Ф Е Р М Е Н Т Ы

Ф Е Р М Е Н Т Ы

ФЕРМЕНТЫ –– высокоэффективные высокоэффективные биологические катализаторы, биологические катализаторы, синтезируемые живыми синтезируемые живыми клеткамиклетками

Впервые обнаружены в дрожжахВпервые обнаружены в дрожжах

От греческого «en zyme» - «в дрожжах»

ЧРЕЗВЫЧАЙНО ВАЖНАЯ РОЛЬ

Участвуют во всех химических процессах

Клетка Организм

Проявляют свою каталитическую активность в водной среде

ФЕРМЕНТЫФЕРМЕНТЫ – – ПРОСТЫЕ БЕЛКИПРОСТЫЕ БЕЛКИ

СОСТОЯТ ТОЛЬКО ИЗПОЛИПЕПТИДНЫХ ЦЕПЕЙ

ГИДРОЛИЗУЮТСЯ ДО АМИНОКИСЛОТ

ПЕПСИН, ТРИПСИН, УРЕАЗА

ФЕРМЕНТЫ – СЛОЖНЫЕ Б Е Л К И

Ионы металлов -Ca2+, Zn2+, Fe2+, Mg2+,Mn2+, Cu2+, Cl-

Коферменты –органические молекулы, производныевитаминовНАД, НАДН, ФАД, ФМН,перидоксальфосфат и др.

Стабилизация третичной/четвертичной структуры ферментовСвязывание ферментов с субстратом Ферментативный катализ

Ферментативный катализ (переносэлектронов, ионов водорода, СО2,Химических групп: амино, ацильныхи др.)

БЕЛОК + КОФАКТОР (ПРОСТЕТИЧЕСКАЯ ГРУППА)

Ф Е Р М Е Н Т Ы –ВЫСОКОЭФФЕКТИВНЫЕ КАТАЛИЗАТОРЫ

Увеличивают скорость химической реакциив миллионы/миллиарды раз

БЕЗ УЧАСТИЯ ФЕРМЕНТОВ ХИМИЧЕСКИЕРЕАКЦИИ ПРОТЕКАЮТ ТАК МЕДЛЕННО, ЧТО

ПОЧТИ НЕ ОКАЗЫВАЮТ ВЛИЯНИЯ НА МЕТАБОЛИЗМ

! ! !

Изоферментыфермент, существующий в виде нескольких изоформ

• ферменты из одного источникаферменты из одного источника• катализируют одну и ту же реакциюкатализируют одну и ту же реакцию• отличаются по а/к составуотличаются по а/к составу• могут иметь различный молекуллярный весмогут иметь различный молекуллярный вес• разную электрофоретическую подвижностьразную электрофоретическую подвижность• разные иммунологические/биохимические характеристикиразные иммунологические/биохимические характеристики• различный рН-оптимумразличный рН-оптимум• разная стабильностьразная стабильность• разные способы регуляцииразные способы регуляции

ЛДГ – 5 изоформ – тетрамеры – комбинация 2 типов субъединицКК – 2 субъединицы – 3 изоформы

ОРГАНЫ И ТКАНИ ИМЕЮТ ХАРАКТЕРНЫЙДЛЯ НИХ НАБОР ИЗОФЕРМЕНТОВ

ОКОЛО 100 ФЕРМЕНТОВ ИМЕЮТ ИЗОФОРМЫ

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗОФЕРМЕНТОВ ЛДГ, КК, α-АМИЛАЗЫ В СЫВОРОТКЕ ВАЖНО ДЛЯ

ДИАГНОСТИКИ РЯДА ЗАБОЛЕВАНИЙ

С У Б С Т Р А Т Ы –вещества, с которыми происходит химическое превращение под действием ферментов

СУБСТРАТЫ –• ПРИРОДНЫЕ ВЕЩЕСТВА• ХИМИЧЕСКИ СИНТЕЗИРОВАННЫЕ

Фермент может иметь один или несколько субстратов

Каталитическая активностьКаталитическая активность

Способность фермента превращать в продуктопределенное количество молекул субстратав единицу времени, оставаясь неизменным

Ферменты могут осуществлятьот 1 до 106 циклов превращений

субстрата в секунду

1 моль трипсина 100 цикл/сек, глюкозоксидаза – 17 000 цикл/сек, карбоангидраза – 600 000 цикл/сек

АКТИВАТОРЫ ФЕРМЕНТОВ

Соединения, которые приводятфермент в каталитическиактивное состояние

Ионы двухвалентных металлов:Zn2+, Cа2+, Mg2+, Cu2+

ИНГИБИТОРЫ ФЕРМЕНТОВСоединения, которые снижают каталитическую

активность ферментов

И н г и б и р о в а н и е

обратимое необратимое

активность ферментавосстанавливается

активность ферментане восстанавливается

ИНГИБИТОРЫ ФЕРМЕНТОВ

КОНКУРЕНТНЫЕ НЕКОНКУРЕНТНЫЕ

СВЯЗЫВАЕТСЯ С АКТИВНЫМЦЕНТРОМ ФЕРМЕНТА

↓ СКОРОСТЬ КАТАЛИЗА, СНИЖАЯДОЛЮ МОЛЕКУЛ ФЕРМЕНТА,СВЯЗЫВАЮЩИХ СУБСТРАТ

СВОЙ УЧАСТОК СВЯЗЫВАНИЯНА МОЛЕКУЛЕ ФЕРМЕНТА

↓ СКОРОСТЬ КАТАЛИЗА, ИЗМЕНЯЯСТРУКТУРУ АКТИВНОГО

ЦЕНТРА ФЕРМЕНТА

СПЕЦИФИЧНОСТЬ ФЕРМЕНТА

ДЕЙСТВИЕ КАЖДОГО ФЕРМЕНТА

СТРОГО ОГРАНИЧЕНО ОДНИМ ТИПОМ

РЕАКЦИИ И ОДНИМ СУБСТРАТОМ

(НЕБОЛЬШИМ ЧИСЛОМ СХОДНЫХ

ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ)

Международная единица активности

МЕ - КОЛИЧЕСТВО ФЕРМЕНТА, КОТОРОЕ КАТАЛИЗИРУЕТПРЕВРАЩЕНИЕ 1 МКМОЛЯ СУБСТРАТА ИЛИ ПОЛУЧЕНИЕ 1 МКМОЛЯПРОДУКТА В МИНУТУ В СТАНДАРТНЫХ ОПТИМАЛЬНЫХ УСОВИЯХ

Единица активности в системе СИ – катал (кат.) –количество фермента, которое катализирует

превращение 1 моля субстрата или получение1 моля продукта в секунду

1 кат. = 6 · 107 МЕ 1 МЕ = 16.67 · 10-9 кат.

Классы ферментовНомер класса

Название класса Катлизируемые реакцииКатлизируемые реакции

1 Оксидоредуктазы Окислительно-восстановительныеОкислительно-восстановительные

2 Трансферазы Перенос группПеренос групп

3 Гидролазы ГидролизГидролиз

4 Лиазы Расщепление негидролитическим путем связей С-С,Расщепление негидролитическим путем связей С-С,отщепление групп с образованием двойной связи,отщепление групп с образованием двойной связи,присоединение по двойной связиприсоединение по двойной связи

5 Изомеразы Изомерные превращенияИзомерные превращения

6 Лигазы Присоединение друг к другу двух молекул сПрисоединение друг к другу двух молекул сиспользованием энергии АТФ (или других использованием энергии АТФ (или других высоко-энергетических соединенийвысоко-энергетических соединений

Ферменты участвуют во всех Ферменты участвуют во всех биологических процессахбиологических процессах

Нарушение метаболизма, вызванное Нарушение метаболизма, вызванное заболеванием, приводит к изменению заболеванием, приводит к изменению концентрации соответствующих ферментов в концентрации соответствующих ферментов в биологических жидкостяхбиологических жидкостях

Определение активности ферментов в сывороткекрови и моче является незаменимым орудием

в диагностике и мониторинге целогоряда заболеваний

Применение ферментов в Применение ферментов в медицинемедицине

• диагностическое диагностическое (энзимодиагностика) (энзимодиагностика)

• терапевтическое (энзимотерапия) терапевтическое (энзимотерапия) • в качестве специфических реактивов в качестве специфических реактивов

для определения ряда веществ для определения ряда веществ (ферментативные методы (ферментативные методы определения субстратов)определения субстратов)

ЭнзимотерапияЭнзимотерапия

Заместительная терапияЗаместительная терапия - - использование ферментов в использование ферментов в случае их недостаточности:случае их недостаточности:

Заместительная энзимотерапия эффективна при Заместительная энзимотерапия эффективна при желудочно-кишечных заболеваниях, связанных с желудочно-кишечных заболеваниях, связанных с недостаточностью секреции пищеварительных соков. недостаточностью секреции пищеварительных соков. Например, пепсин используют при ахилии, гипо- и Например, пепсин используют при ахилии, гипо- и анацидных гастритах. Дефицит панкреатических ферментов анацидных гастритах. Дефицит панкреатических ферментов также в значительной степени может быть компенсирован также в значительной степени может быть компенсирован приёмом внутрь препаратов, содержащих основные приёмом внутрь препаратов, содержащих основные ферменты поджелудочной железы (фестал, энзистал, мезим-ферменты поджелудочной железы (фестал, энзистал, мезим-форте и др.))форте и др.))

ЭнзимотерапияЭнзимотерапияКак элемент комплексной терапииКак элемент комплексной терапии - -

применение ферментов в сочетании с применение ферментов в сочетании с другой терапией.другой терапией.

В качестве дополнительных терапевтических средств ферменты используют при В качестве дополнительных терапевтических средств ферменты используют при ряде заболеваний. ряде заболеваний.

– Протеолитические ферменты (трипсин, химотрипсин) применяют при местном Протеолитические ферменты (трипсин, химотрипсин) применяют при местном воздействии для обработки гнойных ран с целью расщепления белков воздействии для обработки гнойных ран с целью расщепления белков погибших клеток, для удаления сгустков крови или вязких секретов при погибших клеток, для удаления сгустков крови или вязких секретов при воспалительных заболеваниях дыхательных путей. воспалительных заболеваниях дыхательных путей.

– Ферментные препараты рибонуклеазу и дезоксирибонуклеазу используют в Ферментные препараты рибонуклеазу и дезоксирибонуклеазу используют в качестве противовирусных препаратов при лечении аденовирусных качестве противовирусных препаратов при лечении аденовирусных конъюнктивитов, герпетических кератитов. конъюнктивитов, герпетических кератитов.

– Ферментные препараты стали широко применять при тромбозах и Ферментные препараты стали широко применять при тромбозах и тромбоэмболиях. С этой целью используют препараты фибринолизина, тромбоэмболиях. С этой целью используют препараты фибринолизина, стрептолиазы, стрептодеказы, урокиназы. стрептолиазы, стрептодеказы, урокиназы.

– Фермент гиалуронидазу (лидазу), катализирующий расщепление гиалуроновой Фермент гиалуронидазу (лидазу), катализирующий расщепление гиалуроновой кислоты, используют подкожно и внутримышечно для рассасывания контрактур кислоты, используют подкожно и внутримышечно для рассасывания контрактур рубцов после ожогов и операций (гиалуроновая кислота образует сшивки в рубцов после ожогов и операций (гиалуроновая кислота образует сшивки в соединительной ткани)соединительной ткани)

Применение ферментов в качестве Применение ферментов в качестве специфических реактивовспецифических реактивов

• специфические эндонуклеазы, катализирующие разрывы специфические эндонуклеазы, катализирующие разрывы межнуклеотидных связей ДНК, для диагностики межнуклеотидных связей ДНК, для диагностики фенилкетонурии, α- и β-талассемии и других наследственных фенилкетонурии, α- и β-талассемии и других наследственных болезней)болезней)

• глюкозооксидазу применяют для количественного глюкозооксидазу применяют для количественного определения глюкозы в моче и крови. определения глюкозы в моче и крови.

• Фермент уреазу используют для определения содержания Фермент уреазу используют для определения содержания количества мочевины в крови и моче. количества мочевины в крови и моче.

• С помощью различных дегидрогеназ обнаруживают С помощью различных дегидрогеназ обнаруживают соответствующие субстраты, например пируват, лактат, соответствующие субстраты, например пируват, лактат, этиловый спирт и др. этиловый спирт и др.

Значение энзимодиагностикиЗначение энзимодиагностики

Известно около 20 тестов, основанных на количественном определении активности ферментов (и изоферментов), главным образом в крови (реже в моче), а также в биоптатах. В практическом плане энзимологические тесты должны помогать в ранней постановке и дифференциации диагноза, информировать о возможном исходе болезни.

ЭнзимодиагностикаЭнзимодиагностика- постановка диагноза заболевания (или синдрома) постановка диагноза заболевания (или синдрома)

на основе определения активности ферментов в на основе определения активности ферментов в биологических жидкостях человека биологических жидкостях человека

- В особую группу выделяются иммуноферментные В особую группу выделяются иммуноферментные диагностические методы, состоящие в применении диагностические методы, состоящие в применении антител, химически связанных с каким-либо антител, химически связанных с каким-либо ферментом, для определения в жидкостях веществ, ферментом, для определения в жидкостях веществ, образующих с данными антителами комплексы образующих с данными антителами комплексы антиген — антитело. антиген — антитело.

Ферменты сывороткиФерменты сыворотки

Клеточныепоступают в кровь из органов и тканей. Уровень их сывороточной активности зависит от содержания энзимов в тканях, молекулярной массы, внутриклеточной локализации, прочности связи фермента со своей органеллой, а также от скорости гидролитического расщепления и элиминации

СекреторныеСекреторныесинтезируются клетками, синтезируются клетками, поступают в кровь и поступают в кровь и выполняют специфические выполняют специфические функции в кровяном русле, функции в кровяном русле, поэтому их называют поэтому их называют собственно ферментами собственно ферментами крови. Это ферменты крови. Это ферменты свертывающей системы и свертывающей системы и фибринолиза, каллекриин-фибринолиза, каллекриин-кининовой системы, кининовой системы, холинэстераза и др.холинэстераза и др.

ЭкскреторныеЭкскреторныеобразуются образуются пищеварительными пищеварительными железами и из их секретов железами и из их секретов поступают в кровь поступают в кровь (амилаза, липаза и др.).(амилаза, липаза и др.).

ОрганоспецифическиеОрганоспецифическиекоторые находятся в одном-двух которые находятся в одном-двух органах – это наиболее информативные органах – это наиболее информативные энзимы, т.к. увеличение их активности энзимы, т.к. увеличение их активности свидетельствует о поражении этих свидетельствует о поражении этих органов.органов.

НеспецифическиеНеспецифическиеАктивность обнаруживается во всех Активность обнаруживается во всех органах и тканях, поэтому по увеличению органах и тканях, поэтому по увеличению их сывороточной активности трудно их сывороточной активности трудно судить о локализации первичных судить о локализации первичных патологических измененийпатологических изменений

Причины повышения активности Причины повышения активности клеточных ферментов в кровиклеточных ферментов в крови

• нарушение проницаемости мембраны клеток (при воспалительных процессах)

• нарушение целостности клеток (при некрозе)• повышенная пролиферация клеток с ускорением

клеточного цикла (например, при онкопролиферативных процессах)

• повышенный синтез ферментов• обструкция путей секреции ферментов в полости• снижение клиренса (например, активность амилазы в

сыворотке повышается при острой почечной недостаточности)

Факторы, определяющие концентрацию фермента в Факторы, определяющие концентрацию фермента в крови при повреждении клетоккрови при повреждении клеток

• природа повреждающего воздействия, природа повреждающего воздействия, • время действия и степень повреждения время действия и степень повреждения

биомембран клеток и субклеточных структур биомембран клеток и субклеточных структур органов,органов,

• период полужизни (полураспада) в плазме период полужизни (полураспада) в плазме крови каждого из диагностических ферментов, крови каждого из диагностических ферментов,

• особенности распределения (топографии) особенности распределения (топографии) ферментов в индивидуальных органах и ферментов в индивидуальных органах и тканях, а также их внутриклеточная тканях, а также их внутриклеточная локализация.локализация.

Примеры различной локализация Примеры различной локализация ферментов в клеткеферментов в клетке

Клеточная мембранаКлеточная мембрана•кислая фосфатаза, кислая фосфатаза, •5’-нуклеотидаза, 5’-нуклеотидаза, •гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ)гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ)

ЦитоплазмаЦитоплазма• аланинаминотрансфераза (АлАТ),аланинаминотрансфераза (АлАТ),• аспартатаминотрансфераза (АсАТ), аспартатаминотрансфераза (АсАТ), • лактатдегидрогеназа (ЛДГ), лактатдегидрогеназа (ЛДГ), • креатинкиназа (КК)креатинкиназа (КК)

МитохондрииМитохондрии•АсАТ АсАТ •КФК КФК •глутаматдегидрогеназа (ГДГ)глутаматдегидрогеназа (ГДГ)

ЛизосомыЛизосомы•Щелочная Щелочная фосфатаза (ЩФ)фосфатаза (ЩФ)

Причины понижения активности Причины понижения активности клеточных ферментов в крови клеточных ферментов в крови

(гипоферментемия)(гипоферментемия)

• Гипоферментемия Гипоферментемия встречается относительно встречается относительно редко и касается в основном секреторных редко и касается в основном секреторных ферментов. ферментов.

• В подавляющем большинстве случаев она связана В подавляющем большинстве случаев она связана с генетически детерминированными с генетически детерминированными нарушениями синтеза определенных энзимов, нарушениями синтеза определенных энзимов,

• реже – с ингибированием, усиленной деградацией реже – с ингибированием, усиленной деградацией или экскрециейили экскрецией

Механизмы удаления ферментов из Механизмы удаления ферментов из кровикрови

• Большинство ферментов катаболизируется плазменными Большинство ферментов катаболизируется плазменными протеазами и удаляется ретикулоэндотелиальной протеазами и удаляется ретикулоэндотелиальной системой. системой.

• Часть ферментов выделяется со слюной, желчью и Часть ферментов выделяется со слюной, желчью и другими секреторными жидкостями. другими секреторными жидкостями.

• Через почечный фильтр небольшие молекулы с Через почечный фильтр небольшие молекулы с молекулярной массой не более 60–70 кДа, (поэтому в норме молекулярной массой не более 60–70 кДа, (поэтому в норме количество экскретируемых ферментов невелико)количество экскретируемых ферментов невелико)

Основные правила Основные правила дифференциальной диагностикидифференциальной диагностики

• – Определение более чем одного фермента. Разные ткани содержат ферменты в разных количествах. Так, АлАТ и АсАТ содержатся в гепатоцитах и кардиомиоцитах, но АлАТ существенно больше в печени, а АсАТ в сердце. Поэтому при повреждении печени относительно больше повышается АлАТ, а при повреждении сердца – АсАТ.

• – Определение спектра изоферментов. Данный подход основан на том, что отдельные изоформы характерны для разных тканей.

• – Определение активности ферментов в динамике. Скорость изменения активности фермента в сыворотке определяется разницей между скоростью его появления в сыворотке и скоростью удаления из системы циркуляции. При инфаркте органа и некрозе поврежденных клеток в сыворотке крови происходит повышение активности внутриклеточных ферментов, специфичных для данной ткани, затем после выхода всего фермента активность его снижается. Важным является определение динамики изменения фермента и определение его активности в период повышения в сыворотке, т. к. слишком раннее взятие пробы для анализа может предшествовать подъему активности, слишком позднее – также не позволит получить необходимую информацию.

Не всегда активность фермента в сыворотке Не всегда активность фермента в сыворотке отражает тяжесть заболевания. Так, острое отражает тяжесть заболевания. Так, острое повреждение клеток при вирусном гепатите может повреждение клеток при вирусном гепатите может сопровождаться очень высоким подъемом сопровождаться очень высоким подъемом активности ферментов, которая будет падать по активности ферментов, которая будет падать по мере выздоровления. В то же время при циррозе мере выздоровления. В то же время при циррозе печень может быть значительно сильнее печень может быть значительно сильнее вовлечена в патологический процесс, но скорость вовлечена в патологический процесс, но скорость повреждения клеток ниже и активность ферментов повреждения клеток ниже и активность ферментов в сыворотке будет повышена незначительно или в сыворотке будет повышена незначительно или будет находиться в пределах референтных будет находиться в пределах референтных значений. Этот пример еще раз подчеркивает, что значений. Этот пример еще раз подчеркивает, что любые результаты по исследованию активности любые результаты по исследованию активности ферментов в сыворотке должны быть обязательно ферментов в сыворотке должны быть обязательно сопоставлены с другими лабораторными сопоставлены с другими лабораторными анализами и с клинической картиной заболевания.анализами и с клинической картиной заболевания.

Перед тем как указывать на возможность патологического процесса, необходимо исключить возможность неспецифического повышения активности ферментов в сыворотке. Так, относительно невысокое повышение в плазме активности трансаминаз характерно для многих неспецифических патологических процессов. Тяжелая физическая работа, массивные внутримышечные инъекции могут привести к повышению активности КК в сыворотке. Некоторые лекарственные средства, в частности фенитоин, фенобарбитал могут индуцировать синтез микросомального фермента ГГТ и вызвать его повышение в сыворотке без всякого заболевания. Активность ферментов в сыворотке может меняться в результате агрегации с образованием макромолекул, например, при образовании комплексов с иммуноглобулинами, в которые вступают ЛДГ, ЩФ и КК.

Алкогольдегидрогеназа• Алкогольдегидрогеназа (АДГ; КФ 1.1.1.1.) печеночный

цитоплазматический фермент, класса оксидоредуктаз. АДГ является цинксодержащем ферментом и преимущественно располагается в центролобулярном регионе печени. Алкогольдегидрогеназа способна нейтрализировать небольшие дозы алкоголя. Содержится в организме южных народов, в том числе у украинцев, русских, но почти отсут ствует у северных. Фермент катализируюет в присутствии НАД окисление спиртов и ацеталей до альдегидов и кетонов.

• Идентифицированы изоферменты АДГ, специфичные для печени, слизистой желудка и почек. В больших количествах фермент находится лишь в печени, но небольшие его количества содержат почки. Следы фермента также обнаруживаются в сердечной и скелетной мускулатуре человека. В сыворотке крови здорового человека отсутствует. Активность АДГ ответственна за метаболическое превращение метанола и этиленгликоля в токсические соединения. Этот эффект тормозится введением этанола.

Алкогольдегидрогеназа• Изоферментный спектр алкогольдегидрогеназы печени отражает

патологические изменения в организме, что используется для диагностических целей. АДГ – семейство тесно связанных ферментов с выраженным полиморфизмом, что может влиять на скорость выведения этанола. Резкое повышение содержания фермента наблюдается при острых гепатитах (при этом его показатели приходят к норме раньше, чем показатели трансаминаз). При обтурационной желтухе, циррозах печени, инфаркте миокарда, мышечной дистрофии Эрба обычно не наблюдается повышения активности фермента в крови. Цианиды, йодоацетат тормозят действие энзима. Является специфическим для клеток печени. Появление его в сыворотке крови свидетельствует о повреждении клеток печени. Служит критерием выраженности гепатоцеллюлярного некроза и внутрипеченочного холестаза. АДГ рассматривается как высокочувствительный маркер аноксии печени с поражением центров долек.

• Изоформы алкогольдегидрогеназы имеют большое значение в дифференциальной диагностике заболеваний печени. Так, АДГ1 повышается при вирусных гепатитах, АДГ2 – при алкогольных гепатитах, активности АДГ3 так же, как и АДГ2, чаще увеличиваються при циррозе печени. Референтные пределы: <2,8 МЕ/л · 0,017 [<0,05 мккат/л].

АльдолазаАльдолаза• Альдолаза Альдолаза (фруктозобисфосфат-(фруктозодифосфат)-альдолаза; КФ(фруктозобисфосфат-(фруктозодифосфат)-альдолаза; КФ 4.1.2.13) – 4.1.2.13) –

фермент, относящийся к лиазам, катализирующий превращениефермент, относящийся к лиазам, катализирующий превращение фруктозо-1,6-фруктозо-1,6-дифосфата (бисфосфата) в дигидроксиацетонфосфат и глицеральдегид-3-фосфат в дифосфата (бисфосфата) в дигидроксиацетонфосфат и глицеральдегид-3-фосфат в процессе гликолиза. Фермент играет важнейшуюпроцессе гликолиза. Фермент играет важнейшую роль в энергетическом обмене. роль в энергетическом обмене. Молекулярная масса фермента 147–180 кДа,Молекулярная масса фермента 147–180 кДа, состоит из двух полипептидных цепей. состоит из двух полипептидных цепей. Альдолаза присутствует во всехАльдолаза присутствует во всех тканях организма. Генетически обусловленная тканях организма. Генетически обусловленная неполноценность альдолазынеполноценность альдолазы является причиной наследственной непереносимости является причиной наследственной непереносимости фруктозы.фруктозы.

• В норме в сыворотке крови активность альдолазы составляет от 0,0038В норме в сыворотке крови активность альдолазы составляет от 0,0038 до 0,02 (в до 0,02 (в среднем 0,012) мкмоль фруктозо-1,6-дифосфата, превращенногосреднем 0,012) мкмоль фруктозо-1,6-дифосфата, превращенного ферментом, ферментом, содержащимся в 1 мл сыворотки крови, за 1 мин при 37 °С.содержащимся в 1 мл сыворотки крови, за 1 мин при 37 °С.

• Активность альдолазы в крови служит дополнительным диагностическим Активность альдолазы в крови служит дополнительным диагностическим признаком ряда заболеваний. В ткани злокачественных опухолей фермент в признаком ряда заболеваний. В ткани злокачественных опухолей фермент в несколько раз активнее, чем в неизмененных тканях, внесколько раз активнее, чем в неизмененных тканях, в эритроцитах активность эритроцитах активность фермента в 100 раз выше, чем в сыворотке крови, гемолиз существенно искажает фермента в 100 раз выше, чем в сыворотке крови, гемолиз существенно искажает результаты анализа. При ряде заболеваний (прогрессирующая мышечная результаты анализа. При ряде заболеваний (прогрессирующая мышечная дистрофия, инфаркт миокарда, активный ревматизм, рак, поражения печени и др.) дистрофия, инфаркт миокарда, активный ревматизм, рак, поражения печени и др.) активность альдолазы вактивность альдолазы в крови повышается, причем тем значительнее, чем тяжелее крови повышается, причем тем значительнее, чем тяжелее протекает болезнь.протекает болезнь.

• В качестве унифицированного метода определения альдолазыВ качестве унифицированного метода определения альдолазы принят метод принят метод Товарницкого–Валуйской, основанный на том, что продукты расщепления фруктозо-Товарницкого–Валуйской, основанный на том, что продукты расщепления фруктозо-1,6-фосфата альдолазой при реакции с1,6-фосфата альдолазой при реакции с 2,4-динитрофенилгидразином образуют 2,4-динитрофенилгидразином образуют гидразоны, окрашенные в щелочной среде. Интенсивность окраски гидразоны, окрашенные в щелочной среде. Интенсивность окраски пропорциональна активностипропорциональна активности фермента.фермента.

Альфа-амилаза (1,4-a-D-глюкан глюканогидролаза; Альфа-амилаза (1,4-a-D-глюкан глюканогидролаза; КФ 3.2.1.1) относится к группе гидролаз, КФ 3.2.1.1) относится к группе гидролаз, катализирующих гидролиз полисахаридов до катализирующих гидролиз полисахаридов до моно- и дисахаридов (мальтоза, глюкоза), моно- и дисахаридов (мальтоза, глюкоза), разрушая связи между 1 и 4 атомами углеродаразрушая связи между 1 и 4 атомами углерода

Альфа-амилаза

Альфа-амилаза Плазма крови человека содержит альфа-Плазма крови человека содержит альфа-

амилазы двух изозимных типов: амилазы двух изозимных типов: • панкреатическую (Р-тип), вырабатываемую панкреатическую (Р-тип), вырабатываемую

поджелудочной железой (40%)поджелудочной железой (40%)• слюнную (S-тип), продуцируемую слюнными слюнную (S-тип), продуцируемую слюнными

железами (60%)железами (60%)

Уровень активности альфа-амилазы в норме: Уровень активности альфа-амилазы в норме: • в сыворотке 25–220 МЕ/л;в сыворотке 25–220 МЕ/л;• в моче 10–490 МЕ/л в моче 10–490 МЕ/л

Альфа-амилаза• Оба изофермента амилазы имеют Оба изофермента амилазы имеют

молекулярную массу около 45 кДа, поэтому молекулярную массу около 45 кДа, поэтому фильтруются в почках и экскретируются с мочой. фильтруются в почках и экскретируются с мочой. 65 % амилазной активности мочи обусловлено 65 % амилазной активности мочи обусловлено панкреатической амилазой.панкреатической амилазой.

• Активность α-амилазы в течение дня и от одного Активность α-амилазы в течение дня и от одного дня к другому подвергается значительным дня к другому подвергается значительным изменениям. Поэтому для наблюдения за изменениям. Поэтому для наблюдения за динамикой изменения активности фермента динамикой изменения активности фермента необходим забор крови для анализа в одно и то необходим забор крови для анализа в одно и то же время суток. Существуют индивидуальные же время суток. Существуют индивидуальные различия этих показателей у обследуемых без различия этих показателей у обследуемых без патологии органов пищеварения. патологии органов пищеварения.

Альфа-амилаза• Выявление гиперамилаземи и Выявление гиперамилаземи и

гиперамилазурии является важным, но не гиперамилазурии является важным, но не специфическим тестом для острого специфическим тестом для острого панкреатита; кроме того, повышение ее панкреатита; кроме того, повышение ее активности может быть кратковременным. Для активности может быть кратковременным. Для повышения информативности полученных повышения информативности полученных результатов исследования полезно результатов исследования полезно определение активности амилазы крови и мочи определение активности амилазы крови и мочи сочетать с параллельным определением сочетать с параллельным определением концентрации креатинина в моче и сыворотке концентрации креатинина в моче и сыворотке крови. На основании этих данных рассчитывают крови. На основании этих данных рассчитывают индекс амилазо-креатининового клиренса по индекс амилазо-креатининового клиренса по формуле формуле

Альфа-амилаза• АМ · КРС · 100АМ · КРС · 100 • КРМ · АСКРМ · АС

• где:где:• AM – амилаза мочи AM – амилаза мочи • АС – амилаза сыворотки АС – амилаза сыворотки • КРМ – креатинин в мочеКРМ – креатинин в моче• КРС – креатинин в сыворотке КРС – креатинин в сыворотке

Альфа-амилаза• В норме амилазо-креатининовый В норме амилазо-креатининовый

индекс не выше 3индекс не выше 3• Превышение считается признаком Превышение считается признаком

панкреатита, так как при панкреатите панкреатита, так как при панкреатите возрастает уровень истинно возрастает уровень истинно панкреатической амилазы, и ее панкреатической амилазы, и ее клиренс осуществляется на 80 % клиренс осуществляется на 80 % быстрее клиренса амилазы слюныбыстрее клиренса амилазы слюны

Альфа-амилаза

• При заболеваниях, При заболеваниях, протекающих под маской протекающих под маской панкреатита, содержание панкреатита, содержание амилазы сыворотки может амилазы сыворотки может увеличиваться, но показатель увеличиваться, но показатель амилазо-креатининового амилазо-креатининового клиренса остается клиренса остается нормальным нормальным

АминотрансферазыАминотрансферазы• АспартатаминотрансферазаАспартатаминотрансфераза

• (КФ 2.6.1.1. L-аспартат: 2-(КФ 2.6.1.1. L-аспартат: 2-оксоглутарата-минотрансфераза, АСТ или оксоглутарата-минотрансфераза, АСТ или АсАТ или более редкое название АсАТ или более редкое название глутамат-оксалоацетаттрансаминаза глутамат-оксалоацетаттрансаминаза (ГОТ).(ГОТ).

• Нормальные величины активности Нормальные величины активности ферментов в сыворотке/плазме –ферментов в сыворотке/плазме –

• АсАТ: 10–30 МЕ/лАсАТ: 10–30 МЕ/л

АминотрансферазыАминотрансферазы

• АланинаминотрансферазаАланинаминотрансфераза

• (КФ 2.6.1.2. L-аланин: 2-(КФ 2.6.1.2. L-аланин: 2-оксоглутарата-минотрансфераза, оксоглутарата-минотрансфераза, АЛТ АЛТ или АлАТ или более редкое название или АлАТ или более редкое название глутаматпи-руваттрансаминаза (ГТП).глутаматпи-руваттрансаминаза (ГТП).

• Нормальные величины активности Нормальные величины активности ферментов в сыворотке / плазме –ферментов в сыворотке / плазме –

• АлАТ: 7–40 МЕ/л АлАТ: 7–40 МЕ/л


• Аминотрансферазы катализируют Аминотрансферазы катализируют процессы трансаминирования. процессы трансаминирования.

• Они распределены по всем органам и Они распределены по всем органам и тканям. тканям.

• Роль кофермента в трансаминазныхРоль кофермента в трансаминазных реакциях играет пиридоксальфосфат реакциях играет пиридоксальфосфат (витамин В6). (витамин В6).


• АсАТАсАТ имеет изоферменты, локализованныеимеет изоферменты, локализованные •в цитозоле, в цитозоле, •в митохондриях, в митохондриях,

• АлАТАлАТ – – имеет изоферменты, имеет изоферменты, локализованныелокализованные

•в цитозоле (преимущественно)в цитозоле (преимущественно)•в митохондриях (незначительно)в митохондриях (незначительно)


• АсАТАсАТ в высоких концентрациях в высоких концентрациях присутствует в клетках сердечной и присутствует в клетках сердечной и скелетных мышц, печени, почках, скелетных мышц, печени, почках, поджелудочной железе и поджелудочной железе и эритроцитах. эритроцитах.

• АлАТАлАТ в высоких концентрациях в высоких концентрациях присутствует в клетках печени и в присутствует в клетках печени и в меньшей степени в скелетных меньшей степени в скелетных мышцах, почках и сердце.мышцах, почках и сердце.


• Поражение любого из этих Поражение любого из этих органов и тканей может органов и тканей может привести к существенному привести к существенному повышению трансаминаз в повышению трансаминаз в сыворотке крови сыворотке крови


• Наиболее резкие изменения Наиболее резкие изменения АсАТ АсАТ наблюдаются при поражении сердечной наблюдаются при поражении сердечной мышцы. мышцы.

•• Например, при инфаркте миокарда Например, при инфаркте миокарда

активность АсАТ в сыворотке крови может активность АсАТ в сыворотке крови может повышаться в 4–5 раз. Между размерами повышаться в 4–5 раз. Между размерами очага инфаркта и активностью АсАТ в очага инфаркта и активностью АсАТ в сыворотке имеется тесная корреляция: сыворотке имеется тесная корреляция: если в течение нескольких дней не если в течение нескольких дней не происходит нормализация активности происходит нормализация активности фермента, это свидетельствует о фермента, это свидетельствует о расширении зоны инфаркта. расширении зоны инфаркта.


• Снижение активности Снижение активности АсАТ:АсАТ:• при недостаточности при недостаточности

пиридоксина (витамина В6)пиридоксина (витамина В6)• при почечной недостаточности при почечной недостаточности • при беременности при беременности


• Повышение активности Повышение активности АлАТАлАТ наиболее часто отмечается при наиболее часто отмечается при острых заболеваниях печени и острых заболеваниях печени и желчных путей. желчных путей.


• КоэффициентКоэффициент де Ритис - де Ритис - • АсАТ/АлАТАсАТ/АлАТ == 1,3 ± 0,4 1,3 ± 0,4

• при заболеваниях печени – при заболеваниях печени – понижается понижается

• при заболеваниях сердца – при заболеваниях сердца – повышается повышается

Гамма-глутамилтрансферазаГамма-глутамилтрансфераза

• Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ; Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ; КФ 2.3.2.2) КФ 2.3.2.2)

• Катализирует перенос гамма-Катализирует перенос гамма-глутамилового остатка с гамма-глутамилового остатка с гамма-глутамилового пептида на глутамилового пептида на аминокислоту, другой пептид или аминокислоту, другой пептид или иной субстрат. В организме человека иной субстрат. В организме человека фермент участвует в метаболизме фермент участвует в метаболизме глутатиона глутатиона


• Тест по определению активности Тест по определению активности ГГТ в последнее время приобретает ГГТ в последнее время приобретает все большее значение в диагностике все большее значение в диагностике заболеваний печени и гепато-заболеваний печени и гепато-билиарного тракта, т. к. отличается билиарного тракта, т. к. отличается большей чувствительностью, чем большей чувствительностью, чем применяемые с этой целью тесты на применяемые с этой целью тесты на АлАТ, АсАТ и ЩФ. АлАТ, АсАТ и ЩФ.


• Активность ГГТ в сыворотке крови Активность ГГТ в сыворотке крови повышается при любых патологиях повышается при любых патологиях печени и желчных путей. печени и желчных путей.

• В зависимости от механизма В зависимости от механизма повреждения печени степень повреждения печени степень увеличения активности ГГТ в увеличения активности ГГТ в сыворотке крови, заметно сыворотке крови, заметно отличается, что позволяет успешно отличается, что позволяет успешно использовать этот маркер для использовать этот маркер для дифференциальной диагностики дифференциальной диагностики заболеваний печени.заболеваний печени.


Существенное увеличение Существенное увеличение активности ГГТ наблюдается при активности ГГТ наблюдается при холестазе, и лишь холестазе, и лишь незначительное – при незначительное – при повреждении паренхимы печени повреждении паренхимы печени (некрозе гепатоцитов). (некрозе гепатоцитов).

ГлутаматдегидрогеназаГлутаматдегидрогеназа

• ГлутаматдегидрогеназаГлутаматдегидрогеназа (ГДГ; (ГДГ; КФ 1.4.1.3) – фермент, КФ 1.4.1.3) – фермент, катализирующий превращение катализирующий превращение глутамата в 2-оксоглутарат и глутамата в 2-оксоглутарат и аммиак. аммиак.

•


• ГДГ в наибольшем количестве ГДГ в наибольшем количестве содержится в клетках печени.содержится в клетках печени.

• Фермент находится внутри Фермент находится внутри митохондрий гепатоцитов, поэтому митохондрий гепатоцитов, поэтому увеличение его активности отражает увеличение его активности отражает глубину цитолиза клеток - по степени глубину цитолиза клеток - по степени ее повышения можно судить о ее повышения можно судить о тяжести патологического процесса. тяжести патологического процесса.


• Повышение активности ГДГ и Повышение активности ГДГ и ГГТ во многом сходно, но есть ГГТ во многом сходно, но есть различия: высокая активность различия: высокая активность ГДГ наблюдается при острых ГДГ наблюдается при острых повреждениях печени, а повреждениях печени, а высокая ГГТ – при длительных высокая ГГТ – при длительных патологических процессах в патологических процессах в печени.печени.

ГлутатионредуктазаГлутатионредуктаза

• ГлутатионредуктазаГлутатионредуктаза (ГР; КФ (ГР; КФ 1.6.4.2) – НАДФ-зависимый 1.6.4.2) – НАДФ-зависимый фермент, катализирующий фермент, катализирующий превращение окисленной превращение окисленной формы глутатиона в формы глутатиона в восстановленную. восстановленную.


• ГР присутствует практически ГР присутствует практически во всех тканях, но наибольшее во всех тканях, но наибольшее его содержание в почках, его содержание в почках, печени, сердце и эритроцитах. печени, сердце и эритроцитах.


• Повышение активности фермента Повышение активности фермента наблюдается при гепатите, наблюдается при гепатите, механической желтухе, сахарном механической желтухе, сахарном диабете, при дефиците глюкозо-6-диабете, при дефиците глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, серповидной фосфатдегидрогеназы, серповидной и мегалобластной анемиях, после и мегалобластной анемиях, после введения никотиновой кислоты, введения никотиновой кислоты, после физической нагрузки. после физической нагрузки.


• Недостаток ГР отмечается при Недостаток ГР отмечается при дефиците рибофлавина.дефиците рибофлавина.

ГлутатионпероксидазаГлутатионпероксидаза

• ГлутатионпероксидазаГлутатионпероксидаза (ГП, КФ (ГП, КФ 1.11.1.9) – один из ключевых 1.11.1.9) – один из ключевых ферментов антиоксидантной системы ферментов антиоксидантной системы организма, функцией которого организма, функцией которого является разрушение и инактивация является разрушение и инактивация пероксидов водорода и пероксидов водорода и гидропероксидов (пероксидных гидропероксидов (пероксидных радикалов) – токсичных соединений радикалов) – токсичных соединений кислорода. кислорода.


• СодержитсяСодержится практически во практически во всех тканях. ГП клеток печени всех тканях. ГП клеток печени состоит из четырех субъединиц, состоит из четырех субъединиц, каждая из которых содержит в каждая из которых содержит в активном центре атом селена. активном центре атом селена.


• Пероксид водорода и активные Пероксид водорода и активные радикалы образуются в результате радикалы образуются в результате пероксидного окисления липидов пероксидного окисления липидов (ПОЛ), которые приводят к (ПОЛ), которые приводят к дестабилизации клеточных мембран дестабилизации клеточных мембран и, в тяжелых случаях, к их и, в тяжелых случаях, к их разрушению. Активация ПОЛ разрушению. Активация ПОЛ наблюдается при различных наблюдается при различных заболеваниях: ишемия органов и заболеваниях: ишемия органов и тканей, сахарный диабет, тканей, сахарный диабет, атеросклероз и мн.др. атеросклероз и мн.др.


• Определение ГП помогает оценить Определение ГП помогает оценить антиоксидантную способность организма антиоксидантную способность организма при различных заболеваниях, а также у при различных заболеваниях, а также у людей с повышенным риском селенового людей с повышенным риском селенового дефицита (в старческом возрасте, при дефицита (в старческом возрасте, при плохом питании, курении, алкоголизме, плохом питании, курении, алкоголизме, стрессе, почечной недостаточности, стрессе, почечной недостаточности, химиотерапии и др.), рекомендовать химиотерапии и др.), рекомендовать назначение препаратов для назначение препаратов для антиоксидантной терапии и оценивать антиоксидантной терапии и оценивать эффективность терапии.эффективность терапии.


• Увеличение активности Увеличение активности наблюдается при: наблюдается при:

• дефиците глюкозо-6-дефиците глюкозо-6-фосфатдегидрогеназыфосфатдегидрогеназы

• остром лимфоцитарном лейкозе остром лимфоцитарном лейкозе • талассемииталассемии


• Уменьшение активности ГП сопровождает:Уменьшение активности ГП сопровождает:• сердечно-сосудистые заболеваниясердечно-сосудистые заболевания• атеросклероз атеросклероз • сахарный диабетсахарный диабет• аутоиммунные заболевания (ревматоидный аутоиммунные заболевания (ревматоидный

артрит) артрит) • процессы старения организмапроцессы старения организма• муковисцидоз муковисцидоз • шизофрению и маниакально-депрессивный шизофрению и маниакально-депрессивный

психоз психоз


• Уменьшение активности ГП Уменьшение активности ГП значительно повышает риск значительно повышает риск возникновения раковых возникновения раковых заболеваний заболеваний

Глюкозо-6-Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназафосфатдегидрогеназа

• Одним из основных Одним из основных поставщиков НАДФН для поставщиков НАДФН для глутатионовой антиоксидантной глутатионовой антиоксидантной системы является системы является пентозофосфатный путь, пентозофосфатный путь, ключевым ферментом которого ключевым ферментом которого является Г6ФДГ. является Г6ФДГ.

Глюкозо-6-Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназафосфатдегидрогеназа

• В большом количестве находится в В большом количестве находится в эритроцитах и используется, в эритроцитах и используется, в основном, для выявления на основном, для выявления на следственных заболеваний, следственных заболеваний, связанных с дефицитом фермента – связанных с дефицитом фермента – наиболее распространенной наиболее распространенной наследственной гемолитической наследственной гемолитической анемии, обусловленной дефицитом анемии, обусловленной дефицитом активности Г6ФДГ эритроцитов. активности Г6ФДГ эритроцитов.

ИзоцитратдегидрогеназаИзоцитратдегидрогеназа

• ИзоцитратдегидрогеназаИзоцитратдегидрогеназа (ИДГ; (ИДГ; КФ 1.1.1.42) – фермент, КФ 1.1.1.42) – фермент, имеющий 2 формы имеющий 2 формы коферментной специфичности коферментной специфичности (НАД и НАДФ-зависимые) и (НАД и НАДФ-зависимые) и катализирующий обратимое катализирующий обратимое окисление изоцитрата до 2-окисление изоцитрата до 2-оксоглутарата.оксоглутарата.

ИзоцитратдегидрогеназаИзоцитратдегидрогеназа

• НАДФ-зависимая форма присутствует НАДФ-зависимая форма присутствует во всех тканях, но наибольшая ее во всех тканях, но наибольшая ее активность обнаружена в печени, активность обнаружена в печени, скелетной мускулатуре, сердце. скелетной мускулатуре, сердце.

• Повышение активности ИДГ является Повышение активности ИДГ является чувствительным показателем чувствительным показателем поражения паренхимы печени, поражения паренхимы печени, тяжелом инфаркте легкого, тяжелом инфаркте легкого, миелолейкоза, мегалобластной миелолейкоза, мегалобластной анемии. анемии.

КаталазаКаталаза

• КаталазаКаталаза (КФ 1.11.1.6; (КФ 1.11.1.6; Н2О2:Н2О2 – оксидоредуктаза) – Н2О2:Н2О2 – оксидоредуктаза) – фермент, катализирующий фермент, катализирующий реакцию разложения пероксида реакцию разложения пероксида водорода на воду и водорода на воду и молекулярный кислород: молекулярный кислород:

• 2 Н2О2 = О2 + 2Н2О2 Н2О2 = О2 + 2Н2О


- - В клетках каталаза локализуется в В клетках каталаза локализуется в пероксисомах. пероксисомах.

-- Биологическая роль каталазы Биологическая роль каталазы заключается в деградации заключается в деградации пероксида водорода, образующегося пероксида водорода, образующегося в клетках в результате действия в клетках в результате действия ряда флавопротеиновых оксидаз и ряда флавопротеиновых оксидаз и обеспечении эффективной защиты обеспечении эффективной защиты клеточных структур от разрушения клеточных структур от разрушения под действием пероксида водорода.под действием пероксида водорода.


• Каталазный индекс Каталазный индекс (отношение величины (отношение величины каталазной активности каталазной активности определенного объема крови к определенного объема крови к количеству эритроцитов в этом количеству эритроцитов в этом объеме), увеличивается при объеме), увеличивается при злокачественной и других злокачественной и других макроцитарных анемиях макроцитарных анемиях


• Уменьшение активности Уменьшение активности каталазы отмечается при каталазы отмечается при злокачественных злокачественных новообразованиях в печени и новообразованиях в печени и почках, причем существует почках, причем существует зависимость между величиной зависимость между величиной опухоли, скоростью ее роста и опухоли, скоростью ее роста и степенью уменьшения степенью уменьшения активности каталазы. активности каталазы.

КреатинкиназаКреатинкиназа

• Креатинкиназа или Креатинкиназа или креатинфосфокиназакреатинфосфокиназа (КК; КФ (КК; КФ 2.7.3.2.) катализирует 2.7.3.2.) катализирует обратимую реакцию обратимую реакцию фосфорилирования креатинина фосфорилирования креатинина с участием АТФ в результате с участием АТФ в результате чего образуются креатинфосфат чего образуются креатинфосфат и AДФ. и AДФ.


• Фермент существует в виде Фермент существует в виде трех изоферментов: трех изоферментов:

• КК-ВВ (КК-1) – мозговой, КК-ВВ (КК-1) – мозговой, • КК-МВ (КК-2) – сердечный КК-МВ (КК-2) – сердечный • КК-ММ (КК-3) – мышечный КК-ММ (КК-3) – мышечный

КреатинкиназаКреатинкиназа• Увеличение Увеличение общей ККобщей КК:: • травмы, травмы, • операции, операции, • инфаркт миокарда, инфаркт миокарда, • уменьшение кровоснабжения мышц, уменьшение кровоснабжения мышц, • миопатии, миопатии, • дерматомиозит, дерматомиозит, • мышечные дистрофии, мышечные дистрофии, • миокардиты,миокардиты,• отравления, сопровождающиеся комой, отравления, сопровождающиеся комой, • инфекционные болезни (например, инфекционные болезни (например,

брюшной тиф). брюшной тиф).


• КК-ММКК-ММ увеличивается в увеличивается в сыворотке при тех же сыворотке при тех же состояниях, как и общая КК.состояниях, как и общая КК.


• КК-МВКК-МВ • увеличивается более чем в 1,5 раза при:увеличивается более чем в 1,5 раза при:• инфаркте миокардаинфаркте миокарда

• незначительно увеличивается при:незначительно увеличивается при:• миокардитахмиокардитах• стенокардиистенокардии• затяжной аритмиизатяжной аритмии• шокешоке• тяжелых отравлениях тяжелых отравлениях


• КК-ВВКК-ВВ • незначительно повышается при:незначительно повышается при:• некоторых формах раканекоторых формах рака• травме сердечной мышцы травме сердечной мышцы • заболеваниях соединительной тканизаболеваниях соединительной ткани• у новорожденных при родовой травме у новорожденных при родовой травме

мозга мозга

• увеличиваться в 6 раз при:увеличиваться в 6 раз при:• родах (источником являются матка и родах (источником являются матка и

плацента)плацента)

ЛактатдегидрогеназаЛактатдегидрогеназа

• ЛактатдегидрогеназаЛактатдегидрогеназа (ЛДГ; КФ (ЛДГ; КФ 1.1.1.27) катализирует 1.1.1.27) катализирует обратимое восстановление обратимое восстановление пирувата до лактата, в качестве пирувата до лактата, в качестве кофермента используется НАДН кофермента используется НАДН


• ЛДГ имеет молекулярную массу ЛДГ имеет молекулярную массу около 134 кДаоколо 134 кДа..

• ЛДГ тетрамер, состоящий из двух ЛДГ тетрамер, состоящий из двух субъединиц – М (субъединиц – М (muscle muscle – мышечная) – мышечная) и Н (и Н (heart heart – сердечная). – сердечная).

• В сыворотке присутствуют 5 В сыворотке присутствуют 5 изоферментов, различающиеся изоферментов, различающиеся составомсоставом субъединиц. субъединиц.


• ЛДГ - это цитозольный ЛДГ - это цитозольный фермент, присутствует во всех фермент, присутствует во всех клетках организма. клетках организма.

• В печени, сердце, почках, В печени, сердце, почках, скелетной мышце и эритроцитах скелетной мышце и эритроцитах активность ЛДГ более чем в 500 активность ЛДГ более чем в 500 раз выше, чем в сыворотке .раз выше, чем в сыворотке .

Изоферменты Изоферменты ЛактатдегидрогеназыЛактатдегидрогеназы

ВидВид СоставСостав Содержание в Содержание в сывороткесыворотке

ЛДГ-1ЛДГ-1 Н4Н4 15–30 %15–30 %ЛДГ-2ЛДГ-2 Н3МН3М 22–50 %22–50 %ЛДГ-3ЛДГ-3 Н2М2Н2М2 15–30 %;15–30 %;ЛДГ-4ЛДГ-4 Н1М3Н1М3 0–15 %0–15 %ЛДГ-5ЛДГ-5 М4М4 0–15 %0–15 %


Повышается при остром повреждении:Повышается при остром повреждении:• сердцасердца• эритроцитовэритроцитов• почекпочек• скелетных мышцскелетных мышц• печенипечени• легких легких • кожикожи


• Общая активность ЛДГ в Общая активность ЛДГ в сыворотке крови не является сыворотке крови не является специфическим тестом для специфическим тестом для определенной патологии. определенной патологии. Поэтому необходимо разделять Поэтому необходимо разделять изоферменты ЛДГ и, затем, изоферменты ЛДГ и, затем, оценивать вклад каждого в оценивать вклад каждого в общую активность, т.к. они общую активность, т.к. они органоспецифичны органоспецифичны


• Однократное исследование Однократное исследование ЛДГ-1 обладает клинической ЛДГ-1 обладает клинической специфичностью в отношении специфичностью в отношении инфаркта миокарда в 66 % инфаркта миокарда в 66 % случаев, а определение ее в случаев, а определение ее в динамике (через каждые 4–6 динамике (через каждые 4–6 часов в течение суток) – в 86 % часов в течение суток) – в 86 %


• Однократное исследование Однократное исследование ЛДГ1ЛДГ1 обладает клинической обладает клинической специфичностью в отношении специфичностью в отношении инфаркта миокарда в 66 % инфаркта миокарда в 66 % случаев, а определение ее в случаев, а определение ее в динамике (через каждые 4–6 динамике (через каждые 4–6 часов в течение суток) – в 86 % часов в течение суток) – в 86 %


• Повышение Повышение ЛДГ1ЛДГ1 отмечается отмечается также при опухолях также при опухолях репродуктивных органов: репродуктивных органов: тератома, семинома яичка, тератома, семинома яичка, дисгерминома яичникадисгерминома яичника


• ЛДГ2ЛДГ2,, ЛДГ3ЛДГ3 ии ЛДГ4ЛДГ4 обладают обладают промежуточными свойствами. промежуточными свойствами. Активность этих изоферментов Активность этих изоферментов повышается при массивном повышается при массивном разрушении тромбоцитов (эмболия разрушении тромбоцитов (эмболия легочной артерии, массивные легочной артерии, массивные гемотрансфузии) и вовлечении в гемотрансфузии) и вовлечении в патологический процесс патологический процесс лимфатической системы. лимфатической системы.


• При нелимфоцитарных При нелимфоцитарных лейкозах увеличивается лейкозах увеличивается активность активность ЛДГ3ЛДГ3 и и ЛДГ4ЛДГ4

• Увеличение Увеличение ЛДГ3ЛДГ3 иногда иногда наблюдается при острых наблюдается при острых панкреатитах панкреатитах


• Активность Активность ЛДГ4ЛДГ4 возрастает при: возрастает при:• поражении печенипоражении печени• в активную фазу ревматизма в активную фазу ревматизма • кардиосклерозе с нарушением кардиосклерозе с нарушением

гемодинамикигемодинамики• остром нефритеостром нефрите• поражениях почек поражениях почек • опухолях печени, предстательной железы, опухолях печени, предстательной железы,

шейки матки, молочной железы, шейки матки, молочной железы, кишечника кишечника

• тяжелых формах диабета тяжелых формах диабета

ЛактатдегидрогеназаЛактатдегидрогеназа• ЛДГ 5ЛДГ 5

• Наибольшее содержание этого изофермента Наибольшее содержание этого изофермента характерно для скелетных мышц, печени, кожи, слизистых характерно для скелетных мышц, печени, кожи, слизистых оболочек, а также клеток некоторых злокачественных оболочек, а также клеток некоторых злокачественных опухолей. опухолей.

•• Значительное увеличение отмечается при:Значительное увеличение отмечается при:• травмах, воспалительных и дегенеративных заболеваниях травмах, воспалительных и дегенеративных заболеваниях

мышц мышц • многих болезнях печени (гепатиты, циррозы и др.). многих болезнях печени (гепатиты, циррозы и др.). • онкологических заболеваниях (например лимфолейкозы) онкологических заболеваниях (например лимфолейкозы) • активная фаза ревматизмаактивная фаза ревматизма• глубоких поражениях почек, сопровождающихся их глубоких поражениях почек, сопровождающихся их

гипоксией, опухолях почек и отторжении пересаженной гипоксией, опухолях почек и отторжении пересаженной почкипочки

• при тяжелых формах диабетапри тяжелых формах диабета

ЛипазаЛипаза

• Липаза (КФ 3.1.1.3) – фермент, Липаза (КФ 3.1.1.3) – фермент, катализирующий расщепление катализирующий расщепление глицеридов на глицерин и глицеридов на глицерин и высшие жирные кислоты высшие жирные кислоты


• Различают липазу : Различают липазу : • желудочного происхождения, желудочного происхождения, • поджелудочной железы, поджелудочной железы, • легких, легких, • кишечного сока, кишечного сока, • лейкоцитов и др. лейкоцитов и др.

ЛипазаЛипаза• Определение активности липазы в Определение активности липазы в

крови является наиболее крови является наиболее информативным критерием информативным критерием диагностики острого панкреатита.диагностики острого панкреатита.

• Содержание липазы увеличивается Содержание липазы увеличивается и снижается параллельно повышению и снижается параллельно повышению и снижению активности амилазы, но и снижению активности амилазы, но нормализация ее уровня происходит нормализация ее уровня происходит позже нормализации амилазы позже нормализации амилазы


• Одновременное определение Одновременное определение уровня альфа-амилазы (кровь и уровня альфа-амилазы (кровь и моча) и липазы – основа моча) и липазы – основа диагностики острого диагностики острого панкреатита. Повышение обоих панкреатита. Повышение обоих или одного из ферментов или одного из ферментов выявляется у 98 % больных с выявляется у 98 % больных с острым панкреатитом.острым панкреатитом.

5-Нуклеотидаза5-Нуклеотидаза

• 5-Нуклеотидаза5-Нуклеотидаза (5'-рибонуклеотид (5'-рибонуклеотид – фосфогидролаза; КФ 3.1.3.5) – фосфогидролаза; КФ 3.1.3.5) катализирует гидролиз только катализирует гидролиз только нуклеотид-5-фосфатов. нуклеотид-5-фосфатов.

• Фермент распространен во многих Фермент распространен во многих тканях организма (печень, мозг, тканях организма (печень, мозг, мышцы, почки, легкие, щитовидная мышцы, почки, легкие, щитовидная железа, аорта). железа, аорта).


• Возрастание активности 5-Возрастание активности 5-нуклеотидазы происходит нуклеотидазы происходит параллельно активности щелочной параллельно активности щелочной фосфатазы при холестазах любой фосфатазы при холестазах любой локализации, но данный фермент локализации, но данный фермент более чувствителен по отношению к более чувствителен по отношению к первичному и вторичному первичному и вторичному билиарному циррозу, а также к билиарному циррозу, а также к хроническому активному гепатиту. хроническому активному гепатиту.


• Главное отличие 5-Главное отличие 5-нуклеотидазы от щелочной нуклеотидазы от щелочной фосфатазы: отсутствие реакции фосфатазы: отсутствие реакции на костные заболевания. на костные заболевания. Считается, что 5-нуклеотидаза Считается, что 5-нуклеотидаза является специфической является специфической «желчной» фосфатазой.«желчной» фосфатазой.

СорбитолдегидрогеназаСорбитолдегидрогеназа

• СорбитолдегидрогеназаСорбитолдегидрогеназа (полиолдегидрогеназа, L-(полиолдегидрогеназа, L-идитол, НАД+5-идитол, НАД+5-оксидоредуктаза, СДГ, КФ оксидоредуктаза, СДГ, КФ 1.1.1.14) катализирует реакцию 1.1.1.14) катализирует реакцию окисления сорбитола до окисления сорбитола до фруктозы, при этом происходит фруктозы, при этом происходит восстановление НАД восстановление НАД

СорбитолдегидрогеназаСорбитолдегидрогеназа

• СДГ содержится СДГ содержится преимущественно в цитоплазме преимущественно в цитоплазме гепатоцитов, поэтому гепатоцитов, поэтому повышение активности повышение активности фермента специфично отражает фермента специфично отражает поражение печени. поражение печени.

СупероксиддисмутазаСупероксиддисмутаза

• СупероксиддисмутазаСупероксиддисмутаза (супероксид (супероксид оксидоредуктаза, СОД, КФ 1.15.1.1.) оксидоредуктаза, СОД, КФ 1.15.1.1.) фермент (металлопротеин), фермент (металлопротеин), катализирующий реакцию катализирующий реакцию превращения двух супероксидных превращения двух супероксидных радикалов друг с другом, превращая радикалов друг с другом, превращая их в менее токсичный пероксид их в менее токсичный пероксид водорода и кислород . водорода и кислород .


• При инфаркте миокарда СОД При инфаркте миокарда СОД защищает сердечную мышцу от защищает сердечную мышцу от действия свободных радикалов, действия свободных радикалов, образующихся при ишемии, при образующихся при ишемии, при этом в сыворотке крови при этом в сыворотке крови при инфаркте миокарда инфаркте миокарда регистрируется высокая регистрируется высокая активность фермента.активность фермента.


• Степень повышения СОД Степень повышения СОД обратно пропорциональна обратно пропорциональна деятельности левого деятельности левого желудочка, что используется желудочка, что используется как маркер для оценки как маркер для оценки повреждения миокарда и при повреждения миокарда и при мышечной дистрофии. мышечной дистрофии.


• Значительное увеличение Значительное увеличение активности СОД возможно при:активности СОД возможно при:

• ишемии органов ишемии органов • нефропатиинефропатии• заболеваниях, сопровождающихся заболеваниях, сопровождающихся

воспалением (ревматоидный артрит)воспалением (ревматоидный артрит)• сепсисесепсисе

ФосфатазыФосфатазы

• Ферменты, катализирующие Ферменты, катализирующие разрыв сложноэфирной связи в разрыв сложноэфирной связи в моноэфирах фосфорной моноэфирах фосфорной кислоты с образованием кислоты с образованием свободного ортофосфата свободного ортофосфата (аниона ортофосфорной (аниона ортофосфорной кислоты); относятся к классу кислоты); относятся к классу гидролаз.гидролаз.

Щелочная фосфатаза Щелочная фосфатаза

• Оптимум рН щелочной Оптимум рН щелочной фосфатазы лежит в щелочной фосфатазы лежит в щелочной среде (рН 8,6–10,1). среде (рН 8,6–10,1).

• Фермент расположен на Фермент расположен на клеточной мембране и клеточной мембране и принимает участие в транспорте принимает участие в транспорте фосфора.фосфора.


• В сыворотке несколько В сыворотке несколько изоферментов ЩФ, изоферментов ЩФ, семьсемь из которых из которых имеют наибольшее клинико-имеют наибольшее клинико-диагностическое значение. диагностическое значение.

• Для диагностических целей чаще Для диагностических целей чаще всего проводят определение всего проводят определение активности костной и печеночной активности костной и печеночной форм фосфатазы форм фосфатазы


• 1. Костная ЩФ1. Костная ЩФ• В кости ЩФ секретируется В кости ЩФ секретируется

остеобластами, ее роль в остеобластами, ее роль в формировании кости до конца формировании кости до конца не установлена. Предполагают, не установлена. Предполагают, что она участвует в созревании что она участвует в созревании матрикса и его минерализации. матрикса и его минерализации.


• 1. Костная ЩФ1. Костная ЩФ• Значительное увеличение ее активности в Значительное увеличение ее активности в

сыворотке крови наблюдается при сыворотке крови наблюдается при повышенной деятельности остеобластов: повышенной деятельности остеобластов:

• рост костей (у детей активность выше, чем рост костей (у детей активность выше, чем у взрослых; увеличивается эта активность в у взрослых; увеличивается эта активность в последний триместр беременности), последний триместр беременности),

• возобновлении движений после возобновлении движений после длительного постельного режима, длительного постельного режима,

• переломах, деформирующем остите, переломах, деформирующем остите, • рахите. рахите.


• 2. Печеночная ЩФ2. Печеночная ЩФПредставлена двумя изоферментами.Представлена двумя изоферментами.• 1 - основной фермент при патологии 1 - основной фермент при патологии

гепатобилиарного трактагепатобилиарного тракта• 2 - основной фермент при 2 - основной фермент при

гепатоцеллюлярнойгепатоцеллюлярной патологиипатологии


• 3. ЩФ желчи -3. ЩФ желчи - фермент холестаза фермент холестаза • Фермент высвобождается из Фермент высвобождается из

поврежденных желчных протоков при:поврежденных желчных протоков при:• недостаточности выделения желчи, недостаточности выделения желчи,

обусловленнымобусловленным нарушением ее нарушением ее выработки печеночными клетками выработки печеночными клетками (внутрипеченочный холестаз); (внутрипеченочный холестаз);

• прекращении тока желчи по желчным прекращении тока желчи по желчным протокам (внепеченочный холестаз)протокам (внепеченочный холестаз)


• 4. Кишечная ЩФ4. Кишечная ЩФ • Синтезируется энтероцитами, Синтезируется энтероцитами,

поступает в просветпоступает в просвет тонкого тонкого кишечника и частично всасывается в кишечника и частично всасывается в кровь. Вклад ее в общую активность кровь. Вклад ее в общую активность ЩФ невелик. Ее активность может ЩФ невелик. Ее активность может быть увеличена у лиц с I илибыть увеличена у лиц с I или III III группой крови, особенно после группой крови, особенно после приема пищи, при заболеваниях приема пищи, при заболеваниях кишечника, сопровождающихся кишечника, сопровождающихся диареей. диареей.


• 5. Почечная ЩФ 5. Почечная ЩФ

• Частично всасывается в кровь, но в Частично всасывается в кровь, но в основном, экскретируется с мочой. Тест основном, экскретируется с мочой. Тест используется в диагностике заболеваний используется в диагностике заболеваний почекпочек (гломерулонефрит, пиелонефрит, (гломерулонефрит, пиелонефрит, нефропатии).нефропатии).


• 6. Плацентарная ЩФ6. Плацентарная ЩФ

• Появляется в сыворотке крови при Появляется в сыворотке крови при беременности. Самое большое ее беременности. Самое большое ее содержание отмечается в третьем содержание отмечается в третьем триместре. Очень высокие цифры триместре. Очень высокие цифры активности ЩФ наблюдаются у женщин с активности ЩФ наблюдаются у женщин с преэклампсией, что является следствием преэклампсией, что является следствием повреждения плаценты. Низкая активность повреждения плаценты. Низкая активность ЩФ у беременных говорит о ЩФ у беременных говорит о недостаточности развития плацентынедостаточности развития плаценты


• 7. Неидентифицированные 7. Неидентифицированные изоферменты ЩФизоферменты ЩФ

• изоферменты Regan или Nagao изоферменты Regan или Nagao

опухолевого происхожденияопухолевого происхождения• наиболее часто определяются при раке наиболее часто определяются при раке

легкоголегкого

Кислая фосфатаза Кислая фосфатаза

• Фосфатаза кислая (КФ, КФ 3.1.3.2) – Фосфатаза кислая (КФ, КФ 3.1.3.2) – фермент с широкой субстратной фермент с широкой субстратной специфичностью, катализирующий специфичностью, катализирующий расщепление сложноэфирных связей с расщепление сложноэфирных связей с образованием свободного ортофосфата, по образованием свободного ортофосфата, по спектру активности близкий к щелочной спектру активности близкий к щелочной фосфатазе, от которой отличается иным фосфатазе, от которой отличается иным действием на серосодержащие эфиры, действием на серосодержащие эфиры, оптимумом рН (4,7–6,0; у ЩФ – 8,4–9,4)оптимумом рН (4,7–6,0; у ЩФ – 8,4–9,4)


• Под наименованием «кислая фосфатаза» Под наименованием «кислая фосфатаза» подразумевают все фосфатазы, подразумевают все фосфатазы, проявляющие оптимальную активность при проявляющие оптимальную активность при рН < 7,0. рН < 7,0.

• Это ферменты,Это ферменты, которые находятся в которые находятся в клетках различных тканей в лизосомах и клетках различных тканей в лизосомах и вне их. Самая высокая концентрация вне их. Самая высокая концентрация кислой фосфатазы отмечается в кислой фосфатазы отмечается в предстательной железе (простатический предстательной железе (простатический изофермент)изофермент)


• Активность кислой фосфатазы сыворотки Активность кислой фосфатазы сыворотки крови низкая в нормальных условиях.крови низкая в нормальных условиях.

• У мужчин примерно наполовину состоит У мужчин примерно наполовину состоит из активности простатической фосфатазы, из активности простатической фосфатазы, остальная активность связана с ферментом, остальная активность связана с ферментом, происходящим из печени и разрушенных происходящим из печени и разрушенных тромбоцитов и эритроцитов. тромбоцитов и эритроцитов.

• У женщин кислая фосфатаза сыворотки У женщин кислая фосфатаза сыворотки происходит преимущественно из печени,происходит преимущественно из печени, эритроцитов и тромбоцитов.эритроцитов и тромбоцитов.


• Определение кислой фосфатазы в Определение кислой фосфатазы в сыворотке обычно используютсыворотке обычно используют для для выявления или мониторинга рака простаты выявления или мониторинга рака простаты у мужчину мужчин

Тартрат-резистентная кислая Тартрат-резистентная кислая фосфатаза (TRACP 5B) фосфатаза (TRACP 5B)

• TRACP5B – фермент, секретируемый TRACP5B – фермент, секретируемый исключительно остеокластамиисключительно остеокластами и и попадающий в повышенном количестве в попадающий в повышенном количестве в кровоток при увеличении количества и кровоток при увеличении количества и возрастании активности остеокластов. возрастании активности остеокластов.

• Определение уровня тартрат-Определение уровня тартрат-резистентной кислой фосфатазы 5в может резистентной кислой фосфатазы 5в может быть использовано в качестве маркера быть использовано в качестве маркера метастатическогометастатического поражения скелета. поражения скелета.

Холинэстераза Холинэстераза • В тканях человека обнаружены два различных В тканях человека обнаружены два различных

фермента этого типа:фермента этого типа: • ацетилхолинэстераза («истинная» ацетилхолинэстераза («истинная» холинэстераза; КФ холинэстераза; КФ

3.1.1.7), которая3.1.1.7), которая преимущественно находится в нервной преимущественно находится в нервной ткани, скелетных мышцах и в низкой концентрации в ткани, скелетных мышцах и в низкой концентрации в эритроцитах; эритроцитах;

• сывороточная сывороточная или или псевдохолинэстеразапсевдохолинэстераза, которая , которая широко распространена, присутствует в печени, широко распространена, присутствует в печени, поджелудочной железе, секретируется печенью в кровь. поджелудочной железе, секретируется печенью в кровь. Сывороточная холинэстеразаСывороточная холинэстераза является ферментом, является ферментом, катализирующим реакцию гидролиза ацетилхолинакатализирующим реакцию гидролиза ацетилхолина

ХолинэстеразаХолинэстераза

• Определение активности Определение активности холинэстеразы в сыворотке холинэстеразы в сыворотке представляетпредставляет наибольший наибольший клинический интерес как показатель клинический интерес как показатель состояния белково-синтезирующей состояния белково-синтезирующей функции печенифункции печени


• Снижение активности Снижение активности холинэстеразыхолинэстеразы наблюдается при наблюдается при тяжелыхтяжелых хронических заболеваниях хронических заболеваниях печени.печени.


• Повышение активности холинэстеразыПовышение активности холинэстеразы наблюдается при нефротическом синдроме наблюдается при нефротическом синдроме (усиление синтеза альбуминов печенью из-(усиление синтеза альбуминов печенью из-за быстрой потери мелкодисперсной за быстрой потери мелкодисперсной фракции белков с мочой)фракции белков с мочой)

• Повышение холинэстеразы может наблюдаться при:Повышение холинэстеразы может наблюдаться при:• ожиренииожирении• экссудативнойэкссудативной энтеропатии.энтеропатии.• артериальной гипертонии, артериальной гипертонии, • сахарном диабете, сахарном диабете, • столбняке, столбняке, • маниакально-депрессивном психозе, депрессивных маниакально-депрессивном психозе, депрессивных

неврозах, тревоге неврозах, тревоге •

Эластаза Эластаза

• Эластаза-1 (панкреатическая) является Эластаза-1 (панкреатическая) является протеолитическим ферментом, протеолитическим ферментом, синтезируется в ацинарных клетках синтезируется в ацинарных клетках поджелудочной железы иподжелудочной железы и экскретируется в экскретируется в просвет двенадцатиперстной кишки вместе просвет двенадцатиперстной кишки вместе с другимис другими ферментами, в виде ферментами, в виде предшественника – проэластазы, которая предшественника – проэластазы, которая активируется трипсином. Эластаза активируется трипсином. Эластаза абсолютно специфична для абсолютно специфична для поджелудочнойподжелудочной железы и не определяется железы и не определяется ни в каких других органах или тканяхни в каких других органах или тканях

Эластаза Эластаза

• Подобно другим панкреатическим Подобно другим панкреатическим ферментам (амилаза, липаза) показатель ферментам (амилаза, липаза) показатель эластазы панкреатической начинает эластазы панкреатической начинает увеличиваться в крови в острый период увеличиваться в крови в острый период панкреатита, что позволяет поставить панкреатита, что позволяет поставить диагноз этого заболевания.диагноз этого заболевания.

Общие правила работы с Общие правила работы с ферментамиферментами

1.1. Нельзя сильно встряхивать Нельзя сильно встряхивать растворы ферментов и растворы ферментов и допускать образование пены при допускать образование пены при их перемешивании, т. к. их перемешивании, т. к. ферменты при этом могут ферменты при этом могут инактивироваться в результате инактивироваться в результате воздействия на них кислорода воздействия на них кислорода воздуха.воздуха.


2. Растворенные, лиофильно высушенные 2. Растворенные, лиофильно высушенные реагенты, контрольные материалы и реагенты, контрольные материалы и контрольные сыворотки, содержащие контрольные сыворотки, содержащие ферменты, перед использованием ферменты, перед использованием необходимо выдержать при необходимо выдержать при комнатной температуре в течение комнатной температуре в течение времени, указанного в инструкции, времени, указанного в инструкции, чтобы фермент пришел в чтобы фермент пришел в конформационно- активное состояние.конформационно- активное состояние.

3. Время начала и окончания 3. Время начала и окончания ферментативной реакции ферментативной реакции следует фиксировать по следует фиксировать по секундомеру.секундомеру.

4. Температура рабочего 4. Температура рабочего реагента должна быть такой, реагента должна быть такой, как указано в инструкции.как указано в инструкции.


5. Не изменять соотношение 5. Не изменять соотношение рабочий реагент/сыворотка.рабочий реагент/сыворотка.

6. Нельзя разбавлять рабочий 6. Нельзя разбавлять рабочий реагент.реагент.

7. Фотометрирование следует 7. Фотометрирование следует проводить в указанном в проводить в указанном в инструкции диапазоне.инструкции диапазоне.


8. Длина оптического пути 8. Длина оптического пути кюветы должна кюветы должна соответствовать инструкции.соответствовать инструкции.

9. Калибровка для каждой 9. Калибровка для каждой серии обязательна.серии обязательна.

10. Тщательно мыть посуду, 10. Тщательно мыть посуду, наконечники, пипетки…наконечники, пипетки…


11. Следить за качеством воды11. Следить за качеством воды12. Использовать поверенные 12. Использовать поверенные

пипетки, особенно для пипетки, особенно для микропроб.микропроб.

13. Учитывать, что гемолиз 13. Учитывать, что гемолиз завышает содержание завышает содержание ферментов, а, хранение ферментов, а, хранение занижает.занижает.


14. Строго соблюдать условия 14. Строго соблюдать условия храненияхранения

15. Регулярно проверять 15. Регулярно проверять правильность и правильность и воспроизводимость рзультатов воспроизводимость рзультатов анализов по контрольным анализов по контрольным сывороткамсывороткам


Спектр ферментов, Спектр ферментов, определяемых в ИДЦопределяемых в ИДЦ

» Альфа амилаза (сыворотка и Альфа амилаза (сыворотка и моча);моча);

» Амилаза панкреатическая; Амилаза панкреатическая; » Аспартатаминотрансфераза; Аспартатаминотрансфераза; » Аланинаминотрансфераза;Аланинаминотрансфераза;» Фосфатаза щелочная ;Фосфатаза щелочная ;» Лактатдегидрогеназа;Лактатдегидрогеназа;» Гаммаглутамилтрансфераза ;Гаммаглутамилтрансфераза ;» Липаза ;Липаза ;» Холинэстераза .Холинэстераза .

Спасибо за вниманиеСпасибо за внимание!!

Documents

Ф Е Р М Е Н Т Ы