أ

دانشگاه آزاد اسالمی

واحد قائم شهر

پایان نامه جهت اخذ کارشناسی ارشد شیالتگرایش تکثیر و پرورش

عنوان:(Oligofructose( الیگوفروکتوز)Perbioticتاثیر پربیوتیک)

بر فاکتورهای رشد و تغذیه و فاکتورهای خونی و بازماندگی در بچه ماهی ازونبرون

استاد راهنما:دکتر حسینعلی خوش باور رستمی

استاد مشاور:دکتر محمد احمدی

نگارنده:مهسا خوش باور رستمی

1390زمستان

ب

سپاسگذاری

زیباتر از این کالم سعدی نتوان گفت که : » منت خدای را عز و جل که طاعتش موجب قربت است و به شکر اندرش

مزید نعمت« در گام اول چونان که که در تمام مراحل زندگی بPPدان توسPPل جسPPته ام خداونPPد منان را شکر گزار بوده که این فرصت و توانایی را در اختیPPار من قPPرارداد تPPا در تحصیل علم و دانش کوشا باشم. بنابراین به استاد گرانقدر راهنمایم جناب آقPPای دکتر رستمی که همیشه و در همه حال یاور و راهگشای من بوده سپاس فراوان

دارم. هیچگاه نباید فراموش کرد که در کنار یک تحقیق ارزشمند افPPراد بسPPیاری ایفPPای نقش نمایند . لذا از آقای دکتر احمدی ریاست دانشگاه سواد کوه کPPه بPPه عنPPوان استاد مشاور مرا یاری کردند و همچنین کارمندان زحمت کش ایستگاه قره سPPو و آقای مهندس ایری و اقای مهندس مکPPرمی کPPه در تجزیPPه و تحلیPPل آمPPاری این

پروژه مرا یاری نمودند تشکر و قدردانی می نمایم.

ت

فهرستصفحهعنوان

تحقیقکلیات فصل اول:2.......................................................................................مقدمه

6..............................................................- تعریف پربیوتیک و انواع آن16.........................................................- تعریف و تاریخچه پربیوتیک ها1-17.........................................................................- انواع پربیوتیک1-2

8.....................................................- الیگوساکریدهای غیرقابل هضم1-2-18.........................................................- خصوصیات الیگوساکاریدها1-2-29.......................................- ویژیگی های فیزیکوشیمیایی الیگوساکاریدها1-2-312...........................................- خصوصیات فیزیولوژیکی الیگوساکارید1-2-415..............................- منابع طبیعی حاوی الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم1-2-516...................................- تولید صنعتی الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم1-2-6

16.........................................- میکروفلور باکتریایی دستگاه گوارش ماهی1-317..............................- باکتری های اسید الکتیک در دستگاه گوارش ماهی ها1-4

21.........- فاکتورهای موثر بر حضور باکتری های اسید الکتیک در دستگاه گوارش1-4-123........................- کنش های متقابل باکتری های اسید الکتیک و پربیوتیک ها1-4-2

فصل دوم :ادبیات و پیشینه تحقیق29.......................................................- تحقیقلت انجام شده در ایران2-130..............................................- تحقیقات انجام شده در سایر کشورها2-2

مواد و روش ها فصل سوم:40..................................................................- محل اجرای تحقیق3-140.................................................- تامین و محل نگهداری بچه ماهیان:3-241.....................................- تهیه مخازن پرورش و ذخیره سازی بچه ماهی3-342..............................................................- پربیوتیک مورد استفاده3-443.......................................- نحوه افزودن پربیوتیک به جیره پایه آزمایشی3-5

45.........................................- تغذیه بچه ماهی ها با تیمارهای آزمایشی3-5-146................................- بررسی کیفیت بچه ماهی ها در طول دوره آزمایش3-646...................................- کنترل کمی و کیفی محیط پرورش بچه ماهی ها3-7

46......................................................- کنترل کیفیت محیط پرورش3-7-148...........................................- بررسی فاکتورهای فیزیکی و شیمیایی3-7-2

49........................................................................- زیست سنجی3-849...........................................................- بررسی شاخص های رشد3-9

ث

BODY WEIGHT INCREASE...........................49( TACON, 1990- افزایش وزن بدن )3-9-1PERCENT BODY WEIGHT INCREASE.....49( BECKAN ET AL., 2006- درصد افزایش وزن بدن )3-9-2SPECIFIC GROWTH RATE.............50( HEVORY, 2005- نرخ رشد ویژه )درصد در روز( )3-9-3 AVERAGE( DE SILVA & ANDERSON, 1995- میانگین رشد روزانه)گرم ماهی در روز( )3-9-4

DAILY GROWTH..............................................................................50CONDITION FACTOR.................................50( AI ET AL., 2006- فاکتور وضعیت )3-9-5 VELOCITY OF GROWTH OF BODY( DE SILVA & ANDERSON, 1995- سرعت رشد وزنی )3-9-6WEIGHT.....................................................................................50 VELOCITY OF GROWTH OF BODY( DE SILVA & ANDERSON, 1995- سرعت رشد طولی )3-9-7WEIGHT.....................................................................................51 COEFFICIENT OF VARIATION OF( DE SILVA & ANDERSON, 1995- ضریب تغییرات وزنی )3-9-8

BODY WEIGHT...............................................................................51 COEFFICIENT OF VARIATION OF( DE SILVA & ANDERSON, 1995- ضریب تغییرات طولی )3-9-9

BODY LENGTH................................................................................51BODY WEIGHT GAIN..............52( DE SILVA & ANDERSON, 1995- تولید خالص ماهی )3-9-10

52....................................................- محاسبه شاخص های تغذیه ای3-10FEED CONVERSATION RATIO...................52( HEVROY, 2005- ضریب تبدیل غذایی )3-10-1FEED EFFICIENCY..................52( DE SILVA & ANDERSON, 1995- کارایی غذا)درصد( )3-10-2FEED INTAKE.........53( XUE ET AL., 2006- غذای خورده شده روزانه)درصد روزانه( )3-10-3PROTEIN EFFICIENCY RATIO...........53( HELLAND ET AL., 1996- نسبت کارایی پروتئین )3-10-4 NET PROTEIN( HEVROY, 2005- میزان بهره برداری خالص از پروتئین )درصد()3-10-5

UTILIZATION.................................................................................5354........................................................- محاسبه شاخص بازماندگی3-1154............................................................- مطالعات خون شناسی3-12

54...............................................................- فاکتورهای خونی:3-12-154.........................................................- طرز رقیق کردن خون:3-12-255.....................................(:CELLS/ΜL- شمارش گلبول های قرمز خون)3-12-355.............................................(:W.B.C- شمارش گلبول های سفید )3-12-4

55....................................(DIFF- شمارش افتراقی گلبول های سفید )3-12-4-156....................................................(HB- تعیین میزان هموگلوبین )3-12-556..................................................(HCT- اندازه گیری هماتوکریت )3-12-6

57.....................................................- تجزیه و تحلیل آماری داده ها:3-13تجزیه و تحلیلفصل چهارم :

59.......................- اثرالیگوفروکتوزبرپیراسنجه های رشدبچه ماهی ازون برون:4-163.......- اثرات الیگوفروکتوز بر برخی معیارهای تغذیه ای در بچه ماهی ازون برون:4-2

ج

64...........................-اثرات الیگوفروکتوز بر بازماندگی بچه ماهی ازون برون:4-364....................- اثرات الیگوفروکتوز بر فاکتورهای خونی بچه ماهی ازون برون4-469................................................................- فا کتورهای کیفی آب4-5

69...................................................................- اکسیژن محلول4-5-170................................................................................- دما4-5-271............................................................................- پی - اچ4-5-3EC)).......................................................71- قابلیت هدایت الکتریکی4-5-472.............................................................................- شوری4-5-5

فصل پنجم : بحث و نتیجه گیری - تأثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز بر برخی پیراسنجه های رشد و تغذیه5-1

75.......................................................................در ماهی ازون برون77.......- تاثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز بر بازماندگی ماهی ازون برون5-2 - تأثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز برفاکتورهای خونی بچه ماهی ازون5-3

79.......................................................................................برون81.....................................................................- نتیجه گیری کلی5-482............................................................................-پیشنهادات5-5

83...............................................................................منابع و ماخذ

ح

فهرست جداولصفحهعنوان

4....................- استحصال گوشت و خاویار گونه ازون برون در ده سال اخیر1جدول )-تولید تجاری انواع الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم باخواص پربیوتیکی1-1جدول

MUSSATTO AND MANCILHA,2007)................................................................10.....(ANDRIEUX, 2001- الیگوساکاریدهای مهم مورد استدفاده به عنوان پربیوتیک )2-1جدول

11- باکتری های اسید الکتیک در دستگاه گوارش و مدفوع ماهی ها )3-1جدول

RINGO&GATESOUPE, 1998)...................................................................19 ,GIBSON- محصوالت نهایی تخمیر پربیوتیک ها توسط باکتری های روده ای )4-1جدول

1999).......................................................................................2337.........- پربیوتیک های استفاده شده در آبزیان مختلف و مقایسه اثرات آنها1-2جدول ,HOSSEINIFAR&MAHHIOUS- ساختار الیگو ساکاریدی و ترکیب الیگوفروکتوز )1-3جدول

2007).......................................................................................42 - مقایسه برخی شاخصهای رشد )میانگین و انحراف معیار( بدست آمده در1-4جدول

بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوزطی مدت62.................................................................................... روز76

- مقایسه برخی شاخصهای تغذیه ای )میانگین و انحراف معیار( بدست آمده2-4جدول در بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوزطی

63.............................................................................. روز76مدت - مقادیر برخی پارامترهای هماتولوژیک بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با3-4جدول

65...........................................سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوز جیره - شمارش افتراقی گلبول های سفید)میانگین وانحراف معیار ( در بچه4-4جدول

68........ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوز جیره

خ

فهرست شکل هاصفحهعنوان

25.....- مکانیزم افزایش حالللیت کلسیم در نتیجه تخمیر پربیوتیک و کاهش پی1-1شکل - مکانیسم تبادلی ایجاد شده توسط اسیدهای چرب زنجیر کوتاه حاصل از تخمیر2-1شکل

25..............................................................پربیوتیک و جذب عناصر معدنی40..................................- موقیعت ایستگاه تحقیقاتی شیالتی قره سو1-3شکل - ضدعفونی کردن ونیروها پیش از شروع آزمایش با استفاده از پرمنگنات2-3شکل 41.....................................................................................پتاسیم42..................- ساختار شیمیایی الیگوفروکتوز و فرآیند تولید آن از اینولین3-3شکل 44........................................- مراحل افزودن پربیوتیک به جیره پایه4-3شکل -سطل های عالمت گذاری شده حاوی غذای روزانه مصرفی حاوی سطوح5-3شکل

45...........................................................................مختلف پربیوتیک46......- تغذیه دستی روزانه بچه ماهی ازون برون با جیره های حاوی پربیوتیک6-3شکل 47.............................- نظافت روزانه حوضچه های ونیرو و سیفون آب7-3شکل 48..............................................- روند تامین آب برای سالن ونیرو8-3شکل ،WTW- ثبت روزانه پیراسنجه های کیفی آب با استفاده از دستگاه های 9-3شکل

48...............................................................................ساخت آلمان57...- قرار دادن لوله هماتوکریت در سانتریفوژ و نمونه خون سانتریفوژ شده10-3شکل - تغییرات وزن بچه ماهی ازون برون در تیمارهای مختلف در یک دوره1-4شکل

60....................................................................................پرورش - تغییرات طولی بچه ماهی ازون برون در یمارهای مختلف در یک دوره2-4شکل

61....................................................................................پرورش61......................................- نرخ رشد ویژه در بچه ماهی ازون برون3-4شکل - درصد بازماندگی بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف4-4شکل

64...................................................................پربیوتیک در انتهای دوره - میزان هماتوکریت خون ماهیان ازون برون در تیمار شاهد و تیمارهای5-4شکل

65...................................................................................آزمایشی - میزان هموگلوبین خون ماهیان ازون برن در تیمار شاهد و تیمارهای6-4شکل

66...................................................................................آزمایشی - مقادیر گلبول قرمز خون ماهیان ازون برون در تیمار شاهد و تیمارهای7-4شکل

67...................................................................................آزمایشی -مقادیر میانگین حجم گویچه های خون ماهیان ازون برون در تیمار شاهد و8-4شکل

67.............................................................................تیمار آزمایشی - مقادیر میانگین هموگلوبین گویچه های خون ماهیان ازون برون در تیمار9-4شکل

67................................................................شاهد و تیمارهای آزمایشی - مقادیر میانگین غلظت هموگلوبین گویچه های خون ماهیان ازون برون در10-4شکل

68..........................................................تیمار شاهد و تیمارهای آزمایشی

ط

70...............- میانگین تغییرات اکسیژن محلول آب در طول دوره پرورش11-4شکل میانگین دمای آب و هوا در حوضچه های پرورش بچه ماهیان ازون برون– 12-4شکل

71.........................................................................طی دوره پرورش

ي

چکیده این مطالعPPه بPPه منظPPور بررسPPی اثPPرات پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز بPPرروی بPPرخی فاکتورهای رشد و تغذیPPه و فاکتورهPPای خPPونی و بازمانPPدگی در بچPPه مPPاهی ازون

2و1برون انجام شد.این تحقیق با استفاده،از طرح کامال تصادفی شامل سطوح تکرار طPPراحی شPPد.بچPPه مPPاهی هPPا بPPا3 تیمار و 3درصد الیگوفروکتوز در غالب

روز بPPا76 قطعPPه در هPPر ونPPیرو بPPه مPPدت 10 گرم و تراکم 29±3میانگین وزنی جیره های ازمایشی تغذیPPه شPPدند.نتPPایج نشPPان داد کPه پربیوتیPPک تPPاثیر خPوبی بPPر فاکتورهای رشد و تغذیه ای داشPت و اختالف معPنی داری در دو تیمPار ازمایشPPی

تفPPاوت معPPنی درصد الیگوفروکتوز نسبت به تیمار شPPاهد دیPPده شPPد. 2و1حاوی % جPPیره1داری در نرخ بازماندگی ميان تیمارها مشPPاهده نگردیPPد امPPا در سPPطح

.نتایح حاصPPل از تPPاثیر% و شاهد افزایش معنی داری نشان داد.2نسبت به تیمار الیگوفروکتوز بر فاکتورهای خونی نشان داد پری بیوتیک الیگوفروکتوز در سطوح در نظر گرفته شده بر فاکتورها خونی از جمله گلبول هPPا سPPفید و نوتروفیPPل اثPPر مثبتی داشته است اما بر پارامترهای هماتولوژیک اثری نداشت.نتایج این مطالعه نشPPان داد کPه پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز قPابلیت تPPاثیر گPPذاری بPPاالیی بPPر افPPزایش عملکرد رشد و کارایی تغذیه و برخی فاکتورهای خونی به ویژه گلبول های سفید و نوتروفیل ولنفوسیت ها که جزو ایمنی غیر اختصاصی هستند داشته که میتوانPPد

در مقاومت ماهی نسبت به عوامل بیماری زا موثر باشد. %پربیوتیک الیگوفروکتوز در جیره ازون برون1و بر اساس نتایج باال میزان

پیشنهاد میشود. کلمات کلیدی:الیگوفروکتوز،پربیوتیک،فاکتورهای خونی،فاکتورهای رشد و

تغذیه،بازماندگی وازون برون

ك

1

مقدمه رشد فزاینده جمعیت ,ضرورت توجه بPPه تPPأمین منPPابع پروتئیPPنی را بیش از پیش نمایان ساخته است. آبزی پروری یکی از منابع تأمین پروتئین بشری است که بPPه دلیل پتانسیل بالقوه تولید و امنیت غذایی، امروزه بیشتر از قبل مورد توجه قرار می گیرد. در طول دهه گذشته، تولید غذای دریایی از طریق آبزی پروری توسPPعه

2

فصل اول:

تحقیقکلیات

پایداری در جهان داشته است و نسبت آن در مقایسPPه بPPا تولیPPد مPPاهی از طریPPق,Anonymousصید و صیادی در حال افزایش است ) (. بPPا توجPه بPPه افPزایش2005

نیاز به غذا های دریایی به واسPPطه رشPPد سPPریع جمعیت و همچPPنین کPPاهش صPPید ذخایر طبیعی و برداشت بیش از حد از اغلب ذخPPایر، پیش بیPPنی می شPPود آبPPزی

(. دو هدف عمده در بخش آبزیFAO, 2002پروری توسعه بیشتری داشته باشد ) پروری استفاده از مکانهای دارای پتانسیل آبزی \پروری و توسعه پPPرورش انPPواع ماهیان گرم آبی، سرد آبی و دریایی و نیز افزایش تولید در واحد سطح )افزایش کارایی( تولید می باشد. کاهش هزینه های پPPرورش از طریPPق بهبPPود جPPیره هPPای غذایی و نیز افزایش مقPPاومت آبزیPPان پرورشPPی در برابPPر شPPرایط اسPPترس زای پرورش و نیز بیماری ها یکی از موارد مهم در باال بردن کارایی تولیPPد مPPاهی می

باشد. که توجه برخی کشورها به پرورش ماهیان خاویار معطPPوف گردیPPد1980از دهه

(Bronzi et al., 1999مطالعاتی نیز در مورد نیاز های تغذیه ای آنها انجام شد. با ) توجه به اینکه همیشه فعالیتی در آبزی پروری موفق خواهد بود کPPه یPPک پPPرورش دهنده بPPه بیوتکنیPPک تکثPPیر و پPPرورش آن گونPPه اشPPراف کامPPل داشPPته باشPPد امPPا علیرغم پیشرفت های خوبی که طی چند سال اخیر در مورد پرورش تاسPPماهیان صورت گرفته است لیکن اطالعات کافی در مورد نیازهPPای تغذیPPه ای آنهPPا وجPPود

(.Hung and Deng, 2002ندارد )

200( جPز آبزیPان قPدیمی بPا قPدمت Acipenseriformesراسته ماهیPان خاویPاری ) گونه و بسیار با ارزش بوده که امروزه نسPPل بسPPیاری از27میلیون سال شامل

آنها به دالیلی چند منجمله صید بی رویPPه، آلPPودگی هPPای زیسPPت محیطی و از بین IUCNرفتن مناطق مناسب تخم ریزی در خطر بوده و بسیاری از آنها در لیسPPت

در معرض خطر انقراض قPرار دارنPPد. بPPدین سPPبب توجPه بسPPیاری از دولت هPPا و سPPازمانهای مختلPPف بPPه امPPر حفPPاظت و حراسPPت از این گونPPه هPPای ارزشPPمند معطوف گشته و توجه ویژه ای به امر تکثیر و پرورش آنها و درک نکات گوناگون

در این مقوله شده است. تاس ماهیان اهمیت بسیار باالیی از لحاظ اقتصادی در ایران دارنPPد و بPPه منظPPور بازسازی ذخایر، مولدین ماهیان به طور مصنوعی تکثیر شده و ساالنه میلیون ها

گرم، به رودخانه هPPای حوضPPه جنPPوبی دریPPای خPPزر رهPPا3-5بچه ماهی در اوزان (.1384سازی می شوند )عبدالحی،

ماهی ازون برون یکی از انواع ماهیان دریای خزر است. بررسPPی وضPPعیت صPPید تاسPPماهیان در سPPواحل ایPPران نPPیز نشPPان می دهPPد کPPه در سPPال هPPای اخPیر تنهPPا وضعیت ذخایر ماهی قره برون امیدوارکننده بوده و ذخایر ازون برون و چالبPPاش

( بPPه طPPوری کPPه1377کاهش فوق العاده ای را نشان داده اند )مقیم و فضلی ، افزایش تالش صیادی در صیدگاه ها نیز نتوانسPPته اسPPت بهPPره بPPرداری از ذخPPایر ماهی ازون برون را افزایش داده ودر بعضی مناطق استحصPPال خاویPPار بPPه ازای

(. صPPید1376 ، غنی نPPژاد، 1372هر ماده، روند نزولی داشته است)اسدالهی ، 1913 شPPروع شPPده و در سPPال 19ماهیPPان خاویPPاری در دریPPای خPPزر در قPPرن

3

تن انجام38800 شمسی( حداکثر صید ماهیان خاویاری به میزان 1291میالدی) (. از آن پس صPPید این ماهیPPان بPPا ارزش رو بPPه1379گرفت )مقیم و همکPPاران،

هPPزار تن6/1 شمسPPی( بPPه 1376 میالدی )1998کاهش نهاد تPPا اینکPPه در سPPال ,.IvanovتPنزل یPافت ) (. بPه دنبPPال کPاهش شPدید ذخPایر ماهیPPان خاویPاری،2000

بازسازی و حفظ ذخایر این ماهیان در دریای خزر از طریPPق تکثPPیر مصPPنوعی مPPد ( استحصال گوشPPت و خاویPPار گونPPه ازون1نظر کارشناسان قرار گرفت. جدول)

بPPرون را در ده سPPال اخPPیر نشPPان می دهPPد )گPPزارش ارزیPPابی ذخPPایر تحقیقPPاتشیالت(.

(- استحصال گوشت و خاویار گونه ازون برون در ده سال اخیر1جدول ) گوشت ازون برونسالها

)تن( خاويار ازون برون

)تن( جمع ازون برون

)تن(

4

1380138113821383138413851386138713881389

1/1288/81

604/216/14

2/99/4

46/1

226/1

3/214/12

1/79/2

21/17/05/02/0

152/0

4/1492/941/673/246/163/10

6/55/48/1

774/1

به طوریکه امروزه مانند سایر ماهیان خاویاری شدیداً در معرض خطPPر انقPPراض می باشPد. بPه منظPور بازسPازی ذخPایر این ماهیPPان می بایسPت عالوه بPر تکثPیر مصنوعی و رهاسازی بچه ماهیان برای بازسازی ذخایر، به پرورش مصنوعی این

al.2004ustaogluماهیان و تولیPPد و مولPPدین پرورشPPی اهتمPPام جPPدی ورزیPPد ) ) et چنانچه در پرورش تاس ماهیان به ظرافت های فنی توجه شPPود، این صPPنعت می توانPPد یکی از صPPنایع پPPر رونPPق و سPPودآور در آبPPزی پPPروری کشPPور باشPPد. رونPPق پرورش تاس ماهاین عالوه بPPر کPPاهش فشPPار صPPیادی بPPر جمعیت این ماهیPPان در دریای خزر و جلوگیری انقراض نسل این ماهیان، سبب ایجاد زمینه برای اشتغال جمعیت ساکن در حاشPPیه جنPPوبی دریPPای خPPزر و صPPادرات گوشPPت و خاویPPار می شود. یکی از موارد مهم در پرورش ماهیان حفظ سالمت و بقPPاء مPPاهی در سPPحمطلPPوب می باشPPدکه نیازمنPPد بهبPPود وضPPعیت فPPیزیولوژیکی مPPاهی می باشPPد ))

Flikinger et al., 2003. پس از مشخص شدن رابطه بین سالمتی و توازن باکتریایی روده، ایPPده ای تحت عنوان پروبیوتیک مطرح گردید که هPPدف از آن تغیPPیر بPPاالنس باکتریPPایی روده بPPه

KolidaسPPمت بPPاکتری هPPای بPPالقوه مفیPPد بPPود ) et al.,2002اتPPاکنون مطالعPPت ) بسیاری در زمینه کاربرد پروبیوتیک ها در آبزی پروری انجام شده است. ارگانیزم های مختلفی از جمله باکتری های گرم مثبت و منفی، مخمرها، میکروآلگ هPPا بPPه عنوان پروبیوتیک در آبزی پروری بررسی شPPده و اثPPرات بسPPیار سPPودمند آنهPPا در افزایش ایمنی، بهبود رشد، مقPPاومت در برابPPر بیمPPاری هPPای گونPPه هPPای مختلPPف

Iriantoماهی و میگو به اثبPPات رسPPیده اسPPت) and Austin,2002،ودPPا این وجPPب .) ابهاماتی در این زمینه مانند غیر قابل تضمین بودن زنده مPPانی پروبیوتیPPک اضPPافه شPPده در دسPPتگاه گPPوارش و همچPPنین الPPزام رقPPابت پروبیوتیPPک معPPرفی شPPده بامیکروفلور موجود در روده و توانایی تشکیل کلونی موثر سبب شPPد تPا محققین

5

(. به دنبالMahious et al., 2005به دنبال ارائه ایده ای جدید در این زمینه باشند ) شناسایی باکتری های اسید الکتیک در فلور باکتریایی روده ماهی و میگو در دهPPه اخیر و مشخص شدن نقش آنها در سالمتی و رشد میزبان، اهمیت توجPPه بPPه این باکتری های مفید بومی روده بیش از پیش مشخص شده و ایده به نام پربیوتیPPک

MahiousشPPPPکل گPPPPرفت ) et al., 2005 Gibson &Raberfroid, 1995; Ringo&Gatesoupe, ;(. اسPPتفاده از پربیوتیPک هPا بPه دلیPل تخمPیر گزینشPی1998

توسط بPPاکتری هPPای مفیPPدروده ای )الکتوباسPPیلوس هPPا( سPPبب افPPزایش تعPPداد و(.gibson, 2007غابلیت باکتری های مفید روده ای می شود )

با وجود اثرات مفیدی که برای پربیوتیک بیان شده این زمینه از تحقیقات هنوز در آغاز راه خود قرار دارد و بسیاری از جنبه های استفاده از پربیوتیPPک هPPا در آبPPزی

(.1386پروری ناشناخته مانده است )پورامینی و حسینی فر،ضرورت انجام این مطالعه

با توجه به تحقیق های انجام شده بر مدل های انسانی و دامی و مشخص شPPدن نقش پربیوتیک ها در افزایش بقاء ، سالمت و بهبPPود وضPPعیت فیزیولوژیPPک بPPدن، اهمیت بررسی اثرات بالقوه این مواد در آبزی پروری بیش از پیش مشخص می شود. عالوه بPPر این بPPا توجPPه بPPه جدیPPد بPPودن اسPPتفاده از پربیوتیPPک هPPا در آبPPزی پروری، انجام این مطالعه می تواند به افزایش دانش موجود در این زمینه کمPPک کند. همچنین نظر به اینکه الیگوفروکتوز از جمله مهمترین پربیوتیک هPPای مطPPرح

در حال حاضر می باشد، بررسی اثرات آن بر تاس ماهیان حائز اهمیت است.اهداف این مطالعه

بطور کلی اهداف ذیل از انجام این مطالعه مد نظر بود: بدست آوردن اطالعاتی در زمینه اثPPرات پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز بPPر فاکتورهPPای خPPونی،) تعPPداد گلبPPول هPPای قرمPPز، تعPPدا گلبPPول هPPای سPPفید، همPPاتوکریت و هموگلوبین( میانگین حجم یک گلبول قرمز، میانگین هموگلوبین یک گلبول قرمPPز، میانگین درصد غلظت هموگلوبین در یک گلبول قرمز، درصPPد افPPتراقی گلبولهPPای

سفید. بررسی اثرات الیگوفروکتوز بر فاکتورهای رشد ) طول، وزن، فاکتور وضعیت

میزان رشد ویژه، ضریب تبدیل غذایی.مشخص نمودن اثر پربیوتیک بربازماندگی ماهی ازون برون در شرایط پرورشی.

تأثیر پربیوتیک الیگوفروکتوز بر برخی شاخص های تغذیه ای.

6

- تعریف پربیوتیک و انواع آن1

- تعریف و تاریخچه پربیوتیک ها1-1 پس از معرفی ایده پروبیوتیک ها و مشخص شPPدن وجPPود بPPاکتری هPPای مفیPPد در دستگاه گوارش تحقیقات بسیاری در این زمینه انجام شPPده و هم اکنPPون نPPیز اینروند ادامPPه دارد. امPPا وجPPود مشPPکالت و تردیPPدهای زیPPادی در این زمینPPه ماننPPد )

Mahious et al., 2005b:) - غیر قابل تضمین بودن زنده مانی پروبیوتیک اضافه شده در دسPPتگاه گPPوارش و

توانایی تحمل شرایط حاکم بر آن - الزام رقابت پروبیوتیک معرفی شده بPPا میکروفلPPور موجPPود در روده و توانPPایی

تشکیل کلونی موثر - امکان انتقال ژن مقاومت زایی از باکتری های مقPPاوم محیPPط بPPه بPPاکتری هPPای

مفید اضافه شده سبب شد تا محققین به فکر ایده ای جدید در این راستا برآینPPد. بعPPدها تحقیقPPات انجام شده بر انسان ها و حیوانPات نشPان داده بین عملکPرد روده ای و سPالمتی

(. سرانجام تمامیJenkins et al., 1999انسان ها و حیوانات رابطه ای وجود دارد) موارد فوق منجر به ارائه ایده جدیدی به نام پربیوتیPک گردیPد. در این ایPده رشPد گزینشی باکتری های بومی روده )باکتری های مفید روده ای مثل بیفید و باکتری

Roberfroid&Gibdonها و الکتوباسیلوسها( از طریق جیره مPPدنظر اسPPت ) 1995) اولین کسانی بودند که ایده پربیوتیک ها را بیPPان داشPPتند، آنهPPا پربیوتیPPک را چPPنین

تعریف نمودند: پربیوتیک مPPاده غPPذایی غPPیر قابPPل هضPPمی اسPPت کPPه از طریPPق تحریPPک رشPPد و»

فعالیت یک یا تعداد محدودی از بPPاکتری هPPای موجPPود در روده اثPPرات سPPودمندی«برای میزبان داشته و می تواند سالمت میزبان را بهبود بخشد

بر اساس این تعریف هر ماده غذایی که به روده می رسد مثل کربوهیدرات های غیر قابل هضم، بعضی از پیتیدها و پروتئین ها و نیز برخی از چربی ها می تواننPPد

(. اما ماده ای کهGibson, 1998; Gibson, 1999کاندیدایی برای پربیوتیک باشند ) به عنPPوان پربیوتیPPک انتخPPاب می شPPود بایPPد دارای مشخصPPه و معیارهPای خاصPی

,.Kolida et al., 2002; Mahious et alباشد. این معیارها شامل موارد ذیل است )2005b:)

( هیدرولیز یا جذب نشدن در بخش های فوقانی دستگاه گوارش 1)( تخمیر انتخابی بوسیله باکتری های بالقوه مفید روده2)( تغییر ترکیب میکروفلور روده ای به سمت ترکیبی سالم تر3)( دارای اثرات سودمند بر سالمتی میزبان4)

7

- انواع پربیوتیک1-2 با توجه به معیارهای ذکر شده در بخش فوق، تعیین نیازهای غذایی بPPاکتری هPPای مفید روده ای برای شناسایی موادی که به شکل پربیوتیPPک عمPPل می کننPPد حPPائز اهمیت است. تحقیقات نشان داده است که کربوهیدرات هPPا مPPواد غPPذایی مهم و ضروری برای این باکتری ها هستند. به همین دلیل در تغذیه انسان ها و حیوانPPات کربوهیدرات ها بیشترین مPPوادی هسPPتند کPPه بPPه عنPPوان پربیوتیPPک مPPورد ارزیPPابی

(.Gibsin et al., 1999; Kolida et al., 2002; Mahious et al., 2005aقرارگرفته اند) در میPPان کربوهیPPدرات هPPا، الیگوسPPاکاریدهای غPPیر قابPPل هضPPم و بPPه خصPPوص الیگوساکاریدهای حاوی فروکتور )فروکتان ها( عمدتاً به عنوان پروبیوتیک در نظر

VoragenگرفتPPه می شPPوند ) et al., 1998; Crittenden et al., ;(. از بین1996 الیگوسPPPPاکاریدهای غPPPPیر قابPPPPل هضPPPPم اینPPPPولین، الیگوفروکتPPPPوز، تPPPPرانس

(،IMO(، الکتولPPPPوز، ایزومPPPPالتو- الیگوسPPPPاکارید )TOsگاالکتوالیگوسPPPPاکارید ) (، الیگPPPPPPو سPPPPPPاکارید سPPPPPPویا وXOSالکتوسPPPPPPاکاروز، زایلوالیگوسPPPPPPاکارید )

گلوکوالیگوساکاریدها در شکل هPای طPPبیعی و آزمایشPPگاهی اکPPثراً در مPPدل هPای,Mahious&Ollevierانسانی مورد مطالعه بوده اند ) (. که نتایج این بررسPPی2005

( و الکتPPوز را میTOSها نشPPان داد اینPPولین، الیگوفرکتPPوز، گاالکتوالیگوسPPاکارید )توان به عنوان پربیوتیPPک اسPPتفاده نمPPود در حالیکPPه ایزومPPالتو- الیگوسPPاکاریدها )

IMO( اکاریدPPPPPوز، زایلوالیگوسPPPPPالکتول ،)XOSویا وPPPPPاکاریدهای سPPPPPالیگوس ،) گلوکوالیگوسPPاکاریدها چPPون معیارهPPای پربیوتیPPک را ندارنPPد، نمیتPPوان بPPه عنPPوان

(.Mancilha, 2007&Kolida et al., 2002; Mussattoپربیوتیک محسوب کرد )

- الیگوساکریدهای غیرقابل هضم1-2-1Non-digestibleالیگوسPPPاکریدهای غیرقابPPPل هضPPPم oligosaccharides (NDOs)

کربوهیدراتهای با وزن مولکولی کم بوده که از لحPPاظ سPPاختاری مPPا بین قنPPدهای ساده و پلی ساکاریدها قرار می گیرنPد. این مPواد را می تPوان بPا عصPPاره گPیری مستقیم از مواد طبیعی ، فرآیند هیدرولیز شPPیمیایی پلی سPPاکاریدها و یPPا توسPPط سنتز آنزیمی و شیمیایی دی ساکاریدها بدست آورد. الیگوساکاریدهای غPPیر قابPPل هضم خصوصیات فیزیکوشPPیمیایی و فPPیزولوژیکی مهمی داشPPته و می تواننPPد بPPه عنPPوان فیبرهPPا و پربیوتیPPک هPPا در جPPیره عمPPل کننPPد. غPPنی سPPازی جPPیره بPPا الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم سبب بهبود میکرواکولPPوژی روده می شPPود. بPPه همین دلیPPل تقاضPای صPنعتی آنهPا در غPPالب فرموالسPPیون محصPPوالت پربیPPوتیکی

: شامل ارگPPانیزم هPPای پروبیوتیPPک و الیگوسPPاکاریدهایSymbioticوسیمبیوتیکی ) پربیوتیک( در چند سال اخیر به سPPرعت رشPPد نمPوده اسPPت. امPروزه توجPه زیPPاد مصرف کننPPدگان بPPه سPPالمتی، مPPوجب اسPPتفاده از مPPواد غPPذایی مژثPPر در بهبPPود سالمتی و کاهش بروز بیماری ها گردیده و منجر به افزایش اهمیت انواع خاصی از کربوهیدرات ها تحت عنوان الیگوساکاریدهای غیر قایبل هضم شPPده اسPPت. از آنجا که این ترکیبPPات در مصPPرف کننPPده خPPواص فیزیکوشPPیمیایی و فPPیزیولوژیکی مفیدی را به دنبال دارند در حال حاضر استفاده از این مواد غذایی به سرعت رو به افزایش است. برخی از خPPواص مفیPPد این مPPواد غPPذایی شPPامل غPPیر سPPرطان زایی،حرارت زایی کم و توان تحریک باکتری های مفید روده ای است. این مPPواد

8

همچنین در انسان ها موجب کاهش خطر ابتال به اسهال و همچنین بهبود عملکرد روده ناشPPی از ایجPPادpHسیستم ایمنی بدن می شوند. به عالوه به دلیل کPPاهش

شرایط تخمیری ، استفاده از الیگوساکاریدهای غیر قابPل هضPم در جPیره غPPذایی کPPاهش حضPPور عوامPPل بیمPPاری زا در فلPPور روده ای و افPPزایش جمعیت بیفیPPد و

باکترها و نیز افزایش جذب مواد معدنی در دسترس را به دنبال دارد.

- خصوصیات الیگوساکاریدها1-2-2 کربوهیPPدرات هPPا ب اسPPاس وزن مولکPPولی و نPPیز درجPPه پلیمریزاسPPیون )تعPPداد واحPPدهای مونوسPPاکارید تPPرکیب شPPده( بPPه مونوسPPاکارید، الیگوسPPاکارید یPPا پلی

IUBساکارید طبقه بندی می شوند. بر اساس نامگذاری آیPPوب آیوپPPاک ) IUPAC nomenclature ه دارایPPود کPPاکاریدهایی اطالق می شPPا3( الیگوساکاریدها به سPPت

10 sugar moietiesمی باشند. برخی صاحب نظران ساکاریدها را جزء قندهایی واحPPد مونوسPPاکارید دارنPPد، طبقهبنPPدی می نماینPPد، اگرچPPه دلیPPل9 تPPا 3کPPه بین

,Voragenمنطقی شPPیمیایی و فیزیکوشPPیمیایی بPPرای این حPPدود وجPPود ندارنPPد ) (. بنابراین الیگوساکاریدها کربوهیدرات هایی با وزن مولکولی کم هستند. از1998

سوی دیگر بر پایه خصوصیات فیزیولوژیکی، کربوهیPدرات هPا را می تPوان بPه دو دسته قابل هضم و غیر قابل هضم تقسیم نمPود . پس از مشPاهده این مPورد کPه

( واحدهای مونوسPPاکاریدی بPPرخی از الیگوسPPاکاریدهایC2 یا C1کربن آنومریک )جیره ای، دارای ساختاری فضایی هستند که سبب می شود پیونPPدهای آسPPیدیک )

Osidic boundsمPل هضPآنها برای آنزیم های هیدرولتیک دستگاه گوارش غیرقاب ) باشد ، ایده استفاده از الیگوساکاریدهای غیر قابPPل هضPPم مطPPرح گردیPPد. اصPPلی ترین الیگوساکاریدهای عیر قابل هضم که در حال حاضر به عنوان جزئی از مPPواد غذایی د دسترس بوده مصرف می شوند، شامل کربوهیدراتهایی است که گPPروه

مونوساکاریدی آنها را فروکتوز، گاالکتوز، گلوکوز یا زایلوز تشکیل می دهند. الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم به عنوان محرک رشد بPPاکتری هPPای مفیPPد روده ای نیز مطرح بوده که غالبا از گونه بیفیدوباکترها و نیز باکتری هایی هستند که به

Sakoعنوان پروبیوتیک عمل می نمایند. ) and Tanaka, (، سPPیزده مPPورد از1999 الیگوساکاریدهای غیر قابل هضمی کPPه عملکPPرد پربیPPوتیکی داشPPته و بPPه صPPورت

تجاری تولید می شوند را معرفی نمودند. اختالف شیمیایی میان این الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم شامل طول زنجیره، آرایش مونوسPPPPاکاریدها، درجPPPPه منشPPPPعب شPPPPدن و خلPPPPوص می باشPPPPد. الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم از یک ، دو یا حتی سه نوع مونوساکارید تشکیل شده اند. اگر چه این الیگوساکاریدها حداقل از سه واحد مونوساکاریدی تشPPکیل شده اند، الکتولوز ، دی ساکاریدی است که خواص مشابه الیگوساکاریدها داشته

Crittenden andبر همین اساس در دسته الیگوساکاریدها طبقه بندی می گردد ) playne, 1996بنابر دالیلی مشابه زایلوبیوز که ترکیبی با درجه پلیمریزاسیون باال .)

بPPر سPPالمتی مصPPرف کننPPده، بPPه عنPPوان زایلوالیگوسPPاکارید مطPPرح می شPPود )Vazquez et al., 2000 )

9

- ویژیگی های فیزیکوشیمیایی الیگوساکاریدها1-2-3 شPPیرینی6/0 تPPا 3/0الیگوساکاریدها،محلول در آب بوده و دارای شیرینی معادل

ساکارز می باشند که در اصل میزان شPPیرینی آنهPPا بPPه سPPاختار شPPیمیایی، درجPPه پلیمریزاسیون الیگوساکاریدهای موجود در آن و مقادیر مونو و الیگوساکارید های

(. باCrittenden and Playne, 1996; Voragen, 1998موجود د رترکیب بستگی دارد ) افزایش طول زنجیره ساکاریدی میزان شیرینی آنها کاهش می یابPPد. این اثPPر در بسیاری از غذا که استفاده از ساکارز بPPه دلیPPل شPPیرینی زیPPاد محPPدود می شPPود، بسیار مفید واقع می گردد. کم شPPیرینی نسPPبی الیگوسPPاکاریدها جهت طعم دهی به غذاها مطلوب اسPPت، عالوه بPPر این در مقایسPPه بPPا مونPPو و دی سPPاکاریدها بPPه دلیل وزن مولکولی بPPاال، الیگوسPPاکاریدها سPPبب افPPزایش ویسPPکوزیتی شPPده کPPه

CrittendenمنجPPر بPPه بهبPPود طعم و مPPزه در غPPذا هPPا می شPPون ) and Playne, 1996.)

sugarپایPPداری دسPPته هPPای مختلPPف الیگوسPPاکاریدها بسPPته بPPه تعPPداد قنPPد آزاد ) residuesیارPPدها ، بسPPوع پیوینPPک و نPPموجود، شکل حلقه و شکل فضایی آنومری )

از الیگوسPPاکاریدهایβمتفاوت اسPPت. عمومPPا الیگوسPPاکاریدها دارای پیونPPد نPPوع قوی ترند و نیز هگزوزها نسبت بPPه پنتوزهPPا از اتصPPاالت محکمαدارای نوع پیوند

پایین ترpHتری برخوردار می باشند. با این وجود عموما در صورت نگهداری در و دمای بPPاال یPا بPرای مPPدت طPPوالنی در شPPرایط طPPبیعی، الیگوسPاکاریدهای4از

موجود در غذا هیدرولیز شده که منجر به از دست دادن خصوصPPیات تغذیPPه ای و (.Voragen, 1998فیزیکوشیمیایی آنها می شود )

از الیگوساکاریدها همچنین می توان جهت تغیر دمای انجماد و نPPیز کنPPترل شPPدت قهوه ای شدن در اثر واکنش میالرد در عذاهای تحت فPPرآوری گرمPPایی اسPPتفاده نمود. الیگوساکاریدها همچنین سبب افزایش ظرفیت نگهداری آب ، جلوگPPیری از خشک شدن بیش از حد و کاهش فعالیت آب می شوند که راهکار مناسبی جهت

(. میزانCrittenden and Playne, 1996کنترل آلودگی های باکتریایی می باشد ) کیلوکالری بر گPPرم تخمین5/1 – 2گرما زایی الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم

% میزان کربوهیدراتهای قابل جذب مانند40-50زده می شود. این مقدار تقریبا (.Sako et al., 1999ساکارز می باشد )

- تولید تجاری انواع الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم با خواص1-1جدول (Mussatto and Mancilha, 2007پربیوتیکی )

Moleeular struetureaCompound

(Gu)gCyelodextrins

(Fr)g-GuFructooligosaccharides

(Ga)g-GuGalactooligosaccharides

(Gu)gGentiooligosaccharides

10

(Gu)g-FrGlycosylsucrose

(Gu)gIsmaltooligosaccharides

(Gu-Fr)gIsmaltulose(or palatinose)

Ga-Gu-FrLactosucrose

Ga-FrLactulose

(Gu)gMaltooligosaccharides

Ga-Gu-FrRaffinose

(Ga)g-Gu-FrSoybean oligosaccharides

(Xy)gXylooligosaccharides

Ga گاالکتوز ؛ ، Gu گلوکوز ؛ ، Fr فروکتوز؛ ، Xyزایلو ،

,Andrieux- الیگوساکاریدهای مهم مورد استدفاده به عنوان پربیوتیک )2-1جدول 2001)

OligosaccharidesStructureLinkageProcessOrigin

Xylo- Oligosaccharides(Glu)nβ-1.4HydrolysisCereals

LactuloseGal-Fruβ-1.4IsomerisationLactose

Isomalto-Oligosaccharides(Glu)nα-1.6HydrolysisAlga

Gluco- Oligosaccharides(Glu)nα-1.2 and α-

1.6SynthesisSucrose

Galacto- Oligosaccharides(Gal)n-Gluβ-1.4 and β-

1.6SynthesisLactose

Fructo- Oligosaccharides(Fru)n-Glu(β-2.1-)α-1.2SynthesisSucrose

Oligofructose(Fru)n-(Fru)n-Glu(β-2.1)HydrolysisLnulin

11

- خصوصیات فیزیولوژیکی الیگوساکارید1-2-4 گرچPPه الیگوسPPاکاریدها دارای ویPPژگی هPPای مهم فیزیکوشPPیمیایی می باشPPند امPPا مهمترین دلیل استفاده از آنها به عنوان مکمل غذایی ، تأثیرات سPPودمند آنهPPا بPPر سالمتی می باشد. از جمله این ویژگی ها عدم جذب الیگوساکاریدهای غیر قابPPل هضPPم بPPه وسPPیله میکروفلPPور موجPPود در قسPPمت هPPای بPPاالیی دسPPتگاه گPPوارش برخالف نشاسته و قندهای ساده است. بنابراین ترکیبات اسPPیدی یPPا پلی گلوکPPان ها تولید نشده و میتوان از الیگو ساکاریدهای غیر قابل هضم به عنوان قندهای با اثر کاریوژنتیک کم در محصوالتی مانند شیرینی، آدامس، ماسPPت و نوشPPیدنی هPPا

(.Crittenden and Playne, 1996استفاده نمود. ) اغلب الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم به دلیل فقدان آنزیم های هیPPدرولیز کننPPده

ما بین واحدهای مونوساکاریدی، توسط انسان ها و ارگانیزم هPایβاتصاالت نوع آبPPزی مثPPل مPPاهی هPPا و میگوهPPا قابPPل جPPذب نمی باشPPند. این ترکیبPPات شPPامل کربوهیدرات هایی هستند که در آنها فروکتوز، گاالکتوز، گلوکز یا زایلوز به عنPPوان واحPPد هPPای مونوسPPاکاریدی حضPPور دارنPPد. ویPPژگی هPPای فPPوق سPPبب شPPده الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم ترکیباتی مناسب جهت استفاده در شPPیرینی هPPا، جیره های غذایی ارگانیزم های آبزی پرورشی و همچنین مصرف مبتال بPPه دیPPابت

,Crittenden and Playne, 1996; Rivero-Urgell and Santamaria-Orleansباشند ) 2001.)

اکثر الیگوساکاریدها از لحاظ کمی در بخش های باالیی حفره معده ای- رودهPPای(Gasterointestinal tractهیدرولیز می گردند. مونوساکاریدهای حاصله از آنها از )

طریق خون به کبد منتقل شده و سپس به چرخه سیستمیک وارد می شوند. این نوع کربوهیدرات ها جهت بهبود سالمتی ضروری اند زیرا هم به عنوان سوبسPPترا و هم به عنوان تنظیم کننده چرخه های عمده متPPابولیکی عمPPل می کننPPد. بPPا این وجود برخی از الیگوساکاریدها ویژگی های فیزیکوشیمیایی خاصی را بروز داده و در برابPPر فراینPPد گPPوارش مقPPاومت می کننPPد، این مPPواد بPPه بخش هPPای انتهPPایی دسPPتگاه گPPوارش رسPPیده در آنجPPا اکPPثر)ولی نPPه الزامPPا همPPه( الیگوسPPاکاریدهای غیرقابل هضم به الیگومرها و مونومرها هیدرولیز می شوند و بعدها توسط تعداد کمی و یا اکثر باکتری هPPای ب یهPوازی متPابولیزه می گردنPد. چPنین فراینPدی بPه عنوان تخمیر شناخته می شPPود کPPه عالوه بPPر فPPراهم نمPPودن انPPرژی جهت تکثPPیر باکتری ها، موجب تولید گازهای هیدروژن، دی اکسید کربن و متان می شPPود کPPه از لحPPاظ متPPابولیکی بPPرای میزبPPان فایPPده چنPPدانی ندارنPPد. عالوه بPPر این گازهPPا، اسیدهای آلی کوچک )اسیدهای چPPرب زنجPPیره کوتPPاه( ماننPPد اسPPتات،پروبیونPPات،

-اسPPتات نPPیز در این فراینPPد تولیPPد می شPPوند. اگرچPPه این مPPوادLبوتPPیرات و مونوساکاریدی الزم برای بدن را فراهم نمی کننPPد، الیگوسPPاکاریدهای غPPیر قابPPل

energyهضم به طور غیر مستقیم بPPه عنPPوان سوبسPPترای انPPرژی ) substratesو ) Delzenneتنظیم کننده های متPPابولیکی عمPPل نماینPPد ) and Roberfroid, 1994.)

مقدار و نوع اسیدهای چرب زنجیره کوتاه تولید شده در روده طی این فرایند بPPه

12

نPوع سوبسPترای الیگوسPاکاریدهای غیرقابPل هضPPم و نPیز تPرکیب فلPور روده ایSakoبسPPتگی دارد ) et al., (. الیگوسPPاکاریدهای غیرقابPPل هضPPم بPPه دلیPPل1999

ساختاری شیمیایی خاص، تنها توسط تعداد معدودی از باکتریهای مصرف شPPده و محرک رشد آنهPPا محسPPوب می شPPوند. در بین بPPاکتری هPPای موجPPود در دسPPتگاه گوارش بیفیدوباکترها و الکتوباسیلی هPPا بیشPPترین اسPPتفاده را از الیگوسPPاکاریدها می کنند و به عنPPوان تنهPPا میکPPرو ارگPPانیزم هPPایی در نظPPر گرفتPPه می شPPوند کPPه

قادرند اثرات مفیدی بر سالمتی میزبان داشته باشند. نرخ تخمیر الیگوساکاریدها به درجه پلیمریزاسیون، قند و پیونPPدهای گلیکوزیPPدی و درجPPه منشPPعب شPPدن، سPPینرژی بین بPPاکتری هPPای در طPPول تخمPPیر رابطPPه بین

,VoragenسوبسPPترای بPPاکتری هPPا و محصPPوالت تخمPPیر بسPPتگی دارد ) 1998.) مطالعPPات بPPر روی مPPدل هPPای انسPPانی نشPPان داده اسPPت کPPه الیگوسPPاکاریدهای غیرقابPPل هضPPم در سPPکو-کلPPون )بخش انتهPPایی روده بPPزرگ( اثPPرات ذیPPل را بPPر

maning and Gibson, 2004; Gibson, 2004; Rivero-Urgellسالمتی انسان دارد )and Santamaria-Orleans, 2001: )

( اصالح و بهبود قابل مالحضه میکروفلور کلون؛ از آنجا که این الیگوسPPاکاریدها1 نوعی سوبسترا جهت رشد و تکثیر باکتری های بی هوازی )اکPPثرا بیفیPPدوباکترها( می باشند، مانع رشد باکتری های عامل فسPPاد بیمPPاری زا موجPPود در کلPPون می شوند. برای مثال تشکیل میکروفلور بیفیدوس )میکروفلوری که بخش عمده آنرا بیفیPPPدوباکترها تشPPPکیل می دهنPPPد( در روده زنPPPان شPPPیرده سPPPبب حضPPPور

الیگوساکاریدهای حاوی گاالکتوز در شیر آنها می شود. در کلون و متعاقب آن در مدفوع در نتیجPPه تولیPPد اسPPیدهای چPPربpH( کاهش 2

مانع رشد بعضی گونهای باکتریایی خاص بیمPPاری زاpHزنجیره کوتاه؛ مقادیر کم و نیز تحریک رشد بیفیدوباکترها و سایر باکتری های اسید الکتیک می شود.

،B1( تولیPPد ترکیبPPات غPPذایی، ماننPPد ویتPPامین هPPای گPPروه ب ) 3 B2، B6، B12) نیکوتینیک و فولیک اسید.

( افزایش وزن خشک مPدفوع کPه بPا افPPزایش تعPداد بPPاکتری هPا در اثPPر تخمPیر4گسترده الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم مرتبط است.

( ممانعت از یبوست در نتیجه حجم دهی به مدفوع و اثرات احتمالی بر حPPرکت5 مدفوع در روده؛ ویژگی غیرقابل جذب بPودن الیگوسPPاکاریدهای غPیر قابPل هضPPم بدین معنی است کPه آنهPا دارای اثPPراتی مشPابه فیبرهPPای بPPوده و در نتیجPPه مPانع یبوست می شوند. محصول نهایی تخمPPیر این مPPواد توسPPط بPPاکتری هPPای کلPPون، اسید های چرب زنجیره کوتاه هستند که توسط سلول های اپیتلیال کلون جذب و

استفاده شده و سبب تحریک رشد در آنها می شود. ( ممانعت از اسهال؛ خصوصا زمانی که با عفونت های روده ای مرتبPPط باشPPد.6

این مورد احتماال به دلیل اثر بازدارنده بیفیدوباکترها بر باکتری های گPPرم منفی وگرم مثبت می باشد.

13

( اثر محPPافظتی علیPPه عفPPونت هPPای لولPPه گPPوراش، تنفسPPی، ادراری، بPPه دلیPPل7 خاصیت بازدارندگی چسبیدن باکتری ها به سطح اپیتلیال )اولین مرحله در فرایند

عفونت(. ( افزایش در جذب مواد معدنی، مانند آهن، کلسیم و منگنز، بPPه دلیPPل ظPPرفیت8

اتصال و کمپلکس دهندگی الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم؛ به طوری کPPه مPPواد معدنی به انها متصل و تشکیل کمپلکس می دهد. در نتیج در روده کوچPPک جPPذب نشده و به کلون می رسند که در آنجا از شبکه کربوهیPPدراتی جPدا شPPده و جPذب می شوند. افزایش جذب کلسیم به سبب افزایش چگالی و توده استخوان، مPPانع از جذب مواد معدنی ارائه شPPده شPامل اثPر اسPPمزی، اسPیدی شPدن کلPون و در نتیجه تخمیر و تولید های اسیدهای چرب زنجیره کوتاه، شکل)یا فرم( نمPPک هPPای

کلسیم و منیزیم این اسید ها و هایپرتروفی دیواره کلون می باشد. ( اثر مفید بر متابولیسم کربوهیدرات ها و چPPربی هPPا؛ بPPه طPPوری کPPه منجPPر بPPه9

کاهش غلظت الکل، تری گلیسیرید و فسفولیپید در خون و در نتیجه کاهش خطر دیابت و چاقی می شود. تغییرات غلظت کلسترل در سرم با تغییرات میکروفلور روده ای مرتبط می باشPPد. بعضPPی از سPPویه هPPای الکتوباسPPیلوس اسPPیدوفیلوس

Lactobacillus acidophilusدPPذب می کننPPکلسترل موجود در محیط کشت را ج ، در حالی که بعضPPی مPPانع جPPذب کلسPPترل از طریPPق دیPPواره روده می شPPوند. بPPه عبارت دیگر به نظر می رسد تغییرات در متابولیسم چربی در نتیجPPه آداپتاسPPیون متابولیکی کبد می باشد که اسید های چPPرب زنجPPیره کوتPPاه قPPادر بPPه انجPPام آنهPPا هستند.کاهش خطر سرطا و اصوال سرطان روده؛ به نظر می رسد این اثPPر ضPPد سرطانی با افزایش ایمنی سلولی اجزاء دیPPواره سPPلول و خPPارج سPPلول بیفیPPد و

-p ، آمونیPاک، pHباکترها مرتبPط اسPPت. پارامترهPای فPیزیلوژیکی مPدفوع ماننPد کرزول و ایندول )محصول جانبی تریپتوفان که در طول فرایند فساد در روده بPPه وسیله بعضی از گونهای باکتریایی تولید می شود( به عنوان عوامل خطر ساز نه تنها عامل توسعه سرطان کلون بلکه برای بیماری های سیمتمیک در نظر گرفتPPه می شPPوند. در مطالعPPات انسPPانی مشPPخص شPPده کPPه خPPوردن دی سPPاکاریدهای

-P و نPPیز کPPاهش غلظت آمونیPPاک، pHتPPرانس گاالکتوزیلPPه شPPده سPPبب کPPاهش کPPروزل و اینPPدول، و افPPزایش جوامPPع باکتریPPایی بیفیPPدوباکترها و الکتوباسPPیلی و کاهش باکتروئیداسه می شود. به نظر می رسPPد این تغیPPیرات اثPPرات مفیPPدی در

کاهش خطر توسعه سرطان دارند. تمام اثرات ذکر شده در باال به طور سودمندی بر سالمت میزبان اثPPر دارنPPد، بPPههمین دلیل الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم به عنPPوان هPPای غPPذاهای عملکPPردی )

Functional foodدر نظر گرفته می شوند. این مواد می توانند به عنوان " اجزاء ) غذایی که عملکردهای فیزیولوژیکی بدن را تحت تأثیر قPرار داده و اثPرات مثبPتی

بر سالمتی میزبان دارند" در نظر گرفته می شود. برخی از محققین اعتقPPاد دارنPPد کPPه اثPPرات مفیPPد بPPر سPPالمتی در نتیجPPه خPPوردن الیگوساکاریدها، مشابه اثPPرات فیبرهPPا در جPPیره می باشPPد زیPPرا انPPدازه قطعPPات

( را افزایش داده و زمان عبور از دستگاه گوارش را کاهشFecal bolusمدفوع )

14

می دهنPPد و بهبئPPد سPPالمتی دسPPتگاه گPPوارش و بهبPPود کنPPترل گلPPوکز و تغیPPیرdelzenneمدوالسیون تری گلیسریدها را به دنبال دارنPPد ) and roberfroid, 1994;

roberfroid and salvin (. بPPه عالوه الیگوسPPاکاریدهای غPPیر قابPPل هضPPم در2000 مقایسه با فیبرها دارای مزیت هایی هستند زیرا دوز روزانه کمتری از آنهPPا مPPورد نیاز است و اگر طبق دوز توصیه شده مصرف شوند مشPPکلی ایجPPاد نمی کننPPد . آنها کمی شیرین بوده و بافت و طعم نا مطلوبی ندارند. کPPامال محلPPول در آب از لحاظ فیزیکی پایدار و به راحتی قابل ترکیب در غذای فرآوری شPPده و اسPPتفاده

به عنوان مکمل غذایی هستند.

- منابع طبیعی حاوی الیگوساکاریدهای غیرقابل هضم1-2-5 انPPواع مختلPPف الیگوسPPاکاریدهای غیرقابPPل هضPPم را می تPPوان بPPه عنPPوان جPPزئی طبیعی در شیر، عسل، میوه ها و سبزیجات مانند پیاز، کنگرفرنگی، کاسنی، تPPره

( مشPPاهده کPPرد. درSalsify(، جPPو، شPPنگ )Ryeفرنگی ، سیر ، موز، گنPPدم سPPیاه ) 6 درصPPد و 3/0اغلب این مPPوارد غلظت الیگوسPPاکاریدهای غیرقابPPل هضPPم بین

درصPPد اسPPت در10 و 5درصد وزن تر است؛ در کاسنی و شنگ این مقادیر بین در صد هم می رسد. منابع دیگPPری کPPه بPPه طPPور20حالی که در کنگر فرنگی به

طPPبیعی حPاوی الیگوسPPاکاریدهای غیرقابPل هضPPم هسPتند، گادالکتوزیPPل سPPاکاروز رافینوز و استاچیوز سویا و دانه سابر حبوبPPات زایلوالیگوسPPاکاریدهای موجPPود در

,Voragenجوانه پامبو و الیگوسPPاکاریدهای حPPاوی گPPادالکتوز در شPPیر می باشPPند )1998.)

مارچوبه،چغندر،قند،سیر ، کاسنی ، پیاز، کنگر فرنگی ، گندم، عسل، موز،جPPو/فYanگوجه فرنگی، گندم سیاه منابع خاص فروکتوالیگوساکاریدها هسPPتند ) 1996;

Zimer and Gibson, 1998; sangeeta et al., 2005ایزومالتوز به طور طبیعی در . ) Linaعسل عصاره نیشکر و محصPPوالت وابسPPته بPPه آن دیPPده می شPPود ) et al.,

(. زایلوالیگوساکاریدها به طور طبیعی در جوانه بامبو، میPPوه هPPا سPPبیزیجات2002Verschuereشیر ، عسل وجود دارد ) et al., (. گاالکتوالیگوساکاریدها را بPPه2000

طور طبیعی در شیر انسان و به مقPPدار کم در شPPیر گPPاو می تPPوان یPPافت . دانPPه بقوالت، نخود فرنگی، عPPدس ، لوبیPPا ، گPPل تخمی، و خPPردل غPPنی از رافینوزهPPای

(.Sanchez – mata et al., 1998الیگوساکاریدی هستند )

- تولید صنعتی الیگوساکاریدهای غیر قابل هضم1-2-6 فرایندهای تولید صنعتی به منظور استخراج الیگوساکاریدهای غیر قابPPل هضPPم از منابع طبیعی از طریPق هیPدرولیز پلی سPPاکاریدها و سPPنتز آنPPزیمی و شPPیمیایی از سوبسترهای دی ساکاریدی ، بنا نهاده شده اسPPت. بPPه غPPیر از الیگوسPPاکاریدهای دانPPPه سPPPویا و رافینPPPوز )کPPPه بPPPا عصPPPاره گPPPیری مسPPPتقیم تولیPPPد می شPPPوند( الیگوساکاریدهای غPPیر قابPPل هضPPم بPPا اسPPتفاده از فراینPPدهای آنPPزیمی تولیPPد می شوند. این مواد را می توان با واکنش های آنزیمی ترانس گلیکوزیالسیون از قنPد های ساده مانند ساکارز و الکتوز و یPPا بPPا هیPPدرولیزآنزیمی کنPPترل شPPده و از پلی

(. دSako et al., 1999( )2-1ساکاریدها مانند نشاسته و زایالن بدست آورد )شکل

15

راین فرایند معموال مقدار زیادی الیگوساکارید تولید می شود که بر حسب ردجPPه پلیمریزاسیون و گاهی موقعیت پیوندهای گلیکوزیدی با هم متفاوتند. بعد از شکل گPPیری الیگوسPPاکاریدها سوبسPPترهای واکنش نشPPده و مونوسPPاکاریدها نPPیز وجPPود دارند این قندهای مزاحم با روش کروماتوگرافی خPPارج می شPPوند تPPا محصPPوالت

Crittendenنهایی کیفیت باالتر داشته ، الیگوساکاریدهای خالص تری تولید گردند )and Playne, 1996.)

اینولین یک مولکول ساده نیست بلکPPه یPPک الیگوسPPاکارید غPPیر قابPPل هضPPم )و نPPاPolydisperse PP)β-2,1محلول در آب( بوده و یPPک ) fructanایPPد هPPد. واحPPمی باش

( در این ترکیب؛ الیگومرها و پلیمرهای خطی فروکتPPوز هسPPتندکه بPPهFفروکتوز ) ( در انتهPPای هPPرG متصل شده اند به طور شاخص مولکول گلPPوگز)β-2,1باندهای

به عنوان سوکروز متصلα-2,1زنجیره فروکتوز مستقر شده و به وسیله یک باند شده است.

می باشPPد و این پیونPPدهای مPPانع ازβ-2,1ساختار منحصر به فرد اینولین بانPPدهای این می شوند که اینولین در روده کوچک هضم تجذیه و جPPذب شPPود ولی توسPPط

Lopezباکتری های مفید در روده تخمیر شده و مورد مصرف قرار می گیرنPPد ) – Molina et al., (. رافتیلین فرم استاندارد اینولین اسPتخراج شPده از ریشPه2005

درصد می باشد.2-60گیاه کاسنی می باشد و درجه پلیمریزاسیون آن

- میکروفلور باکتریایی دستگاه گوارش ماهی1-3 دستگاه گوارش ماهی ها از یک لوله عضالنی پوشیده شده توسط الیه نPPازکی از

(. با توجه بهRingo et al., 1995موکوس سلول های اپیتلیال تشکیل شده است ) اینگه دستگاه گوارش ماهی ها اکوسیسPPتم متنPPوعی را بPPرای میکروارگPPانیزم هPPا

Ringoفراهم می کند، جوامع میکروبی آن بسیار بیشتر از محیط پیرامون اسPPت)et al., (. اگرچPPPه تPPPا کنPPPون مطالعPPPات بسPPPیاری در زمینPPPه مطالعPPPه1995

میکروفلورباکتریایی دستگاه گوارش ماهی انجام شPPده، امPPا اغلب این مطالعPPات تحت شPPرایط هPوازی بPوده اسPPت و تPوجهی بPه کشPPت بPاکتری هPPای بی هPوازی

Burr)بخصوص بی هوازی اجباری( نشده اسPPت ) et al., (. بPPه همین دلیPPل2005 حتی برخی از محققین چنین نتیجه گیری کPPرده انPPد کPPه بPPاکتری هPPای بی هPPوازی

(.Spanggaaurd et al., 2000نقش جزئی در میکروفلور روده ماهی دارند ) بطPPور کلی در مراحPPل اولیPPه الروی و پس از بPPاز شPPدن دهPPان بPPاکتری هPPا وارد دستگاه گوارش شده وروده از حالت استریل خارج می شود. روند شPPکل گPPیری میکروفلور باکتریایی روده شامل دو مرحله می باشد ابتدا فلور باکتریایی موقت اولیه شکل گرفته و سپس در مراحل بعدی بPPه صPPورت یPPک فلPPور دائمی توسPPعه می یابد. باکتری هایی می توانند در فلور باکتریایی دائمی حضور داشته باشند که

،PHقابلیت سازش با شPPرایط حPPاکم بPPر دسPPتگاه گPPوارش ماننPPد تPPرکیب غPPذایی، شرایط بی هوازی، غلظت نمPPک هPPای صPفراوی، آنPزیم هPای گوارشPPی، سیسPPتم

Hansenایمنی میزبPPان و جوامPPع باکتریPPایی موجPPود داشPPته باشPPند) and Olafsen, (. در مطالعات انجام شده بر روی میکروفلور روده ماهی هPPا،جنس و گونPPه1999

16

هPPای مختلفی از بPPاکتری هPPا جPPدا شPPده انPPد کPPه از آن جملPPه می تPPوان بPPه Ringoالکتوباسیلوس، کارنوباکتریوم، آئروموناس و پزودوموناس اشPPاره داشPPت )

et al., 1995.) بطور کلی عواملی نظیر تغذیه، محیط زیست و آلودگی های آن و مرحله زیستی

Hansenموجود بر فلور روده اثPPر گPPذار هسPPتند ) and Olafsen, (. عالوه بPPر1999 موارد فوق، ترکیب شیمیایی و وجود سوبسترای رشد، وجود مکان هPPای تشPPکیل کلنی، کنش های ایمونولوژیکی، زمان عبور از روده، پی-اچ روده، وجود پذیرنPPده های الکترون غیر آلی، وجود مواد ضد باکتریایی، سن میزبان و عوامل بیماری زا

(.Fooks et al., 1999نیز بر ترکیب میکرو فلور روده ای موثر هستند)

- باکتری های اسید الکتیک در دستگاه گوارش ماهی ها1-4 در زمPان تفPریخ، دسPPتگاه گPوارش اسPPتریل اسPت امPا انPدکی پس از آن الرو در معرض محیط و غذای زنده قرار می گPیرد کPه این مPورد منتج بPه تشPکیل کلPنی

Hansenهای موثر توسط باکتری های مختلPPف می شPPود ) et al., (. تعPPادل1992 باکتریایی متاثر از عوامل متعددی از قبیPPل غPPذا، فPPیزیولوژی مPPاهی و فاکتورهPای ایمنی شناختی می باشد. مستقر شدن فلور طPPبیعی روده ای بPPه عنPPوان مکمPPل آنPPزیم هPPای گوارشPPی تلقی شPPده و در شPPرایط طPPبیعی، سPPدی در برابPPر تهPPاجم

عوامل بیماری زا می باشد. عموماً اعتقاد بر این است که باکتری های گرم مثبت )ماننPPد بPPاکتری هPPای اسPPید الکتیک( از نظر تعداد، اعضای غالب فلور نرمال باکتریPPایی حیوانPPات خPPونگرم در

(. در مطالعات انجام شدهRingo&Gatesoupe, 1998مراحل اولیه زندگی هستند ) روی ماهی نیزباکتری های اسید الکتیک از دستگاه گوارش الرو و ماهی جدا شده

(.Strom and Olafsen, 1990; Askarian& kousha,2007اند ) فاکتورهای محدود کننده جداسازی الکتوباسیلوس هPPا از میکروفلPPور روده مPPاهی می تواند دمPای آب در طPPول دوره ی انکوباسPیون، زمPPان انکوباسPPیون و فقPدان

,Ringo&Gatesoupeگلوکز در محیط باشPد ) (. زمPان انکوباسPPیون و فقPPدان1998 گلوکز مهمترین فاکتورهای بحرانی هستند، زیرا عموماً پذیرفتPPه شPPده اسPPت کPPه باکتری های اسید الکتیک مانند جنس هPPای الکتوباسPPیلوس هPPا و کPPارنی بPPاکتریوم دارای رشد آهسته اند و در نیازهای غذایی خود مصر بوده و رشد آنها منحصر بPPه

(. عالوه بر کربوهیدراتBrock and Madigan, 1991حضور قندها در محیط است ) ها به عنوان منبع کربن و انرژی، آنها برای رشPPد نیPPاز بPPه نوکلئوتیPPدهای مختلPPف،

آمینو اسیدها و ویتامین ها دارند..

17

- باکتری های اسید الکتیک در دستگاه گوارش و مدفوع ماهی ها )3-1جدول Ringo&Gatesoupe, 1998)

18

( دارایLABالکتوباسیلوس ها، به عنوان گروه غالب باکتری هPPای اسPPید الکتیPPک )( :Ringo& Gatesoupe,1998توانایی ذیل می باشند )

- اتصال به سول های غشاء مسواکی روده- ممانعت یا کاهش اتصال باکتری های بیماری زا

- رقابت جهت کسب مواد مغذی حیاتی- تحریک دستگاه ایمنی میزبان

- ثبات در شرایط طبیعی دستگاه گوارش و تکثیر - تولید اسPید، پراکسPید هیPدروژن، و باکتریسPیون هPای مPانع رشPد بPاکتری هPای

بیماری زا- ایمن و در نتیجه غیر مهاجم، غیر سرطان زا و غیر بیماری زا

19

- فاکتورهای موثر بر حضور باکتری های اسید الکتیک در1-4-1دستگاه گوارش

گرچه بعضی از باکتری هPPای اسPPید الکتیPPک توانPPایی تشPPکیل کلPPنی را در دسPPتگاه گوارش میزبان دارند ولی در اکثر موارد باکتری های اسPPید الکتیPPک زنPPده موجPPود

Lidbech andدر غذا، چند روز بعد از بلع غذا از دستگاه گوارش حذف می شوند )NordT, 1993سویه های باکتری های اسید الکتیکی که بطور طبیعی در دستگاه .)

گوارش حضور دارند، باید قابلیت بقاء در آن محیط را داشته و قادر به اتصال بPPه سطح خارجی سلولهای اپیتلیال باشPPند. بطPPور کلی فاکتورهPPای مPPوثر بPPر حضPPور

باکتری های اسید الکتیک در میکروفلور روده شامل موارد ذیل است:الف. اسیدهای چرب غیر اشباع جیره

اسیدهای چرب بلند زنجیره، به خصوص اسیدهای چرب غیر اشباع برای بسPPیاریMaczulakاز گونPه هPای باکتریPایی مخصوصPاً بPاکتری هPای سPPلولولیتیک ) et al.,

( سمی هستند. اگرچه مقادیرPrins et al., 1972( و باکتری های متانوژنیک )1981 کم اسیدهای چرب غیر اشباع رشPPد بعضPPی میکروارگPPانیزم هPPا می باشPPد امPPا در تعداد کمی از مطالعات اثرات اجزاء جیره مانند اسPPیدهای چPPرب غPPیر اشPPباع بPPر

,Pollockفلور باکتریایی روده مورد بررسی قرار گرفته است.) (. مطالعPPه )1949 RIngo 1993a( نشان دهنده اثرات سوء اسیدهای چرب غیر اشباع لینولئیک)n-6 2

( بر الکتوباسیلوس ها و در نتیجه کاهش جمعیت آنهPPا در میکروفلPPور دسPPتگاه18:گوارش چار قطبی بود.ب. ترکیب مواد غذایی

به دلیل محدودیت تامین مواد غذایی در اکوسیستم دستگاه گوارش، ترکیب فلور باکتریایی متاثر از رقابت برای کسب مواد غPPذایی می باشPPد. الکتوباسPPیلوس هPPا قادر به تولید آنزیم های تجزیه کننده خارج سلولی نیستند بنابراین نها وابسPته بPه میکروارگانیزم دیگری هستن تا بر مولکولهای پیچیده عمPPل کPPرده و مPPواد غPPذایی

(.Ringo&Gatesoupe, 1998خاص را برای آنها فراهم کنند )ج. اکسید کرومیک ( معمولPPترین شPPاخص اسPPت کPPه بPPرای مشPPخص کPPردنCr2O3اکسPPید کرومیPPک )

قابلیت هضم مواد غذایی در پستانداران و ماهی ها استفاده می شود. مطالعPPات انجام شده بر روی مPPاهی چPPار قطPPبی نشPPان داد تغذیPPه بPPا جPPیره حPPاوی اکسPPید کرومیک سبب کاهش سویه های باکتری هPPای گPPرم منفی روده و نمونPPه مPPدفوع

,Ringoمی شود، در حالی که تعداد الکتوباسیلی ها ثابت باقی می مانPPد ) 1994.) کاهش باکتری های گرم منفی در دستگاه گوارش می تواند به دلیل دو مورد ذیل

(:Ringo, 1993bباشد )- اکسید کرومیک محل های اتصال را در دیواره روده تحت تاثیر قرار می دهد.1

20

- میکروارگانیزم های اکسید از مثبت ممکن اسPPت نسPPبت بPPه اکسPPید کرومیPPک2حساس تر باشند.

د. شوری انجام تحقیقات مقایسه ای بر روی ماهیان مهاجرت کننده بین آب شیرین و دریPPا جهت تعیین فلور باکتریایی روده جالب توجه است زیPPرا عملکPPرد روده در این دو محیط متفاوت است. تعدادی از محققین اثر شوری روی فلور باکتریایی روده را

Sakataبررسی نموده اند ) et al.,1980; Ringo et al., (. اما فقPPط در یPPک1995 تحقیق تاثیر شوری بر باکتری های اسید الکتیک موجود در روده نشان داده شPPده

&Ringoاست ) Storm (. در این مطالعه مشخص شد در ماهی چار قطPPبی1994 پرورش یافتی در آب دریا، جمعیت الکتوباسیلوس ها در میکروفلور روده کPPاهش

یافته اما جمعیت جنس های لئوکونوستوک و استرپتوکوکوس ثابت باقی ماند.ه. استرس

تغییر در نPوع مPواد غPPذایی و شPPرایط نPPامطلوب جPیره ای یPا محیطی می تواننPPد سیستم گوارشی ماهی را تحت تاثیر قرار دهند. این مPPورد ممکن اسPPت شPPرایط استرس زا مانند گرسنگی و کاهش بلع غذا را بPPه دنبPPال داشPPته باشPPد. در زمPPان استرس باالنس باکتریایی روده آشفته و نامنظم می شود. مطالعات انجام شPPده روی حیوانات خونگرم نشان داده است که استرس مزمن سبب دگرگPPونی فلPPور باکتریایی روده شده و روند معمول آن کاهش الکتوباسیلوس هPPا و افPPزایش کلی

,Tannockفرم ها می باشد ) (. پر بیوتیک هPPا و پروبیوتیPPک هPPا در این زمPPان1983 ارزش باالیی داشته و باالنس باکتریایی را به سمت باکتری هPPای مفیPPد تغیPPیر می دهند. مطالعات انجام شده در زمینه اثرات اسPPترس بPPر میکروفلPPور روده مPPاهی حاکی از تحت تاثیر قرار گرفتن میکروفلور در نتیجه استرس بود. بPPرخالف یافتPPه های بدست آمده بر روی حیوانات خونگرم در مPPاهی هPPای تحت اسPPترس، تعPPداد الکتوباسیلوس ها افزایش و تعداد باکتری های گرم منفی کاهش یPافت کPه دلیPل

(.Ringo et al., 1997این امر مشخص نیست )

- کنش های متقابل باکتری های اسید الکتیک و پربیوتیک1-4-2ها

بPPاکتری هPPای اسPPید الکتیPPک موجPPود در میکروفلPPور بPPویم روده قادرنPPد بPPه طPPور گزینشی پربیوتیک ها را تخمیر کنند. تخمیر سوبسPPتراهای موجPPود در روده سPPبب افزایش انرژی و رشد این باکتری ها می شود که این مورد به خودی خود اثPPرات مفیدی از طریق تقویت میکروفلور روده ای و ممانعت از تشکیل کلPPونی بPPاکتری

(. این بPPاکتری هPPا مPPوادی1386های بیمPPاری زا دارد ) پورامیPPنی و حسPPینی فPPر، ترشح من کنند که سبب تحریک دستگاه ایمنی می شود از ایPPنرو سPPبب افPPزایش مقاومت میزبPPان در برابPPر عوامPPل بیمPPاری زا می شPPوند.عالوه بPPر این مهمPPترین

(SCFAمحصول نهایی میتابولیسم پربیوتیک هPPا اسPPیدهای چPPرب زنجPPیره کوتPPاه ) هستند. این اسPPیدهای چPرب زنجPیره کوتPاه عمPدتاً شPامل اسPتات، پروپیونPات و

21

بوتریات می باشند. مPPواد دیگPPری از جملPPه الکتPPات، پPPروات، اتPPانول، هیPPدروژن و,Mahious&Ollevierسوکسینات نیز در نتیجه متابولیسم بوجPPود می آینPPد ) 2005;

David et al., 1999; Gibson, 1998; Gibson, 1999 این مواد برای1-3( )جدول .) اثPPراتSCFAنگهداری با النس کاهش در طPPول عمPPل تخمPPیر شPPکل می گیرنPPد.

(.Tellez et al., 2006بسیاری بر فیزیولوژی دستگاه گوارش میزبان دارند)- محصوالت نهایی تخمیر پربیوتیک ها توسط باکتری های روده ای )4-1جدول

Gibson, 1999)

مطالعات انجام شPده بPر روی مPدل هPای حیPوانی نشPان داده اسPت کPه مPیزان اسیدهای چرب زنجیره کوتاه در مداحل ابتPPدایی زنPPدگی در روده کم می باشPPد و

Vanمقادیر آنها پس از استقرار فلور باکتریایی بPPه بPPاالترین حPPد خPPود می رسPPد )der wienlen et al, 2000 تولید .)SCFAدر روده بسیاری از ماهی های استخوانی

آب شیرین و دریایی نیز مشاهده شده است، از این رو میتPPوان از آن بPPه عنPPوان (. اسیدهای چربKihara& Sakata, 2002الزمه متعادل بودن فلور روده نام برد )

زنجیره اثرات بسیاری بر وضعیت فیزیولوژیکی دستگاه گوارش دارند :

. تکثیر ازدیاد میکروویلی ها1 اسیدهای چرب زنجPPیره کوتPPاه منPPابع انPPرژی مهمی بPPرای میکPPروویلی هPPای روده

(.Bird et al, 2002% انرژی روزانه آنها را تامین می کنند )50هستند بطوریکه بنابراین افزایش میزان اسیدهای چرب زنجیره کوتاه سبب تPPامین بیشPPتر انPPرژی برای میکروویلی ها شده که این مورد نقش مهمی در جPPذب مPPواد مغPPذی جPPیره

(.Gibson &Raberfroid, 2008دارد ). کاهش پی اچ روده2

22

اسیدهای چرب زنجیره کوتPPاه اسPPیدهای ضPPعیفی هسPPتند، بPPا این وجPPود افPPزایش میزان آنهPPا در روده سPPبب کPPاهش پی اچ در روده شPPده کPPه بPPه نوبPPه خPPود نقشموثری در سPPرکوب عوامPPل بیمPPاری زا و افPPزایش حاللیت بعضPPی عناصPPر دارد )

Bongers et al, 2003 به عنوان مثال تحقیقات نشان داده است به2-1( )شکل .) کارگیری پربیوتیک ها در جیره از طریPPق تولیPPد اسPPیدهای چPPرب زنجPPیره کوتPPاه وکاهش پی اچ زیست فراهمی کلسیم، آهن، منیزیوم و ... را افPPزایش می دهPPد )

Kihara& Sakata, 2002.). جریان خون3

تحقیقات انجام شده مشخص کرده است که ورود اسیدهای چرب زنجیره کوتPPاه,Cherbutبه روده سبب افزایش جران خون می شود ) (. به نظر می رسPPد1995

افزایش جریان خون منجر به اکسیژن رسانی بهPPتر بPPه بPPافت هPPا و انتقPPال مPPواد مغذی جذب می شود. که این عمPPل منجPPر بPPه بهبPPود وضPPعیت فPPیزیولوژیکی کPPل

(.Tellez et al, 2006دستگاه گوارش می شود )

PلPکP1شP-1Pو PکPیPتPوPیPبPرPپ PرPیPمPخPت PهPجPیPتPن PرPد PمPیPسPلPک PتPیPلPلPالPح PشPیPاPزPفPا PمPزPیPنPاPکPم P- PچPا P-PیPپ PشPهPاPک

23

PلPکP1شP-2PرPیPجPنPز PبPرPچ PیPاPهPدPیPسPا PطPسPوPت PهPدPش PدPاPجPیPا PیPلPدPاPبPت PمPسPیPنPاPکPم P- PیPنPدPعPم PرPصPاPنPع PبPذPج Pو PکPیPتPوPیPبPرPپ PرPیPمPخPت PزPا PلPصPاPح PهPاPتPوPک

مطالعات انجام شده بر روی حیوانات آزمایشگاهی نشان داده اند کPPه اسPPیدهایچرب زنجیره کوتاه سبب افزایش جذب کلسیم، منیزیم، روی و آهن می شوند )

Delzenne&Roberfroid, 1994یکی از دالیل این افزایش جذب افزایش اسیدهای .) چرب زنجیره کوتاه و کاهش پی- اچ است که در بPPاال ذکPPر شPPد. امPPا نکتPPه جPPالب توجه این است که حتی در غیاب تغییر غلظت اسیدهای چرب زنجPPیره کوتPاه نPیز جذب کاتیون های دو ظرفیتی در اثر استفاده از پربیوتیک ها افزایش پیدا می کند

(.David et al, 1999که تا کنون برای آن دلیلی پیدا نشده است ) اثرات اسمزی یکی دیگر از دالیل توجیه کننPPده افPPزایش جPPذب مPPواد معPPدنی می باشد. مطالعات نشان داده است که تغییرات اسمواللیتی محتوی روده در نتیجPPه استفاده از پربیوتیک ها، سبب افزایش مایعاتی در روده می شود که مواد معPPدی را می توانند در خود حل کرده و منبع غنی از مواد معدنی را در روده برای جذب

Younesبوجود آورد ) et al, (. اسیدهای چرب زنجیره کوتPPاه احتمPPاالً جPPذب2001 از طریق مکان های+Mg2یا +Ca2با +Hسلولی کلسیم و منیزیوم را بواسطه تبادل

Trinidadدر غشاء سلول های روده افزایش می دهPPد )+Ca/Mg-Hتبادل کننده et al, (. در زمینه جPPذب کلسPPیم مPPورد دیگPPری کPPه توجیPPه کننPPده3-1( )شکل 1996

کPه ) پروتPئینCalbindinافزایش جذب در نتیجه پربیوتیPک اسPت، تغیPیر سPطوح (.Bongers& Van den Heuvel, 2003( می باشد )CaBPمتصل شونده با کلسیم یا

کمبود این پروتئین، انتقال کلسیم و جذب آن از دیواره سلول هPPای روده محPPدود می کنPPد. پربیوتیPPک سPPبب افPPزایش سPPطوح این پروتPPئین در روده و در نتیجPPه

24

افزایش جذب کلسیم شود. بPPه نظPPر می رسPPد این عمPPل بواسPPطه اسPPید چPPرب زنجیره کوتاه بوتریات انجام می شود چرا که این اسید چرب زنجیره کوتاه سبب

Maiyar در ماکیان شده است )CaBPافزایش t al, (. همچPPنین آزمایشPPات1992 انجPPام شPPده روی حیوانPPات آزمایشPPگاهی حPPاکی از آن بPPوده اسPPت کPPه تغذیPPه بPPاپربیوتیک سبب هایپرتروفی و افزایش سطح سلول های اپیتلیال روده می شود )

Younes et al, 2001 که این مورد نیز در جذب .)paracellularو transcellularمواد (.Bongers& van den Heuvel, 2003معدنی موثر است )

پربیوتیک ها همچنین سبب بهبود متابولیسم چربی ها از طریق کاهش کلسPPترول، تPPری گلیسPPریدها، فسPPفولیپیدها در سPPرم خPPون می شPPوند. این کPPاهش بPPدلیل جلوگیری از فعالیت های آنزیم های لیپوژنیPPک و متعPPاقب آن کPPاهش سPPنتز اسPPید

(.Van Loo et al, 1999چرب در کبد و کاهش سطوح کلسترول پالسما می باشد ) بعالوه اسیدهای چرب زنجیره کوتPPاه تولیPPد شPPده در نتیجPPه تخمPPیر پربیوتیPPک نPPیز قادرند سطوح کلسترول خون را تنظیم و متابولیسم چربی هPPا را بهبPPود بخشPPند، مثالً استات به عنوان محرک تولید و پروپیونات به عنPPوان بازدارنPPده سPPبب تنظیم

(.Jenkins et al, 1999سنتز کلسترول می شوند ) یکی دیگر از اثرات پربیوتیک ها تحریک سیستم ایمنی است. تPPا کنPPون مطالعPPات زیادی در زمینه مکانیسم اثرگذاری پربیوتیک ها بPPر سیسPPتم ایمPPنی انجPPام نشPPده است. اما مطالعات انسانی انجام شده حاکی از آن بPPوده اسPPت کPPه اسPPتفاده ازالکتوز )نوعی پربیوتیک( سبب افزایش سPPطح گلوتPPامین سPPرم خPPون می شPPود )

Jenkins et al, (. گلوتامین سوبسترا ترجیحی برای بافت هPPای لنفPPاوی می1991 Davidباشند واحتماالً تحت شرایطی سبب بهبود عکملکرد ایمPPنی می شPPوند ) et

al, (. همچنین مطالعات انجPام دشPه روی مPاهی هPا نشPان داده اسPPت کPه1999 lectin-likeپربیوتیPPک اینPPولین از طریPPق اتصPPال بPPه گیرنPPده هPPای لکPPتین شPPکل )

receptorsتگاهPPک دسPبب تحریPا سPروی لکوسیت ها و افزایش تکثیر ماکروفاژه ) Cerezuelaایمنی می شود ) et al, (. بعالوه اشکال غیر محلPPول اینPPولین از2007

در سPPطح ماکروفPPاژ، قPPادر بPPه فعالسPPازیC3طریPPق تسPPریع حضPPور کمپلمPPان complement pathway alternativeراتPPه اثPPوط بPPا مربPPم هPPتند. این مکانیسPPهس

پربیوتیک بر سیستم ایمنی پستانداران است اما متاسفانه در مورد ماهی بسیاری از این مکانیسم ها ناشناخته مانده است. افزودن پربیوتیک مانان الیگPPو سPPاکارید به جیره قزل آالی رنگین کمان سبب تحریک ایمنی شPPد. تحریPPک دسPPتگاه ایمPPنی

mannose-bindingمی تواند ناشی ا تحریک ترشح proteinولPPه کپسPPه بPPد کPPباش باکتری های بیماری زا متصل شده و سبب راه انPPدازی سیسPPتم تثPPبیت کمپلمPPان

Staykovمی شود ) et al, (. همانطور که بیان شPPد، تعPPیین دقیPPق مکانیسPPم2007 اثرگذاری بر سیستم ایمنی مPPاهی نیازمنPPد انجPPام مطالعPPات بیشPPتر در آینPPده می

باشد.

25

26

فصل دوم : ادبیات و

پیشینه تحقیق

پس از معرفی ایده استفاده از پربیوتیک ها در آبزی پPPروری، مطالعPPات بسPPیاری در زمینه استفاده از این مواد بر رشد، بازماندگی، ایمنی و فلPPور باکتریPPایی روده گونه های مختلف ماهیان، سخت پوستان و صدف ها انجام شده است. همچPPنین بعد از معرفی ایده استفاده از پربیوتیک ها مطالعاتی در زمینPPه کPPاربرد این مPPواد در آبزی پروری انجام شده است اما هنوز بسیاری از جنبPPه هPPای اسPPتفاده از این مواد در آبزی پروری ناشناخته مانده است. در این بخش به مطالعات انجام شده

در این زمینه پرداخته شده است:

- تحقیقلت انجام شده در ایران2-1 (، مطالعه ای را در زمینه اثرات استفاده از پربیوتیک1386- زارع و حسینی فر )

اینولین بر رشد، باز ماندگی وفلور باکتریایی دستگاه گPPوارش مایسPPیس و پسPPت الرو میگوی سفید هندی انجام دادند. این مطالعه در دو مرحله الروی )مایسیس( و پست الروی انجام شد و میگوها با آرتیما غنی شPPده و پربیوتیPPک اینPPولین تغذیPPه شدند. در پایان دوره آزمایش به منظور تعیین اثرات پربیوتیک، فاکتورهای رشPPد، بقاء، مقاومت در برابر استرس شوری و فلور باکتریایی روده مورد بررسی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که تغذیه پست الرو ها با آرتیما غPPنی شPده از پربیوتیPPک بPPه طPPور معPPنی داری بازمانPPدگی پسPPت الورهPPا را افPPزایش می دهPPد، درحPPالی کPPه افPPزایش معPPنی داری در بازمانPPدگی مایسPPیس هPPا مشPPاهده نشPPد. همچنین پربیوتیک اثری بر فاکتورهای رشد میگوها نداشت و فلور باکتریایی روده

نیز در میگوهای تغذیه شده با اینولین مشابه شاهد بود. درصPPد پربیئتیPPک اینPPولین در2 و 5/0(، اثرات از سطوح 1386- شیخ االسالمی )

( را بر فاکتورهای رشد، ایمنیancorbyncbusmykissجیره قزل آالی رنگین کمان ) و مقاومت در برابر مواجهه با اسPPترپتوکوکوزیس مPPورد بررسPPی قPPرار داد. نتPPایج این مطالعه موید این بود که پربیوتیPPک اینPPولین اثریPPبر فاکتورهPPای رشPPد قPPزل آالندارد، اما بطور معنی داری سبب افزایش گلبول هPPای سPPفید و ایمونPو گلPوبین )

IgMوجهیPPل تPPور قابPPمی شود. همچنین قزل آالهای تغذیه شده با پربیوتیک بط ) بازماندگی بیشتری پس از مواجه با باکتری استرپتوکوک داشتند.

(، نیز در مطالعه ای به بررس اثرات پربیوتیک اینولین بPPر رشPPد،1387- اکرمی ) ( پرداخت.Husohusoبازماندگی و میکروفلور دستگاه گوارش فیل ماهیان جوان )

درصد پربیوتیک3 و 2، 1در این مطالعه فیل ماهی ها با جیره های حاوی سطوح هفته تغذیه شدند. برخالف بسیاری از گزارش های ارائه شPPده8اینولین به مدت

در زمینه پربیوتیک ها، در این مطالعه کاهش معنی دار رشد در بچه ماهیان تغذیه درصPPد1شده با اینولین مشاهده شد. البته افزودن اینPPولین بPPه جPPیره در سPPطح

سبب افزایش تعداد الکتوباسیلوس ها در روده شد. آنالیز آنزیم های خونی نشان داد پربیوتیک اینولید اثری بر آنها ندارد. بعالوه استفاده از پربیوتیPPک مPPذکور اثPPری

بر کیفیا الشه و فاکتورهای خونی نداشت. درصد اینPPولین را3 و PP،2 1(، در مطالعه ای سطوح 1387- اکرمی و همکاران )

( افPPزوده وancorbyncbusmykissبPPه جPPیره بچPPه مPPاهی قPPزل آالی رنگین کمPPان )

27

اثرات آن را بر فاکتورهای رشد و بقاء بررسی کردند. آنها گزارش کردند اینPPولیناثری بر رشد و بقاء بچه ماهی قزل آال ندارد.

درصد( پربیوتیPPک اینPPولین در2(، تنها از یک دوز )1387- اوجی فرد و همکاران ) ( اسPتفاده نمودنPد. در این مطالعPهLitooenaeusuannametجیره میگPوی وانPامی )

مشخص شPPد اینPPولین هیچ اثPPری بPPر فاکتورهPPای رشPPد، کPPارایی مصPPرف جPPیره وبازماندگی بچه میگوها ندارد.

( اثرات استفاده از پربیوتیک الیگوفروکتوز بر غPPالبیت جنس1388- حسینی فر ) الکتو باسیلوس در فلور باکتریایی روده ، بقاء، فاکتورهای خونی و بافت کبد بچPPه

% الیگوفروکتPPوز3 و PP،2 1فیل ماهی بررسPPی کPPرد. نتPPایج حاصPPل از تیمارهPPای % داشPPت. کPPه مثبت در بازمانPPدگی و غPPالبیت جنس2بهPPترین نتPPایج را مPPیزان

الکتوباسیلوس دارد و اثری بر بیرانجه های رشد نداشت و اثر سوء بر بPPافت کبPPدنداشت. بر وی برخی فاکتورهای خونی مؤثر بود.

( تأثیر سطوح متفاوت پربیوتیک اینولین بر عملکرد رشد و1389-90- خسروی )Rutilusترکیب الشه در بچPPه مPPاهی کلمPPه ) rutilus caspicusقPPه در این تحقیPPک )

% رشد بهتری نسبت به سایر گروه های داشته اما این افزایش در حPPدی5تیمار نبود که کارایی این ماده را اثبات نماید.

- تحقیقات انجام شده در سایر کشورها2-2 -Kihara( مطالعه ای به منظور تعیین اثرات الکتوساکارز بر1995 و همکاران ،)

Pargusبافت روده ماهی شانک ) majorورPPط فلPPاده توسPPرف این مPPیز مصPPو ن ) باکتریایی روده انجام دادند. نتایح آنها موید این بPPود الکتوسPPاکارز بPPاعث افPPزایش ضخامت غشاء پوششی روده شده و این مPPاده توسPPط فلPPور باکتریPPایی روده بPPه خوبی مورد استفاده قرار می گیرد. با اینم وجود همین محققین در مطالعاتی بPPر

( و ماهی قزل آالیCyorinuscarpio( P)Kihara& Sakata, 2001aروی ماهی کپور )&Kiharaرنگین کمان ) Sakata, 2001bوبیPPه خPPاکاروز بPPگزارش کردند الکتوس )

توسط فلور روده مورد استفاده قرار نمی گیرد. -Yoshida( ارانPPPان1995 و همکPPPان و مانPPPرات گلوکPPPه ای اثPPPدر مطالع ،)

الیگوسPPPاکارید را بPPPر ایمPPPنی و فاکتورهPPPای رشPPPد گربPPPه مPPPاهی آفریقPPPایی )ClariasgariepinusانPPPه مانPPPایج این مطالعPPPاس نتPPPر اسPPPد. بPPPی کردنPPPبررس )

الیگوساکارید اثری بر فاکتورهای رشد گربPPه مPPاهی آفریقPPایی نداشPPت. در پایPPان دوره ماهی های تغذیه شده با مانان الیگوساکارید اثری بر فاکتورهای رشد گربPPه مPPاهی آفریقPPایی نداشPPت. در پایPPان دوره مPPاهی هPPای تغذیPPه شPPده بPPا مانPPان

گرم بر کیلوگرم(، لیزوزیم سرم بیشتری نسPPبت بPPه10الیگوساکارید ) به میزان شاهد داشتند اما این روند در مPPورد تعPPداد نوتروفیPPل هPPای فعPPال شPPده مشPPاهده

نشد. و همکاران به نتایجی در خصوص تاثیر زیان بار اینولینP،Olsen 2001- در سال

( دسPPت یافتنPPد. درSalvelinusalpinusبر روی انترسیتهای روده ماهی چار قطبی )

28

درصPPد( بPPود15این مطالعه میزان بکار گرفته شده اینولین در جیره بسیار بPPاال ) که عPدم توانPایی بPاکتری هPای روده ای بPرای تخمPیر آن منتج بPه انباشPته شPدن اینPPولین در روده و اثPPرات زیPPان بPPار بPPر انتروسPPیت هPPا شPPد. بعالوه این انباشPPت اینPPولین در ردوده اثPPرات نPPامطلوبی بPPر فلPPور باکتریPPایی دسPPتگاه گPPوارش نPPیز

کPPاهشPP×56/3 104 بPPه PP×8/4 105داشPPتبطوریکه جمعیت باکتریPPایی روده از یافت. -Pryor( ارانPPان2003و همکPPتفاده از مانPPرات اسPPه اثPPتحقیقی در زمین ،)

الیگوسPPPاکارید بPPPه عنPPPوان پربیوتیPPPک در جPPPیره غPPPذایی تPPPاس مPPPاهی خلیج )Acipenseroxyrincbusد. اینPام دادنPPوارش انجPتگاه گPوژی دسPد و مرفولPPبر رش )

درصئ پربیوتیک بPPود. نتPPایج این مطالعPPه3مطالعه شامل یک تیمار بود که حاوی نشان داد، پربیوتیک مذکور اثPPرات معPPنی داری بPPر رشPPد، ضPPریب تبPPذیل غPPذایی، مرفولوژی دستگاه گوارش، اندازه، قطر و تراکم میکPPروویلی هPPای روده مPPارپیچ

ندارد. -Vendemiatti( و9، 6، 3، 2، 1، 5/0 ،0(، از سطوح مختلف )2003 و همکاران

گرم به ازای کیلوگرم غذا( مانPPان الیگوسPPاکارید در جPPیره تیالپیالی رود نیPPل )12Oreocbromisniloticusاط منفی بینPPد ارتبPPزارش کردنPPا گPPتفادهنمودند. آنهPPاس )

افزایش سطح پربیوتیک در جPPیره و فاکتورهPPای رشPPد و بازمانPPدگی تیالپیPPا وجPPوددارد.

-li و Gatlin AE درصد پربیوتیک تجاری 2 و 1، با افزودن (2004) TMGrobioticهPPب ()با وزن متوسطMoronecbrysops×M.saxatilisجیره غذایی هیبرید باس مخطط )

هفته، مشاهده کردند کPPه عملکPPرد7 گرم( و تغذیه ماهی ها با آن به مدت 4/91 رشد، کارایی تغذیه و بازماندگی در گروه هPPای تغذیPPه شPPده بPPا این مکمPPل هPPا در

مقایسه با گروه شاهد بطور معنی داری باالتر است.AE نPPیز تPPاپیر پربیوتیPPک تجPPاری 2004- این دو محقق در سال TMGrobioticهPPرا ب

هفته در ماهی هیبرید نابالغ باس راهPPراه21 درصدجیره غذایی به مدت 2میزان (Moronecbrysops×M.saxatilis رار5/64( )با وزن متوسطPPررس قPPمورد ب )گرم

دادند. نتایج این تحقی موید افزایش معنی دار عملکPPرد رشPPد و افPPزایش وزن در 2ماهیان تغذیه شده با پربیوتیک نسبت به گروه شاهد بود. همچPPنین اسPPتفاده از

درصد پربیوتیک در جیره منجPPر بPPه مقPPاومت بیشPPتر و بقPPاء بPPاالتر آنهPPا در برابPPرعفونت مزمن مایکوباکتریوم گردید.

-Mahious( ارانPPوان2005 و همکPPه عنPPوز را بPPولین و الیگوفروکتPPاثیر اینPPت ،) ( بررسیPsetta maximaپربیوتیک بر رشد و فلور باکتریایی روده ماهی توربوت )

روزگی( ب55 روزگی تPPا 29نمودند. در این تحقیق الرو ماهی توربوت ) از سن درصد از پربیوتیک های مذکور تغذیه شPPدند. ماهیPPان2جیره های آزمایشی حاوی

تغذیه شده با الیگوفروکتوز میانگین وزن نهایی بیشتری نسبت به سایر گPPروه هPPا داشتند. کشت قلور باکتریایی روده نشان داد سPPویه ویPPبریو بPPاکتری غPPالب فلPPور

درصPPد کPPل فلPPور14روده است اما در ماهی های تغذیه شPPده بPPا الیگوفروکتPPوز

29

باکتریایی جدا شده از روده این ماهیان به سویه باسیلوس تعلق داشت که مویPPدمصرف این ماده توسط باسیلوس ها به عنوان سوبسترا برای رشد می بشد.

(، بPPه بررسPPی اثPPرات اینPPولین وa2005 و همکاران )Mahious- در مطالعه دیگری ( و گربه ماهیAcipenserbaeriالیگوفروکتوز بر فاکتورهای رشد تایماهی سیبری )

( پرداختند. نتایج این مطالعه نشان داد که پربیوتیPPکClariasgariepinusآفریقایی ) های مذکور سبب بهبود رشد می شوند، بدین ترتیب که نرخ رشد ویPPژه در تPPاس ماهی سیبری تغذیه شده با جیره هPای آزمایشPPی حPاوی اینPPولین و الیگوفروکتPPوز نسبت به گروه شاهد بیشتر بود و در گربه ماهی آفریقPPایی نPPیز بیشPPترین مPPیزان نرخ رشد ویژه به تPPرتیب در تیمارهPای الیگوفورکتPPوز، اینPPولین و شPPاهد مشPاهده

گردید. -Bur 2006 و همکاران در سال( اثرات مخمر نان، فروکتوالیگوساکارید ،FOS) را روی جمعیت میکPPروبی دسPPتگاه گوارشPPی مPPاهی شPPوریده )Grobiotic-Aو

SciaenopsocellatusدینPPد. بPPرار دادنPPی قPPورد بررسPPگاهی مPPط آزمایشPPدر محی ) منظPPور روده ماهیPPان جPPدا شPPده و سPPپس محتویPPات آن رقیPPق و بPPا تیمارهPPای

25 سPPاعت در دمPای 48 و 24 درصد از مPواد فPوق بPه مPدت 2آزمایشی حاوی درجه انکوباسیون نمودند. نتPPایج حاصPPل از این بررسPPی نشPPان داد کPPه محتویPPات

سPPاعت، اسPPتات و اسPPیدهای48 در مدت Grobiotic-Aروده انکوباسیون شده با -Grobioticچرب فرار بیشتری در مقایسه ب سایر تیمارها تولید کردند. همچPPنین

A.و مخمر نان سبب تغییرات معنی داری در جمعیت میکروبی شدند -Gence( ارانPPPدت 2006 و همکPPPه مPPPب ،)ایی )80PPPاهی آفریقPPPه مPPPروز گرب

Clariasgariepinus اویPPای حPPیره هPPا جPP1( را ب PP،2 PP،3انPPک مانPPد پربیوتیPPدرص الیگوساکارید تغذیه کردند و اثرات آن را بر رشد، ضریب تبPPدیل غPPذایی، شPPاخص گنادوسوماتیک و شاخص کبدی و بافت شناسی روده و کبد بررسی نمودند. نتایج

نشان داد این ماده اثرات معنی داری بر مواد فوق ندارد. -Mahious( ارانPPه2006 و همکPPه ای در زمینPPگاهی مطالعPPط آزمایشPPدر محی ،)

تاثیر پربیوتیک هPPای اینPPولین و الیگوفروکتPPوز بPPر تخمPPیر میکPPروبی روده مPPارپیچ )Spiral valveیرهPPرب زنجPPیدهای چPPیزان اسPPد. مPPام دادنPPتاس ماهی سیبری انج ) ( موجPPود در روده بPPه منظPPور تعPPیین قPPابلیت تخمPPیر این مPPوادSCFAکوتاه تولید )

بررسی شد. نتایج نشPPان داد کPPه در حضPPور اینPPولین و الیگوفروکتPPوز مقPPدار کPPل اسیدهای چرب زنجیره کوتاه افزایش می بابد که بخش عمPPده آنهPPا را اسPPتات و بوتریات تشکیل می داد. در تیمار که در آ الیگوفرکتوز استفاده شPPده بPPود مPPیزان تولید اسیدهای چرب زنجیره کوتاه نسبت به تیمار اینولین بیشتر بود. در مطالعPPه بر گربه ماهی آفریقایی مشخص شد که میزان کل اسید چرب زنجPPیره کوتPPاه در روده انکوباسیون شده با اینولین و الیگوفروکتPPوز بPPه طPPور معPPنی دار تغیPPیر نمی کند اما تئلید بوتریPPات درون روده انکوباسPPیون شPPده بPPا اینPPولین و پروپیونPPات در

روده انکوباسیون شده با الیگوفروکتوز به طور چشمگیری افزایش می یابد. -Cerezuela( نی2007 و همکارانPPر ایمPPولین بPPک اینPPبه مطالعه اثرات پربیئتی ،)

Sparusaurataسلولی شانک سر طالیی ) LطحPPه در دو سPPپرداختند. این مطالع )

30

آزمایشگاهی و محیط طبیعی انجا شد. نتایج این مطالعه نشان داد اینولین اثرات معنی داری بر فعالیت لکوسیت ها ندارد. این مورد احتماالً به دلیل فقدان گیرنده های لکتین مانند ) ک اثرات متقPPابلی بPPا کربوهیPPدرات هPPا دارنPPد ( روی لکوسPPیت

های این ماهی می باشد. -Daniels( اکارید2007 و همکارانPPان الیگوسPPمطالعه ای در زمینه اثرات مان ،)

به عنوان پربیوتیکدر پرورش البستر اروپایی انجام دادند. نتایج این مطالعه حاکیاز آن بود که این ماده اثری بر فاکتورهای رشد و بازماندگی البستر ندارد.

-Gence( و همکاران a2007( فPPتحقیقی در زمینه اثرات افزودن سطوح مختل ،)5/1 PP،3 دن و5/4 وPPمانان الیگوساکارید به جیره ماهی تپالپیال بر رشد، ترکیب ب )

بافت شناسی روده و کبد انجام دادند.نتایج مویPPد این بPود کPPه افPزودن مانPان بPPه جیره سبب افPPزایش معPPنی دار فاکتورهPPا رشPPد و شPPاخص کبPPدی نمی شPPود امPPا مختوی پروتئین بدن با افزایش سطوح مانان به طور معنی داری افزایش یPPافت.

درصد مانان به5/1اندازه میکروویلی های روده در ماهیان تغذیه شده با سطوح طور معنی داری بیشتر بود.بعالوه افزودن مانان هیچ اثPPر مخPPربی بPPر بPPافت کبPPد

نداشت. -Gence( و همکاران b2007 در مطالعه ای ،)0 روزه اثرات سطوح مختلف )45،

5/1 P،3 رکیب5/4 وPPدرصد( مانان الیگوساکارید را به عنوان پربیوتیک بر رشد، ت (Penaeusmerguensisالشه و بPPافت شناسPPی هپاتوپPPانکراس میگPPوی بPPبری سPPبز )

درصPPد بهPPترین رشPPد و3مورد ارزیابی قرار دادند. آنها گPPزارش کردنPPد در سPPطح بازماندگی و وضعیت بافتی مشاهده شده است، بنابراین بهترین سطح بکارگیری

درصد ذکر کردند.3پربیوتیک مذکور را در جیره پست الرو میگو -Li( یره2008 و همکارانPPاکاریدهای زنجPPرات فروکتوالیگوسPPی اثPPبه بررس ،(

( بPPر رشPPد، ایمPPنی و فلPPور باکتریPPایی روده میگPPوی پPPا سPPفید غPPربیscFOکوتاه ) ،P،05/0 075/0 P،1/0 025/0پرداختند. در این مطالعه سطوح مختلف پربیوتیک )

2/0 PP،4/0 درصد( مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاکی از این بود scFOراتPPاث معنی داری بPPر ایمPPنی، رشPPد، بازمانPPدگی و ضPPریب تبPPدیل غPPایی میگوهPPا نPPدارد. همچPPنین فلPPور بPPاکتری روده میگوهPPای تغذیPPه شPPده بPPا پربیوتیPPک بسPPیار مشPPابه

میگوهای تغذیه شده با جیره شاهد بود. -Salze( ارانPPان2007 و همکPPک مانPPرات پربیوتیPPی اثPPه بررسPPاتی بPPدر تحقیق ،)

الیگوسPPPاکارید بPPPر تحمPPPل اسPPPترس شPPPوری و تکامPPPل روده الرو سPPPوکال )Racbycentroncanadumپرداختند. بدین منظ.ر الرو سوکال با آرتیما و روتیفر غنی )

شده از مانان الیگوساکارید تغذیه شدند. نتایج این مطالعه نشان داد که تغذیه بPPا پربیوتیک به طPPور معPPنی داری بازمانPPدگی و مقPPاومت در برابPPر اسPPترس شPPوری افزایش داده و نیز به طور چشمگیری سPPبب توسPPعه میکPPروویلی هPPای روده می

شود. -Staykov( ارانPPوان2007 و همکPPاکاریدبه عنPPا الیگوسPPزودن مانPPرات افPPاث ،)

پربیوتیک بر فاکتورهای رشد، بازماندگی و ایمنی قزل آالی رنگین کمPPان را در دو

31

سیستم پرورشی افزودن مانان به جیره بطور معPPنی داری سPPبب افPPزایش وزن،کاهش ضریب تبدیل غذایی، افزایش بازماندگی و افزایش ایمنی می شود.

-Torrecillas( 0(، از سطوح مختلف )2007 و همکاران P،2 P،4پربیوتیک )درصد مانان الیگوساکارید در جیره سی باس استفاده نمPPوده و اثPPرات آن را بPPر رشPPد، ضریب تبدیل غذایی، فاکتورهای ایمنی و بافت شناسی کبد و روده مورد ارزیPPابی قرار دادند. بررسی های بافت شناسی نشPPان داد در گPPروه هPPای تغذیPPه شPPده بPPا پربیوتیک تشکیل حفره های چربی کمتر بPوده و شPکل طPPبیعی هپاتوسPیت هPا در اطراف فضای سینوسی دال بر مصرف یهتر مواد مغزی جیره می باشPPد. بPPا این وجود اثری بر باقت شناسی روده مشPPاهده نشPPد. همچPPنین بررسPPی فاکتورهPPای

ایمنی شناختی اثرات معنی داری بر ایمنی ماهیان نشان داد. -Welker( در مطالعه ای از سطح 2007 و همکاران ،)درصد مانانالیگوساکارید2

( اسPPتفادهIctaluruspunctatusبه عنوان پربیوتیک در جیره گربPPه مPPاهی روگPPاهی ) نمود و اثرات آن را بر فاکتورهای خونی ماهی مورد ارزیابی قرار داند. نتPPایج این مطالعه نشان داد مانان الیگوسPPاکارید اثPری بPر فاکتورهPای خPونی گPربی مPاهی

روگاهی ندارد. -Yilmaz( نیز به بررسی اثرات مانان الیگوساکارید به عنوان2007 و همکاران ،)

پروبیوتیک بر رشد، تPPرکیب بPPدن و بPPافت شناسPPی روده و کبPPد مPPاهی قPPزل آالی وPP،3 5/1 سPPطح 3رنگین کمان پرداختند. در این مطالعه مانان الیگوساکارید در

روز بPPا جPPیره هPPای90 درصPPد بPPه جPPیره اضPPافه شPPد و مPPاهی هPPا بPPه مPPدت 5/4 آزمایشPPی تغذیPPه شPPدند.نتPPایج این مشPPاهده نشPPان داد افPPزودن مانPPان در سPPطح

درصد سبب افPPزایش رشPPد می شPPود امPPا اثPPری بPPر ضPPریب تبPPدیل غPPذایی و5/1 کارایی مصرف پروتئین و شاخص کبدی نPPدارد. انPPدازه میکPPروویلی هPPای روده در

درصPد مانPان بPه طPور معPنی داری3 و 5/1میان ماهیان تغذیه شPPده بPا سPPطوح بیشتر بود وافزودن مانان هیچ اثر مخربی بر روده نداشت.

-Mazurkiewicz ف ) 2008 و همکاران در سالPPطوح مختلPP1، اثرات س PP،2 3 و FERMACTOدرصدی (نوعی پربیوتیPPک تجPPاری ) PREBIOTICایPPر فاکتورهPPرا ب )

( مورد بررسی قرار دادنPPد.Cyprinuscarpioرشد بچه ماهی نورس کپورمعمولی ) نتایج این مطالغه نشان داد استفاده از پربیوتیک به طور معنی داری سبب بهبPPود فاکتورهPPای رشPPد بچPPه مPPاهی نPPورس کپPPور معمPPولی می شPPود و بهPPترین سPPطح

درصد جیره می باشد.3بکارگیری پربیوتیک -Yuji Sado و De Almeida سPPطح مانPPان الیگوسPPاکارید را در6، اثرات (2008)

جPPPPیره بPPPPر فاکتورهPPPPای خPPPPونی و شPPPPاخص عملکPPPPرد تیالپیالی رود نیPPPPل )OreocbromisniloticusذکورPPک مPPه پربیوتیPPبررسی نمودند. نتایج بیانگر این بود ک )

اثر معنی داری بر فاکتورهPای خPونی نPدارد و سPبب افPزایش تعPداد گلبPPول هPای سPPفید نمی شPPود. همچPPنین بPPا افPPزایش سPPطح پربیوتیPPک در جPPیره اثPPر منفی بPPر

فاکتورهای رشد تیالپیال مشاهده شد.

32

-Grisdale-Helland( ان2009 و همکارانPP(، به بررسی اثرات چند پربیوتیک )مان الیگوساکارید، فروکتوالیگوساکارید و گاالکتوالیگوسPاکارید( بPر فاکتورهPای رشPد،

( پرداختنPPد.Salmosalarمصرف جیره غذایی و ایمنی آزاد ماهی اقیانوس اطلس ) گPPرم بPPه ازای10ماه انجام شد و ماهی تنها با یک سPPطح )4این مطالعه به مدت

کیلوگرم( پربیوتیک تغذیه شدند. نتایج مطالعه اثPPرات معPPنی داری بPPر فاکتورهPPایمذکور نشان نداد.

-Jiqiu Li( اثرات استفاده از باکتری پربیوتیکی باسیلوس را2009 و همکاران ،) ( به عنوان پربیوتیPPکIsomalyooligosaccharidesبه همراه ایزومالتوالیگوساکارید )

بر فلور باکتریایی دستگاه گوارش، ایمنی و مقاومت در برابر بیماری لکPPه سPPفید ( بررسPPی نمودنPPد. در این مطالعPهLitopenaeusvannameiمیگوی پاسPPفید غPPربی )

2/0 باکتری پربیوتیکی همراه یا بPPدون 1010CFU/gو PP،108 0 روزه میگوها با 28 درصد ایزومالتوالیگوساکارید به عنوان پربیوتیک تغذیه شPPدند. نتPPایج حPPاکی از آن بود که با افزایش میزان پربیوتیک به طور معنی داری بازماندگی و ایمنی میگوها

درصPPد از پربیوتیPPک بPPه تنهPPایی اثPPر2/0افزایش پیدا می کند. اگرچه اسPPتفاده از قابل توجهی نداشت اما استفاده تPوام پربیوتیPک و پربیوتیPک اثPرات بسPیار قابPل توجهی بر بقا، ایمنی و مقاومت در برابر بیماری لکه سفید داشت. بهPPترین تیمPPار

درصد پربیوتیک بود.2/0 پربیوتیک به همراه 108CFU/gاستفاده از -Ngo Van Hai و RavioFotedar Pseudomonas، از دو نPPوع پربیوتیPPک )(2009)

synxantba و P. aeruginosaرکPک محPاری و یPPک تجPوع پربیوتیPک نPراه یPبه هم ) ( در پرورش شاه میگوی آب شیرین غربی )β-1D-glucan-و3 و Bio-MosRایمنی )

PenaeuslatisulcatusنیPPدگی و ایمPPر بازمانPPرات آن را بPPد و اثPPتفاده نمودنPPاس ) بررسی کردند.میگوهای تغذیه شده با پروبیوتیPPک و پربیتPPوک ضPPریب رشPPد ویPPژه بیشتر و ضریب تبدیل غذایی کمتری نسبت به شاهد داشتند اما این خالف معPPنی دار نبود. استفاده از پروبیوتیک به طور معنی داری سبب افزایش بازماندگی شد

و میگوهای تغذیه شده با پربیوتیک ایمنی و بازماندگی بیشتری داشتند. با توجه مرور منابع انجام شده تا کنون مطالعه ای در زمینه اثرات الیگوفروکتPPوز بPPر فاکتورهPPای رشPPد، و فاکتورهPPای خPPونی در ازون بPPرون انجPPام نشPPده اسPPت. همچنین مشخص نیست آیPPا می تPPوان بPPا اسPPتفاده از این پربیوتیPPک تPPوازن فلPPور باکتریایی روده را به سمت ترکیب بPPالقوه مفیPPدتر سPPوق داد. بنPPابراین ضPPرورت

انجام این مطالعه بیش از پیش مشخص می شود.

33

34

35

فصل سوم:

مواد و روش ها

36

فصل سوم : مواد و

روش ها

- محل اجرای تحقیق3-1 این مطالعه در ایستگاه تحقیقاتی قره سو وابسته به موسسPPه تحقیقPPات شPPیالت ایران انجام شد. این کارگاه در مجاورت ساحل دریای خزر در ناحیه جنوب شرق

کیلومPPتری شهرسPPتان بنPPدر10خلیج گرگان واقع شPPده اسPPت.کارگPPاه مPPذکور در (.1-3 کیلومتری بندر گز قراردارد )شکل 15ترکمن و

- تامین و محل نگهداری بچه ماهیان:3-2 گPرم از انسPتیتو29±3 قطعه بچه ماهی اوزون بPرون بPPا میPPانگین وزن 90تعداد

تحقیقات بین المللی ماهیان خاویاری رشت به ایستگاه منتقل شدند. سپس بچPPه 10/2/90ماهیان طی دو هفته با غذای بیومار عادت دهی شدند.سPPپس از تPPاریخ

تکPPرار و شPPاهد3 تیمPPار و 2 قطعه در هر ونPPیرو تقسPPیم بنPPدی و در 10با تراکم پرورش داده شدند.

PلPکP3شP-1PوPس PهPرPق PیPتPالPیPش PیPتPاPقPیPقPحPت PهPاPگPتPسPیPا PتPعPیPقPوPم P-

37

- تهیه مخازن پرورش و ذخیره سازی بچه ماهی3-3 پس از رسیدن بچه ماهی به وزن مدنظر، بر اسPPاس طPPرح آزمPPایش پایPPان نامPPه

50 مPPتر و عمPPق 2×2 لیتری بPPا ابعPPاد 2000 مخزن فایبر گالس فشرده 9تعداد سانتی متر به عنوان واحدهای آزمایشی انتخاب گردید.

PلPکP3شP-2PهPدPاPفPتPسPا PاPب PشPیPاPمPزPآ PعPوPرPش PزPا PشPیPپ PاPهPوPرPیPنPو PنPدPرPک PیPنPوPفPعPدPض P- PمPیPسPاPتPپ PتPاPنPگPنPمPرPپ PزPا

پیش از انتقال بچه ماهی ها به واحدهای آزمایشی، به منظور جلوگPPیری از خطPPر انتقال بیماری و نیروها با استفاده از پرمنگنات پتاسPPیم کPPامالً ضPPدعفونی شPPدند. پس از ضدعفونی شدنبه طور کامالً تصادفی بPPر اسPPاس تیمارهPPا شPPماره گPPذاری

29±3گردیدند. سپس کلیه بچه ماهی ها زیست سنجی شده و با میPPانگین وزنی قطعه بچه ماهی به ازای هر ونیرو ذخیره سازی شدند.10گرم و تراکم

- پربیوتیک مورد استفاده3-4 ( می باشPPدP95پربیوتیک مورد استفاده در این آزمایش الیگوفروکتPPوز )رافPPتیلوز

است. الیگوفروکتوز از هیPPدرولیزβ(-PP 2 1که جزء فروکتان های خطی ) (. اینPPولین در بعضPPی از3-3( بدست می آیPPد )شPPکلSTآنزیمی اینولین )رافتیلیت

38

گیاهPPان وجPPود داردو عمPPدتاً از ریشPPه گیPPاه کاسPPنی اسPPتخراج می شPPود. درجPPه درصد می باشد. پربیوتیPPک2-8 درصد و الیگوفروکتوز 2-60پلیمراسیون اینولین

مذکور از شرکت سیکما آمریکا تهیه شده.- ساختار الیگو ساکاریدی و ترکیب الیگوفروکتوز )1-3جدول

Hosseinifar&Mahhious, 2007)

PلPکP3شP-3PنPیPلPوPنPیPا PزPا PنPآ PدPیPلPوPت PدPنPیPآPرPف Pو PزPوPتPکPوPرPفPوPگPیPلPا PیPیPاPیPمPیPش PرPاPتPخPاPس P-

- نحوه افزودن پربیوتیک به جیره پایه آزمایشی3-5 غذای ماهی مورد استفاده بیومار بود که متناسب بPPا سPPایز دهPان بچPPه مPPاهی بPه

میلی متر بPPود کPPه پس از پPPودر نمPPودن آن بPPه وسPPیله آسPPیاب بPPرقی9/1اندازه درصد الیگوفروکتوز به آن اضافه گردید. سپس جPPیره تهیPPه2و 1سطوح مختلف

شده به طور کامل با پربیوتیک مخلوط شده و به مخلوط حاصل آب اضPPافه شPPد

39

تا به حالت خمیری درآید. خمیر حاصPPله توسPPط چPPرخ گوشPPت بPPه صPPورت رشPPته میلی متر در آمد. رشPPته هPPای خمPPیری در معPPرض جریPPان هPPوای2هایی به قطر

اتاق قرار داده شد تا خشک شود. پس از خشک شدن پلیت ها شکسته شده و تا به اندازه مناسب درآینPPد پس از آمPPاده نمPPودن غPPذا بPPه صPPورت پلیت در ظPPروف

درجه سانتی گراد نگهداری شدند.4پالستیکی بسته بندی و در یخچال

40

PلPکP3شP-4PهPیPاPپ PهPرPیPج PهPب PکPیPتPوPیPبPرPپ PنPدPوPزPفPا PلPحPاPرPم P- ،1،توزین پربیوتیک: :مخلوط کردن جیره با پربیوتیک به طور کامل،3:توزین مقادیر مدنظر جیره، 2 : چرخ کردن جیره5: افزودن آب و تبدیل حالت پودری جیره به خمیری، 4

: خشک نمودن رشته های خمیری در معرض جریان هوا.6خمیری،

PلPکP3شP-5PیPفPرPصPم PهPنPاPزPوPر PیPاPذPغ PیPوPاPح PهPدPش PیPرPاPذPگ PتPمPالPع PیPاPه PلPطPسP- PکPیPتPوPیPبPرPپ PفPلPتPخPم PحPوPطPس PیPوPاPح

- تغذیه بچه ماهی ها با تیمارهای آزمایشی3-5-1 در زمان غدا دهی جریان آب ورودی به ونیروها و نیز هوادهی قطع شد. غPPذادهی

وعPPده در روز3 درصد وزن بPPدن و 4به بچه ماهی ها به صورت دستی به میزان (. در طPPول مPPدت غPPذا دهی6-3 صPPورت پPPذیرفت )شPPکل 23-15-7درسPPاعات

واکنش بچه ماهی ها به پلیت هPا، نحPوه مصPPرف و اشPPتهای آنهPا بPه طPPور دقیPق روز انجام گرفت.15بررسی شد. بیومتری ماهیان هم هر

41

PلPکP3شP-6PیPوPاPح PیPاPه PهPرPیPج PاPب PنPوPرPب PنPوPزPا PیPهPاPم PهPچPب PهPنPاPزPوPر PیPتPسPد PهPیPذPغPت P- PکPیPتPوPیPبPرPپ

- بررسی کیفیت بچه ماهی ها در طول دوره آزمایش3-6 هفته( همه روزه بچه ماهی ها از نظر وضعیت ظPPاهری8در طول دوره آزمایش )

به صورت چشمی بررسی شدند. مشPاهده مسPتقیم بچPPه مPاهی هPا در تانPک هPا جهت نظارت بر حرکات، نحوه شنا، رفتارهPPای تغذیPPه ای، اشPPتها، تحPPرک بیش از

حد یا کم تحرکی انجام می شد.

- کنترل کمی و کیفی محیط پرورش بچه ماهی ها3-7

- کنترل کیفیت محیط پرورش3-7-1 به منظور تعیین کیفیت مطلوب در محیPPط پPPرورش بچPPه مPPاهی هPPا، سیسPPتم آب رسانی و خروج آب به طور دقیق نظارت شد. ورود آب به نیروها بPPا اسPPتفاده از لوله پخش کن آب قرار گرفته در باالی ونیروهPPا صPPورت پPPذیرفت. جریPPان آب از لوله پخش کن به صورت فPPواره ای بPPه درون حوضPPچه وارد می شPPود تPPا آب بPPه

خوبی اکسیژن دهی شود.

42

هوادهی آب حوضچه های ونیروها از طریق سنگ هوا متصل به کمپرسور مرکزی انجام می شد. برای جلوگیری از آلودگی و زوال کیفیت آب، هر روز صبح دیواره

(. بعالوه2-7های داخلی و کف و نیروها بطور کامPPل نظPPافت می شPPدند )شPPکل بار آب3 تا 2برای خارج شدن باقی مانده غذای خورده نشد و فضوالت، روزانه

ونیروها سیفون می شد. الزم به ذکر است که آب مورد استفاده برای انجام این مطالعه از یک چاه نیمه عمیق تامین می شد. با توجه به رسوب داشتن آب، ابتدا به درون یک استخر رسوب گیر هدایت می گردید. پس از شفاف شدن کامل آب که چند ساعت به طول می انجامید، آب از استخر رسPPوبگیر بPPه مخPPزن واقPPع در

(. آب ورودی بPه سPPالن2-8 متری از سطح زمین پمپ می شPد )شPکل 6ارتفاع ونیرو به صورت ثقلی از مخزن واقع شده در ارتفاع تامین می گردید.

PلPکP3شP-7PبPآ PنPوPفPیPس Pو PوPرPیPنPو PیPاPه PهPچPضPوPح PهPنPاPزPوPر PتPفPاPظPن P-

43

PلPکP3شP-8PوPرPیPنPو PنPلPاPس PیPاPرPب PبPآ PنPیPمPاPت PدPنPوPر P- ،1نمایی از حوضچه : : مخزن آب واقع در ارتفاع3: شفاف شدن آب در حوضچه مصرف، 2رسوبگیر،

متری6

- بررسی فاکتورهای فیزیکی و شیمیایی3-7-2 با تئجه به اهمیت فاکتورهای آب بر سالمتی بچه ماهیان عالوه بPPر نظPPافت محPPل نگهداری بچه ماهیان و کنترل کمیت آب ورودی بPPا اسPPتفاده از دسPPتگاه اکسPPیژن

آلمان( و هدایت الکتریکی هر دو هفتPPه ثبت شPPدند و دمPPای آبWTWسنج ) مدل نوبت اندازه گیری شدند.3به طور مرتب در

PلPکP3شP-9PهPاPگPتPسPد PزPا PهPدPاPفPتPسPا PاPب PبPآ PیPفPیPک PیPاPه PهPجPنPسPاPرPیPپ PهPنPاPزPوPر PتPبPث P- PیPاPهWTWPنPاPمPلPآ PتPخPاPس ،

- زیست سنجی3-8 برای آگاهی از عملکرد جیره های غPذایی، چگPونگی رشPPد و تعPیین مPیزان غPذای

روز زیست سنجی می شدند. بدین منظPور15مورد نیاز، بچه ماهیان در فواصل پس از پایین آوردن سطح آب، کلیه ماهیان در هر تیمPPار بPPا اسPPتفاده از سPPاچوک

001/0صید و پس از بی هوش نمودن ماهیان با گل میخPPک بPPا تPPرازوی بPPه دقت میلی متر1توزین گردیدند. همچنین طول کل با استفاده از تخته بیومتری با دقت

اندازه گیری شد. بر اساس میانگین وزن بدست آمده مقدار غذای روزانه هر یکاز تیمارها محاسبه گردید.

- بررسی شاخص های رشد3-9 روز یPPک بPPار15زیست سنجی بچه ماهیان در طی دوره بررسی بPPه صPPورت هPPر

برای تمام ماهیان انجام می گیرد. به منظور ارزیابی روند رشPد عالوه بPر انPدازه

44

گیری وزن و طول کل ماهیPPان، شPPاخص هPPای رشPPد بPPر اسPPاس منPPابع موجPPود از(.2006معادالت ریاضی محاسبه می شوند )بکن و همکاران،

محاسبه شاخص های رشد ماهیان

Body weight( Tacon, 1990- افزایش وزن بدن )3-9-1increase

BWI=Wt2-Wt1

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

Percent( Beckan et al., 2006- درصد افزایش وزن بدن )3-9-2Body weight increase

PBWI(%)=[(Wt2-Wt1)/Wt1]×100

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

(Hevory, 2005- نرخ رشد ویژه )درصد در روز( )3-9-3Specific growth rate

SGR(%/day)=[(LnWt2-LnWt1)/t2-t1]×100

LnWt1لگاریتم طبیعی وزن اولیه ماهی=

LnWt2لگاریتم طبیعی وزن نهایی ماهی =

t2-t1طول دوره آزمایش=

& De Silva- میانگین رشد روزانه)گرم ماهی در روز( )3-9-4Anderson, 1995 )Average daily growth

ADG(G/FISH/DAY)=[Wt2-Wt1/Wt1×(t2-t1)]×100

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

t2-t1طول دوره آزمایش=

45

condition factor( Ai et al., 2006- فاکتور وضعیت )3-9-5CF=[W/L3]×100

Wوزن ماهی بر حسب گرم=

Lطول کل ماهی بر حسب سانتیمتر=

(De Silva & Anderson, 1995- سرعت رشد وزنی )3-9-6Velocity of growth of body weight

V.W%=[2(Wt2-Wt1)/n(Wt2+Wt1)]×100

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

nطول دوره آزمایش به روز=

(De Silva & Anderson, 1995- سرعت رشد طولی )3-9-7Velocity of growth of body weight

V.L%=[2(Lt2-Lt1)/n(Lt2+Lt1)]×100

Lt1طول اولیه ماهی )سانتیمتر(=

Lt2طول نهایی ماهی)سانتیمتر(=

nطول دوره آزمایش به روز=

(De Silva & Anderson, 1995- ضریب تغییرات وزنی )3-9-8Coefficient of variation of body weight

CVW %=[δ (Variationof body weight)/W (meanweight )]× 100

δانحراف معیار وزن نهایی ماهی )گرم(= (Variationof body weight)

Wمیانگین وزن نهایی ماهی)گرم(= (meanweight )

(De Silva & Anderson, 1995)- ضریب تغییرات طولی 3-9-9Coefficient of variation of body length

CVW %=[δ (Variationof body length)/W (meanlength)]× 100

δانحراف معیار طول نهایی ماهی )سانتیمتر(= (Variationof body length)

46

Wمیانگین طول نهایی ماهی )سانتیمتر(= (meanlength)

(De Silva & Anderson, 1995)- تولید خالص ماهی 3-9-10Body weight gain

BWG=(W t2−W t 1)× N

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

Nتعداد ماهی باقیمانده در انتها دوره=

- محاسبه شاخص های تغذیه ای3-10 بر اساس داده های بدسPPت آمPPده از زیسPت سPPنجی و تجزیPPه الشPPه مPاهی ازون برون در ابتدا و انتهای دوره پPرورش و نPیز تجزیPه جPیره هPای آزمایشPی، بPرخی

معیارهای تغذیه ای به شرح زیر اندازه گیری گردید.

,Hevroy- ضPPPPریب تبPPPPدیل غPPPPذایی )3-10-1 2005 PPPP)Feed conversation ratio : در این تحقیق بیشتر نشان دهنده مقدار غذای مPPورد

استفاده در هر یک از حوضچه ها می باشد زیرا اطمینان از اینکه تمام غذای دادهشده مورد مصرف ماهیها قرار گرفته است وجود ندارد.

FCR=g dry feed eaten/ g live weight gain

G dry feed eatenغذای خورده شده )گرم(=

g live weight gainگرم وزن بدست آمده ماهی=

(De Silva & Anderson, 1995)- کارایی غذا)درصد( 3-10-2feed efficiency

FE(%)=[g live weigh gain/ g dry feed eaten]×100

g live weight gainگرم وزن بدست آمده ماهی=

g dry feed eatenغذای خشک خرد شده )گرم(=

47

,.Xue et alغذای خورده شده روزانه)درصد روزانه( )- 3-10-32006 )Feed intake

Feed intake(%/day)=100×I/[(Wt2+Wt1)/2×(t2-t1)]

Iکل غذای خورده شده بر حسب گرم =

Wt1گرم وزن اولیه ماهی=

wt2گرم وزن نهایی ماهی=

t2-t1طول دوره آزمایش=

protein( Helland et al., 1996- نسبت کارایی پروتئین )3-10-4efficiency ratioبه صورت گرم اضافه وزن بر گرم پروتئین مصرف شده :

بیان می شود و مشخص می نماید به ازاء هر واحد از وزن پرووتئین غذایخورده شده چه مقدار به وزن ماهی اضافه شده است.

PER(g/g)=g live weight gain/g protein intake in fish

g live weight gainوزن بدست آمده )گرم(=

)مقدار غذای خورده شدهg protein intake in fishپروتئین خورده شده )گرم(= درصد پروتئین غذای خورده شده(×

میزان بهره برداری خالص از پروتئین )درصد()- 3-10-5Hevroy, 2005 )Net protein utilization

NPU=[fish protein gain(g CP)/total protein consumed (g CP)]×100

fish protein gain(g CP)پروتئین بدست آمده )گرم(=

)کل غذای خورده شدهtotal protein consumedکل پروتئین خورده شده )گرم( = درصد پروتئین غذای خورده شده(×

- محاسبه شاخص بازماندگی3-11 در پایان مطالعه به منظور بررسی اثرات افزودن الیگوفروکتوز به جPPیره غPPذایی ازون برون و نیز سطوح مختلف پربیوتیک در جیره بر بازماندگی بچه ماهی ازون برون شاخص درصد بازماندگی اندازه گیری شPPد. شPPاخص درصPPد بازمانPPدگی بPPر اساس مقایسه تعداد بچه مPPاهی هPPا در ابتPPدا و انتهPPای آزمPPایش بPPه صPPورت زیPPر

محاسبه می شود:

48

Survival rate = ( Nt – N0)×100

=Ntتعداد بچه ماهی ها در ایتدای دوره آزمایشN0تعداد بچه ماهی ها در انتهای دوره آزمایش=

- مطالعات خون شناسی3-12

- فاکتورهای خونی:3-12-1 سPPی2 ماهی از هر تکرار خونگیری بعمPPل آمPPد. مقPPدار 3در پایان دوره از تعداد

سی از خون بدست آمده در لوله ها هپارینPPه و فاقPPد هپارینPPه ریختPPه شPPد و جهتبررسی فاکتورهای خونی بالفاصله در مخزن حاوی یخ به آزمایشگاه منتقل شد.

- طرز رقیق کردن خون:3-12-2 یک مالنژوربا )مهره سفید( تمیز و خشک انتخاب می کنیم لوله الستیکی را به تPPه مالنژور وصل می کنیم. نمونه خون را خوب مخلوط می کنیم . سر دیگر لوله را در دهان می گذاریم نوک مالنژور را در داخل خون می گذاریم. مالنPPژور را افقی

داخPPل مالنPPژور می کشPPیم خPPون نPPوک و5/0نگPPه می داریم خPPون را تPPا عالمت اطراف مالنژور ر با پنبه خوب پاک می کنیم از ورود حباب هو بPPه داخPPل مالنPPژور جلوگیری به عمل می آوریم باری اینکه تمام محلول آلوده نشPPود، قبالً چنPPد سPPی سی از محلول رقیق کننده )محلول مارکانو( را در یPPک بشPPر کوچPPک می ریPPزیم. نوک مالنژور را داخل محلPPول مارکPPانو قPPرار می دهیم. مPPاده رقیPPق کننPPده را تPPا

به درون مالنژور می کشیم لوله پالستیکی را از مالنژور جدا می کنبم. سPPر و11 ته مالنژور ر بین دو انگش شصت و سPPبابه نگPPه می داریم. بPPه مPPدت یPPک دقیقPPه

دقیقPPه روی5محتوی مالنژور را مخلوط می کPPنیم. سPPپس مالنPPژور را بPPه مPPدت شیکر )ویبراتور( قرار می دهیم.

(:cells/µL- شمارش گلبول های قرمز خون)3-12-3 پس از همگن کردن خون، خون را به وسیله لولPPه پالسPPتیکی کPPه بPPه تPPه مالنPPژور

کشیده و خون اطراف پیپت را با پارچه تمیز یا گاز5/0قرمز وصل است تا درجه می101کامالً پاک کرده و محلول رقیق کننده گلبPPول قرمPPز)ریس( را تPPا درجPPه

می رسد. پیپت را روی شPPیکر گذاشPPته تPPا200 به 1کشیم که در نتیجه رقت به کامالً با هم مخلوط شوند. چند قطره اول ر دور ریخته و یک قطPPره خPPون را بین الم سنگی و الم هموسیتومر می ریزیم. پس از آن که محلول از حPPرکت ایسPPتاد،

خانPPه شPPمارش می کPPنیم و سPPپس گلبPPول هPPای25 خانPPه از 5گلبول قرمز را در ضرب می کنیم تا تعداد در یPPک میلی10000خانه را در عدد 5شمارش شده در

متر مکعب خون محاسبه گردد.

49

(:W.B.C- شمارش گلبول های سفید )3-12-4 روند کار برای شمارش گلبول های سفید تقریباً شمابه گلبول های قرمPPز اسPPت.

از خون پر شده،سپس پیپت در5/0بدین صورت که ابتدا پیپت مالنژور تا عالمت پPPر گردیPPد. این11( قرار داده و تا عالمت Rissظرف محلول رقیق کننده ریس )

سPPی سPPی فرمPPالین و100 گرم برلیPPان کرزیPPل بلPPو، 1محلول از مخلوط کردن گرم تری سیترات سدیم در یک لیتر آب مقطر تهیه می شود )شیشه ئیPPان3/31

دقیقPه توسPPط شPPیکر3(. پس از آن محتویات پیپت بPPه مPPدت 1378و همکاران، قطPPره اولیPPه محتویPPات پیپت را دور ریختPPه و قطPPره بعPPدی در4مخلPPوط گردیPPد.

حفره های مخصوص شمارش بر روی الم نئوبار ریخته شد. برای شمارش گلبول های سفید از چهار مربع کناری استفاده گردید. شمارش گلبPPول هPPای سPPفید زیPPر

ضPPرب شPPد تPPا50میکروسکوپ صورت پذیرفت و در پایان عدد بدست آمPPده در تعPداد گلبPPول سPPفید در یPک میلی لیPPتر مکعب خPون بدسPPت آیPPد )شیشPه ئیPان و

(.1378همکاران،

(Diff- شمارش افتراقی گلبول های سفید )3-12-4-1 برای شمارش افتراقی گلبول های سفید از نمونه های خون گسترش تهیPPه شPPد. پس از خشک شدن گسترش تهیه شده، بر روی الم اتانول ریخته تا سPPطح آن را به طور کامل بپوشاند. سپس الم هPPا بPPا اسPPتفاده از گیسPPما رنPPگ آمPPیزی شPPدند.

سی سی گلیسیرین50 سی سی الکل متیلیک و 50پودر گیسما ، 6/0گیسما از تهیPPه می شPPود. بعPPد از رنPPگ آمPPیزی الم هPPا در دمPPای اتPPاق خشPPک شPPده و زیPPر میکروسکوپ مشاهده گردیدند و درصد انواع گلبول های سفید مشاهده شده در

گسترش تعیین شد .

(Hb- تعیین میزان هموگلوبین )3-12-5 روش اسPPتفاده نمPPود3بطور کلی برای انPPداززه گPPیری هموگلPPوبین می تPPوان از

(. این سه روش شامل مورد ذیل می باشند:1384)شیشه ئیان و همکاران، - اندازه گیری با روش ساهلی1- اندازه گیری با روش تالکوسیت2- اندازه گیری با روش سیان مت هموگلوبین3

در این مطالعه برای تعیین هموگلوبین از روش سوم و محلPPول درابکین اسPPتفاده (Drabkin سی ی محلPPول درابکین )5گردید. بدین صورت که در دو لوله آزمایش

،(6)K3Fe(CN گرم فری سPPیانید پتاسPPیم )2/0اضافه گردید. این محلول از انحالل گPرم فسPافت دی هیPPدروژن پتاسPPیم )14/0( و KCN گرم سPPیانید پتاسPPیم )50/0

KH2PO4 میلی لیتر آب مقطر نهیه می شود.1000( در Hbاکسی هموگلوبین فری سیانورپتاسیم +

50

سPPPPیان مت هموگلPPPPوبین سPPPPیانور پتاسPPPPیم + اکسPPPPیهموگلوبین

سی سی خون با پیپت مخصوص هموگلPPوبین برداشPPته و بPPه یکی از02/0سپس دقیقه در حرارت اتاق و در محل10لوله ها اضافه شد. لوله بخوبی تکان داده و

تاریک قPPرار داده شPPد تPPا سPPیانومت هموگلPPوبین تشPPکیل شPPود. پس از آ دسPPتگاه نPPانومتر بPPا اسPPتفاده از دراب کین در صPPفر540اسپکتروفوتومتر در طول مPPوج

لوله تست در دستگاه مشاهده و ثبت گردید.OD(Optical Density)تنظیم شده و با اسPPتفاده از عPPدد بدسPPت آمPPده و بPPر اسPPاس منحPPنی اسPPتاندارد تعPPیین مPPیزان

هموگلوبین، میزان هموگلوبین در دسی لیتر تعیین شد.

(Hct- اندازه گیری هماتوکریت )3-12-6 برای انPدازه گPیری همPاتوکریت از روش میکروهمPاتوکریت اسPPتفاده شPPد. بPPدین ترتیب که لوله مخصوص هماتوکریت را از نمونPه خPون پPPر کPرده و سPPر لولPه بPا استفاده از خمیر هماتوکریت بسته شد. سپس لولPPه در درون شPPیارهای دسPPتگاه

هPPزار در دقیقPPه5 دقیقPPه بPPا دور 5سانتریفوژ قرار داده شد. نمونه ها بPPه مPPدت (.10-3سانتریفیوژ گردید )شکل

پس از سانتریفوژ گلبول های قرمز در پائین، الیه نPازکی از گلبPول هPای سPPفید و پالکت ها بر روی آن و پالسما در بخش رویی قPPرار می گیرنPPد. لولPPه هPای حPPاوی نمونه خون سPPانتریفوژ شPPده در شPPیار خPPط کش همPPاتوکریت قPPرار داده شPPدند. انتهای پایینی ستون گلبول قرمز با خPط صPفر تنظیم شPPد و خPط سPفید متحPPرک میانی با سطح باالی گلبول های قرمز تنظیم گردید. نهایتاً درصد حجم گلبول های

(.1378قرمز از روی ستون مدرج خوانده شد )شیشه ئسان و همکاران،

PلPکP3شP-10PنPوPخ PهPنPوPمPن Pو PژPوPفPیPرPتPنPاPس PرPد PتPیPرPکPوPتPاPمPه PهPلPوPل PنPدPاPد PرPاPرPق P- PهPدPش PژPوPفPیPرPتPنPاPس

51

- تجزیه و تحلیل آماری داده ها:3-13 طرح کلی این تحقیق در قالب طرح کامالً تصادفی انجام شد و داده های حاصPPله

‹PP 05/0 در سPPطح ANOVAبا استفاده از روش آنPPالیز .اریPPانس یPPک طرفPPه Pو تجزیPه وSPSSمقایسه میانگین هPا بPر اسPاس تسPت دانکن تحت برنامPه آمPاری

تحلیل شد.

52

فصل چهارم : نتایج

53

فصل چهارم : تجزیه و

تحلیل

- اثرالیگوفروکتوزبرپیراسنجه های رشدبچه ماهی ازون4-1برون:

4-1اثرات الیگوفروکتوز برپیراسنجه های رشد بچه مPPاهی ازون بPPرون درجPPدول ارائه شده است نتایج این مطالعه نشPPان داد افPPزودن سPPطوح مختلPPف پربیوتیPPکالیگوفروکتوز به جیره بچه ماهیان اثرمعنی داری برپیراسنجه های رشPPد داشPPته )

05/0>pدندPPو شاخصه های رشددرد و تیمارآزمایشی که با پربیوتیک تغذیه ش .) نسبت بPPه شPPاهدکه دارای جPPیره غPPذایی معمPPولی بPPوده اسPPت دارای اختالف می باشند در صورتی که میزان پروتئین خورده شPPده در هرسPPه گPPروه یکسPPان بPPوده

است. بررسی میزان افزایش وزن دریک دوره پرورش دو ماهPPه در سPPه تیمارپرورشPPی درشکل یک نشان داده شد. همانطورکه در شکل مشاهده می گردد ماهیانی کPPه با دو غلظت متفاوت پربیوتیک موجود در غذای آنها تغذیه شدندنسبت به ماهیPPانی که ازجیره غذایی معمولی تغذیه شدند از سرعت رشد و وزن بPPاالتری برخPPوردار

(.p<05/0بودند و اختالف معنی داری داشتند )

54

0 51 03 54 06 570

010203040506070809

a

aa a a a

a

aa

b b

b

a

ba

b bc

شاهد

%1%2

روز ( پرورش (دوره

)(

رمگ&

زنو

PلPکP4شP-1PرPد PفPلPتPخPم PیPاPهPرPاPمPیPت PرPد PنPوPرPب PنPوPزPا PیPهPاPم PهPچPب PنPزPو PتPاPرPیPیPغPت P- PشPرPوPرPپ PهPرPوPد PکPی

% الیگوفروکتوز نسبت به شاهد نPPیز2و1طول بدن ماهیان تغذیه شده با سطوح ( . اما سرعت رشPPد طPPولی بینp<05/0اختالف معنی داری داشت و بیشتر بود)

تیمارها اختالف معنی داری نداشت.

55

0 51 03 54 06 570

5

01

51

02

52

03

53

04

aa

a a a a

a

ab b

b b

شاهد

%1) روز ) پرورش دوره

)

( تر

می

انتس

لطو

PلPکP4شP-2PرPد PفPلPتPخPم PیPاPهPرPاPمPی PرPد PنPوPرPب PنPوPزPا PیPهPاPم PهPچPب PیPلPوPط PتPاPرPیPیPغPت P- PشPرPوPرPپ PهPرPوPد PکPی

نرخ رشد ویژه در گروه شاهد نسبت به تیمارهای آزمایشی به طPPور معPPنی داری % از1(. و در انتهای دوره پرورش می بیPPنیم کPPه تیمPPار p<05/0کاهش داشت )

بیشترین نرخ رشد ویژه برخوردار است .

PلPکP4شP-3PاPب PهPدPش PهPیPذPغPت PنPوPرPب PنPوPزPا PیPهPاPم PهPچPب PرPد PهPژPیPو PدPشPر PخPرPن P- PشPرPوPرPپ PهPرPوPد PکPی PرPد PزPوPتPکPوPرPف PوPگPیPلPا PفPلPتPخPم PحPوPطPسPنPیPگPنPاPیPم P.PیPگPنPاPیPم P.

PیPنPعPم PفPالPتPخPا Pو PرPتPشPیPب PدPهPاPش PهPب PتPبPسPن PیPشPیPاPمPزPآ PرPاPمPیPت PوPد PرPد PهPنPاPزPوPر PدPشPر P( PتPشPاPد PیPرPاP05/0دP>p PرPاPمPیPت PرPد Pو .)1PرPاPدPرPوPخPرPب PاPر PرPاPدPقPم PنPیPرPتPشPیPب P%

56

PتPشPاPد PیPرPاPد PیPنPعPم PفPالPتPخPا PفPلPتPخPم PیPاPهPرPاPمPیPت PرPد PیPهPاPم PصPلPاPخ PدPیPلPوPتP.PدPوPب PرPاPمPیPت PرPدP1و PلPدPاPعPم PاPر PدPیPلPوPت PنPیPرPتPشPیPب PدPصPرP93/452دP.PدPوPب PمPرPگ

- مقایسه برخی شاخصهای رشد )میانگین و انحراف معیار( بدست1-4جدول آمده در بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک

روز76الیگوفروکتوزطی مدت تیمار

شاخص %1شاهد

الیگوفروکتوز الیگوفروکتوز2%

میانگین وزن ابتدایدوره)گرم(

a 0.33 ± 30.18a 0.34 ± 30.01a 0.37 ± 30.29

میانگین طول ابتدایدوره )سانتی متر(

a 1.1±23.47a 0.45± 23.08a 0.75± 23.72

میانگین وزن انتهایدوره)گرم(

a 3.23 ± 49.28c 6.4 ± 78.39b 3.62 ± 65.42

میانگین طول انتهایدوره )سانتی متر(

a0.59 ± 29.89b1.19 ± 33.95b0.05 ± 32.99

افزایش وزنبدن)گرم(

a3.54 ± 19.1c 6.31 ± 48.38b 3.66 ± 35.13

در صد افزایش وزنبدن)درصد(

a12.44 ± 63.37c 20.17 ± 161.13b 12.39 ± 116.02

a0.09 ± 0.65c 0.08 ± 1.28b 0.13± 0.97نرخ رشد ویژه)درصد(a0.16 ± 0.84c 0.27 ± 2.12b 0.29 ± 1.42میانگین رشد روزانه

سرعت رشد طولی)درصد(

a0.06 ± 0.32a0.22 ± 0.37a0.04 ± 0.43

سرعت رشد وزنی)درصد(

a0.09 ± 0.63c 0.08 ± 1.17b 0.07 ± 0.96

a0.01 ± 0.19a0.01 ± 0.2a0.01 ± 0.18فاکتور وصعیتa5.77 ± 96.67a5.77 ± 93.33a15.28 ± 83.33نرخ بقاء)درصد(

تولید خالص ماهی)گرم(

a22.7 ± 183.3b 78.5 ± 452.93a 57 ± 292.56

میانگین ( در هر ردیف با حروف مشترک دارای اختالف معنی دار± SDاعداد)نیستند.

- اثرات الیگوفروکتوز بر برخی معیارهای تغذیه ای در بچه4-2ماهی ازون برون:

تاثیرسطوح مختلف پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز بPPر معیارهPPای تغذیPPه ای بچPPه مPPاهی ارائه شده است. ضPPریب تبPPدیل غPPذایی بPPا بکPPار گPPیری2-4ازون برون درجدول

پربیوتیک مورد استفاده در این آزمایش در مقایسه با گروه شPPاهد اختالف معPPنیرا داشتیم. FCR%کمترین میزان 1(. و در تیمار p<05/0دای نشان داد )

57

غذای خورده شده روزانه )در صد در روز( یکی از شاخصهای کمی تبدیل غذا می باشد که نسبت به زمان در نظر گرفته می شود در بین تیمارهای مPPورد آزمPPایش

(. در بررسی کPPارایی غPPذاp>0.05نسبت به شاهد اختالف معنی داری نشان نداد) % الیگوفروکتPPوز اختالف معPPنی داری1در بین تیمارهPPای مPPورد آزمPPایش تیمPPار

(.p>0.05نسبت به شاهد نشان داد)% نسPPبت بPPه شPPاهد اختالف معPPنی دار بPPود)1نسPPبت کPPارایی پروتPPئین در تیمPPار

p<0.05 ادل 2-4()جدولPPاهد و34.72 ± 4.3(. کمترین مقدار معPPروه شPPدر گ % الیگوفروکتPPوز مشPPاهده1 در تیمPار 85.78 ± 14.87بیشترین مقدار معPادل

(.2-4گردید)جدول شاخص کبدی که از نسبت وزن کبد بPPه وزن بPPدن مPPاهی بدسPPت می آیPPد در بین

-4( )جPPدول p<0.05تیمارها نسبت به شاهد اختالف معنی داری مشPPاهده گردیPPد) و کمترین مقدار2.29± 0.01(. بیشترین مقدار مربوط به گروه شاهد معادل 3

مشاهده2.05± 0.46 % الیگوفروکتوز جیره معادل 2این شاخص در تیمار شد

- مقایسه برخی شاخصهای تغذیه ای )میانگین و انحراف معیار(2-4جدول بدست آمده در بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک

روز76الیگوفروکتوزطی مدت تیمار

شاخص %1شاهد

الیگوفروکتوز الیگوفروکتوز2%

± b 0.74ضریب تبدیل غذایی6.06

a 0.48 ± 2.48a 0.84 ± 3.87

± a 2.06کارایی غذا )در صد(16.66

b 7.14 ± 41.18a 5.18 ± 26.6

غذای خورده شده روزانه)درصد در روز(

a 0.11 ± 3.77a 0.3 ± 2.9a 1.17 ± 3.22

نسبت کاراییپروتئین)گرم/گرم(

a4.3 ± 34.72

b14.87 ± 85.78 a10.8 ± 55.41

a0.01 ± 2.29ab 0.12 ± 2.17b 0.46 ± 2.05 شاخص کبدی

-اثرات الیگوفروکتوز بر بازماندگی بچه ماهی ازون برون:4-3 بیشترین بازماندگی در بین بچه ماهیان تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیPPک

در صد بود.96.67 ± 5.77الیگوفروکتوز در گروه شاهد مشاهده شد که معادل آنالیز آماری داده ها اختالف معنی داری بین بازماندگی بچه ماهیان تغذیه شده با

و93.33 ± 5.77%(به ترتیب 2% و 1سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز )(p>0.05 نشان نداد)83.33 ± 15.28

58

0 51 03 54 16 670

02

04

06

08

001

021

شاهد

%1%2

) روز ) پرورش دوره

قاد&ب

صدر

PلPکP4شP-4PاPب PهPدPش PهPیPذPغPت PنPوPرPب PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم PهPچPب PیPگPدPنPاPمPزPاPب PدPصPرPد P- PهPرPوPد PیPاPهPتPنPا PرPد PکPیPتPوPیPبPرPپ PفPلPتPخPم PحPوPطPس

- اثرات الیگوفروکتوز بر فاکتورهای خونی بچه ماهی ازون4-4 برون

در انتهای آزمایش نسPبت بPه خPون گPیری و بررسPی فاکتورهPای خPونی از قبیPل گلبPPول قرمPPز، گلبPPول سPPفید، همPPاتوکریت، هموگلPPوبین، میPPانگین حجم گویچPPه، میPPانگین هموگلPPوبین گویچPPه و میPPانگین غلظت هموگلPPوبین گویچPPه و شPPمارش

تفریقی گلبول های سفید اقدام شد. % الیگوفروکتPPوز( نسPPبت بPPه سPPایر1)1میزان هماتوکریت خون در ماهیان تیمار

( .p >05/0تیمارها بیشتر بود واختالف معنی داری نداشت.) - مقادیر برخی پارامترهای هماتولوژیک بچه ماهیان ازون برون تغذیه3-4جدول

شده با سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوز جیرهتیمار

شاخص %1 شاهد

الیگوفروکتوز الیگوفروکتوز2%

MCV(fl)MCH (pg)

a 16.98 ± 229.59

a 0.91 ± 46.54

a 6.02 ± 245.03a 1.64 ± 45.89

a 13.26 ± 226.88a 5.84± 44.64

MCHC)%( a 0.74 ± 19.66a 0.52 ± 18.77a 3.43± 19.38RBC (mm3 ×106)a 0.03 ± 0.96a 0.12 ± 1.03a 0.24 ± 0.9

HCT)%( Hb (g/dl )

a1.2± 22.67a 0.19 ± 4.49

a 3.17 ± 25.22a 0.48 ± 4.72

a4.58 ± 20.67a 1.53 ± 4.11

59

میانگین ( در هر ردیف با حروف مشترک دارای اختالف معنی دار± SDاعداد)نیستند.

PلPکP4شP-5Pو PدPهPاPش PرPاPمPیPت PرPد PنPوPرPب PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم PنPوPخ PتPیPرPکPوPتPاPمPه PنPاPزPیPم P- PیPشPیPاPمPزPآ PیPاPهPرPاPمPیPت

بررسی هموگلوبین موجود در خون ماهیان ازون برون بعد از تغذیPPه بPPا پربیوتیPPک الیگوفروکتوز نشان داد که هموگلوبین خPPون این تیمارهPPا از نظPPر آمPPاری اختالف

% الیگوفروکتPPوز1( . ومPPیزان هموگلPPوبین درتیمPPار p>05/0معPPنی داری نPPدارد )بیشتر از سایر تیمارها بود.

60

PلPکP4شP-6Pو PدPهPاPش PرPاPمPیPت PرPد PنPرPب PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم PنPوPخ PنPیPبPوPلPگPوPمPه PنPاPزPیPم P- PیPشPیPاPمPزPآ PیPاPهPرPاPمPیPت

بررسی مقادیر مختلف گلبول قرمPز ماهیPPان ازون بPرون در تیمارهPای آزمایشPی ( وp>05/0نشPPان داد کPPه این تیمارهPPا بPPا هم اختالف معPPنی داری نداشPPته انPPد )

% الیگوفروکتوز بیشتر از سایر تیمارها بود.1میزان گلبول قرمز در تیمار

PلPکP4شP-7PدPهPاPش PرPاPمPیPت PرPد PنPوPرPب PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم PنPوPخ PزPمPرPق PلPوPبPلPگ PرPیPدPاPقPم P- PیPشPیPاPمPزPآ PیPاPهPرPاPمPیPت Pو

میانگین حجم گویچه های قرمز خون در تیمار آزمایشPPی نسPPبت بPPه تیمPPار شPPاهد %1(. و بیشPPترین مقPPدار آن در تیمPPار p>05/0اختالف معPPنی دار دیPPده نشPPد )

پربیوتیک بود.

61

( gr

/ d

( x 1 06

/m

l

3)

-&م&ق&ا&د&ی&ر& م&ی&ا&ن&گ&ی&ن& ح&ج&م& گ&و&ی&چ&ه& ه&ا&ی& خ&و&ن& م&ا&ه&ی&ا&ن& ا&ز&و&ن& ب&ر&و&ن& د&ر&8-&4ش&ک&ل& ت&ی&م&ا&ر& ش&ا&ه&د& و& ت&ی&م&ا&ر& آ&ز&م&ا&ی&ش&ی&

-در بررسی انجام شده از میانگین هموگلوبین گویچه های خون در ماهیانی که بPPا >05/0پربیوتیک تغذیه شدند نسبت به تیمار شاهد اختالف معنی داری نداشتند )

p پربیوتیک بود.2( و کمترین مقدار آن در تیمار %

PلPکP4شP-9PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم PنPوPخ PیPاPه PهPچPیPوPگ PنPیPبPوPلPگPوPمPه PنPیPگPنPاPیPم PرPیPدPاPقPم P- PیPشPیPاPمPزPآ PیPاPهPرPاPمPیPت Pو PدPهPاPش PرPاPمPیPت PرPد PنPوPرPب

- مشPPاهده می گPPردد میPPانگین غلظت هموگلPPوبین10-4همPPانطور کPPه در شPPکل گویچه های قرمز خون در ماهیان ازون برونی که با پربیوتیک تغذیه شدند با تیمار

%1(.و کمترین مقPPدار آن در تیمPPار p>05/0شاهد اختالف معنی داری نداشتند )الیگوفروکتوز بود.

62

PلPکP4شP-10PنPاPیPهPاPم PنPوPخ PیPاPه PهPچPیPوPگ PنPیPبPوPلPگPوPمPه PتPظPلPغ PنPیPگPنPاPیPم PرPیPدPاPقPم P- PیPشPیPاPمPزPآ PیPاPهPرPاPمPیPت Pو PدPهPاPش PرPاPمPیPت PرPد PنPوPرPب PنPوPزPا

- شمارش افتراقی گلبول های سفید)میانگین وانحراف معیار ( در4-4جدول بچه ماهیان ازون برون تغذیه شده با سطوح مختلف پری بیوتیک الیگوفروکتوز

جیرهتیمار

شاخص %1 شاهد

الیگوفروکتوز الیگوفروکتوز2%

(mm3گلبول سفید)لمفوسیت )%(

a 271.48 ± 5855.56

a 16.65 ± 80.67a 0.51 ± 1.44

c 2133.42 ± 13311.1

a 1.64 ± 94.78

b 302.46 ± 8844.44

a 7.04 ± 81.11a 0.35 ± 0.72a 0.69 ± 2.44ائوزینوفیل )%(a1.53 ± 4.67b 10.34 ± 25.44ab 7.81 ± 15.11نوتروفیل )%(

میانگین ( در هر ردیف با حروف مشترک دارای اختالف معنی دار± SDاعداد)نیستند.

-تعداد گلبول های سفید خون در ماهیان ازون برون در تیمارهایی که مورد تغذیPPهپربیوتیک قرار گرفتند نسبت به تیمار شPPاهد اختالف معPPنی داری نداشPPته اسPPت)

05/0<pد1(. و کمترین مقدار گلبول سفید در تیمارPPالیگوفروکتوز بود. - درص % لمفوسیت موجود در خون ماهیان مورد تغذیه بPPا پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز )تیمPPار

% الیگوفروکتPPوز از نظPPر آمPPاری2% الیگوفروکتوز( نسPPبت بPPه شPPاهد و تیمPPار 1( و مقPدار آن نPPیز در این تیمPPار )p<05/0دارای اختالف معPنی داری می باشPPد )

% الیگوفروکتوز و تیمPPار2% لیگوفروکتوز( بیشتر از سایر تیمارها است. تیمار 1 %1شاهد اختالف معنی داری با هم ندارند-مقادیر ائوزونوفیل خون ماهیان تیمار

( و در عPPوضp>05/0پربیوتیک نسبت به تیمار شPPاهد اختالف غPPیر معPPنی داری ) (. این در صPPورتیp<05/0% پربیوتیک اختالف معPPنی دار دارد )2نسبت به تیمار % بیشترین میزان ائوزونوفیل را داشPPت. نوتروفیلهPPای موجPPود ر2است که تیمار

63

% الیگوفروکتوز تغذیه شدند نسبت به دو گروه دیگر دارای1خون ماهیانی که با (.p<05/0اختالف معنی داری می باشد) % و تیمار شاهد با2% است. در حالی که تیمار 1و کمترین میزان آن در تیمار هم اختالف معنی داری ندارند

کتورهای کیفی آب - فا4-5 اچ، هPPدایت الکPPتریکی و–فاکتورهای کیفی آب شامل اکسیژن محلPPول، دمPPا، پی

شوری به طور روزانه اندازه گیری و ثبت شد. با توجه به وجود یکسان درتمPPامی و نیروها و جریان دائم آب ورودی تفاوت چندانی بین واحدهای آزمایشی از نظPPر مPPوارد فPPوق نبPPود. نتPPایج بدسPPت آمPPده از ثبت فاکتورهPPای کیفی آب مPPوارد ذیPPل

می باشد:

- اکسیژن محلول4-5-1 اکسPPیژن محلPPول از مPPوارد بسPPیار مهم در امPPر پPPرورش مPPاهی اسPPت . در این

± 0.98مطالعه مقادیر اکسیژن محلول به طور متوسط در طول دوره پرورش بود. به دلیل هوادهی مستمر آب مشکلی از نظPPر اکسPPیژن محلPPول وجPPود6.66

(.11-4نداشت. )شکل

51 92 44 95 470123456789

روز پرورش

ر د&

رم& گ&

یمیل

ل )لو

محن

یژس

اک&ر(

لیت

PلPکP4شP-11PشPرPوPرPپ PهPرPوPد PلPوPط PرPد PبPآ PلPوPلPحPم PنPژPیPسPکPا PتPاPرPیPیPغPت PنPیPگPنPاPیPم P-

- دما4-5-2 با توجه به اینکه آب ورودی حوضچه ها از چاه تامین می شد، نوسانات دمایی در طول دوره پرورش تهدیدآمیز نبود. میPPانگین دمPPای آب در طPPول پPPرورش معPPادل

درجه سانتی گراد بود. در حالیکه میPانگین دمPPای هPPوا در طPPول22.41 ± 2.72

64

درجه سانتی گراد بود. میانگین دمای آب و هوا طی28.86 ± 4.83دوره معادل ( نشان داده شده است.12 - 4دوره پرورش در شکل )

1 5 931 71 12 52 92 33 73 14 54 94 35 75 16 56 96 37

0

5

01

51

02

52

03

پرورش روز

)

( راد

یگ&انت

سما

د

PلPکP4شP-12 –PهPچPب PشPرPوPرPپ PیPاPه PهPچPضPوPح PرPد PاPوPه Pو PبPآ PیPاPمPد PنPیPگPنPاPیPم PشPرPوPرPپ PهPرPوPد PیPط PنPوPرPب PنPوPزPا PنPاPیPهPاPم

- پی - اچ4-5-3 بود و در طPPول دوره پPPرورش87/7 ±%6 اچ آب حوضچه پرورش –میانگین پی

نوسانات چشمگیری نداشت.

((EC- قابلیت هدایت الکتریکی4-5-4 میلیPP-51/4 81/4قPPابلیت هPPدایت الکPPتریکی آب در طPPول دوره آزمPPایش بین

±%1موس بر سانتی متر در نوسان بود. میPPانگین قPPابلیت هPPدایت الکPPتریکی آب میلی موس در سانتی متر بود.69/4

65

- شوری4-5-5 بPPا توجPPه بPPه اینکPPه آب مPPورد اسPPتفاده در این مطالعPPه از چPPاه نیمPPه عمیقی در

گرم بر لیPPتر بPPود و در طPPول5/2مجاورت دریای خزر تامین می شد، شوری آب دوره آزمایش ثابت و بدون تغییر بود.

66

فصل پنجم : بحث و نتیجه گیری

67

: پنجم فصل بحث ،

نتیجه گیری

در سالهای اخیر آبزی پروری از سریع الرشدترین بخش های تولید غذا بوده و در کنار این رشد قابل توجه همواره با مشکالتی مواجه بوده اسPPت کPPه از جملPPه آن می توان به تغییرات کیفیت آب ، شیوع بیماری هPPا و مشPPکالت تغذیPPه ای اشPPاره کرد. به گونه ای کPه شPPیوع بیمPاری هPPا بPه عنPPوان مشPکل عمPده آبPPزی پPPروری، گسترش اقتصاد این بخش را در بسیاری از کشورها تحت تأثیر قرار داده اسPPت. وهمواره راه حل هایی نPPیز بPPرای برطPPرف کPPردن این مشPPکالت ارائPPه شPPده کPPه موفقیت چندانی نداشPPته انPPد چPPالش عمPPده در آبPPزی پPPروری، بهبPPود جPPیره هPPای فرموله شده به منظور بهینه کردن رشد ماهی و باال بردن توان ایمPPنی مPPاهی ازطریق توسعه جیره های غذایی ارتقاء سالمتی و مدیریت میکروفلور روده است.

(( بPPPه منظPPPور بهبPPPودProbioticایPPPده اسPPPتفاده از ارگPPPانیزم هPPPای پروبیوتیPPPک فلورمیکروبی روده و نقش بالقوه آنها در ممانعت از تجمع )کلنی شPPدن( بPPاکتری های بیماری زا در روده ماهی ها و نرم تنان مورد توجه قرارگرفتPPه اسPPت ونتPPایج امیدوار کننده ای هم حاصل شPPده اسPPت.بPPا این حPPال اسPPتفاده از پروبیوتیPPک هPPا همواره با محPPدودیت هPPایی چPPون امکPPان غلبPPه برفلPPور باکتریPPای بPPومی دسPPتگاه گوارش وتشکیل کلنی در روده ، تحمل اسPPید معPPده و نمPPک هPPای صPPفراوی و در نهایت خطرمقاومت زایی روبرو بوده است. بنابر این اتخاذ راهبردی جدید در این

راستا ضروری به نظر می رسید. پس از شناسایی باکتری های اسید الکتیک در فلPPور بPPاکتری روده حیوانPPات، ایPPده استفاده از موادی که بتواند سبب افزایش رشد و غالبیت این باکتری هPPای مفیPPد روده بشود شکل گرفت. این مواد که منحصرا توسط باکتری های مفید روده ای مانند بیفیPPدوباکترها و الکتوباسPPیلوس هPPا مPPورد اسPPتفاده قرارگرفتPPه و از طریPPق بهبود تPPوازن بPPاکتری هPPای روده ای بPPه سPPمت بPPاکتری هPPای بPPالقوه مفیPPد سPPبب افزایش ایمنی، بهبود رشد، بازماندگی و بهبود وضعیت فPPیزیولوژیکی می شPPوند، پربیوتیک نام گرفتند. متعاقب آن باکتری های اسید الکتیک از روده ماهی نیز جPPدا

( پس از آن بکارگیری پربیوتیک ها در صنعت پرورش ماهیP،Ringo 1944شدند )آغاز شد.

علی رغم مطالعات انجام شده تاکنون بر روی ماهی ها و سPPخت پوسPPتان هنPPوز بسیاری از جنبه هPPای اسPPتفاده از پربیوتیPPک هPPا درآبPPزی پPPروری ناشPPناخته مانPPده است، مثال سطوح بهینه استفاده از آن ها و نیز اینکه در چه مرحله ای از زنPPدگی آبزیان استفاده شود هنوز مشخص نیست در حالیکه برای انسان ها و مPPدل هPPای حیوانی این مسائل کامال مشخص شده است. افزایش دانش در زمینPPه اسPPتفاده

Hosseinifar,2007از پربیوتیک ها در آبزی پروری مطالعات بیشتری را می طلبد)&Mahious.)

- تأثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز بر برخی5-1پیراسنجه های رشد و تغذیه در ماهی ازون برون

نتایج این بررسی نشان داد که افزودن سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز بPPه جیره بچه ماهیان اثرمعنی داری بر پیراسنجه های رشد و تغذیه داشته و شاخصه

68

% تغذیPPه شPPدند2% و 1های رشد و تغذیه در دو تیمار آزمایشی که بPPا پربیوتیPPک %1نسبت به شPPاهد افPPزایش معPPنی دار داشPPتند. شاخصPPه هPPای رشPPد در تیمPPار

% افزایش بیشتری داشتند. شاخص هایی چون کPPارائی غPPذا و غPPذای2نسبت به % بدست1% بیشتر بود. افزایش تولید مربوط به تیمار 1خورده شده در تیمار

آمد. ایجاد شرایط مناسب محیطی ضمن تاثیر بر روی پارامترهای بیوشPPیمیایی و فیزیولوژیکی ماهیان سPPبب بهبPPود جPPذب مPPواد غPPذایی و افPPزایش سPPرعت رشPPد

ماهیان می گردد. مشابه نتPایج مطالعPه حاضPر ، بPرخی از محققین نتPایجی مبPPنی بPر اثPرات مفیPد

گزارش کردندGatlin (2004)وLiپربیوتیک برپیراسنجه های رشد ارائه نموده اند. GrobioticTM درصد پربیوتیک تجPPاری 2و 1افزودن AEدPPذایی هیبریPPیره غPه جPPب

( و تغذیه ماهی ها با آن به مدتMorone chrysops × M. saxatilisباس راه راه ) هفته سبب بهبود عملکرد رشد و کارایی تغذیه در گروههای تغذیه شPPده بPPا این7

مکمل ها در مقایسه با گروه شاهد می شود. سطوح مختلف پربیوتیک اینPPولین والیگوفروکتوز سبب افزایش معنی دار پیراسنجه های رشد الرو ماهی توربPPوت ))

Psetta maxima( شد Mahious et al.,2005 aهمچنین محققین گزارش کرده اند .) پربیوتیک اینولین و الیگوفروکتوز اثرات معنی داری بر فاکتورهای رشد و مصرف

Acipenserجیره تاس مPPاهی سPPیبری ) baeri(( اییPPاهی آفریقPPه مPPو گرب )Clarias gariepinus ( دارد Ollevior,2005&Mahious(رویPPزارش1389-90. خسPPیز گPPن )

کرد که سطوح مختلف پربیوتیک انPPولین قPPابلیت تPPاثیر گPPذاری نسPPبتا" بPPاالیی بPPر / . درصPPد5افزایش عملکرد رشد و تغذیه در بچه ماهی کلمPPه داشPPت و سPPطوح

اینولین در جیره نتایج بهتری داشت. ( در مورد اثرات مثبت پربیوتیک برپیراسنجههای رشد سخت پوستان نیز دو گزارش وجود دارد. استفاده از سطوح مختلف )

0 P، 5/1 P،3درصد( مانان الیگوساکارید به عنوان پربیوتیک در جیره میگوی5/4 و Penaeusببری سPPبز ) merguensisاPد. آنهPد شPPای رشPنجه هPود پیراسPبب بهبPس )

درصد ذکر3بهترین سطح بکارگیری پربیوتیک مذکور را در جیره پست الرو میگو(Ngo Van Haiکردند. پربیوتیکRavi Fotedar2009 و از (گزارش کردند استفاده

(منتج بهPenaeus latisulcatusتجاری ؟در پرورش شاه میگوی آب شیرین غربی ) ضریب رشد ویژه بیشترو ضPPریب تبPPدیل غPPذایی کمPPتری نسPPبت بPPه شPPاهد شPPده

درصد پربیوتیک اینولین بPPه جPیره3( نیز اعالم کرد. افزودن 1387است. اکرمی ) فیل ماهی سبب اثرات نامطلوب بر فاکتورهای رشد شد. همچنین بر خالف نتایج بدست آمده از این مطالعه که موید اثرات مطلوب پربیوتیک الیگوفروکتPPوز بPPود، اکرمی گزارش کرد بهPPترین نتPPایج از تیمPPار شPPاهد بدسPPت آمPPده و بPPه طPPور کلی پربیوتیک انولین سبب کاهش پیراسنجه های رشد می شPPود. و همچPPنین حسPPینی

( گزارش کرد که پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز در سPPطوح در نظPPر گرفتPPه1388فر ) %( و مPPدت زمPPان اسPPتفاده شPPده اثPPری بPPر پیراسPPنجه هPPای رشPPد3و2و1شده )

% و2% و1نداشته است و اختالف معنی داری بین پیراسPPنجه هPPای رشPPد تیمPPار درصد2تیمار شاهد وجود نداشت اما بیشترین میزان رشد در تیمار الیگوفروکتوز

وvendemiattiدرصد اثر منفی بر رشPPد داشPPت. همچPPنین 3مشاهده شد و سطح Yuji( و نPPیز در مطالعPPه دیگPPری 2003همکPPاران ) SadoوDe Almeida (2008)

گزارش کردند افزودن سPPطوح مختلPف پربیوتیPک مانPان الیگوسPPاکارید بPPه جPPیره

69

Oreochiromisتیالپیای رود نیل ) niliticusنجهPPر پیراسPPامطلوبی بPPرات نPPسبب اث ) های رشد تیالپیای رود نیل می شود و ارتباط منفی بین افزایش سPPطح پربیوتیPPک

در جیره و پیراسنجه های رشد وجود داردOlsen( 2001 و همکاران( ارقطبیPPاهی چPPر روی مPPه ای بPPدر مطالع )Salvelinus

alpines جیره غذایی به15( مشاهده کردند افزودن پربیوتیک اینولین به میزان % دلیل عدم تخمیر و تجزیه آن منجر بPPه انباشPPت آن در روده و اثPPرات نPPامطلوب و زیان بار به انترویسیت های روده می شود . با توجه به نتایج بدست آمده از این تحقیق شاید بتوان گفت سطوح قابل مصرف پربیوتیک بPPرای مPPاهی ازون بPPرون

خیلی کمتر از چار قطبی است ..

به جز مطالعات ذکر شده که موید اثPPرات نPPامطلوب سPPطوح بPPاالی پربیوتیPPک در جیره بر پیراسنجه های رشد ماهی است، مطالعاتی هم بی تاثیر بPPودن پربیوتیPPک

( نشPPان دادنPPد کPPه1387را بر رشد ماهی نشان داده انPPد . اکPPرمی و همکPPاران ) درصد پربیوتیک اینولین تاثیری بر پیراسنجه هPPای رشPPد قPPزل آالی3،2،1افزودن

Oncorbyncbusرنگین کمPPان mykissژه وPPد ویPPرخ رشPPایی ، نPPل وزن نهPPاز قبی )) ضریب تبدیل غذایی ندارد و اینولین مکمل غذایی مطلPPوبی بPPرای مPPاهی قPPزل آال

درصد اینولین به جیره غذایی قزل آالی2 و 5/0نیست. نتایج مشابهی با افزودن ( . نتایج این دو1387رنگین کمان بدست آمده است)شیخ االسالمی و همکاران،

مطالعه با مطالعه حاضر مطابقت ندارد.Yoshid( ر1995 و همکارانPPری بPPاکارید اثPPان الیگوسPPک مانPPنشان دادند پربیوتی )

Clariasفاکتورهای رشد گربه ماهی آفریقایی gariepinus تفاده ازPPدارد. اسPP3(( ن درصد پربیوتیک مانان لیگوساکارید به عنوان پربیوتیک در جیره غذایی تاس ماهی

(( هیچ تاثیر معنی داری برپیراسنجه های رشدAcipenser oxyrincbusخلیج فارس Pryorو ضریب تبدیل غذایی تPPاس مPPاهی خلیج نداشPPت ) et al.,(2003نینPPهمچ .

درصد پربیوتیک مانان الیگوساکارید اثری برپیراسنجه های رشPPد و3،2،1سطوح Clariasضریب تبدیل غذایی گربه مPPاهی آفریقPPایی) gariepinus( تPPنداش )Gence

et al .,2006 بعالوه .)Gence( در مطالعه دیگری گزارش کردند2007 و همکاران ) ،PP 5/1افزودن سطوح مختلف ) درصد( مانان الیگوسPPاکارید بPPه جPPیره5/4 و 3

ماهی تپالپیا تأثیر معنی داری بر پیراسنجه های رشد ندارد. افPPزودن یPPک سPPطح ) گرم به ازای کیلPPوگرم( پربیوتیPPک هPPای مانPPان الیگوسPPاکارید ، فروکتPPو الیگPPو10

SalmoسPPاکارید و گاالکتوسPPاکارید بPPه جPPیره آزادمPPاهی اقیPPانوس اطلس ) salar) -et al.Grisdale,2009تأثیری بر فاکتور رشد و مصرف جیره غذایی نشان نداد)

Helland) در مطالعات انجام شده بر روی سخت پوستان نیز نتایج بدست آمده چنین بوده.

Li( ارانPP2007 و همک(طوحPPد سPPزارش نمودنPPگ )025/0،05/0 PP،075/0 PP،1/0، 2/0 P،4/0درصد( پربیوتیک فروگتوالیگوساکارید زنجیره کوتاه اثرات معنی داری

Penaeusبرپیراسنجه های رشPPد و ضPPریب تبPPدیل غPPذایی میگPPوی پاسPPفیدغربی) )vannameiوانPPه عنPPاکارید بPPان الیگوسPPرات مانPPه اثPPابه در زمینPPایج مشPPدارد. نتPPن

70

(( و پربیوتیک اینولینDaniels et al.,2007پربیوتیک در پرورش البستر اروپایی Fenneropenaeusدر پPPرورش الرو و پسPPت الرو میگPPوی سPPفید هنPPدی ) indicus)

بدست آمده است. اختالف موجود در نتایج مطالعه حاضر با نتایج مطالعات فوق الذکر شاید به دلیل تفاوت در نوع گونه پرورشی، اندازه، سPن ، مرحلPPه بکPPارگیری پربیوتیPک ، طPول دوره پPPرورش ، شPPرایط بهداشPPتی و سیسPPتم پرورشPPی، رفتارهPPای تغذیPPه ای ، خصوصیات فیزیولوژیک، فرموالسیون جیره پایه، نPPوع پربیوتیPPک مصPPرفی، درجPPه خلوص آن و میزان بکارگیری درجیره، روش ها افزودن به جیره و فلور باکتریایی گونه پرورشی باشد. بنابر این می بایست برای هر گونه مطالعات جداگانه ای به

منظور سطوح بهینه پربیوتیک و مرحله بکارگیری انجام شود.

- تاثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز بر بازماندگی5-2ماهی ازون برون

. نتPPایج مطالعPPه حاضPPر نشPPان داد کPPه افPPزودن سPPطوح مختلPPف پربییوتیPPک الیگوفروکتوز در جیره ماهیان ازون برون بربازماندگی اثر نداشت. در این تحقیق

% الیگوفروکتPPوز2% و 1بازماندگی بچه ماهیPPان گPPروه شPPاهد بهPPتر از دو تیمPPار جیره بود همچنین در مطالعه دیگری کPه از سPPطوح مشPابه پربیوتیPPک اینPPولین در جPPیره بچPPه مPPاهی اسPPتفاده شPPده بPPود، پربیوتیPPک مPPذکور هیچ اثرمعPPنی داری بPPر بازماندگی بچه ماهی نداشت اگر چه بیشترین نرخ بازمانPPدگی مربPPوط بPPه تیمPPار

(. همچنین سطوح مختلPPف اینPPولین اثPPری بPPر1387 درصد بود )اکرمی،1اینولین بازماندگی قزل آالی رنگین کمان نداشت و سبب افPPزایش بازمانPPدگی طی دوره

،2، 1، 5/0، 0(. بعالوه سطوح مختلف )1387پرورش نشد )اکرمی و همکاران، 3 PP،6 PP،9 رات12 وPPاکارید اثPPان الیگوسPPگرم به ازای کیلوگرم غذا( پربیوتیک مان

OreocbromisنPPPامطلوب بربازمانPPPدگی تیالپیPPPای رود نیPPPل) niloticus(تPPPداش )Vendemiatti et al.,2003. ) نشان دادنPPد اسPPتفاده از پربیوتیPPکZare(2007)و Hoseinifar. در مطالعه ای دیگر

( اثریFenneropenaeus indicusاینولین در مرحله مایسیس میگوی سفید هندی) بPPر بازمانPPدگی نPPدارد امPPا در مرحلPPه پسPPت الروی سPPبب افPPزایش معPPنی دار

( گزارش کرد که الیگوفروکتوز بPPه طPPور1388بازماندگی می شود. حسینی فر ) معنی داری بازماندگی بچPPه فیPPل مPPاهی را تحت تPPأثیر قPPرار داد. و بازمانPPدگی در

% الیگوفروکتوز بود3 % به طور معنی داری از تیمار شاهد و تیمار2تیمار GrobioticTMدر زمینه اثرات پربیوتیک تجاری مشابهی نتایجی AEدگیPPبر بازمان

Morone cbrysops X M.saxatilis(( )Li&Gatlin,2004هیبرید باس راه راه)

Racbycentron، پربیوتیPPک مانPPان الیگPPو سPPاکارید بPPر بازمانPPدگی الرو سPPوکال )canadum()Salze et al.,2007(( Staykov et al.,2007( P)(و قزل آالی رنگین کمان

Oncorbyncbus mykisss.تطابق دارد.

71

در کلیه مطالعات انجام شده بر روی سخت پوستان افزایش بازماندگی گPPزارش P،5/1 P،3 0( گزارش کردند سطوح مختلف)2007و همکاران Genceشده است.

درصد( مانان الیگوساکارید به طور معPPنی داری بازمانPPدگی میگPPوی بPPبری5/4و Penaeusسبز) merguensis(کPتفاده از پربیوتیPد اسPرا افزایش می ده )Isomalto

oligosaccharides( ربیPفید غPدر پرورش میگوی پاس )Litopenaeus vannamei( P)Jiqiu Li et al.,2009یرینPPوی آب شPPاه میگPPرورش شPPاری ؟در پPPو پربیوتیک تج)

Penaeusغربی) latisulcatusنی اینPPدگی و ایمPPوگیری بازمانPPور چشPPه طPPیز بPP؟ن ) میگو ها را افزایش داد.

اثرات پربیوتیک بر بازماندگی ، ارتباط مستقیمی با توانایی میکروفلPPور باکتریPPاییدسPPPPPتگاه گPPPPPوارش مPPPPPاهی و میگPPPPPو بPPPPPرای تخمPPPPPیر پربیوتیPPPPPک دارد ) )

Hosseinifar&zare,2008یونPPه پلیمریزاسPPیره و درجPPول زنجPPقابلیت تخمیر به ط . بسPتگی دارد. مشPPخص شPPده کPه اینPولین اسPPتخراج شPPده از ریشPه کاسPPنی کPPه

( نسPPبت بPPه الیگوفروکتPPوز60 تPPا 10زنجیره طوالنی دارد )درجه پلیمریزاسPPیون برابر آهسته تر تخمPیر می شPود()2(P 8 تا 2زنجیره کوتاه )درجه پلیمریزاسیون

Roberfroid et al.,1998امطلوبیPPرات نPPعدم تخمیر و تجمع پربیوتیک در روده اث . OlsenفPPیزیولوژیکی برمPPاهی و میگPPو خواهPPد داشPPت )) et al.,2001ایجPPاید نتPPش

متفاوت بدست آمده در زمینه بازماندگی ماهی و میگو در اثر استفاده از سطوحمختلف پربیوتیک های متفاوت را بتوان چنین توجیه کرد.

- تأثیر سطوح مختلف پربیوتیک الیگوفروکتوز برفاکتورهای5-3خونی بچه ماهی ازون برون

شPPرایط محیPPط پPPرورش ، کمیت و کیفیت غPPذا، اختالف رزیم غPPذایی، نPPوع گونPPه Dumeizan etپرورشی، اندازه و سن می تواند برفاکتور های خونی موثر باشد) .)

al.,1997ونPPذایی چPPای غPPتاکنون گزارش مدون و کاملی در زمینه اثرات مکمل ه پربیوتیک و پروبیوتیک برفاکتورهای خونی ماهیان ازجمله ماهیPPان خاویPPاری ارائPPه نشده است وصرفا مقادیر این فاکتور در محیPPط طPبیعی مPورد سPPنجش و آنPPالیز قرارگرفته است. با این وجود اتفاق نظPPر محققین بPPر این اسPPت کPPه فاکتورهPPای خونی و سPPطوح متPPابولیت هPPای پالسPPما در گونPPه هPPای مختلPPف متفPPاوت بPPوده و

(.Ross&Ross,1999ارتباط زیادی با شرایط محیطی، تغذیه ای، سن و.... دارد) بررسی فاکتورهای خونی نشان داد تفاوت معنی داری در بین تیمارها نبود. و-1

الیگوفروکتوز بربرخی فاکتورهای خونی از جمله گلبول ها سPPفید و نوتروفیPPلاثر مثبتی داشته است اما بر پارامترهای هماتولوژیک اثری نداشت.

% پربیوتیک1( گزارش کرد بیشترین میزان گلبول سفید در تیمار1387 اکرمی ) مشاهده شده بود و با افزایش سطوح پربیوتیک تعداد گلبول سفید دچPPار کPPاهش معنی داری شد. افزایش تعداد گلبول هPای سPPفید می توانPPد نشPانه اثPرات مثبت پربیوتیک الیگوفروکتوز به عنوان محرک دستگاه ایمنی باشد )اکرمی و همکاران،

(. همچنین استرس سبب کاهش هموگلوبین و تعداد گلبول های قرمPPز می1387 (. با توجه به اثرات نامطلوب سطوح باالی الیگوفروکتوز درDas et al.,2006شود)

72

جیره کاهش هموگلوبین و تعداد گلبول هPPای قرمPPز می توانPPد در نتیجPPه اسPPترسناشی از آن باشد.

( نیز گزارش کرد که تفاوت معPPنی داری از نظPPر تعPPداد گلبPPول1388حسینی فر) قرمز در بین تیمارهPPا وجPPود نPPدارد درحالیکPPه تعPPداد گلبPPول هPPای سPPفید در تیمPPار

درصPPد3 درصPPد افPPزایش معPPنی داری نسPPبت بPPه الیگوفروکتPPوز 2الیگوفروکتوز نشان داد.

درصPPد بPPود. و همPPاتوکریت2و 1 درصد کمتر از 3میزان هموگلوبین نیز در تیمار در تیمار شاهد کمترین مقدار را داشPPت . و همچPPنین در مطالعPPاتی نPPیز بی تPPأثیر بودن پربیوتیک بر فاکتورهای خونی ماهی گزارش شPPده اسPPت. افPPزودن سPPطوح

درصد اینولین بPPه جPPیره قPPزل آالی رنگین کمPPان منتج بPPه هیچ اثPPر معPPنی2و 5/0 داری برفاکتورهPPای خPPونی از قبیPPل تعPPداد گلبPPول هPPای قرمPPز، همPPاتوکریت،

( . اگرچPPه در این مطالعPPه1387هموگلوبین نشPPد)شPPیخ االسPPالمی و همکPPاران ، افزایش تعداد گلبول های سPPفید در قPPزل آالی تغذیPPه شPPده بPPا پربیوتیPPک اینPPولین

2گزارش شده که مشPPابه مطالعPPه حاضPPر می باشPPد. بعالوه اسPPتفاده از سPPطح درصد مانان الیگوساکارید به عنPPوان پربیوتیPPک در جPیره گربPPه مPPاهی روگPاهی ))

Ictalurus punctatus (Welker et al.,2007)در جیره6و الیگوساکارید مانان سطح ( هیچniloticus)Oreocbromis( P)De Almeida & Yuji Sado, 2008تیالپیای رود نیل

اثر معنی داری بPر فاکتورهPای خPونی نداشPت و پربیوتیPک سPبب افPزایش تعPداد گلبول های سفید نگردید. انکوباسیون لکوسPPیت هPPای بخش قPPدامی کلیPPه مPPاهی

Sparusسیم دریPPایی ) aurataیزPPگاهی نPPط آزمایشPPولین در محیPPک اینPPا پربیوتیPPب ) نشان داد اینولین تأثیری بر لکوسیت ها ندارد.

شمارش تفریقی گلبPPول هPPای سPPفید در مطالعPPه حاضPPر تفPPاوت معPPنی داری بین تعداد نوتروفیPPل در تیمارهPPای مختلPPف نشPPان داد. در حPPالی کPPه بیشPPترین مPPیزان

% پریبوتیک داشتیم. 1نوتروفیل و لمفوسیت را در تیمار (، در شمارش تفریقی گلبPPول هPPای سPPفید تفPPاوت1388در مطالعه حسینی فر )

معنی داری بین تعداد نوتروفیل و مونوسیت و ائوزونوفیPPل در تیمارهPPای مختلPPف درصد الیگوفروکتوز به طPPور معPPنی2و1نشان نداد اما تعداد لمفوسیت در تیمار

% بود.3داری بیشتر از شاهد و ( نیز تعداد لنفوسیت هPPا در شPPمارش تفPPریقی1387مطالعه اکرمی و همکاران )

درصPد بPه طPور معPنی داری بیشPتر از سPایر تیمارهPا بPود در1در تیمار اینPولین حالیکه این روند در مورد سایر انواع گلبول های سفید مشاهده نشد. با توجPPه بPPه اینکه در ماهی ایمنی غیر اختصاصی نقش بسیار مهمی دارد و ایمPPنی اختصاصPPی به دلیل تکامل نیافته بودن اهمیت کمتری دارد، افزایش ایمPPنی غیراختصاصPPی از

Sahooطریق مکمل های غذایی همواره مPPورد توجPPه بPPوده اسPPت ) et al.,2005.) گلبول های سPPفید جPPزو اولین سPPدهای دفPPاعی بPPدن در برابPPر عوامPPل بیمPPاری زا

(. افPPزایش گلبPPول هPPای سPPفید و بPPه خصPPوص1387هستند)اکPPرمی و همکPPاران، درصPPد مؤیPPد اثPPرات مطلPPوب1نوتروفیل ولنفوسیت هPPا در تیمPPار الیگوفروکتPPوز

پربیوتیک الیگوفروکتوز بر ایمنی غیر اختصاصPPی ازون بPPرون می باشPPد.البتPPه می

73

بایست مطالعات بیشتری به منظور ارزیابی دقیق اثرات پربیوتیک الیگوفروکتPPوزبر ایمنی و مقاومت ازون برون در مواجهه با عوامل بیماری زا انجام شود.

- نتیجه گیری کلی5-4 در نهایت با توجه به موضوعات بحث شده و همچنین نتایج بدست آمده می توان

نتایج کلی حاصل از این مطالعه را به صورت زیر جمع بندی کرد:.

- پربیوتیک الیگوفروکتوز در سطوح در نظرگرفته شده و مPPدت زمPPان اسPPتفاده1 شده برپیراسنجه های رشد بچPPه ماهیPPان ازون بPPرون قPPابلیت تأثیرگPPذاری بPPاالیی

داشت نسبت به تیمار شاهد. - پربیوتیک الیگوفروکتوز در سطوح در نظرگرفته شده برفاکتورهPPای تغذیPPه ای2

بچه ماهیان نیز تأثیر بسزایی داشته. - پری بیوتیک الیگوفروکتوز در سطوح در نظر گرفته شده بر فاکتورها خونی از3

جمله گلبول ها سPPفید و نوتروفیPPل اثPPر مثبPPتی داشPPته اسPPت امPPا بPPر پارامترهPPایهماتولوژیک اثری نداشت.

- به نظر می رسد بهترین سطح بکارکیری پربیوتیک الیگوفروکتوز بPPر اسPPاس4 درصد جیره است. 1نتایج بدست آمده

74

-پیشنهادات5-5 انجام مطالعات برروی اثرات سایر پربیوتیک ها با طول زنجیره کوتاه تر و درجPPه

پلیمریزاسیون کمتر بر روی تاس ماهیان بررسی اثرات پربیوتیک الیگوفروکتوز بPPر مراحPPل الروی تPPاس ماهیPPان از طریPPق

غنی سازی غذای زنده با پربیوتیک بکارگیری توام پروبیوتیک ها و پربیوتیک ها تعیین اثPPرات آن هPPا بPPر انPPواع ماهیPPان

پرورشی کشوربررسی اقتصادی بکارگیری طوالنی مدت و در سطح تجاری پربیوتیک ها

تعPیین دوز بهینPPه و دوز مضPPر اسPPتفاده از پریوتیPPک الیگوفروکتPPوز در جPیره ازونبرون و سایر ماهیان

75

منابع و ماخذ

منابع و ماخذ

76

-اکرمی، ر.، اثرات اینولین به عنوان پربیوتیک بر رشPPد، بقPPا و میکروفلPPور روده1Husoبچه فیل ماهی ) buso،رانPPرساله دکتری دانشگاه آزاد علوم تحقیقات ته .)

صفحه.100 . تPPأثیر سPPطوح مختلPPف پربیوتیPPک1387-اکرمی ، ر.، قلیچی، ا.، ابراهیمی، ا.، 2

اینولین بررشدوزنده مPPانی مPPاهی قPPزل االی رنگین کمPPان،خالصPPه مقPPاالت اولین12-10کنفرانس لی علوم شیالت و ابزیان ابران،صفحه

.1387-اوجی فرد .،اعابدیان کنPPاری ،ع .،نفیسPPی بهابPPادی ،م.،عبPPاس زاده،ا.،3 تاثیر پربیوتیک اینولین و تاثیر اسیدهای چرب عضله میگوی پاسفید غربی. خالصPه

15-13مقاالت اولین کنفرانس لی علوم شیالت و ابزیان ابران،صفحه ، کاربرد پروبیوتیک ها و پربیوتیک در1386-پور امینی، م و حسینی فر، س.ح، 4

صفحه.120آبزی پروری ، انتشارات موج سبز تهران، .1383-پور علی فشتمی ، ح.ر، احمدی فPر، م.، محسPنی ، م. ، صPادقی، م. ، 5

Husoپرورش بچه فیل ماهیان ) busoتفادهPPا اسPPدر سواحل جنوبی دریای خزر ب ) صفحه.55از آب لب شور. طرح تحقیقاتی موسسه تحقیقات شیالت ایران،

. ، اثرات اسPPتفاده از پربیوتیPPک الیگوفروکتPPوز بPPر غPPالبیت1388-حسینی فر، ح، 6

جنس الکتوباسیلوس در فلور باکتریایی روده، بقاء فاکتور های خونی و بافت کبPPد صفحه.131بچه فیل ماهی ، پایان نامه کارشناسی ارشد،

، تأثیر سطوح متفاوت پربیوتیک اینولین بر عملکPPرد1389-90-خسروی فر، م، 7 صفحه.57رشد و ترکیب الشه در بچه ماهی کلمه، پایان نامه کارشناسی ارشد،

. تPPأثیر محPPرک رشPPد1383-سPPوداگر، م.، ایمPPانپور، م.،حسPPینی فPPر، س.ح.، 8 (Huso buso( بر شاخص های رشد و بازماندگی بچه فیل ماهی)Optimunاپتیمون)

.33. مجله علوم دریایی ایران. دوره سوم، شماره دوم و سوم، صفحه -شیخ االسPPالمی امPPیری، یوسPPفیان ، م.، یPPاوری، و.، محمPPدیان، ت.، ابهPPری، ح9

Oncorbyncbus. تحریک سیستم ایمPPنی قPPزل آالی رنگین کمPPان 1387گوران ح.، mykissهPPولین بPPو افزایش مقاومت در برابر استرپتوکوک با افزودن پربیوتیک این

68جیره غذایی . خالصه مقاالت اولین همایش ملی منابع شPPیالتی دریPPای خPPزر ، صفحه.

. خPPون شناسPPی پزشPPکی. انتشPPارات1378-شیشPPه ئیPPان، ب ، سPPعیدی، ف، 10 صفحه.210دانشجو،

، اثرات اینولین بPPه عنPPوان پربیوتیPPک بPPر1386-زارع، پ ، حسینی فر، س.ح، 11 رشPPPد، بازمانPPPدگی میکروفلPPPور روده الرو و پسPPPت الرو میگPPPوی سPPPفید هنPPPدی

Fenneropenaeus indicus ،صفحه.60 طرح تحقیقاتی دانشگاه زابل

77

. بیوتکنیPPک مراکPPز تکثPPیر1384-عبدالهی، ح، برادران طهPPوری، ه، امیPPنی، ر، 12 (،4)14. مجله علمی شPPیالت ایPPران 1381 تا 1377ماهیان خاویاری در سالهای

.97صفحه -محسنی ،م، پور کاظمی، م، بهمنی، م /ف پورعلی فشPPتمی، ح.ر، کPPاظمی ،13

. اثر تعداد دفعات تغذیه روی مPPیزان رشPPد ضPPریب تبPPدیل1383ر، صالح پور، م، HusoغPPذایی و بازمانPPدگی بچPPه فیPPل ماهیPPان ) busoه علمیPPال. مجلPPر یکسPPزی )

. 145(، صفحه 3)13شیالت ایران فارسی . بررسی آماری و بیولوژیکی ماهیPPان خاویPPاری1379، م.، و همکاران -مقیم14

صفحه.59. موسسه تحقیقات شیالت ایران. 1379در سال 15-Anderieux, C, 2001. Pribiottics and health in : Post-Antibiotics Era of animal Nutriotion, the 3rd techno word meeting, februarg 23, 2001 published by ctc-bid co, korea.

16-Askarian, F., Kousha, A., Shenavar, A., Ringe, E., Bahmani, M., Khorshidi, K., Matinfar, A., 2007.Isolation of lactic acid bacteria as probiotic from gastrointestinal tracts of Beluga (Huso huso) and Persian sturgeon (Acipenser persicus).Proceeding of International Training Course on fish Nutrition and disease, 5 September, Ghaemshahr, Iran, P. 27.

17-Abdel-Tawwab, M., Abdel-Rahman, A.M., Ismael, N., 2008. Evaluation of commercial live baker's yeast, Saccharomyces cerevisiae as a growth and immunity promoter for fry Nile tilapia, Oreochromis niloticus (L.) challenged in situ with Aeromonas hydrophila. Aquaculture, 280 (1), 185-189.

18-Anonymous., 2005. World aquaculture outlook.Aquaculture Magazine Buyer’s Guide 2005, 6-12.

19-Bekcan, S., Dogankaya, L. and Cakirogullari, G.C., 2006. Growth and body composition of European Catfish (Silurus glanis L.) fed diet containing different percentage of protein. The Israeli Journal of Aquaculture-Bamidgeh. 58(2), 137-142.

78

20-Bird, A. R., Brown, I. L. and Topping, D. L., 2000. Starches, resistant starches, the gut microflora and human health. Curr.Issues Intest.Microbiol. 1, 25–37.

21-Bongers, A., Heuvel, E., van den, H.M., 2003. Prebiotics and the bioavailability of minerals and trace elements, Food Reviews International, 19 (4), 397-422.

22-Brock, T.D., Madigan, M.T., 1991.Biology of Microorganisms.Prentice-Hall, Englewood Cliffs, NJ, 874 pp.

23-Bronzi, P., Rosenthal, H., Arlati, G.,Williot, P., 1999. A brief review on the status and prospects of sturgeon farming in Western and Central Europe. J. Appl. Ichthyol. 15, 224–227.

24-Burr, G., and Gatlin, D., 2006. Microbial Ecology of the Gastrointestinal Tract of Fish and the Potential Application of Prebiotics and Probiotics in Finfish Aquaculture.Journal of the world aquaculture society, 36(4), 425-437.

25-Burr, G., Hume, M., Ricke, S., Gatlin, D., 2006.Evaluation of Grobiotic-A, Brewer yeast and Fructo-oligosaccharide as Prebiotics for the red drum Sciaenops ocellatus.Proceeding of Aquaculture America Meeting.

26-Cahill, M., 1990. Bacterial Flora of Fishes: A Review. Microbial Ecology, 19 (1), 21-41.

27-Cerezuela, R., Cuesta, A., Meseguer, J., Esteban, M. A., 2007. Effects of inulin on gilthead seabream (Sparus aurata L.) innate immune parameters. Fish and Shellfish Immunology, 24 (5), 663-668.

79

28-Cherbut, C., 1995. Effects of short-chain fatty acids on gastrointestinal motility in: Digestive physiology and the role of microorganisms. Tellez, G., Higgins, S.E., Donoghue, A.M and Hargis, B.M., J. Appl. Poult. Res. 15, 136–144.

29-Crittenden, R.G. & Playne, M.J., 1996. Production, properties and applications of food- grade oligosaccharides. Trends in Food Science & Technology, 7, 353–361.

30-Daniels, C., Boothroyd, D., Davies, S., Pryor, R., Taylor, D., Wells, C., 2006. Bio-Mos improves growth and survival of cultured lobsters. Shellfish News, 21, 23–25.

31-Das, P.C., Ayyappan, S., and Jena, J.K., 2006. Haematological changes in the three Indian major carps, Catla catla, Labeo rohita and Cirrhinus mrigala exposed to acidic and alkaline water pH. Aquaculture, 256, 80–87.

32-David, J.A., Jenkiss, C., Kendall, W.C., Vuksan, Vladimir., 1999. Inulin, Oligofructose and Intestinal Function .J .Nutr.129, 1431S-1433S.

33-Delzenne, N.M., & Roberfroid, M.R., 1994.Physiological effects of non-digestible oligosaccharides.Lebensmittel-Wissenschaft und-echnolo-gie, 27, 1–6.

34-De silva,s.s. ,and A.nderson.t.a.1995 .In;Fish nutrition in aquaculture.chapman&Hall.london.p.319

35-Dumeizan, A., Garcia-Galleo, M., Domeizan, J., and Sanz, A., 1997.Evolution during growth of the biometry and the blood constants of the Sturgeon (Acipenser naccarii).Abstract book, 3rd Int. Symp.of Sturgeon. Italy.

80

36-FAO Fisheries Department., 2002. The state of world fisheries and aquaculture 2002.Food and Agriculture Organization of the United Nations, Rome, Italy.

37-Flickinger, E.A., Van Loo, J., Fahey, G.C., 2003. Nutritional response to the presence of Inulin and Oligofuctose in diet of domesticated animal, A Review.Journal of Critical review in Food Science and nutrition, 43(1), 19-60.

38-Fooks, L.J., and Gibson, G.R., 2002. Probiotics as modulators of the gut flora.British Journal of Nutrition 88, Suppl. 1, S39–S49.

39-Genc, M., Yilmaz, E., Genc, E., 2006.Effects of dietary Mannan-oligosaccharide on growth, intestine and liver histology of the African catfish (Clarias gariepinus). Turkish Journal of Fisheries & Aquatic Sciences, 23, (1-2), 37–41.

40-Genc, M., Yilmaz, E., Genc, E., 2007a.Effects of dietary Mannan-oligosaccharide on growth, intestine and liver histology of the Nile tilapia, Oreochromis niloticus.The Israeli journal of Aquaculture-Bamidgeh 59 (1), 12-17.

41-Genc M.A., Aktas M., Genc, E., Yilmaz, E., 2007b. Effects of dietary mannan oligosaccharide on growth, body composition and hepatopancreas histology of Penaeussemisulcatus (de Haan 1844). Aquaculture Nutrition 13, 156–161.

42-Gibson, G.R., 1998. Dietary modulation of the human gut microflora using prebiotics.British Journal of Nutrition, Suppl. 2, S209-S212.

43-Gibson, G.R., 1999. Dietary Modulation of the Human Gut Microflora Using the Prebiotics Oligofructose and Inulin.Nutritional and Health Benefits of Inulin and Oligofructose conference, May 18–19, Bethesda.

81

44-Gibson, G.R., 2004. Fiber and effects on probiotics (the prebiotic concept). J. Clinical Nutrition Supplements, 1, 25-31.

45-Gibson, G.R., and Roberfroid, M.B., 1995. Dietary modulation of the human colonic microbiota: Introducing the concept of prebiotics. Journal of Nutrition, 125, 1401–1412.

46-Gibson, G.R. and Raberfroid, M., 2008. Hand book of prebiotics. CRC press, New York, 506p.

47-Grisdale-Helland, B., Helland S.J., Gatlin, D.M., 2009.The effects of dietary supplementation with mannanoligosaccharide, fructooligosaccharide or galactooligosaccharide on the growth and feed utilization of Atlantic salmon (Salmo salar). Aquaculture, 283, 163–167.

48-Hagi, T., Tanaka, D., Iwamura, Y., Hoshino, T., 2004. Diversity and seasonal change in lactic acid bacteria in the intestinal tract of cultured freshwater fish. Aquaculture, 234, 335-346.

49-Hansen, G.H., Strøm, E., Olafsen, J.A., 1992. Effect of different holding regimes on the intestinal microflora of herring Clupea harengus larvae. Appl. Environ. Microbiol. 58, 461–470.

50-Hansen ,G.H. and Olafsen, J.A ., 1999. Bacterial interactions in early life stages of marine cold water fish.Microb. Ecol. 38, 1-26.

51-Heland,S,J.,grisdale,B. ,and nerland,S. ,1996. A simple method for the measurementof daily feed intake of groups of fish in tanks. Aquacaltur139.157-163.

52-Hevroy,E.M. ,ESPE,M. ,waagbo,R.sandness ok,rund ,M. ,and hemer,G.L. ,2005.nutrition utilization in atlantic salmon fed increased level of fish protein hydrolisate during aperiod of fast growth . aqua calture nutrition 11,301-303.

82

53-Hosseinifar, S.H., Mahious, A.S., 2007. Probiotics, prebiotics and Synbiotics in Aquaculture: A review. Proceeding of International Training Course on fish Nutrition and disease, 5 September, Ghaemshahr, Iran, P. 23.

54-Hosseinifar, S.H, Zare, P., 2008. The effects of intestinal microflora manipulation by prebiotic on survival of Indian white shrimp post larvae (Fenneropenaeus indicus).Proceeding of 15th national an 3rd International conference of biology, 19-21 August, Tehran, Iran, P. 123.

55-Irianto, A., and Austin, B., 2002. Probiotics in aquaculture. J. Fish Disease, 25, 633-642.

56-Jenkins, D., Kendall, J.A., Cyril, W.C., Vuksan, V., 1999. Inulin, Oligofructose and Intestinal Function.Presented at the conference Nutritional and Health Benefits of Inulin and Oligofructose held May 18–19, 1998 in Bethesda, MD.

57-Kasumyan, A.O., 1994. Olfactory sensitivity of the sturgeon to free amino acids. J. of Ichthyology, p. 77.

58-Kihara, M., Ohba, K. and Sakata, T., 1995. Trophic effect of dietary lactosucrose on intestinal tunica muscularis and utilization of this sugar by gut microbes in red sea bream Pagrus major a marine carnivorous teleost under artificial rearing. Comp. Biochem.Physiol. A, 112, 629–634.

59-Kihara, M., and Sakata, T., 2001a.Production of short-chain fatty acids and gas from various oligosaccharides by gut microbes of carp (Cyprinus carpio L.) in micro-scale batch culture.Journal of Comparative Biochemistry and Physiology Part A, 132, 333–34.

60-Kihara, M., and Sakata, T., 2001b. Influence of incubation temperature and various saccharides on the production of organic acids and gases by gut

83

61-microbes of Rain bow trout (Oncorhynchus mykiss) in a micro-scale batch culture. Journal of Comparative Biochemistry and Physiology, 171, 441–447.

62-Kolida, S., Tuohy, K., Gibson, G.R., 2002.Prebiotic effects of inulin and oligofructose.British Journal of Nutrition, 87, Suppl. 2, S193–S197.

63-Li, P and Galtin, D, M., 2004. Dietary brewer's yeast and the prebiotic GroBiotic TM AE influence growth performance, immune responses and resistance of hybrid striped bass(Morone chrysops × M.saxatilis) to Streptococcus iniae infection. Aquaculture 231, 445-456.

64-Li, P. and Galtin, D.M., 2005. Evaluation of the prebiotic GroBiotic TM AE and brewer's yeast as dietary supplements for Sub-adult hybrid Striped bass (Morone chrysops ×M.saxatilis) challenged in situ with Mycobacterium marinum. Aquaculture, 248, 197-205.

65-Li, Jiqiu., Tan, B., Mai, K., 2009. Dietary probiotic Bacillus OJ and isomaltooligosaccharides influence the intestine microbial populations, immune responses and resistance to white spot syndrome virus in shrimp (Litopenaeus vannamei). Aquaculture, 291, 35–40.

66-Li, Peng., Burr, G.S., Gatlin, D.M., Hume, M.E., Patnaik, S., Castille, F.L., Lawrence, A.L., 2008. Dietary Supplementation of Short-Chain Fructooligosaccharides Influences Gastrointestinal Microbiota Composition and Immunity Characteristics of Pacific White Shrimp, Litopenaeus vannamei, Cultured in a Recirculating System. J. Nutr. 137, 2763–2768.

67-Lidbeck, A., Nord, C.E., 1993. Lactobacilli and the normal human anaerobic microflora.Clin. Infect. Dis. 16, S181–S187.

68-Lopez-Molina D., Navarro-Martinez, M.D., Melagrejo, F.R., Hiner, A.N.P., Chasers, S. and Rodriguez-Lopez, J.N., 2005. Molecular properties and

84

prebiotic effect of inulin obtained from artichoke (Cynara scolymus L.). Journal of Phytochemistry, 66, 1476-1484.

69-Maczulak, A.E., Dehority, B.A., Palmquist, D.L., 1981. Effects of long-chain fatty acids on growth of rumen bacteria. Appl. Environ. Microbiol. 42, 856–862. Mahious, A.S., Gatesoupe, F.J., Hervi, M., Metailler, R. and Ollevier, F., 2005.Effect of dietary inulin and oligosaccharides as prebiotics for weaning turbot, Psetta maxima (Linnaeus, C. 1758). Aquaculture International, 14(3), 219-229.

70Mahious, A.S. and Ollevier, F., 2005. Probiotics and Prebiotics in Aquaculture: A Review. 1st Regional Workshop on Techniques for Enrichment of Live Food for Use in Larviculture, 7-11 March, Urmia, Iran, 17-26.

71-Mauguin, S., Novel, G., 1994. Characterization of lactic acid bacteria isolated from seafood. J. Appl. Bacteriol. 76, 616–625.

72-Mazurkiewicz, J., Przybył, A., Golski, Janusz., 2008. Usability of fermacto prebiotic in feeds for common carp (Cyprinus carpio L.) fry. Nauka Przyr. Technol. 2(3), 15-24.

73-Michelle, J.P, David, M.S, David, J.A., 2006. Comparison of conventional and molecular techniques to investigate the intestinal microflora of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Aquaculture, 261, 194–203.

74-Maiyar, A.C., Norman, A.W., 1992. Effects of sodium butyrate on 1, 25-dihydroxy vitamin D3 receptor activity in primary chick kidney cells. Mol. Cell. Endocrinol. 84, 99–107.

75-Mussatto, S., Mancilha, I., Ismael, M., 2007. Non-digestible oligosaccharides: A review. Carbohydrate Polymers, 68 (3), 587-597.

85

76-Olsen, R.E., Myklebust, R., Kryvi, H., Mayhew, T.M., Ringø, E., 2001. Damaging effect of dietary inulin on intestinal enterocytes in Arctic charr (Salvelinus alpinus L.).Aquac. Res. 32, 931–934.

77-Peter, H. and Sneath, A., 1986. Bergey's Manual of systematic Bacteriology. 2, 1104-1154.

78-Pollock, M.R.C., 1949. The effects of long-chain fatty acids on the growth Haemophiluspertussis and other organisms.Symp. Soc. Exp. Biol. 3, 193–216.

79-Pourkazemim, M., 2006. Caspian Sea sturgeon Conservation and Fisheries: Past present and Future. J. Appl. Ichthyol. 22 (Suppl. 1), 12-16.

80-Prins, R.A., Van Nevel, C.S., Demeyer, D.I., 1972. Pure culture studies of inhibitors for methanogenic bacteria. J. Microbiol. Serol. 38, 281–287.

81-Pryor, G.S., Royes, J.B., Chapman, F.A. and Miles, D., 2003. Mannanoligosaccharides in Fish Nutrition: Effects of Dietary Supplementation on Growth and Gastrointestinal Villi Structure in Gulf of Mexico Sturgeon. North American Journal of Aquaculture 65, 106–111.

82-Rengepipat, S., Rukpratanporn, S., Piyatiratitivorakul, S., Menasveta, P., 1998. Probiotics in aquaculture: a case study of probiotics for larvae of the black tiger shrimp (Penaeusmonodon). In: Flegel, TW., editor. Advances in shrimp biotechnology. Proceedings to the Special Session on Shrimp Biotechnology, Fifth Asian Fisheries Forum Chiengmai, Thailand 11-14 November, Thailand, 177-181.

83-Ringø, E., 1993a. Does dietary linoleic acid affect intestinal microflora in Arctic charr, (Salvelinus alpinus L.). Aquacult.Fish. Manage. 24, 133–135.

86

84-Ringø, E., 1993b. Does chromic oxide Cr2O3 affect faecal lipid and intestinal bacterial flora in Arctic charr, (Salvelinus alpinus L.).Aquacult.Fish. Manage. 24, 767–776.

85-Ringø, E., Strom, E., 1994. Microflora of Arctic charr (Salvelinus alpinus L.) gastrointestinal microflora of free-living fish, and effect of diet and salinity on the intestinal microflora. Aquacult.Fish. Manage. 25, 623–629.

86-Ringø, E., Strøm, E., Tabachek, J.A., 1995. Intestinal microflora of salmonids: a review. Aquacult. Res. 26, 773–789.

87-Ringø, E., Olsen, R.E., Overli, O., Lovik, F., 1997. Effect of dominance hierarchy formation on aerobic microbiota associated with the epithelial mucosa of subordinate and dominant individuals of Arctic charr (Salvelinus alpinus L.). Aquacult.Res. 28, 901– 904.

88-Ringø, E., and Gatesoupe, F.J., 1998. Lactic acid bacteria in fish: a review. Aquaculture 160, 177– 203.

89-Ringø, E., Sperstad, S., Myklebust, R., Myhew, T.M., Olsen, R.E., 1997. The Effect of dietary inulin on aerobic bacteria associated with hindgut of Arctic char (Salvelinusalpinus). Aquacult. Res. 37, 177–203.

90-Rivero-Urgell, M. , and santamrio-orleans, A. ,2001, oligosaccharides : Application in infant food. Early human development, 65.S43-S 52.

91-Roberfroid, M., Van Loo, J.A., Gibson., E.R., 1998. The bifidogenic nature of chicory inulin and its hydrolysis products. Journal of Nutrition, 128, 11-19.

92-Roberfroid, M., 2007. Prebiotics: The concept revisited. The journal of Nutrition, 137, 830S-837.

87

93-Ross, L.G., and Ross, B., 1999. Anasthetic and sedative techniques for aquatic animals.Blackwell Science, Oxford, UK.22, 57.

94-Sakata, T., Nakaji, M., Kakimoto, D., 1978.Microflora in the digestive tract of marine fish.General characterization of the isolates from yellowtail.Mem. Fac. Fish. Kagoshima Univ. 27, 65–71.

95-Sakata, T., Okabayashi, J., Kakimoto, D., 1980. Variation in the intestinal flora of tilapia reared in fresh and seawater. Bull. Sco. Sci. Fish, 46, 967-975.

96-Sahoo, P.K., Kumari, J., Mishra, B.K., 2005. Non-specific immune responses in juveniles of Indian major carps. J. Appl. Ichthyol. 21, 151–155.

97-Salze, G., McLean, E., Schwarz, M.H., Craig, S.R., 2008. Dietary mannan oligosaccharide enhances salinity tolerance and gut development of larval cobia. Aquaculture, 274, 148– 152.

98-Sangeetha, P.T, Ramesh, M.N, and perapulla, s. G. , 2005. Recent trends in the microbial prodaction of fractoolito oligosaccharides. Trend in food Science & technology, 16, 442-457.

99-Sharp, M.E., 1981.The genus Lactobacillus. In: Starr, M.P., Stolp, H., Truper, H.G., Balows, A., Schlegel, H.G. (Eds.), The Prokaryotes. A Handbook on Habitat, Isolation and Identification of Bacteria, Vol. I. Springer, Berlin, pp. 1653–1679.

100-Shotts, E.B, Teska, J.H., 1989.Bacterial pathogens of aquatic vertebrates. In: Austin, B., Austin, D.A. (Eds.)., Methods for the microbiological Examination of Fish and Shellfish. Wiley, New York, pp. 164–186.

88

101-Spanggaard, B., Huber, I., Neilsen, J., Neilsen, T., Appel, K., Gram, L., 2000. The microflora of rainbow trout intestine: a comparison of traditional and molecular identification. Aquaculture, 182, l-15.

102-Staykov, Y., Spring, P., Denev, S., Sweetman, J., 2007. Effect of a mannan oligosaccharide on the growth performance and immune status of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Aquacult Int. 15, 153–161.

103-Strøm, E., Olafsen, J.A., 1990. The indigenous microflora of wild-captured juvenile cod in net–pen rearing. In: Lesel, R. (Ed.), Microbiology in Poecilotherms. Elsevier, Amsterdam, pp. 181–185.

104-Sudagar, M., and Hosseinifar, S.H., 2005.The use of Optimun in diet of grand sturgeon Huso huso fry and its effects on growing factors and survival rate.Proceedings of the 5th international symposium on sturgeons. Ramsar, Iran, 9-13 may, P. 93.

105-Sugita, H., Hirose, Y., Matsuo, N., Deguchi, Y., 1998. Production of the antibacterial substance by Bacillus sp. strain NM12, an intestinal bacterium of Japanese coastal fish. Aquaculture, 165, 269–280.

106-Tannock, G.W., 1988. The normal microflora: new concepts in health promotion. Microbiol. Sci. 5, 4–8.

107-Tellez, G., Higgins, S.E., Donoghue, A.M., Hargis, B.M., 2006.Digestive physiology and the role of microorganisms. J. Appl. Poult. Res. 15, 136–144.

108-Trinidad, T.P., Wolever, T.M.S., Thompson, L.U., 1993. Interactive effects of calcium and short chain fatty acids on absorption in the distal colon of man. Nutr. Res. 13, 417–425.

89

109-Topping, D.L., and Clifton, P.M., 2001. Short-chain fatty acids and human colonic function: Roles of resistant starch and non starch polysaccharides. Physiol. Rev. 81, 1031–1064.

110-Torrecillas, S., Makol, A., Caballero, M.J., Montero, D., Robaina, L., Real, F., Sweetman, J., Tort, L. and Izquierdo, M.S., 2007. Immune stimulation and improved infection resistance in European sea bass (Dicentrarchus labrax) fed mannan oligosaccharides. Journal of Fish & Shellfish Immunology 23, 969-981.

111-Vendemiatti, J.A., Costa, A.B., and Cyrino, J.E.P., 2003. Mananoligossacarıide os alimentares (MOS) comoagentes profila´ticos das infeccxo˜es por Edwardsiellatarda em Tila´pia do Nilo (Oreochromis niloticus).Pages 132–140, In : Yuji sado, R. and De Almeida, A.J., 2008. Feeding dietary mannan oligosaccharides to juvenile Nile tilapia, Oreochromis niloticus, has no effect on hematological parameters and showed decreased feed consumption. Journal of the world aquaculture society, 39 (6), 821-827.

112-Van der wielen, P.W., Biesterveld, S., Notermans, S., Hofstra, H., Urlings, B.A.P., van Knapen, F., 2000. Role of volatile fatty acids in development of the cecal microflora in broiler chickens during growth. Appl. Environ. Microbiol. 66, 2536–2540.

113-Van Hai, Ngo., and Fotedar, Ravi., 2009. Comparison of the effects of the prebiotics (BioMos® and β-1,3-D-glucan) and the customised probiotics (Pseudomonas synxantha and P. aeruginosa) on the culture of juvenile western king prawns (Penaeus latisulcatus Kishinouye, 1896). Aquaculture 289, 310–316.

114-Van Loo, J., Cummings, J., Delzenne, N., Franck, A., Hopkins, M., MacFarlane, G., Newton, D., Quigely, M., Roberfroid, M., Van Vliet, T., Van den Heuvel, E., 1999.

90

115-Functional food properties of non-digestible oligosaccharide: a consensus report from the ENDO project (DGXII AIRII-CT94–1095). Br. J. Nutr. 81, 121– 132.

116-Vazquez, M. J. , Alonso, J, L., Dominguez, H. and parajo, J.C., 2000. Oxylo oligosaccharides: Manufacture and applications. Trends in food science & technology, 11, 387-393.

117-Voragen, A.G.J., 1998. Technological aspects of functional food-related carbohydrates. Trends in Food Science & Technology, 9, 328–335.

118-Younes, H., Coudray, C., Bellanger, J., Demigne, C., Rayssiguier, Y., Remesy, C., 2001. Effects of two fermentable carbohydrates (inulin and resistant starch) and their combination on calcium and magnesium balance in rats. Br. J. Nutr. 86, 479–485.

119-Yuji sado, R., and De Almeida, A.J., 2008. Feeding dietary mannan oligosaccharides to juvenile Nile tilapia, Oreochromis niloticus, has no effect on hematological parameters and showed decreased feed consumption. Journal of the world aquaculture society, 39 (6), 821-827.

120-Welker, T.L., Lim, C., Yildirim-Aksoy, M., Shelby, R., Klesius, P.H., 2007.Immune response and resistance to stress and Edwardsiella ictaluri, fed diets containing commercial whole cell yeast or yeast subcomponents. Journal of World Aquaculture Society, 38 (1), 24–35.

-121Yilmaz, E., Genc, M., Genc, E., 2007. Effects of dietary Mannan-oligosaccharide on growth, intestine and liver histology of the Rain bow trout, Oncorhynchus mykiss. The Israeli journal of Aquaculture-Bamidgeh, 59(3), 182-188.

91

122-Yoshida, T., Kruger, R., Inglis, V., 1995.Augmentation of non-specific protection in African catfish, Clarias gariepinus (Burchell), by the long-term oral administration of immunostimulants. Journal of Fish Diseases, 18, 195-198.

123-Yoshimizi, M., Kimura, T., Sakai, M., 1980.Microflora of the embryo and fry of salmonids. Bull. Sco. Sci. Fish, 46, 967-975.

92

Azad University Of Qaemshahr

A Thesis

Presented For The Degree Of MA In Aquacultur

Effect Of Oligofructose On Some Growth And Nutrition Factors ، Survival Rate And Haematological Of Acipenser stellatus

Mahsa Khoshbavar Rostami

Supervisor:Dr. Hosain Ali Khoshbavar Rostami

Advisor: Dr. Mohamad Ahmadi

Winter 2012

93