«Внедрение инновационных технологий в Центре лабораторной медицины АО «Республиканский диагностический центр»

Масс-спектрометрия - высокая точность и качество исследований в микробиологической практике»

Л. Евстафьева

Эффективноелечение

Правильнаяидентификация возбудителя

Определение чувствительности к антимикробнымпрепаратам

Микробиологическая служба оказывает существенную помощь лечащему врачу в выборе наилучшей схемы лечения инфекционной патологии

Время от первичного посева до получения результата идентификации на автоматических иполуавтоматическиханализаторах Время от первичного посева до получения результата идентификации -на масс спектрометре

48-72 часа

24 часа

-Масс спектрометрия метод идентификации молекул путем измерения отношения их массы к заряду в ионизированном состоянии

MALDI (Matrix Assisted Laser Desorption 'lonization) ионизация вещества с помощью матрицы и .лазерного излучения

TOF MS (Time of Flight Mass-Spectrometry) - - . время пролетная масс спектрометрия Масса молекулы оценивается по времени пролета от .источника ионизации до детектора

MALDI-TOF -масс спектрометрия

Анализатор VITEK MS приобретен в2014 . г ,В настоящее время это единственный в Казахстане прибор для идентификации микроорганизмов на внутривидовом уровне методом , спектрального анализа используемый в клинической. практике

Высокая производительность

100% специфичность ичувствительность Высокая скорость анализа

-Преимущества метода масс спектрометрии

Определение спектра белков напрямую из , бактериальной колонии взятой с чашки первичного посева материала (755 Увеличение базы данных клинически значимых видов)микроорганизмов

2

3 4

Смешивание колонии бактерий со специальнойматрицей

1: Этап подготовка образца

1

Кристаллизация лизированного материала - , с веществом матрицей переход молекул лизата в газовую фазу и их. ионизации

Белки Бактериальная

клетка

Протеом

3000 5000

Mass ( m/ z)

7000 9000 1100013000

Масса молекулы

2117. 3

0

90

80

70

60

50

40

30

20

10

100

%

I nt

ensi

t y

V o y a g e r S p e c # 1 = > A d v B C ( 3 2 , 0 . 5 , 1 . 0 ) = > N F 0 . 7 [ B P = 4 4 2 3 . 9 , 2 1 1 7 ]

44

24

.2

94

76

.2

48

61

.0

88

23

.5

58

97

.8

62

71

.2

80

54

.3

66

29

.0

74

24

.9

12

27

1.4

45

35

.6

47

65

.4

47

38

.6

67

86

.7

69

84

.6

72

09

.8

83

83

.8

65

33

.3

89

03

.3

90

75

.2

31

32

.3

33

11

.8

34

91

.4

61

37

.3

86

10

.6

10

11

0.8

10

97

5.2

40

26

.9

10

49

3.9

96

11

.5

Видовое определение

2: Этап ИдентификацияСлайд помещают в анализатор, в котором молекулы матрицы и анализа (белков) переходят в газовую фазу, а протонированные молекулы матрицы взаимодействуют с белками, перенося на них положительный заряд. Под действием электрического поля ионизированные белки движутся от источника ионизации к детектору с ускорениями обратно пропорциональными их атомным массам.Программное обеспечение прибора оценивает время пролета частиц и преобразует эту информацию в спектр молекулярных масс (масс-спектр). Масс-спектр сравнивается со спектрами из базы данных и на основании сведений о массах белков происходит идентификация микроорганизмов.

Добавление 1.0 мкл матричного раствора

- Масс спектрометр Автоматизированная система идентификации

Шаг 1

Шаг 2

Шаг 3 : Просушивание 1-2 мин.

Шаг 4 Загрузка

Шаг 5 Создание спектра( 2 1 )мин на образец

Целевой слайд, , , Бактерии плесень дрожжи

3000 5000 7000 9000 11000 13000

Mass (m/z)

1648.1

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

% Inte

nsity

< < C :\D o k u m e n te u n d E in s te llu n g e n \m .e rh a rd \E ig e n e D a te ie n \A n a g n o s T e c -d c \Z w is c h e n a b la g e \D o k u m e n t B a n n e r.tx t> > S p e c [B P = 3

3775

7075

8074

8744

1093

9

9453

9994

7980

1034

7

5015

7863

1157

2

7092

5931

9654

3581

6837

9330

7367

1022

6

8450

1060

8

1190

6

99,9% достовернос тирезультатов

Результаты исследований 2 - На идентификацию одного микроорганизма требуется около х минут времени

Что дало нам приобретение автоматического анализатора VITEK MS:

эффективное лечение пациента снижение смертности существенное сокращение сроков госпитализации .экономия бюджетных средств

Полная автоматизация стандартных биохимических методов идентификации микроорганизмов

Увеличение скорости исследования

Стандартизация микробиологических исследований

Повышение качества проводимых исследований

Расширение спектра выделяемых патогенов

Сокращение времени на проведение идентификации и сокращение срока выдачи результата

!Спасибо за внимание