View
216
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
69
Lampiran 1 Identifikasi Taksonomi Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var)
Oleh:
Ary Andini
Lokasi:
Desa Kedung Banteng, Tanggulangin, Sidoarjo
Identifikasi Lele Sangkuriang dilakukan berdasarkan struktur morfologinya
dengan hasil sebagai berikut.
Berat : 300 gr
Umur : 3 bulan
Panjang standar: 26 cm
Lebar badan : 4 cm
Lebar ekor : 16,7 cm
Bentuk tubuh ikan Lele Sangkuriang memanjang, licin, berlendir, dan tidak bersisik.
Bentuk kepala menggepeng (depress) dan mulutnya relatif besar. Terdapat 4 pasang
sungut dan terdapat 3 sirip tunggal di punggung, ekor dan anus. Selain itu, terdapat
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
70
dua pasang sirip di dada dan perut. Pada sirip dada terdapat patil dan bagian atas
ruangan rongga terdapat alat pernapasan tambahan seperti batang pohon. Setelah
dilakukan identifikasi, diketahui bahwa ikan tersebut adalah ikan Lele Sangkuriang
dengan klasifikasi taksonomi sebagai berikut.
Filum: Chordata
Klas: Pisces
Ordo: Siluriformis
Famili: Claridae
Genus: Clarias
Speses: Clarias gariepinus var
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
71
Lampiran 2 Dokumentasi Kegiatan Ekstraksi Kolagen dari Kulit Ikan Lele Sangkuriang
Proses Pembuatan Sampel Awal Kulit Ikan Lele Sangkruriang (Clarias
gariepinus var var)
Ikan Lele Sangkuriang dibeli dari petani tambak ikan, yaitu Bpk Moch. Kohar,
S.Sos di desa Kedung Banteng, Tanggulangin, Sidoarjo.
Persiapan alat dan bahan: 1. Beaker glass 2. Aluminium Foil 3. Toples 4. Baskom 5. Penyaring 6. Plastik Klip 7. Gelas Ukur 8. Pengaduk 9. Pipet Tetes 10. NaOH 11. Kulit Ikan Lele Sangkuriang 12. Es Batu
Membersihkan kulit Ikan Lele Sangkuriang dari sisa-sisa daging yang
menempel
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
72
Memotong Kulit Ikan Lele Sangkuriang menjadi 2-5 mm
Mencuci Potongan kulit ikan Lele Sangkuriang hingga bersih dengan air
dingin
Membuat 8 Volume larutan NaOH 0,1 M sebanyak 8 kali
Dilakukan Perendaman dengan NaOH sebanyak 8 kali
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
73
Proses Penirisan kulit Ikan Lele Sangkuriang setelah di rendam dengan
NaOH
Proses pencucian kulit ikan Lele Sangkuriang dengan akuades dingin hingga mencapai pH dasar akuades
Sampel kulit ikan Lele Sangkuriang untuk isoolasi kolagen dimasukkan ke
dalam plastik
Dimasukkan ke dalam Freezer bersuhu -20o C
Kulit ikan Lele Sangkuriang di lyopilisasi dalam freeze dryer sampai kering
seluruhnya selama 18.30 jam.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
74
Proses Isolasi Kolagen Kulit Lele Sangkruriang (Clarias gariepinus var)
Melarutkan lemak kulit Ikan Lele Sangkuriang dalam Heksan selama 2 hari lalu dilakukan pencucian dengan akuades
hingga mencapai pH dasar akuades.
Merendam kulit ikan Lele Sangkuriang dalam 0,5 M asam asetat selama 24 jam.
Mengangkat dan meniriskan kulit ikan Lele Sangkuriang dari larutan asam asetat
0,5 M untuk diambil cairan kentalnya (hasil ekstrak dalam asam asetat 0,5 M).
Hasil ekstrak dari asam asetat 0,5 M yang berupa cairan kental.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
75
Lampiran 3 Dokumentasi Kegiatan Pembuatan Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit
Proses pembuatan komposit kolagen-hidroksiapatit
Kolagen dilarutkan ke dalam asam asetat 0,5M, kemudian
ditambahkan dengan Na2HPO4,2H20 0,02 M, dan larutan HA dikontrol pH-nya hingga netral dengan NaOH,
Mencampurkan kolagen dan hidroksiapatit selama 1,5 jam, lalu
diinkubasi pada suhu ruang selama 24 jam
Pencucian dengan akuades dan disentrifugasi sehinga terbentuk
endapan, lalu dimasukkan ke dalam cetakan, lalu dimasukkan
ke dalam freezer
Freeze drying
Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
76
Lampiran 4 Preparasi Uji FTIR
Media Preparasi uji FTIR Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang
Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit dan Hidroksiapatit yang Dipreparasi menjadi Pellet untuk Uji FTIR
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
77
Lampiran 5 Dokumentasi Uji Densitas dan Porositas
Pengukuran Volume Scaffold dari Selisih Volume Awal (V1) dan Volume Akhir (V2) Air Saat Scaffold Dicelupkan
Penimbangan Berat Kering (Wk) dan Berat Basah Scaffold (Wb)
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
78
Lampiran 6 Data Hasil Uji densitas dan porositas
No. Kolagen (%) N Wk
(gr) Wb (gr)
Vawal (ml)
Vakhir (ml)
Vbenda (ml)
D (gr/cm3) P (%)
1 0
1 0.0163 0.0938 6 6.1 0.1 0.1630 77.50% 2 0.0128 0.0941 6 6.1 0.1 0.1280 81.30% 3 0.0293 0.1058 6 6.15 0.15 0.1953 51.00%
Rata-rata 0.1621 69.93%
2 5
1 0.011 0.074 6 6.1 0.1 0.1100 63% 2 0.0834 0.2915 6 6.3 0.3 0.2780 75% 3 0.0156 0.1188 6 6.15 0.15 0.1040 69%
Rata-rata 0.1640 68.89%
3 10
1 0.0331 0.1705 2 2.15 0.15 0.2207 91.60% 2 0.0291 0.1358 2 2.2 0.2 0.1455 53.33% 3 0.0485 0.1023 2 2.25 0.25 0.1940 55.53%
Rata-rata 0.1867 57.88%
4 15
1 0.0065 0.0325 2 2.075 0.075 0.2167 86.67% 2 0.0078 0.0390 2 2.05 0.05 0.1560 62.40% 3 0.013 0.0704 2 2.1 0.1 0.1300 57.40%
Rata-rata 0.1675 68.82%
5 20
1 0.0331 0.1251 2 2.16 0.16 0.2069 57.50% 2 0.0138 0.0813 2 2.1 0.1 0.1380 67.50% 3 0.0130 0.0979 2 2.1 0.1 0.1300 84.90%
Rata-rata 0.1583 69.97%
6 25
1 0.0176 0.1090 2 2.1 0.1 0.1760 91.40% 2 0.0352 0.1775 2 2.26 0.26 0.1354 54.73% 3 0.0158 0.0808 2 2.1 0.1 0.1580 65.00%
Rata-rata 0.1565 70.38%
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
79
Lampiran 7 Dokumentasi Uji MTT
Proses Inkubasi Sel BHK-21 pada suhu 37oC
Sel Fibroblas Baby Hamster Kidney (BHK-21)
Media Sel
Sel Fibroblas BHK-21
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
80
Proses Pemasukan MTT pada tiap well-plate
Proses Penghitungan Sel Fibroblast BHK yang Hidup dengan Menggunakan Elisa Reader
Perbandingan antara Well-plate Sampel Sebelum Diberi Pereaksi MTT dengan Setelah Diberi Pereaksi MTT
Sebelum Pemberian
Pereaksi MTTSetelah
Pemberian MTT
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
81
Lampiran 8 Hasil Uji MTT
Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit
Hidroksiapatit (HA)
Kontrol Sel
Kontrol Media
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi Potensi Kolagen Kulit Ikan Lele Sangkuriang (Clarias gariepinus var) Sebagai Scaffold Kolagen-Hidroksiapatit pada Bone Tissue Engineering
Ary Andini
Recommended