Gota gruesa

El diagnostico microscópico de Parásitos está basado en la identificación de los parásitos coloreados libres (gota gruesa) o intracelulares en el eritrocito (extendido fino). Los parásitos se identifican por su forma y por la coloración diferencial de sus componentes, es decir, citoplasma, cromatina y pigmento, y se deben distinguir de los elementos de la sangre, de otros microorganismos sanguíneos y de microorganismos o artefactos que puedan estar presentes en la lámina o en el colorante.

Las coloraciones de Giemsa y de Wright tienen colorantes ácidos (eosina) y básicos (azul de metileno) que colorean los componentes celulares acidofilicosy basofilicos, respectivamente. Así tenemos, que la gota gruesa es más sensible y el extendido fino es más específico. En el laboratorio clínico se recomienda la utilización de ambas muestras en una sola lámina.

Gradilla de Tinción

4 Portaobjetos de 25x75 mm

Lancetas

Aceite de Inmersión

Colorante Wright

Colorante Giemsa

Muestra Biológica con EDTA (opcional).

Realizar la punción capilar (se puederealizar también venosa, aunque nose requiere de mucha sangre).

Colocar una gota en un portaobjetosy con el ancho de otro hacer el

extendido de sangre.

En otro portaobjetos, colocar una gotagruesa y hacer un cuadrado de 1.5 mm.

Dejar secar las 2 muestras

Colocamos la gota gruesa en la gradillade tinción, en posición horizontal.

Para fijar la muestra cubrimos elporta con metanol durante 3 minutos.Escurrimos y lo dejamos secar al aire.

Se cubre el portaobjetos con elcolorante Giemsa, dejándoloactuar de 10-15 minutos.

Escurrimos y lavamos con aguadestilada y se deja secar. Posteriormente

se le coloca una gota de aceite deinmersión y se observa al microscopio.

Teñir el frotis con 2.5 ml decolorante Wright por 5 minutos

Sin tirar el colorante, añadir2ml de Solución de Buffer con

pH de 6.8 y dejarlo reposarpor 6 minutos

Homogeneizar soplando conuna pipeta en forma de zigzag

Enjuagar con abundanteagua destilada y observar

al microscopio.

Es identificar parásitos sanguíneos. Principalmente podemos encontrar Plasmodium spp, Leishmania spp, Tripanozoma cruzi, Toxoplasma Gondii y las Micro filarias.

El resultado debería ser negativo. Cuando no lo es, se vuelve a realizar la prueba y/o realizar otro tipo de examen para comprobar si es positivo o fue un error del técnico.

Leishmania spp. Microfilarie. Plasmodieum spp.

Toxoplasma gondii Trypanosoma cruzi