Estudio Histológico de Médula Ósea Toma de muestra, Procesamiento y

Parámetros de Evaluación.Médula ósea normal, Fibrosis,

Necrosis, Granulomas , Relación Mieloide-Eritroíde

BIOPSIA DE HUESO

• Util en el diagnóstico y control evolutivo de numerosas enfermedades hematológicas.

• Aporta información de gran valor para determinar o completar el diagnóstico de otras enfermedades no hematológicas.

• Esencial para el diagnóstico, cuando el AMO es seco (como consecuencia de fibrosis medular o de una densa infiltración celular)

BIOPSIA DE HUESO

• Estudio de la arquitectura medular, presencia de granulomas o de lesiones vasculares, y el patrón de distribución de cualquier infiltrado anormal.

• Valora cuantitativamente la celularidad en pacientes con citopenias, para investigar la infiltración en linfomas, y en el estudio de los neoplasias mieloides.

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE AMO Y BIOPSIA DE HUESO

PROCESAMIENTO HISTOLOGICO• Es recomendable una biopsia de al menos 1 cm de largo, se

coloca en formol tamponado a una concentración de 4%. El tiempo de fijación puede ser de 2 a 4 horas.

• Descalcificación usando ácido nítrico con EDTA por 2 a 3 horas.

• Proceso histotecnólogico, hasta obtener la biopsia incluida en un taco de parafina, lista para los cortes histológicos.

• Los cortes histológicos, son a un grosor de 3 a 4 um.• Se adhieren a una lámina portaobjetos, luego se

desparafinan.• Se lleva a colorear en una batería de Hematoxilina de Harris-

eosina.• Montaje con bálsamo de Cánada, y etiquetado.

PARAMETROS DE EVALUACION• Determinar la presencia de megacariocitos o evaluar

depósitos de hierro.

• Determinar la presencia de artefactos que puedan dificultar una correcta interpretación (hemorragia, tejido hematopoyético desplazado y distorsionado por las trabéculas óseas).

• Una biopsia de 0,5 cm de largo puede ser insuficiente para excluir una infiltración linfomatosa o metastásica.

Observación a 40x

• Evaluación de la arquitectura medular,• Las trabéculas óseas, la relación celularidad/grasa

(expresada como porcentaje entre tejido hematopoyético y grasa).Según la edad varía desde un 90% en niños hasta un 40 - 50% en mayores de 60 años.

• La presencia de estructuras anormales, como: nódulos linfoides, áreas infiltradas o fibrosadas, granulomas, entre otras.

Arquitectura Medular

BIOPSIA NORMAL

BIOPSIAS DE HUESO

BIOPSIA DE HUESO

NODULOS LINFOIDES EN MO

AREAS CON INFILTRACION O FIBROSIS

Observación a 100x

• Valorar la presencia, cantidad y maduración de las tres series hematopoyéticas.

• Presencia y situación de los megacariocitos, la presencia de acúmulos de linfocitos (teniendo en cuenta que aproximadamente un 10% de las biopsias de adultos mayores de 40 años tienen agregados linfoides de carácter benigno), e identificación de las células plasmáticas, de los histiocitos principalmente.

Observación superior a 400x• El tipo de alteración observada en los cortes de médula es fundamental para el

diagnóstico de algunas enfermedades hematológicas, especialmente aplasia medular y Enfermedades Mieloproliferativas.

• Empleado en la extensión de la Enfermedad de Hodgkin, y pronóstico de otras, como la Leucemia Linfática Crónica.

• En granulomas, metástasis, leucemias, linfomas, mielomas, etc, determinan la extensión y características de la infiltración (difusa, nodular, intersticial).

• En la pancitopenia o síndrome febril de etiología desconocida puede permitir el diagnóstico de linfoma o carcinomatosis con invasión medular.

• Adicionalmente, pueden realizarse técnicas histoquímicas e inmunohistoquímicas. Las cuales serán detalladas en la presente unidad.

ASPIRADO DE MEDULA OSEA• Evaluación de finos detalles morfológicos.

• El aspirado es útil en el estudio de pacientes con sospecha de anemia de enfermedad crónica, anemia megaloblástica, control de leucemias agudas, búsqueda de hemoparásitos, agranulocitosis, etc.

• El estudio morfológico de la sangre periférica es más representativo que el de la médula ósea, de manera particular en algunos síndromes linfoproliferativos y mieloproliferativos.

ESPICULAS

VALORACION MACROSCOPICA

• La abundancia, escasez o ausencia de espículas, nos orienta sobre la representatividad del material analizado.

• Presencia de espículas, el aspecto citológico que se estudia suele ser representativo de la médula ósea.

• En el caso de un aspirado seco o sin espículas, se establece la sospecha de una mielofibrosis o de médula ósea hipercelular "empaquetada", siendo en estos casos recomendable efectuar una biopsia medular.

HIPOCELULAR

HIPERCELULAR

VALORACION MICROSCOPICA A MENOR AUMENTO

• Permite valoración semicuantitativa de la celularidad (muy escasa, disminuida, normal o aumentada)

Confirmar la presencia de células de estroma medular, en condiciones normales la celularidad es representativa, así como observar la presencia de megacariocitos.

• Permite identificar otros elementos celulares: células metastásicas, histiocitos, acúmulos de células plasmáticas, osteoblastos, osteoclastos, mastocitos, necrosis celular, células de Reed-Sternberg, entre otras.

VALORACION MICROSCOPICA CON OBJETIVO DE INMERSION

• Se efectúa un recuento diferencial de al menos 300 - 500 células para determinar los siguientes parámetros:

La relación mielo/eritroideRecuento celular diferencial (Mielograma)

• El examen morfológico evalúa los rasgos de maduración de las series hematopoyéticas: detención madurativa mieloide o eritroide (agranulocitosis, eritroblastopenia), o alteraciones madurativas (anemia megaloblástica, anemia hemolítica, síndrome mielodisplásico, infecciones graves, etc.).

• La observación citológica cuidadosa permite identificar células atípicas de leucemias, linfomas, histiocitosis, mieloma, metástasis, etc., así como la presencia de hemoparásitos ante un cuadro clínico sospechoso.

RESULTADOS DEL MIELOGRAMA