« Aide soignante dans un centre hospitalier, vous assurez les soins d’hygiène de Mme Durand, 88 ans, hospitalisée dans le service de gériatrie. Mme Durand a de la fièvre, ses urines ont été prélevées et envoyées au laboratoire de bactériologie pour identifier le ou les germes responsables d’une éventuelle infection.

Vous expliquez à une élève de BEP Carrières Sanitaires et Sociales en stage dans le service, en quoi consiste une coloration de Gram et l’intérêt de cette coloration. »

« Agent Technique d’Alimentation dans une entreprise agro-alimentaire, vous assurez l’hygiène des produits et des matériels. Des prélèvements réguliers sont effectués et envoyés à un laboratoire d’analyse pour vérifier l’absence de biocontaminations.

Vous expliquez à une élève de BEP Bioservices en stage dans votre structure, en quoi consiste une coloration de Gram et l’intérêt de cette coloration. »

Diapositive suivante , cliquer

L’identification permet d’ orienter ou de

confirmer un diagnostic de contamination, afin d’adapter au mieux un

traitement efficace

Pour mettre en évidence et identifier

le ou les germes bactériens

responsables d’une infection/contaminatio

n

Pour identifier et classer

les bactéries selon deux critères :

- Leur affinité pour les colorants :

bactéries gram + et gram -

- Leur forme

à la flamme du bec bunsen

Cette opération se réalise

dans la zone stérile d’un bec bunsen

Anse de platine

stérilisée par

chauffage au rouge

Prélever une goutte de yaourt

avec l’anse de platine refroidie

Prélèvement de l’échantillon

Etalement à l’anse de platine:

L’étalement doit être aussi mince que possible

Déposer la goutte de yaourt dans la goutte d’eau

avec un mouvement de rotation

Lame

propre

et dégraissée

Si l’échantillon est épais:

le diluer dans une

goutte d’eau stérile

Porte LameBac à coloration

Stériliser l’anse de platineÀ la flamme du bec bunsen

Séchage du frottis

Laisser sécher la lame en la maintenant dans l’air chaud de la veilleuse du bec

bunsen

Eteindre le bec

bunsen !

Fixation du frottis à l’alcool

Recouvrir la lame d’alcool à 95°

pendant 5 minutes

Laisser évaporer l’alcool résiduel.

Alcool

Egoutter la lame

2ème possibilité: Fixation du frottis par la chaleur

Passer rapidement la face de la lame, frottis séché sur le dessus, en écrasant la flamme 3 fois