View
144
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
Magorzata Luchter
IMMUNOCYTOCHEMIAWykrywanie i lokalizacja w/na komrkach antygenw przy pomocy swoistych przeciwcia immunohistochemia (tkanki) zastosowanie w badaniach biologii komrki a take diagnostyce: na podstawie charakterystycznego markera lub grupy markerw dla danej jednostki chorobowej
IMMUNOCYTOCHEMIA W DIAGNOSTYCEchoroby autoimmunologiczne choroby neurodegeneracyjne choroby serca zakaenia wirusami, bakteriami, grzybami NOWOTWORY
choroby autoimmunologiczneANA antinuclear antibody, przeciwciaa skierowane przeciwko zawartoci jdra komrkowego. Czyli oglne okrelenie na przeciwciaa przeciwko biakom histonowym, towarzyszcym centromerom, topoizomerazom, rybonukleoproteinom. wysokie stenie w surowicy w przypadku chorb autoimmunologicznych takich jak: tocze rumieniowaty, zwyrodnienie staww, syndrom Sjgren`a, zapalenie wtroby i inne
choroby autoimmunologicznetest z komrkami Hep-2, modyfikacje?
-test mwi o obecnoci choroby autoimmunologicznej -ale jest on przeprowadzany wobec ogu antygenw antyjdrowych -przyblione okrelenie typu choroby na podstawie wzoru (dalsze badania)
choroby autoimmunologiczne
http://ww2.mymedicnews.com/article.asp?newsid=761
choroby autoimmunologiczneLIMITATIONS OF THE PROCEDURE 1. The ANA test is a laboratory diagnostic aid and by itself is not diagnostic. (Prby pewnej normalizacji) Positive ANA may be found in apparently healthy individuals. It is therefore imperative that ANA results be interpreted in light of the patients clinical condition by a medical authority. Wiek, pe, uywki... 2. SLE patients undergoing steroid therapy may have negative test results. 3. Many commonly prescribed drugs may induce ANA (6,7). 4. One autoantibody pattern may partially or completely obscure the diagnostic features of the other. In such instances, it is necessary to titrate the serum. 5. No definitive association between the pattern of nuclear fluorescence and any specific disease state is intended with this product.http://eng.genericassays.com/prod/AL/AL_E_8100.pdf
choroby autoimmunologiczneBadania nad zastosowaniem immunocytochemii w diagnostyce przykad pemfigoidu klasycznego przewlekej choroby skry o podou autoimmunologicznym Przeciwciaa przeciwko skadnikowi dopeniacza C3d
choroby autoimmunologiczne
Formalin fixed tissue, rabbit antihuman polyclonal antibody against C3d Vision BioSystems Bond polymer alkaline phosphatase Red Detection Katrin Pfaltz et al.
Choroby neurodegeneracyjne
Alzheimer: W przypadku Alzheimera stosuj si m.in przeciwciaa przeciwko ubikwitynie- biaku sucym do oznaczania le sfadowanych biaek przeznaczonych do proteasomowej destrukcji. Obserwuje si akumulacj tych przeciwcia w obrbie pytki amyloidowej oraz w obrbie spltek neurofibrylarnych agregatw hiperfosforylowanych biakek tau przeciwciaa anty-tau
Choroby neurodegeneracyjne
Amyloid precursor protein alfa lub beta secretaza materiay informacyjne z kursu stres komrkowy i apoptoza
Choroby neurodegeneracyjne
pytka gra, spltki-dhttp://www.propath.com/newsletters-immunohistochemistry-173/157-august-2002-ubiquitin-immunohistochemistry-in-alzheimers-disease
Choroby neurodegeneracyjne
Identyfikacja chorb prionowych: specyficzne przeciwciao anty PrPsc
Vladka Curin Serbec et al. 2003
choroby serca
Przykad diagnostyki zawau minia sercowego (MI-Infarcted myocardium) przeciwciaa anty-C9 oraz przeciwko troponinie T metoda pozwala na wczeniejsze potwierdzenie zawau gdy zwyke metody histochemiczne s skuteczne dopiero po 12h od zaobsrerwowanych objawwtkanka serca zdrowa MI obecno troponiny T + obniony obecno C9 + -
choroby serca
Diagnostyka HIV
standardowo : ELISA, WESTERN BLOT, RT-PCR na obecno antygenw(p24- rzadko), przeciwcia/ RNA wirusa w linie, serum lub moczu. Dodatkowo symptomy kliniczne: (powikszenie wzw chlonnych, objawy z drg oddechowych, zator drg nosowo-gardwych ) bardziej wyrafinowany sposb detekcji biopsja m.in. wzw chonnych, przeciwciao anty p24 (moliwa anlaziza tkanek z innych miejsc- puc, mzgu, migdaki) obecno virionw w germinal center FDC, ale te czsto w CD4+, aktywowanych CD8+, makrofagach, NK
germinal centres, p24 antibody staining (czerwone)Mufaddal T Moonim et al.
http://www.pinnacletoxicology.com/std_te sting/hiv_picture.htm
Diagnostyka nowotworwprzeciwciaa specyficzne dla biaek charakterystycznych wobec danego typu nowotworu przeciwciaa skierowane przeciwko biakom filamentw porednich przeciwciaa skierowane przeciwko wydzielanym biakom (nowotwory tk endokrynnych)
Diagnostyka nowotworwspecyficzne antygeny*
PR- progesteron, ER- estrogen receptors-luminal non luminal; HER-2 human epidermal growth factor receptor-2, CK5/6 or epidermal growth factor receptor (EGFR)- basal
Diagnostyka nowotworwBadanie immunocytochemiczne pozwala na rozrnienie rnych subtypw co z kolei daje moliwoc okreslenia teoretycznego czasu przeycia oraz dostosowania terapii np. Wysokie stenie antygenu Her-2 wiadczy o agresywnym typie nowotworu ale jednoczenie daje wiksze szanse na powodzenie terapii z wykorzystaniem przeciwcia monoklonalnychhttp://www.biooncology.com/research/hdis/her2/index.html
Antigen Factor VIII-related antigen
Tumor Specificity guzy naczyniowe
Gross cystic disease fluid protein
Rak piersi
czerniak, renal angiomyolipoma HMB-45 (naczyniakominiakotuszc zak nerek;) ) misniowoguzy misni gadkich i specyficzna aktyna szkieletowych
HMB 45- Przeciwciao stworzone na podstawie ekstraktu z czerniaka w 1986, okazao si byc specyficzne: antygen przeciwko ktremu jest ono skierowane wystpuje tylko w podowych melanocytachFormalin fixed paraffin embedded human melanoma stained with ab787, using ABC and AEC chromogen http://www.abcam.com/melanoma-antibodyhmb45-ab787.html#ab787_1.jpg
mioglobinaProstate-specific antigen Thyroglobulin
guz misni gadkichrak prostaty
nowotwr komrek nabonka pcherzykowatego tarczycy
Diagnostyka nowotworwfilamenty porednie
- brak polaryzacji; dimery spolaryzoawne, tetrameryfunkcjonalne filamenty- uoenie head to tail
Diagnostyka nowotworwfilamenty porednie
Podzia filamentw porednich:Typ I-keratyny kwane Typ II keratyny zasadowe heterodimery! z typu I i II, komrki epitelialne Typ III Desmina- komponent sarkomerw (linia Z) w komrkach miniowych. GFAP (glial fibrillary acidic protein) znajduj si w astrocytach i innych komrkach gleju. periforyna w neuronach periferycznych. VIMENTYNA- w fibroblastach, leukocytach, komrkach endotelialnych naczy krwiononych- komrki mezodermy Typ IV -interneksyna Neurofilamenty - wzdu aksonw neuronw. Synemina, Syncoilina Typ V Nuclear Lamins
Diagnostyka nowotworwfilamenty porednie
teoretycznie moliwo rozrnienia typw nowotworw w zalenoci od ich pochodzenia ektodermalne, mezodermalne na podstawie filamentow porednich niestety zdarza si, e niektre nowotwory pochodzenia ektodermalnego s pozytywne dla vimentyny itd
Pojedyncza komrka oraz mikroprzerzut komrek raka piersi do szpiku kostnego. Barwienie przeciwciaem przeciwko cytokeratynie 8, 18 i 19 (APAAP)STEPHAN BRAUN et al.
Bibliografia
http://www.propath.com/newsletters-immunohistochemistry173/157-august-2002-ubiquitin-immunohistochemistry-inalzheimers-disease http://www.alphalabs.co.uk/product-information/diagnosticproducts/immunology.aspx http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK20935/ http://en.wikipedia.org/wiki/HIV_test http://www.abcam.com/melanoma-antibody-hmb45ab787.html#ab787_1.jpg http://www.biooncology.com/research/hdis/her2/index.html http://eng.genericassays.com/prod/AL/AL_E_8100.pdf Vladka Curin Serbec et al., Monoclonal Antibody against a Peptide of Human Prion Protein discriminates between Creutzfeldt-Jacobs Disease-affected and Normal Brain Tissue
Bibliografia
Katrin Pfaltz et al., C3d immunohistochemistry on formalin-fixed tissue is a valuable tool in the diagnosis of bullous pemphigoid of the skin Rodney T. Miller, Immunohistochemistry in the Recognition of Early Myocardial Infarction Stephan Braun et al., Cytokeratin-positive cells in the bone marrow and survival of patients with stage I, II, or III breast cancer Fiona M. Blows et al., Subtyping of Breast Cancer by Immunohistochemistry to investigate a relationship between Subtype and Short and Long Term Survival: A Collaborative Analysis of Data for 10,159 Cases from 12 Studies Mufaddal T Moonim, et al., Identifying HIV infection in diagnostic histopathology tissue samples the role of HIV-1 p24 immunohistochemistry inidentifying clinically unsuspected HIV infection: a 3-year analysis
Recommended