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奈瑟菌属. 共同点: 革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛 触酶试验( + ) 氧化酶试验( + ) 种类:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等 9 种 致病菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌. 脑膜炎奈瑟菌. 是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌. 脑膜炎奈瑟菌电镜图. 形态染色. 革兰阴性、肾形、成双排列 新分离菌株有菌毛和荚膜 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内. 培养特性-- 生长条件. 营养要求高、在血液、血清培养基中才能生长 专性需氧、初次分离需 5 % CO2 最适温度 35℃ , 40℃ 不生长 可产生自溶酶. - PowerPoint PPT Presentation
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奈瑟菌属
共同点:革兰阴性球菌、单个或成双排列、无芽孢、无鞭毛、有菌毛
触酶试验( + ) 氧化酶试验( + )
种类:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等 9 种致病菌:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌
脑膜炎奈瑟菌
是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌
脑膜炎奈瑟菌电镜图
形态染色
革兰阴性、肾形、成双排列新分离菌株有菌毛和荚膜在患者脑脊液中位于中性粒细胞内
培养特性--生长条件
营养要求高、在血液、血清培养基中才能生长专性需氧、初次分离需 5 % CO2
最适温度 35℃, <30℃ 或 >40℃ 不生长可产生自溶酶
常用培养基及生长现象
巧克力色血平板:属营养培养基,菌落无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽,似露水珠,易乳化卵黄双抗平板( EPV ):属选择平板,用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养,菌落无色、光滑湿润、较大、扁平
生化反应
氧化酶试验阳性分解葡萄糖、麦芽糖、不分解蔗糖
抗原构造与分型
菌体抗原 无特异性核蛋白抗原 无特异性,与细菌毒力有关表面荚膜多糖抗原
具有群特异性 根据此抗原,将该菌分为 13 个血清群 我国以 A 群为主,占 95 %,
抵抗力
抵抗力弱对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感能产生自溶酶
临床意义传染源:病人、带菌者传染途径:呼吸道飞沫传染致病物质:内毒素、荚膜、菌毛所致疾病:流行性脑脊髓膜炎临床表现:上呼吸道症状:鼻咽炎等全身感染症状:高热、出血点或瘀血点 脑膜炎症状:头痛、呕吐、颈项强直特异性预防:接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗
微生物检验
标本采集
流脑病人:血液、脑脊液、瘀血点带菌者检查:鼻咽拭
脑脊液、瘀血点 血液
分离培养(卵黄双抗平板)
增菌培养直接涂片染色
分离培养(巧克力色平板)
可疑菌落、盐水自凝
无自凝
报告阴性
涂片染色 生化反应
自凝、色素
初步报告
鼻咽拭子
生长特性 血清学分群
直接涂片镜检
脑脊液沉淀物、瘀血点涂片革兰染色镜检:
若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌、呈肾形,可作初步诊断
培养检查
增菌培养:血液、脑脊液接种增菌液, 5% CO2 培养。分离培养:将增菌培养物转种巧克力色平板,置 5 % CO2环境, 35℃ 培养 18 ~ 24小时可疑菌落:观察菌落特征,取可疑菌落涂片染色镜检,作盐水自凝试验,盐水中无自凝。
鉴定试验
形态染色:革兰阴性、肾形、成双排列氧化酶( + )触酶( + )糖代谢试验:发酵葡萄糖、麦芽糖生长特性试验:生长温度、营养需求血清学鉴定与分群:可与相应诊断血清发生凝集
快速鉴定试验荧光抗体法
荧光素 - 流脑抗体 +待检物--荧光 (直接法) 流脑抗体 +待检物 +羊抗兔荧光抗体--荧光 (间接法)间接血凝试验
流脑多糖抗原致敏红细胞 +待检血清反向血凝试验
流脑抗体致敏红细胞 + 标本中可溶性流脑抗原
鉴定依据形态染色:革兰阴性球菌成双排列菌落典型:光滑型,易乳化,盐水中无自凝生化反应:氧化酶+、触酶 -发酵葡萄糖、麦芽糖生长条件:普通培养基不生长、血清学:与相应分群血清凝集
与卡他布兰汉菌鉴别
形态与奈瑟菌相似18 ~ 24℃环境能生长普通培养基中可以生长具有 DNA 酶
淋病奈瑟菌
形态染色革兰阴性肾形、成双排列有荚膜、菌毛淋球菌多侵犯尿道粘膜,急性期常位于中性粒细胞内,急性期多位于中性粒细胞内,慢性期则多在细胞外 根据菌毛分型: T1~T5
T1 、 T2 有菌毛 T3 、 T4 、 T5 无菌毛
淋球菌革兰染色图
生长条件
营养要求高专性需氧5 ~ 10 % CO2
< 30℃ 或> 36.5 ℃ 不生长
常用培养基和菌落特征
巧克力色培养基TM 培养基(含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素)MTM 培养基(改良的 TM )菌落特征:圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化
生化反应
氧化酶、触酶:+葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+--30 % H2O2 试验:+
抵抗力抵抗力极弱对温度变化敏感对干燥敏感对消毒剂敏感易形成耐药性
临床意义
致病物质:菌毛、 IgA 蛋白酶所致疾病:性接触--引起淋病产道感染--引起新生儿淋病性眼结膜炎
标本采集正确取材
女性病人标本:取宫颈内膜分泌物 男性病人标本:取尿道口脓性分泌物
分泌物
直接涂片染色 分离培养
可疑菌落
涂片染色 生化反应
初步报告
生长特性
直接涂片
分泌物涂片,做革兰染色急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌。阳性率男性 90 %、女性 50 %~ 60 %。无症状淋病或轻症患者,尤其是女性,检出率低,只做涂片可漏诊 40 %以上,
培养检查取材部位准确培养基预温立即接种最好床边接种合适的培养基CO2 培养取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定
鉴定试验
氧化酶试验糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)30 %过氧化氢试验
药敏试验
抗生素 纸片含药量 判定标准( mm ) 敏感 中度敏感 耐药
青霉素 2.4μ ( 4U ) ≥30 20 ~ 29 ≤19
壮观霉素 100μg ≥18 ≤14
头孢呋肟 10μg ≥30 20 ~ 29 ≤19
鉴定依据
形态染色典型:革兰阴性球菌培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖
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