каріотипування 3 укр

КАРІОТИПУВАННЯ

=

ЦИТОГЕНЕТИЧНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ

В ЛАБОРАТОРІЇ СІНЕВО З ЖОВТНЯ 2013 Р.

Каріоти́п — сукупність ознак

(число, розміри, форма,

структура) повного

набору хромосом

Каріотипування

(= цитогенетичне дослідження)

– це аналіз каріотипу клітин

людини під час їх поділу в

культурі шляхом мікроскопії

пофарбованих хромосом

Каріотипування дозволяє

виявити:

-кількісні аномалії

хромосомного набору

- cтруктурні аномалії

хромосом

Числові

1. Анеуплоідія – зміна

числа хромосом,

некратна

хромосомному набору

2. Поліплоідія –

зміна числа хромосом,

кратна

хромосомному набору

Типи хромосомних аберацій

(від лат. aberratio – відхилення)).

Структурні

del –делеція

dup -дуплікація

t -транслокація

inv - інверсія

der - дериватна хр.

мar - маркерна хр.

Синдроми:

Дауна (тр. 21)

Эдвардса (тр. 18)

Патау (тр. 13)

Кляйнфельтера

(47, XXY),

Тернера (45, Х)

Анеуплоідні каріотипи

В каріотипі зі збалансованою

перебудовою є в наявності повний набір

генів, але розташування їх в межах

хромосом або між хромосомами

відрізняється від нормального

Носії таких змін у більшості випадків

фенотипово нормальні, але для їх потомства

існує великий ризик мати незбалансований

каріотип

Структурні збалансовані

зміни хромосом

Якщо обоє батьків мають збалансовану

аномалію, ризик переривання вагітності

складає 25-50%

В парі, де таку аномалію має один з батьків,

ризик народження дитини з незбалансованим

хромосомним набором оцінюється в 1-15%

Структурні збалансовані

зміни хромосом

Покази для виконання каріотипування

(виконується 1 раз в житті):

- репродуктивні проблеми

- високий ризик

в результаті

пренатального

скринінгу

- діти з вадами

розвитку

Покази для виконання каріотипування:

репродуктивні проблемі

Згідно з результатами

цитогенетичного обстеження

подружніх пар з репродуктивними

проблемами частота хромосомних

аномалій для нашої популяції населення

варіюється від 4,3 % до 9,6 %

А.Д. Политко, Г.И. Лазок 1998; С.Г. Ворсанова и др., 1995; Г.В.Стефанович и др., 2002

• У пацієнтів з патологією репродукції в

каріотипах виявлені хромосомні зміни: інверсії,

збалансовані транслокації, анеуплоідії по

статевих хромосомах і т.д.

• У потенційних донорів гамет також виявлені

хромосомні перебудови в каріотипах.

• Структура хромосомних перебудов у всіх

обстежених суттєво не відрізнялась

Висновок: необхідно обовязково виконувати

каріотипування всім пацієнтам з первинним

безпліддям, звичними невиношуванням та перед

циклами ЕКЗ

Покази для проведення каріотипування:

високий ризик в результаті пренатального

скринінгу

International Society for

Prenatal Diagnosis, January 2011

Остаточна діагностика

хромосомних аномалій

плоду можлива лише після

проведення інвазивних

процедур та каріотипування

Матеріал для дослідження

(який приймає лабораторія Синево):

- кров

- амніотична рідина / ворсини хоріону

- абортивний матеріал

- сперма

Загальні вимоги до забору матеріалу:

- перед забором матеріалу за 1-2 дні

виключити жирну, смажену їжу та алкоголь

- не раніше, ніж через 14 днів

після запальних захворювань чи

прийому антибіотиків

-Зберігання і доставка: при температурі +4+8°С

Матеріал для дослідження: кров

-не обовязково натщесерце

- матеріалом може бути

венозна чи пуповинна кров

-забір тільки в моновет –

Monovette, Li-Heparin LH/2.7ml

-зберігання та доставка: при температурі +4-+8°С, 24 – 48 годин

Матеріал для дослідження:

Амніотична рідина/ворсини хоріону

- лікарська маніпуляція, матеріал приносний

-кількість амніотичної рідини (мл)

відповідає строку вагітності

- забір в стерильну пробірку

(фіз.р-н + гепарин – для ворсин хоріону)

- зберігання та доставка: при температурі +4 +8°С, 24 години

Матеріал для дослідження: abortus

- строк вагітності – 5 – 11 тижнів

- забір в стерильну ємність

до 100 мл (можливо з фіз.р-ном)

- матеріал повинен бути в нативному стані

- зберігання та доставка:

при температурі 24 – 48 (72) години

Матеріал для дослідження: еякулят

- забір в стерильну ємність

-матеріал повинен бути в нативному стані

- зберігання та доставка: при температурі +4 +8°С, 24 години

Цитогенетичні методи в

лабораторії

• культура клітин

• диференційне фарбування хромосом

(G-,C-,Q-техніки)

• FISH - fluorescence in situ hybridization

• PGD - предимплантационной

генетической диагностики

Каріотипування - це аналіз каріотипу

клітин людини під час їх поділу в культурі

шляхом мікроскопії пофарбованих хромосом

GTG фарбування –

диференційне

фарбування з

використанням трипсину

та барвника Гімзи (G-

полоси – темні)

GTG фарбування дозволяє:

виявити кількісні порушення каріотипу

ідентифікувати хромосоми

виявляти структурні зміни

(делеції, інверсії, транслокації,

ламкі місця)

GTG

фарбування

Виявлена

перицентрична

інверсія

9 хромосоми

(варіант норми)

FISH метод -

метод флюоресцентної гібридизації in situ

(fluorescence in situ hybridization)

Дозволяє ідентифікувати

конкретну хромосому або частину хромосоми,

невеликі зміни в структурі

Переваги методу FISH:

- висока точність

- швидкість проведення дослідження

(1 доба)

Інформація по окремих ослугах

Послуга 7007:

«Визначення каріотипу пацієнта

(хромосомний паспорт)»

Знижка 20% для подружньої пари

Послуга 7007: «Визначення каріотипу

пацієнта (хромосомний паспорт)»

- Подружні пари

(безпліддя, планування вагітності)

- Діти з вадами розвитку

(подтверждение диагноза)

- Діти з відставанням розвитку

(фізичному, психічному, статевому)


пацієнта (хромосомний паспорт)»


пацієнта, терміново»


пацієнта з використанням FISH-

методу»

Інформація по окремих послугах


абортуса з використанням FISH-методу»


абортуса з використанням FISH-методу та

гістологічним дослідженням матеріалу»

Послуги 7014, 7015: «Визначення каріотипу

абортуса … »

65% втрат вагітностей на ранніх

термінах мають хромосомну природу

Підтвердження хромосомної патології

завмерлої вагітності чи вагітності, що

перервалася спонтанно, є важливим для

адекватного прогнозу та планування

наступної вагітності



«Молекулярно – цитогенетичне

дослідження статевих клітин еякуляту

пацієнта методами FISH і TUNEL»

До послуги 7016:

Метод TUNEL (terminal

deoxynucleotide nick-end labeling)

дозволяє визначити

фрагментацію ДНК сперматозоїдів –

однієї з найбільш поширених

причин чоловічого безпліддя

(при нормальному каріотипі)

До послуги 7016: Покази для генетичного

тестування сперми:

• біохімічні, завмерлі, перервані вагітності, що повторюються

у жінок з нормальним каріотипом периферійної крові

• ембріони низької якості у жінок в віці до 35 років з

нормальним каріотипом периферійної крові

• нездатність сперми до запліднення яйцеклітини

• чоловіки після хіміо- чи променевої терапії

• чоловіки з олігозооспермією, тератозооспермією та

азооспермією

• безпліддя пари неясного походження



«Визначення каріотипу

пацієнта з використанням FISH-методу

для виявлення структурних

перебудов»


Структурні перебудови –

виникають внаслідок розривів в хромосомах

І зєднання кусків, що утворилися,

в інших сполученнях, ніж тих, що були раніше



«Каріотипування і діагностика

мікроделеційних синдромів

З використанням FISH – методу

(ДіДжорджи, Вільямса,

Прадера – Віллі/Ангельмана,

Вольфа-Хіршхорна, кошачого крику)»


Делеції -

(від лат. deletio — знищення)

хромосомні перебудови,

при яких відбувається втрата

ділянки хромосоми

Клінічне значення визначення делецій

Делеція короткого плеча 4 хромосоми -

синдром Вольфа — Хіршхорна

(1: 50 000)

Делеція короткого плеча 5 хромосоми –

синдром кошачого крику

(1:45 000, М1 : Ж1,3)

Клінічне значення

визначення делецій

Делеція 22 хромосоми -

синдром Ді Джо́рджи

(гіпопаратиреоз, кандидомікоз,

аномаліії розвитку носа, рота, вух; аплазія тімуса,

імунодефіцит – клітинний і гуморальний)




синдром Вільямса

(обличчя ельфа)

(дефекти ССС, помірна

Розумова відсталясть,

характерне обличчя)




синдром

Прадера – Віллі/Ангельмана

(1:10 000 – 25 000)

(мязова слабкість, гіпогонадизм, безпліддя,

ожиріння, низький розумовий рівень)

Результат каріотипування

Для ідентичності опису результатів

цитогенетичних досліджень використовується

Міжнародна цитогенетична номенклатура

(International System for Cytogenetic

Nomenclature, ISCN, 1995)

Каріотип описується в наступному

форматі:

[кількість хромосом], [статеві

хромосоми], [особливості]


Структурні перебудови, формат:

[номер хромосоми] [плече] [номер

ділянки][номер полоси]

q - довге плече хромосоми

p – коротке плече хромосоми

Приклад: 5p15.2 - коротке плече

5-ї хромосомы 15-ої ділянки 2-га

полоса


Приклад

Каріотип чоловіка з транслокацією 21-

х ділянок короткого (p) і довгого плеча

(q) 1-ої і 3-ої хромосом і

делецією 22-ої ділянки довгого плеча

(q) 9-ої хромосоми:

46, XY, t(1;3)(p21;q21), del(9)(q22)

ДЯКУЮ ЗА УВАГУ

Documents

каріотипування 3 укр