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实验九 免疫学检测技术临床应用综合训练 ---- 自身免疫性疾病的检测. 一、实验目的要求. 1. 掌握自身免疫性疾病免疫检测的应用原则。 2. 了解 SLE 疾病特点,掌握 SLE 免疫学特征及常用检测项目。 3. 掌握 ANA 荧光抗体技术原理、方法和检测意义。 4. 掌握 ENA 多肽抗体谱检测技术原理、方法和检测意义。 5. 掌握抗 dsDNA 抗体免疫渗滤试验原理、方法和检测意义。 6. 掌握 RF 胶乳凝集试验的原理、方法和检测意义。 7. 掌握免疫标记技术试验原理、实验方法及结果判断。 - PowerPoint PPT Presentation
----
1.2.SLESLE3.ANA4.ENA5.dsDNA6.RF7.8.9.
1.Ag
Ag
2.T 70
3.
26-1
(Graves)
TSH
(Addison)
IgG
26-1
(Graves)
TSH
(Addison)
IgG
4.AID AID
5. AID
IIIIIT
6. AIDIIAID
1autoimmune hemolytic anemia, AIHA + + Coombs test
2immunologic thrombocytopenic purpura, ITPplt,1/10000plt
()SLERA T IDM1 MS
1SLE,Ig-
Sm dsDNA DNA ssDNA 10%15%SLE
75%80% 10%60% Coombs RF30%
2RA RFTNF1RF23
ANAIgGIgAIgMCH50C3RFENAdsDNA7. AID
95%99%SLE SLE IC RASLE
ENA dsDNASmrib ANA
1IgIgGIgMIgAIg2 AIDTAID
8.HEp-2
indirect immunofluorescence, IIF
ELISA Western-blot 9.
FPIA TR-FIA10.
11.
1 ------ ------
2
11.
1
2
3
4
Ag cell 1 2 3TB
DNA dsDNADNA dsDNASLE
12. DNA
5
1~21~22~3
ENA: ENA Sm U1-RNP SSA SSB Jo-1 Scl-70 rib-P13. ENA
SDS-PAGE
1SmSLE SmUUsnRNP29KD28KD13.5KDSLESmSnRNPSmU1RNPU1RNP
2SSARoSSARoscRNPsYYRNA52KD60KD52KDSS60KDSLESSA6075SSA
3SSB/La/HasnRNPRNARNA 48KD47KD45KD48KDSSBSSASSBSSA40SSB
4Scl-70100KDDNAIPSSScl-7070KDScl-70PSS30%40%PSSSSC100%Scl-70
5JO-1 Jo-1tRNAscRNPs50KDtRNAJo-1PMPM25DM7.1%PMDM6067Jo-1HLADR3
6rRNPribosomerRNPrRNP38KD 16KD15KDrRNPSLESLE10%20%SLErRNPSLEANArRNPrRNPdsDNAdsDNA12
7RNPnRNPnuclear RNPU1RNPU1snRNPU1RNP970KD32KD22KD U1U1snRNPU1RNP
1(MCTD)MCTDRNPMCTD2SLERNPSLE40%RNPSLEDNARNPRNPds-DNASm3RNP
rheumatoid factor, RFIgG FcIgM RFIgG 14. RF
1 IgM-RF 2ARRAYIMAGE IgM-RF 3ELISA RF
1RFRASLEPSS
%
RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25
2 RFRA IgM-RF>80IU/ml 3IgG-RFRA IgM-RF RA 4IgA-RFRA
16313373815kgT:37.8P100/R20/BP120/90mmHg IgG28.3g/lIgA3.40g/lIgM3.02g/lC30.43g/lC40.06g/l MA:14mg/LTRF:1.5mg/LIgG:9.5mg/L1M:10mg/L
SLESLESLE
SLEdsDNASmSLE RFANAdsDNAENACRPCICSLE ANARFIgGMAdsDNAENA
ANARFENAdsDNA
1.2.
ANA
ANA1. 4~8NS20min2. 1cm3. PBS1:1050ul3730min4. ddH2OPBS1235min5. FITC-IgG10ul3730min6. 47.
1.2.3. 1. 2. 3.MLR 4.HLA 5.FCS
HLACDCFSSS
*Complement mediated lysis