e Spectro Foto Me Tria

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eSpectroFotoMeTria

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22/08/2012

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Aseguramiento de la Calidad Analitca Aseguramiento de la Calidad Analitca EspectrofotometricaEspectrofotometrica

Hach Company

ING. ERICK REA

ELICROM CIA. LTDA

Andean Region

erea@elicrom.com

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Conceptos de Colorimetria

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¿QUÉ ES COLORIMETRÍA??

Esta medida se usa para cuantificar un analito disuelto en una solución.

La sustancia debe ser coloreada (absorber la luz) o convertida en un compuesto coloreado.

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LEY DE BEER-LAMBERTRelación empírica entre la absorción de luz y las propiedades del material atravesado por la luz.

En resumen, la ley explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a través de una sustancia y la concentración de la misma, así como también entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si se conoce l y α, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz transmitida.

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• Procedimiento de análisis químico

basado en la medida de la intensidad

de color de las soluciones.

¿QUÉ ES COLORIMETRÍA?

• Medición de la concentración de las

muestras con un sistema óptico.

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ESPECTROFOTÓMETRO BÁSICO

Lámpara Monocromador o

filtro

Lente Muestra Detector

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FUNDAMENTOS

Los métodos de espectrofotometría son invariablemente métodos de comparación.

La muestra es comparada con un estándar del mismo tipo bajo condiciones idénticas de química e iluminación.

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Absorbancia

Co

nce

ntr

acio

n (

mg

/L)

0.88

1.60

4.00

0.22 0.40 1.00

Pendiente

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CARACTERÍSTICAS DEL ESPECTROFOTÓMETRO

�Genera energía lumínica.� Selecciona una longitud de onda específica en el

espectro.� Incide un rayo de luz por la muestra.�Mide el cambio en la intensidad de la luz al pasar

por la muestra.�Muestra la señal de la intensidad digitalmente.

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100

15.2

0.00

0.818

79.1 0.19

36.3 0.440

%T ABS CONC mg/L

0.00

0.10

0.83

1.55

(Absorbance = -log T)

Sample Cell Detector

535nm535nm

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¿Dónde se usan?

NH3

Mn

SO4

SiO2

Fe

Cr

PbN2

AlCl2

DQO

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Aplicaciones de colorimetria

• Pruebas de Agua Potable

– arsénico*, cloro*, fluoruro*, plomo*, ozono, TOC, color, hierro, nitrato, chloramina y amoníaco libre.

• Pruebas de Aguas Residuales– DQO*, nutrientes (NH3 *, NO3

-, nitrógeno total, PO4*, fósforo total *), varios metales*

* Denota métodos aprobados por la Agencia de Protección Ambiental de EEUU

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Aplicaciones de colorimetria

• Pruebas de Agua Industriales– Sílice (3 rangos),

– Dureza (1 – 1000 ppb, y 0.07 – 4.00 mg/L)

– DEHA, oxígeno secuestrante

– Hidrazina

– fosfonatos

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HACH OFRECE EL SISTEMA COMPLETO

�El instrumento�Procedimiento

escrito�Reactivos

¡Son probados!

Los tres son diseñados para funcionar juntos.

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¿SÓLO PUEDE UTILIZAR PROGRAMAS DE HACH?

No, pero. . .

es

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¿CÓMO SE UTILIZA EL ESPECTROFOTÓMETRO?1. Llene la celda con la muestra.

2. Añada el reactivo y agite la muestra.

3. Espere el tiempo de reacción.

4. Haga cero en el espectrofotómetro.

5. Lea la muestra.

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Correr de la Prueba

• 1. Llene la celda con la muestra– Enjuague la celda con muestra antes de

llenar a volumen

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Correr de la Prueba

• 2. Añada reactivo a la muestra, como indicado en el procedimiento

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Reactivo + muestra

Complejo coloreado

Correr de la Prueba

3. Espere el tiempo de reacción.

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4. Haga cero en el espectrofotómetro

• Limpia la celda (el blanco), coloquéla en el instrumento y presione la tecla de Zero.

Correr de la Prueba

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• 5. Lea la muestra• Despues del periodo de reaccion, limpia la celda

reaccionada,coloquela en el instrumento y presione la tecla de

Leer.

Correr de la Prueba

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Buenas Practicas de Laboratorio

• Chequeos de instrumento • Chequeos de reactivo

– Correcto, no cauducidos

• Limpieza del cristal – Celdas y otro aparato

• Cristal de exactitud• Buen registro de los datos

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• Sistema optico

• Conjunto de filtros certificados para chequear– la exactitud de absorbancia

– luz desviada

– exactitud de longitud de onda.

• Certificado de los valores acceptables.

• Servicio

Chequeo de Instrumento

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CHEQUEOS DE PRUEBA

Como cualquier instrumento, hay que verificar periódicamente su funcionamiento, utilizando patrones y la adición de estándares.

Soluciones estándar