血细胞检验技术

Detection technique for blood cells

内蒙古民族大学临床医学院 赵文海

一、骨髓象检验

Bone marrow image test

1. 诊断某些疾病：高雪氏病、巨幼 贫、 AA 、某些白血病、 MM 等2. 协助诊断疾病：癌症转移、 MDS IDA( 染色 ) 、溶贫、脾功能亢进等3. 提高疾病的诊断：寄生虫、黑热 病、疟原虫、干细胞培养、细菌 培养等

( 一 ) 检验的目的

( 二 ) 标本的采集

1. 部位：2. 体位：3. 器材：4. 方法：5. 推片：

二、检验的方法

Test method

( 一 )BM 片 bone marrow smear

1. 肉眼观： a. 推片 : 推片的质量 . b. 油珠 ( 染色前 ): 反应红、黄骨 髓的情况 c.BM 小粒：验证是否是骨髓组织

Bone marrow smear

Bone marrow smear

2. 低倍镜观察： BM 的总体情况

a. 增生程度： 1:1 、 1:10 、 1:20 、 1:50 、 1:200 b. 估计巨核细胞数： 7-35 个 / 1.5×3cm2

c. 观察边缘、尾部：有关异常细 胞及寄生虫。

subocoloration

hyperocoloration

Polar hypoplasia

Polar hyperplasia

Polar hyperplasia

hyperplasia

Obvious proliferation

a.  观察细胞形态，b. 对有核细胞进行分类 (200-500 个细胞 ) ，增生越活跃，分类的细胞数应该越多

3. 油镜 oil lens

三、结果计算 Count of results

1. 粒、红比例，2. 各阶段细胞所占比例。

四、正常 BM 象条件 The condition of normal bone marrow image

1. 增生程度：活跃 ； 粒：红 =3-4:1 2. 各系，各阶段细胞比例大致 正常 3. 各系，各阶段细胞形态大致 正常 4. 无其他异常细胞及寄生虫

五、填写检验报告单

1. 比例： G∶E ；各种细胞的比例 （ 在急性白血病中需计算非红系细 胞的比例即先除去红细胞后再计算 各种细胞的比例）。 2.BM 评价：染色、推片、细胞分布。 3. 描述：要在诊断的意向下描述。 4. 诊断意见：确诊、提示、建议等。

1.BM 象相似，而血象有区别：溶贫， IDA 2.BM 象不同，而血象相似：传淋与慢淋 非白血性白血病与 AA 。 3.BM 象变化不大，而血象有显著改变： 传单。 4.BM 象变化大，而血象无大变化： MM 高雪氏病 5.BM 细胞难辩认，而血象细胞易辩认 ( 从血象细胞推断 BM 细胞的种类 )

五、 BM 象与血象同步分析的重要性

1. 综合判断：三方面、九特点。 2. 原始细胞归类要借助组化染色。 3. 处于两阶段之间的细胞往成熟方向划分 4. 大数法则的应用：即在两种细胞间的细 胞，往比例大的细胞群划分。 5. 分类不明。 6. 破碎细胞的描述。

六、 BM 检查的注意事项Paying attention PointS

1.增生程度2.粒∶红3.粒系改变： 增多； 减低 .4. 红系改变 :

增多 ; 减低 .

七、 BM 象分析：

八、血细胞的发育与成熟

Development and maturity of blood cells

1. 血细胞增殖与分化

2. 血细胞的成熟

造血细胞的生成

3. 血细胞的形态特征the morphologic characteristics of blood cells A.按形态特征分：不可辨认细胞如干细 胞、祖细胞（这些细胞可通过培养进 行集落鉴定）与可辨认细胞 ( 原始以下 细胞 )B.依种类分：红 C 、粒 C 、淋巴 C 、巨核系 单核系C.以功能分种类很多D. 各种细胞均在中幼以后无分化能力

可归纳为三方面九特点morphologic characteristics

A. 胞体：大小、边缘、形状B. 胞浆：多少、颗粒、颜色C. 胞核：染色质、核仁、形状

特别注意

1.颗粒： S 颗粒：（或称特异性颗粒） 嗜碱、嗜硷、嗜中颗粒； A 颗粒（非 特异性颗粒）。2. 原红、原粒的区别3. 大淋巴细胞与中幼红的区别4. 单核细胞的特点

组织细胞形态

Fat.ED.FC.MC及组织嗜酸 or嗜碱Cell

Histiocytes

组化染色

( 一 ) 原理

用不同的方法使细胞内的某种不能观察的特异性物质 (Pr酶，金属离子，糖，核酸，脂质等 )着色，以达到判断细胞类型和阶段的目的。

1. 小分子（功能透过膜）2.只与某一种物质起反应3. 生成的产物有特定的颜色4. 生成的产物在细胞内溶解 度极低

( 二 ) 染料的要求

主要的染色方法

PAS 、 POX 、 ALP 、 Fe+++ 染色， NE+NaF 如急性白血病，原始细胞占 90%以上。先做 POX 染色，如为阴性则为急淋，若POX （ + ） 则为急非淋；阳性者再做非脂酶染色，若 为阳性则为急粒，若为阴性，再加氟化钠 抑制，若为阴性则为急单，若为阳性则为 急粒。PAS ：主要鉴别红血病 (+) 与巨幼 A （一）ALP ：主要鉴别类白血病反应（ ++）与慢粒（一）

POX 染色

NAP 染色

POX

碱磷酶染色

非脂酶非脂酶

Hisitochemistry coloration

急淋 POX

白血病 急单

急非淋

脂酶 急粒