Vorläufiges Programm, interaktiv 1. Einordnung der Biotechnologie als eine Einführung 2. Der...

Vorläufiges Programm, interaktiv

1. Einordnung der Biotechnologie als eine Einführung

2. Der jetzige Stand3. Einige molekularbiologische Grundlagen4. Biotechnologische Methoden, die man kennen muss! Teil I5. Was sind Mutanten und wie werden sie erzeugt?6. Wie macht man gentechnisch veränderte

Pflanzen? 7. Biotechnologische Methoden, die man kennen

muss! Teil II8. Umweltaspekte und ethische Erwägungen

9. Biotechnologische Diagnostik

Reaktionen zum Kopieren von Sequenzen

Die Grundreaktion

1. PCR

1. PCR

1. PCR

1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung

1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung

1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung

3´ 5´

5´ 3´

5´

5´

3´

3´

Viele Fehler sind möglich!1. PCR

Die Primerlänge ist kritisch

1. PCR

Prinzip der PCR

1. PCR

1. PCR

1. PCR

1. PCR

1. PCR

1. PCR

Verwendung der PCR-Reaktion1. Amplifizierung von DNA-Fragmenten zwischen den Primern2. Quantifizierung von DNA-Fragmenten3. Quantifizierung von RNA-Konzentrationen4. Lokalisierung von Inserts (getaggte Mutationen) in der DNA5. Charakterisierung von Genotypen (RAPD et al.)6. Einsatz für molekularte Marker

1. PCR

2. Sequenzierung

2. Sequenzierung

2. Sequenzierung

2. Sequenzierung

1234567 dATPαS

ATP-

ATP-

+ PPi

DNA polymerase — an enzyme that

synthesises DNA using nucleotide

phosphate (dNTP) according to the

single stranded DNA template. PPi

(inorganic phosphate) is formed as a by-

product.

ATP sulfurylase — an enzyme that forms

ATP from adenosine phosphosulfate (APS)

and pyrophosphate (PPi).

Luciferase — an enzyme that catalyzes the

conversion of luciferin to oxyluciferin

with the liberation of light. It requires ATP.

Apyrase – an enzyme that destroys NTPs:

catalyses e.g. the hydrolysis of ATP to yield

AMP and inorganic phosphate Pi.

?

Key substrate: not used by DNA polymerase

Adenosine-5´-phosphosulphate (APS), substrate for ATP sulfurylase:

PPi + APS + ATP sulfurylase → ATP + by-product

APS

dATP

?

Key substrate:

Deoxyadenosine alpha-thiotriphosphate (= dATPαS):

accepted by DNA polymarese as ATP

but not by luciferase.

(Synthesis)

dATPαS

1. Einordnung der Biotechnologie als eine Einführung

2. Der jetzige Stand3. Einige molekularbiologische Grundlagen4. Biotechnologische Methoden, die man kennen muss! Teil I5. Was sind Mutanten und wie werden sie erzeugt?6. Wie macht man gentechnisch veränderte

Pflanzen? 7. Biotechnologische Methoden, die man kennen

muss! Teil II8. Umweltaspekte und ethische Erwägungen

9. Biotechnologische Diagnostik