- Citogenética y FISH en Leucemias .· Desarrollo de la Exposición •Generalidades de Citogenética

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  • Contribucin y avances del laboratorio en el diagnstico y seguimiento de Leucemias agudas

    - Citogentica y FISH en Leucemias Agudas.

    Dr. Pablo Lpez.

  • Desarrollo de la Exposicin

    Generalidades de Citogentica y FISH

    Leucemias Agudas Linfoides Estatus de Ploida

    Traslocaciones especficas

    Leucemias Agudas Mieloides

    Conclusiones

  • Leucemias Agudas

    Las Leucemias Agudas es una categora de enfermedades con una presentacin clnica agresiva comn cuyo pronstico y tratamiento es dependiente de las caractersticas genticas subyacentes de la neoplasia.

    Evaluacin Gentica

    Citogentica

    FISH

    Biologa Molecular

    Evaluacin Perfil de Expresin Proteica

    Citometra de Flujo

    Identificacin del Clon Anmalo /s

  • Citogentica y FISH en Leucemias Agudas.

    Tcnicas especializadas que evalan la composicin gentica del individuo.

    Citogentica: Ordenamiento y Anlisis del componente cromosmico.

    FISH: Hibridacin In Situ Fluorescente. Tcnica que permite detectar ganancias, prdidas y reordenamientos gnicos especficos.

  • 1 banda cromosmica de ms o menos 10.000.000 pares de bases (107).

    1 sonda de FISH alrededor de 100.000 a 700.000 pares de bases (105).

    Resolucin

  • Leucemias Agudas

    Mieloides

    Linfoides

  • Leucemias Linfoides Agudas

    World Health Organization classification of myeloid

    neoplasms and acute leukemia

    B-lymphoblastic leukemia/lymphoma B-lymphoblastic leukemia/lymphoma, NOS B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with recurrent genetic abnormalities

    B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(9;22)(q34.1;q11.2);BCR-ABL1 B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(v;11q23.3);KMT2A rearranged B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(12;21)(p13.2;q22.1); ETV6-RUNX1 B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with hyperdiploidy B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with hypodiploidy B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(5;14)(q31.1;q32.3) IL3-IGH B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with t(1;19)(q23;p13.3);TCF3-PBX1

    Provisional entity: B-lymphoblastic leukemia/lymphoma, BCR-ABL1like Provisional entity: B-lymphoblastic leukemia/lymphoma with iAMP21

    T-lymphoblastic leukemia/lymphoma Provisional entity: Early T-cell precursor lymphoblastic leukemia Provisional entity: Natural killer (NK) cell lymphoblastic leukemia/lymphoma

  • Leucemias Linfoides Agudas

    Estatus de Ploida Cromosmica

    NMERO DE CROMOSOMAS

    n

    2n

    3n

    4n

    23 crom

    92 crom

    46 crom

    69 crom

    n 2n 23 crom

    46 crom

    2n+35

    2n+20

    2n+3

    46 + 3= 49

    46 + 20= 66

    46 + 35= 81

    n 2n 23 crom

    46 crom

    2n-12

    2n-3 46 - 3= 43

    46 - 12= 34

    POLIPLOIDAS

    HIPERPLOIDAS

    HIPOPLOIDAS

  • Estatus de Ploida en LAL Hiperdiploidas Hiperdiploidas mayor a 50 cromosomas Perfil cromosomico no aleatorio: +X, +4, +6, +10, +14, +17,

    +18, +21,+2

  • Es importante el tipo de Hiperdiploida?

    Hipodiploidas severas/cercanas a triploidas

  • Estatus de Ploida en LAL Hipodiploidas

  • Anomalas cromosmicas especficas

    DELECCIONES

    Leucemias Linfoides Agudas

    INVERSIONES

    TRASLOCACIONES

  • Traslocacin (9;22)(q34;q11) Cromosoma Ph

  • Traslocaciones MLL/ KMT2A 11q23

    t(4;11)(q21;q23)

  • LAL Traslocacin 1;19

    El tratamiento agresivo cambio el mal pronstico natural de la enfermedad

    Gen de Fusin TCF3-PBX1

  • Leucemia Aguda Linfoide

  • Leucemias Mieloides Agudas

    Acute myeloid leukemia (AML) and related neoplasms AML with recurrent genetic abnormalities AML with t(8;21)(q22;q22.1);RUNX1-RUNX1T1 AML with inv(16)(p13.1q22) or t(16;16)(p13.1;q22);CBFB-MYH11 APL with PML-RARA AML with t(9;11)(p21.3;q23.3);MLLT3-KMT2A AML with t(6;9)(p23;q34.1);DEK-NUP214 AML with inv(3)(q21.3q26.2) or t(3;3)(q21.3;q26.2); GATA2, MECOM AML (megakaryoblastic) with t(1;22)(p13.3;q13.3);RBM15-MKL1

    Provisional entity: AML with BCR-ABL1 AML with mutated NPM1

    AML with biallelic mutations of CEBPA

    Provisional entity: AML with mutated RUNX1

    AML with myelodysplasia-related changes Therapy-related myeloid neoplasms

    AML, NOS

    AML with minimal differentiation

    AML without maturation

    AML with maturation

    Acute myelomonocytic leukemia Acute monoblastic/monocytic leukemia Pure erythroid leukemia

    Acute megakaryoblastic leukemia Acute basophilic leukemia Acute panmyelosis with myelofibrosis

    Myeloid sarcoma

    Myeloid proliferations related to Down syndrome Transient abnormal myelopoiesis (TAM)

    Myeloid leukemia associated with Down syndrome

  • Leucemia Mieloide Aguda

    Anomalas Citogenticas Recurrentes (WHO 2008). t(15;17)(q22;q12), PML-RAR

    t(8;21)(q22;q22), RUNX1-RUNX1T

    inv(16)(p13.1q22) - t(16;16) (p13.1;q22), CBFB-MYH11

    Diagnstico de LMA con blastos menores a 20% en sangre perifrica o mdula sea.

    t(9;11)(p22;q23), t(6;9)(p23;q34), inv(3)(q21q26), t(3;3) (q21;q26), t(1;22)(p13;q13)

  • LAM M3- Promieloctica

    t(15;17)(q22;q12), PML-RAR

    Coagulopata con un elevado riesgo de mortalidad.

    El pronstico de la leucemia promieloctica aguda es muy bueno si se trata adecuadamente.

  • LAM M2-M4

    t(8;21)(q22;q22), RUNX1-RUNX1T

    inv(16)(p13.1q22) - t(16;16) (p13.1;q22), CBFB-MYH11

    CORE BINDING FACTOR

    Maduracin celular

    BUEN PRONSTICO

    Remisin complete en el 90% con relativamente larga sobrevida libre de enfermedad cuando es tratado con quimioterapia a altas dosis.

  • t(6;9)(p23;q34)

    t(9;11)(p22;q23) Riesgo Intermedio

    Mal Pronstico

  • Datos

    306 LAM 50% de Cariotipos Anormales

    5-10% de APM, No Analizables.

    40% de Cariotipos Normales.

    Anomala Cromosmica

    Frecuencia Relativa (%)

    t(15;17) 13,2

    t(8;21) 7

    Inv(16) o t(16;16) 5

    t(9;11) 1

    t(6;9) 1

    +8 10

    +21 2,5

  • Clasificacin de Riego de LAM

  • Citogentica vs FISH

    CITOGENTICA FISH

    t(8;21) t(15;17) t(16;16) Inv(16;16) t(9;22) Ph

    Traslocaciones especficas Reordenamiento 11q23

    t(12,21) t(4;11)

    Falla en obtencin de metafases

    Hiperdiploidas Hipodiploidas Secundarias a tratamiento Traslocaciones especficas

    de baja frecuencia o sin clnica o Citometra sugestiva

  • Muchas Gracias Dr. Pablo Lpez

    Prof. Adj. Depto. Inmunologa y Biologa Molecular

    Citogentica Hematolgica. Asociacin Espaola Primera en Salud