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Editorial Los estudios de investigación en transformación de materias primas vegetales y valorización de residuos a partir de los diversos materiales vegetales de la biota colombiana son importantes por su interés para el consumo humano e industrial. Los residuos sólidos orgánicos ocupan en el mundo un lugar prioritario desde el punto de vista cualitativo y cuantitativo, porque constituyen más del 85% de los residuos agrícolas y un porcentaje no despreciable de los residuos agroindustriales son una fuente importante de metabolitos secundarios. Es por esto que su aprovechamiento es una práctica que poco a poco ha tomando fuerza porque al crear alternativas para su uso, estas se traducen en la reducción sustancial del volumen de lo que se considera residuos. A las conocidas alternativas de producción de energía por incineración, producción de biogás, transformación para alimentación animal y la preparación de compost para acondicionar suelos, se han sumando poco a poco nuevas ideas para reciclar estos residuos y para obtener productos de alto valor añadido como son las vitaminas y antioxidantes. Estos últimos son capaces de neutralizar los radicales libres que son moléculas inestables que tienen un electrón desapareado, son consecuencia del metabolismo o llegan al organismo desde afuera. Muchas de las enfermedades degenerativas son

el producto de una larga exposición a estas entidades químicas. Por lo tanto todos los esfuerzos en la consecución de fuentes promisorias par la producción de antioxidantes bien a partir de procesos industriales o biotecnológicos son un valioso aporte desde el punto de vista nutricional o farmacéutico. Este quinto número de Aliméntica recoge algunas iniciativas en el tema de uso de la biomasa como materia prima para la producción de sustancias con propiedades funcionales e ilustra el creciente interés del programa de ingeniería de alimentos en el tema de aprovechamiento de los recursos agroindustriales, en este caso residuos de origen vegetal.

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Marañón un recurso valioso para el Aprovechamiento Industrial en Colombia Ligia Inés Rodríguez Programa de Ingeniería de Alimentos

El marañón es una planta de alto valor nutritivo, medicinal e industrial que se encuentra creciendo naturalmente en las extensas sabanas de la Orinoquía colombiana y parte de las sabanas del Caribe. Por el gran potencial que presenta en el mercado, su gran adaptación a suelos muy pobres, y por existir en estas regiones las condiciones de clima (temperatura, precipitación, humedad relativa) que requiere el cultivo, condiciones que no permiten el desarrollo satisfactorio de la mayoría de los cultivos,(Arango, 2003). El marañón se ha identificado como una excelente alternativa agroindustrial para las regiones de sabanas tropicales de Colombia. El marañón ha sido incluido en la apuesta exportadora del Ministerio de Agricultura con una expectativa de crecimiento de 11.469 hectáreas para el 2010, lo que representaría un aumento del 300% del área sembrada que equivaldría en plena producción a unas 7.000 toneladas de Nuez al año. (Minagricultura, Apuesta exportadora) De los diferentes productos del marañón, el de mayor comercio es la

nuez descascarada o almendra, la cual se cotiza según diversas calidades, que están definidas por el tamaño, color, humedad, y grado de partido, las importaciones mundiales se han incrementado en forma sostenida, y los principales países demandantes son Estados Unidos con una importación anual de 71.5 Mil TM (US $ 431 Millones) y la Unión Europea que importa 50 Mil TM (US $ 235 Mill.), entre los países de la Unión Europea destacan, Holanda, Alemania, Francia y el Reino Unido. En la Orinoquía entre las décadas del 60 y 70 se sembraron 450 hectáreas en el Meta y más recientemente unas 700 hectáreas y 500 en el Vichada. En el municipio de Chinu (Córdoba) se establecieron 150 hectáreas de marañón semilla que se explotan ocasionalmente y en la actualidad un proyecto de Alianza productiva de nuevas 150 hectáreas para un total de 300 hectáreas en esta región. El MADR en su documento de Apuesta exportadora 2006-2020, reporta para el año 2006 un total de 2986 hectáreas y unas 1000 toneladas de nuez producidas en todo el territorio nacional. Toda esta área de cultivo, por tratarse de marañón de semilla, presenta bajos rendimientos que varían desde 50 kilos por hectárea hasta máximo 600 Kg. en explotaciones bien manejadas y bajo condiciones optimas de clima y suelos. El árbol de marañón se destaca entre los frutales tropicales, debido a la comercialización de sus productos principalmente las almendras o nueces. La nuez del marañón esta constituida de la cáscara, la almendra y la película adherida a la almendra, cada una de ellas con uso importante en la industria.

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La almendra tiene en el mercado mundial un alto valor comercial. Actualmente existe gran preocupación por el desarrollo de tecnologías para el procesamiento del marañón, en el mundo y especialmente en Brasil se han logrado importantes avances en el procesamiento del fruto para el propósito comercial de obtención de la nuez (Arango, 2003). La nuez de marañón, que es el fruto real, es de forma arriñonada, con un largo que varía entre 2.5 y 3.5 cm. de ancho y entre 1.0 y 1.5 cm. de grosor. El peso varía entre 5 y 6 g. El producto principal de la nuez es la almendra que se obtiene al eliminar la cáscara de la nuez entera. La cadena agroindustrial del marañón se centra en la producción de almendras que tienen gran aceptación en el mercado mundial y cuya valoración se basa en escalas de calidad asociadas a las variedades y a las prácticas de Procesamiento,(Cashew export promotion council), la rentabilidad de esta agroindustria deberá analizarse a la luz del rendimiento agronómico, pero también del aprovechamiento integral del fruto, pues el pedúnculo modificado o seudo fruto es susceptible de ser transformado en una amplia variedad de productos alimenticios, con un importante contenido de vitamina C (200 mg/100 g de pedúnculo; Menezes y Alves 1995) y de otros antioxidantes valiosos como vitamina A (10,8 UI: Santos et al 2007) y con posibilidad también de acceder al mercado mundial. El seudo fruto (Cashew apple) es reconocido por su alto contenido de vitamina C, cuatro veces mas que el jugo de naranja (200 mg. /100 g de pedúnculo; Menezes y Alves 1995),

vitamina A (10,8 UI; Santos et al 2007), así como por su aroma y su sabor. La composición del seudo fruto o pedúnculo es muy compleja, contiene vitaminas, taninos, minerales, ácidos orgánicos y carbohidratos lo que hace que tenga importancia nutricional (FAO 1986); sin embargo su valor nutricional es responsable de su alta perecibilidad exigiendo especial cuidado en el almacenamiento, transporte, limpieza y procesamiento (Crisóstomo 1991). En Brasil la producción del pedúnculo es de aproximadamente de 1,5 millones de toneladas por año de las cuales solamente el 6% se aprovecha (Moura 1998); su baja explotación esta asociada con su rápido deterioro. Se han estudiado algunas formas de procesamiento dentro de las cuales están productos como jugos y néctares (Costa et al 2003), deshidratados osmóticamente, vinos, vinagre, dulces y mieles entre otros (Arango L. 2007). El principal producto del procesamiento del pedúnculo es el jugo al cual se le atribuyen propiedades antitumorales (Kubo et al., 1993); el mayor inconveniente asociado al consumo de productos obtenidos de seudo fruto, es la astringencia, atribuible a la presencia de taninos, problema que se ha podido solucionar mediante tratamientos con vapor directo, lavados en solución Salina como medio de cultivo para la producción de biosurfactantes (Rocha et al., 2006). Se han realizado estudios para conocer el contenido de ácidos anacárdicos, cardanoles y cardol tanto en la nuez como en el seudo fruto,

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concentrándose principalmente en el líquido de la cáscara de la nuez y en la fibra del seudo fruto, con un menor contenido en la nuez; a estas sustancias se atribuye propiedades antioxidantes, antitumorales (Kubo et al 1993), antimicrobianas (Muroi y Kubo 1993) y antimutagénicas (Cavalcante et al, 2003). Las propiedades antioxidantes de los componentes del extracto de la cáscara de la nuez han sido descritas por varios autores (Kubo et al 1993), pero es reconocido para la mayoría de estos compuestos una relación entre las condiciones de siembra, las variedades, las condiciones ambientales y el contenido de los principios activos, por lo tanto es importante la determinación propia de esta actividad para correlacionarla con el material genético disponible y las condiciones de cultivo (Assunciao y Mercadante, 2003). Referencias Bibliográficas Arango, L. V. Y Roman, C. A. 2007. Marañón (Anacardium Occidentale L.) Tecnologías De Producción E Industrialización Para La Orinoquia Colombiana Manual Técnico Villavicencio, Meta. Colombia. En Prensa. Arango, L. V. 2003. Ajuste Y Validación De Tecnología Para El Cultivo Y La Poscosecha Del Marañón En La Altillanura Bien Drenada Del Vichada. Informe Final. CORPOICA-PRONATTA. C.I. La Libertad, Villavicencio, Meta, Colombia. On Line: Http://Pronatta.Gov.Co/Proyectos/Regiones/Proy_Vich.Php

Assunciao, R. B., & Mercadante, A. Z. (2003). Carotenoids And Ascorbic Acid From Cashew Apple (Anacardium Occidentale L.): Variety And Geographiceffec Ts. Food Chemistry, 81, 495–502. Cavalcante, A.A.M., Rubensam, G., Picada, J.N., Silva, E.G., Moreira, J.C.F., Henriques, J.A.P., (2003). Mutagenicity, Antioxidant Potential, And Antimutagenic Activity Against Hydrogen Peroxide Of Cashew (Anacardium Occidentale) Apple Juice And Cajuina. Environmental And Molecular Mutagenesis 41, 360–369. Costa, Maria Cecília Oliveira, Maia, Geraldo Arraes, Figueiredo, Raimundo Wilane De Et Al. Storage Stability Of Cashew Apple Juice Preserved By Hot Fill And Aseptic Processes. Ciênc. Tecnol. Aliment. [Online]. [Cited 2007-02-12], Pp. 106-109. Crisóstomo, J. R. (1991). Avanc¸Os Tecnológicos E Desafios Atuais Do Agronegocio Caju No Nordeste Do Brasil. Fortaleza, Brasil: EMBRAPA/CNPAT. FAO - Food And Agricultural Organization. (1986). Food And Fruitbearing Forest Species. 3. Examples From Latin America. FAO-Foresty Paper 44/3. Rome. Kubo, I., Ochi, M., Vieira, P.C., Komatsu, S., (1993). Antitumor agents from the cashew (Anacardium occidentale) apple juice.

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Menezes, J.B., Alves, R.E., (1995). Physiology and postharvest technology of cashew apple. Fortaleza: EMBRAPA-CMPAT [Document, 17] (Portuguese). Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. 2007. Apuesta Exportadora Agropecuaria, Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural 2006 – 2020. Disponible en: http://www.minagricultura.gov.co/18_descargas/documentos/APUESTAEXPORTADORA.pdf. Acceso en Febrero 2007. Muroi, H., Kubo, I., (1993). Bactericidal activity of anacardic acids against Streptococcus mutans and their potentiation. Journal of Agricultural Food Chemistry 41, 1780–1783. Rocha Maria V. P. , Oliveira Adriano H. S. 1, Souza Maria C. M. 1 and Gonçalves Luciana R. B. 1(2006),

Natural cashew apple juice as fermentation medium for biosurfactant production by Acinetobacter calcoaceticus . World Journal of Microbiology and Biotechnology. Volume 22, Number 12 / December 1295-1299.

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Producción De Biomasa A Partir Del Hongo Geotrichum Sp. En Fermentación En Fase Líquida Para Suplementar Alimento Para Aves D. Hernández, L. Piñeros, V. Ways

Universidad Jorge Tadeo Lozano Programa de Ingeniería de Alimentos Área Biotecnología http://www.utadeo.edu.co

Abstract The Geotrichum sp. fungus was cultivated using a yeast extract, glucose and cloranphenicol as an agar medium to facilitate the fungus’ isolation. Afterwards, it was replicated several times on PDA, YGC and malt extract until a pure cultivation was obtained. It was also replicated on a liquid medium adjusting the pH to 4.6 using glucose and lactate as a carbon source. A protein test was carried out using the Kjeldahl method (AOAC, 1995), which was 4.353% on dry weight and 21.768% on wet weight. The biomass obtained from the three glucose-cultivated samples was used to carry out a humidity test (AOAC, 1995) and a 97.937% relative humidity was obtained. Finally a sugar test was carried out to determine the sample’s substrate consumption. The fungus’ growth kinetics study is important as far as carbon and nitrogen sources go. Thus two media were compared: peptone-based media, one supplemented with lactate and the other with glucose, since it has been previously shown that some

amino acids can be metabolized not only as nitrogen sources but also as carbon and energy source (Adour, 2002). Keywords: Geotrichum sp., Biomass, Liquid medium

Resumen

Se cultivó el hongo Geotrichum sp. utilizando como medio agar de extracto de levadura, glucosa y cloranfenicol para facilitar el aislamiento del hongo. Luego se replicó en PDA, YGC y extracto de malta, varias veces hasta obtener un cultivo puro, igualmente se realizó replica en medio líquido ajustando el pH a 4.6. Se utilizaron como fuente de carbono glucosa y lactato. Se hizo prueba de proteínas por medio del método de Kjeldahl (AOAC, 1995) los cuales fueron de 4.353% en peso seco y de 21.768% en peso húmedo. Se tomó la biomasa obtenida de tres muestras cultivadas en medio de glucosa y se realizó prueba de humedad (AOAC, 1995) y se obtuvo una relativa de 97.937%. Por último se hizo una prueba de azúcares para poder determinar el consumo de sustrato de la muestra. 1. Introducción En la actualidad crecen las exigencias de la producción agropecuaria en alimentos. Los recursos biológicos pueden constituir fuentes no tradicionales de materia prima para la alimentación animal; el Geotrichum candidum ofrece una posibilidad de producción de biomasa con considerables contenidos de proteína que pueden ser un suplemento

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eficiente en la alimentación animal y en especial para nuestro caso el de las gallinas (www.intep.edu.co). Desde las décadas de los sesentas y setentas ha habido un gran estímulo por la producción de proteína unicelular a través de la salud de alimentos y la agricultura por miedo a una escasez de proteína mundial. En los países altamente desarrollados los niveles de vida han originado una creciente demanda de proteínas de alta calidad para satisfacer todos los requerimientos nutricionales. Es por esto que la proteína unicelular es una alternativa válida a Algunas de estas fuentes tradicionales, reduciendo el consumo de soya, harinas de pescado y cereales. (biocity.iespana.es, 2001). Hay muchas ventajas en la producción de biomasa microbiana. Entre ellas está el hecho que los microorganismos poseen una alta tasa de multiplicación además de un alto contenido de proteína 55-60 % y hasta un 15 % de ácidos nucleicos en base a peso seco. Pueden utilizar un gran número de fuentes de carbono diferentes y son independientes a variaciones climáticas o estaciónales y por lo que son más fáciles de planear. (biocity.iespana.es, 2001). Las especies del género Geotrichum sp., cuyo crecimiento primeramente tiene aspecto de una masa compacta que se vuelve blanda y cremosa, pueden tener un color blanco, grisáceo, naranja o rojo. La especie Geotrichum candidum se le conoce como “hongo de la lechería”, da un crecimiento de aspecto cremoso de color variable entre el blanco y el rojo. Las hifas de los mohos de este género son septadas y, en las especies habituales, poseen ramificaciones. Las esporas asexuales son astrosporas, las

cuales pueden tener forma rectangular cuando son producidas en hifas sumergidas, y forma ovalada si las producen las hifas aéreas. (www.unsa.edu.ar). El estudio de la cinética de crecimiento del hongo es importante de acuerdo a las fuentes de carbono y nitrógeno. Para esto se compararon tres medios: uno basado en peptona ya que se ha mostrado anteriormente que algunos aminoácidos pueden ser metabolizados no solo como fuentes de nitrógeno sino como fuentes energéticas y de carbono con la adición de lactato, el otro medio era fue suplementado con glucosa (Adour, 2002). 2. Materiales y Métodos

2.1. Aislamiento del hongo Para el aislamiento del hongo Geotrichum sp., se utilizó agar extracto de levadura glucosa y cloranfenicol (YGC), para facilitar el aislamiento de hongos. La muestra que se utilizó para cultivar el hongo fue: suero de leche como sustrato básico enriquecido con melaza, urea, triple 15 y sulfato de magnesio (Instituto de Educación Técnica Profesional).

2.2. Cultivo del hongo El hongo aislado se replicó en PDA, y se cultivó a 32°C durante una semana, para su posterior cultivo en medio líquido el cual especificamos a continuación. El medio de cultivo utilizado fue con la siguiente composición para 300 mL de medio: 3 g. de peptona; 1.02g. de KH2PO4; 1.03 g. de NaH2PO4·H2O; 0.00145 g. de CuSO4·5H2O; 0.0015 g.

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de NaMoO4·2H2O; 0.0059 g. de ZnSO4·7H2O; 0.0198.

de CaCl2·2H2O; 0.0173 g. de FeCl3; 0.0769 g. de MgSO4·7H2O; 0.1755 g. de EDTA. Se utilizaron dos suplementos a) 5 g/L de glucosa y b) 5 g/L de lactato de sodio. El pH se ajustó a 4,6 Por medio de un potenciómetro. El cultivo en fase líquida se realizó a 100 r.p.m. en agitador orbital marca Shaker JP Inglobal, a 30°C durante una semana.

2.3. Caracterización de la biomasa Proteína: Se utilizó el método de Kjeldahl, el cual se fundamenta en la conversión del nitrógeno total presente en la muestra a sales de amonio que son posteriormente valoradas por volumetría ácido base, por medio del método AOAC. Humedad: Para el cálculo de la humedad se tuvo en cuenta el método que consiste en determinar los contenidos de humedad de las muestras llevándolas a sequedad por el método AOAC. Se hicieron mediciones de la pérdida de peso en las cuales se tomaron 3 muestras, se pesaron en papel filtro y posteriormente se llevaron a un secador a temperatura de 105°C durante 4 horas; posteriormente se procedió a pesar la muestra con el papel filtro y se realizaron los respectivos cálculos de % de humedad.

2.4. Determinación del sustrato consumido

Para el consumo de sustrato (glucosa) se utilizó el método de DNS donde se

determinaron los azúcares reductores. (Miller, 1959). Se tomó 2 mL de muestra, 1 mL de agua destilada y 3 mL del reactivo DNS y se calentó a ebullición hasta obtener cambios de color. Este procedimiento se realizó tres veces para luego leer las absorbancia a 575 nm en un espectrofotómetro marca Unicam Hexios β. 3. Resultados & Discusión

3.1 Aislamiento El YGC resultó ser un medio apropiado para el aislamiento del hongo Geotrichum sp. ya que se logró obtener una cepa limpia partiendo del cultivo inicial logrado a partir de queso camembert. En la figura 1 se puede observar el aislado en YGC.

Figura 1. Geotrichum sp.

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3.2 Caracterización de biomasa

3.2.1 Determinación de

humedad por secado

Muestra

Peso

inicial

(g)

Peso

final (g)

1 3.9365 0.0971

2 3.9031 0.0757

3 3.6566 0.0651

Tabla 1. Pesos iniciales y finales de las

muestras de biomasa

Muestra %

Humedad 1 97.533 2 98.060 3 98.219

Tabla 2. Porcentaje de humedad de

las muestras de biomasa

% Humedad = Peso inicial – Peso final * 100 Peso inicial % Humedad = 97.937% ± 0.3591

3.2.2 Prueba de proteínas

Para el porcentaje de proteína en peso húmedo se utilizó la siguiente fórmula obtenida de 3.4741 g. de muestra. %Proteína=(VTITULACIÓN)*(N)*(6.25)*(100) Peso de la muestra en mg

%Proteína = 21.768% en peso húmedo Para el porcentaje de humedad en peso seco se utilizó la siguiente fórmula obtenida de 3.4741 g. de muestra. %Proteína(VTITULACIÓN)*(NHCl)*(6.25)*(100) (Peso de la muestra en mg)(% peso seco) %Proteína = 4.353% en peso seco

3.3 Producción de biomasa Para la producción de biomasa, se obtuvo mayor cantidad de ésta en el medio con glucosa como fuente de carbono. En la Figura 2 se puede observar la producción de biomasa en medio líquido con glucosa y el la figura 3 la biomasa producida.

Figura 2. Medio Líquido

Figura 3. Biomasa

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3.4 Rendimiento de Biomasa

3.4.1.Determinación de sustrato consumido (Yxs)

Teniendo la curva de calibración de la glucosa se procede a buscar el valor del sustrato consumido.

Absorbancia vs. Concentración Promedio de Glucosa

y = 0.2111x - 0.1687R2 = 0.9886

0.0000.2000.4000.6000.8001.0001.200

0.06 0.10 0.16 0.20 0.30 0.40

)Concentración Promedio (mg/mL

)Abs

orba

ncia

(nm

Figura 4.Grafica de absorbancia vs. concentración promedio de glucosa

[Abs] = 0.2111*[S] – 0.1687

[S] = [Abs] + 0.1687 0.2111

Muestra Absorbancia

(nm)

Sustrato

consumido

(mg/mL)

1 0.121 1.37234

2 0.144 1.48129

3 0.103 1.28707

Tabla 3. Niveles de absorbancia y sustrato consumido de las muestras a una dilución 2/3.

Tabla 4. Niveles de sustrato consumido, ∆S, ∆X y YXS de las

muestras originales

YXSPromedio = 0.7312 mg/mL ± 0.1544

3.4.2 Determinación del Producto Producido (YPS)

Tabla 5. Datos de la muestra de Biomasa y su proteína producida.

Muestra YPS (∆P/∆S)

1 0.4632

2 0.4775

3 0.4526

Tabla 5. YPS de las muestras originales

YPSPromedio = 0.4644 mg/mg ± 0.0125

Muestr

a

Sustrato

consumid

o

(mg/mL)

∆S

(mg/mL

)

∆X

(mg/mL

)

YXS

(∆X/∆S

)

1 2.0585 3.6277 3.2367 0.8922

2 2.2219 3.5187 2.5233 0.7171

3 1.9306 3.7129 2.1700 0.5844

Peso de la muestra (mg/ml)

Proteína producida (mg/ml)

38.6011 1.6803

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4. Conclusiones Se logró aislar el hongo Geotrichum sp. y se logró mantener la cepa en medio PDA lo cual nos aseguró una cepa limpia. Se hicieron pruebas de caracterización de la biomasa y se obtuvieron datos de humedad de 97.937% y 21.768% y 4.353% de porcentaje de proteínas en peso húmedo y en peso seco respectivamente. Se obtuvo que la fuente de carbono más adecuada para la producción de Biomasa de Geotrichum sp. fue glucosa ya que hubo mayor producción que en la de lactato como fuente de carbono. La proteína producida por miligramo de sustrato consumido fue de 0.4644 mg lo cual constituye un alto porcentaje de proteína con respecto a la biomasa producida; esto admite decir que ésta biomasa puede constituir un buen suplemento proteico para la alimentación de las aves.

5. Bibliografía • AOAC. Official Methods of Analysis

of the Association of Official Analytical Chemist. Edited by Kenneth Herlich. 1995;I:78-79, 237, 247, 272.

• AOAC. Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemist. 1995. Volume II. Edited by Kenneth Herlich. 1995. pp. 777-778, 1110.

• Growth of Geotrichum candidum and Penicillium camembertii in liquid media in relation with the consumption of carbon and nitrogen sources and the release

of ammonia and carbon dioxide. L. Adour, C. Couriol, A. Amrane, Y. Prigent. Enzyme and Microbial Technology 31. 2002. pp. 533-541.

• http://biocity.iespana.es/micro/leva.htm

• http://es.wikipedia.org/wiki/Geotrichum

• http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/09htextolevaduras.pdf

• http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_3_2.pdf

• INCORPORACIÓN DEL HONGO Geotrichum candidum LINK EN DIETA. Instituto de Educación Técnica Profesional. Roldanillo Valle. Revista de Investigación Copyright.

• Miller G.L.(1959). Use of DNS acid reagent for determination of reducing sugar. Anal Chem. Nº 31. pp,. 426-428.

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Producción De Pleurotus Ostreatus En Fermentación Líquida Y Evaluación Antioxidante Hurtado S. Angélica, Muñoz M. Jenny1. Resumen Se analizó la producción de Biomasa y la actividad antioxidante del Pleurotus ostreatus en medio DL, que contiene extracto de levadura y dextrosa, con una temperatura de incubación a 30º C con agitación constante durante diez días, además se sembró la cepa de Pleurotus Ostreatus en Agar de malta. Se obtuvo la biomasa y a esta se le midió la actividad antioxidante con el método ABTS dando como resultado 3.1193 VCEAC, también se le midió el contenido de proteína dando como resultado 3.69% y se comparo con los cuerpos fructíferos de orellanas con el método de Kjendahl, además se midió el porcentaje de humedad dando como resultado 95.26% y el teniendo como resultado 164.40 cantidad de nitrógeno, midiendo también la actividad antioxidante de la muestra dando 13.24%. Palabras Clave Pleurotus Ostreatus, Medio DL, producción de biomasa, Actividad Antioxidante. Introducción 1 Universidad de Bogota Jorge Tadeo Lozano, Facultad de Ciencias Naturales, Programa de Ingeniería de Alimentos, Bogota- Colombia.

Los hongos comestibles se han convertido en una fuente alimenticia muy importante debido a sus propiedades nutricionales y terapéuticas. Los recientes avances logrados en el campo de la medicina natural y tradicional como una alternativa para el tratamiento de varios trastornos fisiológicos y el reconocimiento de numerosos modificadores biológicos en las setas comestibles, ha conducido a la definición del termino “setas nutracéuticas¨ (Chang, et al., 1996). La demanda de consumo de los hongos comestibles ha tenido un rápido aumento en los últimos seis años. La producción de Pleurotus Sp. Aumento en un 14% anual en los Estados Unidos, que equivale a valores desde 880 toneladas en 1996 a 1940 toneladas en el 2002. La china es el país de mayor producción y consumo, el cual produce cerca del 90% del total de la producción mundial. (Chang, 1999) En México y particularmente en Chiapas el cultivo de Pleurotus Ostreatus (Jacq.Fr) Kumm. Se visualiza como una alternativa a problemas como la insuficiencia alimentaría de origen agroindustrial.

Los cuerpos fructíferos de los Pleurotus o setas, que son las partes comestibles, son una excelente fuente de proteína de buena calidad, esto debido a que en su contenido, están presentes todos los aminoácidos esenciales donde los que predominan son la alanina, el ácido glutámico y la glutamina. En particular el Pleurotus Ostreatus tiene un contenido elevado de carbohidratos de 57% y 14% de

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fibra cruda, de los cuales el 47% es fibra dietética.

Dentro de los carbohidratos que contienen dichos hongos, se encuentran pentosas, hexosas, sacarosa, alcohol azúcares, azúcares-ácidos, metil- pentosas y amino azúcares como la quitina (Guzmany 1990).

Todos los hongos suelen ser una buena fuente de tiamina (vitamina B1), riboflavina (vitamina B2), niacina, biotina y ácido ascórbico (vitamina C). En el caso de Pleurotus ostreatus el contenido de tiamina se encuentra entre 4.8 y 7.8mg. / 100g. Riboflavina 4.7 a 4.9mg/100g. Y niacina 55 a 109mg/100g. Todo en peso seco.

Los contenidos de ácido ascórbico (vitamina C) son muy altos, hasta de 36 a 58mg/100g. del peso seco por lo que pueden ser una muy buena fuente de antioxidantes y agentes reductores para el uso de medicamentos y complementos nutricionales, estos pueden ser utilizados en el tratamiento del escorbuto, la diabetes, hipoglucemia, cáncer, etc. (Guzmany 1990).

Por otro lado, el alto contenido de ergosterol, es transformado en vitamina D por acción de los rayos de luz UV al ser deshidratados al sol. Por lo que las setas deshidratadas de esta forma, son una buena fuente de esta vitamina, muy importante para la absorción de calcio, sobretodo del fosfato de calcio fundamental para el buen desarrollo de huesos y dientes.

Los hongos absorben todos los minerales que contiene el substrato donde son cultivados, por lo general contienen buena cantidad de fósforo y

potasio, y calcio en menor cantidad. En el caso de Pleurotus, se han encontrado, además de los ya mencionados, buenas cantidades de zinc, cobre y magnesio y fósforo. Una proporción media de hierro, manganeso y potasio.

El calcio, aluminio y sodio se ha encontrado en pequeñas cantidades. También se han encontrado trazas de fósforo, arsénico y mercurio (Guzmany, 1990).

Al Pleurotus Ostreatus se le atribuyen ciertos efectos terapéuticos dentro de los cuales tenemos efectos antitumorales, Efectos antivirales, efecto antiinflamatorio, control del colesterol, efecto hepatoprotector, efecto antihipertensión, efecto antioxidante.

El término antioxidante significa que impide la oxidación perjudicial de otras sustancias químicas, ocasionada en las reacciones metabólicas o producidas por los factores exógenos como las radiaciones ionizantes. (Licata, 1999).

En los últimos años, se han investigado los antioxidantes en relación con su papel dentro de las enfermedades de máximo impacto en occidente o países desarrollados, como son las enfermedades cardiovasculares, numerosos tipos de cáncer, sida, e incluso otras directamente asociadas con el proceso de envejecimiento, como las cataratas, la enfermedad de Alzheimer y otras alteraciones del sistema nervioso. (Licata, 1999).

El Pleurotus ostreatus contiene sustancias antioxidantes benéficos para la salud del hombre, debido a esto se realizo el presente estudio

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para evaluar la actividad antioxidante y la producción de biomasa.

Materiales y Métodos

Cepas. Se utilizó la cepa Pleurotus. ostreatus PE01, depositada en el laboratorio de la Universidad Jorge Tadeo Lozano (Bogota-Colombia).

Medios y condiciones de Cultivo. La cepa fue replica en agar malta y almacenada a 30º C. Para la producción de biomasa se sembró en un medio liquido; para este medio se empleo 1.5 gr. de dextrosa, 1.5gr de extracto de levadura (Medio DL). Su pH fue de 5.5, el cual se ajusto agregando NaOH o HCL 0.01N. El procedimiento se llevo a cabo en frascos compoteros con 30ml de medio DL, inoculados con pellets de P. Ostreatus tomados de las cepas sembradas con anterioridad, se dejaron en el Shaker por seis días a una Temperatura de 30º C, con agitación constante de 103 rpm. (Griselda K, et al., 1998)

Determinación del Contenido de Proteína.

Para la determinación de proteína se utilizo el método de Khjendal.

Determinación de la Actividad Antioxidante

Para determinar la Actividad antioxidante se empleo el método ABTS.

El radical ABTS+ se obtiene tras la reacción de ABTS (7mM) con persulfato potásico (2.45 mM, concentración final) incubados a temperatura ambiente y en oscuridad durante 16 h. una vez formado el

radical ABTS+ se diluye con etanol hasta obtener un valor de absorbancia comprendido entre 0.70 a 754 nm (longitud de onda de máxima absorción). Las muestras de biomasa filtradas se extrajeron con etanol; a 980 μL de dilución del radical ABTS+ así generado se le determina la A754 a 30º C, se añade 20 μL de la muestra y se mide de nuevo la A754 cada minuto por siete minutos. Los resultados se expresan en VCEAC (actividad antioxidante equivalente a Vitamina C), en este último caso por tratarse de Alimentos. (Kuskoski et al. 2005; Pellegrini et al 1999).

Determinación de la humedad.

Para determinar la humedad se empleo el método A.O.A.C. 7.003/84, 930.15/90 adaptado.

Resultados y Discusión

Producción de biomasa en Fermentación liquida. El medio de cultivo utilizado fue apropiado para la producción de biomasa de P. ostreatus, bajo las condiciones de cultivo descritas en la sección de materiales y métodos. En la Figuras 1y 2, se pueden observar los cultivos realizados.

Caracterización de la biomasa

Figura 1 Cepa de P. ostreatus en agar malta.

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Figura 2 Biomasa en medio líquido de extracto de levadura y dextrosa.

Porcentaje de Humedad.

Porcentaje de = Perdida de peso * 100 humedad peso muestra

Porcentaje de = 22. 2288 gr. *100 humedad 2.3395 gr.

El porcentaje de humedad de la biomasa producida por el P. ostresatus es 95.26 %.

Porcentaje de proteína

% nitrógeno total = V * C *(M/m)

Donde: V = volumen gastado en la titulación, C = [ ] de la solución de la titulación, M = g de nitrógeno por mol, m = peso de la muestra.

Nitrógeno total en biomasa = 6.5ml * 0.1N *(28 g/mol/ 0.1107) =164.40 g/kg

% de Proteína = (V* C* 6.25* 100)/masa de la muestra

% de proteína =(6.5*0.1*6.25*100)/110= 3.69

Se observó que el porcentaje de proteína es baja comparado con los cuerpos fructíferos en fresco; se debe tener en cuenta que el tiempo de la producción de las orellanas es de 40 días aproximadamente. Una consideración importante es aumentar el tiempo de producción de biomasa para tener un porcentaje te proteína mas alto.

Rendimiento

Yps = Masa de producto generado Masa de F.C consumido

= 0.1107gr de Biomasa 0,15gr glucosa

= 0,738gr de Biomasa/glucosa

*el peso de la biomasa fue producido en 10 días

Determinación de la actividad antioxidante.

Para determinar la actividad antioxidante se empleo el método ABTS, en la tabla 1 se reporta los resultados equivalente a vitamina C en cada una de los patrones y el de la muestra.

Observando un equivalente de vitamina C mayor en el patrón uno, seguido de la muestra.

Muestras ABTS (1min) Mora 125,8±3,2 Uva 161,5±3,3 Açaí 163,4±4,0 Guayaba 120,0±4,5 Fresa 202,5±0,5 Acerola 1198,9±8,1 Piña 64,8±5,2 Mango 224,7±4,6 Graviola 76,8±4,0 Cupuaçu 37,0±0,0 Maracuyá 54,0±1,9 P. ostreatus (biomasa)

3.11±0.5

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Tabla No. 1

Pendiente mg de Vit. C Patrón 1 -0,0027 0,016

Patrón 2 -0,0017 0,0008 Muestra -0.0054 0,0136

Tabla No.2 Determinación de la actividad antioxidante equivalente a Vitamina C de pulpa de frutos aplicando el método ABTS

*Kuskoski et al. 2005, determinación de la capacidad antioxidante de pulpa de frutos).

Como se puede observar en la Tabla No. 2 tenemos algunos valores de VCEAC (mg/100g) de frutas y notamos que el valor antioxidante del P. ostreatus es bajo en comparación de las frutas, pero teniendo en cuenta la cantidad de biomas fue una cantidad muy pequeña, y el tiempo de producción fue de 10 días. Aproximadamente y el resultado de las frutas fue 120 días en cosechar la fruta.

Conclusiones

* Se cumplieron los objetivos del trabajo, se estudio la actividad antioxidante de la biomasa producida por Pleurotus ostreatus en diez días la cual encontramos 0.0136 mg equivalente de Vit. C/100mg de biomasa.

* Comparando la actividad antioxidante de la biomasa producida por P. ostreatus y cuerpos fructíferos encontramos que los valores son alejados; esto por razón de que los cuerpos fructíferos tardan 40 días en fructificar, mientras que la producción de biomasa fue de 10 días.

Bibliografía

1. Chang, S.T. World Production of Cultivated edible and medicinal Mushrooms in 1997 with emplasis on lentinus edobes (Berk). Sing in China. Int. J. Med. Mush.1, 1999. 291-300.

2. Chang, S.T.,And Buswell J.A.. Mushroom Nutriceuticals. World J Microbiol Biotechnol., 12:473-6. 1996.

3. Guzmany G, Mata, G. El cultivo de los hongos comestibles. México DF. Instituto Politécnico Nacional, 1990: Pág. 245.

4. Kuskoski,E.M.; Asueroro, A.G.; Troncoso, A.M.; Garcia-Parilla, M. C.; Fett,R. Actividad antioxidante de pigmentos antocianicos. Rev. Brasilera. Tecnología y ciencia de Alimentos., v. 24, n.4, 691-693, 2004.

5. Las vitaminas y los antioxidantes esenciales Licata M.. zonadiet. Consultado abril de 2007. Disponible en www.zonadiet.com/alimentación

6. Pellegrini,N.; Proteggente, A.; Pannala, A.; Yang, M.; Rice-Evans, C. Antioxidant activity applyng an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radic. Biol. Med., 26, 9/10, 1231-1237, 1999.

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Evaluación de la Actividad Antibacterial del Marañón Diana Carolina Hernández; Paula Liliana Riaño Jiménez; Universidad Jorge Tadeo Lozano Mayo 2007 Resumen El proyecto de aula consistió en el análisis de la actividad antimicrobiana y antifungica de los extractos acuosos y etanolicos del Marañón (Anacardium occidentales L.) seudo fruto y cáscara de la nuez. Para tal efecto, se utilizaron cepas de Escherichea coli CN y Aspergillus níger, mediante el método de difusión en agar bacteriológico nutritivo. Esta actividad se midió con los diámetros de los halos de inhibición de crecimiento. En ninguno de los ensayos realizados con extracto acuoso del pseudo fruto resulto positivo en actividad antibacterial ni antifúngica, mientras que los realizados con extracto acuoso y etanolico de la cáscara de la nuez presentaron un halo alrededor del papel, o se observo una reducción de la población bacteriana. Palabras clave: Actividad antibacteriana, marañón, nuez del marañón.

1. Introducción El marañón, merey, o cashew en los países de habla inglesa (Anarcadium occidentale L.) es originario del noreste de Brasil, constituyendo un producto de elevada importancia económica y social. Su producción se concentra en algunos países en vía de desarrollo como la India, Brasil,

Mozambique, Tanzania y Kenia. En los últimos años ha crecido la participación del cultivo en el desarrollo productivo de países del continente africano y asiático. (J. Chirinos y M. Sindoni 2004). El marañón es un pedúnculo de color amarillo dorado o rojo, ovalado, que posee un agradable sabor ácido y astringente, la semilla cuelga al final de la manzana, y esta protegida por dos cubiertas, entre estas dos cubiertas existe un líquido aceitoso, viscoso y resinoso (CNSL de sus siglas en inglés) que es cáustico y produce irritación. (R.N. Patel 2006). Esta es una especie vegetal que crece bien en diferentes regiones cálidas del país como el Valle del Magdalena, la Costa Atlántica y la Orinoquía colombiana (en los departamentos del Meta y Vichada). Esta última región posee grandes extensiones aptas para plantaciones comerciales del marañón, tanto por el buen comportamiento de la especie en ella, como por sus ventajas comparativas en relación con otras regiones cálidas del país. (Medina et al 2004). La composición del marañón es muy compleja ya que presenta gran cantidad de vitaminas, taninos, sales minerales, ácidos orgánicos y carbohidratos, los que lo hace una fuente de nutrientes muy importante, el pedúnculo se utiliza industrialmente en Brasil para bebidas, dulces y mermeladas. (R.P.Santos et al 2007). El líquido de la cáscara de la nuez es usado para fabricar resinas fenólicas, también es usado en líquido de frenos para la industria automotriz, además presenta características antisépticas, igualmente se dice que el marañón posee una gran actividad

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antibacteriana, contra el Streptococcus mutans (principal agente etiológico de la caries dental) ya que tanto la cáscara como la nuez del marañón son ricas en compuestos caracterizados por cadenas lineales de 15 carbonos, con varios grados de insaturación, resaltando los fenólicos derivados del ácido salicílico y el resorcinol denominados ácidos anacárdicos, cardoles y 2 – metil cardoles. (Medina R., Rico Y., Leal AL., Gaitán S., Cruz G., Jiménez A., Naranjo C., 2004). 2. Materiales y Métodos

2.1 Materiales Marañón criollo proveniente de los llanos colombianos. Agar nutritivo Agar YGC Etanol 98% E- coli CN del laboratorio de microbiología de la universidad Jorge Tadeo Lozano Aspergillus Níger del laboratorio de biotecnología. Extracto de humus Agua destilada Papel de filtro Alcohol 96%

2.2 Obtención de extractos Para obtener los extractos con tanto del pedúnculo como de la nuez del marañón se realizaron extracciones al 48% peso volumen con los solventes agua y etanol al 96%.

2.3 Detección de la actividad antifúngica

Se utilizó Agar YGC (extracto de levadura, glucosa y cloranfenicol) suplementado con diferentes concentraciones extracto acuoso del pedúnculo de marañón (200, 400, 600 y 800 microlitros por cada 100 mL de medio de cultivo). Posteriormente se sembró Aspergillus niger. La actividad se evaluó luego de incubar a 30ºC por una semana.

2.4 Detección de la actividad antibacterial

Se utilizó Agar nutritivo suplementado con diferentes concentraciones extracto acuoso del pedúnculo de marañón (50,100, 150, 200, 250, 300, 400 microlitros por cada 100 mL de medio de cultivo). Posteriormente se sembró extracto de humus (microorganismos del suelo). La actividad se evaluó luego de 24 horas a 30ºC. (Alrozaky y Ankara 2002) Se sembraron 30 microlitros E-coli CN sobre Agar Nutritivo, en el centro de las cajas se ubicaron círculos de papel de filtro previamente impregnados en diferentes disoluciones de un extracto acuoso del pedúnculo del marañón 0.2%,0.4%,0.5%,0.8% y 1%. La actividad se evaluó 24 horas después de incubar a 30ºC. Se sembraron 30 microlitros E-coli CN sobre agar nutritivo, en el centro de las cajas se ubicaron círculos de papel de flitro previamente impregnados en diferentes disoluciones de un extracto etanolico de la nuez de marañón 0.05%, 0.1%, 0.2%, 0.3%, 0.4%. La actividad se evaluó 24 horas después de incubar a 30ºC

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En 5 viales diferentes se tomaron 5 microlitros de E-coli CN a los que posteriormente se les agrego diferentes cantidades de extracto (5, 10, 15, 20,25 y 30 microlitros de extracto acuoso de cáscara de nuez de marañón) para luego sembrar sobre agra nutritivo, la actividad se evaluó 24 horas después de incubar a 30ºC. 3. RESULTADOS Y DISCUCIÓN Al utilizar un extracto acuoso del pedúnculo de marañón para evaluar la actividad antifúngica, no se observo ningún efecto, no hay aparición de un halo de inhibición. Los extractos acuosos del pedúnculo de marañón no poseen actividad antifúngica, lo que indica que sus componentes no pueden inhibir las síntesis de β 1,3 D glucano componente clave de la pared de la célula fúngica. No se percibió ningún efecto antibacterial del extracto del pedúnculo de marañón en los ensayos realizados con extracto de humus, ni con la E-coli CN. Pues en ninguno de los ensayos se observo eliminación o reducción de la población bacteriana. Al evaluar la actividad antibacterial usando el extracto acuoso del pedúnculo marañón con el extracto de humus no se observo ningún efecto esto pudo ser debido a la variedad de bacterias presentes en este extracto Al realizar extractos de la cáscara de la nuez del marañón se observo una reducción de la población, y en los casos en los que se ubico papel de filtro impregnados se observo la presencia de un halo alrededor del papel donde no hubo crecimiento de E- coli CN.

Con los extractos etanolicos y acuosos de la cáscara de nuez del marañón se observó la reducción e inhibición del crecimiento de la población.

Imagen de caja de petri sembrada con E-coli CN con papel de filtro impregnado con extracto etanólico de cáscara de nuez concentración 0,05%, donde se aprecia un halo en el cual no hubo crecimiento de bacteria.

En el lado izquierdo se aprecia el blanco y en el lado derecho la de caja de petri sembrada con 5 microlitros de E-coli CN con 30 microlitros extracto acuoso de cáscara de nuez concentración, en donde se puede observar que se presentó una reducción de la población bacteriana.

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4. Referencias

1. Alrozeky, N. S., & Nakahara, K. (2002). Antibacterial activity of extracts from some edible plants commonly consumed in Asia. International Journal of Food Microbiology, 80, 223–230.

2. J. Chirinos y M. Sindoni (2004) Comportamiento de diferentes clones de merey criollo y enano ante el ataque de enfermedades al sur del estado Anzoátegui Revista Facultades de Agronomía 21 Supl. 1: 213-219

3. Medina R., Rico Y., Leal AL., GaitánS., Cruz G., Jiménez A., Naranjo C.,(2004) Universidad Nacional de Colombia. Actividad antimicrobiana del Líquido de la Cáscara de la Nuez del Marañón –Anacardium ccidentale(LCNM) sobre Streptococcus mutans

4. R.N. Patel et al. / J. Chromatogr. A 1124 (2006) 130–138Economic appraisal of supercritical fluid extraction of refined cashew nut shell liquid Elsevier Science

5. R.P. Santos et al. / Journal of Food Engineering 79 (2007) 1432–1437Production and characterization of the cashew (Anacardium occidentale L.) peduncle bagasse ashes

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Obtención de Oleorresinas del Genero Capsicum de la Amazonia Colombiana Usando CO2 Supercrítico. Juan C. Castro Martínez1, Ligia I. Rodriguez2, Maria S. Hernández3,

Palabras claves: oleorresina, extracción con Fluidos supercríticos, extracción Soxhlet, lixiviación, capsaicina, ají.

Resumen

La oleorresina es el extracto líquido del fruto maduro, seco, de pimientos Capsicum que contienen una mezcla compleja de aceites esenciales, ceras, materiales coloreados y capsaicinoides. El potencial de producción de oleorresinas de origen amazónico radica en el valor económico de las oleorresinas, su demanda en el mercado interno y externo al igual que la disponibilidad de mano de obra y de materia prima. Este estudio compara la recuperación de oleorresinas a partir del genero capsicum de origen amazónico por lixiviación y extracción supercrítica con CO2. ----------------------------------------------------- 1Ingeniero de Alimentos, Asistente de Investigación facultad de ciencias Naturales, programa Ingeniería de Alimentos, Universidad De Bogota Jorge Tadeo Lozano ([email protected]). 2Ingeniera de Alimentos, administradora docente facultad de ciencias Naturales, programa Ingeniería de Alimentos, Universidad De Bogota Jorge Tadeo Lozano. 3Ph.D. Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Colombia, Investigadora Principal Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas – SINCHI.

1. Introducción Capsicum, es un género endémico de América, incluye cerca de 30 especies, cinco de las cuales fueron domesticadas desde tiempos prehispánicos por sus frutos comestibles y pungentes (Melgarejo, 2.000). La producción mundial del genero Capsicum es de aproximadamente 19 millones de toneladas métricas, con un incremento anual de cerca del 5%, Colombia produce aproximadamente 16800 toneladas. La oleorresina es el extracto liquido del fruto maduro, seco, de Capsicum, que contiene una mezcla compleja de aceites esenciales, ceras, materiales coloreados y se obtiene en forma de aceite, de viscosidad media, con un intenso color rojo y aroma típico de pimiento.(Navarro y Costa, 1996). Las oleorresinas son de fácil uso en productos formulados, son uniformes, estables y con características de sabor semejantes al aceite esencial. Los alcaloides responsables de la pungencia del ají son principalmente la capsaicina e hidrocapsaicina, que en niveles superiores a 0.05 ppm son fácilmente detectables por las papilas gustativas del ser humano. (Ordoñez et al., 2002). Este estudio evaluó las condiciones de extracción de oleorresinas de capsicum, con CO2 supercrítico y etanol, en algunas muestras de las colecciones de material vegetal a cargo del Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas. SINCHI.

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2. Metodología

2.1. Especies evaluadas Las muestras para el estudio fueron suministradas por el instituto Amazónico de investigaciones Científicas, SINCHI, quien maneja un banco de germoplasma que rescata gran parte de la diversidad del género para la región Amazónica Colombiana. La colección de Capsicum de la región Amazónica Colombiana, esta compuesta por 377 muestras en las que se encuentran las especies C. annuum, C. baccatum, C. frutescens y C. chinense y C. pubescens. (Sinchi,2005) La caracterización morfológica se realizo con base en los descriptores del IPGRI (International Plant Genetic Resources Institute),la parte bioquímica por izo enzimas y la parte molecular por AFLP (como métodos de identificación genética de vid basados en el estudio de fragmentos),(Toquica et al, 2003), con el fin de ampliar el conocimiento de su biodiversidad y estudio de fisiología de semillas en algunas muestras de ají para determinar las condiciones optimas de almacenamiento en el banco de germoplasma. (Melgarejo et al, 2000).

2.2. Acondicionamiento de la muestra.

Para lograr una mejor y más efectiva extracción, la muestra se dispuso seca y molida para lograr aumentar el área de transferencia con el CO2. Las muestras se empacaron al vacío para evitar rehidratación.

2.3. Materiales y Métodos El solvente utilizado en la extracción por lixiviación y en la extracción por fluido supercrítico con CO2, fue etanol grado analítico. Rota vapor Buchi RE-111 con bomba de vacío Buchi B-169. Equipo Soxtec sistem HT1043, con cartuchos Scheleicher y Schuell 603 (25x60mm) Ref. 10350215. Equipo de extracción soxhlet. Equipo de extracción por fluido supercrítico con CO2. (Figura 1), con bomba HPLC Watters Mod. 510. Espectrofotómetro Unycam Helios β. Equipo HPLC con detector UV/VIS con columna de fase reversa C18 usando como fase móvil mezcla de acetonitrilo: Agua: Ácido acético con un flujo de 1.5mil/ mn. Y detector a 281nm.

2.4. Diseño experimental El diseño experimental que se propone para el análisis de extracción en donde la oleorresina recuperada se evalúa según las variables relación peso de muestra de ají- Volumen de etanol, muestra del banco de germoplasma del instituto SINCHI y su interacción.

Yijk= μ + τI + βj + (τβ)ij + εijk

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En donde: Y es la variable de respuesta (% de Oleorresina recuperada). μ Representa la media general del experimento. τ Indica el primer factor, origen de la muestra. β Indica el segundo factor relación peso de ají– volumen de etanol. K Corresponde al número de réplicas por cada tratamiento (3). E error. Método de extracción de oleorresinas por fluido supercrítico con CO2. Se escogieron muestras con base en la disponibilidad del material y tomando en cuenta el potencial de recuperación alto, medio y bajo, arrojado por lixiviación. Las muestras seleccionadas corresponden a los códigos CS-219, CS-250, CS-262. Las condiciones de extracción se fijaron en 4000 psi de presión, 40 grados centígrados de temperatura, y tiempo de contacto de 60 minutos.

Figura 1. Equipo de extracción de fluidos supercríticos. Fuente: laboratorio de altas presiones, Departamento de química, Facultad de ciencias. Universidad Nacional de Colombia.

3. Resultados Se encontró un valor mínimo de contenido de oleorresinas de 24.78% que corresponde a la muestra CS-09 de variedad Chinense y un máximo de 55.64% que corresponde a la muestra CS-170 de variedad Baccatum. La muestra con mayor concentración de capsaicinoides totales (nordihidrocapsaicina, capsaicina, dihidrocapsaicina) es la CS-09 de la variedad Chinense con un valor de 153.900 ppm. Indicando que su poder activo y pungente, es de 15.39% en la muestra de oleorresina extraída, mayor que las otras muestras. En lo referente al contenido de capsaicina se encontró un máximo de 141.866 ppm en la oleorresina correspondiente a la muestra CS-09 de la variedad Chinense, lo que quiere decir que de los 153.900 ppm. Encontrados por espectrofotometría para capsaicinoides totales de esta misma muestra solo 12034 ppm corresponden a nordihidrocapsaicina y dihidrocapsaicina, y compuestos coloreados, la mayor parte corresponde a capsaicina compuesto activo pungente. 3.2. Caracterización, extracción por Fluido supercrítico de Oleorresinas con CO2 Todos los cálculos están hechos en base seca.

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ORDENADO

MUESTRA

Oleorresina recuperada

(g)

Eficiencia De

Extracción

1 CS-219 0,8274 53,8%

2 CS-219 2,8930 89,5%

3 CS-219 2,9138 89,7%

4 CS-219 2,8879 89,5%

5 CS-219 2,8962 89,5%

6 CS-219 2,9092 89,6%

7 CS-250 1,0129 82,7%

8 CS-262 1,3626 84,7%

La evaluación del tiempo de contacto, indico que en promedio el 44% de oleorresina que se logra recuperar en el proceso, se obtiene en los 60 minutos iniciales, a los 100 minutos de contacto un 29% y a los 120 minutos el 27% del total de la oleorresina obtenida. 3.4. Determinación de capsaicina y contenido de oleorresina en las extracciones por lixiviación con etanol y las extracciones por fluido supercrítico con CO2.

CONCENTRACIÓN

CAPSAICINOIDES TOTALES

ACCES. ESPECTROFOTOMETRIA

(PPM)

SINCHI LIXIVIACION. EFSC

CS-219 37271 10999

CS-250 58760 7673

CS-262 10696 6847

CONCENTRACIÓN

MAXIMA POR HPLC

ACCES. DE CAPSAICINA (PPM)

SINCHI LIXIVIACION. EFSC

CS-219 37004 861

CS-250 9092 762

CS-262 105 48

No necesariamente un mayor potencial de recuperación de oleorresina corresponde a una mayor concentración de capsaicina o de compuestos activos, como se ve en la muestra CS-262, donde la recuperación de oleorresina extraída tiene porcentaje (47%) frente a los otros, y la concentración de capsaicinoides y capsaicina es la de menor valor en los dos tipos de extracción (EFSC y lixiviación). 4. Conclusiones

En las condiciones del ensayo es posible recuperar oleorresinas a partir de las muestras de ají amazónico evaluadas en proporción y calidad diferente según el origen de las muestras. Se determinó que un mayor potencial de recuperación de oleorresina no necesariamente corresponde a una mayor concentración de compuestos activos o capsaicina. Se determinó, en el proceso de lixiviación, que la relación de disolución / inertes es constante con un valor de 0.66, por lo tanto la línea de flujo inferior es una recta. Al evaluar el potencial de recuperación de capsaicina por lixiviación de las muestras evaluadas, la CS-09 capsicum Chinense, resulta ser la más promisoria. El contenido de oleorresinas es de 32.07% y la concentración de capsaicina determinada por HPLC es de 141.866 ppm, por lo tanto es la variedad mas pungente. La evaluación del efecto de cosolvente en la extracción de Oleorresinas con CO2 supercrítico, muestra que la

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recuperación de oleorresina es de 17.32% con una eficiencia del 53,8% sin la adición de etanol que corresponde al ensayo 1 de la muestra CS-219 de la variedad Annum; y de 28.82% con una eficiencia del 89,67% con la adición de 10% de cosolvente en condiciones de presión y temperatura iguales (2500 psi, 50°C) que corresponde al ensayo 2 de la misma muestra. Se estableció que la mayor concentración de capsaicina alcanzada fue de 861 ppm, correspondiente a la muestra CS-219 de la variedad Annum, a condiciones de extracción: 4000 psi de presión, 40 grados centígrados de temperatura, y un tiempo de 60 minutos de contacto. 5. Referencias Bibliográficas Instituto SINCHI. Memorias Talle Base de Desarrollo de la Cadena Agro productiva de Capsicum. (2002). Melgarejo,L.,Rodriguez,F.Giraldo,M.,Cardona,G.,Celis,M. y Arias J. Caracterización morfológica, Bioquímica y Molecular de especies promisorias de la Amazonía Colombiana Pertenecientes al Genero Capsicum, para su conservación y uso. Informe entregado al COLCIENCIAS. Instituto Amazónico De Investigaciones Científicas SINCHI. Informe COLCIENCIAS. p.121. (2000).

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