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Carte d’Identité MEtabolique (projet
« CIME ») :
« Pharmacocinétique des substrats du
cocktail CIME et premiers résultats
de phénotypage de sujets basé sur l'activité
d'enzymes (CYP et transporteurs) du
métabolisme des médicaments »
1
Henri BENECH
Institut de biologie et de tecnologies de Saclay
CEA
Plan
• Rappel du projet
• Essai clinique CIME1 – résultats plasmatiques• Objectifs
• Volontaires
• Tolérance
• Bioanalyse
• Profils plasmatiques
• Analyses pharmacocinétiques non compartimentales
• Observation des génotypes / phénotypes
• Publications/poster
•Conclusions
• Suites…CIME2…
2
0
20
40
60
80
100
120
140
160
A B C D E F G H I
Enzymes
% Activité
Cocktail de
substrats
Administration Analyse des échantillons
Échantillons : sang/urine/salive
Phénotype enzymes de la
DMPK
Per os
UPLC-MSMS
Intérêt de phénotyper:
- interactions médicamenteuses,
- effet de candidats médicaments,
- conditions particulières (âge, exposition à des toxiques
Utilisateurs :
- industrie pharmaceutique,- cliniciens. Analyse des données
• Pourquoi ? / Comment ?
12
3
2
31
CIME
3
0
20
40
60
80
100
120
140
160
A B C D E F G H I
Enzymes
% Activité
Cocktail de
substrats
Administration Analyse des échantillons
Échantillons : sang/urine/salive
Phénotype enzymes de la
DMPK
Per os
UPLC-MSMS
Intérêt de phénotyper:
- interactions médicamenteuses,
- effet de candidats médicaments,
- conditions particulières (âge, exposition à des toxiques
Utilisateurs :
- industrie pharmaceutique,- cliniciens. Analyse des données
• Pourquoi ? / Comment ?
12
3
2
31
CIME
4
CYP1A2 CYP2C8 CYP2C19 CYP2D6CYP3A4
Fonction réabsorption
tubulaire
Tolbutamide Omeprazole DextromethorphanMidazolam
Memantine
3OHrepaglinide
Repaglinide
4OHtolbutamide
5OHomeprazole
Omeprazole
sulfone3methoxymorphinan
DextrorphanAcetaminophen UGT
Acetaminophen
glucuronide
Paraxanthine
1OHmidazolam
Pgp Digoxine
OATP Rosuvastatine
Caféine
CYP2C9
• Choix enzymes/substrats:
Rappel
4OHmidazolam
5
Carte d’Identité Metabolique
(projet « CIME ») :
« Pharmacocinétique des substrats du
cocktail CIME et premiers résultats
de phénotypage de sujets basé sur l'activité
d'enzymes (CYP et transporteurs) du
métabolisme des médicaments »
6
Henri BENECH, Marcel DELAFORGE, Natacha LENUZZA, Gregory NICOLAS (CEA)
Essai clinique CIME1
Investigateur principal
Dr. Xavier Duval (CIC Bichat – Claude Bernard, Paris)
Promoteur : INSERM
Financement : CEA (programme Technologies Pour la santé : J. Grassi)
Experts extérieurs au CEA
Pr. Philippe Beaune, Pr. Laurent Becquemont, Pr. Christian Funck-Brentano, Pr
France Mentré
Objectif principal:Décrire la pharmacocinétique des 10 substrats du cocktail CIME et de leurs métabolites,
après administration unique et simultanée à des doses préétablies
Objectifs secondaires :- Etudier la tolérance clinique et biologique du cocktail des 10 substrats
- Evaluer l’adéquation des doses choisies
- Evaluer l’influence des génotypes sur la pharmacocinétique des substrats et de leurs
métabolites (en fonction des génotypes des volontaires inclus)
- Déterminer quels sont les temps de prélèvements qui apportent le maximum
d’information sur la pharmacocinétique d’un maximum de composés7
Présentation des volontaires
n=10 Unité Moyenne Médiane CV (%) Intervalle
Age années 31.5 31.5 24.5% [19-42]
Taille cm 173 172 5.5% [158-190]
Poids kg 69 69 13.5% [58-90]
BMI kg/m² 23.3 21.9 15.6% [19.9-29.7]
Genre 6 hommes, 4 femmes
Genre Age
(années)
Taille
(cm)
Poids
(kg)
BMI
(kg/m²)
Inclus le Administration le
PL_01 M 25 190 72.8 20.1 16/08/2010 23/08/2010
WM_03 F 30 161 73.3 28.2 10/09/2010 20/09/2010
PM_05 M 24 170 58.0 20.0 09/11/2010 30/11/2010
LV_07 M 38 183 69.3 20.5 02/12/2010 13/12/2010
PJ_08 M 40 176 69.3 22.2 06/12/2010 13/12/2010
BF_09 F 42 174 90 29.7 21/12/2010 17/01/2011
TT_13 M 33 170 62.5 21.6 17/02/2011 08/03/2011
PJ_14 F 19 173 73.1 24.4 18/02/2011 08/03/2011
CC_19 M 27 171 58.5 19.9 07/06/2011 27/06/2011
BN_18 F 37 158 65.0 26.0 16/08/2011 23/08/2011
Caractéristiques individuelles
Résumé
8
2D6 2C19
Génotype Génotype
PL_01 *1/*1 Normal *1/*17 Normal
WM_03 *1/*4 Normal *1/*17 Normal
PM_05 *1/*4 Normal *1/*1 Normal
LV_07 *4/*5 Lent *2/*17 Normal
FJ_08 *1/*6 Normal *1/*17 Normal
BF_09 *1/*1 Normal *1/*17 Normal
TT_13 *1/*1 Normal *1/*1 Normal
PJ_14 *1/*3 Normal *1/*1 Normal
CC_19 *1/*1 Normal *1/*1 Normal
BN_18 *1/*1 Normal *1/*1 Normal
9
Tableau sur les génotypes 2D6 et 2C19
10
- 19 points de
prélèvements
plasmatiques par
volontaire (temps : 0,
0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2,
2.5, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12,
24, 48, 72 h et 7 j)
11
Substrats
(forme sel de référence)
Doses choisies
du cocktail
Doses utilisées
dans d’autres
cocktails
Dose thérapeutique
maximale décrite chez
adultes
Ratio dose
cocktail/dose
thérapeutique
(%)
Acétaminophene
(ou Paracétamol)60 mg 1000 mg 6
Caféine 73 mg 50-200 mg 400 mg 18
Dextrométhorphane
(Bromohydrate)18 mg 30 mg 120 mg 15
Digoxine 0,25 mg 0.5 mg 0.5 mg 50
Mémantine (hydrochloride) 5 mg 20 mg 25
Midazolam
(maléate)4 mg 1,5-8 mg 15mg 40
Oméprazole (magnésium) 10 mg 20-40 mg 40mg 25
Repaglinide 0,25 mg 4 mg 6
Rosuvastatine (calcique) 5 mg 40 mg 25
Tolbutamide 10 mg 125-500 mg 500 mg 25
Tableau 7 : Comparaison des doses choisies des substrats du cocktail avec les doses utilisés dans d’autres cocktails et
leurs doses thérapeutiques.
Tolérance – Evénements indésirables
Adverse events Number of
patients
(n = 10)
Number of
episodes
Delay after
administration
Somnolence 8 8 40min - 6h
Dizziness 3 3 40min; 40min; 12h
Blood pressure drop 2 3 3h; 8h; 3h
Headache 2 1 7h; 48h
Euphoria 1 1 30min
Nausea 1 1 14h
Atrial extrasystole 1 1 8h30
Diarrhea 1 1 3h
Abdominal pain 1 1 48h
Tolérance – Evénements indésirables léger
modéré
E Relation avec CIME exclue
E E
E
Tolérance – Suivi biologique
Unit Baseline (n=10) End-point (n=10)
CARDIOVASCULAR SYSTEM
Sitting systolic blood pressure mmHg 122±12 [102; 144] 112±8 [101;125] *
Sitting diastolic blood pressure mmHg 73±11 [53; 91] 64±6 [55;74] *
Sitting pulsing rate bpm 67±6 [60; 78] 67±5 [60;75]
HEMATOLOGY
Prothrombine rate % 98 ±3 [91;100] 97±6 [83;100]
Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]
Red Blood Cells T/l 4.81±0.45 [4.09;5.50] 4.57±0.41 [3.90;5.10] *
Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *
Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *
Mean corpuscular volume fl 86.4±2.9 [82.9;92.0] 86.7±2.6 [84.1;92.0]
Mean corpuscular hemoglobin pg 29.8±1.3 [28.1;32.3] 29.8±1.2 [28.3;32.2]
Mean corpuscular hemoglogin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]
Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]
Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]
Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]
Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]
Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]
Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]
KIDNEY FUNCTION (BIOCHEMISTRY)
NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]
K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]
Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]
CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]
HEPATIC FUNCTION
SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]
SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]
Alcalin phosphatases U/l 62±15 [40;77] 63±15 [42;86]
Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]
Analyse statistique: comparaison des valeurs à V1 (inclusion) et à V6 (7 jours post-administration) par un t-test apparié
Tolérance – Suivi biologique
Unit Baseline (n=10) End-point (n=10)
CARDIOVASCULAR SYSTEM
Sitting systolic blood pressure mmHg 122±12 [102; 144] 112±8 [101;125] *
Sitting diastolic blood pressure mmHg 73±11 [53; 91] 64±6 [55;74] *
Sitting pulsing rate bpm 67±6 [60; 78] 67±5 [60;75]
HEMATOLOGY
Prothrombine rate % 98 ±3 [91;100] 97±6 [83;100]
Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]
Red Blood Cells T/l 4.81±0.45 [4.09;5.50] 4.57±0.41 [3.90;5.10] *
Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *
Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *
Mean corpuscular volume fl 86.4±2.9 [82.9;92.0] 86.7±2.6 [84.1;92.0]
Mean corpuscular hemoglobin pg 29.8±1.3 [28.1;32.3] 29.8±1.2 [28.3;32.2]
Mean corpuscular hemoglogin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]
Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]
Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]
Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]
Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]
Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]
Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]
KIDNEY FUNCTION (BIOCHEMISTRY)
NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]
K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]
Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]
CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]
HEPATIC FUNCTION
SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]
SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]
Alcalin phosphatases U/l 62±15 [40;77] 63±15 [42;86]
Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]
Analyse statistique: comparaison des valeurs à V1 (inclusion) et à V6 (7 jours post-administration) par un t-test apparié
Différence non retrouvée
entre V2 (juste avant
administration) et V6
Tolérance – Suivi biologique
Unit Baseline (n=10) End-point (n=10)
CARDIOVASCULAR SYSTEM
Sitting systolic blood pressure mmHg 122±12 [102; 144] 112±8 [101;125] *
Sitting diastolic blood pressure mmHg 73±11 [53; 91] 64±6 [55;74] *
Sitting pulsing rate bpm 67±6 [60; 78] 67±5 [60;75]
HEMATOLOGY
Prothrombine rate % 98 ±3 [91;100] 97±6 [83;100]
Leucocytes G/l 6.5±1.8 [4.2;8.9] 6.0±1.2 [4.1;8.0]
Red Blood Cells T/l 4.81±0.45 [4.09;5.50] 4.57±0.41 [3.90;5.10] *
Hemoglobin g/dl 14.4±1.2 [12.5;16.7] 13.7±1.2 [12.0;15.6] *
Hematocrit % 41.7±3.3 [36.9;47.4] 40.0±3.3 [25.3;42.2] *
Mean corpuscular volume fl 86.4±2.9 [82.9;92.0] 86.7±2.6 [84.1;92.0]
Mean corpuscular hemoglobin pg 29.8±1.3 [28.1;32.3] 29.8±1.2 [28.3;32.2]
Mean corpuscular hemoglobin concentration g/dl 34.5±0.9 [33.2;35.9] 34.4±0.6 [33.5;35.3]
Platelets G/l 224± 39[171;283] 231±33 [177;280]
Neutrophils G/l 3.8±1.5 [2.1;5.9] 3.4±0.9 [2.1;4.7]
Eosinophils G/l 0.13±0.08 [0.03;0.29] 0.14±0.09 [0.03;0.34]
Basophils G/l 0.03±0.01 [0.01;0.06] 0.03±0.02 [0.02;0.08]
Lymphocytes G/l 2.0±0.5 [1.6;3.2] 1.9±0.5 [1.26;2.96]
Monocytes G/l 0.52±0.15 [0.33;0.79] 0.49±0.12 [0.32;0.67]
KIDNEY FUNCTION (BIOCHEMISTRY)
NA+ mmol/l 140±2 [138;143] 141±2 [138;144]
K+ mmol/l 3.9±0.3 [3.5;4.4] 4.1±0.3 [3.4;4.7]
Creatinin µmol/l 77±15 [54;102] 77±13 [57;95]
CPK U/l 118±43 [58;83] 125±35 [85;174]
HEPATIC FUNCTION
SGPT (ALAT) U/l 20±9 [9;39] 19±7 [14;36]
SGOT (ASAT) U/l 24±3 [21;32] 25±5 [17;35]
Alcalin phosphatases U/l 62±15 [40;77] 63±15 [42;86]
Gamma GT U/l 16±6 [9;23] 16±5 [11;24]
Analyse statistique: comparaison des valeurs à V1 (inclusion) et à V6 (7 jours post-administration) par un t-test apparié
Valeurs individuels
normales
Tolérance – Suivi du système cardiovasculaire
Pression artérielle
Tolérance – Suivi du système cardiovasculaire
ECG
Fréquence cardiaque
Tolérance – Suivi spécifique Glycémie
Tolérance – Suivi spécifique
Digoxinémie (sur site à la pharmacie Bichat)
PK des 10 substrats du cocktail CIME et de leurs métabolites, après
administration unique et simultanée à des doses préétablies
Influence d’un génotype 2D6 lent sur la pharmacocinétique des substrats et de leurs métabolite
Bioanalyse des 10 substrats du
cocktail CIME et de leurs métabolites
22
Videau et al, RCMS 2010
Exemple de chromatogrammes:
23
Analyse des échantillons plasmatiques
Méthode mise au point et
validée sur un
ensemble
UPLC/Quattro
Premier XE (WATERS)
Videau et al, RCMS 2010
24
Analyse des échantillons plasmatiques
Transfert de la méthode
sans modification sur
un appareillage de
nouvelle génération
Xevo TQ (WATERS) en
2010
Dosage des échantilllons
plasmatiques de
l’étude clinique CIME1
Pourcentage d’ILQ (en excluant les T0)
Sans les T0
Volontaire Nb ILQ sur 24h
Nb ILQ sur 24h
(18 molécules) Nb ILQ total
Nb ILQ total
(18molécules)
Nb echantillons
total
Nb echantillons
total (18
molécules) % ILQ 24h %ILQ total
% ILQ 24h
(18molécules)
%ILQ total (18
molécules)
PL01 78 48 127 91 380 342 20.5 33.4 14.0 26.6
WM03 76 52 138 108 380 342 20.0 36.3 15.2 31.6
PM05 55 38 100 77 380 342 14.5 26.3 11.1 22.5
LV07 64 48 104 84 380 342 16.8 27.4 14.0 24.6
FJH08 71 41 117 81 380 342 18.7 30.8 12.0 23.7
BF09 84 54 129 93 380 342 22.1 33.9 15.8 27.2
TT13 62 38 126 96 380 342 16.3 33.2 11.1 28.1
PJ14 72 47 111 80 380 342 18.9 29.2 13.7 23.4
CC19 52 36 111 90 380 342 13.7 29.2 10.5 26.3
BN18 85 58 135 102 380 342 22.4 35.5 17.0 29.8
Nb total ILQ sur 24h
Nb total ILQ sur
24h (18
molécules) Nb Total ILQ
Nb total ILQ
(18 molécules Nb échantillons
Nb échantillons
(18 molécules)
% total ILQ sur
24h % total ILQ
% total ILQ sur
24h (18
molécules
% total ILQ
(18molécules)
699 460 1198 902 3800 3420 18.4 31.5 13.5 26.4
25
PK des composés CIME – Méthodologie (II)
Données manquantes (ie. sous la LOQ) :
mise à LOQ/2 de la première valeur sous la
LOQ après Cmax et de la dernière valeur sous
la LOQ avant Cmax. Les autres valeurs sous la
LOQ sont ignorées.
LOQ/2 supprimé
0 2 4 6 8
Time (h)
0
50
100
150
Con
cent
ratio
n (n
g/m
L)
OME - 1 OME - 7
Cime Clinical Trial Data (2011-10-28)
0 0.25 0.5 0.75 1 1.5 2 2.5 3 4 5 6 8 10 12 24 48 72 168
PL01 0 0 0 LOQ LOQ LOQ 0 0 0 0 0 0
LV07 LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ LOQ 0 0
Exemple de l’oméprazole pour 2 volontaires
PK des composés CIME – Méthodologie (III)
Données non nulles en t=0 (juste avant administration du cocktail):
0 5 10 15 20
Time (h)
200
400
600
800
1 000
1 200
1 400
Con
cent
ratio
n (n
g/m
L)
CAF - 8
Cime Trial
0 5 10 15 20
Time (h)
200
300
400
500
600
700
Con
cent
ratio
n (n
g/m
L)
CAFPAR - 8
Cime Trial
Suppression de la caféine résiduelle Suppression de la paraxanthine résiduelle+
Suppression de la paraxanthine produite par métabolisation de la caféine résiduelle
PK des composés CIME – Résultats (I)
• Paramètres PK calculés pour les 10 substrats et pour 7 métabolites sur 10.
3-métoxymorphinan et 4-hydroxymidazolam: détecté pour certains patients, mais pas assez dedonnées valides (i.e. >LOQ validée a priori)
3-hydroxyrépaglinide : problème d’identification par rapport au standard
0 2 4 6 8 10 12
Time (h)
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
Con
cent
ratio
n (n
g/m
L)
DEXMET - 1 DEXMET - 3 DEXMET - 5 DEXMET - 7 DEXMET - 8 DEXMET - 9 DEXMET - 13 DEXMET - 14 DEXMET - 19 DEXMET - 18
Cime Clinical Trial Data (2011-10-28)
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
Time (h)
0
0.5
1
1.5
Con
cent
ratio
n (n
g/m
L)
MID4OH - 1 MID4OH - 3 MID4OH - 5 MID4OH - 7 MID4OH - 8 MID4OH - 9 MID4OH - 13 MID4OH - 14 MID4OH - 19 MID4OH - 18
Cime Clinical Trial Data (2011-10-28)
CYP1A2 CYP28 CYP2C19 CYP2D6CYP3A4
Fonction rénale
Tolbutamide Omeprazole DextromethorphanMidazolam
Mémantine
3OHrepaglinide
Repaglinide
4OHtolbutamide
5OH-
omeprazole
Omeprazole
sulfone3 –methoxy-
morphinan
Dextrorphan
Acetaminophen UGTAcetaminophen
glucuronide
Paraxanthine
1OHmidazolam
Pgp Digoxine
OATP Rosuvastatine
Caféine
CYP2C9
4OHmidazolam
3MM
4OHMDZ
28
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Cmax
(met)
AUC0-inf
(met)Rm
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 1091 4645 877 6459 0.73
Médiane 1057 4565 842 6408 0.68
CV 24% 28% 14% 15% 30%
Intervalle [732-1630] [2978-6461] [768-1085] [5082-7705] [0.45-1.10]29
UGT1A1/6/9
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Unité ng/ml ng.h/ml
Moyenne 0.532 10.07
Médiane 0.522 10.57
CV 36% 42%
Intervalle [0.274-0.849] [4.45-16.01]30
P-gp
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Unité ng/ml ng.h/ml
Moyenne 6.97 442
Médiane 7.05 451
CV 17% 17%
Intervalle [4.86-8.41] [303-557]31
Réabsorption tubulaire rénale
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Cmax
(met- 1OH)
AUC0-inf
(met-1OH)Rm
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 21.6 65.2 31.6 90.1 1.00
Médiane 21.0 59.6 33.2 85.3 0.73
CV 24% 38% 52% 51% 81%
Intervalle [13.9-31.8] [31.9-109.6] [9.67-56.1] [35.7-165.4] [0.34-2.48]32
CYP3A4
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Cmax
(met)*
AUC0-inf
(met)*Rm*
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 1.76 2.74 0.139 0.188 494
Médiane 1.66 2.49 0.129 0.183 482
CV 55% 57% 22% 32% 38%
Intervalle [0.52-3.66] [1.03-5.36] [0.110-0.189] [0.097-0.311] [276-833]33
*n=8
CYP2C8
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Cmax
(met)
AUC0-inf
(met)Rm
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 1323 14 039 7.11 103 146
Médiane 1317 13 347 6.23 110 124
CV 27% 27% 36% 24% 42%
Intervalle [790-1976] [8 976-21 017] [3.74-11.31] [69.2-135] [80.5-253]34
CYP2C9
Cmax
(sub)
AUC0-inf
(sub)
Cmax
(5OH)
AUC0-inf
(5OH)
Rm
(5OH)
Cmax
(sulfone)
AUC0-inf
(sulfone)
Rm
(sulfone)
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml - ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 101 174 100 220 0.81 30.1 96.7 1.91
Médiane 98.5 154 95.8 222 0.74 25.6 90.8 1.70
CV 45% 41% 43% 24% 38% 58% 43% 35%
Intervalle [36.7-172] [84.7-336] [40.9-160] [124-279] [0.48-1.33] [11.3-71.0] [47.1-198] [1.14-2.87]
35
CYP2C19
----- Homozygote sauvage (*1/*1) (5 patients)
----- Hétérozygote sauvage/muté (*1/*17) (4 patients)
----- Double muté (*2/*17) (1 patient)
CYP 2C19
LV_07
Cmax
(sub)
AUC0-inf
(sub)
Cmax
(dextrorphan)
AUC0-inf
(dextrorphan)Rm
Unité ng/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 2.44 76.33 5.21 28.27 13.62
Médiane 0.91 8.75 4.08 28.87 0.29
CV 148% 253% 58% 50% 307%
Intervalle [0.43-11.74] [2.18-622.45] [0.55-10.49] [4.70-47.71] [0.06-132]37
CYP2D6
----- Double muté (*4/*5) (1 patient)
----- Homozygote sauvage (*1/*1) (5 patients)
----- Hétérozygote Sauvage/mutés (*1/*3, *1/*4, *1/*6) (4 patients)
LV_07
38
CC_19
CC_19
• Détection des
génotypes particuliers à
partir du ratio
métabolique (sujet
LV_07)
• Information
supplémentaire à partir
de l’AUC du substrat
(sujet CC_19)
Absorption plus importante via une
faible activité de la P-gp et/ou du 3A4 au niveau
intestinal ?
39
P-gp assez active (plus les
concentrations plasmatiques
sont faibles et plus la P-gp est
active )3A4 peu actif (ratio
mdz/met élevé)
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Cmax
(met)AUC0-inf (met) Rm
Uniténg/ml ng.h/ml ng/ml ng.h/ml -
Moyenne 2064
(1973)17 691
(16 621)620
(554)10 873
(10 455)1.57
(1.53)
Médiane 1715
(1658)15 224
(14 800)679
(524)9 385
(8 322)1.49
(1.48)
CV 54%
(54%)69%
(67%)34%
(31%)48%
(49%)23%
(18%)
Intervalle [1472-5145]
[1292-4882][9 217-51 390]
[9 217-47 331][340-1023]
[340-859][7 472-25 046]
[7 472-23 646][0.98-2.11]
[1.16-2.00]
(données corrigées)
Avant correction
(Après correction)
id cMax auc0Inf
LV_07 4.74% 5.56%
FJ_08 12.26% 13.20%
BF_09 1.61% 1.63%
CC_19 19.49% 21.97%
BN_18 5.12% 7.90%
cMax auc0Inf Rm
LV_07 5.05% 4.64% 0.96%
FJ_08 16.91% 26.77% 18.53%
BF_09 6.37% 5.20% 3.77%
CC_19 - - -
BN_18 16.05% 5.59% 2.45%
caféine
paraxanthine
Différence relative entre
paramètres avant et après
correction
n=9 pour le métabolite,
données corrigées
CYP1A2
Cmax
(sub)AUC0-inf (sub)
Unité ng/ml ng.h/ml
Moyenne 5.32 66.2
Médiane 1.91 16.8
CV 208% 210%
Intervalle [1.09-36.8] [12.8-461]41
PL_01
OATP1B
(OATP-C, BCRP
43
1.Données salivaires confirment
le sujet « outliers » pour
dextromethorphan et caféine
mais pas rosuvastatine
1.Urines en cours.
44
2D6
(Dextromethorphan /
Dextrorphan)
2C8
AUC substrat
3A4
(Midazolam/
1OH-
Midazolam)
OATP1B1
( substrat)
Absorption
Dextromethorphan
Caffeine
(absorption)
PL_01 --PM_05 +LV_07 -- --PJ_14 -CC_19 - -- -- ++BN_18 -- ++
Objectif secondaire :
Quels sont les temps de prélèvements qui apportent le maximum
d’information sur la pharmacocinétique d’un maximum de composés ?
Temps de prélèvements informatifs – Corrélations simple point
• Stratégie 1: identification des points informatifs par corrélation linéaire entre la métrique complète (i.e.
Ratio AUCsub/AUCmet ou CLsub) et une métrique simple-point (i.e. Csub/Cmet ou Csub)
Metabolic ration (i.e. AUCsubstrate/AUCmetabolite) vs single-point
concentration ratio (Csubstrate/Cmetabolite)
(1) (2a) (2b) (3) (4) (5) (6) (7) p-value > 0.05
1A2 2D6 2D6 2C9 2C19 3A4 3A4 UGT p-value ≤ 0.05
0.5h nc nc nc nc nc nc p-value ≤ 0.01
0.75h nc nc nc nc nc p-value ≤ 0.001
1h nc nc nc nc nc nc not calculated
1.5h nc nc nc
2h * nc nc (1) caffein/paraxanthine
2.5h * * (2a) dextromethorphan/dextrorphan (all the volunteers)
3h * * (2b) dextromethorphan/dextrorphan (except CC19 and LV07)
4h * * (3) tolbutamide/4-oh-tolbutamide
5h * * nc nc (4) omeprazole/5-oh-omeprazole
6h * nc nc (5) midazolam/1-oh-midazolam
8h * nc nc nc nc nc (6) omeprazole/omeprazole sulfone
10h nc nc nc nc nc (7) acetaminophen/acetaminophen glucuronide
12h nc nc nc nc nc
24h nc nc nc nc nc nc nc
48h nc nc nc nc nc nc nc nc
72h nc nc nc nc nc nc nc nc
168h nc nc nc nc nc nc nc nc
Temps de prélèvements informatifs – Corrélations simple point
Clearance vs single-point concentration (substrate only)
(1) (2a) (2b) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) p-value > 0.05
1A2 2D6 2D6 2C9 2C19 3A4 2C8 UGT OATP Tub. Pgp p-value ≤ 0.05
0.5h nc nc p-value ≤ 0.01
0.75h nc p-value ≤ 0.001
1h nc nc nc not calculated
1.5h nc
2h nc (1) caffein
2.5h (2a) dextromethorphan(all the volunteers)
3h (2b) dextromethorphan(except CC19 and LV07)
4h nc (3) tolbutamide
5h nc nc (4) omeprazole
6h nc nc (5) midazolam
8h nc nc nc nc nc (6) repaglinide
10h nc nc nc nc nc (7) acetaminophen/acetaminophen glucuronide
12h nc nc nc nc nc (8) rosuvastatin
24h nc nc nc * nc nc nc nc (9) memantine
48h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc (10) digoxin
72h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc
168h nc nc nc nc nc nc nc nc nc nc
Stratégie inefficace pour identifier des points pertinents pour décrire l’AUC
Pas d’amélioration des résultats en recherchant des combinaisons de points par régression linéaire multiple
Perspectives/suites du projet :
1. Diminuation des doses du cocktail (� tests de
LC-MS/MS les plus récents ; WATERS)
2. Forme galénique : Bertin Pharma
3. Etude clinique CIME 2 à plusieurs segments
(inducteurs/inhibiteurs) : ANR Recherche Partenariale et
Innovation Biomédicale (RPIB ; dead-line 23 mars 2012)
� INSERM Promoteur?
4. Etude chez des patients : montrer que des patients
phénotypés ont un meilleur devenir que des patients
non phénotypés48
Temps de prélèvements informatifs – Approche de population (en cours)
• Stratégie 2: Etablissement d’un modèle de population
ke
kem
k21 k12
km
kaXa X
Xp
Xm
Dose
Modèle 2 compartiments pour le substrat, 1 compartiment pour le métabolite,
administration orale
Fixed effects Random effects
unit Estimate RSE Estimate RSE
Tlag h 0.114 15% 0.268 53%
ka /h 6.94 39% 0.964 29%
K /h 0.276 6% 0.168 27%
V L 49.5 6% 0.16 28%
k12 /h 0.0602 19% 0.387 39%
k21 /h 0.152 18% 0.323 52%
km/Vm /h /L 0.0178 4% 0.0931 31%
kem /h 0.572 5% 0.124 31%
Paramètres du modèle de population (Monolix) pour l’acétaminophène et
son métabolite
Population de référence
2 ou 3 points de
prélèvements pour
un nouveau patient
Paramètres PK (i.e.cinétique complète)
AUC substrat
AUC metabolite
Clairance
etc…
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