View
244
Download
1
Category
Preview:
Citation preview
PENGARUH VARIASI PENGECILAN UKURAN DAN LAMA FERMENTASI
TERHADAP KADAR ASAM SIANIDA (HCN) DAN SENYAWA FENOLIK
PADA TEMPE KORO BABI (Vicia faba)
Skripsi
Untuk memenuhi sebagian persyaratan guna memperoleh derajat Sarjana S1 Teknologi Hasil Pertanian
di Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta
Jurusan/Program Studi Teknologi Hasil Pertanian
OLEH: CHRISTIANA SEPTI INDRIYANI
H 0605047
FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA 2010
i
ii
PENGARUH VARIASI PENGECILAN UKURAN DAN LAMA FERMENTASI
TERHADAP KADAR ASAM SIANIDA (HCN) DAN SENYAWA FENOLIK
PADA TEMPE KORO BABI (Vicia faba)
Yang dipersiapkan dan disusun oleh
Christiana Septi Indriyani
H 0605047
Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji
Pada tanggal : 22 Januari 2010
Dan dinyatakan telah memenuhi syarat
Susunan Tim Penguji
Ketua
Prof. Ir. Sri Handajani, MS, Ph.D NIP. 1947 0729 197612 2 001
Anggota I
Dian Rachmawanti A., S. TP, MP NIP. 1979 0803 200604 2 001
Anggota II
Rohula Utami, STP., MP NIP.1981 0306 200801 2 008
Surakarta, Januari 2010 Mengetahui,
Universitas Sebelas Maret, Fakultas Pertanian
Dekan
Prof. Dr. Ir. H. Suntoro, MS NIP. 1955 1217 198203 1 003
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala limpahan rahmat
dan hidayah-Nya, sehingga pada akhirnya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul “Pengaruh Variasi Pengecilan Ukuran dan Lama Fermentasi Terhadap
Kadar Asam Sianida ( HCN) Dan Senyawa Fenolik Pada Tempe Koro Babi (Vicia
faba)”. Skripsi ini merupakan bagian dari penelitian berjudul ”Kajian Kandungan
Protein, Senyawa Anti Nutrisi, Aktivitas Antioksidan, dan Sifat Sensoris Tempe
Koro Babi (Vicia faba) dengan Variasi Pengecilan Ukuran.” yang dilakukan oleh
Dian Rachmawanti A., S.TP, MP, Prof. Ir. Sri Handajani, M.S., PhD. dan Rohula
Utami, STP., MP.
Skripsi ini disusun dalam rangka untuk melengkapi persyaratan guna
memperoleh gelar Sarjana Teknologi Pertanian pada Program Studi Teknologi Hasil
Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Dalam penyusunan skripsi ini penulis telah banyak mendapat bantuan,
bimbingan, dan dorongan dari berbagai pihak. Sehubungan dengan hal tersebut, maka
penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Ibu Prof. Ir. Sri Handayani, MS, PhD. selaku Pembimbing Utama yang telah
meluangkan waktu, tenaga, dan pikiran untuk memberikan bimbingan, petunjuk,
serta dorongan yang sangat berarti bagi penyusunan skripsi ini.
2. Ibu Dian Rachmawati A, S.TP, MP selaku Pembimbing Pendamping yang telah
meluangkan waktu, tenaga, dan pikiran untuk memberikan bimbingan, petunjuk,
serta dorongan yang sangat berarti bagi penyusunan skripsi ini.
3. Ibu Rohula Utami S.TP., MP. selaku Penguji yang telah memberikan bimbingan
dan masukan yang sangat berarti bagi penyusunan skripsi ini.
4. Bapak Godras Jati Manuhara S.TP. sebagai pembimbing akademik yang telah
mengarahkan saya selama menjadi mahasiswa.
5. Semua Teknisi Laboratorium dan Staf Administrasi Program Studi Teknologi
Hasil Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret Surakarta yang
telah memberi masukan dan saran bagi penyusunan skripsi ini.
iv
6. Keluarga tercinta, Bapak, Ibu, kakak dan adik-adik yang merupakan sumber
inspirasi sekaligus pemberi dorongan dan motivasi atas selesainya skripsi ini.
7. Teman-temanku semua di Teknologi Hasil Pertanian 2005 atas waktu dan
kerjasama selama di bangku kuliah serta semua kenangan bersama kalian semoga
akan selalu abadi.
8. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu atas bantuannya baik moril
maupun materiil sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
Dalam penulisan skripsi ini, penulis menyadari masih banyak kekurangan.
Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun
dari semua pihak untuk lebih menyempurnakan isi dari skripsi ini sehingga dapat
lebih berguna dan membantu bagi pihak-pihak yang memerlukannya.
Surakarta, 2010
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman HALAMAN JUDUL......................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN........................................................... ii
KATA PENGANTAR ...................................................................... iii
DAFTAR ISI ..................................................................................... v
DAFTAR TABEL ............................................................................. vii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................... ix
RINGKASAN ................................................................................... x
SUMMARY ...................................................................................... xi
BAB I PENDAHULUAN ............................................................. 1
A. Latar Belakang ............................................................ 1
B. Perumusan Masalah .................................................... 3
C. Tujuan ......................................................................... 4
D. Manfaat Penelitian ...................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................ 5
A. Tinjauan Pustaka ......................................................... 5
1. Koro Babi .............................................................. 5
2. Tempe..................................................................... 7
3. HCN (Asam Sianida) ............................................. 10
4. Senyawa Fenol ....................................................... 12
5. Pengecilan Ukuran ................................................. 14
B. Kerangka Berpikir ........................................................ 15
C. Hipotesis....................................................................... 15
BAB III METODE PENELITIAN .................................................. 16
A. Tempat dan Waktu Penelitian ...................................... 16
B. Bahan dan Alat ............................................................ 16
1. Bahan ..................................................................... 16
2. Alat ......................................................................... 16
vi
C. Perancangan Percobaan ................................................ 16
D. Parameter Pengamatan ................................................. 17
E. Tata Laksana Penelitian ............................................... 17
F. Rancangan Penelitian .................................................. 20
G. Analisis Data ............................................................... 23
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN …………………………. 24
1. HCN ............................................................................ 24
2. Total Fenol ................................................................... 27
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ......................................... 31
A. Kesimpulan .................................................................. 31
B. Saran ............................................................................ 31
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................... 32
LAMPIRAN ..................................................................................... 36
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 3.1 Rancangan Percobaan ................................................................ 17
Tabel 4.1 Kadar Asam Sianida (mg/g db) Tempe Koro Babi dengan Berbagai
Perlakuan ..................................................................................... 24
Tabel 4.2 Kadar Total Fenol (%) Tempe Koro Babi dengan Berbagai
Perlakuan ..................................................................................... 28
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Tanaman koro babi ................................................................. 6
Gambar 2.2 Variasi Ukuran Biji Koro Babi ................................................ 6
Gambar 2.3 Struktur Asam Sianida ........................................................... 11
Gambar 2.4 Kerangka Berpikir ........................................................... 15
Gambar 3.1 Skema Pembuatan Tempe Koro Babi..................................... 19
Gambar 3.2. Skema Rancangan Penelitian................................................. 20
Gambar 3.3. Skema Analisis Asam Sianida................................................. 21
Gambar 3.4. Skema Analisis Fenolik Metode Folin Ciocalteu.................... 22
Gambar 4.1. Kadar HCN selama Fermentasi Tempe Koro Babi.................. 25
Gambar 4.2. Kadar Total Fenol selama Fermentasi Tempe Koro Babi....... 29
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Metode Analisis. .................................................................. 36
Lampiran 2. Data Analisis Asam Sianida ................................................ 38
Lampiran 3. Data Analisis Total Fenol .................................................... 40
Lampiran 4. Foto ..................................................................................... 43
x
RINGKASAN
Christiana Septi Indriyani . H0605047. Pengaruh Variasi Pengecilan Ukuran dan Lama Fermentasi terhadap Kadar Asam Sianida ( HCN) dan Senyawa Fenolik pada Tempe Koro Babi (Vicia Faba). Dibawah Bimbingan Prof. Ir. Sri Handajani, MS, Ph.D. dan Dian Rachmawanti, S.TP, MP. Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Tempe adalah produk fermentasi yang sangat dikenal oleh masyarakat Indonesia dan telah dikenal masyarakat barat. Tempe dapat dibuat dari berbagai bahan, tetapi yang umum dikenal ialah tempe yang dibuat dari kedelai. Semakin lama harga kedelai semakin tinggi, sehingga diharapkan pemanfaatan leguminose lokal dapat mensubtitusi kebutuhan kedelai. Koro babi (Vicia faba) merupakan salah satu leguminose lokal yang dapat dimanfaatkan. namun koro babi mengandung fenol sebagai antioksidan dan asam sianida yang bersifat racun.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pengecilan ukuran biji koro babi (Vicia faba) dan lama fermentasi terhadap kadar asam sianida dan kadar total fenol pada tempe koro babi (Vicia faba). Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial yang terdiri dari dua faktor yaitu variasi pengecilan ukuran (cacah dan rajang) serta variasi lama fermentasi (0,30,36,42 dan 48 jam).
Hasil penelitian menunjukkan kadar asam sianida pada fermentasi 0, 30, 36, 42, dan 48 jam biji koro babi cacah berturut-turut adalah 0,060 mg/g; 0,048 mg/g; 0,036 mg/g; 0 mg/g; dan 0 mg/g, sedangkan untuk biji koro babi rajang adalah 0,072 mg/g; 0,036 mg/g; 0,036 mg/g; 0 mg/g; dan 0 mg/g.
Kadar total fenol biji koro babi cacah berturut-turut adalah 0,014750%, 0,149900%, 0,201825%, 0,170400%, dan 0,234400%, sedangkan untuk biji koro babi rajang adalah 0,014750%, 0,152650%, 0,178300% 0,162750% dan 0,192620%.
Berdasar hasil hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa semakin lama fermentasi tempe koro babi maka kadar asam sianida semakin rendah dan kadar total fenol semakin tinggi. Semakin kecil ukuran biji tempe koro babi, maka kadar asam sianida semakin rendah dan kadar total fenolnya semakin tinggi. Kadar HCN terendah adalah pada tempe dengan fermentasi 42 dan 48 jam, perlakuan cacah maupun rajang yaitu mencapai 0 mg/g. Kadar total fenol tertinggi terdapat pada tempe koro babi cacah dengan lama fermentasi 48 jam yaitu sebesar 0,234400%.
Kata Kunci : Koro babi, Lama Fermentasi, Pengecilan ukuran, Kadar Asam Sianida,
Kadar Total Fenol. SUMMARY
Christiana Septi Indriyani. H0605047. Influence of Size Reduction Variation and Fermentation Time towards Cyanide Acid Contents (HCN) and Phenolic Compound in Faba Beans (Vicia faba) Tempeh. Under the supervision of Prof. Ir. Sri Handajani, MS, PhD; and Dian Rachmawanti A., S.TP, MP. Agriculture Faculty Sebelas Maret University, Surakarta.
Tempeh is fermentation product wich very known by Indonesian society and has been familiar by various western society. Tempeh can be made from various ingredient, but usually tempeh is made from soy bean. Due to of increasing the soy
xi
bean price, has been found another leguminose to substitute that soy bean . One of the legume was faba bean, leguminose, as general contain phenol as antioxidant and cyanide acid as anti-nutrient and toxic material.
The aims of this research is to know the effect of size reduction variation and fermentation time variation of faba beans tempeh production to cyanide acid and total phenol contents. This research use factorial experiment that arranged in Randomized Complete Design (RCD) with two experimental factors including size reduction (chopped and sliced) and time of fermentation (0,30,36,42, and 48 hour).
The result shows cyanide acid contents in fermentation 0, 30, 36, 42, and 48 hour on faba beans tempeh of chopped seeds are 0,060 mg/g; 0,048 mg/g; 0,036 mg/g; 0 mg/g; and 0 mg/g respectively, then on faba beans tempeh of sliced seeds are 0,072 mg/g; 0,036 mg/g; 0,036 mg/g; 0 mg/g; and 0 mg/g ,respectively.
Contens of total phenol on faba beans tempeh of chopped seeds are 0,014750%, 0,149900% 0,201825%, 0,170400% and 0,234400%, then on faba beans tempeh of sliced seeds are 0,014750%; 0,152650%; 0,178300%; 0,162750%; and 0,192620%, respectively.
Fermentation time and size of faba beans seeds affect on cyanide acid and total phenol contents of faba beans tempeh. The longer fermentation time of faba beans tempeh caused lower cyanide acid content and higher total phenol content. The smaller size of faba beans seeds on tempeh caused lower cyanide acid content and higher total phenol content. The lowest cyanide acid content, contained in faba beans tempeh of chopped and sliced seeds with 42 and 48 hours fermentation reach 0 mg/g. The highest totap phenol content, contained in chopped faba beans tempeh with 48 hours fermentation reach 0,234400%.
Key Word: Faba Beans, Fermentation Time, Size Reduction, Cyanide Acid Contents,
Total Phenol Contents.
xii
PENGARUH VARIASI PENGECILAN UKURAN DAN LAMA FERMENTASI TERHADAP KADAR ASAM SIANIDA (HCN) DAN SENYAWA FENOLIK
PADA TEMPE KORO BABI (Vicia faba)
Christiana Septi Indriyani1)
Prof. Ir. Sri Handayani, MS., PhD2) Dian Rachmawanti, STP., MP,3)
ABSTRAK
Mengetahui pengaruh pengecilan ukuran biji koro babi (Vicia faba) dan lama fermentasi terhadap kadar asam sianida dan kadar total fenol pada pembuatan tempe koro babi (Vicia faba). Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial yang terdiri dari dua faktor yaitu variasi pengecilan ukuran (2 macam) serta variasi lama fermentasi (5 macam).
Hasil penelitian menunjukkan selama 48 jam waktu fermentasi untuk kedua jenis ukuran biji koro babi, kadar asam sianida terendah dan kadar total fenol tertinggi didapatkan pada tempe koro babi biji cacah. Pada fermentasi 42 dan 48 jam untuk kedua jenis ukuran biji diperoleh asam sianida terendah selama fermentasi yaitu mencapai 0 mg/g. Kadar total fenol tertinggi selama fermentasi diperoleh pada fermentasi 48 jam yaitu 0,234400 % untuk biji koro babi cacah dan 0,192620% untuk biji koro babi rajang.
Berdasarkan hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa lama fermentasi dan ukuran biji koro babi berpengaruh pada kadar asam sianida dan kadar total fenol pada tempe koro babi. Semakin lama fermentasi tempe koro benguk maka kadar asam sianida semakin rendah dan kadar total fenol semakin tinggi. Semakin kecil ukuran biji tempe koro benguk, maka kadar asam sianida semakin rendah dan kadar total fenolnya semakin tinggi. Tempe koro babi biji cacah fermentasi 48 jam memiliki kadar asam sianida terendah dan kadar total fenol tertinggi dari semua sampel dengan variasi lama fermentasi dan pengecilan ukuran.
Kata kunci: Koro Babi, Kadar Asam Sianida, Kadar Total Fenol, Lama Fermentasi, Pengecilan Ukuran 1
1) Mahasiswa Jurusan/Program Studi Teknologi Hasil Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta
dengan NIM H 0605047 2) Pembimbing Utama
3) Pembimbing Pendamping
xiii
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Tempe merupakan makanan khas indonesia , selain mengandung protein
nabati yang tinggi , juga harganya pun sangat terjangkau , murah dan
memasyarakat. Tempe merupakan salah satu sumber protein nabati yang sering
dikonsumsi dan pada umumnya berbahan baku kedelai. Bahan baku tempe selama
ini masih diimpor dari Amerika, rata-rata 40 % karena produksi lokal terus
mengalami penurunan (5,2%)(Anonim, 2008) dan tidak dapat memenuhi
kebutuhan kedelai yang terus naik (1,8 % tiap tahun) (Pitojo, 2003) sementara
tingkat impor kedelai terus meningkat. Oleh karena itu perlu alternatif bahan baku
tempe sehingga kebutuhan masyarakat akan sumber protein dapat terus terpenuhi.
Di daerah-daerah tertentu di Indonesia telah ditemukan beberapa masyarakat yang
menggunakan kacang-kacangan lain yang digunakan sebagai bahan baku tempe.
Kacang-kacangan telah lama dikenal sebagai sumber protein yang saling
melengkapi dengan biji-bijian, seperti beras dan gandum. Komoditi ini juga
ternyata potensial sebagai sumber zat gizi lain selain protein, yaitu mineral,
vitamin B, karbohidrat kompleks dan serat makanan. Di samping diolah secara
tradisional dengan direbus, dikukus, dan disayur, sebenarnya potensi
penggunaannya sangat luas untuk menghasilkan produk baru.
Banyak ragam kacang-kacangan yang berada di Indonesia, salah satunya
adalah koro babi (Vicia faba). Koro babi (Vicia faba) merupakan jenis kacang –
kacangan yang potensial. Jika dibandingkan dengan kedelai, koro babi (Vicia
faba) mempunyai kandungan protein dan lemak yang sedikit lebih rendah,
sedangkan kandungan karbohidratnya lebih tinggi. Koro babi (Vicia faba)
merupakan sumber riboflavin, niasin, fosfor, dan potasium. Selain itu juga
merupakan sumber folat, tembaga, dan mangan yang sangat baik. Akan tetapi
koro babi (Vicia faba) mempunyai biji yang keras dan juga mengandung senyawa
anti gizi seperti pada umumnya kacang – kacangan yang lain.
Koro babi (Vicia Faba) merupakan salah satu jenis Leguminoceae yang
dapat digunakan sebagai salah satu alternatif bahan baku sumber protein non-
1
xiv
kedelai yang dapat diolah menjadi tempe. Koro babi memiliki kandungan protein
yang cukup tinggi (22%) (Anonim, 2009). Selain itu koro babi diproduksi lokal
sehingga tidak terpengaruh oleh biaya masuk impor.
Senyawa – senyawa anti gizi yang terdapat dalam kacang-kacangan meliputi
asam fitat, tanin, protease inhibitor (tripsin dan chymotrypsin), α-amylase
inhibitor, HCN, serta lektin. Selain itu kecernaan pati dan proteinnya dalam tubuh
juga rendah dikarenakan keberadaan senyawa anti gizi tersebut di atas. Hal inilah
yang menyebabkan pemanfaatan kacang – kacangan pada umumnya masih
terbatas.
Asam sianida (HCN) merupakan senyawa racun yang dapat menggangggu
kesehatan. Keberadaan senyawa ini dapat menimbulkan rasa pahit. Senyawa ini
banyak dijumpai pada kacang koro. Keberadaan senyawa antigizi ini dapat
mengurangi ketersediaan nutrisi dalam tubuh (Anonim, 2009).
HCN (Asam sianida) dikenal dengan nama lain racun biru. Tubuh manusia
umumnya tidak tahan terhadap HCN pada dosis 0,06 gram. Bila mengonsumsi
HCN pada dosis lethal (mematikan) itu, biasanya manusia sudah bisa mati.
Namun, ada pula yang masih bertahan hidup dan disembuhkan walau telah
mengonsumsi HCN sebanyak tiga kali lipat dari dosis lethal itu (Anonim, 2006).
Fermentasi sederhana, seperti pada pembuatan tempe kedelai, diduga dapat
menjadi salah satu alternatif pemanfaatan koro babi (Vicia faba). Menurut
Kasmidjo (1990), fermentasi dapat mengurangi senyawa – senyawa anti gizi pada
serta dapat meningkatkan kecernaan protein dan senyawa gizi lainnya, karena
pada proses fermentasi terjadi perombakan senyawa makromolekul menjadi
komponen – komponen yang lebih sederhana. Dalam Handajani (1996), pada
proses penempean koro benguk, fermentasi dapat menurunkan kandungan HCN
biji koro benguk. Diduga proses fermentasi dapat menurunkan kadar HCN karena
aktifitas kapang yang menghasilkan panas hingga 40°C, dan juga menaikkan
kadar air selama fermentasi yang mempengaruhi sifat HCN yang larut air dan
mempunyai titik didih 26,5°C.
Sebagian besar senyawa organik bahan alam adalah senyawa-senyawa
aromatik. Senyawa aromatik ini mengandung cincin karboaromatik yaitu cincin
xv
aromatik yang hanya terdiri dari atom karbon seperti benzen, naftalen dan
antrasen. Cincin karboaromatik ini biasanya tersubtitusi oleh satu atau lebih gugus
hidroksil atau gugus lainnya yang ekivalen ditinjau dari segi biogenetiknya. Oleh
karena itu senyawa bahan alam aromatik ini sering disebut sebagai senyawa-
senyawa fenol walaupun sebagian di antaranya bersifat netral karena tidak
mengandung gugus fenol dalam keadaan bebas (Sovia, 2006).
Senyawa fenol dalam tempe kedelai dan seperti pada leguminosa lain, yaitu
isoflavon yang merupakan senyawa fungsional yang berperan sebagai antioksidan.
Diduga di dalam tempe koro babi juga terdapat senyawa fenol. Maka dibutuhkan
penelitian tentang jumlah total fenol dalam tempe koro babi sebagai manfaatnya
untuk manusia.
Mengacu pada penelitian sebelumnya (Laela, 2008) pada tempe koro
benguk yang juga menggunakan pengecilan ukuran, yang ternyata pengecilan
ukuran dapat menurunkan kadar asam fitat dan komponen lainnya maka
pengecilan ukuran pada pembuatan tempe koro babi, diharapkan juga dapat
memeberi pengaruh terhadap kadar asam sianida dan total fenol, karena perbedaan
luas permukaannya.
Senyawa anti gizi biji koro babi merupakan kelemahan yang harus dapat
diatasi secara baik dan benar pada pengolahan koro babi, salah satunya dengan
pembuatan tempe sehingga akan dihasilkan produk yang aman dan layak untuk
dikonsumsi oleh masyarakat. Oleh karena itu diperlukan suatu upaya untuk
mengurangi jumlah senyawa anti gizi produk tempe koro babi. Dengan perbedaan
ukuran tersebut diharapkan akan didapatkan perlakuan yang efektif untuk
mempersingkat waktu fermentasi.
xvi
B. Perumusan Masalah
1. Apakah kadar asam sianida (HCN) pada pembuatan tempe koro babi (Vicia
faba) dipengaruhi oleh pengecilan ukuran biji dan lama fermentasi ?
2. Apakah senyawa fenolik pada pembuatan tempe koro babi (Vicia faba)
dipengaruhi oleh pengecilan ukuran biji dan lama fermentasi ?
C. Tujuan
Tujuan penelitian ini adalah :
1. Mengetahui pengaruh pengecilan ukuran biji koro babi (Vicia faba) dan lama
fermentasi terhadap kadar asam sianida pada pembuatan tempe koro babi
(Vicia faba)
2. Mengetahui pengaruh pengecilan ukuran biji koro babi (Vicia faba) dan lama
fermentasi terhadap senyawa fenolik pada pembuatan tempe koro babi (Vicia
faba)
D. Manfaat Penelitian
Penelitian ini penting karena diharapkan dapat diperoleh tempe koro babi
dengan kadar asam sianida rendah dan senyawa fenolik yang tinggi sehingga koro
babi (Vicia faba) dapat dimanfaatkan sebagai salah satu alternatif bahan baku
tempe non-kedelai yang aman dan layak dikonsumsi.
Hasil penelitian diharapkan akan memberi masukan pada perkembangan
ilmu pengetahuan disebabkan belum adanya data mengenai kadar HCN dan total
fenol pada tempe koro babi dan dapat digunakan sebagai referensi.
xvii
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Tinjauan Pustaka
1. Koro Babi
Koro babi mempunyai beberapa sebutan lain yaitu kacang babi, kacang
dieng, buncis kuda, buncis besar, dan buncis dindsor. Dalam bahasa Inggris
sering disebut juga dengan fava bean, faba bean, dan broad bean. Berikut
adalah spesifikasi koro babi :
Kingdom : Plantae (tumbuhan)
Subkingdom : Tracheobiota (berpembuluh)
Superdivisio : Spermatophyta (menghasilkan biji)
Divisio : Magnoliophyta (berbunga)
Kelas : Magnoliospida (berkeping dua/dikotil)
Sub kelas : Rosidae
Familia : Fabaceae (suku polong-polongan)
Genus : Vicia
Spesies : Vicia faba L.
(Anonim a, 2008)
Koro babi merupakan tumbuhan tahunan yang berasal dari daerah
tropis. Tanaman ini dapat tumbuh pada ketinggian yang tinggi (pegunungan) di
daerah tropis. Selama periode pertumbuhan memerlukan suhu antara 18-27oC.
Curah hujan yang diperlukan 650-1000 mm/tahun. Kelembaban tertinggi
dibutuhkan tanaman ini pada masa 9-12 minggu setelah penanaman. Tanaman
ini tidak tahan kekeringan dan juga tidak tahan terhadap air yang berlebihan.
Koro babi dapat tumbuh pada hampir semua lahan tetapi tumbuh terbaik pada
tanah liat, pH 4,5-8,3 dan optimum pada pH 6,5 (Anonim c, 2008). Di Indonesia
kacang babi terdapat di Jawa Tengah dan daerah pegunungan Tengger (Gandjar
et al, 1979 dalam Handajani dan Windi Atmaka,1993), dan dapat tumbuh di
daerah-daerah dengan ketinggian 1300m dpl seperti Tawangmangu, Dieng dan
Tosari, Jawa Timur. (Sastrapraja et al, 1983 dalam Handajani dan Windi
Atmaka,1993).
5
xviii
Gambar 2.1 Tanaman koro babi Gambar 2.2 Variasi ukuran biji koro babi Sumber: Jarso, M. & Keneni 2006 Sumber: Jarso, M. & Keneni 2006
Gambar 2.1 menunjukkan tanaman serta bentuk polong koro babi yang
berbentuk agak silinder hingga memipih. Panjang polong bisa mencapai 20 cm
jika ditanam di kebun, sedangkan jika dibudidayakan panjangnya rata-rata 5-10
cm. Bentuk dan ukuran biji koro babi sangat beragam (gambar 2.2), sangat
padat hingga agak membulat, berwarna putih, hijau, kekuning-kuningan, coklat,
ungu atau hitam. (Anonim, 2008c).
Untuk memanfaatkan leguminose ini secara maksimal maka kita harus
mengetahui kandungan gizi yang terdapat didalamnya. Seperti ditampilkan
pada tabel 2.1.
Tabel 2.1. Kandungan Kimia dalam 100 g Koro Babi
Kandungan Jumlah Kandungan Jumlah Air Energi Protein Lemak Karbohidrat Dietary fiber Vitamin A Tiamin Riboflavin Niasin Vitamin B6 Folat Asam askorbat Asam lemak
asam linoleat asam oleat
11.0 g 1425 kJ (340 kcal) 26.1 g 1.5 g 58.3 g 25.0 g 53 IU 0.56 mg 0.33 mg 2.8 mg 0.37 mg, 423 µg 1.4 mg 581 mg 297 mg
asam palmitat Asam amino Triptofan Lisin Metionin Fenilalanin Treonin Valin Leusin Isoleusin
Mineral Ca Mg P Fe Zn
204 mg 247 mg 1671 mg 213 mg 1103 mg 928 mg 1161 mg 1964 mg 1053 mg 103 mg 192 mg 421 mg 6.7 mg 3.1 mg
Sumber: USDA, 2004 cit Jarso, M. and Keneni, 2006).
Dari tabel diatas, dapat dilihat bahwa koro babi mempunyai kandungan
gizi yang cukup dalam 100 gram bahan, koro babi mempunyai protein yang
xix
cukup tinggi, maka diharapkan bisa menjadi komoditas subtitusi kedelai yang
menjadi sumber protein nabati utama di Indonesia. Menurut Purseglove (1969)
dalam Handajani dan Windi Atmaka (1993) terdapat 3 varietas kacang babi
yaitu varietas Minor Beck, bentuk biji bulat dengan ukuran kecil, varietas
Equina Pers, biji berukuran sedang kira-kira 1-5 cm, dan varietas Major Harz,
biji berukuran paling besar sekitar 2-5 cm dengan polong besar.
Kacang babi biasa diambil biji mudanya untuk digoreng sebagai snack,
sedangkan daunya dapat digunakan sebagai makanan ternak, dapat juga
digunakan sebagai pagar atau pembatas rumah(Maradjo, 1976). Sedang di
Inggris telah diproduksi dalam bentuk instan kacang babi dan protein isolat
kacang babi dibuat menjadi daging buatan (Haris dan Karnas, 1989 dalam
Handajani dan Windi Atmaka,1993)
Pada beberapa orang yang hidup di bagian Mediterania, mengkonsumsi
koro babi, khususnya yang masih mentah dan menghirup seruk sarinya dapat
menyebabkan favism, yaitu suatu jenis anemia hemolitik yang dihasilkan dari
akumulasi β-glikosidase (vicin dan convicin) dan aglikonnya pada individu
yang kekurangan enzim glukose-6-phosphate dehidrogenase pada sel darah
merahnya. Merendamnya sebelum memasaknya akan menginaktivasi
komponen racunnya. Faktor anti gizi lainya pada koro babi adalah tripsin
inhibitor, lektins (haemaglutinin), tanin, oligosakarida dan fitase.( Jarso, M. &
Keneni 2006).
2. Tempe
Kacang-kacangan dan umbi-umbian cepat sekali terkena jamur sehingga
mudah menjadi layu dan busuk. Untuk mengatasi masalah ini, bahan tersebut
perlu diawetkan. Hasil olahannya dapat berupa makanan seperti keripik, tahu
dan tempe, serta minuman seperti bubuk dan susu kedelai (Anonim, 2000).
Tempe merupakan hasil fermentasi biji – bijian dengan menggunakan
jamur Rhizopus oligosporus. Di Indonesia tempe yang sangat digemari
masyarakat berasal dari kedelai, selain kedelai tempe dapat dibuat dari
gandum, beras dan biji - bijian lain, meskipun kualitasnya tidak sebaik yang
dibuat dari kedelai. (Heseltine et al., 1967 dalam Laela Nur Rochmah, 2008)
xx
Indonesia merupakan negara produsen tempe terbesar di dunia dan
menjadi pasar kedelai terbesar di Asia. Sebanyak 50 % dari konsumsi kedelai di
Indonesia dalam bentuk tempe, 10 % bentuk tahu dan 10 % dalam bentuk
produk lain. Konsumsi tempe rata-rata per orang per tahun di Indonesia saat ini
sekitar 6,45 kg. Kesukaan terhadap tempe tidak terlepas dari harganya yang
relatif murah, raza lezat dan kandungan gizinya yang tinggi (Made Astawan,
2004) .
Tempe merupakan produk olahan kedelai yang terbentuk dari hasil
fermentasi oleh jamur jenis Rhizopus. Banyak perubahan yang terjadi selama
proses fermentasi kedelai menjadi tempe, baik yang menyangkut perubahan
fisik, biokimia, dan mikrobiologi, yang semuanya berdampak menguntungkan
terhadap sumbangan gizi dan kesehatan. Secara garis besar, tahap-tahap penting
dalam proses pembuatan tempe meliputi pembersihan biji kedelai, pengukusan,
pengupasan kullit, inokulasi jamur, pembungkusan, dan fermentasi. Proses
fermentasi adalah tahap terpenting, yang mana pada tahap ini dilakukan
pemeraman kedelai selama beberapa hari (36-48 jam) menggunakan laru/jamur
tempe (Made Astawan, 2004).
Dari hasil penelitian diketahui bahwa tempe yang merupakan makanan
tradisional asli Indonesia memiliki potensi untuk melawan radikal bebas
sehingga dapat mencegah berbagai penyakitm menghambat proses penuaan,
dan mencegah terjadinya penyakit degeneratif, yaitu arteriosklerosis, jantung
koroner, diabetes melitus, dan kanker. Tempe juga telah diketahui mengandung
zat antibakteri penyebab diare (Made Astawan, 2004) .
Tempe kedelai paling dikenal dan banyak dikonsumsi. Namun demikian
terdapat beberapa jenis tempe di Indonesia, antara lain tempe gembus, tempe
lamtoro, tempe benguk, tempe bongkrek, tempe gude, tempe bungkil (Made
Astawan, 2004). Dengan demikian, ada kemungkinan kacang-kacangan atau
jenis legum lain termasuk koro berpotensi untuk dijadikan tempe.
Rhizopus oligosporus adalah jamur utama yang berperan dalam proses
fermentasi tempe. Ciri yang khas dari genus Rhizopus adalah pertumbuhan
koloninya cepat, mempunyai stolon, rhizoid dan sporangiosfor dengan banyak
xxi
spora, umumnya berukuran besar, berwarna putih waktu masih muda,
kemudian menjadi hitam dan coklat serta collumela berwarna coklat (Samson,
Hoekra dan Van Oorschot dalam Sutardi, 1988).
Persyaratan yang harus dipenuhi Rhizopus agar dapat digunakan
sebagai inokulum tempe (Steinkraus, et al. dalam Shurtleff dan Aoyagi, 1979)
yaitu
1. Pertumbuhan cepat pada suhu 37°C
2. Mempunyai aktivitas proteolitik yang tinggi dan menghasilkan ammonia
bebas setelah fermentasi 48-78 jam
3. Mempunyai kemampuan untuk menghasilkan sifat-sifat khas tempe seperti
flavor, aroma, dan tekstur
4. Mempunyai aktivitas lipolitik yang tinggi dan memproduksi antioksidan
Perendaman kedelai merupakan tahap awal dan penting dalam
pembuatan tempe secara tradisional. Menurut Kasmidjo (1990) dalam Laela
Nur Rochmah (2008) ada beberapa maksud dan tujuan perendaman kedelai, di
antaranya adalah :
1. Memberikan kesempatan pada kedelai untuk menyerap air (hidrasi)
sehingga biji lebih lunak. Selama perendaman, biji menyerap air kira-kira
sebanyak beratnya sendiri. Menurut Steinkraus (1983), jamur tempe tidak
akan mampu tumbuh pada kedelai yang keras (belum menyerap air) dan
tidak dikupas.
2. Perendaman akan mengeluarkan faktor yang menghambat pertumbuhan
jamur tempe dari dalam biji kedelai, larut dalam air rendaman.
3. Perendaman dapat menurunkan pH kedelai yang disebabkan oleh proses
fermentasi dan pengasaman oleh bakteri. Penurunan pH kedelai memberi
kesempatan jamur tempe tumbuh lebih lama dan menjamin kualitas tempe
yang baik. Jamur tempe memproduksi enzim proteolitik yang kuat. Selama
fermentasi, enzim ini merombak protein kedelai menjadi senyawa
sederhana dan menghasilkan amoniak yang kemudian menjadi ammonia
dalam air, sehingga menaikkan pH. Jika biji kedelai memiliki pH awal
yang rendah pada saat fermentasi dimulai maka akan tersedia sebanyak
xxii
cadangan keasaman untuk menetralkan ammonia yang terbentuk selama
fermentasi. Apabila pH melampaui 7, dapat menyebabkan amoniak tidak
ternetralkan sehingga berbau busuk, juga mempercepat pertumbuhan
bakteri pembusuk dan mengganggu pertumbuhan jamur tempe.
Berbagai macam perlakuan pendahuluan sebelum menjadi tempe
memungkinkan turunnya berbagai senyawa didalam tempe.
3. HCN (Asam Sianida)
Sianida dalam jumlah sedikit sekali tersebar luas dalam tanaman,
terutama dalam bentuk sianogenik glukosida. Konsentrasi yang relatif tinggi
ditemukan dalam rumput-rumputan tertentu, kacang-kacangan, umbi-umbian
dan diji buah. Sebagian besar hasil tanaman ini dikonsumsi Asam sianida
(HCN) secara alami terdapat pada umbi-umbian, di antaranya gadung,
singkong, talas dan bengkoang. HCN dihasilkan jika produk dihancurkan,
dikunyah, diiris atau diolah. Jika dicerna, HCN sangat cepat terserap oleh alat
pencernaan masuk ke dalam saluran darah dan terikat bersama oksigen. Bahaya
HCN terutama pada sistem pernafasan, dimana oksigen dalam darah terikat
oleh senyawa HCN dan terganggunya sistem pernafasan ( sulit bernafas ).
Tergantung jumlah yang dikonsumsi, HCN dapat menyebabkan kematian jika
pada dosis 0,5-3,5 mg HCN/kg berat badan ( Winarno, 2002 ).
H −C ≡ N
Gambar 2.3 Struktur Asam Sianida
Sianida adalah senyawa kimia yang mengandung kelompok siano C≡N,
dengan atom karbon terikat tiga ke atom nitrogen. Kelompok CN dapat
ditemukan dalam banyak senyawa. Beberapa adalah gas, dan lainnya adalah
padat atau cair. Beberapa seperti garam, beberapa kovalen. Beberapa
molekular, beberapa ionik dan banyak juga polimerik. Sianida yang dapat
melepas ion sianida CN- sangat beracun ( Anonim, 2006 ).
Asam sianida (HCN) merupakan senyawa racun yang dapat
mengganggu kesehatan. Keberadaan senyawa ini dapat menimbulkan rasa
pahit. Senyawa ini banyak dijumpai pada kacang koro. Keberadaan senyawa ini
dapat mengurangi ketersediaan nutrisi di dalam tubuh. (Anonim, 2009)
xxiii
Glikosida sianogenik merupakan senyawa yang terdapat di dalam bahan
pangan nabati yang bersifat antigizi dan secara potensial dapat beracun karena
dapat terurai dan menghasilkan hydrogen sianida. Reaksi detoksifikasi sianida
dalam tubuh akan menghasilkan thiosianat. Karena itu, seseorang yang
mengkonsumsi akan mengalami peningkatan kadar thiosianat dalam tubuhnya.
Padahal, thiosianat dalam tubuh mempunyai sifat menurunkan jumlah yodium
dalam tubuh (Anonim, 2006). Yodium diperlukan tubuh terutama untuk sintesis
hormon tiroksin, yaitu suatu hormon yang dihasilkan oleh kelenjar tiroid yang
sangat dibutuhkan untuk proses pertumbuhan, perkembangan, dan kecerdasan.
Jika kebutuhan tersebut tidak terpenuhi dalam waktu lama, kelenjar tiroid akan
membesar untuk menangkap yodium, yang lebih banyak dari darah.
Pembesaran kelenjar tiroid tersebutlah yang sehari-hari kita kenal sebagai
penyakit gondok (Siswono, 2003).
Glikosida sianogenik dapat menyebabkan keracunan jika membebaskan
HCN / asam sianida melalui reaksi hidrolisa enzimatik. Enzim yang berperan
adalah β-glukosidase. Dalam tanaman glikosida terpisah dengan enzim,
sehingga hidrolisa tidak terjadi. Proses pengolahan seperti perendaman,
pengirisan dan penghancuran menyebabkan terjadinya hidrolisis, sehingga
dibebaskan senyawa HCN ( Grahan, 1980 dalam Utomo, 2004 dalam Bayu
Kanetro dan Retno Hastuti, 2006 ).
Dalam Handajani (1996), pada proses penempean koro benguk, yang
kandungan HCNnya di uji dengan metode titrasi, dapat menurunkan kandungan
HCN biji koro benguk sebelum fermentasi dari 0,265 mg/100g hingga menjadi
0 mg/100g tempe. Dalam produk tempenya, kandungan HCN telah benar-benar
hilang, sehingga dapat dinyatakan bahwa tempe benguk aman untuk
dikonsumsi.
4. Senyawa Fenol
Senyawa fenolik merupakan salah satu senyawa antioksidan alami yang
dapat larut dalam air serta memiliki fungsi antara lain sebagai penangkap
radikal bebas. Bahan bahan yang mengandung senyawa fenolik dan sangat
bagus sebagai antioksidan antara lain jahe, bawang putih, teh (kandungan
xxiv
senyawa fenolik tertinggi terdapat pada teh hijau), kunyit, ubi jalar ungu,
strawberry, serta kedelai dan hasil olahannya.
Komponen fenolik atau disebut juga polifenol merupakan produk
metabolisme sekunder tanaman yang banyak didapatkan pada tanaman.
Substansi ini mempunyai berbagai macam struktur dan fungsi yang berbeda.
Secara umum, fenolik terdiri atas cincin aromatik yang mengikat satu atau lebih
gugus hidroksil (Robards et al., 1999). Penggolongan fenolik sangat beragam,
dari molekul sederhana seperti asam fenolik, sampai dengan molekul kompleks
seperti tanin.Komponen fenolik ini meliputi fenol sederhana, benzoquinon,
fenolik, fenilasetat, asam sinamat, fenilpropen, coumarin, chromon,
naptoquinon, xhanthon, stilben, antraquinon, golongan floavanoid, lignin dan
biflavanoid (Robards et al, 1999).
Sebagian besar senyawa organik bahan alam adalah senyawa-senyawa
aromatik. Senyawa aromatik ini mengandung cincin karboaromatik yaitu cincin
aromatik yang hanya terdiri dari atom karbon seperti benzen, naftalen dan
antrasen. Cincin karboaromatik ini biasanya tersubtitusi oleh satu atau lebih
gugus hidroksil atau gugus lainnya yang ekivalen ditinjau dari segi
biogenetiknya. Oleh karena itu senyawa bahan alam aromatik ini sering disebut
sebagai senyawa-senyawa fenol walaupun sebagian diantaranya bersifat netral
karena tidak mengandung gugus fenol dalam keadaan bebas (Sovia, 2006)
Senyawa polifenol yang terdapat dalam tanaman antara lain asam
fenolat, flavanoid termasuk isoflavon dan tanin. Senyawa-senyawa ini
distribusinya sangat luas, terdapat dalam daun, batang, akar, bunga, buah, dan
biji serta selalu terdapat dalam makanan yang berasal dari tanaman. Senyawa
polifenol dari kelas yang berbeda mempunya aktifitas fisiologis yang berbeda,
sehingga pengaruhnya terhadap nilai gizi bahan pangan juga berbeda, tanin
telah diketahui dapat menurunkan daya cerna protein (Ford dan Hewitt, 1979)
dan mungkin bioavaibilitas zat-zat gizi lainnya (Muchtadi, 1989).
Asam fenolat adalah turunan dari asam sinamat dan banyak terdapat
dalam tanaman bahan pangan (Maga, 1978), yang mungkin merupakan daya
pertahanan diri dari tanaman terhadap infeksi mikrobia, predator dan parasit
xxv
(Synge, 1975), dan ikut terlibat dalam sintesa lignin (Pierpoint, 1971). Salah
satu sifat kimianya yang menonjol adalah kemudahannya untuk teroksidasi.
Dengan adanya oksigen, asam klorogenat, asam kafenat dan senyawa orto-
difenol lainnya dapat teroksidasi dalam larutan alkalis atau oleh adanya enzim
polifenol oksidase. Produk pertama hasil oksidase tersebut adalah radikal orto-
semikuinon atau molekul orto kuinon, yang keduanya sangat reaktif dan bila
bereaksi dengan senyawa lain akan membentuk warna coklat dengan berat
molekul tinggi. Jenis reaksi browning enzimatik semacam ini akan terjadi bila
bahan-bahan tersebut dilukai dan terkena udara (Muchtadi, 1989).
xxvi
5. Pengecilan Ukuran
Pengecilan ukuran mungkin merupakan tujuan utama operasi atau
bagian dari operasi. Pengecilan ukuran dapat dibedakan menjadi pengecilan
ukuran yang ekstrim atau penggilingan dan pengecilan ukuran yang relative
masih berukuran lebih besar. Pada penggilingan kering, perlu diperhatikan
mengenai penguapan air dan bahan mudah menguap lainnya dan dekomposisi
karena panas dan oksidasi semua terjadi karena suhu tinggi yang mungkin
terjadi. Selama pengecilan ukuran suatu produk berubah bentuk dan ini
menghasilkan desakan. Pada perubahan bentuk selanjutnya desakan
meningkat dan gaya kohesi dipatahkan, suatu retakan terbentuk dan meluas
(Suyitno, 1989).
Penghancuran dan pemotongan mengurangi ukuran bahan padat
dengan kerja mekanis, yaitu membaginya menjadi partikel-partikel lebih kecil.
Penggunaan proses penghancuran yang paling luas di dalam industri pangan
sebagai contoh adalah dalam penggilingan butir-butir gandum menjadi tepung,
penggilingan jagung untuk menghasilkan tepung jagung, penggilingan gula
dan penggilingan bahan pangan kering seperti sayuran. Pemotongan
dipergunakan untuk memecahkan potongan besar bahan pangan menjadi
potong-potongan kecil yang sesuai untuk pengolahan lebih lanjut, seperti
dalam penyiapan daging olahan. Didalam proses penggilingan, ukuran bahan
diperkecil dengan mengoyakkannya. (Earle, 1969)
Menurut Laela Nur Rochmah (2008), kandungan asam fitat tempe koro
benguk dengan biji yang berukuran lebih kecil akan lebih rendah bila
dibandingkan pada tempe koro benguk dengan ukuran biji yang lebih besar.
Ukuran tempe koro benguk biji utuh paling besar dibandingkan koro benguk
biji belah dan giling, sedangkan biji belah lebih besar dibandingkan biji giling.
Variasi pengecilan ukuran berpengaruh terhadap kadar asam fitat selama
fermentasi koro benguk dengan perlakuan digiling memiliki kadar asam fitat
paling rendah diantara koro benguk utuh dan koro benguk belah. Diharapkan
dengan pengecilan ukuran juga dapat menurunkan kadar HCN dalam koro
babi.
xxvii
B. Kerangka Berpikir
C. Hipotesis
Perbedaan jenis pengecilan ukuran dan lama fermentasi dalam proses
pembuatan tempe koro babi (Vicia faba) berpengaruh terhadap kadar asam sianida
dan senyawa fenol tempe koro babi (Vicia faba)
Gambar 2.4. Kerangka Berpikir
Tempe koro babi
Variasi Pengecilan ukuran (rajang dan cacah)
1. Berpengaruh pada kadar Asam Sianida
2. Berpengaruh pada Kadar Total Fenol
Variasi Lama fermentasi
(0, 30,36,42 & 48jam)
Kedelai impor
Bahan baku tempe kedelai
Harganya naik tiap tahun
Koro babi (sumber lokal)
xxviii
III. METODE PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Rekayasa Proses Pengolahan
Pangan dan Hasil Pertanian Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Lab. Biologi
Tanah Jurusan Ilmu Tanah Fakultas Pertanian, Lab. MIPA Pusat Universitas
Sebelas Maret Surakarta, dan Lab. CV. Chemix Pratama Bantul. Penelitian
dilaksanakan mulai April - September 2009.
B. Bahan dan Alat
1. Bahan
Bahan yang digunakan dalam pembuatan tempe yaitu koro babi. Koro
babi di beli dari pasar Wonosobo, ragi tempe merk ”RAPRIMA”: produksi
Bandung yang diperoleh dari Koperasi “Makmur” Mojosongo Surakarta, air
sumur, daun pisang dan kertas koran.
Pada pengujian asam sianida digunakan metode metode AOAC. Bahan
kimia yang digunakan untuk analisis asam sianida antara lain : aquades, 0,02
N AgNO3, 0,02 N HNO3 , K-Thiosianat, indikator ferri.
Pada pengujian total fenol digunakan metode Folin Ciocalteu. Bahan
kimia yang digunakan untuk analisis total fenol antara lain : etanol, aquades,
reagen Folin Ciocalteu, Na2CO3 7%
2. Alat
Alat yang digunakan yaitu oven (merk Memmert UNM 400),
spektrofotometer (merk Thermo electron corporation). Alat untuk untuk
analisis asam sianida yaitu labu kjeldahl, erlenmeyer, kruss Gooch, buret.
Sedangkan alat yang diperlukan untuk analisis total fenol dengan metode
Folin Ciocalteu adalah erlenmeyer, botol gelas, labu takar, tabung reaksi, pipet
ukur, blender, baskom, timbangan mekanik, dan kertas saring. Alat untuk
pembuatan tempe : kompor, panci, alat perajang, baskom dan timbangan
mekanik.
xxix
C. Rancangan Percobaan
Penelitian ini adalah penelitian hubungan fungsional yang pendekatan
variabelnya melalui suatu eksperimen dengan memakai sampel tempe koro babi
dan rancangan dasar Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola faktorial yang terdiri
dari dua faktor yaitu variasi pengecilan ukuran (2 macam) serta variasi lama
fermentasi (4 macam). Adapun kombinasi perlakuan dapat dilihat pada Tabel 3.1.
Tabel 3.1 Rancangan Percobaan
Perlakuan Lama fermentasi
Koro Rajang Koro Cacah
0 jam 0R 0C 30 jam 30R 30C 36 jam 36R 36C 42 jam 42R 42C 48 jam 48R 48C
D. Pengamatan Parameter/ Peubah
Peubah yang digunakan dalam penelitian ini adalah:
1. Variabel bebas : lama fermentasi dan pengecilan ukuran pada tempe koro
babi (Vicia faba).
2. Variabel terikat utama : kadar total fenol dan kadar asam sianida pada tempe
koro babi (Vicia faba).
E. Tata Laksana Penelitian
1. Pembuatan tempe koro babi
a. Persiapan bahan dan Sortasi
Koro babi (Vicia faba) disortasi dari cemaran fisik kemudian
ditimbang, Lalu dicuci terlebih dahulu sebelum ke tahap berikutnya.
b. Perebusan.
Koro babi direbus sampai mendidih. Perbandingan air dan koro babi
(Vicia faba) adalah 4 : 1. Setelah mendidih buang airnya ganti dengan air
dingin dan rebus kembali sampai mendidih. Setelah dingin, kulitnya
dikelupas.
16
xxx
c. Perendaman selama 6 x 12 jam
Koro babi (Vicia faba) yang telah dikelupas direndam kembali
dengan air. Perbandingan air dan koro babi (Vicia faba) adalah 4:1
selama 6 x 12 jam. Tiap 12 jam air diganti.
d. Pengukusan
Pengukusan dilakukan selama 20 menit dengan api kecil
e. Penirisan
Penirisan dilakukan dengan menggunakan saringan.
f. Pendinginan
Pendinginan dilakukan dalam suhu kamar dan udara terbuka
g. Perlakuan pengecilan ukuran
Koro babi (Vicia faba) dibagi 2 bagian sama banyak, 1 bagian
dirajang (1 lembaga dibelah vertikal menjadi 3) dimensi ± 2,5 x 0,5 x 0,5
cm, dan 1 bagian dicacah (1 lembaga dibelah vertikal menjadi 3,
kemudian dibelah horisontal 5-7) dimensi ± 0,5 x 0,5 x 0,5 cm.
h. Inokulasi
Inokulasi dengan menggunakan ragi tempe dengan perbandingan 2
gr ragi tempe dalam 1 kg Koro. Dilakukan pencampuran secara
homogen. Lalu dibungkus dengan daun pisang.
i. Fermentasi
Inkubasi dilakukan dengan menata sample di atas rak pada suhu
kamar selama 30 jam, 36 jam, 42 jam dan 48 jam.
xxxi
Air: sampel = 4:1
Gambar 3.1 Skema Pembuatan Tempe Koro babi
Dirajang 1 lembaga menjadi 3
Pendinginan
Inokulasi
Fermentasi
± 2,5 x 0,5 x 0,5cm
T ruang = ±27oC
42jam
48jam 30jam
36jam
0jam
Pengukusan 20 menit
Sortasi
Perendaman 6x12 jam
Koro babi
Perebusan 25 menit
Buang dan diganti airnya
Pengupasan kulit
Air: sampel = 4:1
Dicacah 1 lembaga menjadi 15
Pendinginan
Inokulasi
Fermentasi
Penirisan
42jam
48jam 30jam
36jam
0jam
± 0,5 x 0,5x 5 cm
T ruang = ±27oC
Tempe koro babi berbagai variasi pengecilan ukuran dan variasi lama fermentasi
Pengecilan ukuran
2 gr ragi/ Kg koro babi
xxxii
F. Rancangan Penelitian
Koro Babi
Analisa HCN Analisa Total Fenol
Gambar 3.2. Skema Rancangan Penelitian
Tempe koro babi
0 jam 30 jam 36 jam 48 jam 42 jam Fermentasi
Cacah Rajang
xxxiii
Analisis Di Laboratorium
1. Uji kadar asam sianida
Uji kadar asam sianida merupakan pengujian untuk mengetahui kadar
asam sianida dalam tempe koro babi. Pengujian kadar asam sianida
menggunakan metode AOAC. Sebelum dianalisis, tempe tiap perlakuan
dikecilkan ukuran kemudian dioven pada suhu 100oC selama 2 jam. Setelah
itu bahan dihaluskan dengan menggunakan blender hingga melewati ayakan
80 mesh. Semua bahan yang telah halus disimpan dalam botol kering, ditutup
rapat untuk selanjutnya dianalisis. Jalannya analisis terlihat pada Gambar 3.3
Maserasi dalam labu Kjeldahl selama 2 jam
Destilasi Uap
10-20 gr bubuk sampel 20 mesh
100 ml Aquades
destilat
Ditampung dalam erlenmeyer berisi 20 ml 0,02 NAgNO3 dan
1 ml HNO3hingga 150 ml
Disaring dengan krus Gooch
Dititrasi dengan K-thiosianat dengan indicator ferri
Gambar 3.3 Skema Analisis Asam Sianida
100 ml Aquades Pencampuran
xxxiv
2. Uji Total Fenol
Uji total fenol dengan menggunakan metode Folin Ciocalteu. Tujuan
dilakukannya analisis ini adalah untuk mengetahui jumlah komp[onen fenolik
terutama dalam bentuk asam galat yang terdapat pada kacang. Sebagai
standar digunakan asam galat dan hasilnya dinyatakan dalam satuan Gallic
Acid Equivalent (GAE). Reagen Folin Ciocalteumerupakan larutan ion
komppleks yang terbentuk dari asam fosfotungstat dan asam. Reagen ini
dapat bereaksi dengan fenol sehingga campuran asam fosfotungstat- asam
fosfomolibdat ini tereduksi menjadi komplek berwarna biru dalam larutan
basa. Jalannya analisis terlihat pada Gambar 3.4
G. Analisis Data
Ekstrak kacang 5 mg/mL dalam aquades
9 ml aquadest Pelarutan 1 mL ekstrak encer
Pencampuran
Penambahan aquades s/d tanda (25 ml)
1mL reagen Folin Ciocalteu
Penyimpanan pada suhu kamar dan kondisi gelap (90menit)
Peneraan pada λ 750 nm
5 menit
Gambar 3.4 Skema Analisis Fenolik Metode Folin Ciocalteu
xxxv
Pengujian statistik untuk parameter asam sianida dan total fenol dianalisis
mengaplikasikan software SPSS 13.0 menggunakan analisis variansi (ANOVA)
pada α 5% kemudian dilanjutkan dengan pengujian Duncan Multiple Range Test
(DMRT).
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Asam Sianida (HCN)
Glikosida sianogenik merupakan senyawa yang terdapat di dalam bahan
pangan nabati dan secara potensial dapat beracun karena dapat terurai dan
menghasilkan hidrogen sianida yang berbahaya bagi kesehatan manusia.
Pengujian yang dilakukan ini merupakan pengujian untuk mengetahui
kadar asam sianida dalam tempe koro babi. Pengujian kadar asam sianida
menggunakan metode titrasi AOAC. Sebelum dianalisis, tempe tiap perlakuan
dikecilkan ukuran kemudian dioven pada suhu 100oC selama 2 jam yang
bertujuan untuk memaksimalkan hidrolisis HCN dalam bahan. Setelah itu
bahan dihaluskan dengan menggunakan blender hingga melewati ayakan 80
mesh. Semua bahan yang telah halus disimpan dalam botol kering, ditutup
rapat untuk selanjutnya dianalisis. Kadar asam sianida (HCN) pada tempe
koro babi dengan variasi lama fermentasi dan pengecilan ukuran. dapat dilihat
pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1 Kadar Asam Sianida (mg/g db) Tempe Koro Babi dengan Berbagai Perlakuan
lama fermentasi (jam) Pengecilan Ukuran
Cacah Rajang 0 0.060d 0.072e
30 0.048c 0.036b
36 0.036b 0.036b
42 0a 0a 48 0a 0a
*)superscript yang berbeda menunjukkan beda nyata (p< 0,05)
xxxvi
Pada fermentasi 0 jam, tempe koro babi dengan perlakuan cacah dan
rajang hasilnya berbeda nyata, hal ini disebabkan karena ukuran biji koro
sebelum fermentasi. Tempe koro babi dengan perlakuan cacah 0 jam, kadar
asam sianidanya lebih rendah dibandingkan tempe koro babi perlakuan rajang
0 jam. Pada fermentasi tempe koro babi 30 jam menunjukkan hasil yang
berbeda nyata dengan waktu fermentasi 0 jam, dan pada perlakuan cacah dan
rajang menunjukkan beda nyata. Sedangkan pada fermentasi 36 jam,
perlakuan cacah dan rajang tidak menunjukkan beda nyata. Pada fermentasi
42 jam menunjukkan beda nyata dengan waktu fermentasi sebelumnya, tetapi
antara tempe perlakuan rajang dan cacah tidak menunjukkan beda nyata. Pada
waktu fermentasi selanjutnya yaitu 48 jam hasilya tidak berbeda nyata dengan
tempe fermentasi 42 jam. Begitu pula pada variasi perngecilan ukuran tidak
memberikan pengaruh pada kadar HCN tempe koro babi.
Dapat disimpulkan bahwa variasi pengecilan ukuran rajang dan cacah
menunjukkan beda nyata pada kadar HCN tempe koro babi. Variasi lama
fermentasi tempe koro babi, 0jam, sampai dengan 36 jam berpengaruh pada
kadar HCN tempe koro babi yang kadar HCNnya terus mengalami penurunan.
Fermentasi 42 jam ke atas juga memberi pengaruh pada kadar HCN tempe
koro babi, yang mana kandungannya bisa mencapai 0 mg.
Bila dilihat dari kadar HCN tempe koro babi pada fermentasi 0 jam yaitu
0,072 mg/g sampel, maka diperkirakan biji mentahnya mempunyai kadar
asam sianida yang lebih tinggi dari 0,072 mg/g. HCN yang ada kemungkinan
telah banyak tereliminasi karena sifat dari HCN sendiri yang larut air, dan
sebelumnya telah dilakukan perendaman selama 3 hari dengan penggantian
air setiap harinya. Selanjutnya setelah mengalami fermentasi, kadar HCN
mengalami penurunan sampai kadar 0 mg/g. Pola penurunannya dapat dilihat
pada Gambar 4.1.
24
-0.016
0.008
0.032
0.056
0.080
0 6 12 18 24 30 36 42 48
lama fermentasi (jam)
kad
ar
HC
N (m
g/g
)
cacah
rajang
xxxvii
Gambar 4.1. Kadar HCN selama Fermentasi Tempe Koro Babi
Secara keseluruhan , hasil penelitian menunjukkan kadar HCN pada
tempe koro babi rajang lebih tinggi. Hal ini disebabkan karena perbedaan luas
permukaan sampel akibat perbedaan pengecilan ukuran antara cacah dan
rajang. Ukuran biji pada tempe cacah lebih kecil sehingga lebih banyak
jumlah HCN yang tereleminasi, sedangkan pada tempe rajang yang
ukurannya lebih besar lebih banyak HCN yang terperangkap dalam sampel.
Menurut Bayu Kanetro dan Setyo Hastuti (2006), langkah pertama
menghilangkan HCN yaitu dengan cara pengirisan dan perendaman. Langkah
selanjutnya adalah dengan cara pemanasan atau perebusan.
Perlakuan perendaman dan pemanasan efektif dalam mengeliminasi HCN
yang terikat pada senyawa glikosida dan pada prinsipnya adalah
mengusahakan terjadinya hidrolisis yang membebaskan HCN pada bahan.
Cheeke (1985) dalam Utomo (2004) dalam Bayu Kanetro dan Setyo Hastuti
(2006) menjelaskan bahwa koro babi dipengaruhi sifat asam sianida yang
mempunyai titik didih 26,5oC, dan sangat larut dalam air, sehingga pada
proses perebusan yang suhunya diatas titik didih asam sianida, bisa
menurunkan kadar asam sianida yang ada. Proses pengolahan seperti
perendaman, pengirisan, dan penghancuran menyebabkan terjadinya hidrolisis
sehingga membebaskan senyawa HCN. Proses perebusan selain dapat
mengeliminasi senyawa HCN juga menyebabkan biji koro menjadi lebih
lunak sehingga lebih aman dan mudah dikonsumsi.
Penurunan kadar HCN diduga dipengaruhi oleh aktifitas bakteri, diketahui
bahwa titik didih HCN 26,5 oC, pada 24 jam fermentasi suhu tempe
meningkat hingga 40 oC, lalu pada 36-48 jam suhu nya antara 25 -37 oC
(Kasmidjo, 1990) kemungkinan yang terjadi adalah HCN rusak karena suhu
tempe lebih tinggi dari titik didihnya. Kemungkinan yang lain, diduga
xxxviii
peningkatan kadar air tempe selama fermentasi juga turut melarutkan HCN
dalam tempe dan ikut teruap pada saat pengeringan.
Menurut Winarno (1997) kapang merupakan salah satu mikroba yang
mempunyai enzim untuk memecah ikatan glukosidik. Enzim yang mampu
memecah ikatan glukosidik adalah enzim -glukosidik (Mega dan Matsushima,
1983 dalam Wedhastri, 1993). Medikasari dan Marniza (2007), pada
fermentasi kecap koro benguk, penurunan kadar HCN yang terkandung di
dalam kecap diduga karena adanya senyawa HCN yang dipecah oleh kapang.
HCN kemudian diuapkan oleh pemasakan moromi sehingga kadarnya
berkurang. Menurut Wedhastri (1993) Rhizopus oryzae dapat menurunkan
kadar HCN (67,79%) dan Aspergillus oryzae (37,20%). Diduga terjadi
mekanisme yang sama pada fermentasi tempe koro babi.
Data kadar HCN yang didapat dari hasil penelitian dibandingkan dengan
lethal dose atau kadar HCN maksimal yang dapat diterima tubuh, HCN dapat
menyebabkan kematian pada dosis 0,5-3,5 mg HCN/kg berat badan (
Winarno, 2002 ). Diasumsikan orang mengkonsumsi tempe koro babi 100 g
tempe koro babi (dari hasil penelitian), maka total HCN yang masuk ke tubuh
adalah 0,072 mg/g bahan (jumlah tertinggi hasil penelitian), dikalikan 100 g
bahan, yaitu 7,2 mg HCN. Jika rata-rata berat manusia diasumsikan 50 kg,
maka didapatkan hasil HCN yang masuk ke tubuh adalah 7,2 mg/ 50 kg berat
badan atau 0,144 mg/ kg berat badan. Dibandingakn dengan dosis HCN yang
dapat menyebabkan kematian di atas, maka dikatakan tempe koro babi dengan
hasil HCN tertinggi pun masih layak dikonsumsi. Tubuh manusia umumnya
tidak tahan terhadap HCN pada dosis 0,06 gram. Bila mengonsumsi HCN
pada dosis lethal (mematikan) itu, biasanya manusia sudah bisa mati. Namun,
ada pula yang masih bertahan hidup dan disembuhkan walau telah
mengonsumsi HCN sebanyak tiga kali lipat dari dosis lethal itu.
2. TOTAL FENOL
Komponen fenolik atau disebut juga polifenol merupakan produk
metabolisme sekunder tanaman yang banyak didapatkan pada tanaman.
Substansi ini mempunyai berbagai macam struktur dan fungsi yang berbeda.
xxxix
Secara umum, fenolik terdiri atas cincin aromatik yang mengikat satu atau
lebih gugus hidroksil (Robards et al., 1999). Kadar total fenol pada tempe
koro babi dengan variasi lama fermentasi dan pengecilan ukuran dapat dilihat
pada Tabel 4.2
Tabel 4.2 Kadar Total Fenol (%) Tempe Koro Babi dengan Berbagai Perlakuan
lama fermentasi (jam) Pengecilan Ukuran
cacah Rajang 0 0,014750a 0,014750a
30 0,149900b 0,152650b
36 0,201825f 0,178300e
42 0,170400d 0,162750d 48 0,234400g 0,192620f
*)superscript yang berbeda menunjukkan beda nyata (p< 0,05)
Pada 0 jam fermentasi, kadar total fenol pada tempe dengan perlakuan
cacah dan rajang hasilnya tidak berbeda nyata, hal ini disebabkan karena koro
sama-sama belum terfermentasi. Begitu pula pada fermentasi 30 jam, kadar
total fenol tempe dengan perlakuan cacah dan rajang tidak menunjukkan beda
nyata. Sedangkan pada 36 jam fermentasi kadar total fenol tempe dengan
perlakuan cacah dan rajang menunjukkan beda nyata. Pada fermentasi 42 jam
kadar total fenol berbeda nyata dengan waktu fermemntasi sebelumnya, tetapi
antara tempe dengan perlakuan rajang dan cacah tidak menunjukkan beda
nyata. Pada waktu fermentasi selanjutnya yaitu 48 jam, kadar total fenol
berbeda nyata dengan tempe fermentasi 42 jam. Begitu pula perlakuan variasi
pengecilan ukuran juga memberi pengaruh pada kadar total fenol tempe koro
babi.
Dapat disimpulkan bahwa variasi pengecilan ukuran biji koro babi
berpengaruh pada kadar total fenol tempe koro babi. Variasi lama fermentasi
tempe koro babi, dari 0 jam sampai dengan 48 jam juga berpengaruh pada
kadar total fenol tempe koro babi. Selanjutnya kenaikan kadar total fenol
tempe koro babi dapat dilihat pada Gambar 4.2
xl
Gambar 4.2. Kadar Total Fenol selama Fermentasi Tempe Koro Babi
Secara keseluruhan, hasil penelitian menunjukkan kadar total fenol pada
tempe koro babi rajang lebih tinggi dibandingkan tempe koro babi cacah. Dari
gambar 4.2 di atas dapat dilihat bahwa kadar total fenol yang diperoleh
mengalami kenaikan pada masing-masing perlakuan pengecilan ukuran dan
lama fermentasi, jadi pengecilan ukuran dan lama fermentasi dapat
meningkatkan kdar total fenol pada tempe koro babi.
Pada kedua perlakuan pengecilan ukuran, dari fermentasi 0 jam hingga 36
jam kadar total fenol terus mengalami peningkatan, namun pada fermentasi 42
jam kadar toral fenol perlakuan cacah dan rajang mengalami penurunan. Lalu
pada fermentasi 48 jam, kadar total fenol kembali mengalami kenaikan pada
masing-masing variasi pengecilan ukuran.
Kemungkinan yang terjadi ialah, pada 0 jam hingga 36 jam fermentasi
terjadi pembentukan senyawa fenol oleh perombakan senyawa dalam tempe
koro babi oleh mikrobia. Kadar total fenol paling tinggi pada 36 jam
fermentasi, hingga setelah itu terjadi penurunan kadar total fenol pada
fermentasi 42 jam. Hal ini dimungkinkan aktifitas mikrobia paling maksimal
adalah pada waktu fermentasi 36 jam, setelah itu aktifitas mikrobia
mengalami penurunan karena substrat yang telah habis dirombak, atau kondisi
yang tidak lagi sesuai dengan syarat tumbuh mikrobia. Penyimpangan yang
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0 6 12 18 24 30 36 42 48
lama fermentasi (jam)
kad
ar
tota
l fe
no
l (%
)
cacah
rajang
xli
terjadi adalah pada fermentasi 48 jam kadar total fenol kembali mengalami
kenaikan. Kemungkinan yang terjadi adalah, tempe telah mengalami over
fermented karena aktifitas lanjutan dari mikrobia, yang menghasilkan bau,
yang terdeteksi sebagai fenol, sehingga kadar total fenol tempe koro babi
kembali mengalami kenaikan setelah mengalami penurunan.
Dalam koro babi sudah mengandung senyawa antioksidan seperti asam
fenolik, tannin serta antosianin (Souâd Akroum, 2009). Kemudian dalam
tempe juga ditemukan suatu zat antioksidan dalam bentuk isoflavon. Seperti
halnya vitamin C, E, dan karotenoid, isoflavon juga merupakan antioksidan
yang sangat dibutuhkan tubuh untuk menghentikan reaksi pembentukan
radikal bebas.( Sutikno Arthur, 2009).
Menurut Sutikno Arthur, (2009) dalam kedelai terdapat tiga jenis
isoflavon, yaitu daidzein, glisitein, dan genistein. Pada tempe, di samping
ketiga jenis isoflavon tersebut juga terdapat antioksidan faktor II (6,7,4-
trihidroksi isoflavon) yang mempunyai sifat antioksidan paling kuat
dibandingkan dengan isoflavon dalam kedelai. Antioksidan ini disintesis pada
saat terjadinya proses fermentasi kedelai menjadi tempe oleh bakteri
Micrococcus luteus dan Coreyne bacterium. Pernyataan ini juga didukung
oleh Anonim (2008b). Jika pada fermentasi tempe ditemukan adanya bakteri
Micrococcus sp. adalah bakteri berbentuk kokus, gram positif, berpasangan
tetrad atau kelompok kecil, aerob dan tidak berspora, bisa tumbuh baik pada
medium nutrient agar pada suhu 30oC dibawah kondisi aerob. Bakteri ini
menghasilkan senyawa isoflavon sebagai antioksidan.
xlii
V. KESIMPULAN DAN SARAN
A. KESIMPULAN
1. Variasi pengecilan ukuran dan lama fermentasi berpengaruh terhadap
kadar HCN tempe koro babi, semakin kecil ukuran biji koro dan semakin
lama waktu fermentasi maka kadar asam sianidanya semakin kecil.
2. Pada fermentasi 0, 30, 36, 42, dan 48 jam kadar asam sianida biji koro
babi cacah berturut-turut adalah 0.060 mg/g, 0.048 mg/g, 0.036 mg/g, 0
mg/g, dan 0 mg/g, sedangkan untuk biji koro babi rajang adalah 0.072
mg/g, 0.036 mg/g , 0.036 mg/g , 0 mg/g dan 0 mg/g.
3. Kadar asam sianida terendah terdapat pada tempe koro babi dengan
perlakuan rajang maupun cacah pada leme fermentasi 42 dan 48 jam, yaitu
mencapai 0 mg/g bahan.
4. Variasi pengecilan ukuran dan lama fermentasi berpengaruh terhadap
kadar total fenol tempe koro babi, semakin kecil ukuran biji koro dan
semakin lama waktu fermentasi maka kadar total fenolnya semakin kecil.
5. Pada fermentasi 0, 30, 36, 42, dan 48 jam kadar total fenol biji koro babi
cacah berturut-turut adalah 0,014750%, 0,149900%, 0,201825%,
0,170400%, dan 0,234400%, sedangkan untuk biji koro babi rajang adalah
0,014750%, 0,152650%, 0,178300% 0,162750% dan 0,192620%.
6. kadar total fenol terendah terdapat pada tempe koro babi dengan perlakuan
cacah dengan lama fermentasi 48 jam.
B. SARAN
Perlu penelitian lebih lanjut terhadap kadar asam sianida dan kadar total
fenol pada tempe koro-koroan selain tempe koro babi dengan variasi pengecilan
ukuran dan lama fermentasi.
xliii
DAFTAR PUSTAKA
Ali, Iqbal. 2008. Buat Tempe Yuuuk. http://iqbalali.com/2008/05/07buat-tempe-yuuuuk/. Didownload februari 2009 pukul 16.00WIB.
Anonim. 2006. Sianida. www.wikipedia.org/wiki/sianida
Anonim, 2008a. Kacang Babi (Vicia faba L.). http:// www.plantamor.com. Didownload pada tanggal 2 Februari 2009, pukul 16.00 WIB.
Anonim, 2008b. Detil data Vicia faba Linn. http:// www.kehati.or.id/florakita/ Didownload pada tanggal 2 Februari 2009, pukul 16.10 WIB.
Anonim, 2008c. Beans, fava in pod, raw. http:// www.nutritionfacts.com. Didownload pada tanggal 2 Februari 2009, pukul 16.15 WIB.
Anonim, 2008d. Alternatif Kacang-kacangan Non Kedelai untuk Tahu dan Tempe. http://www/litbang.deptan.go.id/berita/one/597/
Anonim. 2008e. Usaha Makanan dari Tempe. http://koperasi-jawatimur.net/index.php?pilih=hal&id. Didownload pada tanggal 2 Februari 2009, pukul 16.00 WIB.
Apriadji, Harry. 2008. Kedele dan Tempe Masih Dianggap Sepele. www.docudesk.com. Diakses 29 Juli 2008 Jam 20.45 WIB
Ardiansyah, 2007. Antioksidan dan Peranannya Bagi Kesehatan. www.chaptereislamicspace.wordpress.com/2007/01/24/antioksidan-dan-peranannya-bagi-kesehatan/-32k
Astuti, Mary., Meliala, Andreanyta., Fabien, Dalais., wahlq, Mark 2000. Tempe a nutritious and healthy food from Indonesia. Asia Pasific J Ciin Nutr(2000) 9(4): 322-325. http//:iqbali.com/2008/05/07/buat-tempe-yuuuuuk/. Didownload 16 februari 2009 pukul 16.00WIB.
Bayu Kanetro dan Retno Hastuti, 2006. Ragam Produk Olahan Kacang – kacangan. Universitas Wangsa Manggala Press. Yogyakarta
Buckle, K. A., Edwards, H., Fleet, G.H., & Wooton, M.. 1985. Ilmu Pangan. UI Press. Jakarta.
Burgess, J. R., dan Feng Gao. 2000. The Antioxidant Effects of Inositol Phosphates. 11: 189-190.
Cook dan Samman. 1996. Flavonoids-Chemistry, Metabolism, Cardioprotective Effects, and Dietary Sources. Nutricional Biochemistry 766-76. New York.
Desti Utami. 2007. Antioksidan. www.halalguide.info.destiutami.wordpress.com/2007/02/27/14/-27k
32
xliv
Earle, R. L. 1969. Satuan Operasi dalam Pengolahan Pangan. Sastra Hudaya.Bogor
Erdman J. W. and K.E. Weingartner. 1981. Nutritional Implications. J. Am Oil Chem Soc.56: 736-71
Ferlina, Shinta. 2009. Tempe. http//www.adln.lib.unair.ac.id/go.php. 16 februari 2009 pukul 16.00WIB.
Hartati dan Ersam. 2006. Dua Senyawa 4-Fenilkumarin pada Fraksi non Polar dari Ekstrak Etil Asetat Batang Garcinia Balica Miq. (Mundu Alas). Kelompok Penelitian Kimiawi Tumbuhan - ITS Jurusan Kimia, FMIPA ITS, Surabaya
Hestining Pupus Pangastuti dan Sitoresmi Triwibowo. 1996. Penelitian Proses Pembuatan Tempe Kedelai II. Pengaruh lama fermentasi terhadap kandungan asam fitat dalam tempe kedelai. Cermin Kedokteran No 108. Jakarta
Jarso, M. & Keneni, G., 2006. Vicia faba L. Protabase. Brink, M. & Belay, G. (Editors). PROTA (Plant Resources of Tropical Africa / Ressources v g tales de l’Afrique tropicale), Wageningen, Netherlands. http://database.prota.org/search.htm. didownload pada 16 februari 2009 pukul 16.00WIB.
Kasmidjo. R B. 1990. TEMPE Mikrobiologi dan Biokimia Pengolahan serta Pemanfaatannya. Pusat antar Universitas Pangan dan Gizi. UGM. Yogyakarta.
Khokhar, S. dan Pushpanjali. 1994. Phytate Content of Indian Foods and intakes by Vegetarian Indian of Hisar Region, Haryana State. J Agric Food Chem 42:2440-2444.
Kumalaningsih, Sri. 2007. Antioksidan, Sumber, dan Manfaatnya. www.antioxidantcentre.com/index2.php?option=com_content&do_pdf=1&id=14. [17 Juli 2008, 11.20].
Laela Nur Rochmah. 2008. Skripsi Kajian Kadar Asam Fitat dan Kadar Protein Selama Pembuatan Tempe Koro Benguk (Mucuna pruriens) dengan Variasi Pengecilan Ukuran dan Lama Fermentasi. UNS. Surakarta.
Made Astawan, 2004. Tetap Sehat dengan Produk Makanan Olahan. Tiga Serangkai, Solo.
Medikasari dan Marniza. 2007. Studi Mutu Kecap Benguk: Pengaruh Jenis dan Konsentrasi Kapang pada Fermentasi Koji. Teknologi Hasil Pertanian. UNILA. Lampung.
xlv
Muchtadi, D. 1998. Kajian gizi produk olahan kedelai. Dalam Nuraida, L. dan S. b pada Berbagai Perlakuan Pencucian dalam Pembuatan Tempe. Skripsi Jur FTP UGM. Yogyakarta
Nuraida, L. dan S. Yasni (Eds.)1998. Kajian Gizi Produk Olahan Kedelai. Prosiding Seminar Pengembangan Pengolahan dan Penggunaan Kedelai selain Tempe. Kerjasama Pusat Studi Pangan dan Gizi-IPB dengan American Soybean Association. Bogor.
Retnaningsih, Ch., 1996. Koro, Legume Lokal Bergizi Tinggi. www. Suara Merdeka-koro.htm.
Sathe, S.K. & Venkatachalam, M., 2002. Influence of Processing Technologies on Phytate and Its Removal. Dalam : N. Rukma Reddy & Shridar K. Sathe (ed.), 2002. Food Phytates. CRC Press, Florida.
Setyastuti Purwanti. 2004. Kajian Suhu Ruang Simpan Terhadap Kualitas Benih Kedelai Hitam dan Kedelai Kuning. Ilmu Pertanian Vol.11 No.1,2004 :22-31
Shi, J., Konesh A, David Y., Yukio K., & Gauri M. 2004. Phytate from edible beans: chemistry, processing and health benefits. Food, Agriculture & Environment Vol.2 (1) : 49-58. WFL Publisher.
Souâd Akroum. 2009 . Antimicrobial, Antioxidant, Cytotoxic Activities and Phytochemical. European Journal of Scientific Research ISSN 1450-216X Vol.31 No.2 (2009), pp.289-295 © EuroJournals Publishing, Inc. 2009. http://www.eurojournals.com/ejsr.htm. didonload tanggal 19 Oktober 2009.
Sovia Lenny. 2006. Senyawa Flavanoida, Fenil Propanoida Dan Alkaloida. Departemen Kimia Universitas Sumatra utara.
Sri Handajani dan Windi Atmaka. 1992. Analisa Sifat Phisis-Khemis Beberapa Biji Kacang-kacangan; Kekerasan; Kualitas Tanak; Protein; dan Kandungan Mineralnya. Lembaga Penelitian Universitas Sebelas Maret Surakarta. Surakarta.
Sri Handajani. 1993. Pengaruh Larutan Perendam dan Perebus Terhadap Kekerasan, Kualitas Tanak, dan Kandungan Mineral Biji Kacang-kacangan. Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret. Surakarta
Sri Handajani. 1996. Pengembangan Budidaya dan Pengolahan Hasil Kacang-kacangan Sebagia Usaha Produktif Wanita di Lahan Kering Daerah Tangkapan Hujan Waduk Kedung Ombo. Pusat Studi Wanita Lembaga Penelitian Universitas Sebelas Maret. Surakarta.
Sri Raharjo, 2004. Kerusakan Oksidatif pada Makanan. Pusat Studi Pangan dan Gizi UGM, Yogyakarta.
xlvi
Sudarmadji, 1975. Certain Chemical and Nutritional Aspect of Soybean tempeh. Michigan State University.
Sugiantoro. 2008. Bagaimana Hidup Sehat Tanpa Obat. www.bali-community.blogspot.com/2008/04/susu-kedelai-anti-kankertumor-vs-susu.html. [17 Juli 2008, 10.00 WIB].
Sullivan, Jack. 2008. Anthocyanin. www.charlies-web.com/specialtopics/anthocyanin.html. 15 Juli 2008. 18.16 WIB
Sutikno Arthur. 2009. Fermentasi Tempe. http://sutikno.staff.uns.ac.id/about/. 15 Juli 2009. 16.30 WIB
Suyitno, Haryadi, Supriyanto, Budi Susmadji, Haryanto G., Adi Djoko Guritno, & Wahyu Supartono. 1989. Petunjuk Laboratorium Rekayasa Pangan. PAU Pangan dan Gizi UGM. Yogyakarta.
Tangendjaja, B. 1979. Studies on the dephosphorilation of phytic acid in rice bran. University of New South Wales, Sydney
Winarno, FG. 2002. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta
Yhona Nitya. 2008. Antioksidan. http://iniyhona.blogspot. com/2008/06/ antioksidan.html. 25 januari 2010. 09.30 WIB
xlvii
Recommended