5/28/2018 1-5

1/27

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Dewasa ini pola dan gaya hidup modern semakin menggejala di dalam

masyarakat. Fenomena ini disambut baik sebagai wujud kemajuan pembangunan

dan perkembangan teknologi (Wiryowidagdo, 2002). Namun pola makan yang

salah dan gaya hidup yang kurang sehat (kurang olahraga dan kurang istirahat)

akan meningkatkan resiko terjangkitnya suatu penyakit, apalagi sekarang banyak

berdiri restoran-restoran cepat saji yang banyak diminati oleh masyarakat. Pola

makan yang terlalu banyak lemak dan karbohidrat ini semakin memicu timbulnya

penyakit jantung koroner (Wiryowidagdo, 2002).

Penyakit jantung koroner merupakan penyebab kematian utama di negara

yang telah maju dan semakin sering ditemukan di Indonesia (Ganiswara, 1995).

Salah satu penyebab penyakit jantung koroner adalah hiperlipidemia (Katzung,

2002). Hiperlipidemia disebabkan oleh peningkatan kadar trigilserida (Tjay dan

Rahardja, 2002).

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan oleh Kobayashi et al. (2010),

pemberian serbuk daun murbei (Morus albaL.) dengan dosis 250 mg/KgBB dan

500 mg/KgBB per hari selama tujuh minggu dapat menurunkan kadar trigliserida

plasma tikus secara signifikan. Dari penelitian tersebut, diketahui bahwa

penurunan kadar trigliserida dikaitkan dengan adanya zat aktif dalam serbuk daun

murbei berupa senyawa flavonoid, yaitu kuersetin.

5/28/2018 1-5

2/27

2

Sekarang ini terdapatproduk Xyang mengandung ekstrak daun murbei dan

diperkirakan dapat menurunkan kadar trigliserida. Berdasarkan hal tersebut di atas

maka penulis ingin membuktikan apakah produk X yang mengandung ekstrak

daun murbei dapat menurunkan kadar trigliserida pada tikus putih jantan galur

Wistar.

B. Rumusan Masalah

1. Apakah produk X yang mengandung ekstrak daun murbei dapatmenurunkan kadar trigliserida darah pada tikus putih jantan galur Wistar ?

2. Apakah efek penurunan kadar trigliserida produk X yang mengandungekstrak daun murbei lebih besar dibandingkan gemfibrozil ?

C. Tujuan Penelitian

1. Untuk mengetahui apakah produk X yang mengandung ekstrak daunmurbei dapat menurunkan kadar trigliserida darah pada tikus putih jantan

galur Wistar.

2. Untuk mengetahui kemampuan efek penurunan kadar trigliserida produkX yang mengandung ekstrak daun murbei jika dibandingkan dengan

gemfibrozil ?

D. Manfaat Penelitian

1. Memberikan informasi apakah produk X yang mengandung ekstrakdaun murbei dapat menurunkan kadar trigliserida darah pada tikus Wistar.

2. Menginspirasi penulis / peneliti yang selanjutnya dalam pengembanganpengobatan terhadap penyakit jantung.

5/28/2018 1-5

3/27

3

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Kajian Teori1. Uraian Tanaman Murbei (Morus alba L .)a. Klasifikasi Tanaman

Kingdom : Plantae

Ordo : Rosales

Famili : Moraceae

Tribe : Morae

Genus : Morus

Spesies : M. alba

Nama Binominal :Morus alba

b.Nama UmumNama Tumbuhan : Mulberry

Nama Daerah : Kerta, kitau (Sumatera); Murbai, besaran (Jawa); Sangya

(Cina); May mon, dau tam (Vietnam); Morus leaf, morus bark, morus

fruit, mulberry leaf, mulberry bark, mulberry twigs, white mulberry,

mulberry(Inggris)

Nama Latin :Morus albaL.

Sinonim : Morus Austalis Pour., dan Morus Atropurpurea

Roxb

(Dalimartha, 2000)

5/28/2018 1-5

4/27

4

c. Deskripsi Tanaman

Pohon murbei dapat tumbuh hingga 9 meter, percabangannya, cabang

muda berambut halus, daun tunggal, letak berseling, dan bertangkai dengan

panjang 4 cm. Helai daun berbentuk bulat telur sampai jantung, ujung runcing,

pangkal tumpul, tepi bergerigi, pertulangan menyirip agak menonjol, permukaan

atas dan bawah kasar, panjang 2,5 sampai 20 cm, lebar 1,5 sampai 12 cm, serta

berwarna hijau. Bunga majemuk berbentuk tandan, keluar dari ketiak daun,

mahkota berbentuk tajuk, dan berwarna putih. Dalam satu pohon terdapat bunga

jantan, bunga betina dan bunga sempurna yang terpisah. Murbei berbunga

sepanjang tahun (Arisandi dan Andriani, 2006).

d. Habitat dan Penyebaran

Murbei (Morus alba) merupakan tanaman asli dari Cina yang tersebar luas

hampir diseluruh tempat baik di daerah dengan iklim tropis maupun subtropis.

Murbei dapat tumbuh baik pada ketinggian lebih dari 100 mdpl dan cukup

matahari. Pohon murbei relatif besar dengan ketinggian 9-12 m serta diameter 0,5

cm.

e. Kandungan dan Manfaat Tanaman

Murbei mengandung banyak senyawa kimia seperti ekdisteron,

inokosteron, lupeol, -sitosterol, rutin, morasetin, skopoletin, benzaldehida,

eugenol, linalol, benzil alkohol, butilamin, aseton, kholin dan kuersetin. Pada

bagian ranting terdapat tanin dan vitamin A serta pada bagian buah terdapat

sianidin, isoquercetin, sakarida, asam linoleat, asam stearat, serta karoten. Selain

itu, pada bagian daun juga terdapat kaempferol-3-O-beta-D-glucopyranoside,

5/28/2018 1-5

5/27

5

kaempferol -3O - (6-O-acetyl)betaD -glucopyranoside, quercetin -3 -O -(6-

O-acetyl) -beta-D -glucopyranoside, quercetin -3 O beta D -glucopyranoside,

kaempferol -3 O alpha L rhamnopyranosyl beta D -glucopyranoside,

quercetin -3 O alpha L rhamnopyranosyl beta D -glucopyranoside,

quercetin -3 O beta D glucopyranosyl beta D -glucopyranoside, dan

quercetin -3,7diObetaD -glucopyranoside (Kimet al,. 2000).

Kandungan Nutrien Murbei (%)

Kadar air 85,47

Kadar abu 10,92Serat kasar 10,52

Lemak kasar 2,89

Protein kasar 18,43

BETN 57,24

Jenis asam amino Daun Murbei (Morus alba)

Muda Tua

Aspartat 0.45 0.47

Threonin 0.36 0.34

Serin 0.16 0.21

Glutamat 0.64 0.75

Glisin 0.21 0.24

Alanin 0.31 0.32

Valin 0.29 0.28

Methionin 0.06 0.05

Isoleusin 0.18 0.20

Leusin 0.34 0.43

Tirosin 0.21 0.23

Fenilalanin 0.28 0.23

Histidin 0.11 0.11

Lisin 0.35 0.32

Arginin 0.26 0.25

Tabel I. Komposisi nutrien tanaman murbei (Morus alba)

Tabel II. Komposisi 15 macam asam amino daun murbei (% dari bahan

kering)

5/28/2018 1-5

6/27

6

Bagian tanaman murbei yang dapat dimanfaatkan yaitu bagian daun,

batang, ranting, akar dan kulit batang. Daun bersifat pahit, serta manis dingin,

berkhasiat sebagai peluruh keringat (diaforetik), peluruh kencing (diuretik),

mendinginkan darah, antihiperlipidemia, pereda demam (antipiretik) dan

memperbaiki pengelihatan. Buah bersifat manis, berkhasiat memelihara darah,

memperkuat ginjal, diuretik, peluruh dahak (ekspektoran), hipotensif, penghilang

haus, meningkatkan sirkulasi darah dan efek tonik pada jantung. Kulit akar

bersifat manis, sejuk, berkhasiat sebagai anti asmatik, ekspektoran, diuretik, dan

menghilangkan bengkak. Ranting bersifat pahit, netral, berkhasiat sebagai

karminatif, antipiretik, analgesik, antireumatik dan merangsang pembentukan

kolateral (Anugrah, 2012).

2. KuersetinNama IUPAC kuersetin adalah (3,4-dihidroksifenil)3,5,7trihidroksi4

HKromon-4on, dengan rumus molekul C15H10O7.2H2O, massa molar 338,27

g/mol, kerapatan curah 1,799 g/cm3, dan titik leleh 316 C (Anonim, 1996).

Kuersetin merupakan aglikon (kurang molekul gula) dari flavonoid lainnya (Xing

et al., 2001).

Gambar 1. Struktur kimia kuersetin (Anonim, 1996)

Telah dilaporkan bahwa kuersetin mempunyai efek hipolipidemik, tidak

hanya hipokolesterol tetapi juga hipotrigliserida (Rivera et al., 2008). Kuersetin

Gambar 1. Struktur kimia kuersetin (Anonim, 1996)

5/28/2018 1-5

7/27

7

mempercepat katabolisme trigliserida menjadi asam lemak dan gliserol

(Mazzucotelli et al., 2007) serta menginduksi oksidasi asam lemak menjadi energi

(de Boer et al., 2006). Selain itu, dari penelitian Gnoni, et al. (2009) diketahui

bahwa kuersetin dapat menghambat sintesis de novoasam lemah dan trigliserida.

3. Lipid PlasmaSenyawa-senyawa yang termasuk lipid dapat dibagi dalam beberapa

golongan. Bloor membagi lipid dalam tiga golongan besar yakni: (1) lipid

sederhana, yaitu ester asam lemak dengan berbagai alkohol, contohnya lemak atau

gliserida dan lilin; (2) lipid gabungan, yaitu ester asam lemak yang mempunyai

gugus tambahan, contohnya fosfolipid, serebrosida; (3) derivat lipid, yaitu

senyawa yang dihasilkan oleh proses hidrolisis lipid, contohnya asam lemak,

gliserol dan sterol (Poedjiadi, 2006). Kolesterol dan trigliserida adalah dua jenis

lipid yang relatif mempunyai makna klinis yang penting sehubungan dengan

aterogenesis. Karena lipid tak larut dalam plasma, lipid terikat pada protein

sebagai mekanisme transport dalam serum. Ikatan ini menghasilkan empat kelas

utama lipoprotein; kilomikron, lipoprotein densitas sangat rendah (VLDL),

lipoprotein densitas rendah (LDL), lipoprotein densitas tinggi (HDL).

Kadar relatif lipid dan protein berbeda-beda pada setiap kelas tersebut.

Dari keempat kelas lipoprotein yang ada, LDL yang paling tinggi kadar

kolesterolnya, sedangkan kilomikron dan VLDL kaya akan trigliserida. Kadar

protein tertinggi pada HDL (Price dan Wilson, 1995)

5/28/2018 1-5

8/27

8

a. TrigliseridaTrigliserida merupakan komponen utama lemak dalam makanan, yang

dibentuk oleh reaksi katalisa gliserol dengan tiga molekul asam lemak (Piliang

dan Djojosoebagio, 2006). Trigliserida merupakan suatu ester alkohol dengan

asam lemak. Alkoholnya gliserol dan asam lemaknya asam karboksilat dengan

kerangka hidrokarbon yang panjang (Hawab, 2003). Struktur umum trigliserida

dapat dilihat pada gambar 3. Trigliserida banyak didapatkan dalam sel-sel lemak

yang merupakan 99% dari volume sel. Beberapa trigliserida juga berada dalam

bentuk butir-butir lipida yang kecil dalam jaringan nonlemak (nonadipose) seperti

hati dan urat daging, yang dapat segera digunakan untuk metabolisme energi

(Linder, 1992). Triasilgliserol memegang peranan yang sangat penting dalam

menghasilkan energi pada hewan. Senyawa ini mengandung energi tertinggi

diantara nutrien utama (lebih dari 9 kkal/g) dan disimpan di dalam sel sebagai

butir-butir lemak yang hampir murni serta dapat disimpan dalam jumlah sangat

besar di dalam jaringan adiposa. Rata-rata 40% atau lebih kebutuhan energi harian

manusia di negara-negara modern dipenuhi oleh triasilgliserol pada makanan

(Lehninger, 2004).

Asam-asam lemak digabung atau diesterifikasi dengan molekul gliserol

untuk membentuk trigliserida-trigliserida, asam-asam lemak tersebut

Gambar 2. Struktur kimia trigliserida (Hawab, 2003)

5/28/2018 1-5

9/27

9

kemungkinan asam-asam lemak yang baru saja disintesa atau merupakan hasil

pemecahan hidrolisis trigliserida. Tiga molekul asam lemak yang bereaksi dengan

gliserol akan membentuk satu molekul trigliserida, sedangkan dua molekul asam

lemak dan satu komponen cholinfosfat yang bereaksi dengan gliserol akan

menghasilkan fosfolipida (Piliang dan Djojosoebagio, 2006). Trigliserida secara

prinsip, diangkut oleh VLDL yang tergantung pada aktivitas lipoprotein lipase

dan reseptor membran selular (Madani et al., 2003).

b.KolesterolKolesterol merupakan salah satu sterol penting dan terdapat banyak di

alam. Kolesterol terdapat hampir di semua sel hewan dan sel manusia terutama

dalam darah, empedu, kelenjar adrenal bagian luar (adrenal cortex) dan jaringan

saraf. Kolesterol juga dapat diisolasi dari batu empedu karena kolesterol

merupakan komponen utama batu empedu tersebut. Kolesterol larut dalam pelarut

lemak, misalnya eter, kloroform, benzena dan alkohol panas (Poedjiadi, 2006).

Kolesterol merupakan zoosterol khas yang dapat ditemukan di jaringan

tumbuhan dalam jumlah 0,05% sampai 5%. Senyawa tersebut terdapat dalam

jumlah besar dalam otak manusia yang 17% berupa zat padat (Manitto, 1992).

Kolesterol adalah senyawa sterol dengan bentuk alkohol steroid yang mempunyai

ikatan rangkap (Poedjiadi, 2006). Senyawa steroid memiliki struktur yang sama,

seperti pada gambar 4, yaitu terdiri dari sistem gabungan cincin yang disebut

siklopentano perhidrofenatren.

5/28/2018 1-5

10/27

10

Gambar 3. Struktur kimia steroid (Poedjiadi, 2006)

Sterol merupakan steroid yang mengalami modifikasi, karena kehadiran

1 rantai hidrokarbon yang mengandung 8 sampai 10 atom karbon pada posisi

17 dan kehadiran hidroksil pada posisi 3 pada cincin. Kolesterol mengandung 8

atom karbon aeperti pada gambar 5, dan mengandung ikatan rangkap pada

posisi C5-C6 cincin siklopentano perhidrofenatren.

Klasifikasi total kolesterol, trigliserida, kolesterol LDL, dan kolesterol HDL dapat

dilihat pada Tabel 3.

Sumber : Mahan dan Stump (2004)

Tabel III. Klasifikasi total kolesterol, kolesterol LDL, kolesterol HDL, dan

Trigliserida

Gambar 4. Struktur kimia kolesterol (Poedjiadi, 2006)

5/28/2018 1-5

11/27

11

Pengetahuan mengenai kadar kolesterol dan trigliserida digunakan untuk

menduga jenis lipoprotein mana yang meningkat, sehingga bermanfaat dalam

menegakkan diagnostik genetik. Jika kadar kolesterol meningkat sedangkan

trigliserida normal, maka hal ini selalu disebabkan oleh kadar LDL dan

merupakan hiperkolesterolmia lipogenik. Jika ditemukan peningkatan trigliserida

(200-800 mg/dl) dengan kadar kolesterol normal, maka hal ini selalu hampir

menunjukkan adanya kenaikan VLDL (Suyatna dan Handoko, 1995)

4. Hiperlipidemia (HLD)Hiperlipidemia (lebih tepatnya hiperlipoproteinemia) adalah sejumlah

gangguan metabolisme yang melibatkan peningkatan konsentrasi plasma dari

spesies lipoprotein apapun (Katzung, 2002). Istilah hiperlipidemia terbatas pada

kondisi meningkatnya kadar kolesterol (hiperkolesterolemia) atau trigliserida

(hipertrigliseridemia) dalam plasma atau keduanya.

Dalam kapiler jaringan-otot dan lemak, trigliserida dirombak di bawah

pengaruh lipoproteinlipase menjadi produk yang masih mengandung banyak

trigliserida dan kolesterol. Produk ini lazimnya dibentuk lebih lanjut oleh hati.

Tetapi, bila karena sesuatu sebab, pengolahan tidak sempurna, maka sisanya

setelah makan masih bersirkulasi dalam darah untuk jangka waktu yang lama.

Demikian terjadinya hipertrigliseridemia. HLD ini dapat ditentukan dengan

naiknya kadar kilomikron segera setelah makan. Umumnya, gangguan ini jauh

hari sudah menimbulkan bentuk atherosclerosis dan timbulnya problema sekitar

usia 30 tahun (Tjay dan Rahardja, 2002).

5/28/2018 1-5

12/27

12

Penggolongan HLD berdasarkan dasar penyebab terjadinya

hiperlipidemia, yakni :

a. HLD keturunanDalam jumlah kecil (2-3 % dari penduduk), HLPD bersifat familial akibat

kelainan genetis yang mempengaruhi langsung metabolisme lipida. Misalnya,

pembentukan LDL dipertinggi atau kekurangan reseptor yang berakibat LDL

tidak diserap oleh sel.

b. HLD akibat susunan panganTerlampau banyak lemak jenuh dan terlalu sedikitnya sayur-mayur, biasanya

menimbulkan kenaikan LDL dan atau VLDL. Bentuk ini dapat ditanggulangi

dengan diet kalori rendah, yang miskin kolesterol / trigliserida dan kaya akan

asam lemak. Bila diet ini tidak memberikan hasil, barulah digunakan obat-obatan.

c. HLD sekunder akibat penyakitMisalnya, diabetes, hipotirosis, insufisiensi ginjal menahun, obesitas dan

penyakit hati tertentu. Atau akibat pengobatan dengan, misalnya, hormon,

diuretika dan beta bloker. Umumnya, gejala ini menjadi sembuh sesudah

penyebab gangguan dihilangkan. Antilipemika biasanya tidak digunakan, kecuali

mungkin pada penderita diabetes, yang resiko atherosclerosis tinggi sekali karena

sistem pembuluhnya kurang kuat (Tjay dan Rahardja, 2002).

5. FibratObat-obat yang termasuk dalam golongan fibrat ini adalah klofibrat,

simfibrat, fenofibrat, dan bezafibrat. Berkhasiat menurunkan TG dan VLDL

dengan kuat, kolesterol total hanya sedikit, LDL dapat diturunkan serta HDL

5/28/2018 1-5

13/27

13

dinaikkan sedikit, kecuali gemfibrozil yang menaikkan HDL dengan kuat. Obat-

obat ini dapat menurunkan secara efektif kadar TG yang tinggi berdasarkan

penghambatan pemasukan kilomikron dari usus ke darah dan aktifasi protein

lipase (Tjay dan Rahardja, 2002).

B. Penelitian yang RelevanBerdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Kobayashi et al. (2010) ,

pemberian serbuk daun murbei (Morus alba L.) dosis 250 mg/KgBB dan 500

mg/KgBB per hari selama tujuh minggu dapat menurunkan kadar trigliserida

plasma tikus secara signifikan.

Penelitian lain yang dilakukan oleh Aramwit et al. (2012) disimpulkan

bahwa pemberian 280 mg serbuk daun murbei (Morus alba L.) tiga kali sehari

sebelum makan selama 12 minggu dapat menurunkan kadar trigliserida dan LDL

pasien milddislipidemiatanpa menimbulkan efek samping.

C. Kerangka BerpikirBanyak obat-obatan sintetis yang dapat mencegah, mengurangi, dan

menghilangkan penyakit yang disebabkan oleh hiperlipidemia, namun tidak

menutup kemungkinan obat herbal mempunyai efek yang sama atau bahkan lebih

tinggi dibandingkan dengan obat sintetis.

Terdapat produk X yang mengandung ekstrak daun murbei dan

diperkirakan dapat menurunkan kadar trigliserida. Dari penelitian yang telah

dilakukan oleh Kobayashi et al. (2010) dan Aramwit et al. (2012) diketahui

5/28/2018 1-5

14/27

14

bahwa serbuk daun murbei dapat menurunkan kadar trigliserida. Dari penelitian

tersebut, diketahui bahwa penurunan kadar trigliserida dikaitkan dengan adanya

zat aktif dalam serbuk daun murbei berupa senyawa flavonoid, yaitu kuersetin.

Berdasarkan hal tersebut, ada tidaknya efek penurunnan kadar trigliserida

oleh produk X bergantung pada kandungan senyawa kuersetin dalam produk

X tersebut. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian terhadap produk X

untuk mengetahui penurunan kadar trigliserida darah pada tikus putih jantan galur

Wistar.

D. Keterangan Empiris yang DiharapkanProduk X yang mengandung ekstrak daun murbei dapat menurunkan

kadar trigliserida darah, sehingga dapat dijadikan obat alternatif selain obat

sintetis sebagai penurun trigliserida darah.

5/28/2018 1-5

15/27

15

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan PenelitianPenelitian ini termasuk jenis penelitian yang bersifat eksperimental.

Penelitian laboratorium (Experimental Research) atau penelitian experimental,

merupakan penelitian yang bertujuan untuk mempelajari fenomena dalam

kerangka korelasi sebab akibat dengan cara memberikan perlakuan (manipulasi)

pada subjek penelitian kemudian di uji secara empirik (Yanwirasti, 2008).

Penelitian ini menggunakan rancangan penelitian True Experimental Design

Post Test Only Control Group Design yaitu rancangan yang digunakan untuk

mengukur efek setelah diberikan perlakuan pada beberapa buah kelompok

(kontrol dan perlakuan) yang dikondisikan secara identik dan telah dikendalikan

berbagai variabel yang tidak dikehendaki atau non eksperimental. Pada

kelompok-kelompok tertentu diberikan intervensi sebagai cause sedangkan

kelompok yang lain tidak diberikan intervensi, kemudian dibandingkan efek yang

terjadi antara kelompok-kelompok tersebut (Yanwirasti, 2008).

B. Subyek Penelitian

Penelitian dilakukan pada tikus putih jantan speciesRattus norvegicusgalur

Wistar dengan berat badan awal 150-200 gram yang berumur 2-3 bulan

5/28/2018 1-5

16/27

16

dan sehat yang diperoleh dari Laboraturium Farmakologi Universitas Gadjah

MadaYogyakarta.

C. Variabel Penelitian

Variabel bebas:

1. Perlakuan, yaitu diet lemak tinggi (kuning telur puyuh).

2. Lama perlakuan, yaitu lama pemberian perlakuan sampai saat

pengambilan darah hewan uji.

Variabel Terikat:

Kadar trigliserida darah tikus putih jantan galur Wistar.

Variabel terkendali:

Jenis tikus, jenis kelamin, umur, berat badan, waktu pemberian, dan,

serta asupan makanan.

D. Bahan dan Alat yang Digunakan

1. Bahan

a. Bahan Uji

Bahan uji yang digunakan adalah yang Produk X yang mengandung

ekstrak daun murbei. Sediaan yang digunakan mempunyai berat 1 gram tiap

sachet.

b. Bahan Pelarut

Cairan yang digunakan untuk melarutkan produk X adalah aquades

yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas

5/28/2018 1-5

17/27

17

Ahmad Dahlan Yogyakarta.

c. Senyawa Pembanding

Senyawa pembanding yang digunakan adalah gemfibrozil yang

diproduksi oleh Phapros.

d. Hewan Uji

Tikus putih jantan galur Wistar dengan berat badan awal 150-200 gram

yang berumur 2-3 bulan dan sehat yang diperoleh dari Laboraturium

Farmakologi Universitas Gadja Mada Yogyakarta.

2. Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu kandang, timbangan

hewan, spuit oral, timbangan gram analitik, mortir, stamper, gelas beker,

labu takar, pipet tetes, batang pengaduk, pisau,Easy Touch dan strip.

E. Jalannya Penelitian1. Persiapan Sediaan Ujia. Perhitungan Dosis Larutanproduk X

Kebutuhan dosis manusia (BB 60 kg) untuk 1 hari = 6 gram

Konversi ke kebutuhan dosis tikus = 70/60 x 0,018 x 6 g

= 0,126 g/200 gBB

= 630 mg/KgBB

VAO = 630 mg/KgBB x 0,2 KgBB = 2 ml

Kons.

5/28/2018 1-5

18/27

18

Kons. = 63 mg/ml

Maka produk X akan diberikan dengan dosis 630 mg/KgBB dalam

volume 2 ml untuk tikus dengan berat badan 200 mg.

b. Pembuatan Larutan Produk XProduk Xdilarutkan dengan air, diaduk sampai larut.

2. PenginduksiSenyawa yang digunakan sebagai penginduksi (untuk menaikkan kadar

trigliserida) adalah kuning telur puyuh. Tikus setiap harinya diberikan kuning

telur puyuh sebanyak 6 ml selama 7 hari berturut-turut.

3. Penentuan Dosis Obat dan Pembuatan Suspensi Gemfibrozila.Perhitungan Dosis Gemfibrozil

Kebutuhan dosis manusia (BB 60 kg) untuk 1 hari = 1200 mg

Konversi ke kebutuhan dosis tikus = 70/60 x 0,018 x 1200 mg

= 25,2 mg/200 gBB

= 126 mg/KgBB

VAO = 126 mg/KgBB x 0,2 KgBB

10 mg/ml

= 2,52 ml

Maka, gemfibrozil akan diberikan dengan dosis 126 mg/KgBB dalam volume

2,52 ml untuk tikus dengan berat badan 200 mg.

b. Pembuatan Suspensi Gemfibrozil

1). Pembuatan CMC Na 0,5 %

Larutan CMC Na 0,5 % dibuat dengan menimbang 0,5 gram CMC Na

5/28/2018 1-5

19/27

19

kemudian dikembangkan dengan sebagian air panas dalam mortir,

diaduk sampai homogen, lalu tambahkan air sampai 100 ml.

2). Pembuatan Suspensi Gemfibrozil

Suspensi gemfibrozil dibuat dengan menyuspensikan tablet gemfibrozil

(setara dengan 1 gram gemfibrozil) dalam CMC Na 0,5 % (100 ml).

4. Pengelompokan dan Perlakukan Hewan UjiHewan uji dibagi secara acak menjadi lima kelompok yang terdiri dari

lima ekor tikus putih jantan galur Wistar, sebagai berikut :

Kelompok A : Diberi pakan standar dan air minum ad libitum.

Kelompok B : Diberi pakan standar, kuning telur puyuh, air

minum ad libitum.

Kelompok C : Diberi pakan standar, kuning telur puyuh, air

minum ad libitum dan larutan Natrium CMC

0,5%

Kelompok D : Diberi pakan standar, kuning telur puyuh, air

minum ad libitumdan suspensi gemfibrozil.

Kelompok E : Diberi pakan standar, kuning telur puyuh, air

minum ad libitumdanproduk X.

5/28/2018 1-5

20/27

20

F. Cara Kerja Skematis

25 ekor tikus umur 2-3 bulan dengan bobot 150-200 gram

Diadaptasikan selama 1 minggu

Dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing kelompok 5 ekor

Kelompok A Kelompok B Kelompok C Kelompok D Kelompok E

Diinduksi kuning telur puyuh dan diberi perlakuan selama 7 hari

Dipuasakan 12 jam

Dilakukan pengecekan kadar trigliserida dengan alatEasy Touch

Analisa statistik

Gambar 5. Cara kerja skematis

Keterangan :

A : kontrol normal

B : kontrol negatif

C : kontrol pelarut

D : kontrol positif (gemfibrozil 126 mg/KgBB)E : produk X (630 mg/KgBB)

G. Analisis DataData yang diperoleh dianalisis dengan statistika. Dilakukan uji

pendahuluan dengan uji Kolgomorov-Smirnov untuk memeriksa normalitas data

dan uji Levene untuk melihat homogenitas data. Jika data yang diuji terdistribusi

Gambar 5. Cara kerja skematis

5/28/2018 1-5

21/27

21

normal dan homogen (p > 0.05), maka dilanjutkan dengan uji parametrik meliputi

uji t berpasangan, ANOVA satu jalur dilanjutkan uji t Tukeys dengan taraf

kepercayaan 95% untuk menunjukan perbedaan yang signifikan antar pasangan

kelompok. Jika dengan uji Kolmogorov-Smirnov dan uji Levene tidak didapatkan

distribusi normal dan homogenya, maka dilanjutkan dengan uji non parametrik

yaitu uji Wilcoxon.

5/28/2018 1-5

22/27

22

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Perlakuan Pada Hewan UjiPenelitian dilakukan di Laboratorium Farmakologi Universitas Ahmad

Dahlan menggunakan hewan uji tikus putih jantan galur Wistar umur 2-3 bulan,

dengan berat antara 150-200 gram. Tikus merupakan salah satu hewan percobaan

yang memiliki pembawaan tenang, mudah ditangani, memiliki kesamaan fisiologi

dengan manusia, dan dapat menyesuaikan diri dengan baik. Selain itu, tikus putih

jantan memiliki sistem metabolisme yang lebih stabil, karena tidak banyak

dipengaruhi oleh kondisi hormonal sehingga dapat meminimalkan gangguan pada

pengukuran data penelitian (Muwarni et al., 2006).Tikus yang digunakan adalah

tikus sehat yang ditandai dengan gerakannya yang aktif.

Penelitian ini menggunakan hewan uji dengan jenis kelamin jantan untuk

menghindari adanya faktor hormonal (siklus estrus) pada hewan betina sehingga

tidak terpengaruh oleh faktor hormonal. Pada penelitian Yamaguchi et al(2002)

diketahui bahwa pada siklus estrus betina, fase diestrus dan proestrus terjadi

peningkatan kadar lipoproteinlipase sehingga meningkatkan hidrolisis trigliserida

menjadi asam lemak bebas dan monoasilgliserol.

Disamping keseragaman jenis kelamin, hewan yang digunakan

mempunyai keseragaman berat badan, yaitu 150-200 gram dan keseragaman

umur, yaitu 2-3 bulan. Umur tikus yang baik digunakan adalah tikus yang telah

dewasa karena perkembangan organ tubuhnya telah sempurna. Umur dan berat

5/28/2018 1-5

23/27

23

badan tikus diusahakan seragam untuk menghindari atau memperkecil variabilitas

biologis antar hewan uji yang digunakan sehingga dapat memberikan respon yang

relatif lebih seragam dalam penelitian ini. Sebelum digunakan untuk penelitian,

hewan uji diadaptasikan selama satu minggu pada lokasi penelitian agar hewan

tersebut terbiasa pada lokasi penelitian.

B. Pengukuran Kadar Trigliserida dan Analisis Statistik ANOVA

Sebelumnya, dilakukan orientasi lamanya waktu pemberian kuning telur

puyuh untuk meningkatkan kadar trigliserida darah tikus. Berdasarkan penelitian

oleh Sinanoglou et al(2011) diketahui bahwa kandungan trigliserida, lemak, dan

asam lemak pada kuning telur puyuh secara berturut-turut adalah 56,47%,

27,45%, dan 0,38%. Dari data tersebut diperkirakan kuning telur puyuh dapat

meningkatkan kadar trigliserida darah tikus. Dari orientasi yang telah dilakukan,

diperoleh hasil peningkatan kadar trigliserida darah tikus setelah pemberian

kuning telur puyuh sebanyak 6 ml per hari selama 7 hari.

Pengukuran kadar trigliserida darah tikus dilakukan pada hari ke 8.

Penetapan kadar trigliserida darah tikus menggunakan alat easy touch. Cara ini

dipilih karena cara kerjanya yang lebih sederhana dibandingkan dengan metode

colorimetric enzymatik test. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Luley et

al (2000) diketahui bahwa perbedaan yang terjadi antara kedua metode tersebut

hanya sebesar 0,94%.

Setelah diberi perlakuan selama 7 hari maka tikus putih jantan galur

Wistar diukur kadar trigliseridanya dengan cara mengambil darah dari vena di

5/28/2018 1-5

24/27

24

ekor lalu diukur dengan alat easy touch. Hasil pengukuran kadar trigliserida

terlihat pada tabel IV.

Tabel IV. Data hasil pengukuran kadar trigliserida dan persen penurunan tiap

kelompok

kelompokKadar SD

(mg/dl)

Persen penurunan

(%)

A 128,6 5,41 -

B 201,0 9,92 -

C 200,6 6,31 -

D 151,2 7,09 24,78

E 182,0 6,14 9,45

Keterangan :

A : kontrol normal

B : kontrol negatif

C : kontrol pelarut

D : kontrol positif (gemfibrozil 126 mg/KgBB)

E : produk X (630 mg/KgBB)

Dari tabel IV terlihat pemberian suspensi gemfibrozil dapat menurunkan

kadar trigliserida sebesar 24,78 % dan produk X dapat menurunkan kadar

trigliserida sebesar 9,45 %.

Data hasil pengukuran trigliserida masing-masing kolompok kemudian

dianalisis statistik. Analisis statistik dilakukan untuk mengetahui perbedaan dari

tiap kelompok uji dan untuk lebih mempertegas pengambilan kesimpulan terhadap

perlakuan. Langkah pertama pada uji statistik adalah menentukan apakah

kelompok uji terdistribusi normal atau tidak terdistribusi normal dan homogen

atau tidak homogen. Berdasarkan hasil uji pendahuluan pada kelompok uji,

menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dan homogen sehingga analisis

yang dilakukan adalah analisis parametrik yaitu dengan menggunakan uji

ANOVA. Uji ANOVA ini dilakukan untuk mengetahui perlakuan mana saja yang

menunjukkan perbedaan bermakna. Hasil uji ANOVA terlihat pada Tabel V.

5/28/2018 1-5

25/27

25

Tabel V. Ringkasan hasil uji analisis statistik antar kelompok menggunakan

ANOVA

Keterangan :

A : kontrol normal

B : kontrol negatifC : kontrol pelarut

D : kontrol positif (gemfibrozil 126 mg/KgBB)

E : produk X (630 mg/KgBB)

S : berbeda signifikan / berbeda bermakna

TS : berbeda tidak signifikan / berbeda tidak bermakna

Berdasarkan hasil analisis statistik kontrol negatif mempunyai nilai

signifikansi yang berbeda bermakna dengan kelompok normal (nilai signifikansi p

< 0,05). Hal tersebut menunjukkan bahwa kelompok kontrol negatif yang diberi

kuning telur puyuh secara signifikan mengalami peningkatan kadar trigliserida.

Melihat nilai signifikansi antara kelompok negatif dan kelompok pelarut

menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna (nilai signifikansi p > 0,05). Hal

tersebut menunjukkan bahwa pelarut (CMC Na 0,5%) tidak menyebabkan

peningkatan maupun penurunan kadar trigliserida.

Hasil analisis statistik kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol

positif serta kelompok kontrol negatif dengan kelompok produk X

menunjukkan nilai signifikansi berbeda bermakna (nilai signifikansi p < 0,05).

Hal tersebut menunjukkan antara kelompok negatif dengan kelompok positif serta

Sumber

variasiA B C D E

A

B S (p=0,00)

C S (p=0,00) TS (p=1,00)

D S (p=0,01) S (p=0,00) S (p=0,00)

E S (p=0,00) S (p=0,04) S (p=0,04) S (p=0,00)

5/28/2018 1-5

26/27

26

kelompok negatif dengan kelompok produk X memiliki efek penurunan kadar

trigliserida darah pada hewan uji berbeda bermakna.

Hasil analisis statistik kelompok kontrol positif dengan kelompok produk

X menunjukkan nilai signifikansi berbeda bermakna (nilai signifikansi p