Troponin -T high sensitive - B&S Zentrallabor des Troponin -Ths Assays • Erhöhungdes...

Benjamin DieplingerBenjamin Dieplinger

TroponinTroponin--T high sensitiveT high sensitive

Entwicklung des Entwicklung des TroponinTroponin--TT hshs AssaysAssays

• Erhöhung des Probenvolumens von 15 µl auf 50 µl

• Signalverstärkung durch den Einsatz hoch-optimierter Antikörper-Ru Konjugaten

• Erhöhung des Signal/Rausch Verhältnisses durchVerringerung des Hintergrundsignals

• Verwendung des gleichen Antikörpers wie beim 4. Generations Troponin-T Assay

• Signal-Antikörper als Maus-Human chimere Antikörper(Reduktion von Interferenzen durch heterophileAntikörper)

Troponin-T Assay Design

1 : 101 : 10Verdünnung

3-10 000 ng/l0,01 – 25 ng/mlMessbereich

18 Minuten18 MinutenInkubationszeit

Serum, Heparin- und EDTA-Plasma

Serum, Heparin- und EDTA-Plasma

Probentyp

50 µl 15 µlProbenvolumen

TnT high sensitiveTnT Gen 4th

TroponinTroponin--TT hshs Plasma Konzentrationen in 616 BlutspendernPlasma Konzentrationen in 616 Blutspendern

n=3679 n=1338

99. Perzentile = 14 ng/l

Giannitsis et al. Clin Chem 2009 (Epub ahead of print)

TroponinTroponin--TT hshs InterInter--AssayAssay PrPrääzisionzision

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

≤ 10% CV bei 13 ng/l

99. Perzentile Wert = 14 ng/l

Giannitsis et al. Clin Chem 2009 (Epub ahead of print)

Das Haus

TroponinTroponin--TT hshs Vergleich vs. Gen 4. Vergleich vs. Gen 4. TroponinTroponin--TT

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

0

2000

4000

6000

8000

10000

0 2000 4000 6000 8000 10000

Elecsys® Troponin T 4th gen [pg/mL] E170

Ele

cs

ys

® h

sT

rop

on

in T

[p

g/m

L]

E1

70

DR

01

P/B Regression

Y = 1.01 * X + 20.035

md(95) = 473.344

N = 182 r = 0.9914

t = 0.8890

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

0 500 1000 1500 2000 2500 3000

Elecsys® TnT STAT 4th gen [pg/mL] E2010

Ele

cs

ys

® h

s T

nT

[

pg

/mL

] E

20

10

P/B Regression

Y = 0.928 * X + 24.543

md(95) = 111.223

N = 246 r = 0.9899

t = 0.9140

Giannitsis et al. Clin Chem 2009 (Epub ahead of print)

TroponinTroponin--TT hshs misst im niedrigen Bereich hmisst im niedrigen Bereich hööhere Wertehere Werte

30 ng/L (0.03 ng/ml) Gen 4. Troponin-T

entsprechen

~ 50 ng/L Troponin-T hs

3-10 000 ng/l0.01 - 25 ng/mlMessbereich

13 ng/l0.03 ng/mlLoQ (10% CV)

100 ng/l0.1 ng/mlWHO cut-off

14 ng/l0.01 ng/ml99. Perzentileeiner gesundenPopulation

3 ng/l

5 ng/l

Analytische Sens.

0.01 ng/ml

LoB

LoD

Troponin-T hsTroponin T Gen 4th

TroponinTroponin--TT AssayAssay SpezifikationenSpezifikationen

(Circulation 1979)

(Clin Chem, EHJ 2007)

Universal Universal definitiondefinition of of myocardialmyocardial infarctioninfarction

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

„„Consensus Consensus documentsdocuments highlightshighlights on on TroponinsTroponins““

• cTn (T and I) sind die bevorzugten Marker für die Diagnose des Myokardinfarktes (MI)

• In einem klinischen Setting konsistent mit Myokardischämie, ist die Detektion eines Anstiegs und/oder eine Abfalls von Tnder Eckpfeiler der Myokardinfarkt-Diagnose

• Optimale Präzision bei der 99. Perzentile des oberenReferenzbereiches (URL) für jeden Assay ist alsVariationskoeffizient (VK) ≤10% definiert

Thygesen et al. Eur Heart J 2007;28:2525-38

Kriterien fKriterien füür einen akuten Myokardinfarktr einen akuten Myokardinfarkt

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

Nachweis von Anstieg und/oder Abfall von kardialen Biomarkern

(vor-zugsweise Troponin) mit zumindest einem Wert über der 99.

Perzentile der oberen Referenzbereichsgrenze (URL) zusammen

mit der Evidenz von myokardialer Ischämie mit zumindest einem

der folgenden Punkte:

� Symptome der Ischämie

� EKG Veränderungen indikativ für eine neue Ischämie(neue ST-T Veränderungen oder neuerLinksschenkelblock)

� Entwicklung pathologischer Q Wellen im EKG

� Bildgebende Evidenz eines neuen Verlustes an sichtbarem Myokard oder neue regionale Abnormalitätder Wandbewegung

Thygesen et al. Eur Heart J 2007;28:2525-38

CategorisationCategorisation of of acuteacute coronarycoronary syndromessyndromes

NACB WRITING GROUP MEMBERS et al. Clin Chem 2007;53:552-74

ClassificationClassification of 115 of 115 patientspatients withwith ACS ACS accordingaccording to to thethe

Universal Definition of Universal Definition of MyocardialMyocardial InfarctionInfarction

{ {On Admission Final Diagnosis

(within 6-24h)

Giannitsis et al. Clin Chem 2009 (Epub ahead of print)

Cut off:

0.03 ng/ml for Troponin-T 4. Gen (≤ 10% CV)

14 ng/L for Troponin-T hs (99th percentile, ≤ 10% CV)

CumulativeCumulative PercentagePercentage of of patientspatients withwith TroponinTroponin--TT valuevalue

aboveabove decisiondecision cutpointcutpoint accordingaccording to to onsetonset of of symptomssymptoms

Giannitsis et al. Clin Chem 2009 (Epub ahead of print)

DiagnosticDiagnostic performanceperformance of of TroponinTroponin AssaysAssays at at presentationpresentation in in

patientspatients withwith symtomssymtoms suggestive of suggestive of acuteacute MCI (n=718)MCI (n=718)

Reichlin T et al. N Engl J Med 2009;361:858-67

0.90 (0.86-0.94)Roche TnT

gen 4th

0.96 (0.94-0.98)Siemens TnI-

Ultra

0.94 (0.92-0.97)Roche TnI

0.96 (0.94-0.98)Roche cTnT-

hs

0.96 (0.94-0.98)Abbott cTnI

Architect

AUC at

presentation

DiagnosticDiagnostic performanceperformance of of TroponinTroponin AssaysAssays at at presentationpresentation

(123 (123 patientspatients withwith MCI and 595 MCI and 595 patientspatients withoutwithout MCI)MCI)

Reichlin T et al. N Engl J Med 2009;361:858-67

DiagnosticDiagnostic AccuracyAccuracy of of TroponinTroponin AssasysAssasys at at PresentationPresentation

accordingaccording to time to time sincesince onsetonset

Reichlin T et al. N Engl J Med 2009;361:858-67

Distribution of Distribution of TroponinTroponin--TT hshs in in patientspatients withwith stablestable CAD and CAD and

in in healthyhealthy bloodblood donorsdonors

n=3679 n=1338

Omland T et al. N Engl J Med 2009;361:2538-47

Association Association betweenbetween TroponinTroponin--TT hshs as as continouscontinous variable and variable and

CardiovascularCardiovascular OutcomesOutcomes

Omland T et al. N Engl J Med 2009;361:2538-47

IncidenceIncidence of of CardiovascularCardiovascular DeathDeath AccordingAccording to to QuartileQuartile of of

TroponinTroponin--TT hshs concentrationsconcentrations

Omland T et al. N Engl J Med 2009;361:2538-47

Differential Differential diagnosisdiagnosis of of increasedincreased TroponinTroponin in in patientspatients withoutwithout

acuteacute coronarycoronary symdromesymdrome oror heartheart failurefailure

Kelley WE et al. Clin Chem 2009;55:2098-112

Vergleichsmessungen B&S Zentrallabor Vergleichsmessungen B&S Zentrallabor

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

• 03.12.-20.12.2009 wurden ca. 1.000 Troponin-T hs und 4. Gen Troponin-T Bestimmungen parallel gemessen

• 400 (40%) Troponin-T hs positiv bei einem cut-off von 14 ng/l

• 200 (20%) 4. Gen Troponin-T positiv bei einem cut-off von 0.03 ng/ml

• 100 (10%) 4. Gen Troponin-T positiv bei einem cut-off von 0.1 ng/ml

Zusammenfassung Zusammenfassung TroponinTroponin--TT hshs

Omland T et al. N Engl J Med 2009;10.1056/NEJMoa0805299

• Volle Entsprechung der Forderungen in den ESC/ACC Guidelines (weniger als 10 % VK bei der 99. Perzentile des Referenzbereiches)

• Steigerung der diagnostischen Sensitivität auf 95% (bei cut-off 14 ng/l, Spezifität 80%) im Vergleich zu 4. Gen Assay Troponin-T mit einer Sensitivität von 72% (cut- off 0.03 ng/ml, Spezifität 97%)

• Der bisher im Labor verwendete WHO cut-off von 0.1 ng/ml (4. Gen Troponin T) entspricht 100 ng/l mit dem neuen Troponin-T hs Test