PENDAHULUAN - · PDF fileDunia Mikroba, Metode dalam ... Isolasi Sel Tunggal (dgn...

PENDAHULUAN

Sejarah Mikrobiologi, TinjauanDunia Mikroba, Metode dalamMikrobiologi

Morfologi dan Struktur Halus Bakteri

Kultivasi, reproduksi dan Pertumbuhan Bakteri

PENDAHULUAN

Metabolisme mikroorganismeGenetika BakteriKeragaman BakteriKeragaman EukariotUTS

Mikrobiologi : Ilmu yang mempelajari Mikroba (JasadRenik atau makhluk berukuranMikro).

Ukuran : µm ( 1/1000 mm)

I. Sejarah Mikrobiologi, Tinjauan Dunia Mikroba, Metode dalam Mikrobiologi

Sejarah Linnaeus (1735), klasifikasi 2 dunia : Dunia

tumbuhan dan Dunia Hewan. Haeckel (1866), Klasifikasi 3 dunia : tumbuhan,

binatang dan protista (bakteri, alga, cendawan, protozoa)

Whittaker (1969), Sistem 5 dunia :dunia tumbuhan, dunia hewan, dunia cendawan (khamir, kapang), dunia dunia protista (ganggang mikroskopik dan protozoa), dunia monera (bakteri termasuk sianobakter)

Woesse (1990), Klasifikasi 3 domain : Bacteria, Archaea, Eucarya.

Antony van Leeuwehoek (1633 – 1723)

⇒ Mikroskop → mikroorganisme Animalculus

Generasi Spontan → Kehidupan berasal dari bahan mati yang dihancurkan.

→ ABIOGENESIS

ABIO (= tak hidup) + GENESISI (= asal)

X

BIOGENESIS

Lazaro Spallanzani (1729 – 1799)

→ Membuat kaldu daging dan ditutup rapat.

→Teori Abiogenesis Gagal.

Fransisco Redi (1665),Ruang Vacum Bebas Kontaminan.

John Tyndall (1870-an) → Kotak bebas debu dengan penutup kapas → tetap steril.

Louis Pasteur (1822 – 1895)

Labu leher angsa berisi kaldu yang tetap steril.

Pasteurisasi : 620C / ½ jam.

Serge Winograosky (1856 – 1953)• Mikrobiologi tanah → M.O penyubur tanah

MikrobaBermanfaat

Merugikan

DUNIA MIKROB

Mikrob → berbagai jasad renik kebanyakan bersel satu (UNISELULAR).

Cirinya: - Mirip tumbuhan, mirip Hewan, Seperti hewan dan Tumbuhan

Jasad Renik = PROTISTA :

⇒ Prokariot & Eukariot

→ Didasarkan pada ada tidaknya membran inti sel.

Haeckel : - Protista tingkat rendah (P) Bakteri

- Protista tingkat tinggi (E) Ganggang, Protozoa, Cendawan.

Whittaker (1969), Sistem 5 dunia : dunia tumbuhan, dunia hewan, dunia cendawan (khamir, kapang), dunia protista (ganggang mikroskopik dan

protozoa), dunia monera (bakteri termasuk

sianobakter)

Ciri-Ciri Sel Prokariot (P)1. Tidak memiliki membran inti sel.2. Pembagian nukleus → Pembelahan (proses aseksual sederhana)3. Dinding sel mengandung molekul kompleks

→MUKOPEPTIDA → sel jadi kaku. Protista Prokariotik :

- Bakteri- Sianobakteri (dulu: Blue Green Algae)

Protista Eukariotik :- Fungi (Cendawan)- Protozoa- Algae (Ganggang)

VIRUS → Aseluler, parasit obligat, DNA/RNA terbungkus protein

METODE ANALISA MIKROBIOLOGI

Prosedur untuk menelaah Mikroba (jasad renik)⇒ Metode mikroskopik.MIKROSKOP:

1. Medan Terang2. Medan Gelap3. Fase kontras4. Fluoresen5. Elektron → PERBESARAN lebih dari 250.000X

Perbesaran Objek sampai 1000 – 2000X

Yang sering dipakai di laboratorium mikroskop Medan Terang

Contoh: - Perbesaran objektif 40, Okuler 10

→ Total perbesaran 40 X 10 = 400X

Daya Pisah Mikroskop:Kemampuan untuk menghasilkan bayangan berlainan dari 2 titik yang berdekatan

Daya Pisah =Panjang Gelombang Cahaya (λ)

NA Objektif + NA Kondensor

Contoh: Gelombang cahaya yang dipakai : 0.55 µm. NA (Numerical Aperture = Tingkat Numeris) Objektif = 1.25 (perbesaran 100X), NA Kondensor = 0.9

0.55 µmDaya Pisah = = 0.255 µm

1.25 + 0.9Artinya : Jika 2 titik terpisahkan oleh jarak kurang dari 0.255 µm, maka akan

tampak seperti satu titik.

Pemeriksaan Preparat dengan Mikroskop

A. Pembuatan Preparat1. Lekapan Basah2. Tetes gantung

B. Pewarnaan Bakteri1. Pewarnaan Sederhana ( satu macam pewarna)2. Pewarnaan Diferensial : Pewarnaan Gram,

Tahan Asam, Giemsa, Spora, Kapsul, Flagela, inti / bahan inti.

3. Pewarnaan Negatif (pewarna asam : nigrosin)

Metode Isolasi Biakan Murni (Pure Culture)1. Metode Cawan Gores2. Metode Cawan Tebar3. Metode Cawan Tuang4. Metode Biakan Penyuburan5. Isolasi Sel Tunggal (dgn Manipulator Mikro)

Pewarnaan Gram

Larutan dan UrutanPenggunaannya

Reaksi & Tampang Bakteri

Gram ⊕ Gram Θ

1. Ungu Kristal (UK)Crioxal Violet

Sel berwarna ungu Sel berwarna ungu

2. Larutan Yodium (Y) Kompleks UK-Yterbentuk di dalamsel; sel tetapberwarna ungu.

Kompleks UK-Yterbentuk di dalam sel;sel tetap berwarna ungu.

3. Alkohol Dinding sel mengalamidehidrasi, pori-porimenciut; daya rembesdinding sel & membranmenurun, UK-Y takdpt keluar dari sel; seltetap ungu

Lipid terekstraksi dari dinding sel, pori-pori mengembang, kompleks UK-Y keluar dari sel; sel menjadi tak berwarna.

4. Safranin Sel tak terpengaruhi, tetap ungu

Sel menyerap zat pewarna ini, menjadi merah

Pewarnaan Gram

Gram NegatifGram Positif

Metode Pencirian Mikroorganisme (Mikrob) “

1. Morfologis2. Nutrisional3. Kultural4. Susunan Kimiawi5. Sunsunan Antigen6. Patogenik7. Genetik

Pencirian Mikroorganisme

Uji O/F (Oksidatif/ Fermentatif) Uji Motilitas Uji Katalase Uji Oksidase Uji Gelatin Hidrolisis kasein

Pencirian identifikasi mikroba didasarkan Pada prosedur atau Metode Tertentu : Cowan (1974) atau Bullock (1971)

Uji O/F

Digunakan untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memecah karbohidrat (glukosa) dalamsuasana aerobic (oksidatif) atau anaerobic (fermentative).

Uji MotilitasMedia SIM (Sulfida IndolMotility) merupakan salah satumedia semi solid yang digunakanuntuk pengujian fisio-metabolisme suatu bakteri yakniuntuk mengetahui kemampuanmembentuk indol (produk hasildegradasi protein), ikatansulfida dan motilitas ataupergerakan bakteri.

Uji Oksidase

Pada awal oksidasi suatu substrat oleh jasad renik, hidrogendipindahkan dari substrat itu oleh enzim khusus yaitudehidrogenase. P-Aminodimetyl aniline oxalate 1%

Uji Katalase

Uji ini dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya enzimkatalase. Enzim tersebut merupakan katalisator dalampenguraian hydrogen-peroksida (H202) untukmenghasilkan oksigen dan air.

Terimakasih........