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Citoesqueleto

CURSO: Licenciatura em Ciências Biológicas

DISCIPLINA: Biologia Celular e Molecular

PROFESSORA: Dra. Jaqueline Figuerêdo Rosa

Célula é a unidade estrutural e funcional dos seres vivos.

Membrana Plasmática

Citoplasma

Material Genético

Quais as partes fundamentais de

uma célula?

O citoesqueleto apresenta muitas funções

Guia e direciona o transito intracelular de

organelas;

Dá suporte à membrana plasmática;

Promove a locomoção das células;

Separa os cromossomos durante a divisão celular e

divide a célula;

Promove a contração muscular

Etc…….

O citoesqueleto é composto por três tipos de filamentos e as proteínas acessórias:

25 nm

8 nm

10 nm

Tubulina

Actina

Variados

Também conhecidos como Microfilamentos

Microtúbulos

F. intermediários

F. actina

Alberts et al., 2017

De Robertis; Hib, 2006

O citoesqueleto é composto por três tipos de filamentos e as proteínas acessórias:

Neurônios

Alberts et al., 2017

Microtúbulos → posição das organelas - transporteintracelular, fuso mitótico, locomoção (cílios e flagelos);

O citoesqueleto é composto por três tipos de filamentos e as proteínas acessórias:

Alberts et al., 2017

Microtúbulos → posição das organelas - transporteintracelular, fuso mitótico, locomoção (cílios e flagelos); Filamentos de actina → forma da superfície celular;transporte intracelular, locomoção da célula;

O citoesqueleto é composto por três tipos de filamentos e as proteínas acessórias:

Neurônios

Epiteliais

Lâmina nuclearAlberts et al., 2017

Microtúbulos → posição das organelas - transporteintracelular, fuso mitótico, locomoção (cílios e flagelos); Filamentos de actina → forma da superfície celular;transporte intracelular, locomoção da célula;

Filamentos intermediários → força mecânica eresistência ao estresse;

Microtúbulos → posição das organelas - transporteintracelular, fuso mitótico, locomoção (cílios e flagelos); Filamentos de actina → forma da superfície celular;transporte intracelular, locomoção da célula;

Filamentos intermediários → força mecânica eresistência ao estresse;

Proteínas acessórias:

Reguladoras → nascimento, alongamento,encurtamento e desaparecimento dos filamentos;

Ligadoras→ conectam filamentos;

Motoras → transporte e movimento defilamentos uns sobre os outros;

O citoesqueleto é composto por três tipos de filamentos e as proteínas acessórias:

Os filamentos são compostos por subunidades protéicas menores

(pequenas) e apresentam estrutura dinâmica.

Filamentos intermediários →fibrosas e longas;

Microtúbulos → globular(tubulina);

Filamentos de actina →

globular (actina);Alberts et al., 2004

Monômeros unidos por interações fracas não-covalentes

Os microtúbulos são formados por subunidades de tubulina

α-tubulina e β-tubulina fortemente conectadas não-covalentemente

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Sítios de Ligação com um nucleotídeo - GTP

Os microtúbulos são cilíndricos, ocos e constituídos de 13 protofilamentos de tubulina paralelos

Alberts et al., 2017

Longitudinalmente, num mesmo protofilamento, uma β-tubulina de um

heterodímero se liga com a α-tubulina de outro.

Lateralmente, entre protofilamentos, a ligação

ocorre, principalmente, entre tubulinas do

mesmo tipo (β-β e α-α).

Alberts et al., 2017

Os microtúbulos são cilíndricos, ocos e constituídos de 13 protofilamentos de tubulina paralelos

É um filamento polarizado!

Cresce e dissocia mais rapidamente!

Os microtúbulos são estruturas dinâmicas!

Alberts et al., 2017

Influenciada pela ligação e hidrólise do GTP na subunidade

de β-tubulina

Alberts et al., 2017

Os microtúbulos são estruturas dinâmicas!

Se a adição de tubulina GTP for mais rápida que a hidrólise

do GTP, forma-se uma capa de GTP e o microtúbulo cresce!

Alberts et al., 2017

Os microtúbulos são estruturas dinâmicas!

Se a hidrólise do GTP for mais rápida que a

adição de tubulina GTP, as tubulinas irão

dissociar e o microtúbulo encurta !

Alberts et al., 2017

Os microtúbulos são estruturas dinâmicas!

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Instabilidade Dinâmica: rápida interconversão entre os estados de crescimento e encurtamento.

Alberts et al., 2017

Instabilidade Dinâmica: rápida interconversão entre os estados de crescimento e encurtamento.

Alberts et al., 2017

Se o microtúbulo cresce ou encurta vai depender da concentração citoplasmática de tubulina na forma GTP

e da ação de proteínas reguladoras.

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Os microtúbulos irradiam a partir do centrossomo (centro organizador de microtúbulos - MTOC).

De Robertis; Hib, 2006

Alberts et al., 2004

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

A extremidade menos encontra-se nucleada no complexo protéico de γ-tubulina presente no centrossomo.

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

A extremidade menos encontra-se nucleada no complexo protéico de γ-tubulina presente no centrossomo.

Duas γ-tubulina se ligam a proteínas acessórias para

formar o complexo γ-TuSC;

Alberts et al., 2017

A extremidade menos encontra-se nucleada no complexo protéico de γ-tubulina presente no centrossomo.

Sete cópias do complexo γ-TuSC associam-se em espiram com sobreposição da primeira

com a última γ-tubulina ;

Alberts et al., 2017

A extremidade menos encontra-se nucleada no complexo protéico de γ-tubulina presente no centrossomo.

Os heterodímeros de α e β-

tubulina se ligam a γ-tubulina

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Um arranjo de microtúbulos pode localizar o centro de uma célula!

Experimento com célula pigmentar de peixe:

Os filamentos de actina são formados por dois protofilamentos de actina G enrolados entre si

A actina apresenta um nucleotídeo ligado → ATP ou ADP

Alberts et al., 2017

Os filamentos de actina são formados por dois protofilamentos de actina G enrolados entre si

É um filamento polarizado!Polarização da Actina

Os microfilamentos também são estruturas dinâmicas!

Influenciada pela ligação e hidrólise do ATP na actina

Alberts et al., 2017

Cooper; Housman., 2007

Cooper; Housman., 2007

Se a velocidade de adição de actina ATP for mais

rápida que a hidrólise, a extremidade cresce

Se a velocidade de adição de actina ATP for mais lenta

que a hidrólise, a extremidade diminui

Como a velocidade de adição de actina ATP nas extremidades é diferente, em algumas concentrações de actina, a extremidade mais

pode crescer enquanto a extremidade menos diminui:

ROLAMENTO.

Proteínas de ligação à actina influenciam a dinâmica dos microfilamentos, controlando a

disponibilidade dos monômeros

A timosina torna a actina inativa

Alberts et al., 2017

Proteínas de ligação à actina influenciam a dinâmica dos microfilamentos, controlando a

disponibilidade dos monômeros

A profilina induz a adição de actina na à extremidade mais

Alberts et al., 2017

A nucleação espontânea dos filamentos de actina dependem da formação de trímeros

De Robertis&Hib, 2006

São mais estáveis

Alberts et al., 2017

A nucleação é uma fase limitante do crescimento do microfilamento.

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Com filamentos pré-formados, o crescimento é rápido.

Proteínas de nucleação serão utilizadas para controlar o nascimento de novos filamentos.

Alberts et al., 2017

O Complexo Arp 2/3 ainda promove ramificação dos filamentos de actina.

Alberts et al., 2017

Proteínas de nucleação serão utilizadas para controlar o nascimento de novos filamentos.

A formina promove a nucleação pela captura de dois monômeros, e continua ligada a extremidade mais!

Alberts et al., 2017

Os filamentos de actina são frequentemente nucleados na membrana plasmática

Corticais

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2004

Alberts et al., 2017

Cooper; Housman., 2007Reece et al., 2015

Os filamentos de actina podem atravessar a célula.

Transcelulares

De Robertis; Hib, 2006

De Robertis; Hib, 2006 Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

O tipo de proteína ligadora determina a forma de organização dos filamentos de actina.

Alberts et al., 2017

O tipo de proteína ligadora determina a forma de organização dos filamentos de actina.

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Alberts et al., 2017

Reece et al., 2015

De Robertis; Hib, 2006

Sadava et al., 2009

Alberts et al., 2017

Dinâmica do citoesqueleto durante divisão celular

Alberts et al., 2017

Dinâmica do citoesqueleto (filamentos de actina) durante interfase

Neutrófilo perseguindo bactéria

Alberts et al., 2017

Dinâmica do citoesqueleto (filamentos de actina) durante interfase

Neutrófilo perseguindo bactéria

Alberts et al., 2017

Estrutura dos filamentos intermediários Uma sequência de 7 aminoácidos

repetida ca. de 40 vezes.

Subunidade solúvel

Alberts et al., 2017

Paralelos

Antiparalelos e recuados

Alberts et al., 2004

Estrutura dos filamentos intermediários

➢ Ao contrário dos microtúbulos e microfilamentos, filamentosintermediários não estão presentes em todas células eucarióticas;

➢ Restrito a alguns metazoários (vertebrados, nematódeos e moluscos), emcélulas sujeitas a estresse mecânico;

➢ Não são encontrados em organismos com exoesqueleto (comoartrópodes).

Estrutura semelhantes a cabos:✓ São facilmente curvados;✓ São extremamente difíceis de serem

rompidos;✓ Podem ser esticados.

Função: resistência a estresse mecânico

Alberts et al., 2017

Duas diferenças importantes entre filamentos intermediários e os outros filamentos:

Alberts et al., 2017

As subunidades não possuem

sítios de ligação com nucleotídeos (ATP e GTP)!

São mais estáveis que filamentos de actina e

microtúbulos

No tetrâmero (subunidade

solúvel), as duas extremidade são idênticas!

O filamento intermediário não é polarizado!

Alberts et al., 2017

Os filamentos intermediários citoplasmáticos formam uma rede contínua entre a membrana plasmática e o

envoltório nuclear.

Alberts et al., 2017

Os filamentos intermediários nucleares revestem o envoltório nuclear internamente.

De Robertis; Hib, 2006

Alberts et al., 2017

ATIVIDADE PONTUADA EM GRUPO

Seminários:Grupo: Cílios, flagelos, centríolos e os

movimentos ciliar e flagelar;Grupo: Transporte de organelas via

microtúbulos;Grupo: Transporte de organelas via filamentos

de actina;Grupo: Migração celular mediado pelos

filamentos de actina;Grupo: Contração Muscular.

Máximo de 20 minutos por equipe.

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