Fiksasi Ppt

MIKROTEKNIK HEWAN 1

Mikroteknik hewan

FIKSASI

MIKROTEKNIK HEWAN 2

USAHA UNTUK MEMPERTAHANKAN ELEMEN ELEMEN SEL / JARINGAN AGAR TETAP PADA TEMPATNYA & TIDAK MENGALAMI PERUBAHAN STRUKTUR

MIKROTEKNIK HEWAN 3

TUJUAN

“AGAR DAPAT DIPEROLEH GAMBARAN STRUKTUR SEL / JARINGAN SEPERTI PADA GAMBARAN SEBELUM MATI / ASLINYA”

MIKROTEKNIK HEWAN 4

CARA FIKSASI

DIPILIH FIKSATIF MENURUT TUJUAN; FIKSATIF YG DIPILIH HARUS SESUAI / DIKETAHUI SIFAT-SIFATNYA, A.L. : “DAYA PENETRASINYA”

MIKROTEKNIK HEWAN 5

MACAM-MACAM FIKSATIF

SEDERHANA / FIKSATIF TUNGGAL

ALKOHOL, FORMALIN, dsb

MAJEMUK / FIKSATIF CAMPURAN

BOUIN, ZENKER dsb

MIKROTEKNIK HEWAN 6

KONSENTRASI : JENUH s/d HAMPIR JENUH BENTUK KRISTAL, KUNING, MUDAH MENYALA,

MELEDAK MRPK ASAM KUAT, LARUT DALAM ALKOHOL,

XYLOL/BENSIN GUNA : MENGENDAPKAN PROTEIN; MEMBENTUK

CAMPURAN PIKRAT + ALKOHOL U/ FIKSASI KARBOHIDRAT (LRT.BOUIN) U/ FIKSASI PROTEIN PENETRASI LAMBAT; SANGAT MENGKERUTKAN &

MENGERASKAN JARINGAN MENINGGALKAN EFEK KUNING PD JARINGAN

PERLU WASHING YG CUKUP LAMA DALAM ALKOHOL 70%

PICRIC ACID (C6H2(NO2)3OH

MIKROTEKNIK HEWAN 7

KONSENTRASI : 0,5% - 1% LARUTAN AQUOSAMENGENDAPKAN NUKLEOPROTEIN

TIDAK BOLEH + ALKOHOL / FORMALIN DENATURASI PROTEIN JARINGAN SEDIKIT MENGERASKAN JARINGAN U/ FIKSASI : LEMAK, BAIK SEKALI U/ FIKSASI

MITOKHONDRIA, GOLGI & GLIKOGEN DAYA PENETRASI : LAMBAT, TDK KERUTKAN JAR. TERJADI ENDAPANWASHING PD AIR MENGALIR 12

JAM BILA WASHING TDK SEMPURNA SANGAT PEKA THD

PEWARNA BASA KEBAIKAN : JARINGAN AKAN TERPULAS DG BAIK

SETELAH MGNK FIKSATIF INI

CHROMIC ACID (H2Cr2O4)Hannover (1940)

MIKROTEKNIK HEWAN 8

KONSENTRASI : 1% -3% (LART.BAKU 3 – 5%) BENTUK PADAT, KRISTAL BESAR, MERAH

JINGGA, BERACUN GARAM YG LARUT DALAM AIR

CAMPUR FORMALIN JARINGAN (MYELIN & PHOSPHOLIPID) +

FIKSATIF FORMALIN MASUK KE Potassium dichromat 2-3% (3-7 HARI)TERFIKSASI BAIK

POTASSIUM DICHROMAT (K2Cr2O7)Henrich Muller (1859)

MIKROTEKNIK HEWAN 9

KONSENTRASI JENUH – HAMPIR JENUHLARUTAN STOK / BAKU DLM BENTUKL JENUH

BUBUK PUTIH, RACUN KERAS SANGAT BAHAYAASPEK KOROSI PD MEMBRAN MUKOSA

MENGENDAPKAN SEMUA MACAM PROTEINENDAPAN KRISTAL BENTUK JARUM

SEMUA ZAT WARNA BERASPEK BAIK MEMBENGKAKKAN JARINGAN DAYA PENETRASI : SEDANG Hg = Sublimat pada Larutan ZENKER, HARUS 2 KALI

WASHING AIR MENGALIR (24 JAM) SEBELUM DEHIDRASI JUGA SEBELUM STAINING

MERCURIC CHLORID (Hg Cl2)

CORTI (1851)

MIKROTEKNIK HEWAN 10

KONSENTRASI : 0,5%-2% LART. STOK 2% KRISTAL KUNING PUCAT / LARUTAN 2% DALAM

AMPUL SATU-2NYA FIKSATIF TERBAIK U/ LEMAK HITAM

U/ KARBOHIDRAT, OKSIDATOR, MUDAH MENGUAP IRITASI MATA

DAYA PENETRASI : SANGAT LAMBAN BUAT IRISAN TIPIS / KECIL DIFIKSASI WASH PD AIR MENGALIR

JANGAN DI + ALKOHOL / FORMALIN KEBAIKAN : GOLGI, MITOKHONDRIA TERWARNA BAIK;

TIDAK MENGKERUTKAN JARINGAN KEJELEKAN : ZAT WARNA YG DIBERIKAN SUKAR

MASUK KE DALAM JARINGAN

OSMIUM TETROXIDE (OsO4) Max Schultze (1865)

MIKROTEKNIK HEWAN 11

U/APARATUS GOLGI DALAM SEL JARANG DGNK SEKARANG

CADMIUM CHLORIDE (Cd Cl2) Aoyama (1929

MIKROTEKNIK HEWAN 12

BISA DGNK U/ DEHIDRASI JUGA DGNK DALAM MACAM-MACAM

KONSENTRASI ACETONE ABSOLUT (-50 C/ DINGIN)

DAPAT MEMPERTAHANKAN ENZIM-ENZIM TERTENTULYPASE, ACID PHOSPHATASE dsb

ACETONE (CH3CO)

MIKROTEKNIK HEWAN 13

PICRIC ACID 5% AQUOSA (JENUH)…..75 ml

FORMALIN 40%……………………..25 ml ACETIC ACID GLACIAL ……………5 ml

LARUTAN BOUIN

MIKROTEKNIK HEWAN 14

KEBAIKAN BOUIN PENETRASI CEPAT INTI TERPULAS BAIK SEKALI + JAR.

IKAT

MIKROTEKNIK HEWAN 15

KEJELEKAN BOUIN BILA LAMAJARINGAN RAPUH SULIT

DIIRIS SEMUA JARINGAN TERFIKSASI DG BAIK LAMA : 2 – 10 JAM, TGT TEBAL TIPIS

JARINGAN WASHING DG ALKOHOL 70%, JANGAN

DG AIRSWELLING

MIKROTEKNIK HEWAN 16

MERCURIC CHLORIDE ……………………5 gr POTASSIUM DICHROMATE…………… 2,5 gr AQUADEST………………………………..100 ml DITAMBAH SODIUM SULPHATE 1 gr BILA DGNK TINGGAL DITAMBAH 5 ml ACIDUM

ACETICUM GLACIAL TEPAT SEBELUM DIGNK ATAU LARUTAN ZENKER STOCK………………………100 ml A A G……………………………………………………5 ml DIBUAT pH nya s/d 3,2

LARUTAN ZENKER

MIKROTEKNIK HEWAN 17

KEBAIKAN : INTI + JAR. IKAT TERPULAS BAIK U/

JAR. TUMOR LEBIH-LEBIH, SEMUA ZAT WARNA BEKERJA BAIK

KEJELEKAN : JARINGAN TERLALU TEBAL LAMA JAR. RAPUH PATAH

MIKROTEKNIK HEWAN 18

CHLOROFORM………………………30 ml ALKOHOL ABSOLUT ……………… 30 ml A . A. G………………………………..10 ml

LARUTAN HELLY

MIKROTEKNIK HEWAN 19

KEBAIKAN : FIKSASI + DEHIDRASI DAPAT BERJALAN

SEKALIGUS AWETKAN GLIKOGEN DALAM JARINGAN

KEJELEKAN : SANGAT KERAS BILA TERLALU LAMASULIT

DIIRIS LANGSUNG DAPAT DIPINDAH KE ALKOHOL

ABSOLUT SETELAH DIFIKSASI

MIKROTEKNIK HEWAN 20

POTASSIUM DICHROMAT………………2,5 gr

SODIUM SULPHAT……………… 1,0 gr AQUADEST ……………………… 100 ml

LARUTAN DI ATAS BILA DGNK DITAMBAH 10 ml FERMALIN TEPAT

LARUTAN ORTH

MIKROTEKNIK HEWAN 21

KEBAIKAN : U/ MELIHAT MITHOSIS, SEL ERYTHROCYT,

JAR. IKAT

KEJELEKAN : TIDAK DAPAT DGNK U/ JARINGAN BESAR PENETRASI SANGAT LAMBAT WASH ½ s/d 1 JAM PADA AIR MENGALIR