View
233
Download
2
Category
Preview:
Citation preview
Analitika ostataka pesticida u hrani
mr. sc. Mirela Grubelid, voditeljica Odjela hrane i vode Euroinspekt-Croatiakontrola d.o.o.
Iva Sabljak, mag. Ing. preh. aliment. , univ. spec. voditeljica Laboratorija Euroinspekt-Croatiakontrola d.o.o.
1
Cilj određivanja pesticida u hrani
• Provjera sukladnosti proizvoda s regulativom (MDK, organski uzgoj, zloupotreba pesticida…)
• Procjena unosa pesticida hranom u populaciji (koordinirani monitoring)
• Otkrivanje akutnih rizika (RASSF)
• Jačanje povjerenja potrošača u sigurnost hrane
2
Povijest
3
1960 1970 1980 1990 2000 2010
jednostavne metode
usko područje (OCP)
prošireno područje (OCP, OPP)
slaba selektivnost
složene metode
široki spektar
jednostavne metode
visoka selektivnost
Definicije
Ostaci pesticida su ostaci, uključujudi aktivne tvari, njihove metabolite i/ili produkte razgradnje ili produkte reakcije aktivnih tvari koja se trenutno koriste ili su se prije koristili u sredstvima za zaštitu bilja
Maksimalna razina ostataka pesticida (MDK, MRO) je najviša zakonski dopuštena razina koncentracije ostatka pesticida u ili na hrani ili hrani za životinje uspostavljena sukladno legislativi, na temelju dobre poljoprivredne prakse i najmanje potrebne izloženosti potrošača u svrhu zaštite osjetljive populacije potrošača
4
Analitika pesticida - izazovi
• Velik broj različitih spojeva
• Komplicirane matrice
• Maksimalne dopuštene vrijednosti
• Ocjena sukladnosti – tumačenje rezultata
5
Pesticidi
• > 1000 spojeva metaboliti i razgradni produkti
• Pesticide DataPool: 144 kemijske skupine
• nove aktivne tvari
6
Matrice • Vode i povrde
• Začinsko bilje
• Žitarice
• Uljarice
• Proizvodi animalnog podrijetla
• Dječja hrana
• „Zahtjevne” matrice
– čajevi i biljne infuzije
– kakao
– Kava
• Prerađena hrana
• Voda
• Tlo
7
MDK
• Širok raspon
• Razlikuju se od pesticida do pesticida i od matrice do matrice
Boskalid: MDK od 0,5 mg/kg (šparoge, masline) do 50 mg/kg (začinsko bilje)
Salata: MDK od 0,01 mg/kg (amitrol) do 100 mg/kg (spojevi bakra)
• Vrijednosti MDK i definicije ostataka podložni promjenama
8
Klasične analitičke tehnike
• Plinska kromatografija s različitim detektorima (ECD, FPD, NPD itd.)
• Tekudinska kromatografija (DAD, FLD)
• Ostale tehnike – tankoslojna kromatografija, ELISA, biosenzori
9
Nedvojbena identifikacija?
Spektrometrija masa
• Visoka selektivnost
• Visoka osjetljivost
• Mogudnost istovremenog određivanja velikog broja različitih spojeva
• Informacija o strukturi molekule – nedvojbena identifikacija
10
Višestruka spektrometrija masa
• Minimalan utjecaj matrice
• Nije potrebno potpuno kromatografsko razdvajanje komponenti u uzorku
• QQQ, QTOF
11
Priprema uzorka
• Ekstrakcija tekude-tekude (LLE)
• Ekstrakcija na čvrstoj fazi (SPE)
• Disperzija matrice u čvrstoj fazi (MSPD)
• Mikroekstrakcija na čvrstoj fazi (SPME)
• Ekstrakcija fluidom pri superkritičnim uvjetima (SFE)
• Gel permeacijska kromatografija (GPC)
• Disperzivna tehnika (QuEChERS)
12
Analitičke metode Multirezidualne metode • Mini-Luke • ChemElut • SweEt • QuEChERS Metode za pojedinačne ostatke (SRM) • Modifikacije QuEChERS tehnike • QuPPe (za jako polarne pesticide) • Pojedinačne metode koje se temelje na GC i GC-MS
tehnikama za određivanje ditiokarbamata, fumiganata i spojeva koji sadržavaju brom
• AAS – za spojeve koji sadržavaju bakar
13
Validacija metoda - zahtjevi SANCO/12571/2013 Analytical Quality Control and Method
Validation Procedures for Pesticide Residues Analysis in Food and Feed
14
Parametar Kriterij
Linearnost Rezidualne vrijednosti < ± 20 %
Utjecaj matrice Procjena utjecaja matrice u %
Granica kvantifikacije ≤ MDK
Specifičnost < 30 %
Istinitost (bias) 70 – 120 %
Preciznost (RSDr) ≤ 20 %
Preciznost (RSDwR) ≤ 20 %
Robusnost Procjenjuje se iz podataka kontrole kvalitete iz iskorištenja i preciznosti
Validacija metoda - matrice
15
Grupa proizvoda Kategorija proizvoda Vrsta proizvoda Kategorija proizvoda
1. Visoki sadržaj vode jabučasto vode 4b. Visoki sadržaj ulja i srednji
sadržaj vode
plodovi uljarica i proizvodi
koštidavo vode 5. Visoki sadržaj škroba i/ili
proteina i nizak sadržaj vode i
masti
suhe mahunarke
ostalo vode žitarice i proizvodi
lukovičasto povrde 6. Komplicirane matrice čajevi, začini, kava
plodovito povrde / tikvenjače 7. Meso i plodovi mora crveno meso
kupusnjače bijelo meso
lisnato povrde i svježe začinsko bilje iznutrice
stabljičasto povrde riba
krmno bilje školjkaši
svježe mahunarke 8. Mlijeko i mliječni proizvodi mlijeko
lišde korjenastog i gomoljastog povrda sir
svježe gljive mliječni proizvodi
gomoljasto povrde 9. Jaja jaja
2. Visoki sadržaj kiselina i vode citrusi 10. Masti animalnog podrijetla mast iz mesa
sitno i bobičasto vode mliječna mast
ostalo riblje ulje
3. Visoki sadržaj šedera i niski
sadržaj vode
med, suho vode
4a. Visoki sadržaj ulja i niski
sadržaj vode
orašasti plodovi
sjemenke uljarica
paste od orašastih plodova i sjemenki
ulja
Naša iskustva Metoda za određivanje organoklornih pesticida
• SPE; GC-ECD, GC-FPD
• 18 analita
• organoklorni i organofosforni pesticidi
Multirezidualna metoda
• QuEChERS; LC-MS/MS i GC-MSMS
• 400 + analita
• organofosforni, organoklorni, piretroidi, karbamati, tiokarbamati, derivati ureje, benzimidazoli, strobilurini, neonikotinoidi, dinitroanilini...
16
Naša iskustva
Metode za pojedinačne pesticide:
• Ditiokarbamati kao CS2 (mankozeb, propineb, maneb, tiram, metiram itd.) – HSS-GC-ECD
• Glifosat, fosetil, perklorat – QuPPe, LC-MS/MS
• Spojevi bakra kao Cu - AAS
17
Kromatogram (275 pesticida – 10 minuta)
18
19
0,0
20,0
40,0
60,0
80,0
100,0
120,0
140,0
Ace
tam
ipri
dA
ldik
arb
Azi
nfo
s et
ilA
zoks
istr
ob
inB
ite
rtan
ol
Bo
skal
idB
up
irim
atB
up
rofe
zin
Cija
naz
inC
ipro
din
ilC
ipro
kon
azo
lD
ifen
oko
naz
ol
Dik
roto
fos
Dim
eto
atD
imet
om
orf
EPN
Epo
ksik
on
azo
lEt
ion
Eto
pro
fos
Fen
amif
os
Fen
arim
ol
Fen
azak
vin
Fen
bu
kon
azo
lFe
nb
uta
tin
oks
idFe
nh
eks
amid
Fen
pro
pim
orf
Fen
toat
Flu
azif
op
-P b
uti
lFl
ufe
no
ksu
ron
Flu
sila
zol
Flu
tria
fol
Fosm
et
Hek
sako
naz
ol
Hek
siti
azo
ksIm
azal
ilIm
idac
lop
rid
Ind
oks
akar
bIp
rova
likar
bK
arb
aril
Kar
be
nd
azim
Kar
bo
fura
nK
lofe
nte
zin
Klo
rfen
vin
fos
Klo
rpir
ifo
sK
lorp
irif
os
met
il o
kso
nK
rezo
ksim
me
til
Kvi
no
ksif
enLi
nu
ron
Me
pan
ipir
imM
eta
laks
ilM
eti
dat
ion
Me
tio
karb
Me
toks
ifen
ozi
dM
eto
mil
Mik
lob
uta
nil
Mo
no
kro
tofo
sO
ksam
ilP
aklo
bu
traz
ol
Pe
nd
imet
alin
Pe
nko
naz
ol
Pir
azo
fos
Pir
idab
enP
irim
etan
ilP
irim
ifo
s m
eti
lP
irip
roks
ife
nP
rofe
no
fos
Pro
klo
raz
Pro
pik
on
azo
lP
rop
izam
idSp
ino
sin
ASp
ino
sin
DSp
iro
dik
lofe
nSp
iro
ksam
inTe
bu
fen
pir
adTe
trak
on
azo
lTi
abe
nd
azo
lTi
aklo
pri
dTi
ame
toks
amTi
od
ikar
bTr
iaid
ime
no
lTr
iflo
ksis
tro
bin
Trit
iko
naz
ol
Iskorištenje (%)
20
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
Ace
tam
ipri
dA
ldik
arb
Azi
nfo
s et
ilA
zoks
istr
ob
inB
ite
rtan
ol
Bo
skal
idB
up
irim
atB
up
rofe
zin
Cija
naz
inC
ipro
din
ilC
ipro
kon
azo
lD
ifen
oko
naz
ol
Dik
roto
fos
Dim
eto
atD
imet
om
orf
EPN
Epo
ksik
on
azo
lEt
ion
Eto
pro
fos
Fen
amif
os
Fen
arim
ol
Fen
azak
vin
Fen
bu
kon
azo
lFe
nb
uta
tin
oks
idFe
nh
eks
amid
Fen
pro
pim
orf
Fen
toat
Flu
azif
op
-P b
uti
lFl
ufe
no
ksu
ron
Flu
sila
zol
Flu
tria
fol
Fosm
et
Hek
sako
naz
ol
Hek
siti
azo
ksIm
azal
ilIm
idac
lop
rid
Ind
oks
akar
bIp
rova
likar
bK
arb
aril
Kar
be
nd
azim
Kar
bo
fura
nK
lofe
nte
zin
Klo
rfen
vin
fos
Klo
rpir
ifo
sK
lorp
irif
os
met
il o
kso
nK
rezo
ksim
me
til
Kvi
no
ksif
enLi
nu
ron
Me
pan
ipir
imM
eta
laks
ilM
eti
dat
ion
Me
tio
karb
Me
toks
ifen
ozi
dM
eto
mil
Mik
lob
uta
nil
Mo
no
kro
tofo
sO
ksam
ilP
aklo
bu
traz
ol
Pe
nd
imet
alin
Pe
nko
naz
ol
Pir
azo
fos
Pir
idab
enP
irim
etan
ilP
irim
ifo
s m
eti
lP
irip
roks
ife
nP
rofe
no
fos
Pro
klo
raz
Pro
pik
on
azo
lP
rop
izam
idSp
ino
sin
ASp
ino
sin
DSp
iro
dik
lofe
nSp
iro
ksam
inTe
bu
fen
pir
adTe
trak
on
azo
lTi
abe
nd
azo
lTi
aklo
pri
dTi
ame
toks
amTi
od
ikar
bTr
iaid
ime
no
lTr
iflo
ksis
tro
bin
Trit
iko
naz
ol
RSD (%)
Međulaboratorijske usporebe
• FAPAS
• EUPT-FV14
• EUPT-FV15
• EUPT-FV16
• EUPT-CF8
• EUPT-FV-T02
21
Ocjena sukladnosti
Sadržaj pesticida
Definicija ostatka
Kombinirana i prerađena hrana
Mjerna nesigurnost
Organska hrana
22
Legislativa – Uredba (EZ) br. 396/2005 Europskog parlamenta i
Vijeda od 23. veljače 2005. o maksimalnim razinama ostataka pesticida u ili na hrani i hrani za životinje biljnog i životinjskog podrijetla
– Uredba EU br. 1243/2008 od 12. prosinca 2008. o izmjenama priloga III. i VI. Direktivi 2006/141/EZ o zahtjevima glede sastojaka određene hrane za dojenčad i malu djecu
– Uredba Komisije (EZ) br. 889/2008 od 5.rujna 2008. o podrobnim pravilima za provedbu Uredbe Vijeda (EZ) br. 834/2007 o ekološkoj proizvodnji i označavanju ekoloških proizvoda u pogledu ekološke proizvodnje, označavanja i stručne kontrole
23
Definicija ostatka Aktivni spoj + metaboliti / razgradni produkti Acetamiprid = acetamiprid Spinosad = spinosin A + spinosin D Dimetoat = dimetoat + ometoat izražen kao
dimetoat Kletodim = zbroj setoksidima i kletodima uključujudi
razgradne produkte izražene kao setoksidim
24
Kombinirana i prerađena hrana PRIMJER:
Proizvod koji sadrži:
1 % lješnjaka
60 % brašna
ostalo
Sadržaj pesticida u sastojcima :
brašno: pirimifos metil 1,2 mg/kg MDK = 5
lješnjak: pirimifos metil < 0,01 mg/kg MDK = 0,05
ostalo: pirimifos metil < 0,01 mg/kg
Sadržaj pesticida u gotovom proizvodu: 0,7 mg/kg
MDK = ???
25
Mjerna nesigurnost
SANCO/12571/2013: U = 50 % (k =2)
PRIMJER:
Sadržaj klorpirifosa u marelicama (MDK = 0,05 mg/kg):
w = (0,056 ± 0,028) mg/kg; k=2
SLUŽBENA KONTROLA: uzorak je nesukladan, ali nije automatski zdravstveno neispravan; mjera upozorenja uvozniku, pojačano uzorkovanje
UZORAK IZ DRUGOG IZVORA: uzorak je nesukladan, ne smije se stavljati na tržište
26
Organska hrana - legislativa
• Uredba Komisije (EZ) br. 889/2008 od 5.rujna 2008. o podrobnim pravilima za provedbu Uredbe Vijeda (EZ) br. 834/2007 o ekološkoj proizvodnji i označavanju ekoloških proizvoda u pogledu ekološke proizvodnje, označavanja i stručne kontrole
• Guideline for Pesticide Residue Contamination for International Trade in Organic, 2012, IFOAM EU GROUP
27
Organska hrana - sukladnost
• granična vrijednost: 0,01 mg/kg za sve pesticide osim onih koji su dozvoljeni u organskoj proizvodnji
• mjerna nesigurnost se uzima u obzir ako se nađu ostaci do dva pesticida
• prekoračenje granične vrijednosti znači sumnju da proizvodnja nije u skladu s pravilima organske proizvodnje
28
29
Recommended