2 UREA Métodos

*T. Hayde Ziga Cceres*

UREA (BUN, N ureico, N de rea, Carbamida)

Factores de conversin:Urea N ureico60 - 2890 - X X = 90 x 28 60 90 x 0.46

Urea N ureico60 - 28X - 40X = 40 x 60 28X = 40 x 2.14

C:12O:164 H: 42 N:28 Pm: 60 daltons

T. Hayde Ziga Cceres

*T. Hayde Ziga Cceres*Los animales acuticos pueden eliminar NH3 directamente de la sangre x las branquias (animales amonotlicos), gracias al gran volumen de agua que pasa a travs de stas.Bacterias y protozoos liberan al NH3 disolvindolo en el medio donde el agua es abundante.,


*T. Hayde Ziga Cceres*Los vertebrados (entre ellos el hombre) eliminan poco NH3, la mayor parte lo transforman en urea antes de ser eliminado (animales ureotlicos).

La glutamina es el aa encargado de almacenarlo temporalmente, mantenerlo dentro de los niveles aceptados y transportarlo.



Aves y reptiles forman c. rico, el q durante la retencin de agua se elimina principalmente como un comp. slido (an. uricotlicos).

El NH3 se convierte en c. rico, compuesto insoluble que se excreta en forma de masa semislida de cristales de c. rico en las heces.


*T. Hayde Ziga Cceres*NH3 es una base relativam. fuerte q con valores fisiolgicos de pH se pta. predominantem. como in amonio (NH4); ambos txicos y en altas concs daan particularm. el cerebro. Por ello el NH3 debe ser inactivado y eliminado, lo cual se logra a travs del Ciclo de la Urea.


*T. Hayde Ziga Cceres*El Ciclo de la UreaLa urea es la diamida del c. Carbnico. A diferencia del NH3, no es bsica y resulta relativam. atxica. Debido a su tamao y carga elctrica (neutra) puede traspasar las membrana biolgicas y ser fcilmente transportada x la sangre y eliminada en la orina.Se produce exclusivam. en el hgado a travs del Ciclo de la Urea q se inicia en las mitocon-drias y contina en el citoplas-ma.


*T. Hayde Ziga Cceres*UREA, N ureico, BUN


Formacin de carbamilfosfato: El NH4 reacciona con el CO2 para formar carbamilfosfato, catalizado por la carbomilfosfatosintasa (CPS I).Formacin de citrulina: Carbamilfosfato reacciona con ornitina para dar citrulina catalizado por la transferasa de carbamilornitina.La citrulina se transforma en argininosuccinato con intervencin del aspartato x accin de la sintetasa de argininosuccinato.Arginosuccinato es hidrolizado por la liasa argininosuccinato produciendo arginina y fumarato.5. Por accin de la arginasa se forma UREA y ornitina.



*T. Hayde Ziga Cceres*El NH4 reacciona con el CO2 para formar carbamilfosfato, la enzima catalizadora es la carbomilfosfatosintasa (CPS I).


*T. Hayde Ziga Cceres*Carbamilfosfato reacciona con la ornitina p formar citrulina, catalizado x la transferasa de carbamilornitina.


*T. Hayde Ziga Cceres*La citrulina se transforma en argininosuccinato con intervencin del aspartato x accin de la sintetasa de argininosuccinato .


*T. Hayde Ziga Cceres*Argininosuccinato es hidrolizado x la liasa argninosuccinato, produciendo arginina y fumarato.


*T. Hayde Ziga Cceres*Por accin de la arginasa se forma urea y ornitina.


*T. Hayde Ziga Cceres*U R E AEs la principal forma de eliminar productos nitrogenados del metabolismo proteico en el humano. Con el agua solutos como la urea difunden pasivam., aunque parcialm., ya que la membrana tubular no es completamente permeable, y por ello al final del tbulo proximal slo un 50 % de la urea ha sido reabsorbida. En orina puede alcanzar concentraciones muy superiores a las plasmticas. Cuando dism. el flujo renal, la urea se acumula en sangre y se produce la uremia.


*T. Hayde Ziga Cceres*La conc srica de urea es + influenciada x factores no renales que la creatina. La produccin de urea puede no ser constante porque depende del nivel de ingesta proteica, el uso de antianablicos (esteroides, tetraciclinas; nivel catablico del paciente (fiebre, infeccin, trauma masivo), y del aumento de productos de degradacin proteica, como: sangrado gastrointestinal.


*T. Hayde Ziga Cceres*La conc. srica de urea sirve en la evaluacin de la presencia de enf. Renal, ya que su conc es inversamente proporcional al FG. La urea tiene un Pm de 60 daltons y bajo condiciones normales filtra y se resorbe facilm. De modo que su aclaramiento es menor que el FG


*T. Hayde Ziga Cceres*SIGNIFICACION CLINICAUrea es la fraccin de N no proteico + importante en la mayora de los lquidos biolgicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo proteico. Se produce en el hgado y es excretada x la orina a travs de los riones. Una elevacin de la conc. srica de urea, se interpreta como una posible disfuncin renal o heptica, problemas dietticos, diabetes y otros. Pero, los valores sricos de urea estn muy relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, y cualquier alteracin en estas variables se traducir en un cambio de la conc. de urea en suero.


*T. Hayde Ziga Cceres*Mtodos para determinar UREAMtodos directos: M. qumico: Usa la reaccin de Fearon con diacetilmonoxima,

Mtodos indirectos:Usando ureasa y posterior determinacin de amonio (Nessler, Berthelot, glutamato deshidrogenasa).


*T. Hayde Ziga Cceres*a) M. directo: M. de FearonFundamento: Por hidrlisis cida en caliente de la Diacetil monoxima (DAM) se obtiene diacetilo e hidroxilamina.DIACETILO


*T. Hayde Ziga Cceres*En solucin cida el diacetilo se condensa con la urea formando una diazina amarilla, cuya intensidad se mide a 550 m y es proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra problema. DIACETILO

UREA +

DIAZINA DERIVADA(Amarilla)


*T. Hayde Ziga Cceres*b) Mtodos Indirectos Ureasa Urea + 2H2O + H+ 2 NH3+ CO2

1) Mtodo de Nessler:

NH4+ + 2 HgI2 + 4 KI + NaOH NH2Hg2I3 + 4 IK + INa Coloide amarillo naranja


*T. Hayde Ziga Cceres*2) Reaccin de Berthelot: El amonio reacciona con hipoclorito y salicilato para dar un cromge-no verde.


El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en ambiente alcalino, formndose un complejo verde, cuya intensidad es proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra y se lee a 600 nm.*T. Hayde Ziga Cceres*


REACTIVOS

La Urea-S sin FENOL. Conservados entre 2 y 8 C. y protegidos de la luz, estables hasta le fecha de caducidad indicada en c/etiqueta. Suspensin de Ureasa Ureasa >50 U/ml -Estabilizantes y preserv no reactivos c.s. Reactivo Salicilato: Acido Saliclico 5 mM Nitroprusiato 5 mM Reactivo Hipoclorito: Hipoclorito 10 mM NaOH 200 Mm Solucin Standard Urea 66 mg/dl Equivalente Nitrgeno Ureico 30 mg/dl Estabilizantes y preservantes no reactivos c.s. *T. Hayde Ziga Cceres*


MUESTRAS

Suero, plasma u orina diluida 1:100. El plasma debe obtenerse utilizando anticoagulan-tes libres de amonio. No utilizar fluoruro pues inhibe la accin de la enzima ureasa. La urea es estable en el suero por lo menos 24 hs a temp. ambiente, varios das entre 2 y 8 C., ms de seis meses a -20 C. *T. Hayde Ziga Cceres*


Tcnica:*T. Hayde Ziga Cceres*

BlStM.P.Muestra0.01 mLEstndar0.01 mLReactivo de trabajo1 mL1 mL1 mLIncubar 5 min. a temp. amb. 20 a 25 C 3 min.a 37 CReactivo Hipoclorito1 mL1 mL1 mLMezclar e incubar 10 min a temp. amb 5 minutos a 37 C. Leer abs. a 600 m dentro del plazo de 1 hora


Rangos de referenciaSuero o plasma: Urea : 10 a 50 mg/dL Nitrgeno Ureico : 4.5 a 22.7 mg/dL Orina: Urea : 15 a 30 g/24 hrs. Nitrgeno Ureico : 7 a 14 g/24 hrs. Los valores de referencia de excrecin urinaria de urea son muy variables y dependen de la ingesta. La excrecin de urea urinaria diaria puede ser de 12-20 g urea/da (200-333 mmol urea/da), aunque los lmites, especialmente el superior, puede aumentar mucho.



CAUSAS de HIPERUREMIAS:PRE RENALES: Descompensacin cardiaca, deshidratacin x ingestin reducida o prdida excesiva de agua, aum. del catabolismo proteico.RENALES: Glomrulonefritis ag. (aum. moderado), nefritis crnica, rin poliqustico, nefroesclerosis y necrosis tubular.POST RENALES: Cualquier obstruccin del tracto urinario: clculos, glndula prosttica dilatada, tumores.*T. Hayde Ziga Cceres*


*T. Hayde Ziga Cceres*Los valores de referencia de excrecin urinaria de urea son muy variables y dependen mucho de la ingesta. A excrecin de urea urinaria diaria puede ser de 12-20 g urea/da (200-333 mmol urea/da), aunque los lmites, especialmente el superior, puede aumentar mucho.


*T. Hayde Ziga Cceres*Mtodos Indirectos:3) El amonio producido reacciona con 2-oxoglutarato en presencia de la enzima Glutamato-deshidrogenasa (GlDH) y del coenzimo NADH, producindose l-glutamato. La dism. de la concentracin de NADH en la reaccin es proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra Esta reaccin se acepta como el mtodo de referencia y se utiliza en los analizadores automatizados. GlDHNH3 + NADH + H + + 2-oxoglutarato l-glutamato + NAD+ + H2O


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