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SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
2
Proponer un programa eficaz de control de Salmonella, a través de una alternativa inocua para las aves y sin presencia de residuos en los productos avícolas.
3
Registrada desde 1998 en Alemania
SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
4
Países donde la vacuna estáregistrada
Alemania
Holanda
Reino Unido
España
Portugal
Italia
Francia
AustriaBélgicaHungríaÁfrica del SurBrasilParaguayEcuadorEntre otros...
5
Experiencia del Reino Unido
2001 2001 –– 20062006
AviPro® SALMONELLA VAC E lanzada en 2001
Mercado en 2005:• 80% Reproductoras• 72% Ponedoras
Mercado 2006:• 100% Reproductoras• 90% Ponedoras
6
Características del productoVacuna oral patentada para uso en aves
Liofilizada
Presentación:10 x 1.000 dosis10 x 2.000 dosis
SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
7
Profesor Dr. Klaus Linde Científico de Leipzig Pionero en el desarrollo de varias vacunas humanas (S. Typhi, Shigella) y de animalesAplicación del principio de identificación de los mutantes metabólicos como posibles candidatos para vacunas
Desarrollo de la PatenteSALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
8
Seguridad
La AviPro® SALMONELLA VAC E es una vacuna segura tanto para el uso en aves como en otras especies animales, incluyendo el hombre.
Se realizaron muchas pruebas de transmisión a otras especies y no hubo re-aislamiento de la vacuna
Aves inmunosuprimidas tampoco presentaron ningún tipo de reacción indeseable a la vacuna
9
Pobre supervivencia en el medio ambiente
En amplios estudios de campo, la cepa vacunal nunca fue aislada de la cama, del medio ambiente, de trabajadores, de veterinarios, de aves silvestres, de roedores, de gatos. Lo anterior a pesar de las innumerables muestras recogidas, semanalmente, mensualmente, bimensualmente... Inclusive de excrementos humanos.
Seguridad
10
Auto-limitante en el ambiente
La cepa vacunal con la membrana porosa y las otras atenuaciones hacen que la supervivencia en el medio ambiente sea baja
SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
0
5
10
15
20D
ías
dete
ctab
les
2 - 8 20 37
Temperatura oC
Supervivencia a varias temperaturas
vacuna
cepa de campo
11
Muestras Positivas VacunaSE 8253 0STM 6644 0
Seguridad
En el hombre
Robert Koch Institute – AlemaniaCentro de referencia nacional – casos humanos
Período de enero 1996 – mayo 1999
12
SeguridadOvarios y huevos
Animales: aves SPF de 22 semanas de edad20 gallinas – una dosis20 gallinas – 10 x dosis normal
Huevos: recogidos diariamente por 3 semanasen el período de mayor riesgo
Cultivo: específico para la cepa vacunalseparado – cáscara, yema y albúmina
13
SeguridadResultados: ovarios y huevos
1923 muestras – negativas
Post-mortem: cultivo de los tejidos, hígado, bazo, ovarios y oviductos – negativos
Sin transmisión, vía ovario, de la cepa vacunal asíhayan sido vacunadas en producción y con
sobredosis
14
SeguridadHuevos
La cepa vacunal se comporta como una cepa no invasoraMultiplicación en huevos embrionados inoculados es 1.000 (mil) veces menor que con cepas de campo.
15
Seguridad para los huevos
Cepa de campo deSalmonella con fimbrias del tipo 1
16
Seguridad para los huevos
Cepa vacunal deSalmonella sin las fimbrias del tipo 1
17
Las membranas del cascarón del huevo, generalmente son el sitio de contaminación más grande, después que el cascarón ha sido descontaminadoEso se debe a la adhesión de las fimbrias tipo 1 de la Salmonella en las glándulas que producen las membranas del huevoComo consecuencia la Salmonella sin la fimbria tipo 1 no son capaces de contaminar los huevosAvipro Salmonella Vac E y T no poseen ese tipo de fimbria
De Buck et al., 2003
Seguridad para los huevos
18
Mayonesa – Receta Delia Smith
Experimento comparando con cepa de campoMayonesa con adición de Salmonella – campo y vacunal. Mantenida a la temperatura ambiente – verificar el crecimiento
24hr 48hrCepa de campo + +Cepa vacunal - -
La vacuna no es detectada en la Mayonesa “ condimentada”
19
La falta de virulencia en otras especies: PAVOS
Pavitos de 20 días de edad• Libres de Salmonellae• 1 dosis de 2,1 x 108 ufc SE-vacuna/animal/oral• Período de observación: 21 días• Parámetros: condiciones generales, mortalidad; post-
mortem y bacteriológica
Resultados: los pavitos no presentaron ningún síntoma relacionado a la vacunación.
20
La falta de virulencia en otras especies: cerdos y bovinos
4 becerros de 4 semanas de edad, 4 controles4 lechones de 4 a 6 semanas de edad, 4 controles• Libres de Salmonellae• 1 dosis máxima de 4,2 x 108 ufc SE-vacuna/animal/oral• Período de observación: 14 días• Parámetros: condiciones generales; temperatura
corporal; muestras fecales en los días 0,3,5,7,9 y 11; post-mortem y bacteriológico
Resultados: todos los animales permanecieron saludables, la cepa vacunal no pudo ser aislada
21
Seguridad en animales estresados - inmunosuprimidos
1. Pollitos de un día tratados con 10mg de metilprednisolona + una dosis de la vacuna vía oral
• Parámetros: condiciones generales y persistencia de la cepa vacunal
2. Pollitos de un día tratados con Anti-CD4 (depleción de las células T - auxiliadoras)
• Parámetros: condiciones generales y peso corporal diario
Resultados: igualmente segura en las aves sanas o inmunosuprimidas, no hubo aumento en la bacteriología de la cepa vacunal
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Estabilidad Genética Total: <10-24
1 : 1,000,000,000,000,000,000,000,000Ganar en la lotería 2,300,000,000,000
SeguridadEstabilidad Genética
3 atenuantes cromosómicos independientes (los marcadores, que reducen la virulencia de la cepa)La probabilidad de mutación reversa es de 10-8 por marcador
23
Especificaciones biológicas de la cepa vacunal
Alteraciones en las enzimas esenciales y caminos metabólicos → tiempo de crecimiento retardado y disminución en la virulencia correspondienteAlteraciones en la membrana celular → aumento de la permeabilidad para eritromicina y otros antibióticosSensibilidad aumentada a detergentes y temperaturaCapacidad reducida de desarrollar ciertas fimbrias
24
Vía de aplicaciónLa vacuna debe darse por vía oral
La aplicación puede hacerse por: • Agua de bebida• Gota oral• Spray por gota gruesa (1º día de edad)
La vía de elección para aves adultas es agua de bebida
25
La inmunidad desarrollada por la vacuna oral prepara al animal para lidiar mejor con el desafío
La vacuna oral mimetiza la infección natural sin las consecuencias de la enfermedad
Promueve la inmunidad local del intestino y la inmunidad mediada por células para combatir este parásito intracelular, que de esta manera escapa del ataque de los anticuerpos
Primera vacuna bacteriana oral para aves
26
Programas de vacunaciónEl programa de vacunación indicado es el de 3 dosis durante el período de crianza, tanto para ponedoras comerciales como para reproductoras.
El programa de 3 dosis garantiza una excelente protección durante todo el período de producción
Cada dosis de vacuna tiene una función
No existe la necesidad de aplicar vacunas muertas
27Van Immerseel, F. et al., 2002
Invasión de Macrófagos en la Lámina Propia del Ciego después de la Vacuna Viva
0.00
2.00
4.00
6.00
8.00
10.00
12.00
14.00
0 10 20 30 40 50
Edad (horas)
Por
cent
aje
de c
ober
tura
ControlVacunado
1a dosis – primer día de edadBeneficios de un programa de 3
dosis
28Van Immerseel, F. et al., 2002
M a c ro p h a g e n -In v a s io n in d ie c a e c a le L a m in a P ro p ria n a c h L e b e n d im p fu n g (2 )
0,00
2,00
4,00
6,00
8,00
10,00
12,00
14,00
0 2 4 6 8 10 12
Alte r (T a g e )
Proz
entu
a
K ontro lle G eim pft
Edad (días)
control vacunado
Porc
enta
je d
e co
bert
ura
Beneficios de un programa de 3 dosis1a dosis – primer día de edad
Invasión de Macrófagos en la Lámina Propia delCiego después de la Vacuna Viva
Control Vacunado
29
Tasa de Reactividad del Linfocito T en el Bazo
0
1
2
3
4
3 5 7 9 11
Edad en días
Tasa
TcR
1 e
Controles Aves Infectadas Aves vacunadas
Beneficios de un programa de 3 dosis
1a dosis – primer día de edad
Berndt, A. and U. Methner, 2001
TcR1= Tasa de Reactividad de las Sub-poblaciones de Linfocitos T
30
Efecto instantáneo a través de la estimulación de una respuesta no específica (<24h a 4 días)
Continúa la protección debido al desarrollo de la inmunidad mediada por células (a partir de 4 días)
Literalmente no existen vacíos en la protección
Beneficios de un programa de 3 dosis
1a dosis – primer día de edad
31
Beneficios de un programa de 3 dosis
2ª dosis no a las 3 semanas, sino entre 6 y 8 semanas de edad
Estimulación optimizada de la respuesta de anticuerpos IgA
32
Beneficios de un programa de 3 dosis
La 3ª dosis garantiza un incremento de la memoria de la inmunidad celular
El ave responderá más rápido en la época más vulnerable (inicio de producción y pico de producción)
33
Beneficios de un programa de 3 dosis
3a dosis entre 16 y 18 semanas de edadPonedoras con máxima protección al inicio de la posturaProtección duradera – hasta el fin del período de producciónNo causa impacto en el inicio de la producción
34
Eficacia de la AviPro® Salmonella vac E contra desafío – a las 52 semanas de
edadAnimales: ponedoras comerciales, 42.000 por grupo
Diseño: Esquema de vacunación
Grupo Día 1 Semana 7 Semana 161 3 x SE viva vía agua de bebida
2 control
Desafío: 36 aves a las 50 semanas de edad (grupo 1)36 aves a las 52 semanas de edad (grupo 2)(= 34 a 36 semanas después de la 3a vacunación)oral SE, 1 x 1010 ufc*
35Dosis desafío – 1 x 1010 ufc
010203040506070
% p
ositi
vo
2 5 8 12
días después del desafío
Desafío oral
vacunado
control
Eficacia de la AviPro® Salmonella vac E contra desafío – resultado excreción
36
DuraciDuracióón de la inmunidad a las 52 semanasn de la inmunidad a las 52 semanasResultados (2) PersistenciaResultados (2) Persistencia
0
10
20
30
40
% p
ositi
vos
14 d
ías
p.d.
hígado/bazo ciego
Bacteriología de los órganos
vacunado
control
37
Eficacia de la AviPro Salmonella Vac E en el
CampoComparación de lotes de reproductoras vacunados con AviPro Salmonella Vac E y vacuna muerta
• Vacunados según programa regular de cada vacuna• Alojados en galpones distintos pero en la misma unidad
de producción• Monitoreo según las normas brasileñas• Desafío de algunas aves a las 50 semanas de edad, en
condiciones controladas y con cepa desafío Salmonella Enteritidis
38
Resultados
No hubo diferencia entre los lotes durante el monitoreo de campo (sin desafío)
Después del desafío la diferencia principal fue la negatividad de las muestras de los embriones de los lotes vacunados con la AviPro Salmonella Vac E
39
Uso de la AviPro Salmonella Vac E en lotes de reproductoras positivas a Salmonella Enteritidis• Reproductoras de distintas edades con historia de
aislamiento de Salmonella Enteritidis en muestras de las aves, huevos y pollitos
• 2 lotes recibieron tratamiento antibiótico y 2 lotes no• Todos los lotes recibieron la vacuna por vía oral• No hubo cambios en el alimento ni en el manejo
Eficacia de la AviPro Salmonella Vac E en el Campo
40
Resultados
Los lotes presentaron negatividad después de un tiempoLos huevos y pollitos nacidos después de 3 semanas no presentaron positividad
Los lotes más viejos tardaron un poco más para “limpiarse”
Lotes negativos próximos sin vacuna presentaron SalmonellaLotes negativos próximos con vacuna permanecieron negativos
41
Comparación de ProductosAvipro® Salmonella Vac E y Vacunas Muertas
Salmonella vac E1. Reduce mucho la excreción
de Salmonella después del desafío
2. Impide la invasión/colonización de órganos
3. Sin reacción local y/o sistémica en la ave vacunada
4. Produce inmunidad casi inmediata después de la aplicación de la vacuna
5. No interfiere en el monitoreo serológico
Vacunas Muertas1. Reducción de excreción es
mucho menor después del desafío
2. No impide la invasión/colonización de órganos, apenas reduce
3. Produce intensa reacción local, con pérdidas de peso y uniformidad del lote
4. La producción de inmunidad es demorada – más de 2 semanas
5. Interfiere con el monitoreo serológico
42
Comparación de Productos –Vacunas Vivas
Avipro Salmonella Vac E SG 9R Ventajas Avipro Salmonella Vac E
Usada a partir de un día de edad
Mínimo 6 semanas de edad Protección desde los primeros días de vida
Alta eficacia a través del agua de bebida
La eficacia depende de la vacunación parenteral
No requiere manejo complejoNo estresa las avesBien-estar animal
La cepa no persiste en el ovario
La cepa persiste en el ovario No interfiere en la monitoría bacteriológica
No existe transmisión vía huevo
Transmite vía huevo No interfiere en la monitoría bacteriológica
Bajos niveles de anticuerpos en pruebas serológicas
Vía parenteral induce anticuerpos circulantes
No interfiere en la monitoría serológica
43
Duración de la inmunidad
La vacuna AviPro® SALMONELLA VAC E aplicada en un programa de 3 dosis protege las aves máximo durante el período de producción
No existe necesidad de revacunación, así se hayan usado antibióticos en alguna fase
Resultados de protección mucho mejores comparados con otros programas de vacunación
44
Período de crianza Período de producción
Cre
cim
ien
to d
e la
pro
tecc
ión
Desafío leve Desafío severo
Riesgo
s May
ores
Inyección @10 – 12 sin & transferencia
Gap de protección
Aves protegidas
Aves sin protección
Esquema de vacunaciEsquema de vacunacióón convencionaln convencionalUsando vacuna contra SE inactivada Usando vacuna contra SE inactivada
inyectableinyectable
45
Período de crianza Período de Producción
Cre
cim
ento
de
la p
rote
cció
n
Inyección a las 6 sems y 18 sems
70 - 80 % protección
1 mes
60 % protección5 meses
Desafío severoDesafío leve
Gap deProtección Aves protegidas
Aves sin protección
PadrPadróón de proteccin de proteccióón contra SE n contra SE usando una vacuna de SG por inyecciusando una vacuna de SG por inyeccióónn
46
Período de crianza Período de producción
Au
men
tan
do la
pro
tecc
ión
Mayor
riesgo Protección con
vacunación
98% protección@ fin de la postura
Inicio de la prot.@ 2 sem
Aves protegidas
Aves sin protección
1º día 6-8 sem
16-18 sem
PadrPadróón de proteccin de proteccióón n óóptimoptimousando Aviprousando Avipro®® Salmonella vac ESalmonella vac E
47
Serología
La vacuna AviPro® SALMONELLA VAC E fue diseñada para no interferir con el monitoreo serológico
Estudios realizados usando varios kits ELISA mostraron que la positividad no interfiere con la interpretación de los resultados de serología
48
Sin interferencia en el monitoreo serológico
AviProAviPro®® SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
Tiempo
SA
R -
# av
es p
ositi
vas
Títu
los
ELI
SA
Neg
ativ
o
P
ositi
vo
SE desafío de campo
SE vacunas inyectadas
SE viva - ORAL
Sem interferencia na sorologia
49
Serología2 principios importantes para los kits ELISA
LPS: Lipo Poli Sacárido – trabaja con estructura del cuerpo celular – identifica anticuerpos contra un grupo específico. Disponible para grupos B, D o B+D. Puede ocurrir reacción cruzada contra otros grupos. Es apropiada para monitoreo
GM: Se basa en los flagelos. Identifica anticuerpos contra serotipos específicos. Comercialmente disponible para Salmonella Enteritidis. Menor posibilidad de reacciones cruzadas
50
1. V
ac
2. V
ac
3. V
ac
Sem
. 24
0
2
4
6
8
10
Biocheck SE/STM
Salmotype SE/STM
IDEXX SE
Guildhay SE
SerologSerologíía posa pos--vacunacivacunacióón conn conAviProAviPro®® SALMONELLA VAC SALMONELLA VAC EE
Pos
itivo
s en
10
mue
stra
s
Muestra recogida – 14 días después de la vacunación y a las 24 semanas de edad
Azul: gm-ELISARoja: LPS-ELISAs
51
Serología y Vacunación
Vacunación parenteral (inyectable)Reacción positiva en el ELISANo se puede diferenciar de infección de campoNo existe correlación entre anticuerpos circulantes (IgG) y nivel de protección con las técnicas existentes hasta el momentoLa inmunidad mediada por células y la inmunidad de mucosa son medidas por pruebas de desafío. Todavía no existen pruebas para uso de rutina.
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SerologSerologíía y vacunacia y vacunacióón n ––experiencias actuales y resultados esperadosexperiencias actuales y resultados esperados
LPSVacunas
AplicaciónB+D D B
+ + + +
GM - SE
SE inactivada + + (+) +SG viva + + + -
Oral - - - -SE viva
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SerologíaResumen
Herramienta útil para levantamiento y monitoreo del statusnegativo del loteDiferenciación confiable de anticuerpos, causados por infección de campo o vacunación parenteral, no ha podido ser establecida hasta el momentoResultados positivos aún deben confirmarse a través de la bacteriología
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Cómo medir la eficacia?La protección se mide a través de pruebas de desafío con Salmonella virulenta – reducción en:
1. Colonización/ Eliminación:Presencia/cantidad de Salmonella en hisopados cloacales
2. Invasión: Presencia de Salmonella en el hígado / bazo 5 días después del desafío
3. Persistencia: Presencia en órganos 14 días después del desafío
Ver: eficacia de la vacuna
55
Pruebas desafío
Las pruebas de desafío sirven para demostrar la eficacia de la inmunización, ya que la serología no es un método útil para este fin.
Las pruebas de desafío se realizan usando cepas de Salmonella conocidamente capaces de colonizar, invadir, infectar órganos de aves normales y diseminarse en el medio ambiente
56
Diferenciación de cepas
La vacuna AviPro® SALMONELLA VAC E fue desarrollada pensando también en la facilidad para diferenciarla de cepas de campo
Tiene marcadores propios que auxilian en la diferenciación a través de pruebas bacteriológicas simples que pueden realizarse en cualquier laboratorio microbiológico
Lohmann Animal Health posee también un kit para este uso – el AviPro® PLATE
57
La cepa vacunal se basa en el principio del “Mutante con alteraciones metabólicas” por tanto es eficaz y segura
Ocurre naturalmente en el trato intestinal y no es un GMO (organismo genéticamente modificado)
Faltan enzimas esenciales y caminos metabólicos = crecimiento lento (tiempo de generación prolongada)= contiene marcadores antibióticos específicos
Falta de fimbrias = viabilidad reducida
Diferenciación de cepas
58
Tecnología de la marcación
RNA polimerasa con defecto afecta la transcripción del DNA para el RNAm en el núcleo = Rifampicina sin efecto en la célula
La proteína S12 con defecto (RPSL) afecta la síntesis de proteína = Estreptomicina sin efecto en la célula
La membrana celular tiene influjo/reflujo = Moléculas grandes como la Eritromicina pueden pasar a través de la membrana externa (lo que no es posible con cepas de campo) y afectar la célula
59
Antibiogramaen
Agar
Salmonella Enteritidis(cepa de campo)
ERY15
STRE25
RAM30
STRE25
RAM30
ERY15
ERY = ErythromycinaSTRE = StreptomycinaRAM = Rifampicina
Salmonella vac E(cepa vacunal)
60
O… identificar ambas cepas vacunales de Salmonella a través de microdilución conla Placa AviPro®
61
La cepa vacunal es débil y no crece en todos los medios de cultivo común de propagación de Salmonella
Caldos Selectivos Caldo Selenito F Si
Caldo Tetrationato Si
Medio Semi-Sólido Rappaport-Vassiliadis Modificado Si
Caldo Rappaport-Vassiliadis No
Medios Selectivos para Sembrar en Placas de AgarAgar Verde Brillante Si!!!
Agar GASSNER Si!!!
Agar XLD (sin el centro negro) Si!!
Agar Mac Conkey Si
Agar LEIPSON (colonias rojas) Si
Agar Entérico Hektoen (sin las colonias negras) Si
Agar RAMBACH (sin la alteración de color) No
Agar MLCB (Manitol lisina Violeta Cristal Verde Brillante) No
Agar XLT 4 (colonias amarillas, no típicas colonias rojas) No
62
Transmisión
La AviPro® SALMONELLA VAC E no se transmite ni horizontal, ni verticalmente, por eso es una vacuna bastante segura para uso en cualquier tipo de producción, inclusive en operaciones de múltiple edad.
Al no transmitirse verticalmente, puede usarse con seguridad en reproductoras y ponedoras comerciales, no habiendo riesgo para la producción, calidad del huevo, embriones o pollitos.
63
Salud PúblicaLa AviPro® SALMONELLA VAC E está registrada en varios países, entre ellos muchos de la Comunidad Europea. La introducción de esta vacuna comenzó por los problemas de salud pública y el consumo de huevos contaminados por la población humana.
El uso constante de esta vacuna no solo disminuyó los problemas de Salmonella Enteritidis en la avicultura, sino también aquellos relacionados al consumo de productos avícolas en la Salud Pública
64
Protección cruzada
SG x SE
SE x SG
65
Antígeno flagelar - H
Endotoxinas
Antígenos Somáticos - O
Grupo Serogrupo
66
67
Protección cruzada
Existe!!!
68
⇒ Buena protección cruzada heteróloga entre serotipos de grupo idéntico
ProtecciProteccióón Cruzadan Cruzada=
Serotipos relevantes según el esquema KAUFFMANN-WHITE
Salmonella EnteritidisSalmonella Gallinarum Salmonella Typhimurium
⇓ ⇓Grupo D1 Grupo B
O 1 9 12 O 1 4 5 12
69
Cómo medimos la eficacia contra la Salmonella Gallinarum?
La eficacia de la AviPro® SALMONELLA VAC E se mide a través de la protección contra un desafío oral de cepa virulenta de salmonella Gallinarum, observándose:
1. Mortalidad 2. Colonización:
presencia de Salmonella Gallinarum en hisopados cloacales en los días 2 - 4 - 6 - 12 - 15 después del desafío
3. Invasión y Persistencia:presencia de Salmonella Gallinarum en el hígado; bazo; corazón y ovario en aves muertas o sacrificadas
70
Animales: ponedoras comerciales, libres de Salmonella spp.
Desafío: dosis oral de 3 x 105 ufcSalmonella Gallinarum patogénica12 semanas después de la última vacunación= 28 semanas de edad
Parámetros: MortalidadEliminación por las hecesPersistencia en los órganos
ProtecciProteccióón contra n contra S.S. Gallinarum despuGallinarum despuééssde la vacunacide la vacunacióón con Salmonella E vivan con Salmonella E viva
SG
71
Grupo 1 día 7 Sem. 17 Sem.
1
Nada
2
control Nada Nada
28 Sem.
DesafíoS. Gallinarum
Desafío S. Gallinarum
DesafíoS. Gallinarum
ProtecciProteccióón contra n contra S.S. Gallinarum despuGallinarum despuééssde la vacunacide la vacunacióón con Salmonella E vivan con Salmonella E viva
SGSG
72
0%
25%
50%
75%
100%
Mortalidad Eliminaciónheces
Persistencia enorganos
Control Grupo 1 Grupo 2
ProtecciProteccióón contra n contra S.S. Gallinarum despuGallinarum despuééssde la vacunacide la vacunacióón con Salmonella E vivan con Salmonella E viva
SG
SG
73
Lotes de ponedoras y reproductoras vacunadas según el protocolo de vacunación para prevención
• Buenos resultados de protección • Hasta la fecha no hubo necesidad de revacunación
durante la producción• Lotes donde los pollitos provenían de lotes positivos
tuvieron una mortalidad durante los primeros días debido a Salmonella, pero no después.
Eficacia de la AviPro Salmonella Vac E contra SG en el campo
74
Eficacia de la AviPro Salmonella Vac E contra SG en el campo
Lotes de ponedoras y reproductoras vacunadas sobre brote por vía oral o vía parenteral
• Disminución de la mortalidad• Dependiendo del manejo no hubo reincidencia• Fallas en la protección relacionadas al uso de
antibióticos antes de la vacunación
75
Países de Suramerica donde la vacuna es usada contra SG
Venezuela
Ecuador
En todos esos países la mayoría de los lotes vacunados presentaron excelentes resultados de protección, cuando comparados con otros métodos de control, protección o tratamiento.
Paraguay
Brasil
76
Resultados de campo
3 dosis durante la recría – protección durante la producción sin necesidad de otra dosis
Vacunación sobre brote – mejores resultados con 1 vacuna oral y una inyectada
Cuidar para no aplicar la vacuna con residuos de antibiótico!!!! La vacuna NO funciona en esos casos
77
Vacunación sobre brote
Con tratamiento anterior :
3 – 5 días después del termino del tratamiento vacunar oral
14 días después – vacunación parenteral
Otra dosis oral 6 – 8 semanas después, dependiendo de la edad de las aves
78
Resultados Venezuela
Avipro Salmonella Vac E contra Infecciones de campo de Salmonella gallinarum
Dr. Enrique Peña, MV
79
LESIONES COMPATIBLES CON SALMONELLOSIS
81
APLICACIÓN EN INCUBADORA
81
PREPARANDO LA VACUNA EN EL AGUA
83
VACUNACION AL PRIMER DIA EN GRANJA
84
6ta. SEMANA
85
17va. SEMANA
86
Serología antes de la vacunación
86
Comparación de Métodos de Protección Reproductoras Empresa 1
Mortality Accumulated
0
5
10
15
20
1 4 12 19
Age - weeks
Flock 1Flock 2Flock 3Flock 4
Mortalidad acumulada
Lote 1
Lote 2
Lote 3
Lote 4
Edad en semanas
•Lotes 1 y 2: 3 vacunas inyectadas (muerta e cepa 9R)
•Lotes 3 y 4: 3 orales AviPro®SALMONELLA VAC E
87
Mortality Accumulated
0
5
10
15
20
25
1 4 12 17
Age - weeks
1234
Mortalidad Acumulada
Edad en Semanas
•Lotes 1, 2 y 3: 3 vacunas inyectadas (muerta e cepa 9R)
•Lote 4: 3 orales AviPro®SALMONELLA VAC E
Comparación de Métodos de Protección Reproductoras Empresa 2
88
Vacunación sobre brote de SG –Ponedoras comerciales
Lote en piso
Lote en jaula
•Vacuna AviPro®SALMONELLA VAC Einyectada en el pico de mortalidad 2 semanas despues refuerzo oral.
•Mortalidad regresa a lanormalidad hasta la salidadel lote
•Las aves no recibierontratamiento antibiótico
0
50
100
150
200
Mortality
Flock 1 - cage Flock 2 - floor
Mortalidad
IM Oral
89
ENRIQUE PENA M.V.ASESOR TECNICO
RESUMEN RESUMEN -- VenezuelaVenezuelaEn todas las pruebas que hemos realizado, se ha demostrado que las aves vacunadas con AviPro Salmonella Vac E confiere excelente protección contra Salmonella Enteritidis / Gallinarum.
Para garantizar el éxito del programa de control, además de la vacuna, es importante cumplir con las normas de bioseguridad y buenas medidas sanitarias.
90
Mercado en Venezuela
Vacuna autorizada para uso comercial a principios de 2007
Hasta la fecha (Septiembre 2007) 60% del mercado, y de los 60%; 30% reproductoras y 70% de las ponedoras comerciales usan el programa Avipro Salmonella Vac E
91
Ventas de la Salmonella Vac E para uso principalmente contra SG
Jul 2006 – Jun 2007• Ecuador: 1550 fr X 2000 ds• Paraguay: 100 fr X 2000 ds• Venezuela: 4500 fr X 2000 ds
Jul 2005 – Jun 2006• Ecuador: 300 fr X 2000 ds• Venezuela: 2250 fr X 2000 ds
92
Campo X Laboratorio
Los resultados de campo observados hasta la fecha (Septiembre 2007), son distintos de la prueba de laboratorio para la duración de la protección.
En los datos presentados por el Dr. Terzolo del INTA Argentina, no hubo protección duradera para desafío contra SG
En el campo, muchos lotes ya salieron al sacrificio, sin la necesidad de revacunación, aunque fueran de distintas empresas, ubicados en zonas de distintos niveles de desafío
93
Características del agua de bebida para la vacunación
En condiciones de vacunación, la vacuna debe sobrevivir en el agua
Debido a la pobre supervivencia en el medio ambiente y a la incapacidad de transmisión horizontal, todas las aves deben tener acceso al agua con la vacuna, para garantizar una buena cobertura vacunal y protección del lote
94
Estabilidad en Agua de Buenas Características para la Vacunación
3.33.33.33.3Gumboro
03.7Bronquitis + 1ppm Cl
01.93.1Bronquitis
7.67.67.67.6AviPro® SALMONELLA VAC E
6 horas420Vacuna
95
0
5
10
15
20
25
106 u
fc /
ml
0 h 2 h 4 h 6 hHoras después de la preparación
pH 5,04pH 7,09pH 9,05
Exp 1: Influencia del pH (a 20°C)
Estabilidad de la Estabilidad de la AviProAviPro®® SALMONELLA SALMONELLA VAC VAC EE
96
05
101520253035
106 u
fc /
ml
0 h 2 h 4 h 6 hHoras después de la preparación
Normal1 ppm de Cloro5 ppm de Cloro
Exp 2: Influencia de la Calidad del Agua (a 20°C)
EstabilidadEstabilidad de de lala AviProAviPro®® SALMONELLA SALMONELLA VAC VAC EE
97
0
5
10
15
20
25
30
35
106 u
fc /
ml
0 h 2 h 4 h 6 hHoras después de la preparación
5ppm Cloro + LecheDescremadapH 8,2 + Leche Descremada
pH 8,2
pH 7,6
Exp 3: Influencia de la Leche en Polvo Descremada (2g/litro) (a 20°C)
EstabilidadEstabilidad de de lala AviProAviPro®® SALMONELLA SALMONELLA VAC VAC EE
98
0
10
20
30
40
50
60
70
106 u
fc /
ml
0 h 2 h 4 h 6 h 24 hHoras después de la preparaciónRefrigerada Temperatura Ambiente Incubatorio
Exp 4: Influencia de la Temperatura del agua de bebida
EstabilidadEstabilidad de de lala AviProAviPro®® SALMONELLA SALMONELLA VAC VAC EE
99
Antibióticos
Sin importar que la cepa vacunal sea resistente a algunos antibióticos no se recomienda su uso 3 días antes ni 3 días después de la aplicación de la vacuna.
Si la aplicación de la vacuna es por vía parenteral, esperar el tiempo de la eliminación del antibiótico antes de la aplicación de la vacuna.
100
Exclusión competitiva
La AviProAviPro®® SALMONELLA VAC E SALMONELLA VAC E puede aplicarse en programas que usen productos de Exclusión Competitiva, desde que la vacuna sea suministrada antes o en conjunto con la EC en el primer día de edad
101
Animales: pollitos de un día SPFTratamientos:
log ufc/g SE-cepa vacunal en el contenido cecal
Usar la vacuna viva SE antes o junto con Productos de ExclusiónCompetitiva
grupo 1 grupo 2 grupo 3 grupo 4
dia 1 SE-viva SE-viva SE-viva + EC EC
día 2 EC SE-viva
día 8 4,3 3,9 3,0 0,0
Estudios de la InteracciEstudios de la Interaccióón entre n entre AviProAviPro®® SALMONELLA VAC E y Producto de ECSALMONELLA VAC E y Producto de EC
102
Coccidiostatos
No existe interferencia de productos para el control de la coccidiosis y la vacuna
103
Experimento: Estudios de Interacción entre AviPro®SALMONELLA VAC E e varios Coccidiostatos
In-vivo:• Experimento de campo con Amprolium durante la crianza • desafío con SE al final de la producción
Resultado: Inmunidad idéntica entre los grupos con o sin Amprolium
In-vitro:• Uso de Monensin, Lerbek, ESB3 y Salinomycin 2h la temperatura ambiente disuelta en agua
Resultado: Contaje de Bacterias Vivas iguales en todos los grupos testados
Conclusión: Coccidiostatos no demuestran influencia adversa en la eficacia de la AviPro® SALMONELLA VAC E
104
Anticuerpos maternales
No existe influencia de los anticuerpos maternales y la calidad de la inmunidad dada por la AviPro®SALMONELLA VAC E A pesar de la presencia de anticuerpos maternales el desarrollo de la inmunidad es completoEso demuestra más de una vez que la IgG tiene una importancia limitada en la inmunidad
105
n Grupo MAB Vacunación20 1 - 1 x SE-viva
1o dia oral
20 Control 1 - No vacunado
20 2 + 1 x SE-viva1o día oral
20 Control 2 + No vacunado
Animales:• Grupo 1 sin anticuerpos maternales• Grupo 2 con anticorpos maternales
Influencia de Influencia de loslos anticuerposanticuerpos maternalesmaternales enen lalarespuestarespuesta inmuneinmune despudespuééss de de lala vacunacivacunacióónn concon
AviProAviPro®® SALMONELLA VAC ESALMONELLA VAC E
Desafío: 15días, S.E. Nal res K285/941), oral, 3x109 ufc por ave1) BGVV Jena, Dr. Methner 485/99
106
0
25
50
75
100
0 2 4 6 8 10 12 14
Días después del desafio
% d
e M
uest
ras
Posi
tivas
Group 1 - MAB negativeGroup 2 - MAB positive
Control 1 - MAB negativeControl 2 -MAB positive
significativo
EliminaciEliminacióón de la SE desafn de la SE desafíío (hisopado cloacal)o (hisopado cloacal)
485/99
Grupo 1 – AM negativoGrupo 2 – AM positivoControl 1 – AM negativoControl 2 – AM positivo
107
Aves más saludables – menos riesgo
Más flexibilidad / equipos de vacunación
Economía en tiempo y costos de mano de obra
Menor riesgo para los vacunadores
Beneficios para el: Productor
108
Beneficios para el: Ave
Sin la necesidad de manejo individualSin retardo en el crecimento o impacto en la producción de huevosSin reacciones locales
109
AviPro® SALMONELLA VAC E ofrece la oportunidade de quebrar la cadena de infección del ave para el hombreAumento en la confianza en consumir huevos y carne de aves
Beneficios para el: Consumidor
110
Resumen
La vacunación no crea un ave estéril, ya que no se puede excluir el contacto con otras fuentes de Salmonella EnteritidisSin embargo, aves vacunadas consiguen eliminar la infección más rápidamente que aves sin vacunar
menos aves eliminanmenos bacterias
por un período más corto
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