CROMATOGRAFÍA DE GASES Y LÍQUIDOS

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omercio E

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MUESTRA

FASE MÓVIL

Tiempo (min)

30 40 500

DETECTOR

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omercio E

CROMATOGRAFÍA

FASE MÓVIL

Tiempo (min)

30 40 500

DETECTORFase estacionaria COLUMNA

MUESTRA

CROMATOGRAMA

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omercio E

INSTRUMENTACIÓN

Un cromatógrafo de gases consta de:

COLUMNA

BOTELLA DE GAS PORTADOR

MEDIDOR DE PRESIÓN

HORNO TERMOSTATIZADO

JERINGA

DETECTOR

TRATAMIENTO DE DATOS

PUERTO DE INYECCIÓN

VÁLVULABYPASS

MEDIDOR DE CAUDAL DE POMPAS DE JABÓN

VÁLVULABYPASS

Cromatografía de gases (GC)

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omercio E

SISTEMAS PARA LA INTRODUCCIÓN DE LA MUESTRACromatografía de gases (GC)

• Inyector split/splitless: MODO SPLIT (con división de muestra)

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omercio E

SISTEMAS PARA LA INTRODUCCIÓN DE LA MUESTRA

• Inyector split/splitless: SPLITLESS (sin división de muestra)

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omercio E

COLUMNAS Y FASES ESTACIONARIAS

EMPAQUETADA O DE RELLENO∅ = 2 a 6 mmL = 1 m a 6 m

1.000-2.000 platos teóricos/m

ABIERTAS O CAPILARES∅ = 0,1 a 0,6 mmL = 10 m a 100 m

10.000 platos teóricos/m

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omercio E

Elución: Isotérmica vs programa de Temperatura

Elución de analitos depende de su P de vapor y por tanto de la Temperatura

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omercio E

� Detector de ionización de llama (FID)Cromatografía de gases (GC)

Columna Columna

10-12 A

Formación de iones y electrones (CHO+ + e-)cuando se pirolizan átomos de carbono a latemperatura de una llama aire/hidrógeno

FUNDAMENTO

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omercio E

ANÁLISIS DE ALIMENTOS• Especies volátiles responsables de

olores y sabores

CROMATOGRAFÍADE GASES

CONTAMINANTES EN EL MEDIO AMBIENTE• Pesticidas• Metales en diversas muestras

ANÁLISIS DE DROGAS• Fluidos biológicos (sangre, orina,...)

Cromatografía de gases (GC). Aplicaciones

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omercio E

Compuestos orgánicos: Pesticida DDT

� COMPONENTES:

� DESCOMPOSICIÓN:

p,p´-DDT (70-80%)

CCl3o,p´-DDT (15-20%)

p,p´-DDD (1-4%)

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omercio E

Compuestos orgánicos: Pesticida DDT

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omercio E

ANÁLISIS DE ALIMENTOS• Especies volátiles responsables de

olores y sabores

CROMATOGRAFÍADE GASES

CONTAMINANTES EN EL MEDIO AMBIENTE• Pesticidas• Metales en diversas muestras

ANÁLISIS DE DROGAS• Fluidos biológicos (sangre, orina,...)

CONTAMINACIÓN ATMOSFÉRICA• Dibenzo-p-dioxinas policloradas (PCDD)

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omercio E

• Seveso, 1976: una nube tóxica que contenía TCDD (2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina)

• Contaminación de alimentos: • Envenenamiento:

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omercio E

INSTRUMENTACIÓN

Cromatografía de líquidos de alta eficacia (HPLC)

Un cromatógrafo de líquidos consta de:

COLUMNA

FILTRO

DETECTOR

INTRODUCCIÓN DE LA MUESTRA

FASEMÓVIL

SISTEMA DE BOMBEO

TRATAMIENTO DE DATOS

Alta presión

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omercio E

INTRODUCCIÓN DE LA MUESTRA

� Volúmenes pequeños para evitar sobrecarga de lacolumna

� Válvulas de inyección con bucles volumen conocido(5-500 µl)

CARGA DE MUESTRA

A la columna

De la bomba

A la columna

De la bomba

INYECCIÓN DE MUESTRA

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omercio E

COLUMNAS Y FASES ESTACIONARIAS

MODOS CROMATOGRÁFICOS

� Fase normal � Fase inversa � Cambio iónico� Pares iónicos� Exclusión por tamaños� Afinidad

Fases estacionarias comunes

� Fase normal vs fase inversa

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omercio E

� SEPARACIÓN de componentes: Elución ISOCRÁTICA: fase móvilcon composición constante

Elución EN GRADIENTE: cambiode la composición de la fase móvil

MODOS DE ELUCIÓN

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omercio E

� DETECTOR DE UV/VISIBLE

• Fundamento: absorción de radiación ultravioleta o visible

• Célula de flujo: volumen mínimo entre 1 y 10 µl

Al desecho

De la columna

FuenteUV Detector

Ventanasde cuarzo

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omercio E

� DETECTOR DE UV/VISIBLE

Detección a una sola longitud deonda

• Detección monocromática

Lámpara de deuterio y unmonocromador para mediciones alongitud de onda variable

• Detección policromática(“Fotodiodos”)

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omercio E

EJEMPLO 2: HPLC CON DETECCIÓN DE FLUORESCENCIA

� Hidrocarburos polinucleares aromáticos (PAHs)

Cromatografía líquida (HPLC): APLICACIONES

Antraceno

Naftaleno

Benzo[a,h]pireno

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omercio E

EJEMPLO 2: HPLC CON DETECCIÓN DE FLUORESCENCIA

� Hidrocarburos polinucleares aromáticos (PAHs)

Cromatografía líquida (HPLC): APLICACIONES

Combustión INCOMPLETA petróleo yderivados y materia orgánica (carbón, madera,tabaco o vegetación)

FUENTES

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CROMATOGRAFÍA DE GASES Y LÍQUIDOS

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