- Citogenética y FISH en Leucemias .· Desarrollo de la Exposición •Generalidades de Citogenética

Contribucin y avances del laboratorio en el diagnstico y seguimiento de Leucemias agudas

- Citogentica y FISH en Leucemias Agudas.

Dr. Pablo Lpez.

Desarrollo de la Exposicin

Generalidades de Citogentica y FISH

Leucemias Agudas Linfoides Estatus de Ploida

Traslocaciones especficas

Leucemias Agudas Mieloides

Conclusiones

Leucemias Agudas

Las Leucemias Agudas es una categora de enfermedades con una presentacin clnica agresiva comn cuyo pronstico y tratamiento es dependiente de las caractersticas genticas subyacentes de la neoplasia.

Evaluacin Gentica

Citogentica

FISH

Biologa Molecular

Evaluacin Perfil de Expresin Proteica

Citometra de Flujo

Identificacin del Clon Anmalo /s

Citogentica y FISH en Leucemias Agudas.

Tcnicas especializadas que evalan la composicin gentica del individuo.

Citogentica: Ordenamiento y Anlisis del componente cromosmico.

FISH: Hibridacin In Situ Fluorescente. Tcnica que permite detectar ganancias, prdidas y reordenamientos gnicos especficos.

1 banda cromosmica de ms o menos 10.000.000 pares de bases (107).

1 sonda de FISH alrededor de 100.000 a 700.000 pares de bases (105).

Resolucin

Leucemias Agudas

Mieloides

Linfoides

Leucemias Linfoides Agudas

World Health Organization classification of myeloid

neoplasms and acute leukemia

B-lymphoblastic leukemia/lymphoma B-lymphoblastic leukemia/lymphoma, NOS B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with recurrent genetic abnormalities

B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(9;22)(q34.1;q11.2);BCR-ABL1 B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(v;11q23.3);KMT2A rearranged B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(12;21)(p13.2;q22.1); ETV6-RUNX1 B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with hyperdiploidy B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with hypodiploidy B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(5;14)(q31.1;q32.3) IL3-IGH B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(1;19)(q23;p13.3);TCF3-PBX1

Provisional entity: B-lymphoblastic leukemia/lymphoma, BCR-ABL1like Provisional entity: B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with iAMP21

T-lymphoblastic leukemia/lymphoma Provisional entity: Early T-cell precursor lymphoblastic leukemia Provisional entity: Natural killer (NK) cell lymphoblastic leukemia/lymphoma

Leucemias Linfoides Agudas

Estatus de Ploida Cromosmica

NMERO DE CROMOSOMAS

n

2n

3n

4n

23 crom

92 crom

46 crom

69 crom

n 2n 23 crom

46 crom

2n+35

2n+20

2n+3

46 + 3= 49

46 + 20= 66

46 + 35= 81

n 2n 23 crom

46 crom

2n-12

2n-3 46 - 3= 43

46 - 12= 34

POLIPLOIDAS

HIPERPLOIDAS

HIPOPLOIDAS

Estatus de Ploida en LAL Hiperdiploidas Hiperdiploidas mayor a 50 cromosomas Perfil cromosomico no aleatorio: +X, +4, +6, +10, +14, +17,

+18, +21,+2

Es importante el tipo de Hiperdiploida?

Hipodiploidas severas/cercanas a triploidas

Estatus de Ploida en LAL Hipodiploidas

Anomalas cromosmicas especficas

DELECCIONES

Leucemias Linfoides Agudas

INVERSIONES

TRASLOCACIONES

Traslocacin (9;22)(q34;q11) Cromosoma Ph

Traslocaciones MLL/ KMT2A 11q23

t(4;11)(q21;q23)

LAL Traslocacin 1;19

El tratamiento agresivo cambio el mal pronstico natural de la enfermedad

Gen de Fusin TCF3-PBX1

Leucemia Aguda Linfoide

Leucemias Mieloides Agudas

Acute myeloid leukemia (AML) and related neoplasms AML with recurrent genetic abnormalities AML with t(8;21)(q22;q22.1);RUNX1-RUNX1T1 AML with inv(16)(p13.1q22) or t(16;16)(p13.1;q22);CBFB-MYH11 APL with PML-RARA AML with t(9;11)(p21.3;q23.3);MLLT3-KMT2A AML with t(6;9)(p23;q34.1);DEK-NUP214 AML with inv(3)(q21.3q26.2) or t(3;3)(q21.3;q26.2); GATA2, MECOM AML (megakaryoblastic) with t(1;22)(p13.3;q13.3);RBM15-MKL1

Provisional entity: AML with BCR-ABL1 AML with mutated NPM1

AML with biallelic mutations of CEBPA

Provisional entity: AML with mutated RUNX1

AML with myelodysplasia-related changes Therapy-related myeloid neoplasms

AML, NOS

AML with minimal differentiation

AML without maturation

AML with maturation

Acute myelomonocytic leukemia Acute monoblastic/monocytic leukemia Pure erythroid leukemia

Acute megakaryoblastic leukemia Acute basophilic leukemia Acute panmyelosis with myelofibrosis

Myeloid sarcoma

Myeloid proliferations related to Down syndrome Transient abnormal myelopoiesis (TAM)

Myeloid leukemia associated with Down syndrome

Leucemia Mieloide Aguda

Anomalas Citogenticas Recurrentes (WHO 2008). t(15;17)(q22;q12), PML-RAR

t(8;21)(q22;q22), RUNX1-RUNX1T

inv(16)(p13.1q22) - t(16;16) (p13.1;q22), CBFB-MYH11

Diagnstico de LMA con blastos menores a 20% en sangre perifrica o mdula sea.

t(9;11)(p22;q23), t(6;9)(p23;q34), inv(3)(q21q26), t(3;3) (q21;q26), t(1;22)(p13;q13)

LAM M3- Promieloctica

t(15;17)(q22;q12), PML-RAR

Coagulopata con un elevado riesgo de mortalidad.

El pronstico de la leucemia promieloctica aguda es muy bueno si se trata adecuadamente.

LAM M2-M4

t(8;21)(q22;q22), RUNX1-RUNX1T

inv(16)(p13.1q22) - t(16;16) (p13.1;q22), CBFB-MYH11

CORE BINDING FACTOR

Maduracin celular

BUEN PRONSTICO

Remisin complete en el 90% con relativamente larga sobrevida libre de enfermedad cuando es tratado con quimioterapia a altas dosis.

t(6;9)(p23;q34)

t(9;11)(p22;q23) Riesgo Intermedio

Mal Pronstico

Datos

306 LAM 50% de Cariotipos Anormales

5-10% de APM, No Analizables.

40% de Cariotipos Normales.

Anomala Cromosmica

Frecuencia Relativa (%)

t(15;17) 13,2

t(8;21) 7

Inv(16) o t(16;16) 5

t(9;11) 1

t(6;9) 1

+8 10

+21 2,5

Clasificacin de Riego de LAM

Citogentica vs FISH

CITOGENTICA FISH

t(8;21) t(15;17) t(16;16) Inv(16;16) t(9;22) Ph

Traslocaciones especficas Reordenamiento 11q23

t(12,21) t(4;11)

Falla en obtencin de metafases

Hiperdiploidas Hipodiploidas Secundarias a tratamiento Traslocaciones especficas

de baja frecuencia o sin clnica o Citometra sugestiva

Muchas Gracias Dr. Pablo Lpez

Prof. Adj. Depto. Inmunologa y Biologa Molecular

Citogentica Hematolgica. Asociacin Espaola Primera en Salud