2018 Pengaruh Penambahan Platelet-Rich Fibrin ......jaringan ikat gingiva adalah serat kolagen (sekitar 60% dari volume jaringan ikat gingiva). Platelet-rich fibrin (PRF) merupakan

Universitas Sumatera Utara

Repositori Institusi USU http://repositori.usu.ac.id

Fakultas Kedokteran Gigi Skripsi Sarjana

2018

Pengaruh Penambahan Platelet-Rich

Fibrin Pascakuretase Terhadap

Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat

Gingiva Model Periodontitis Kajian in

Vivo pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)

Dewanti, Wendy

Universitas Sumatera Utara

http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/11484

Downloaded from Repositori Institusi USU, Univsersitas Sumatera Utara

PENGARUH PENAMBAHAN PLATELET-RICH FIBRIN

PASCAKURETASE TERHADAP KEPADATAN

KOLAGEN JARINGAN IKAT GINGIVA

MODEL PERIODONTITIS

Kajian in Vivo pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi

syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokteran gigi

WENNY DEWANTI

NIM: 140600069

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN 2018


Fakultas Kedokteran Gigi

Departemen Periodonsia

Tahun 2018

Wenny Dewanti

Pengaruh Penambahan Platelet-rich Fibrin Pascakuretase Terhadap Kepadatan

Kolagen Jaringan Ikat Gingiva Model Periodontitis. Kajian in Vivo pada Kelinci

(Oryctolagus cuniculus)

xiii + 60 Halaman

Periodontitis ditandai dengan kerusakan yang progresif dari perlekatan jaringan

konektif yang disertai dengan pembentukan poket periodontal. Komponen utama dari

jaringan ikat gingiva adalah serat kolagen (sekitar 60% dari volume jaringan ikat

gingiva). Platelet-rich fibrin (PRF) merupakan generasi kedua konsentrat platelet

yang mengandung platelet dan growth factors yang diperoleh dari darah pasien

sendiri. Beberapa growth factors yang paling berperan dalam proses reparasi jaringan

ikat dengan meningkatkan produksi kolagen jaringan ikat antara lain platelet-derived

growth factor (PDGF) dan transforming growth factors (TGF-β). Penelitian ini

merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan rancangan post-test with

control group dan split-mouth design yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh

penambahan platelet-rich fibrin terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva

pascakuretase pada model periodontitis kelinci (Oryctolagus cunicuclus). Subjek

penelitian ini menggunakan 10 ekor kelinci yang kemudian dibagi menjadi 2

kelompok, yaitu kelompok perlakuan dengan pemberian PRF pascakuretase dan


kelompok kontrol tanpa pemberian PRF pascakuretase. Sebanyak satu ekor kelinci

mati dikarenakan kelalaian operator pada kelompok pengamatan hari ke-7 sehingga

jumlah sampel penelitian adalah 18 sampel. Kelinci diinduksi periodontitis dengan

silk-ligature selama 14 hari pada daerah servikal gigi insisivus sentralis rahang

bawah untuk kelompok perlakuan dan rahang atas untuk kelompok kontrol kemudian

dilakukan kuretase. Hasil penelitian diperoleh dari perhitungan fraksi warna

kepadatan serabut kolagen dengan menggunakan program ImageJ. Hasil uji statistik

yang dianalisis dengan menggunakan uji T berpasangan dan two-way Anova

menunjukkan terdapat perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva yang

signifikan (p<0,05) antara kelompok perlakuan dan kontrol pada pengamatan hari ke-

7 dan 14. Kesimpulan dari penelitian ini adalah terdapat pengaruh penambahan

platelet-rich fibrin (PRF) pascakuretase terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat

gingiva pada model periodontitis kelinci.

Daftar rujukan : 62 (1989-2018)


Faculty of Dentistry

Periodontia Department

2018 Year

Wenny Dewanti

The Effects of Platelet-rich Fibrin Post Curettage on Collagen Density of Gingival

Connective Tissue of Periodontitis Model in In Vivo Study on Rabbits (Oryctolagus

cuniculus)

xiii + 60 Pages

Periodontitis is an infectious disease that results in progressive destruction of

connective tissue attachments as well as periodontal pocket formation. The mayor

component of gingival connective tissue such as collagen fibers (about 60% of

gingival connective tissue). Platelet-rich fibrin (PRF) is a second-generation platelet

concentrate enriched with platelets and growth factors from patient own’s blood

harvest. Growth factors that play a crucial role in gingival connective tissue

reparation by promoting the production of collagen such as platelet-derived growth

factors (PDGF) and transforming growth factors (TGF-β). This study was an

experimental study with post-test only control group design approach that aims to

evaluate in vivo effects of PRF post curettage on collagen density of gingival

connective tissue in a rabbit model of periodontitis. Periodontitis was induced in 10

New Zealand local rabbits with 4-0 braided silk ligatures tied around the cervical

region of central incisors teeth bilaterally for 14 days then followed by curettage. By

using a split mouth design, PRF was placed in lower region as treatment group


whereas control group without PRF in upper region of jaws. Histopathological

analysis was conducted and collagen density was quantified by using ImageJ

software. The results were statistically analyzed using paired-T and two-way Anova

test, which showed significant differences (p<0,05) in collagen density of gingival

connective tissue between treatment and control groups on the 7th and 14th day of

healing. The conclusion of this research was platelet-rich fibrin addition post

curettage affects collagen density of gingival connective tissue in rabbit model of

periodontitis.

References : 62 (1989-2018)


ii

PERNYATAAN PERSETUJUAN

Skripsi ini telah disetujui untuk dipertahankan

di hadapan tim penguji skripsi

Medan, 23 Oktober 2018

Pembimbing : Tanda Tangan

Aini Hariyani Nasution, drg., Sp. Perio (K)

NIP. 19780130 200212 2 002 ............................................


iii

TIM PENGUJI

Skripsi ini telah dipertahankan di hadapan tim penguji

Pada tanggal 23 Oktober 2018

TIM PENGUJI

KETUA : Aini Hariyani Nasution, drg., Sp. Perio (K) .............................

NIP : 19780130 200212 2 2002

ANGGOTA :

1. Rini Octavia Nasution, drg., SH., M.Kes., Sp.Perio .............................

NIP : 19781002 200312 2 005

2. Krisnamurthy Pasaribu, drg., Sp. Perio .............................

NIP : 19461125 197703 1 001

Mengetahui,

Plt. KETUA DEPARTEMEN

Aini Hariyani Nasution, drg., Sp. Perio (K)

NIP. 19780130 200212 2 002


iv

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat

rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Pengaruh Penambahan Platelet-rich Fibrin Pascakuretase Terhadap

Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat Gingiva Model Periodontitis. Kajian in Vivo

pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)” sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan

gelar Sarjana Kedokteran Gigi pada Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera

Utara.

Dengan kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih kepada Aini

Hariyani Nasution, drg., Sp. Perio (K) selaku dosen pembimbing skripsi yang telah

meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing penulis serta memberikan

dorongan, motivasi dan semangat sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.

Rasa hormat dan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya juga penulis sampaikan

kepada kedua orang tua tercinta, yaitu ayahanda David Wijaya dan ibunda Tjioe Tjoei

Tjin yang telah membesarkan, memberikan kasih sayang yang tak terbalas, doa,

nasehat, semangat, dan dukungan baik moral maupun materi kepada penulis. Penulis

juga menyampaikan terima kasih kepada kakak penulis yaitu Chaterine dan adik

penulis yaitu Tiffany Dewanti serta segenap keluarga yang senantiasa memberikan

semangat dan dukungan kepada penulis selama penulisan skripsi ini.

Dalam penulisan skripsi ini, penulis telah banyak mendapat bantuan,

bimbingan serta saran dari berbagai pihak. Dengan segala kerendahan hati dan

penghargaan yang tulus, penulis ingin mengucapkan terima kasih yang sebesar-

besarnya kepada:

1. Dr. Trelia Boel, drg., M.Kes., Sp. RKG (K) selaku Dekan Fakultas

Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara

2. Aini Hariyani, drg., Sp. Perio (K) selaku Ketua Departemen Periodonsia

sekaligus sebagai Dosen Pembimbing Skripsi penulis di Fakultas Kedokteran Gigi

Eddy Dahar, drg., M. Kes selaku ketua tim penguji skripsi dan Hubban Nasution,


v

Universitas Sumatera Utara atas motivasi dan bantuan yang diberikan sehingga

skripsi ini dapat berjalan dengan lancar.

3. Prof. Haslinda Z. Tamin, drg., M.Kes., Sp. Pros (K) selaku Dosen

Pembimbing Akademik penulis yang telah memberikan bimbingan dan arahan

kepada penulis selama menjalani pendidikan di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas

Sumatera Utara.

4. Krisnamurthy Pasaribu, drg., Sp. Perio dan Rini Octavia Nasution, drg.,

SH., Sp. Perio., M.Kes selaku tim penguji penulis yang telah memberikan saran dan

masukan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

5. Seluruh staf pengajar serta pegawai Departemen Periodonsia Fakultas

Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara atas motivasi dan bantuan dalam

menyelesaikan skripsi ini hingga selesai.

6. Seluruh staf pengajar Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera

Utara atas ilmu dan pelajaran yang telah diberikan selama masa penulis menjalani

kuliah.

7. Prof. Drh. Srihadi Agungpriyono, Ph.D, PAVet (K) selaku Dekan Fakultas

Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.

8. Drh. Arni Diana Fitri selaku Direktur Eksekutif Rumah Sakit Hewan

Pendidikan Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor sekaligus dosen

pembimbing penulis dalam melakukan penelitian.

9. Prof. Drh. Ekowati Handharyani, Ph.D, APVet serta seluruh laboran dari

Departemen Histopatologi yang telah membantu penulis dalam memberikan saran

dan bimbingan dalam pembuatan sediaan histologis hingga pembuatan sampel selesai

dilakukan.

10. Rekan bimbingan penulis dalam menyelesaikan skripsi, Muhamad Aeiman

Dannial bin Muhamad Zaki dan Rahmadita Meidina Tarigan yang telah bersama-

sama berjuang, saling mendoakan, memberi semangat dan membantu dalam seluruh

tahap penyelesaian skripsi.

11. Sahabat-sahabat terbaik penulis, Surya Putrasia Santoso, Steven Saputra,

Derek Wong Teck Lik, Kevin Lauwen, Wong Lung Lung, Yasmine Angela, Malvin


vi

Caine, Matatias Hanan, Jason, Johan Andreas, David Benedict dan teman-teman

semasa SMA yang telah banyak memberikan bantuan pikiran dan semangat serta

meluangkan waktu untuk memberikan saran, kritik maupun dukungan kepada penulis

selama masa penyelesaian skripsi ini.

12. Teman-teman terdekat penulis terutama Angelline Theresia, Calvina

Winarta, Jeanie Teresa Tanslie, Vivian, Richard Austeen, Dicky Guntara, Martyn dan

Winna Wijaya yang telah banyak menghabiskan waktunya bersama penulis dalam

menjalani perkuliahan dan memberikan bantuan dan dorongan semangat dari awal

hingga akhir penulisan skripsi ini.

13. Teman-teman seperjuangan yang melaksanakan penulisan skripsi di

Departemen Periodonsia Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara dan

para residen PPDGS Periodonsia atas dukungan dan bantuannya selama penulisan

skripsi ini.

14. Rekan-rekan sejawat stambuk 2014 dan teman-teman yang membantu

penulis ketika sedang melakukan penelitian di Bogor yang tidak dapat disebutkan

satu per satu atas segala bantuan dan dorongan semangat yang diberikan dari awal

hingga akhir penulisan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh

karena itu saran dan kritik yang membangun dari berbagai pihak sangat diharapkan.

Akhir kata, penulis mengharapkan agar skripsi ini dapat berguna bagi pengembangan

disiplin ilmu di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara, khususnya

Departemen Periodonsia, serta pengembangan ilmu di kalangan masyarakat.

Akhirnya tiada lagi yang dapat penulis ucapkan selain ucapan syukur yang tak

terhingga, semoga Allah SWT selalu memberikan karunia-Nya kepada kita semua.

Medan, 23 Oktober 2018

Penulis,

(Wenny Dewanti)

NIM: 140600069


vii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL

HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN

HALAMAN TIM PENGUJI

KATA PENGANTAR ......................................................................................... iv

DAFTAR ISI ........................................................................................................ vii

DAFTAR TABEL ............................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xiii

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ....................................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................ 5

1.4 Hipotesis ..................................................................................... 5

1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................... 5

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Periodontitis ................................................................................ 7

2.2 Jaringan Ikat Gingiva .................................................................. 8

2.2.1 Serat-serat Gingiva ...................................................................... 9

2.2.2 Sel-sel pada Jaringan Ikat Gingiva ............................................. 12

2.2.3 Substansi Dasar ........................................................................... 13

2.3 Terapi Periodontal ....................................................................... 13

2.3.1 Kuretase Gingiva ........................................................................ 14

2.4 Penyembuhan Luka pada Jaringan Periodontal ........................... 16

2.4.1 Penyembuhan Luka Pasca Kuretase ........................................... 19

2.5 Platelet-rich Fibrin ..................................................................... 20

2.6 Kelinci (Oryctolagus cuniculus) ................................................. 22

2.7 Kerangka Teori ........................................................................... 25

2.7 Kerangka Konsep ........................................................................ 26

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian ............................................................................ 27

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ...................................................... 27


viii

3.2.1 Lokasi Penelitian ......................................................................... 27

3.2.2 Waktu Penelitian ......................................................................... 27

3.3 Populasi, Sampel dan Besar Penelitian ....................................... 27

3.3.1 Populasi Penelitian ...................................................................... 27

3.3.2 Sampel Penelitian ........................................................................ 27

3.3.3 Besar Sampel Penelitian ............................................................. 28

3.4 Kriteria Inklusi dan Eksklusi ...................................................... 28

3.4.1 Kriteria Inklusi ............................................................................ 28

3.4.2 Kriteria Eksklusi ......................................................................... 29

3.5 Variabel Penelitian ...................................................................... 29

3.5.1 Variabel Bebas ............................................................................ 29

3.5.2 Variabel Terikat .......................................................................... 29

3.5.3 Variabel Terkendali .................................................................... 29

3.5.4 Variabel Tak Terkendali ............................................................. 29

3.6 Definisi Operasional ................................................................... 30

3.7 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 30

3.7.1 Alat Penelitian ............................................................................. 30

3.7.2 Bahan Penelitian ......................................................................... 31

3.8 Prosedur Penelitian ..................................................................... 32

3.8.1 Pembuatan Ethical Clearance ..................................................... 32

3.8.2 Persiapan Hewan Coba ............................................................... 33

3.8.3 Induksi Periodontitis pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus) ...... 32

3.8.4 Preparasi Platelet-rich Fibrin dan Kuretase ............................... 36

3.8.5 Pengambilan Sampel Jaringan .................................................... 38

3.8.6 Pembuatan Sediaan Histologis .................................................... 39

3.8.7 Pengamatan Sediaan Histologis .................................................. 42

3.8.8 Analisis Data ............................................................................... 42

3.8.8.1 Data Bivariat ............................................................................. 42

3.8.8.2 Data Multivariat ........................................................................ 43

3.8.9 Skema Alur Penelitian ................................................................ 44

BAB 4 HASIL PENELITIAN

4.1 Nilai Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat Gingiva Kelompok

Perlakuan dan Kontrol Pada Pengamatan Hari ke-7 dan 14 45

4.2 Pengaruh Penambahan Platelet-rich Fibrin Pascakuretase

Terhadap Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat Gingiva Antara

Kelompok Perlakuan dan Kontrol Pada Pengamatan Hari ke-7

dan 14 48

BAB 5 PEMBAHASAN .................................................................................. 51

BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan ................................................................................. 54

6.2 Saran ........................................................................................... 54


ix

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 55

LAMPIRAN


x

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1 Nilai kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan dan

kontrol pada hari ke-7 dan 14 dalam bentuk persentase (%). ...................... 45

2 Perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dengan pemberian PRF dan kelompok kontrol 48

3 Hasil uji kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dan kontrol pada pengamatan hari ke-7 dan 14 49

4 Perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dan kontrol berdasarkan waktu pengamatan 50


xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1 Kelompok utama serat-serat gingiva ........................................................... 10

2 Kelompok sekunder serat-serat gingiva ...................................................... 12

3 Kuretase gingiva .......................................................................................... 15

4 Kuretase gingiva dilakukan dengan horizontal stroke dari kuret ................ 16

5 Fase penyembuhan luka .............................................................................. 18

6 Gambaran klinis sebelum dilakukan kuretase ............................................. 20

7 Gambaran klinis setelah dilakukan kuretase ............................................... 20

8 Gumpalan platelet-rich fibrin yang terbentuk setelah disentrifugasi .......... 21

9 Gigi insisivus kelinci yang normal memiliki bentuk permukaan oklusal

chisel- like .................................................................................................... 23

10 Rahang kelinci ............................................................................................. 24

11 Pemberian pakan rutin kelinci ..................................................................... 32

12 Pemberian anastesi dengan injeksi intramuskular pada paha atas kelinci ... 33

13 Probing pada keadaan gingiva normal ........................................................ 33

14 Insisi dengan menggunakan scalpel pada interdental gingiva kelinci ......... 34

15 Induksi periodontitis dengan menggunakan silk ligature. ........................... 34

16 Pengaplikasian Glass Ionomer Cement ....................................................... 35

17 Gambaran klinis periodontitis pada kelinci ................................................. 35

18 Pengambilan darah dari vena marginal auricularis kelinci ........................ 36

19 Hasil sentrifugasi darah ............................................................................... 37

20 Membran platelet-rich fibrin ....................................................................... 37


xii

21 Kuretase gingiva pada kelinci ..................................................................... 38

22 Euthanasia pada kelinci ............................................................................... 39

23 Pengambilan jaringan mandibula dan maksila kelinci. ............................... 39

24 Perendaman spesimen pada formalin murni 10% ....................................... 40

25 Pemotongan spesimen menjadi ukuran yang lebih kecil ............................. 40

26 Proses pemotongan blok jaringan ................................................................ 41

27 Pewarnaan sampel dengan larutan Masson Trichrome ............................... 42

28 Diagram batang rerata nilai kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva

kelompok perlakuan dan kontrol pada hari ke-7 dan 14 dalam bentuk

persentase (%). ............................................................................................ 46

29 Gambaran histopatologis kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada

hari ke-7. Pembesaran 40x .......................................................................... 47

30 Gambaran histopatologis kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada

hari ke-14. Pembesaran 40x ........................................................................ 47


xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran

1 Surat Keterangan Ethical Clearance

2 Surat Keterangan Izin Penelitian Mahasiswa di Rumah Sakit Hewan Pendidikan

Institut Pertanian Bogor

3 Surat Keterangan Selesai Penelitian dari Rumah Sakit Hewan Pendidikan

Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor

4 Hasil Uji Analisis Statistik

5 Data Berat Badan dan Kedalaman Probing Kelinci

6 Plagiarism Scan Report


1

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Kesehatan gigi dan mulut merupakan bagian integral dari kesehatan secara

keseluruhan dan tidak saling terpisahkan. Salah satu penyakit gigi dan mulut yang

banyak diderita masyarakat Indonesia selain karies gigi adalah penyakit periodontal.

Berdasarkan hasil Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) tahun 2013, prevalensi

penduduk Indonesia yang mempunyai masalah kesehatan gigi dan mulut, termasuk

penyakit periodontal adalah 25,9%.1 Prevalensi tersebut mengalami peningkatan dari

hasil Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) tahun 2007, yaitu sebesar 23,4%.2

Prevalensi penyakit periodontal baik pada negara berkembang maupun pada

negara yang sedang berkembang adalah sebesar 20-50% dari total seluruh populasi

masyarakat.3 Penyakit periodontal yang parah dapat menyebabkan tanggalnya gigi

yang ditemukan sebesar 5-20% dari seluruh populasi orang dewasa di dunia.4

Prevalensi penyakit periodontal yang tinggi tersebut menunjukkan bahwa penyakit

periodontal perlu mendapat perhatian serius dari tenaga kesehatan.3,4

Periodontitis merupakan penyakit inflamasi kronis yang biasanya diawali

dengan gingivitis atau peradangan pada gusi yang mengakibatkan kerusakan yang

irreversibel pada jaringan penyangga gigi.5 Penyakit periodontal ini ditandai dengan

kerusakan yang progresif dari tulang alveolar, perlekatan jaringan ikat dan ligamen

periodontal yang disertai dengan pembentukan poket periodontal.3,5-8 Periodontitis

menjadi penyebab utama dari tanggalnya gigi dan dianggap sebagai satu dari dua

ancaman terbesar terhadap kesehatan gigi dan mulut.3,5,8 Pada rongga mulut manusia

dapat ditemukan kira-kira ± 800 jenis spesies bakteri dan interaksi kompleks antara

infeksi bakteri penyebab penyakit periodontal dengan respon pejamu yang

menyebabkan terjadinya penyakit periodontal.3


2

Poket periodontal sering menyertai beberapa penyakit periodontal, misalnya

pada gingivitis maupun periodontitis kronis.5 Poket periodontal yang berisi jaringan

patogen dan debris harus segera dihilangkan sehingga tidak meluas menjadi lebih

parah. Perawatan alternatif poket periodontal salah satunya adalah dengan dilakukan

kuretase.9,10 Kuretase merupakan salah satu teknik bedah periodontal dengan tujuan

untuk membuat perlekatan baru pada poket dengan cara membersihkan jaringan yang

rusak, sementum nekroktik, serta jaringan yang dapat mengiritasi gingiva yang

merupakan dinding dari poket.9,10,11

Terapi periodontal bertujuan untuk mengatur dan menghentikan infeksi bakteri

penyebab penyakit periodontal serta meregenerasi kembali struktur jaringan

periodontal yang telah rusak.5,6,12 Pada jaringan periodonsium, keberhasilan

regenerasi ditinjau dari pembentukan kembali jaringan epitelium, restorasi kembali

ketinggian tulang alveolar, deposisi sementum yang baru dan perlekatan kembali

ligamen periodontal serta jaringan ikat yang baru.13,14 Penyembuhan luka (wound

healing) pada jaringan periodonsium memerlukan serangkaian interaksi antara

jaringan epitelium, fibroblas gingiva, jaringan ligamen periodontal dan osteoblas.12,14

Terganggunya vaskularisasi jaringan periodontal selama masa penyembuhan

luka menyebabkan terbentuknya fibrin dan aggregasi platelet.15,16 Growth factors

yang terdapat pada platelet akan dilepaskan ke dalam jaringan melalui signal

molekuler yang diperantarai oleh sitokin dan growth factors.16 Adanya growth factors

dan sitokin pada platelet memberikan peranan penting dalam penyembuhan luka

maupun inflamasi. Hal ini menimbulkan gagasan untuk menggunakan platelet

sebagai alat terapeutik untuk meningkatkan perbaikan jaringan terutama pada

penyembuhan luka jaringan periodontal.15,16

Penggunaan konsentrat platelet dengan potensi regenerasi pertama kali

diperkenalkan di dunia medis oleh Ross dkk pada tahun 1974.17,18 Konsentrat platelet

telah digunakan untuk meningkatkan reparasi dan regenerasi dari jaringan lunak

maupun jaringan keras pada berbagai prosedur bedah periodontal. Penggunaan

konsentrat platelet merupakan salah satu cara untuk mempercepat dan meningkatkan

mekanisme penyembuhan luka tubuh seseorang secara alamiah.17


3

Choukroun dkk memperkenalkan platelet-rich fibrin (PRF) sebagai generasi

kedua konsentrat platelet yang mengandung platelet dan growth factors dalam bentuk

membran fibrin yang diperoleh dari darah pasien sendiri.15,16-21 Proses pembuatan

PRF sangat sederhana karena tidak menggunakan antikoagulan atau modifikasi

biokimia buatan.16,17,19-21 Growth factors yang terdapat pada PRF berperan dalam

penyembuhan luka dan meningkatkan regenerasi jaringan. PRF bersifat tidak toksik

dan tidak terdapat reaksi imunologi karena bersifat autologus.17,19-21

Chang dkk melakukan penelitian bahwa PRF dapat meningkatkan pembentukan

jaringan ligamen periodontal manusia pada defek periodontal dengan meningkatkan

extracelullar signal protein kinase phosphorylation (p-ERK), menstimulasi produksi

dari osteoprotegerin (OPG) dan meningkatkan aktivitas alkaline phosphatase (ALP)

di sekitar fibroblas ligamen periodontal. Hasil penelitian menunjukkan bahwa PRF

dapat meningkatkan proliferasi jaringan ligamen periodontal hingga meningkatkan

regenerasi jaringan periodontal.21,22

Tsai dkk melakukan penelitian kemampuan regenerasi PRF yang mengandung

platelet yang dapat melepaskan growth factors, seperti platelet-derived growth

factors (PDGF) dan transforming growth factors (TGF). Faktor tersebut dapat

meningkatkan regenerasi periodontal dengan menstimulasi diferensiasi dan proliferasi

sel spesifik. Hasil penelitian menunjukkan bahwa PRF telah menginduksi proliferasi

sel dari osteoblas dan jaringan ligamen periodontal. Sementara itu, PRF menekan

pertumbuhan sel epitelial selama 3 hari periode kultur. Berdasarkan hasil

penelitiannya, dapat disimpulkan bahwa aksi tipe sel spesifik ini dapat bermanfaat

untuk regenerasi periodontal.22,23

Moraschini dan Barboza Edos dalam systematic meta-analysis dan Keceli dkk

serta Gupta dkk dalam studi klinisnya, memperoleh hasil yang tidak konsisten dalam

penggunaan PRF terhadap penutupan resesi gingiva Miller klas I dan II, dimana tidak

terdapat peningkatan pada penutupan akar, lebar mukosa keratinisasi atau tingkat

perlekatan secara klinis, tetapi didapatkan peningkatan ketebalan gingiva.15,24,25,26

Terapi bedah periodontal seperti akses bedah flap dikenal sebagai terapi standar

untuk mengatasi poket residual setelah terapi faktor penyebab periodontitis. Sebuah


4

systematic reviews menunjukkan bedah flap dapat menurunkan kedalaman poket dan

terdapat peningkatan yang cukup pada tingkat perlekatan klinis.21 Namun, diperoleh

prosedur open flap debridement (OFD) kurang dapat meregenerasi kembali jaringan

yang telah rusak akibat penyakit periodontal tersebut.6,13,19

Pada penelitian yang dilakukan oleh Pradeep dkk, diperoleh pengurangan

kedalaman poket yang signifikan serta peningkatan perlekatan secara klinis dengan

penggunaan PRF pada kelompok studi dibandingkan dengan kelompok kontrol yang

hanya menggunakan prosedur OFD.20,28 Penelitian oleh Tunali dkk memperoleh

penggunaan PRF yang disentrifugasi pada tabung titanium dapat meningkatkan

penyembuhan luka pada jaringan lunak pada model defek flep mukoperiosteal dengan

kajian in vivo pada hewan kelinci selama 30 hari.29

Prosedur regeneratif saat ini memberikan potensi yang terbatas terhadap

restorasi jaringan periodontal secara keseluruhan.6,19 Pengunaan PRF sebagai bahan

yang mempercepat proses penyembuhan luka dapat menjadi tahapan baru untuk

perawatan periodontitis di dunia medis karena PRF merupakan bahan yang aman,

murah, mudah baik dalam pembuatan maupun penggunaannya serta bahan terapi

periodontal yang menghemat waktu.6,16,18

Penggunaan PRF sebagai bahan periodontal regeneratif telah banyak digunakan

di kalangan medis seperti pada perawatan defek tulang alveolar, restorasi implan,

perawatan periodontal dan perawatan resesi gingiva. Akan tetapi, hanya ditemukan

beberapa penelitian mengenai mekanisme PRF dalam menstimulasi penyembuhan

luka terutama dalam menstimulasi sel induk yang berhubungan dengan regenerasi

periodontal kasus periodontitis.18

Berdasarkan uraian di atas, maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian

yang menguji pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis secara in vivo pada

hewan kelinci agar dapat digunakan sebagai alternatif bahan perawatan periodontal

regeneratif di dunia medis.


5

1.2 Rumusan Masalah

Apakah terdapat pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase

terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci

(Oryctolagus cuniculus)?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh penambahan platelet-

rich fibrin pascakuretase terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada

model periodontitis kelinci (Oryctolagus cuniculus) dengan teknik histologis.

1.4 Hipotesis

Terdapat pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci

(Oryctolagus cuniculus).

1.5 Manfaat Penelitian

Manfaat penelitian ini adalah :

1. Manfaat untuk ilmu pengetahuan:

Dapat memberikan informasi ilmiah dan perkembangan ilmu kedokteran gigi

mengenai pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci.

2. Manfaat untuk institusi:

Dapat digunakan sebagai referensi untuk penelitian lebih lanjut tentang

pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap kepadatan kolagen

jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci.

3. Manfaat untuk klinisi:

Dapat memberikan informasi mengenai pengaruh penambahan platelet-rich

fibrin pascakuretase terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model

periodontitis kelinci untuk membantu proses penyembuhan luka guna peningkatan


6

kesehatan gigi dan mulut serta dapat digunakan sebagai alternatif bahan perawatan

untuk periodontal regeneratif kasus periodontitis.


7

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Periodontitis

Periodontitis dikenal sebagai penyakit inflamasi pada jaringan pendukung gigi

yang disebabkan oleh mikroorganisme atau sekelompok mikroorganisme tertentu

sehingga terjadi kerusakan yang progresif pada perlekatan ligamen periodontal dan

tulang alveolar yang disertai dengan meningkatnya kedalaman poket periodontal.5,30

Proses terjadinya kerusakan umumnya tidak menyebabkan rasa sakit bagi penderita

sehingga perkembangan penyakit tidak dapat diidentifikasi secara dini dan

berlangsung selama bertahun-tahun yang mengakibatkan tanggalnya gigi.3,5

Klasifikasi periodontitis oleh American Academy of Periodontology tahun 1999

dalam International Workshop for Classification of Periodontal Disease berdasarkan

manifestasi klinis secara umum, yaitu periodontitis kronis, periodontitis agresif dan

periodontitis sebagai manifestasi dari penyakit sistemik.9,30,31

Etiologi terjadinya periodontitis terbagi menjadi faktor primer dan faktor

sekunder. Faktor primer penyebab periodontitis adalah iritasi bakteri patogen spesifik

seperti Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus, dan

Aggregatibacter actinomycetemcomitans.7,31,32 Faktor penyebab periodontitis lainnya,

baik faktor lokal maupun sistemik merupakan faktor pendukung terhadap terjadinya

akumulasi plak maupun menganggu respon gingiva terhadap plak. Faktor tersebut

digolongkan sebagai faktor sekunder penyebab periodontitis.5,30 Mekanisme bakteri

patogen dalam menyebabkan terjadinya penyakit periodontal dipengaruhi oleh respon

imunologik dari pejamu.5

Plak bakteri penyebab penyakit periodontal berkolonisasi dan melekat pada

servikal gingiva dan permukaan gigi.31,32 Terlepasnya produk metabolik dari bakteri

seperti endotoksin maupun antigen lainnya menyebabkan terjadinya inflamasi dan

bekerjanya respon imunologik dari pejamu.5,31 Respon imun pejamu akan


8

menyebabkan terlepasnya sel imun seperti neutrofil dan sel-sel inflamasi lainnya ke

jaringan gingiva. Proinflammatory mediators seperti sitokin, prostanoids dan

berbagai enzim lainnya dilepaskan oleh neutrofil sebagai bagian dari sistem

pertahanan pejamu terhadap reaksi inflamasi bakteri.5 Adanya inflamasi pada

jaringan periodontal menyebabkan terjadinya degadrasi pada jaringan ikat gingiva.

Pelepasan sitokin, mediator imun lainnya dan tissue-destructive proteinase oleh

junctional epitelium menyebabkan degradasi dari membran dasar gingiva dan migrasi

junctional epitelium ke arah apikal gigi sehingga menghasilkan poket periodontal dan

kehilangan perlekatan periodontal yang merupakan tanda terjadinya periodontitis.7,5,30

Pemeriksaan klinis pada periodontitis umumnya dijumpai dengan terbentuknya

poket periodontal serta perubahan kepadatan dan tinggi dari tulang alveolar.9 Foto

radiografi sebagai pemeriksaan penunjang dapat digunakan untuk melihat

berkurangnya kepadatan tulang alveolar.5 Kehilangan perlekatan ligamen periodontal

yang umumnya disertai dengan resesi gingiva serta mobiliti gigi yang dapat

ditemukan pada saat pemeriksaan klinis.5,9,30 Tanda klinis dari inflamasi pada

jaringan periodontal yaitu ditemukan adanya perubahan warna, kontur dan

konsistensi gingiva serta pendarahan pada saat dilakukan probing.30 Adanya

pendarahan yang terus menerus pada saat dilakukan probing selama kunjungan

berkala menjadi indikator adanya inflamasi dan berpotensi terhadap kehilangan

perlekatan pada lokasi pendarahan.5,9,30

2.2 Jaringan Ikat Gingiva

Jaringan ikat gingiva yang mendukung epitelium rongga mulut yang dikenal

juga dengan lamina propria terdiri atas dua jenis lapisan, yaitu31,33: (1) lapisan papilari

superfisial yang terletak di bawah epitelium; dan (2) lapisan retikuler yang terletak

berdekatan dengan periosteum tulang alveolar. Pada lapisan papilari, dijumpai serat

kolagen yang tipis dan tersusun renggang serta terdapat banyak capillary loops.

Lapisan retikuler merupakan lapisan yang didominasi oleh serat kolagen yang

tersusun dalam serangkaian ikatan.31 Komponen utama dari jaringan ikat gingiva


9

adalah serat kolagen (sekitar 60% dari volume jaringan ikat gingiva), fibroblas (5%),

pembuluh darah, saraf dan matriks (sekitar 35%).33

Jaringan ikat pada gingiva terbagi menjadi serat-serat gingiva, sel-sel pada

jaringan ikat gingiva dan substansi dasar.9,31,33

2.2.1 Serat-serat Gingiva

Serat-serat pada jaringan ikat gingiva terbagi menjadi tiga jenis, yaitu kolagen,

retikulin dan elastin. Kolagen tipe I dapat dijumpai mendominasi pada gingiva.

Kolagen tipe I membentuk lamina propria dalam jumlah yang besar dan memberikan

kekuatan tarikan pada jaringan gingiva.9,31,33 Kolagen tipe II terdapat pada membran

basal gingiva.31 Kolagen tipe III merupakan fetal collagen, dimana berperan penting

dalam fase awal dari penyembuhan luka (wound healing) dan tetap dalam bentuk

unmineralized. Kolagen tipe III juga berperan dalam maintenance ruangan dalam

matriks penyembuhan.9

Kolagen tipe IV (argyrophilic reticulum fiber) bercabang di antara serangkaian

kolagen tipe I dan merupakan lanjutan dari membran basal gingiva dan dinding

pembuluh darah.9,33 Kolagen tipe VI didistribusikan bersama dengan serat elastin di

sepanjang pembuluh darah. Kolagen tipe VI juga memberikan kekakuan yang

diperlukan untuk mempertahankan dinding pembuluh darah yang elastis dari

terjadinya deformasi yang permanen. Kolagen tipe VII berperan sebagai anchoring

fibrils yang membantu memperkuat perlekatan jaringan epitel terhadap jaringan ikat

di bawahnya.9

Serat-serat gingiva mempunyai beberapa fungsi, antara lain9,31,33: (1) untuk

menahan margin gingiva agar dapat rapat bersandar ke permukaan gigi; (2)

memberikan kekakuan yang diperlukan agar gingiva tidak terkuak menjauhi

permukaan gigi saat mendapat tekanan mastikasi; dan (3) menyatukan margin gingiva

bebas dengan sementum akar gigi dan gingiva cekat.

Susunan serat-serat gingiva terdiri dari dua kelompok, yaitu: (1) kelompok

utama serat-serat gingiva; dan (2) kelompok sekunder serat-serat gingiva.31

Kelompok utama serat-serat gingiva (Gambar 1) termasuk diantaranya, yaitu9,31,33:


10

1) Serat dentogingiva: serat yang merentang dari arah sementum ke junctional

epitelium dan menjalar ke arah samping dan koronal dari lamina propria gingiva.

Serat ini memberikan dukungan terhadap gingiva dengan melekatkannya ke gigi.

2) Serat alveologingiva: serat yang merentang secara koronal dari periosteum

krista alveolar ke lamina propria. Serat ini melekatkan gingiva ke tulang alveolar.

3) Serat dentoperiosteal: serat yang muncul dari sementum dekat dengan

cementoenamel junction dan masuk ke periosteum tulang alveolar yang berfungsi

untuk memberikan perlindungan terhadap ligamen periodontal.

4) Serat sirkular: serat yang mengelilingi gigi secara sirkular dan menjalar

melalui margin jaringan ikat dan gingiva cekat. Serat ini berguna untuk menjaga

kontur dan posisi dari tepi gingiva bebas.

5) Serat transeptal: serat yang terletak secara interproksimal, merentang dari

sementum gigi yang satu ke sementum gigi tetangganya. Serat ini berfungsi untuk

melindungi tulang interproksimal dan menjaga kontak antar gigi.

Gambar 1. Kelompok utama serat-serat

gingiva.31

Adapun yang termasuk dalam kelompok sekunder serat-serat gingiva (Gambar

2), yaitu9,31,33:


11

1) Serat periosteogingiva: serat yang merentang dari periosteum tulang

alveolar ke gingiva cekat. Serat ini membantu melekatkan gingiva ke tulang alveolar.

2) Serat interpapilari: serat yang dapat ditemukan pada interdental gingiva dan

merentang ke arah fasiolingual. Serat ini berperan dalam mendukung papila gingiva.

3) Serat transgingiva: serat yang dapat ditemukan pada gingiva cekat,

merentang di sepanjang lengkung gigi di antara dan di sekeliling gigi. Serat ini

menjaga susunan gigi di dalam lengkung gigi.

4) Serat intersirkular: serat yang merentang dari sementum permukaan distal

dari gigi kemudian melebar ke arah bukal dan lingual di sekeliling gigi tetangganya

dan insersi ke permukaan mesial gigi tetangganya. Serat ini berfungsi untuk

menstabilkan gigi di dalam lengkung gigi.

5) Serat intergingiva: serat yang dapat ditemukan di dalam gingiva cekat dan

berbatasan dengan membran basal gingiva yang merentang dalam arah mesiodistal.

Serat ini memberikan dukungan dan membentuk kontur gingiva cekat.

6) Serat semisirkular: serat yang merentang dari permukaan mesial gigi ke

permukaan distal gigi yang sama dalam bentuk setengah lingkaran.

7) Serat oxytalan: serat yang dapat ditemukan pada semua struktur jaringan

ikat dari periodonsium.

8) Serat elastin: serat yang hanya terdapat pada jaringan ikat gingiva dan

ligamen periodontal. Serat ini juga dapat ditemukan pada jaringan ikat dari mukosa

alveolar dalam jumlah yang banyak.


12

Gambar 2. Kelompok sekunder serat-serat

gingiva.31

2.2.2 Sel-sel pada Jaringan Ikat Gingiva

Berbagai jenis sel yang terdapat pada jaringan ikat gingiva, yaitu: sel fibroblas,

sel mast, makrofag dan sel inflamatori. Sel fibroblas merupakan sel yang ditemukan

dominan pada jaringan ikat gingiva.9,31,33 Sel fibroblas dalam jumlah yang banyak

dapat ditemukan di antara serangkaian serat-serat gingiva.33 Sel fibroblas yang

berasal dari sel mesenkim berperan penting dalam mengembangkan, memelihara dan

memperbaiki jaringan ikat gingiva.9,33

Sel fibroblas tidak hanya dapat merespon sinyal parakrin maupun autokrin,

tetapi juga dapat mensintesis dan menghasilkan sejumlah growth factors, sitokin dan

produk metabolik.9 Sel ini dapat mensintesis kolagen, serat elastik, glikoprotein dan

glikosaminoglikan dari substansi amorf interselular yang juga dapat disintesis oleh

jaringan ikat di bagian tubuh manapun.9,33 Sel fibroblas dapat meregulasi degadrasi

kolagen melalui fagositosis dan mensekresi kolagenase.33

Sel mast yang terdapat pada seluruh bagian tubuh, dapat ditemukan dalam

jumlah yang banyak pada jaringan ikat mukosa mulut dan gingiva.9,33 Sel ini

dijumpai di perivaskular dan memiliki granul-granul sitoplasmik unik yang dapat

menghasilkan heparin dan histamin.9


13

Sel makrofag yang matang dan histiosit dapat ditemukan pada jaringan ikat

gingiva sebagai komponen dari sistem fagosit mononuklear (sistem

retikuloendotelial) yang berasal dari monosit-monosit darah. Sel adiposa dan

eosinofil juga dapat dijumpai pada lamina propria meskipun dalam jumlah yang

sedikit. Sel inflamatori seperti sel plasma dan sel limfosit dapat ditemukan di jaringan

ikat gingiva dekat dengan dasar sulkus gingiva. Sel neutrofil dapat dijumpai dalam

jumlah yang cukup banyak di dalam jaringan ikat gingiva dan sulkus gingiva.9,33

2.2.3 Substansi Dasar

Berbagai sel, serat, saraf dan pembuluh darah dari gingiva dapat ditemukan

dalam substansi dasar yang berbentuk gel-like.9 Substansi dasar merupakan matriks

ekstraseluler dari jaringan ikat gingiva yang mengisi ruangan di antara serat-serat dan

berbagai sel.9,31 Substansi dasar diproduksi oleh sel fibroblas, sel mast dan komponen

lainnya yang berasal dari darah.31 Matriks ini berguna untuk memelihara fungsi yang

normal dari jaringan ikat gingiva dimana matriks ini memfasilitasi transportasi air,

elektrolit, nutrisi dan metabolit ke dan dari sel-sel dalam jaringan ikat gingiva itu

sendiri.31,33

Substansi dasar terdiri dari proteoglikan dan glikoprotein. Proteoglikan yang

terdapat pada substansi dasar mengandung glikosaminoglikan, seperti asam

hialuronat, heparin sulfat, kondroitin sulfat, dan sebagainya.9,31,33 Proteoglikan

berperan sebagai molecular filter dan berperan penting dalam meregulasi migrasi sel

dalam jaringan.31 Pada glikoprotein dapat ditemukan kandungan fibronektin dan

laminin. Fibronektin berguna untuk mengikat fibroblas dan komponen lainnya dari

matriks interseluler, dimana membantu dalam mediasi adhesi sel dan migrasi.31,33

Kandungan glikoprotein lainnya, yaitu laminin dapat ditemukan pada lamina basal,

dimana berfungsi untuk melekatkan lamina basal dengan sel epitel.33

2.3 Terapi Periodontal

Tujuan utama dari terapi periodontal adalah untuk menghentikan proses

inflamasi akibat penyakit periodontal sehingga dapat menjaga fungsi dan estetis pada


14

gigi dan jaringan periodonsium.6,15,16,27 Regenerasi struktur jaringan periodontal yang

hilang akibat kerusakan juga merupakan tujuan dari terapi periodontal.15,16,20

Perawatan termasuk pembuangan mekanis dari bakteri biofilm subgingiva dan

mengembalikan lingkungan serta mikroflora yang sesuai dengan periodontal yang

sehat.27 Terapi periodontal terbagi menjadi lima fase, yaitu9: (1) fase emergensi; (2)

fase I (fase etiotropik); (3) fase II (fase bedah); (4) fase III (fase restoratif); dan (5)

fase IV (fase pemeliharaan) dimana setiap fase dilakukan evaluasi ulang.

Terapi periodontal yang bertujuan untuk meningkatkan kesehatan jaringan

periodontal adalah dengan mengurangi kedalaman poket ketika dilakukan probing,

mempertahankan atau meningkatkan tingkat perlekatan secara klinis dan mengurangi

pendarahan saat dilakukan probing.27 Terapi periodontal dapat dilakukan dengan

professional dental cleaning, skeling dan root planing, terapi antibiotik dan melalui

prosedur bedah untuk mengembalikan jaringan pendukung gigi yang sehat dan

mencegah tanggalnya gigi.7,27

Terapi nonbedah periodontal yang sederhana yaitu terapi skeling dan root

planing.27 Perawatan skeling dan root planing dilakukan untuk membuang plak

bakteri dan kalkulus penyebab periodontitis. Studi klinis menunjukkan bahwa skeling

dan root planing dapat mengurangi jumlah mikroba dan mengakibatkan

berkurangnya pendarahan pada saat dilakukan probing, mengurangi kedalaman poket

dan meningkatkan perlekatan klinis.5 Terapi bedah periodontal, seperti bedah

kuretase dilakukan agar memudahkan akses pembuangan plak bakteri dan kalkulus

pada akar gigi.9

2.3.1 Kuretase Gingiva

Kuretase gingiva (Gambar 3) merupakan terapi bedah periodontal yang meliputi

prosedur penyingkiran jaringan inflamasi yang terdapat di lateral dari dinding poket

dan junctional epitelium.9,34 Komponen jaringan granulasi, seperti fibroblas dan

proliferasi angioblastik mengandung sebagian dari daerah peradangan kronis, dimana

dapat ditemukan sebagian kecil potongan kalkulus yang terlepas dan koloni bakteri.

Potongan kalkulus dan koloni bakteri tersebut dapat mempengaruhi gambaran


15

patologis dari jaringan dan menghambat penyembuhan.34 Prosedur kuretase

dilakukan untuk membuang jaringan granulasi yang merupakan jaringan inflamasi

kronis tersebut. Kuretase dilakukan dengan menggunakan kuret dan hanya

meninggalkan lapisan jaringan ikat gingiva.9,10,11,34

Gambar 3. Kuretase gingiva; A. Kuretase dengan menggunakan

kuret; B. Gingiva setelah dilakukan kuretase9

Tujuan dari kuretase secara umum adalah membuat perlekatan baru terutama

pada poket infraboni, mengeliminasi poket gingiva, memperbaiki gingiva menjadi

sehat baik warna, kontur, konsistensi dan tekstur permukaan. Kuretase dapat

dilakukan sebagai prosedur untuk membuat perlekatan baru pada kedalaman poket

infraboni sedang hingga dangkal dengan lebar dan ketebalan jaringan gingiva yang

adekuat.9,34 Kuretase juga merupakan perawatan alternatif untuk mengurangi

inflamasi apabila perawatan teknik bedah lainnya, seperti flap tidak dapat dilakukan

karena kontraindikasi terhadap pasien.34 Kuretase gingiva sering dilakukan pada

kunjungan berkala dalam fase pemeliharaan pada daerah dengan inflamasi yang

rekuren dan kedalaman poket, terutama apabila pengurangan poket dengan bedah

sebelumnya telah dilakukan.9,34

Prosedur kuretase dilakukan setelah perawatan skeling dan root planing karena

prosedur kuretase sendiri tidak dapat mengeliminasi penyebab dari inflamasi, yaitu

plak bakteri. Kuretase merupakan prosedur pembedahan yang dilakukan di bawah


16

anastesi lokal.9,10,11,34 Kuret yang digunakan adalah kuret Gracey atau Columbia

Universal dimana bagian kuret yang tajam menghadap ke jaringan yang akan

dilakukan kuretase (Gambar 4) agar tercakup lapisan bagian dalam dari dinding poket

dan junctional epitelium.9,34

Gambar 4. Kuretase gingiva

dilakukan dengan horizontal

stroke dari kuret.34

2.4 Penyembuhan Luka pada Jaringan Periodontal (Periodontal Wound

Healing)

Penyembuhan (healing) merupakan fase dari respon inflamatori terhadap

hubungan fisiologi dan anatomikal dari terlukanya bagian tubuh.9 Ketika jaringan

periodonsium mengalami kerusakan karena inflamasi atau sebagai akibat dari

perawatan pascabedah, luka tersebut akan mengalami proses penyembuhan baik

melalui regenerasi maupun perbaikan oleh jaringan periodontal.34 Setelah terjadi

injuri pada jaringan periodontal, berbagai biological pathaways akan teraktivasi dan

bergerak ke lokasi injuri untuk mencegah terjadinya infeksi dan mengembalikan

jaringan yang rusak. Berbagai macam sel ikut berperan dalam proses penyembuhan

luka, termasuk sel imun (neutrofil, monosit, limfosit dan sel dendrit), sel endotelial,

keratinosit dan fibroblas.35

Pada jaringan periodonsium, penyembuhan terjadi setelah melalui berbagai

proses rekonstitusi (pemulihan) ke jaringan periodonsium yang baru, termasuk

pembentukan tulang alveolar, ligamen periodontal yang berfungsi dengan baik dan


17

pembentukan sementum yang baru.9,34 Bentuk penyembuhan luka yang terjadi pada

jaringan periodontal dapat berupa perbaikan (repair), perlekatan baru (new

attachment) dan regenerasi (regeneration).9

Perbaikan (repair) merupakan proses penyembuhan luka dari jaringan dimana

perbaikan yang terjadi tidak dapat mengembalikan fungsi asli jaringan tersebut secara

keseluruhan.9 Perlekatan kembali jaringan ikat atau jaringan epitelium dari

permukaan gigi yang telah hilang atau tertanamnya serat ligamen periodontal ke

sementum yang baru serta perlekatan kembali epitelium gingiva ke permukaan gigi

yang hilang sebelumnya akibat penyakit disebut dengan perlekatan baru (new

attachment).9,34 Regenerasi periodontal merupakan sebuah proses kompleks yang

membutuhkan koordinasi dari proliferasi, diferensiasi dan pengembangan dari

berbagai jenis sel untuk membentuk perlekatan periodontal yang baru.9

Respon normal tubuh terhadap injuri terbagi menjadi tiga fase (Gambar 5),

yaitu31,35,36,37: (1) inflamasi; (2) pembentukan jaringan baru; dan (3) tissue

remodelling. Hemostasis dan infiltrasi sel-sel inflamasi terjadi pada fase

inflamasi.35,36,37 Fase proliferasi ditandai dengan adanya fibroplasia, granulasi,

kontraksi dan epitelisasi. Fase tissue remodelling dikenal dengan fase maturasi luka.36

Kolagen berperan penting dalam setiap fase penyembuhan luka. Pada fase awal

penyembuhan luka, kolagen tipe III dapat dijumpai mendominasi. Jumlah kolagen

tipe III akan terus meningkat seiring dengan perkembangan dari pembentukan

jaringan parut.36,38 Fase inflamasi terjadi segera setelah terjadi injuri dimana

komponen kaskade koagulasi, inflammatory pathaways dan sistem imun teraktivasi

untuk membuang sel debris dan mencegah infeksi. Proses penyembuhan luka

berlangsung ketika terjadi hemostasis dimana terdapat kontribusi dari proses

vasokonstriksi, agregasi platelet dan deposisi kolagen.35,36

Pada fase ini sel inflamasi akan mensekresi enzim proteolitik berupa neutrofil,

eusinofil dan makrofag ke area luka.36,37 Makrofag yang teraktivasi akan mensekresi

sitokin, antara lain TNF-α dan IL-1β. IL-1β akan merangsang sifat mitogenik dari sel

fibroblas dan meningkatkan regulasi metaloproteinase matriks (MMP).37 Sitokin ini


18

secara langsung berpengaruh terhadap deposisi kolagen ke area luka dengan

menginduksi produksi kolagen dari sel fibroblas.36,37

Fase proliferasi berlangsung pada 2-10 hari setelah terjadinya injuri. Fase ini

meliputi migrasi dan proliferasi dari sel epitel, diferensiasi myofibroblas dan

tumbuhnya pembuluh kapiler yang baru pada luka.35 Fase proliferasi dimulai dengan

aktivasi sel fibroblas oleh growth factors yang dapat mensintesa dan mengubah

bentuk collagen-rich Extracelullar Matrix (ECM) serta menyebabkan terjadinya

angiogenesis.35,36 ECM yang tervaskularisasi akan menyebabkan terbentuknya

jaringan granulasi. Degradasi kolagen juga akan menstimulasi proliferasi dan migrasi

keratinosit.36,37 Keratinosit akan bermigrasi ke daerah di sekitar jaringan granulasi

yang baru terbentuk dan menyebabkan terjadinya pembentukan epitel kembali.37

Fase tissue remodelling terjadi di antara 2-3 minggu setelah injuri dan dapat

berlangsung hingga 1 tahun atau lebih.35,36 Laju sintesis kolagen dan regulasi sintesis

kolagen pada fase ini mulai berkurang. Penurunan regulasi sintesis kolagen

diperantarai oleh IFN-γ, TNF-α dan matriks kolagen itu sendiri.36,37 Pada fase akhir

tissue remodelling kolagen akan digantikan dengan serabut kolagen yang telah

terorganisir dan secara bertahap serabut kolagen akan terlihat lebih tebal.19,36,37 Tahap

terakhir dari proses penyembuhan luka akan terjadi apoptosis pada sel fibroblas,

makrofag dan sel endotelial.35,36

Gambar 5. Fase penyembuhan luka.36


19

Proses penyembuhan luka pada jaringan gingiva berlangsung lebih cepat

dengan pembentukan jejas jaringan parut yang lebih sedikit dibandingkan dengan

kulit.9 Hal ini dikarenakan oleh sel fibroblas dari jaringan gingiva yang menghasilkan

MMP13 yang memiliki turnover yang besar dari protein matriks ekstraseluler

sehingga mencegah pembentukan jaringan parut.9,33

2.4.1 Penyembuhan Luka Pascakuretase

Setelah dilakukan terapi bedah periodontal berupa kuretase, poket periodontal

akan dipenuhi dengan gumpalan darah dan terjadi pendarahan pada jaringan yang

disertai dengan dilatasi kapiler.30,31 Pada poket periodontal pascakuretase juga dapat

ditemukan jumlah sel polimorfonuklear (PMN) yang meningkat.9,31,34 Hal ini diikuti

dengan proliferasi yang cepat dari jaringan granulasi dengan penurunan jumlah dari

pembuluh darah kecil setelah jaringan mengalami maturasi.34 Permukaan akar gigi

setelah dilakukan kuretase akan didominasi oleh empat tipe macam sel, yaitu9,34: (1)

sel epitel; (2) sel yang berasal dari jaringan ikat gingiva; (3) sel yang berasal dari

tulang; dan (4) sel yang berasal dari ligamen periodontal.

Restorasi dan epitelisasi kembali dari sulkus gingiva umumnya membutuhkan

waktu 2-7 hari sedangkan junctional epitelium terbentuk kira-kira 5 hari

pascakuretase.9,31,34 Pada jaringan ikat gingiva, serat kolagen yang belum matang

dapat ditemukan dalam waktu 21 hari.9,34 Ketinggian jaringan gingiva akan

mengalami penurunan setelah 1 minggu sebagai akibat dari gingiva bebas yang

bergerak ke arah apikal. Gingiva bebas akan terlihat beradaptasi baik dengan gigi

dengan warna, konsistensi, tekstur permukaan dan kontur gingiva yang normal

setelah 2 minggu proses penyembuhan luka (Gambar 6 dan 7).31,34


20

Gambar 6. Gambaran klinis sebelum

dilakukan kuretase.31

Gambar 7. Gambaran klinis setelah

dilakukan kuretase.31

Penyembuhan luka (wound healing) merupakan proses biologis yang kompleks

dimana membutuhkan kinerja berbagai sel dengan tujuan untuk memperbaiki atau

meregenerasi jaringan yang rusak.19 Peranan konsentrat platelet yang baik dalam

hemostatis dan penyembuhan luka sudah tidak dapat diragukan.15 Hal tersebut

dikarenakan konsentrat platelet merupakan reservoir dari growth factors yang

bertanggung jawab dalam neovaskularisasi, sintesis kolagen, divisi sel, diferensiasi

sel, induksi dan migrasi dari sel lainnya ke lokasi injuri.15,17

2.5 Platelet-rich Fibrin (PRF)

Konsentrat platelet memiliki peranan penting dalam inflamasi dan

penyembuhan luka yang disebabkan oleh adanya growth factors dan sitokin.15,16

Konsentrat platelet mengandung fibrin, fibronectin dan vitronectin yang berperan

sebagai matriks jaringan ikat dan mempermudah migrasi sel.15,16


21

Seorang pionir dari Prancis, Dr. Joseph Choukroun pada tahun 2001

mengembangkan penelitian generasi kedua konsentrat platelet tanpa adanya

penggunaan faktor antikoagulan yang kemudian dikenal dengan platelet-rich fibrin

(PRF).12,16,17,19,20,22,39 Penggunaan PRF dalam dunia medis banyak mendapat

perhatian dari berbagai dunia karena kegunaannya sebagai bahan regenerasi yang

biokompatibel.15

PRF merupakan salah satu bahan autologus yang dapat melepaskan growth

factors dalam periode antara 1 sampai 4 minggu.12,22,40 PRF atau leukocyte-PRF

mengandung sel darah putih yang merupakan sel penting dalam proses penyembuhan

luka dengan meningkatkan sistem pertahanan imun.12,16,19,20 Gumpalan fibrin

(Gambar 8) dapat ditemukan pada bagian tengah dari tabung, tepat di antara sel darah

merah di bagian bawah dan acellular plasma di bagian atas setelah dilakukan

sentrifugasi.12,16,19,20,41

Gambar 8. Gumpalan platelet-rich fibrin yang terbentuk setelah

disentrifugasi.19

PRF merupakan hasil pemisahan dari darah lengkap yang telah disentrifugasi

sehingga mudah diperoleh.16,19,40,41 PRF dipilih sebagai bahan regeneratif yang tepat

karena metode preparasinya yang mudah dan murah serta tidak menggunakan

antikoagulan sehingga PRF tidak membutuhkan tambahan komponen luar

lainnya.16,19,22,40 Tanpa penggunaan antikoagulan, sampel harus segera disentrifugasi

dalam hitungan menit agar fibrinogen dapat terkonsentrasi di bagian tengah dan atas

dari tabung.41 Keberhasilan penggunaan PRF sangat bergantung pada kecepatan


22

proses pengambilan sampel darah dan proses pemindahannya untuk

disentrifugasi.16,41

Beberapa penelitian menunjukkan bahwa PRF merupakan healing biomaterial

yang mempunyai potensi besar untuk regenerasi jaringan keras dan lunak tanpa

adanya reaksi inflamasi, meningkatkan hemostasis dan maturasi.13,16,20,40 Penggunaan

PRF diharapkan mampu meningkatkan penyembuhan jaringan periodontal

regeneratif.19 Terapi periodontal yang dikombinasikan dengan penggunaan PRF

diketahui dapat menjadi sebuah metode untuk meningkatkan regenerasi dari jaringan

periodonsium yang hilang akibat kerusakan.16,39

2.6 Kelinci (Oryctolagus cuniculus)

Kelinci eropa (Oryctolagus cuniculus) merupakan hewan mamalia yang berasal

dari famili Leporidae dan dapat ditemukan di berbagai belahan dunia. Hewan ini

merupakan hewan liar yang hidup di Afrika hingga ke daratan Eropa pada zaman

dahulu. Pada tahun 1912, kelinci dalam perkembangannya diklasifikasikan ke dalam

ordo Lagomorpha.42,43 Kelinci putih yang berasal dari New Zealand umumnya

digunakan untuk penelitian. Hewan ini jarang memiliki masalah kesehatan

dibandingkan dengan hewan lainnya.42

Semua gigi permanen pada kelinci bersifat elodont atau tumbuh terus menerus.

Mahkota gigi kelinci memiliki anatomi yang panjang (hypsodont) dan memiliki akar

yang terbuka (aradicular).44,45-47 Gigi insisivus pertama maksila dan mandibula

kelinci tumbuh dengan kecepatan antara 2-2,4 mm/minggu.45,46,47 Rumus gigi

permanen kelinci adalah44,45-47 : 2*(I 2/1: C 0/0: P 3/2: M 3/3) dengan jumlah gigi 28

buah. Kelinci memiliki gigi insisivus kedua maksila yang dikenal dengan peg teeth

yang terletak di belakang gigi insisivus pertama yang umumnya ditemukan pada orgo

Lagomorpha.44,45,46 Permukaan oklusal gigi insisivus kelinci berbentuk chisel-like

(Gambar 9).44


23

Gambar 9. Gigi insisivus kelinci yang

normal memiliki bentuk permukaan

oklusal chisel-like.44

Kelinci tidak memiliki gigi taring dan dapat ditemukan diastema yang lebar di

antara gigi insisivus dan gigi premolar (Gambar 10).44,45-47 Kelinci merupakan hewan

herbivora dengan gigi premolar yang mempunyai bentuk yang sama dengan gigi

molar dan biasanya disebut dengan cheek teeth.44,46,47 Gigi tersebut memiliki

permukaan oklusal yang datar atau horizontal dengan lipatan enamel yang melintang

untuk mengunyah makanan yang kaya serat.44,45,47 Gigi insisivus mandibula beroklusi

di antara gigi insisivus pertama dan kedua maksila.45

Kelinci mengunyah makanan dibantu dengan lidah dan menggerakan rahangnya

lebih dari 120 kali per menit.43 Asupan makanan sehari-hari kelinci adalah 5% dari

berat badannya sedangkan konsumsi air minumnya sekitar 10% dari berat badan

kelinci. Pola makan kelinci laboratorium harus dijaga dengan baik agar mencegah

obesitas dan gangguan ginjal. Pemberian makanan kelinci penelitian harus mencakup

semua nutrisi makanan yang diperlukan. Perubahan pola makan pada kelinci harus

dilakukan secara bertahap untuk mencegah gangguan pencernaan.42,43


24

Gambar 10. Rahang Kelinci; A. Pandangan oklusal

maksila; B. Pandangan oklusal mandibula.43

Kelinci merupakan salah satu jenis hewan yang sangat aktif. Kegiatan budidaya

dan manajemen kelinci sangat sederhana. Kelinci mempunyai potensi biologis yang

tinggi dimana hewan ini memiliki kemampuan reproduksi yang tinggi dan memiliki

interval kelahiran yang pendek. Kelinci merupakan hewan yang sangat jinak dan

tidak agresif sehingga penanganan dan observasi mudah dilakukan. Hewan kelinci

umumnya dipilih sebagai model penelitian karena hewan ini tidak memerlukan lahan

yang luas dalam pemeliharaannya sehingga mudah dan ekonomis.42,43,48

Secara umum, jumlah maksimum darah yang dapat diambil dalam satu kali

pengambilan adalah 1% dari berat badan.49,50 Pengambilan sampel darah yang

didahului pemberian anastesi biasanya dilakukan pada arteri atau vena marginal

telinga kelinci.50 Bahan anastetikum seperti ketamin dapat disuntikkan secara

instramuskular atau intravena untuk menginduksi dan mempertahankan potensi serta

durasi anastesi.42,45,50 Penelitian menunjukkan kelinci memiliki struktur gingiva yang

sangat mirip dengan manusia sehingga banyak digunakan dalam penelitian

periodontal.51


25

Bedah Kuretase Gingiva

Platelet-rich Fibrin

Growth factors dan sitokin

2.7 Kerangka Teori

Periodontitis

Migrasi junctional

epitelium ke apikal

Kehilangan perlekatan jaringan

periodontal

Peningkatan proliferasi sel

fibroblas

Peningkatan sekresi kolagenase

Perlekatan baru pada jaringan ikat

gingiva

Kerusakan pada tulang alveolar


26

2.8 Kerangka Konsep

Variabel Bebas:

Platelet-rich fibrin

Variabel Terikat:

Kepadatan kolagen

jaringan ikat gingiva

Variabel Terkendali:

1. Spesies kelinci ((Oryctolagus cuniculus) atau

kelinci lokal New Zealand)

2. Jenis kelamin kelinci (Jantan)

3. Umur kelinci (6-8 bulan)

4. Berat badan kelinci (2000-2800 gram)

5. Lokasi perlakuan (Insisivus sentralis rahang

atas dan rahang bawah regio kanan dan kiri)

6. Cara induksi periodontitis (4-0 braided silk

ligatures selama 14 hari)

7. Waktu aplikasi PRF (Satu kali pascakuretase)

8. Bedah periodontal (Kuretase gingiva teknik

sederhana oleh operator pada setiap subjek

penelitian)

9. Jenis pakan kelinci (Pelet kelinci)

10. Perawatan harian kelinci secara rutin

Variabel Tak

Terkendali:

Daya imunitas kelinci

(Oryctolagus cuniculus)


27

BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan

rancangan post-test only control group dan split-mouth design.

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.2.1 Lokasi Penelitian

Lokasi pengumpulan sampel dan penelitian dilakukan di Rumah Sakit Hewan

Pendidikan Institut Pertanian Bogor. Lokasi pembuatan histologi dan sediaan preparat

dilakukan di Laboratorium Histopatologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut

Pertanian Bogor.

3.2.2 Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juni – September 2018.

3.3 Populasi, Sampel dan Besar Penelitian

3.3.1 Populasi Penelitian

Populasi penelitian ini adalah hewan kelinci (Oryctolagus cuniculus).

3.3.2 Sampel Penelitian

Sampel penelitian ini adalah permukaan gigi insisivus dan jaringan periodontal

dari hewan kelinci (Oryctolagus cuniculus) jantan berusia 6-8 bulan dengan berat

2000-2800 gram dan memiliki kondisi tubuh yang sehat.


28

3.3.3 Besar Sampel Penelitian

Sampel penelitian dibagi menjadi dua kelompok, yaitu kelompok perlakuan

dengan pemberian platelet-rich fibrin pascakuretase dan kelompok kontrol tanpa

pemberian platelet-rich fibrin pascakuretase.

Perhitungan jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah dengan

menggunakan rumus eksperimen laboratorium sederhana (Federer), yaitu:

(n − 1)(r − 1) ≥ 15

(2 − 1)(𝑟 − 1) ≥ 15

𝑟 − 1 ≥ 15

𝑟 ≥ 16

Dimana:

n = jumlah kelompok perlakuan

r = jumlah sampel tiap kelompok

Dari hasil perhitungan diperoleh besar sampel untuk setiap kelompok perlakuan

adalah 16 sampel. Sampel penelitian yang digunakan adalah 10 ekor kelinci, dimana

setiap satu rongga mulut kelinci diberi 2 tindakan berbeda, yaitu:

Rahang atas : kelompok perlakuan

Rahang bawah : kelompok kontrol negatif

Sehingga diperoleh besar sampel sebanyak 20 sampel yang sesuai dengan

kriteria inklusi untuk menghindari terjadinya bias.

3.4 Kriteria Inklusi dan Eksklusi

3.4.1 Kriteria Inklusi

1. Kelinci jantan dengan berat 2000-2800 gram;

2. Kelinci jantan dengan rentang umur 6-8 bulan;

3. Kelinci yang memiliki gigi insisivus sentralis atas dan bawah;

4. Kelinci yang memiliki kondisi sehat.


29

3.4.2 Kriteria Eksklusi

1. Kelinci jantan yang sudah memiliki periodontitis;

2. Kelinci dengan abnormalitas gigi insisivus sentralis atas dan bawah;

3. Kelinci yang memiliki penyakit sistemik.

3.5 Variabel Penelitian

3.5.1 Variabel Bebas

Platelet-rich Fibrin

3.5.2 Variabel Terikat

Kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva.

3.5.3 Variabel Terkendali

1. Spesies kelinci ((Oryctolagus cuniculus) atau kelinci lokal New Zealand);

2. Jenis kelamin kelinci (Jantan);

3. Umur kelinci (6-8 bulan);

4. Berat badan kelinci (2000 – 2800 gram);

5. Lokasi perlakuan (Insisivus sentralis rahang atas dan rahang bawah regio

kanan dan kiri);

6. Cara induksi periodontitis (4-0 braided silk ligatures selama 14 hari);

7. Waktu aplikasi PRF (Satu kali pascakuretase);

8. Bedah periodontal (Kuretase gingiva teknik sederhana oleh operator pada

setiap subjek penelitian);

9. Jenis pakan kelinci (Pelet kelinci);

10. Perawatan harian kelinci secara rutin.

3.5.4 Variabel Tak Terkendali

Daya imunitas kelinci (Oryctolagus cuniculus)


30

3.6 Definisi Operasional

No. Variabel Definisi Operasional Alat Ukur Skala

Ukur

1. Model

Periodontitis

Kondisi periodontitis yang

diinduksi selama 14 hari pada

gigi insisivus sentralis rahang

atas dan bawah regio kanan dan

kiri dengan menggunakan 4-0

braided silk ligatures pada

hewan kelinci (Oryctolagus

cuniculus).

- Nominal

2. Kuretase

Gingiva

Prosedur penyingkiran jaringan

lunak yang terinflamasi yang

berada lateral dari dinding pada

poket periodontal.

Kuret Gracey

#1-2 dan #3-4

Nominal

3. Platelet-rich

Fibrin

Konsentrat platelet yang

diperoleh dari sentrifugasi 2 ml

darah kelinci (Oryctolagus

cuniculus) 3500 rpm selama 15

menit.

Sentrifugator Nominal

4. Kepadatan

Kolagen

Jaringan Ikat

Gingiva

Gambaran histologis dari

kolagen jaringan ikat gingiva

yang diukur dari bawah

junctional epitelium ke apikal.

Mikroskop

cahaya

Nominal

5. Insisi

Interdental

Insisi yang dilakukan pada

interdental gingiva untuk

memudahkan pemasangan

ligasi pada kelinci (Oryctolagus

cuniculus)

Scalpel dan

blade #11

Nominal

3.7 Alat dan Bahan Penelitian

3.7.1 Alat Penelitian

1. Mikroskop cahaya (Olympus BX51);

2. Sentrifugator (Gemmy PLC-05);

3. Image processing software;

4. Kamera mikroskop Olympus;

5. Sarung tangan;

6. Masker;


31

7. Spuit injeksi 1ml dan 3ml;

8. Skeler elektrik;

9. Kuret Gracey #1-2 dan #3-4;

10. Diagnostic set;

11. 4-0 braided silk suture;

12. Needle holder;

13. Gunting bedah;

14. Plain vacutainer tube;

15. Prob periodontal (UNC-15);

16. Nierbekken steril;

17. Spatula pengaduk Glass Ionomer Cement;

18. Cotton roll;

19. Alcohol swab;

20. Scalpel dan blade #11.

3.7.2 Bahan Penelitian

1. Darah kelinci (Oryctolagus cuniculus) untuk membuat platelet-rich fibrin;

2. CavitTM (periodontal dressing);

3. Glass Ionomer Cement;

4. Formalin murni 10%;

5. Parafin;

6. Alkohol 70%, 80%, 95%, 100%;

7. Xylol;

8. Larutan Masson Trichrome;

9. Phosphate-buffered Saline (PBS);

10. Xylazine;

11. Ketamine;

12. Kaca objek;

13. Canada Balsam.


32

3.8 Prosedur Penelitian

3.8.1 Pembuatan Ethical Clearance

Keterangan kelayakan etik diperoleh dengan cara mengajukan usulan penelitian

kepada Komisi Etik Penelitian Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.

3.8.2 Persiapan Hewan Coba

Hewan yang digunakan dalam penelitian adalah kelinci (Oryctolagus

cuniculus) jantan dengan berat 2000-2800 gram yang memiliki rentang umur 6-8

bulan. Hewan penelitian kemudian dibagi menjadi 2 kelompok pengamatan, yaitu

pada hari ke-7 dan 14.

Hewan coba diadaptasi selama 10 hari dan dipelihara dalam kandang yang

ditempatkan di ruangan yang cukup aliran udara dan cahaya. Selama masa adaptasi,

hewan coba diawasi secara rutin setiap hari termasuk asupan makanan dan minuman,

urinisasi, kenaikan atau kehilangan berat badan serta perilaku umum hewan untuk

mengevaluasi tingkat stress dari hewan. Kandang dibersihkan setiap hari dari kotoran

dan sisa makanan agar tetap kering. Hewan diberi pakan dan air minum (Gambar 11)

sebanyak tiga kali sehari selama masa uji coba.

Gambar 11. Pemberian pakan rutin kelinci.


33

3.8.3 Induksi Periodontitis pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus)

Prosedur induksi periodontitis diawali dengan pemberian anastesi injeksi

intramuskular ketamine 25 mg/kgBB dan xylazine 3 mg/kgBB kelinci pada paha atas

untuk memberikan efek sedasi (Gambar 12). Hewan coba dievaluasi secara rutin

dengan cara mengukur detak jantung untuk mencegah hewan mengalami rasa sakit

akibat pulihnya kesadaran selama masa perlakuan. Probing dilakukan setelah anastesi

untuk mengukur kedalaman sulkus gingiva pada keadaan normal (Gambar 13).

Gambar 12. Pemberian anastesi dengan injeksi

intramuskular pada paha atas kelinci.

Gambar 13. Probing pada keadaan gingiva normal


34

Induksi periodontitis (Gambar 15) dilakukan dengan menggunakan 4-0 braided

silk ligatures yang dililitkan pada daerah servikal gigi insisivus rahang atas dan

bawah selama 14 hari. Interdental gingiva pada kelinci dilakukan insisi dengan

menggunakan scalpel dan blade #11 agar memudahkan pemasangan ligasi (Gambar

14). Gigi kelinci yang telah dililitkan dengan ligasi kemudian diaplikasikan Glass

Ionomer Cement (Gambar 16) untuk mencegah ligasi mudah terlepas.

Gambar 14. Insisi dengan menggunakan

scalpel pada interdental gingiva kelinci.

Gambar 15. Induksi periodontitis dengan

menggunakan silk ligature.


35

Gambar 16. Pengaplikasian Glass

Ionomer Cement.

Kalibrasi periodontitis sesuai dengan parameter klinis dimana terjadi resesi

gingiva dan loss of attachment serta tereksposnya tulang alveolar dan dilakukan

probing untuk melihat kedalaman poket periodontal yang terbentuk (Gambar 17).

Ligasi dilepaskan pada hari ke-14, kemudian debris di sekitar gigi insisivus dilakukan

skeling dan root planing untuk menghilangkan faktor etiologi periodontitis.

Gambar 17. Gambaran klinis periodontitis pada kelinci.


36

3.8.4 Preparasi Platelet-rich Fibrin dan Kuretase

Hewan kelinci dianastesi dengan injeksi intramuskular dengan menggunakan

ketamine 25 mg/kgBB dan xylazine 3 mg/kgBB kelinci. Sampel darah diambil dari

vena marginal auricularis kelinci (Gambar 18) sebanyak 2 ml dan ditempatkan ke

dalam plain vacutainer tube tanpa penggunaan antikoagulan. Sampel darah yang

diperoleh langsung disentrifugasi pada kecepatan 3500 rpm selama 15 menit.

Gambar 18. Pengambilan darah dari vena

marginal auricularis kelinci.

Hasil sentrifugasi darah (Gambar 19) akan diperoleh tiga lapisan, yaitu: (1)

lapisan pertama dijumpai acellular plasma; (2) lapisan kedua terdapat gumpalan

fibrin; dan (3) lapisan ketiga dijumpai sel darah merah. Gumpalan fibrin dipisahkan

dengan menggunakan pinset dan gunting kemudian dilakukan pemotongan dengan

ukuran ±1 cm2 menggunakan scalpel dan dipindahkan ke nierbekken yang steril.

Membran PRF (Gambar 20) diperoleh dengan cara menekan gumpalan fibrin dengan

menggunakan kaca.


37

Gambar 19. Hasil sentrifugasi darah; A. Accelular plasma; B.

Gumpalan fibrin atau platelet-rich fibrin; C. Sel darah merah.

Gambar 20. Membran platelet-rich fibrin

Prosedur kuretase gingiva (Gambar 21) dilakukan pada hewan coba yang masih

berada di bawah pengaruh anastesi. Instrumen kuretase yang dipakai adalah kuret

Gracey #1-2 dan #3-4 untuk gigi anterior. Instrumen dimasukkan ke lapisan dalam

dinding poket dan dilakukan pengerokan secara horisontal pada jaringan lunak untuk

menghilangkan jaringan patologis. Dinding poket didukung oleh tekanan ibu jari

yang lembut pada permukaan eksternal. Irigasi dengan menggunakan 10 ml akuades

dilakukan untuk mengairi daerah agar menghilangkan kotoran dan darah.

Sembuhnya inflamasi pada gingiva ditandai dengan berhentinya pendarahan

dan tidak terdapat pembengkakan serta hilangnya poket periodontal. Kelompok

A

B

C B

C

A


38

perlakuan yang telah dilakukan kuretase diberikan penambahan PRF dengan

menggunakan pinset kemudian ditutupi dengan periodontal dressing. Periodontal

dressing dibiarkan selama seminggu dan kemudian dilepaskan. Pada kelompok

kontrol hanya dilakukan prosedur kuretase dan langsung ditutupi dengan periodontal

dressing.

Gambar 21. Kuretase gingiva pada kelinci; A. Kuretase gingiva

dengan horizontal stroke dari kuret; B. Gambaran klinis setelah

dilakukan kuretase gingiva.

3.8.5 Pengambilan Sampel Jaringan

Pada hari ke-7 setelah kuretase dengan pemberian PRF pada kelompok

perlakuan dan kuretase tanpa pemberian PRF pada kelompok kontrol, dilakukan

euthanasia pada kedua kelompok dengan eksanguinasi (Gambar 22). Pengambilan

jaringan mandibula dan maksila (Gambar 23) dilakukan untuk mendapatkan potongan

permukaan gigi dan jaringan periodontal dari hewan kelinci. Prosedur ini kemudian

dilakukan kembali pada hari ke-14 setelah kuretase dengan pemberian PRF pada

kelompok perlakuan dan kuretase tanpa pemberian PRF pada kelompok kontrol untuk

pengambilan sampel jaringan.

A

B


39

Gambar 22. Euthanasia pada kelinci.

Gambar 23. Pengambilan jaringan mandibula

dan maksila kelinci.

3.8.6 Pembuatan Sediaan Histologis

Spesimen dibilas dengan menggunakan larutan saline, kemudian dinetralkan

dengan menggunakan formalin buffer 10% (Gambar 24). Spesimen dipotong menjadi

ukuran yang lebih kecil (Gambar 25) kemudian dilakukan penarikan air (dehydrating)

dengan cara direndam dengan alkohol konsentrasi bertingkat (70%, 80%, 95%,

100%) selama 2 jam. Spesimen dilakukan penjernihan (clearing) terhadap alkohol

dengan merendam di dalam larutan xylol sebanyak 2 kali perendaman masing-masing

selama 1,5 jam.


40

Gambar 24. Perendaman spesimen pada

formalin murni 10%.

Gambar 25. Pemotongan spesimen menjadi ukuran yang lebih kecil.

Spesimen dilakukan pemasukan (infiltrasi) parafin ke dalam blok jaringan

dengan direndam di dalam parafin cair sebanyak 3 kali masing-masing selama 2 jam.

Penanaman (embedding) di dalam cetakan parafin blok untuk dilakukan pemotongan

setelah proses infiltrasi selesai. Proses pemotongan (sectioning) blok jaringan

(Gambar 26) dengan menggunakan pisau mikrotom sebesar 5 μm dengan arah

buccal-lingual dan diletakkan pada kaca objek. Kaca objek yang berisikan parafin

direndam di dalam larutan xylol masing-masing 2 kali, alkohol 2 kali selama 1 menit,

alkohol 95% masing-masing selama 1 menit, larutan iodin selama 10 menit,

kemudian dicelupkan 4 kali dalam air mengalir untuk direndam di dalam larutan

masson trichrome (Gambar 27) selama 10 menit.


41

Gambar 26. Proses pemotongan blok jaringan.

Kaca objek direndam ke dalam larutan Mordant selama 30-40 menit, dibasuh

kembali di air mengalir dan air distilasi selama 20 menit. Kaca objek direndam ke

larutan Carrazi’s Hematoxylin selama 40 menit, dibasuh kembali di air mengalir dan

air distilasi selama 5 menit, dicelupkan ke larutan Orange G 0,75% selama 1-2 menit

kemudian dicelupkan ke dalam larutan asam asetat 1% sebanyak 2 kali. Kaca objek

direndam ke larutan Ponceau Xylidine atau larutan Fuschin selama 15 menit,

kemudian dicelupkan ke dalam larutan asam asetat 1% sebanyak 2 kali kemudian

direndam ke larutan Phosphotungtic Acid selama 7-10 menit lalu dicelupkan ke

dalam larutan asam asetat 1% sebanyak 2 kali.

Kaca objek selanjutnya direndam dalam larutan Anilin Blue selama 20 menit,

kemudian dicelupkan kembali ke dalam larutan asam asetat 1% sebanyak 2 kali. Kaca

objek kemudian direndam ke dalam alkohol 95% selama 5 menit, selanjutnya

dilakukan penarikan air (dehydrating) dengan direndam ke alkohol konsentrasi

bertingkat dan dicelupkan kembali ke dalam larutan xylol masing-masing 3 kali.

Kaca objek dioleskan (mounting) dengan Canada Balsam dan ditutupi dengan kaca

penutup (cover glass).


42

Gambar 27. Pewarnaan sampel dengan larutan Masson Trichrome.

3.8.7 Pengamatan Sediaan Histologis

Pengamatan secara histologi dilakukan dengan menggunakan mikroskop

cahaya dan kamera Olympus dengan perbesaran 40x. Pengukuran kepadatan serabut

kolagen dilakukan dengan cara menghitung skor kepadatan pada preparat histologis

dalam 5 lapang pandang. Kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva yang diukur

terletak di bawah junctional epitelium hingga ke apikal.

Kolagen akan tampak sebagai serabut-serabut pada jaringan ikat dan

diekspresikan dalam persentase sesuai dengan fraksi warna yang dihasilkan masing-

masing preparat dengan bantuan program image processing software. Pengukuran

dilakukan berdasarkan waktu pengamatan (hari ke-7 dan 14) dan dibandingkan rerata

antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan pada masing-masing waktu

pengamatan.

3.8.8 Analisis Data

Data yang diperoleh dari penelitian merupakan data kuantitatif berupa

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva berdasarkan waktu dengan skala rasio.

3.8.8.1 Data Bivariat

Analisis bivariat bertujuan untuk membandingkan dua variabel yang

berhubungan. Data bivariat yang disajikan dalam bentuk tabel meliputi tabulasi silang


43

antara kelompok perlakuan yang diberikan penambahan PRF pascakuretase dan

kelompok kontrol tanpa pemberian penambahan PRF pascakuretase.

Analisis data pada penelitian ini menggunakan uji T berpasangan untuk

mengetahui ada tidaknya pengaruh penambahan PRF pascakuretase antara kelompok

perlakuan dengan kelompok kontrol.

3.8.8.2 Data Multivariat

Analisis multivariat bertujuan untuk membandingkan lebih dari dua variabel

yang berhubungan. Uji statistik two-way Anova digunakan untuk mengetahui ada

tidaknya pengaruh penambahan PRF pascakuretase antar kelompok dan waktu

pengamatan terhadap kepadatan serabut kolagen. Uji statistik two-way Anova harus

diawali dengan uji prasyarat analisis, yaitu uji normalitas dan uji homogenitas,

dimana sebaran data yang akan diuji harus terdistribusi normal dan homogen.

Uji statistik Post-Hoc Least Significance Difference (LSD) selanjutnya

dilakukan untuk mengetahui perbedaan rerata kepadatan serabut kolagen antar waktu

pengamatan, yaitu hari ke-7 dan 14. Perhitungan statistik dilakukan dengan

menggunakan software statistik dengan tingkat kepercayaan 95% (α<0,05).


44

3.8.9 Skema Alur Penelitian

Ethical Clearance

Induksi periodontitis kelinci dengan menggunakan 4-0 braided silk ligatures selama 14 hari

Kelinci mengalami periodontitis

10 sampel kelompok kontrol

Kuretase gingiva

10 sampel kelompok perlakuan

Darah sebanyak 2 ml diambil dari vena aurikularis kemudian

disentrifugasi 3500 rpm selama 15menit

Kuretase gingiva

Pemberian platelet-rich fibrin pada poket gigi

Pembuatan preparat histologis

dengan pewarnaan Masson

Trichrome dan pengamatan pada

hari ke-7 dan 14

Hasil pengamatan kepadatan

kolagen jaringan ikat gingiva

Analisis Data


45

BAB 4

HASIL PENELITIAN

Penelitian ini mengenai pengaruh penambahan platelet-rich fibrin (PRF)

pascakuretase terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva model periodontitis

pada hewan kelinci (Oryctolagus cuniculus). Penelitian ini menggunakan 10 ekor

kelinci (Oryctolagus cuniculus) sebagai subjek penelitian, dimana setiap subjek

penelitian dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu kelompok perlakuan dan kelompok

kontrol. Subjek penelitian sebanyak satu ekor mati pada kelompok pengamatan hari

ke-7 dikarenakan oleh kelalaian operator, sehingga jumlah sampel penelitian adalah

sebanyak 18 sampel.

4.1 Nilai Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat gingiva Kelompok Perlakuan

dan Kontrol Pada Pengamatan Hari ke-7 dan 14.

Hasil penelitian diperoleh dari perhitungan kepadatan kolagen jaringan ikat

gingiva kelompok perlakuan dan kontrol pada waktu pengamatan hari ke-7 dan 14

dengan menggunakan program image processing software, yaitu program ImageJ.

Kolagen akan diekspresikan dalam persentase sesuai fraksi warna yang dihasilkan

oleh masing-masing preparat.

Tabel 1. Nilai kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan dan

kontrol pada hari ke-7 dan 14 dalam bentuk persentase (%).

Hari ke-7 Hari ke-14

Perlakuan Kontrol Perlakuan Kontrol

42,38 30,10 51,66 41,46

40,37 32,73 58,41 43,58

40,02 31,09 56,57 42,91

41,23 32,10 52,07 44,89

- - 54,55 43,08

�̅� ± SD 41,00 ± 1,05 31,51 ± 1,15 54,65 ± 2,89 43,18 ± 1,24


46

Keterangan :

�̅� : rerata

SD : standar deviasi atau simpangan baku

Gambar 28. Diagram batang rerata nilai kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok

perlakuan dan kontrol pada hari ke-7 dan 14 dalam bentuk persentase (%).

Kepadatan serabut kolagen jaringan ikat gingiva mengalami peningkatan secara

keseluruhan pada kelompok perlakuan dan kontrol pada kedua waktu pengamatan

(Tabel 1 dan Gambar 28). Hasil penelitian kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva

kelompok perlakuan pada hari ke-7 mengalami peningkatan sebesar 9,49% dari

kelompok kontrol pada hari ke-7. Pada kelompok perlakuan hari ke-14 diperoleh

peningkatan kepadatan serabut kolagen adalah sebesar 11,47% dari kelompok kontrol

pada pengamatan hari ke-14.

Hasil penelitian kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan

pada hari ke-14 mengalami peningkatan sebesar 13,65% dari pengamatan hari ke-7.

Pada kelompok kontrol, hasil penelitian kepadatan serabut kolagen jaringan ikat

gingiva pada hari ke-14 mengalami peningkatan sebesar 11,67% dari pengamatan

hari ke-7. Data yang diperoleh menunjukkan rerata kepadatan serabut kolagen pada

kelompok perlakuan yang diberikan penambahan platelet-rich fibrin lebih tinggi

daripada kelompok kontrol.

41,00

54,65

31,5143,18

0

10

20

30

40

50

60

Hari ke-7 Hari ke-14

Ke

pad

atan

Ko

lage

n J

arin

gan

Ikat

(%

)

Waktu Pengamatan

Perlakuan Kontrol


47

Gambar 29. Gambaran histopatologis kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva

pada hari ke-7; A. Kelompok perlakuan; B. Kelompok perlakuan pada software

ImageJ; C. Kelompok kontrol; D. Kelompok kontrol pada software ImageJ.

Pembesaran 40x.

Gambar 30. Gambaran histopatologis kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva

pada hari ke-14; A. Kelompok perlakuan; B. Kelompok perlakuan pada

software ImageJ; C. Kelompok kontrol; D. Kelompok kontrol pada software

ImageJ. Pembesaran 40x.


48

Kepadatan kolagen diamati dengan menggunakan mikroskop cahaya Olympus

dengan perbesaran 40x sebanyak 5 lapang pandang. Hasil pengamatan pada hari ke-

14 menunjukkan kepadatan kolagen yang semakin meningkat pada kelompok

perlakuan dan kelompok kontrol (Gambar 29 dan Gambar 30). Penggunaan program

image processing software, yaitu ImageJ akan mengubah warna biru kolagen menjadi

warna merah. Kelompok perlakuan memiliki kepadatan kolagen yang ditunjukkan

dengan warna biru yang semakin tebal dan padat jika dibandingkan dengan kelompok

kontrol (Gambar 29 dan Gambar 30).

4.2 Pengaruh Penambahan Platelet-rich Fibrin Pascakuretase Terhadap

Kepadatan Kolagen Jaringan Ikat Gingiva Antara Kelompok Perlakuan dan

Kontrol Pada Pengamatan Hari ke-7 dan 14.

Hasil uji statistik menggunakan uji T berpasangan (Tabel 2) kepadatan kolagen

jaringan ikat gingiva antara kelompok perlakuan dan kontrol menunjukkan nilai

signifikansi sebesar 0,000 (p<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva yang bermakna antara kelompok perlakuan

dengan pemberian PRF dan kelompok kontrol tanpa pemberian PRF.

Tabel 2. Perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dengan pemberian PRF dan kelompok kontrol.

Kelompok Jumlah Sampel

(n)

�̅� Nilai p

Perlakuan 9 48,36 0,000*

Kontrol 9 38,33

Keterangan:

�̅� : nilai rata-rata

(*) : signifikan (p<0,05)

Uji normalitas Shapiro-wilk digunakan untuk mengetahui apakah data

terdistribusi normal atau tidak. Uji Shapiro-wilk digunakan karena jumlah sampel

pada penelitian berjumlah kecil. Hasil uji normalitas Shapiro-wilk diperoleh nilai

signifikansi lebih besar dari 0,05 (p>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa data


49

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan dan kontrol pada hari

pengamatan ke -7 dan 14 adalah terdistribusi secara normal.

Uji homogenitas data dilakukan untuk mengetahui apakah data kepadatan

kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan dan kontrol pada kedua waktu

pengamatan homogen atau tidak. Uji homogenitas yang digunakan pada penelitian ini

adalah Levene’s Test. Hasil uji homogenitas Levene’s Test diperoleh nilai signifikansi

0,071 (p>0,05) yang menunjukkan tidak ada perbedaan variasi data antara kelompok

data yang dibandingkan sehingga diperoleh variasi data kepadatan kolagen jaringan

ikat gingiva kelompok perlakuan dan kontrol pada kedua waktu pengamatan adalah

homogen.

Data hasil penelitian telah terdistribusi normal dan homogen sehingga

memenuhi syarat untuk dilakukan uji statistik two-way Anova. Pengaruh penambahan

PRF pascakuretase terhadap kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dengan kelompok kontrol pada model periodontitis kelinci berdasarkan

waktu pengamatan dianalisis dengan menggunakan uji two-way Anova (Tabel 3 dan

Tabel 4). Hasil uji statistik diperoleh sebagian besar interaksi antar kelompok dengan

kedua waktu pengamatan memiliki perbedaan yang signifikan (p<0,05).

Kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva kelompok perlakuan pada pengamatan

hari ke-7 dengan kelompok kontrol pada pengamatan hari ke-14 diperoleh nilai

signifikansi sebesar 0,097 (p<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa rerata kepadatan

kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok perlakuan dengan pemberian PRF

pada pengamatan hari ke-7 dengan kelompok kontrol tanpa pemberian PRF pada

pengamatan hari ke-14 tidak terdapat perbedaan yang signifikan.

Tabel 3. Hasil uji kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok perlakuan

dan kontrol pada pengamatan hari ke-7 dan 14.

Kelompok Kontrol

(Hari ke-14)

Perlakuan

(Hari ke-7)

Perlakuan

(Hari ke-14)

Kontrol (Hari ke-7) 0,000* 0,002* 0,000*

Kontrol (Hari ke-14) 0,097 0,001*

Perlakuan (Hari ke-7) 0,000*


50

Keterangan:


Hasil uji statistik kelompok perlakuan dan kelompok kontrol pada

pengamatan hari ke-7 diperoleh nilai signifikansi sebesar 0,002 (p<0,05). Kelompok

perlakuan dan kelompok kontrol pada pengamatan hari ke-14 menunjukkan nilai

signifikansi sebesar 0,001 (p<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pada pengamatan

hari ke-7 dan 14, kelompok perlakuan dengan pemberian PRF pascakuretase dan

kelompok kontrol tanpa pemberian PRF pascakuretase terdapat perbedaan kepadatan

kolagen jaringan ikat gingiva yang bermakna.

Tabel 4. Perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok

perlakuan dan kontrol berdasarkan waktu pengamatan.

Waktu

Pengamatan

Kelompok Jumlah Sampel

(n)

�̅� Nilai p

Hari ke-7 Perlakuan 4 41,00

0,002* Kontrol 4 31,51

Hari ke-14 Perlakuan 5 54,65

0,001* Kontrol 5 43,18

Keterangan:

�̅� : nilai rata-rata



51

BAB 5

PEMBAHASAN

Platelet-rich fibrin (PRF) merupakan generasi kedua dari konsentrat platelet

yang digunakan untuk meningkatkan penyembuhan jaringan keras dan lunak.16,19

Konsentrat platelet terbentuk terdiri dari platelet, sitokin dan matriks fibrin.

Degranulasi dari platelet akan melepaskan sitokin, yang memiliki kemampuan untuk

memicu migrasi sel dan proliferasi pada matriks fibrin sehingga terjadi awal mula

dari proses penyembuhan.17,19

PRF dapat melepaskan sitokin yang dapat meningkatkan proses regenerasi

jaringan periodonsium.12,19,39 Pada PRF dijumpai terdapat banyak growth factors

yang dapat meningkatkan proliferasi dan diferensiasi dari sel induk, neovaskularisasi

dan sintesis kolagen.19,22 Penelitian oleh Duan dkk, menunjukkan bahwa penggunaan

PRF sebagai bahan biologis autologus dalam rekayasa jaringan untuk regenerasi

periodonsium merupakan pilihan yang baik.52 PRF dapat meningkatkan pertumbuhan

jaringan tulang dan jaringan lunak untuk mempercepat proses penyembuhan dan

meningkatkan kualitas penyembuhan.12,16,19,21,22,52

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan

rancangan post-test with control group dan split-mouth design yang bertujuan untuk

mengetahui pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci. Hasil

penelitian ini menunjukkan bahwa penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase

dapat meningkatkan kepadatan serabut kolagen jaringan ikat gingiva pada model

periodontitis kelinci.

Hasil uji statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan

(p<0,05) kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva antara kelompok perlakuan dan

kontrol pada masing-masing waktu pengamatan. Hal ini disebabkan oleh platelet-rich

fibrin mengandung platelet-derived growth factor (PDGF) dan transforming growth

factor-beta (TGF)-β dimana kedua growth factors tersebut berperan penting dalam


52

proses reparasi jaringan ikat dengan meningkatkan produksi kolagen jaringan

ikat.20,24,53,54,55

PDGF bekerja dengan menstimulasi proliferasi sel fibroblas yang mempercepat

pembentukan matriks ekstraseluler dan formasi kolagen sehingga mempercepat

proses penyembuhan.55,56 TGF-β akan menstimulasi migrasi sel fibroblas ke luka

sehingga dapat mensintesis kolagen secara langsung.56 Kedua growth factors ini

saling bekerja untuk mensintesis kolagen sehingga kepadatan kolagen dapat

bertambah.57

Hasil uji statistik diperoleh kelompok perlakuan dan kontrol mengalami

peningkatan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada pengamatan hari ke-7 dan

14. Hal ini sesuai dengan penelitian oleh Kiani dkk dan Sabirin dkk, dimana kolagen

mulai dapat diamati pada area luka pada hari ke-3 setelah terjadinya luka dan

berlanjut hingga minggu ke-2 setelah terjadinya luka.58,59 Jumlah serabut kolagen

akan tampak lebih nyata pada hari ke-7 pasca luka seiring dengan peningkatan jumlah

sel fibroblas kemudian susunan serabut kolagen akan lebih stabil dan terorganisir

pada hari ke-14 setelah terjadinya luka.57,58

Pada pengamatan hari ke-7 dan 14 memiliki perbedaan kepadatan kolagen

jaringan ikat gingiva yang signifikan (p<0,05) antara kedua kelompok. Hal ini sesuai

dengan penelitian oleh He dkk yang menunjukkan bahwa pelepasan growth factors

antara lain PDGF dan TGF- β akan mencapai puncaknya pada hari ke-14 sehingga

jumlah kepadatan kolagen akan bertambah banyak.57 Pelepasan PDGF dari PRF yang

telah teraktivasi akan berlangsung selama 3 minggu sementara kadar TGF-β yang

dilepaskan secara bertahap akan menurun 7 hari selama proses penyembuhan

luka.53,57

Kelompok perlakuan pada pengamatan hari ke-7 dengan kelompok kontrol pada

pengamatan hari ke-14 tidak memiliki perbedaan kepadatan kolagen jaringan ikat

gingiva yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian PRF bekerja dengan

baik karena kelompok perlakuan dengan pemberian PRF pada pengamatan hari ke-7

memiliki hasil yang sama dengan kelompok kontrol tanpa permberian PRF pada

pengamatan hari ke-14. Hal ini disebabkan PRF menyediakan semua growth factors


53

yang penting untuk sintesis kolagen, pembentukan sel, penutupan epitel dan

pertumbuhan pembuluh darah.60

Penelitian oleh Tuan dkk, menunjukkan bahwa fibrin sangat berperan dalam

reparasi jaringan dan ditambah dengan sel fibroblas memiliki kemampuan untuk

merekonstruksi matriks fibrin pada PRF serta mensintesis kolagen yang berperan

dalam penyembuhan luka.61 Proses penyembuhan luka yang normal pertama kali

dijumpai akumulasi platelet yang kemudian dilanjutkan dengan pelepasan growth

factors. Pada PRF dapat dijumpai matriks fibrin dimana platelet dan sitokin yang

telah dilepaskan terperangkap di dalamnya dalam periode waktu tertentu selama

proses penyembuhan luka.28,61 PRF dapat digunakan sebagai bahan tambahan pada

defek periodontal yang berpotensi dalam regenerasi periodonsium.28


54

BAB 6

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:

1. Terdapat pengaruh penambahan platelet-rich fibrin pascakuretase terhadap

kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva pada model periodontitis kelinci

(Oryctolagus cuniculus).

2. Pada kelompok perlakuan dengan penambahan platelet-rich fibrin

pascakuretase terdapat peningkatan kepadatan kolagen jaringan ikat gingiva yang

signifikan (p<0,05).

6.2 Saran

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka saran yang dapat diberikan

yaitu:

1. Penelitian lebih lanjut mengenai induksi periodontitis pada kelinci sebaiknya

dilakukan pada gigi posterior kelinci untuk menghindari kesulitan pemasangan ligasi

yang dapat menyebabkan trauma luka berlebih akibat interdental gingiva yang terlalu

tinggi pada gigi insisivus anterior kelinci.

2. Penelitian lebih lanjut dengan jumlah sampel yang lebih besar untuk

mendapatkan hasil yang lebih akurat.

Penelitian lebih lanjut dengan menggunakan inovasi PRF yang lebih baru

seperti Injectable Platelet-rich Fibrin (i-PRF) atau Advanced Platelet-rich Fibrin (A-

PRF) untuk mengetahui profil kepadatan kolagen jaringan ikat terhadap periodontitis

lebih jelas.


55

DAFTAR PUSTAKA

1. Departemen Kesehatan. Riset Kesehatan Dasar 2013:110-1.

2. Departemen Kesehatan. Riset Kesehatan Dasar 2007:130-1.

3. Nazir MA. Prevalence of Periodontal Disease, Its Association with Systemic

Disease and Prevention. Int J Health Sci. 2017; 1(2): 72-80.

4. Aljehani YA. Risk Factors of Periodontal Disease: Review of the Literature.

Int J Dent. 2014; 1-9.

5. Gu Y, dkk. Periodontal Diseases: Classification, Epidemiology, Pathogenesis,

and Management. In: Genco RJ, Williams RC. Periodontal Disease and

Overall Health: A Clinician’s Guide. 2nd Edition. Pennsylvania: Professional

Audience Communications, Inc. 2014. 2: 6-29.

6. Chatterjee A, dkk. Treatment of Periodontal Intrabony Defects Using

Autologous Platelet-Rich Fibrin and Titanium Platelet-Rich Fibrin: A

Randomized, Clinical, Comparative Study. J Investigative Clin Dent. 2016; 1-

6.

7. Segura VAI, dkk. Etiology and Microbiology of Periodontal Diseases: A

Review. Afr J Microbiol Res. 2015; 9(48): 2300-6.

8. Suwandi T. Perawatan Awal Penutupan Diastema Gigi Goyang pada

Penderita Periodontitis Kronis Dewasa. Jurnal PDGI. 2010; 59(3): 105-9.

9. Bathla S. Periodontics Revisited. First Edition. New Delhi: Jaypee Brothers

Medical Publishers. 2011: 3-382.

10. Dinyati M, Adam AM. Kuretase Gingiva Sebagai Perawatan Poket

Periodontal. Makassar Dent J. 2016; 5(2): 58-64.

11. Asyakarie INA, Faizah A. Perawatan Kuretase Gingiva pada Gigi Incisivus

Lateral Rahang Bawah. J Ked G. 2017; 1(1): 64-70.

12. Patel GK, Gujjari SK, Kumar V. Platelet Rich Fibrin (PRF) in Regeneration

of Intrabony Defects – A Randomized Controlled Trial. J Periodontol. 2014;

1-14.


56

13. Yajamanya SR, dkk. Bioactive Glass Versus Autologous Platelet-Rich Fibrin

For Treating Periodontal Intrabony Defects: A Comparative Clinical Study. J

Ind Soc Periodontol. 2017; 21(1): 32-6.

14. Tassi SA, Sergio NZ, Misawa MYO, Villar CC. Efficacy of Stem Cells on

Periodontal Regeneration: Systematic Review of Pre-Clinical Studies. J

Periodont Res. 2017; 1-20.

15. Verma UP, Yadav RK, Dixit M, Gupta A. Platelet-rich Fibrin: A Paradigm in

Periodontal Therapy – A Systematic Review. J Int Soc Prev Community Dent.

2017; 7(5): 227-233.

16. Chandran P, Sivadas A. Platelet-Rich Fibrin: Its Role in Periodontal

Regeneration. Saudi J Dent Res. 2014; 5: 117-122.

17. Khiste SV, Tari RN. Platelet-Rich Fibrin as a Biofuel for Tissue

Regeneration. ISRN Biomaterials. 2013; 1-6.

18. Nguyen HTT, dkk. Platelet-rich Fibrin Influences on Proliferation and

Migration of Human Gingival Fibroblasts. Int J Experiment Dent Sci. 2016;

5(2): 83-8.

19. Miron RJ, Choukroun J. Platelet Rich Fibrin in Regenerative Dentistry:

Biological Background and Clinical Indications. United States of America:

John Wiley & Sons. 2017: 1-144.

20. Doshi M, Ambulgekar JR, Sanadi RM, Govalkar P. Platelet Rich Fibrin – A

New Hope for Regeneration of Ossesous Defects in Aggressive Periodontitis

Patients: A Case Report. American J Advanced Drug Delivery. 2014; 2(1):

85-9.

21. Chang YC, Zhao JH. Effects of Platelet-Rich Fibrin On Human Periodontal

Ligament Fibroblast and Application for Periodontal Infrabony Defects. Aust

Dent J. 2011; 56(4): 365-371.

22. Madi M, Samuel M, Kedr MA. Platelet Rich Fibrin and Periodontal Tissue

Regeneration. Adv Dent Oral Health. 2017; 4(5): 1-4.


57

23. Tsai CH, Shen SY, Zhao JH, Chang YC. Platelet-Rich Fibrin Modulates Cell

Proliferation of Human Periodontally Related Cells In Vitro. J Dent Sci. 2009;

4(3): 130-5.

24. Moraschini V, Barboza SE. Use of Platelet-rich Fibrin Membrane in the

Treatment of Gingival Recession: A Systematic Review and Meta-Analysis. J

Periodontol. 2016; 87: 281–90.

25. Keceli HG, dkk. The Adjunctive Effect of Platelet-Rich Fibrin to Connective

Tissue Graft in the Treatment of Buccal Recession Defects: Results of A

Randomized, Parallel-Group Controlled Trial. J Periodontol. 2015; 86: 1221–

30.

26. Gupta S, dkk. Clinical Evaluation and Comparison of the Efficacy of

Coronally Advanced Flap Alone and in Combination with Platelet Rich Fibrin

Membrane in the Treatment of Miller Class I and II Gingival

Recessions. Contemp Clin Dent. 2015; 6: 153–60.

27. Heitz-Mayfield LJ, dkk. A systematic review of the effect of surgical

debridement vs. non-surgical debridement for the treatment of chronic

periodontitis. J Clin Periodont. 2002; 29: 92-102.

28. Pradeep AR, dkk. Platelet-rich fibrin combined with a porous hydroxyapatite

graft for the treatment of three-wall intrabony defects in chronic periodontitis:

a randomized controlled clinical trial. J Periodontol. 2012; 87(1): 5-13.

29. Tunali M, dkk. In vivo evaluation of titanium-prepared platelet-rich fibrin (T-

PRF): a new platelet concentrate. Br J Oral Maxillofac Surg. 2013; 51, 438-

43.

30. Hinrichs JE, Kotsakis G. Classification of Diseases and Conditions Affecting

the Periodontium. In: Newman MG, dkk. Carranza’s Clinical Periodontology.

12th ed. Misouri: Saunders, 2015: 45-67.

31. Reddy S. Essentials of Clinical Periodontology and Periodontics. Second

Edition. New Delhi: Jaypee Brothers Medical Publisher. 2008: 8-306.


58

32. Van Winkelhoff AJ, dkk. Porphyromonas gingivalis, Bacteroides forsythus

and other putative periodontal pathogens in subjects with and without

periodontal destruction. J Clin Periodontol. 2002; 29: 1023-8.

33. Fiorellini JP, Stathopoulou PG. Anatomy of the Periodontium. In: Newman

MG, dkk. Carranza’s Clinical Periodontology. 12th ed. Misouri: Saunders,

2015: 9-39.

34. Takei HH, dkk. Gingival Surgical Techniques. In: Newman MG, dkk.

Carranza’s Clinical Periodontology. 12th ed. Misouri: Saunders, 2015: 576-

81.

35. Smith PC, dkk. Gingival Wound Healing: An Essential Response Disturbed

by Aging?. J Dent Res. 2015; 94(3): 395-402.

36. Kumar S, dkk. Concepts of Healing in Periodontal Therapy – Part I. J Dent

Med Sci. 2015; 14(10): 89-101.

37. Brett D. A Review of Collagen and Collagen-based Wound Dressings.

Wounds. 2008; 20(12): 347-56.

38. Rangaraj A, dkk. Role of Collagen in Wound Management. Wounds. 2011;

7(2): 54-63.

39. Desarda HM, dkk. Platelet rich fibrin: A new hope for regeneration in

aggressive periodontitis patients: Report of two cases. Indian J Dent Res.

2013; 24(5): 627-30.

40. Borie E, dkk. Platelet-rich fibrin application in dentistry: a literature review.

Int J Clin Exp Med. 2015; 8(5): 7922-29.

41. Alizade FL, dkk. Biologic characteristics of platelet rich plasma and platelet

rich fibrin: A review. Int J Contemporary Dent Med Reviews. 2016; 1-4.

42. Mapara M, Thomas ST, Bhat KM. Rabbit as an animal model for

experimental research. Dent Res J. 2012; 9(1): 111-8.

43. Yanni AE. The laboratory rabbit: an animal model of atherosclerosis research.

Laboratory animals. 2004; 38: 246-56.

44. Meredith, A. Rabbit Dentistry. EJCAP. 2007; 17(1): 55-62.


59

45. Frank JM, Osofsky A. Dentistry in Pet Rabbits. COMPENDIUM. 2005; 671-

83.

46. Capello V, dkk. Rabbit and Rodent Dentistry Handbook. Canada: Zoological

Education Network. 2005: 7-230

47. Schumacher M. Measurement of Clinical Crown Length of Incisor and

Premolar Teeth in Clinically Healthy Rabbits. J Vet Dent. 2011; 28(2): 90-5.

48. Calasans-Maia MD, dkk. The rabbit as an animal model for experimental

surgery. Acta cirurgica Brasileira. 2009; 24(4): 325-8.

49. Thrall MA. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Maryland:

Lippincott Williams and Wilkins. 2004: 571-81.

50. Parasuraman S, Raveendran R, Kesavan R. Blood sample collection in small

laboratory animals. J Pharmacology Pharmacotherapeutics. 2010; 1(2): 87-93.

51. Alzarea BK. Selection of Animal Models in Dentistry: State of Art, Review

Article. J Animal Veterinary Adv. 2014; 13(18): 1080-5.

52. Duan, dkk. Study of Platelet-rich Fibrin combined with rat periodontal

ligament stem cells in periodontal tissue regeneration. J Cell Mol Med. 2018;

22(2): 1047-55.

53. Jung HS, Bae Hs, Hong KS. The Effects of Platelet-Rich Fibrin on Osteoblast

Proliferation and Differentiation: Effects of Platelet-Rich Fibrin on

Osteoblasts. J Dent Hyg Sci. 2013; 13(2): 158-64.

54. Wu CL, dkk. Platelet-rich fibrin increases cell attachment, proliferation and

collagen-related protein expression of human osteoblasts. Aus Dent J. 2012;

57: 207-12.

55. Deng XQ, dkk. Platelet-Derived Growth Factor and Transforming Growth

Factor β1 Regulate ARDS-Associated Lung Fibrosis Through Distinct

Signaling Pathways. Cell Physiol Biochem. 2015; 36: 937-46.

56. Pierce GF, dkk. Platelet-derived Growth Factor and Transforming Growth

Factor-β Enhance Tissue Repair Activities by Unique Mechanisms. J Cell

Biology. 1989; 109: 429-40.


60

57. He L, dkk. A Comparative Study of Platelet-rich Fibrin (PRF) and Platelet-

rich Plasma (PRP) on the Effect of Proliferation and Differentiation of Rat

Osteoblasts In Vitro. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod.

2009; 108: 707-13.

58. Kiani, FA, dkk. Histological Characterization of Wound Healing of Flank

Verses Midline Ovariohysterectomy in Different Age Groups of Cats. J Clin

Pathol Forensic Med. 2014; 5(2): 6-16.

59. Sabirin IPR, dkk. Peran Ekstrak Etanol Topikal Daun Mengkudu (Morinda

citrifolia L.) pada Penyembuhan Luka Ditinjau dari Imunoekspresi CD34 dan

Kolagen pada Tikus Galur Wistar. MKB. 2013; 45(4): 226-33.

60. Jain V, dkk. Role of Platelet-rich Fibrin in Enhancing Palatal Wound Healing

After Free Graft. Contemp Clin Dent. 2012; 3(2): 240-3.

61. Tuan TL, dkk. In Vitro Fibroplasia: Matrix Contaction, Cell Growth and

Collagen Production of Fibroblasts Cultured in Fibrin Gels. Exp Cell Res.

1996; 223 (1): 127-34.

62. Vahabi S, dkk. Effects of Plasma Rich in Growth Factors and Platelet-rich

Fibrin on Proliferation and Viability of Human Gingival Fibroblasts. J Dent

(Tehran). 2015; 12(7): 504-12.


Lampiran 1


Lampiran 2


Lampiran 3


Lampiran 4

Case Processing Summary

Kelompok

Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

Nilai Kepadatan

Kolagen

Kontrol7 4 80.0% 1 20.0% 5 100.0%

Perlakuan7 4 80.0% 1 20.0% 5 100.0%

Kontrol14 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

Perlakuan14 5 100.0% 0 0.0% 5 100.0%

Descriptive Statistics

Dependent Variable: Nilai Kepadatan Kolagen

Waktu Pengamatan Kelompok Mean

Std.

Deviation N

7 Hari Kontrol7 31.5050 1.15483 4

Perlakuan7 41.0000 1.05113 4

Total 36.2525 5.17722 8

14 Hari Kontrol14 43.1840 1.23747 5

Perlakuan14 54.6520 2.89095 5

Total 48.9180 6.39742 10

Total Kontrol7 31.5050 1.15483 4

Perlakuan7 41.0000 1.05113 4

Kontrol14 43.1840 1.23747 5

Perlakuan14 54.6520 2.89095 5

Total 43.2889 8.63959 18

Paired Samples Statistics

Mean N

Std.

Deviation

Std. Error

Mean

Pair 1 Perlakuan 48.3622 9 7.33664 2.44555

Kontrol 38.3267 9 6.65916 2.21972


Paired Samples Test

Paired Differences

t df

Sig. (2-

tailed) Mean

Std.

Deviation

Std.

Error

Mean

95% Confidence

Interval of the

Difference

Lower Upper

Pair

1

Perlakuan -

Kontrol 10.03556 2.17014 .72338 8.36743 11.70368 13.873 8 .000

Tests of Normality

Kelompok

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Nilai Kepadatan

Kolagen

Kontrol7 .197 4 . .975 4 .875

Perlakuan7 .226 4 . .940 4 .653

Kontrol14 .212 5 .200* .973 5 .895

Perlakuan14 .214 5 .200* .929 5 .589

*. This is a lower bound of the true significance.

a. Lilliefors Significance Correction

Levene's Test of Equality of Error

Variancesa

Dependent Variable: Nilai Kepadatan

Kolagen

F df1 df2 Sig.

2.921 3 14 .071

Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups.

a. Design: Intercept + Waktu + Kelompok + Waktu * Kelompok


Between-Subjects Factors

Value Label N

Waktu Pengamatan 1 7 Hari 8

2 14 Hari 10

Kelompok 1 Kontrol7 4

2 Perlakuan7 4

3 Kontrol14 5

4 Perlakuan1

4 5

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable: Nilai_Kepadatan_Kolagen

Source Type III Sum

of Squares

df Mean

Square

F Sig.

Corrected Model 1092.947a 3 364.316 78.327 .000

Intercept 29289.755 1 29289.755 6297.205 .000

Kelompok 408.545 1 408.545 87.836 .000

Waktu_Pengamatan 682.908 1 682.908 146.823 .000

Kelompok *

Waktu_Pengamatan

1.495 1 1.495 .321 .581

Error 55.815 12 4.651

Total 30438.517 16

Corrected Total 1148.762 15

a. R Squared = ,951 (Adjusted R Squared = ,939)


Multiple Comparisons

Dependent Variable: Nilai Kepadatan Kolagen

LSD

(I) Kelompok (J) Kelompok

Mean

Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower

Bound

Upper

Bound

Kontrol7 Perlakuan7 -9.4950* 1.29382 .002 -12.2700 -6.7200

Kontrol14 -11.6790* 1.22743 .000 -14.3116 -9.0464

Perlakuan14 -23.1470* 1.22743 .000 -25.7796 -20.5144

Perlakuan7 Kontrol7 9.4950* 1.29382 .002 6.7200 12.2700

Kontrol14 -2.1840 1.22743 .097 -4.8166 .4486

Perlakuan14 -13.6520* 1.22743 .000 -16.2846 -11.0194

Kontrol14 Kontrol7 11.6790* 1.22743 .000 9.0464 14.3116

Perlakuan7 2.1840 1.22743 .097 -.4486 4.8166

Perlakuan14 -11.4680* 1.15723 .001 -13.9500 -8.9860

Perlakuan14 Kontrol7 23.1470* 1.22743 .000 20.5144 25.7796

Perlakuan7 13.6520* 1.22743 .000 11.0194 16.2846

Kontrol14 11.4680* 1.15723 .001 8.9860 13.9500

Based on observed means.

The error term is Mean Square(Error) = 3,348.

*. The mean difference is significant at the .05 level.


Lampiran 5

Data Berat Badan dan Kedalaman Probing Kelinci

No. Sampel Berat Badan

(kg)

Kedalaman Probing (mm)

Normal Sesudah Induksi

Periodontitis (14 hari)

RA RB RA RB

1 2100 1 2 2 4

2 2200 1 3 2 5

3 2350 2 4 3 4

4 2850 1 4 2 5

5 2100 1 3 3 4

6 2100 1 3 3 5

7 2600 1 4 2 5

8 2300 1 3 2 5

9 2100 1 4 2 5

Rata-rata 2300


Lampiran 6











Documents

2018 Pengaruh Penambahan Platelet-Rich Fibrin ......jaringan ikat gingiva adalah serat kolagen (sekitar 60% dari volume jaringan ikat gingiva). Platelet-rich fibrin (PRF) merupakan