2998 フォトダイオードアレイ検出器オペレーターズガイド

71500121902_JA/リビジョン C

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おことわり

© 2010 WATERS CORPORATION. 米国およびアイルランドにて印刷。著作権保有。発

行者の文書による承諾なしには、いかなる形でも本書の全部または一部を複製することはできません。

本書の内容は、予告なしに変更される場合があり、また、Waters Corporation および日本

ウォーターズ（株）の責任を示すものではありません。本書は、発行時点においては完全で正確なものと確信しておりますが、万一誤りがあった場合には、Waters Corporationおよび日本ウォーターズ（株）は責任を負いかねますのでご了承ください。本書の使用に関連する、または使用から発生する偶発的または間接的な損害に対して、いかなる場合もWaters Corporation および日本ウォーターズ（株）は責任を負うものではありません。

商標

Waters および Alliance は Waters Corporation の登録商標であり、Empower、MassLynx、SAT/IN、TaperSlit、および「THE SCIENCE OF WHAT’S POSSIBLE.」は Waters Corporation の商標です。

Tygon は Saint-Gobain Ceramics & Plastics, Inc. の登録商標です。

他のすべての登録商標または商標は、商標所有の各社に所有権があります。

ii

お客様のご意見について

本マニュアルの誤りや、本マニュアルの改善に関するその他のご意見は、Waters テクニ

カルコミュニケーション部にお知らせください。お客様の本書に対するご要望をより良く理解し、今後も本書の正確さと使いやすさを向上してゆくことができるように、ご協力をお願いいたします。

皆様からいただいたご意見は慎重に検討させていただきます。担当窓口はtech_comm@waters.com です。

Waters へのお問い合わせ

Waters®製品へのご要望、使用、輸送、取り外し、および廃棄に関する技術的なご質問は、

Waters までお問い合わせください。

Waters の連絡先情報

問い合わせ方法 情報

インターネット 世界各国の Waters の連絡先情報については、

Waters のウェブサイト www.waters.com をご覧く

ださい。

電話およびファックス 電話：フリーダイヤル 0120-800-299

ファックス：東京 03-347-7118、大阪 06-6300-1734

住所 日本ウォーターズ株式会社

〒 140-0001

東京都品川区北品川 1 丁目 3 番 12 号

第 5 小池ビル

iii

安全に関する注意事項

Waters の装置とデバイスで使用する試薬およびサンプルの中には、化学的、生物学的、お

よび放射線学的危険有害性を引き起こすものもあります。ご使用になられるすべての物質に対して、潜在的な危険有害性を把握しておく必要があります。必ず優良試験所基準

(GLP) に従い、組織の安全担当者から適切なガイダンスを受けてください。

安全上の注意

警告および注意の総合リストついては、付録 A を参照してください。

この装置の操作

この装置を操作する際は、標準の品質管理 (QC) 手順とこのセクションのガイドラインに

従ってください。

適用記号

記号 定義

製造者

EC（欧州共同体）の正式代表者

製造された製品が該当するすべての欧州共同体指令に準拠していることを裏付けます。

オーストラリアの C-Tick EMC 規格

製造された製品が該当するすべての米国およびカナダの安全要求事項に準拠していることが確認されています。

説明書をお読みください

iv

対象読者および目的

本書は、Waters 2998 フォトダイオードアレイ (PDA) 検出器の設置、運転、および保守

を行う担当者を対象にしています。

2998 フォトダイオードアレイ検出器の使用目的

Waters は様々な種類の化合物を分析するために、2998 フォトダイオードアレイ (PDA)検出器を開発しました。

キャリブレーション

LC システムのキャリブレーションを行うには、標準試料を使用して条件に合ったキャリ

ブレーションメソッドに従い、検量線を作成します。標準試料は、分析対象物において想定される下限および上限を含む三点以上の濃度について測定します。

質量分析計をキャリブレーションするときには、キャリブレーションする装置のオペレーターズガイドのキャリブレーションのセクションを参照してください。オペレーターズガイドではなく、概要およびメンテナンスガイドが装置に付属している場合、キャリブレーションの手順については、装置のオンラインヘルプシステムをご覧ください。

品質管理

化合物の濃度が通常の値よりも低いレベル、通常濃度、および通常よりも高いレベルの 3つの品質管理 (QC) サンプルを定期的に分析してください。QC サンプル結果が許容範囲内

であることを確認し、毎日、分析毎に精度を評価してください。QC サンプルが範囲外の

ときに収集されたデータは無効な場合があります。これらのデータは、装置が適切に実行されることが確認されるまで、レポートしないでください。

ISM 分類

ISM 分類：ISM グループ 1、クラス Bこの分類は、CISPR 11、工業・科学・医療用 (ISM) 機器の要件に従って指定されていま

す。グループ 1 の製品分類は、その機器の動作に必要な伝導的に結合された無線周波数エ

ネルギーを生成するか、使用する製品に適用されます。クラス B の製品は、商業地域と

住宅地域の両方での使用に適した製品で、低電圧電力網に直接接続できます。

v

EC の認定代理人

Waters Corporation (Micromass UK Ltd.)Floats RoadWythenshaweManchester M23 9LZUnited Kingdom

電話： +44-161-946-2400

ファックス： +44-161-946-2480

お問い合わせ窓口： 品質管理マネージャ (Quality manager)

vi

目次

おことわり ............................................................................................................................... ii

商標 .......................................................................................................................................... ii

お客様のご意見について ....................................................................................................... iii

Waters へのお問い合わせ .................................................................................................... iii

安全に関する注意事項 ............................................................................................................ iv 安全上の注意 ................................................................................................................... iv

この装置の操作 ....................................................................................................................... iv 適用記号 .......................................................................................................................... iv 対象読者および目的 ......................................................................................................... v 2998 フォトダイオードアレイ検出器の使用目的 ............................................................ v キャリブレーション ......................................................................................................... v 品質管理 ........................................................................................................................... v

ISM 分類 ................................................................................................................................. v ISM 分類：ISM グループ 1、クラス B ............................................................................ v

EC の認定代理人 .................................................................................................................... vi

1 2998 PDA 検出器の光学系の原理 ...................................................................................... 1-1

検出器の光学系 .................................................................................................................... 1-2 吸光度の計算 ................................................................................................................. 1-3

フローセルの動作原理 ......................................................................................................... 1-5

スペクトルデータの解像度 .................................................................................................. 1-6

フォトダイオードアレイでの光の測定 ................................................................................ 1-7 シグナル対ノイズ比の最適化 ........................................................................................ 1-7 フィルタ時定数の最適化 ............................................................................................... 1-8 適切なサンプリングレートの選択 ................................................................................. 1-8

吸光度データポイントの計算 .............................................................................................. 1-9 暗電流 ............................................................................................................................ 1-9 レファレンススペクトル ............................................................................................... 1-9 データの平均化 .............................................................................................................. 1-9 データのフィルタリング ............................................................................................. 1-12 レファレンス波長の補正 ............................................................................................. 1-12

目次 1

2 検出器の設定 ....................................................................................................................... 2-1

はじめに .............................................................................................................................. 2-2

開梱と検品 ........................................................................................................................... 2-2

設置場所の選定 .................................................................................................................... 2-3 検出器の寸法 ................................................................................................................. 2-3

電源接続 .............................................................................................................................. 2-5

信号接続 .............................................................................................................................. 2-6 Ethernet ケーブルの接続 .............................................................................................. 2-6 ネットワークインストールのガイドライン .................................................................. 2-7 他の装置への接続 .......................................................................................................... 2-9

検出器の配管 ..................................................................................................................... 2-16 ガス供給接続 ............................................................................................................... 2-18

検出器の起動とシャットダウン ........................................................................................ 2-18 検出器の起動 ............................................................................................................... 2-18 検出器 LED のモニター .............................................................................................. 2-20 検出器のシャットダウン ............................................................................................. 2-21

キュベットの使用方法 ....................................................................................................... 2-21

3 検出器のメンテナンス ......................................................................................................... 3-1

Waters テクニカルサービスへの連絡 ................................................................................ 3-2

メンテナンス時の注意事項 .................................................................................................. 3-2 安全と警告への対応 ...................................................................................................... 3-2 スペアパーツ ................................................................................................................. 3-3

日常のメンテナンス ............................................................................................................ 3-3

フローセルのメンテナンス .................................................................................................. 3-3 フローセルのフラッシュ洗浄 ........................................................................................ 3-4 フローセルの交換方法 ................................................................................................... 3-4

ランプの交換 ....................................................................................................................... 3-7

ヒューズの交換 .................................................................................................................. 3-10

4 診断テストおよびトラブルシューティング ........................................................................ 4-1

診断テスト ........................................................................................................................... 4-2 検出器キャリブレーションの検証 ................................................................................. 4-2 ランプエネルギーの読み取り ........................................................................................ 4-3 エルビウムキャリブレーションを実行する .................................................................. 4-3

2 目次

キャリブレーション定数の読み込み ............................................................................. 4-4 PDA 検出器背面パネルのインターフェース接続の表示 ............................................... 4-4 背面パネルのインターフェース接続の変更 .................................................................. 4-5

全般的なトラブルシューティング ....................................................................................... 4-5 電源サージ ..................................................................................................................... 4-6 フローセルから気泡を取り除く .................................................................................... 4-6 検出器のトラブルシューティング ................................................................................. 4-7

5 スペクトルコントラスト理論 .............................................................................................. 5-1

吸光度スペクトルの比較 ..................................................................................................... 5-2

ベクトルによるスペクトルの表示 ....................................................................................... 5-3 2 つの波長から生成されたベクトル .............................................................................. 5-3 複数の波長から生成されたベクトル ............................................................................. 5-4

スペクトルコントラストアングル ....................................................................................... 5-4

望ましくない影響 ................................................................................................................ 5-8 検出器のノイズ .............................................................................................................. 5-8 光度測定エラー .............................................................................................................. 5-8 溶媒の変化 ..................................................................................................................... 5-8 許容差アングル .............................................................................................................. 5-9

A 安全上の注意 ...................................................................................................................... A-1

警告記号 ............................................................................................................................. A-2 作業中の危険警告 .......................................................................................................... A-2 具体的な警告 ................................................................................................................. A-3

注意記号 ............................................................................................................................. A-5

すべての Waters 装置に適用される警告 ........................................................................... A-5

電気および取り扱い関連の記号 ......................................................................................... A-6 電気的記号 ..................................................................................................................... A-6 取扱記号 ........................................................................................................................ A-7

B 仕様 .................................................................................................................................... B-1

C 溶媒の取り扱い時の注意 .................................................................................................... C-1

はじめに ............................................................................................................................. C-2 清潔な溶媒 ..................................................................................................................... C-2 溶媒の品質 ..................................................................................................................... C-2 溶媒調製のチェックリスト ............................................................................................ C-2 水 ................................................................................................................................... C-2

目次 3

バッファ（緩衝剤）の使用 ............................................................................................ C-2 テトラヒドロフラン ...................................................................................................... C-3

溶媒の混和性 ...................................................................................................................... C-3 混和性番号の使用法 ...................................................................................................... C-5

バッファ溶液 ...................................................................................................................... C-5

溶媒ボトルの位置 ............................................................................................................... C-6

チューブの曲げ半径の推奨値 ............................................................................................. C-6

溶媒の粘性 .......................................................................................................................... C-6

移動相の溶媒脱気 ............................................................................................................... C-7 気体の溶解性 ................................................................................................................. C-7

溶媒の脱気方法 ................................................................................................................... C-8 スパージ ........................................................................................................................ C-8 真空脱気 ........................................................................................................................ C-8 溶媒脱気に関する注意事項 ............................................................................................ C-8

波長の選択 .......................................................................................................................... C-9 一般的な溶媒に対する UV カットオフ ......................................................................... C-9 移動相混合液 ............................................................................................................... C-10 発色団検出のための波長選択 ...................................................................................... C-11 移動相の吸光度 ............................................................................................................ C-13

索引 ..................................................................................................................................... 索引 -1

4 目次

1 2998 PDA 検出器の光学系の原理

2998 PDA 検出器を効果的に使用するために、検出器の光学やエレクトロニクスの動作原

理を理解する必要があります。

内容：

トピック ページ

検出器の光学系 1-2

フローセルの動作原理 1-5

スペクトルデータの解像度 1-6

フォトダイオードアレイでの光の測定 1-7

吸光度データポイントの計算 1-9

1-1

検出器の光学系

この検出器は、紫外・可視 (UV/Vis)分光光度計です。512個のフォトダイオードを持つフォト

ダイオードアレイが装備されており、1.2 nmの光学解像度で、190 ~ 800 nmの領域で動作し

ます。

検出器の光学アセンブリ内の光路を次の図に示します。

光学アセンブリの光路

次の表では、光学アセンブリの構成部品について説明します。

光学アセンブリのパーツ

パーツ 機能

ランプ 重水素ランプ。

M1ミラー 重水素ランプからの光を集光します。

ウィンドウ 光源の光はこのウィンドウから出ます。

TP02819

回折格子

フォトダイオードアレイ

分光器のミラーおよびマスク

フローセル

ウィンドウ

フィルタフラグ/シャッター

ランプ

オーダーフィルタ

M1 ミラースリット

1-2 2998 PDA 検出器の光学系の原理

吸光度の計算

検出器は、レファレンススペクトル（レファレンスエネルギー）と取り込んだスペクトル（サンプルエネルギー）から、暗電流（1-9 ページの「暗電流」を参照）を差し引くことによっ

て、吸光度を算出します。吸光度は、ベールの法則のに従います。

フィルタフラグ/シャッター

シャッター開放（サンプル測定用）およびブロック（ダーク測定用）して光線のエネルギーを測定するフラグ位置と波長検証用測定に第三のフラグ位置があります。波長検証用測定のフラグではエルビウムフィルタが光路に入ります。

フローセル 多波長光が通過するように流路のセグメント（溶離液とサンプルを含む）を配置しており、そのセグメントがフローセルです。

分光器のミラーおよびマスク

ミラーによって、フローセルを透過した光が分光器の入口となるスリットに集光されます。ミラー上のマスクによって、回折格子におけるビームサイズが決まります。

スリット フォトダイオードに当たる光の波長解像度と強度がスリット幅によって決まります。スリットの幅は50 μmです。

回折格子 波長帯に応じて光を分散し、フォトダイオードアレイの平面に集光します。

オーダーフィルタ 可視光の波長（370 nm以上）で測定される光の強度に対する紫外

線（370 nm未満）の2次回折の影響を低減します。

フォトダイオードアレイ

512個のフォトダイオードの直線配列。ダイオードの幅(50 μm)と50 μmのスリットを合わせて、1.2 nmの単一波長解像度が実現さ

れます。

光学アセンブリのパーツ

パーツ 機能

検出器の光学系 1-3

ベールの法則

ランベルト・ベールの法則（一般にベールの法則と呼ばれる）は、フォトダイオードに到達した特定の波長の光量と、フローセルを通過するサンプルの濃度の関係を説明するものです。ベールの法則は、A = εlc で表されます。

A = 吸光度単位で測定される無次元量

ε = モル吸光係数 (単位は M-1 cm-1)l = 光路長、cm（検出器の通常フローセルで1.0 cm）

c = 濃度（モル/リットル）

ベールの法則は、平衡状態の希薄溶液にのみ適用されます。試料の屈折率が一定であること、光が単色であること、および迷光が検出器の要素に到達しないことが前提です。濃度が高くなると、分子間相互作用などの問題があり、結果として（吸光度対濃度が）直線性から逸脱することがあります。移動相の吸光度によって、直線範囲が減少することがあります。

濃度と吸光度の関係

溶液濃度

吸光度

理想的

実際

分析対象物の直線範囲

1-4 2998 PDA 検出器の光学系の原理

フローセルの動作原理

2998検出器で使用するWaters TaperSlit™フローセルは、移動相屈折率(RI)の変化による

ベースラインへの影響を最小限に抑えます。RI の変化は、グラジェント分析中に、または温

度やポンプが原因の圧力変動の結果として発生します。

RI の影響を低減するため、球面ミラー、フローセルの入口のレンズ、およびテーパー型のフ

ローセルを組み合わせて、フローセルの内壁に光線が当たらないようにします。WatersTaperSlit フローセルの名前の由来にもなっているもう一つの特徴は、フローセルの出口

面の形状であり、これは分光器スリットの形状に一致します。円柱形の従来のフローセルと比較して、2998検出器はTaperSlitセル設計によりスペクトル解像度に必要な光ハイス

ループットを実現します。

フローセルの特性の比較

ウィンドウ

ウィンドウ

光線

従来のフローセル：

TaperSlit 分析フローセル：

ウィンドウ

レンズ

光線

フローセルの動作原理 1-5

スペクトルデータの解像度

フォトダイオードの間隔と 50 μm のスリットによって、フォトダイオードアレイに当たる

光量と波長範囲が決定されます。波長範囲が狭いと、検出器の解像度が向上し、 重なった

バンドをより効果的に区別できるようになります。

回折格子は、スリットの像をフォトダイオードアレイに投影します。回折格子の角度によって、アレイ内の特定のフォトダイオードに当たる波長が決定されます。

次の図は、ベンゼンの吸光度スペクトルを示しています。波長解像度は、5 つの主要な吸収

ピークを識別するのに十分であることに注目してください。

異なる解像度のベンゼンのスペクトル

吸光度

nm

230.00 250.00 270.00

1.2 nm

3.6 nm

1-6 2998 PDA 検出器の光学系の原理

フォトダイオードアレイでの光の測定

検出器は、フォトダイオードアレイに当たる光量を測定して、フローセル内のサンプルの吸光度を判断します。

アレイは、512個のフォトダイオードの列から構成されます。各フォトダイオードは、最初、固

定の電荷量を保持するコンデンサーとして起動します。

フォトダイオードに光があたると、ダイオードは保持していた電荷を放電します。放電の大きさは、フォトダイオードに当たる光量によって決まります。

光によって放電されるフォトダイオード

検出器は、各フォトダイオードを再充電するのに必要な電流量を測定します。充電量は、ダイオード露出時間で中に、フローセルを透過した光量に比例します。

シグナル対ノイズ比の最適化

シグナル対ノイズ比を最適化するには、対象となる波長のみを含む取り込み波長範囲を選択します。移動相のバックグラウンド吸収が最小の範囲を選択してください（付録 C を参

照）。解像度パラメータの値を大きくすると、シグナル対ノイズ比が更に向上します。たとえば、1.2 nmではなく3.6 nmの解像度で動作するように選択します。 詳細については、1-10ページを参照してください。

ミラー

回折格子フローセル

重水素ランプ

回折格子からの光はダイオード上に分散されます。

フローセル内のサンプルは、特定の波長を吸光します。

スリット

フォトダイオードアレイでの光の測定 1-7

フィルタ時定数の最適化

フィルタ時定数は、ピーク強度に影響します。感度を高めるには、フィルタ時定数の値を小さく設定します。

適切なサンプリングレートの選択

正しいピーク形状のピークを検出するには、十分な数のデータポイントが必要です。このため、非常に低いサンプリングレートでは、最適なピーク形状が得られません。Empowerでは、開始時刻から終了時刻を差し引き、クロマトグラム中の検出ピークの［ピーク内のポイント数］値が計算されます。

ヒント：［ピーク内のポイント数］値は［レビューのメイン］画面の下部にある［ピーク］テーブルに表示されます。［ピーク内のポイント数］フィールドが表示されない場合は、テーブル内を右クリックし、［テーブルのプロパティ］をクリックします。［列］タブをクリックしてから下にスクロールして、［ピーク内のポイント数］フィールドを探します。チェックボックスをオフにし、[OK]をクリックします。

対象となる最も狭いピークの［ピーク内のポイント数］値が 25未満の場合は、装置メソッド

でより高いサンプリングレートを指定する必要があります。値が 50 より大きい場合は、装

置メソッドでより低いサンプリングレートを指定する必要があります。

サンプリングレートとノイズの関係

5 Hz

10 Hz

20 Hz

40 Hz

1-8 2998 PDA 検出器の光学系の原理

吸光度データポイントの計算

吸光度データポイントは、検出器によって算出された後、データベース（MassLynx または

Empower）に転送されます。

吸光度の計算は以下のとおりです。

ここで

S = サンプルエネルギー

D = 暗電流エネルギー

R = レファレンスエネルギー

t = 注入開始からの経過時間

λ = 波長

その後、この吸光度に指定したフィルタが施されます。

暗電流

フォトダイオードは、露出していないときでも放電します。この放電を暗電流と呼びます。暗電流の更新時は、シャッターが閉じ、各ダイオードの暗電流が読み込まれます。更新後、検出器はシャッターを開き、暗電流値を差し引きます（上の方程式を参照）。

レファレンススペクトル

レファレンススペクトルは、最初の状態でのランプ強度と移動相吸光度の計測です。検出器は、注入が開始されるたびにレファレンススペクトルを記録します。レファレンススペクトル値の計算には、サンプル測定と同じフィルタ時定数が使用されます。

データの平均化

検出器からデータベース（Empower または MassLynx）に送るデータは、多くのデータポイ

ントの平均値にすることができます。吸光度の計算後に、検出器は要求されたスペクトル解像度に基づいて吸光度値を平均します。

Absorbancet λ, Log10Rλ Dλ–

St λ, Dλ–-----------------------=吸光度

吸光度データポイントの計算 1-9

平均スペクトル解像度

検出器は、次の2種類のデータチャンネルを同時に収集できます。スペクトル(3D)とクロマ

トグラム (2D)。ライブラリとの照合とピーク純度分析で最善の結果を得るには、3D解像度

を1.2 nmに設定します。

クロマトグラム（2D データ）の場合は、信号振幅、ノイズ、ダイナミックレンジの直線性が最

適化されるような解像度を選択します。分析対象物のモニター波長がピークの最大吸光度波長に一致している場合、解像度を高くすると、ピーク高さ、ノイズ、ダイナミックレンジの直線性が低下します。

ヒント：多くの分析対象物では、3.6 nmの解像度が効果的です。

1-10 2998 PDA 検出器の光学系の原理

アントラセンの解像度の比較

クロマトグラフサンプリングレートの平均化

サンプリングレートは、1 秒間に取り込まれるデータポイント数です。サンプリング中に

フォトダイオードの読み込み回数は、露出時間によって決まります。たとえば、露出時間が25 ミリ秒で、サンプリングレートが 20 Hz の場合、サンプルあたりの露出は次のようにな

ります。

3.20 3.30 3.40 3.50 3.60 3.70 3.80 3.90 4.00 4.10 4.20

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0.45

0.50

0.55

吸光度

252 nm（1.2 nm、高さ 0.53）252 nm（6.0 nm、高さ 0.45）252 nm（12.0 nm、高さ 0.35）

20 サンプル / 秒： = 2 露出 / サンプル（1000 ミリ秒 / 秒）

（20 サンプル / 秒）（25 ミリ秒 / 露出）

吸光度データポイントの計算 1-11

読み取り値は平均化され、単一のデータポイントとしてレポートされます。露出数 / サンプ

ルが増えるとノイズが減ります。

ヒント：保存されるデータ量は、波長範囲、スペクトル解像度、実行時間およびサンプリングレートに基づきます。これらのパラメータ値は、PDAの［装置メソッド編集］の［全般］タブで

指定します。詳細については、EmpowerまたはMassLynxのオンラインヘルプを参照して

ください。

データのフィルタリング

PDAの［装置メソッド編集］の［全般］タブで（詳細は、EmpowerまたはMassLynxのオンラ

インヘルプを参照）、取り込んだデータに対して（［デジタルフィルタ］パラメータで）オプションのノイズフィルタを適用できます。次の表は、許容されるサンプリングレートに適用されるデジタルフィルタ設定の一覧です。

ヒント : 最適な分析結果を得るには、ピークの広がりを回避する［高速］を選択します。

レファレンス波長の補正

レファレンス波長を補正することにより、既知の分析対象物がないスペクトル領域で、幅広い吸光度データを収集できます。レファレンス波長を補正することにより、積分値の精度に影響を及ぼすドリフトや揺らぎを低減できます。

検出器は、選択した波長範囲の吸光度値を平均化することによって、補正値を算出します。その後、次のように、吸光度値から補正値が差し引かれます。

Abs-Comp(t) = Abs(t) - CRef(t)

サンプリングレートのデジタルフィルタ設定

サンプリングレート(Hz)

低速（秒）

通常（秒）

高速（秒）

範囲（秒）増分

（秒）

1 4.000 2.000 1.000 フィルタなし、0.100 ~ 5.000 0.100

2 2.000 1.000 0.500 フィルタなし、0.100 ~ 5.000 0.100

5 0.800 0.400 0.200 フィルタなし、0.100 ~ 2,000 0.100

10 0.400 0.200 0.100 フィルタなし、0.100 ~ 1,000 0.100

20 0.200 0.100 0.050 フィルタなし、0.050 ~ 0.500 0.050

40 0.100 0.050 0.025 フィルタなし、0.025 ~ 0.250 0.025

80 0.050 0.025 0.0125 フィルタなし、0.100 ~ 5.000 0.0125

1-12 2998 PDA 検出器の光学系の原理

ここで

Abs-Comp = 吸光度値 - 補正値

Abs = 吸光度値

CRef = 補正レファレンス

t = 注入開始からの経過時間

補正レファレンスは、開始波長と終了波長によって定義されます。CRef波長範囲は、

≥40 nm、≤100 nmで、190 ~ 800 nmの範囲内になければなりません。

ヒント：補正レファレンス範囲は、分析対象物が現れない範囲で選択します。レスポンスは吸光度値から差し引かれるため、レスポンス補正レファレンス範囲内にある場合は、定量データにエラーが生じます。

吸光度データポイントの計算 1-13

1-14 2998 PDA 検出器の光学系の原理

2 検出器の設定

本章では、検出器のセットアップに必要な情報を説明します。

内容：

トピック ページ

はじめに 2-2

開梱と検品 2-2

設置場所の選定 2-3

電源接続 2-5

信号接続 2-6

検出器の配管 2-16

検出器の起動とシャットダウン 2-18

キュベットの使用方法 2-21

2-1

はじめに

必要条件：2998 PDA 検出器を設置するには、一般的な実験装置およびコンピュータ制御

装置の設定方法と操作方法、溶媒の取り扱い方法を理解している必要があります。

検出器を設置する前に、以下のことを確認してください。

• 必要な部品が揃っていること。

• 出荷時の箱や開梱された製品に損傷がないこと。

開梱と検品

検出器の段ボールには以下のものがあります。

• Certificate of Structural Integrity

• 2998 PDA検出器

• Waters 2998 PDA検出器オペレーターズガイド（本書）

• スタートアップキット

• リリースノート

検出器およびフローセルを開梱する方法

1. 梱包リストを見ながら、必要なものが全部揃っているか、段ボールの中のものを確認します。

2. 将来の移動や輸送に備えて、段ボールは捨てずにとっておいてください。

同梱品の確認の際に損傷または不具合等を発見した場合は、運送会社およびお近くのWaters支社まで直ちにご連絡ください。

破損や不良品がある場合、日本のお客様は日本ウォーターズ（株）(0120-800-299) までご連

絡ください。日本以外のお客様は、Waters 支社または Waters Corporation 本社 (Milford,Massachusetts, USA)にお問い合わせいただくか、あるいはhttp://www.waters.comにア

クセスして[Offices]をクリックしてください。

輸送中の破損およびクレームお申し出についての詳細は、『Waters 使用許諾・保証・サポー

トサービス』を参照してください。

背面パネルのネームプレートとフロントパネル内側にあるシリアル番号が、装置のバリデーション証明書に記載のものと一致していることを確認してください。

2-2 検出器の設定

設置場所の選定

検出器の安定した動作を確保するには、次のように設置します。

• 冷房、暖房の通風口の下に置かない

• 接地されているAC、100 ~ 240 VACの電源に接続する

• 換気のために、裏側に少なくとも15 cm（6インチ）の間隔をあける

2-4 ページの図「検出器の寸法」に示されている寸法より、検出器は積み重ねが可能なユ

ニットであり、余分なスペースを必要としないことが分かります。

バンドの広がりによってクロマトグラムの分離が悪くなるのを防ぐために、カラム出口のチューブは最短にして検出器に接続してください。

必要条件：検出器は水平面に置き、ドリップマネージメントシステム（ドレインチューブ）が正常に機能するようにします。そのシステムには、フローセルからの液漏れを受ける廃液リザーバを接続できます。

検出器の寸法次の図は、検出器の寸法を示しています。

注意：検出器の損傷を避けるために、検出器の上には 18.1 kg 以上のものを置かないようにしてください。

設置場所の選定 2-3

検出器の寸法

TP02753

34.3 cm（13.5 インチ）

19.1 cm（7.64 インチ）

61 cm（24 インチ）

2-4 検出器の設定

電源接続

2998 PDA 検出器には、接地済みの電源が必要です。コンセントの接地接続は共通で、シス

テムの近くに接続する必要があります。

電源に接続する方法

推奨事項：最適な長期間安定な入力電圧を維持するため、ラインコンディショナまたは無停電電源装置(UPS)を使用します。

1. オフ/オン ( ) スイッチをOff ( ) の位置にします。

2. メス型の電源コードの端を検出器の背面パネルにある差し込み口に接続します。

3. オス型の電源コードの端を適切な壁のコンセントに接続します。

重要：この時点では検出器の電源を投入しないでください。

警告：感電を防止するため、以下の注意事項を厳守してください。

• 米国ではSVT型の電源コードを使用し、ヨーロッパではHAR型の電源コード

（あるいはそれよりも優良なもの）を使用してください。その他の国では、各国のWatersの営業所に問い合わせてください。

• 検出器の電源を切り、プラグを抜いてから、装置の保守を行ってください。

• 検出器を他の装置と共通のアースに接続します。

電源接続 2-5

信号接続

関連項目：Waters Ethernet装置入門ガイド。

次の図は、検出器を外部デバイスと接続して操作する際に使用するコネクタの背面パネルの位置を示したものです。

2998 PDA 検出器の背面パネル

必要な信号ケーブルの接続は、使用するHPLCシステムの信号接続によって異なります。

Ethernet ケーブルの接続

Waters製品は、専用のローカルエリアネットワーク (LAN)を介して取り込みコンピュータ

と通信します。取り込みコンピュータでは、装置用のネットワークカードが装置との通信を行います。

取り込みコンピュータがWaters製品をコントロールするためには、Waters製品ソフトウェ

アドライバをコンピュータにインストールする必要があります。装置コントロールソフトウェアに添付のソフトウェアインストール方法を参照してください。

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外部デバイス入力および出力

2-6 検出器の設定

単一の Waters 装置の接続

1 台の Waters 装置を接続する場合は、接続ハードウェアとして、スタートアップキットに

同梱の標準Ethernetケーブルを1本のみ使用します。

単一の Waters 装置の接続

複数の Waters 装置の接続

複数の Waters 装置を使用する場合は、製品と取り込みコンピュータ間で複数の信号を送

受信するため、Ethernetスイッチが必要です。

接続には、各装置あたり 1 本の標準 Ethernet ケーブルと、ネットワークスイッチと取り込

みコンピュータ間を接続する標準Ethernetケーブル1本が必要です。

取り込みコンピュータがWaters装置をコントロールするには、Waters装置ソフトウェア

ドライバをコンピュータにインストールする必要があります。各装置のドライバのディスクに添付のソフトウェアインストール方法を参照してください。

ネットワークインストールのガイドライン

複数のWaters装置を構成するための専用LANネットワークは、以下のガイドラインに基づ

いて設計する必要があります。

• Ethernetケーブル

• 最長100メートル（328フィート）であること

必要条件：複数のEthernet装置を使用する場合、ネットワークスイッチを使用する必要があ

ります。ネットワークハブはサポートされません。

Waters 装置

装置 LANネットワークカード

Ethernet ケーブル

取り込みコンピュータ

信号接続 2-7

Waters Ethernet 製品の接続

注入開始信号接続

検出器で Ethernet データシステムを使用する場合、データシステムまたはコントローラ

は、オートサンプラーまたはマニュアルインジェクタから注入開始信号を受け取り、データ収集およびタイムベースのプログラムを開始する必要があります。

次の表は、さまざまなシステム構成についての注入開始接続についてまとめたものです。

ヒント：インジェクタがEthernetモードで動作しているe2695セパレーションモジュール

または 2707オートサンプラーである場合、注入開始ケーブルを接続してはいけません。た

だし、インジェクタが IEEE モードで動作している e2695 セパレーションモジュールであ

る場合、注入開始ケーブルを接続する必要があります。

検出器注入開始接続

注入開始出力ソース注入開始入力接続（2998 PDA 検出器、コネクタ A）

Waters Allianceセパレーションモジュール 注入開始 +/–

Waters 717オートサンプラー 注入開始 +/–

Watersマニュアルインジェクタ、または他社マ

ニュアルインジェクタ/オートサンプラー

注入開始 +/–

�������

クロマトグラフィマネージャ

装置 LANネットワークカード

PDA 検出器 質量分析計

注入開始信号ケーブル

IEEE カード

クロマトグラフィシステム

IEEE-488ケーブル

ネットワークスイッチ

Ethernet ケーブル

Ethernet ケーブル

2-8 検出器の設定

マニュアルインジェクタへの接続

システムでマニュアルインジェクタを使用する場合は、次の表に示すように、信号ケーブルを検出器の背面パネルコネクタからインジェクタに接続します。

マニュアルインジェクタからの注入トリガ信号については、2-15ページを参照してくださ

い。

他の装置への接続

このセクションでは、検出器の背面パネルと以下の装置との信号接続について説明します。

• Waters Allianceセパレーションモジュール

• Waters 1500シリーズポンプ

• Waters SAT/IN™モジュール

• Watersマニュアルインジェクタおよび他社マニュアルインジェクタ

• Waters自動精製システム

• 他社のインジェクタまたはA/Dインターフェースデバイス

必要条件：この装置のパフォーマンスに影響する可能性がある外部の電気的障害の免責に関する法的な要求事項を満たすには、I/Oコネクタに接続するときに、3 m (9.8 フィート)を超えるケーブルを使用しないでください。また、ケーブルのシールドは1つの装置でだけ接

地端子に接続するようにしてください。

検出器を他の装置に接続するには、背面パネルの2つのアナログ出力/イベント入力(I/O)コネクタと対応するピン配列を使用します。

マニュアルインジェクタへの接続

2998 PDA 検出器（コネクタ A） マニュアルインジェクタ

注入開始 +（赤） U字型注入開始端子

注入開始 –（黒）

警告：感電を防止するため、電気系統の接続を行う前に、システム装置の電源をオフにしてください。

信号接続 2-9

2998 背面パネルのアナログ出力 / イベント入力コネクタ

次の表は、検出器のI/O接続についてまとめたものです。

検出器のアナログ出力 / イベント入力の接続

信号接続 説明

Inject Start 実行時間のクロックの開始をトリガし、タイムイベントを作動させます。

Lamp off 入力が有効な場合、ランプは消灯しています。新しいメソッドを検出器に送信した場合、ランプボタンを使用した場合、または検出器をリブートした場合のみ、ランプは点灯します。

Chart mark アナログ出力チャンネルにチャートマークを入れることができます（フルスケールの10%）。アナログ出力のSignal Out 1とSignal Out 2の片方もしくは両方に設定可能です。

Auto zero サンプル信号に加えてベースライン信号をゼロにするオフセット値を計算します。

Analog 1およびAnalog 2

プログラム可能なアナログ出力。最小出力電圧範囲：–0.1 ~ 2.1 VDC10、20、40、または80 Hzのサンプリングレートでは、この出力

は指定のサンプリングレートで実行されます。1、2、または5 Hzのサンプリングレートでは、この出力は10 Hzで実行されます。

Switch 1 タイムイベントやスレッシュホールドイベントをコントロールします。ユーザープログラムが可能な補助出力です。

12345678910

+−

+−+−

+−

Analog 1Analog 1GroundAnalog 2Analog 2Switch 1Switch 1GroundSwitch 2Switch 2

12345678910

+−

+−+−

+−

Inject StartInject StartGroundLamp OffLamp OffChart MarkChart MarkGroundAuto ZeroAuto Zero

コネクタ B（出力） コネクタ A（入力）

2-10 検出器の設定

注入開始の作成

Alliance セパレーションモジュールから注入を開始するときに、検出器に注入開始機能を

作成するには、以下の表および図のように接続します。

ヒント：ファームウェアのデフォルトは注入時のオートゼロです。

Alliance セパレーションモジュールと検出器の注入開始接続

Switch 2 タイムイベントやスレッシュホールドイベントをコントロールします。ユーザープログラムが可能な補助出力です。

Alliance セパレーションモジュールと検出器の接続

Alliance セパレーションモジュール（コネクタ B）

2998 PDA 検出器（コネクタ A）

ピン1 Inject Start（赤） ピン1 inject start +（赤）

ピン2 Inject Start（黒） ピン2 inject start −（黒）

検出器のアナログ出力 / イベント入力の接続（続き）

信号接続 説明

赤

黒

12345678910

+−

+−+−

+−

Inject StartInject StartGroundLamp OffLamp OffChart MarkChart MarkGroundAuto ZeroAuto Zero

123456789101112

+−+−+−

+−

Inject StartInject StartGroundStop FlowStop FlowHold Inject 1Hold Inject 1Hold Inject 2Hold Inject 2GroundChart OutChart Out

Waters Alliance コネクタ B

2998 PDA 検出器コネクタ A

信号接続 2-11

送液停止の作成

検出器には、プログラム可能なスイッチ出力が備わっています。スレッシュホールドまたはタイムイベントでコントロールします。

送液停止機能を使用するには、以下の表および図のように接続を行います。

必要条件：エラー発生時やハードウェア障害の発生時に送液を自動停止するには、送液停止信号をクロマトグラフィポンプに接続する必要があります。

Alliance セパレーションモジュールと検出器の送液停止接続

警告：火災・爆発の危険性があります。送液停止の接続に失敗すると検出器が液漏れを起こす可能性があります。

Alliance セパレーションモジュールと検出器の接続

Alliance セパレーションモジュール（コネクタ B）

2998 PDA 検出器（コネクタ B）

ピン4 stop flow +（赤） ピン6 switch 1 +（赤）

ピン5 stop flow –（黒） ピン7 switch 1 –（黒）

赤

黒

12345678910

+−

+−+−

+−

Analog 1Analog 1GroundAnalog 2Analog 2Switch 1Switch 1GroundSwitch 2Switch 2

123456789101112

+−+−+−

+−

Inject StartInject StartGroundStop FlowStop FlowHold Inject 1Hold Inject 1Hold Inject 2Hold Inject 2GroundChart OutChart Out

Waters Alliance コネクタ B

2998 PDA 検出器コネクタ B

2-12 検出器の設定

チャートレコーダーまたは外部アナログデータ収集デバイスへの接続

検出器からチャートレコーダーにアナログ出力信号を送信するには、以下の表と図のように接続を行います。

チャートレコーダーへのアナログ出力接続

チャートレコーダーへのアナログ出力接続

チャートレコーダーコネクタ 2998 PDA 検出器（コネクタ B）

Pen Y1 + ピン1信号出力 +（赤）

Pen Y1 – ピン2信号出力 –（黒）

ヒント：この接続では、ケーブルシールドを使用しないでください。

Y2Y1+ – –+

チャートレコーダーコネクタ

2998 PDA 検出器コネクタ B

赤

黒

12345678910

+−

+−+−

+−

Analog 1Analog 1GroundAnalog 2Analog 2Switch 1Switch 1GroundSwitch 2Switch 2

信号接続 2-13

eSAT/IN モジュールを使用した Empower または MassLynx データシステムへの接続

インテグレータアナログ出力信号(–0.1 ~ +2.1 V)を、検出器からEmpowerまたは

MassLynxシステム（2チャンネルSAT/INモジュール経由）に送信するには、以下の表およ

び図のように接続します。

eSAT/IN モジュールへのアナログ出力接続

eSAT/IN モジュールと検出器の接続

SAT/IN モジュールコネクタ 2998 PDA 検出器（コネクタ B）

CHANNEL 1 ピン1信号出力 +（赤）

ピン2信号出力 –（黒）

赤

黒

シールド

12345678910

+−

+−+−

+−

Analog 1Analog 1GroundAnalog 2Analog 2Switch 1Switch 1GroundSwitch 2Switch 2

eSAT/IN モジュール

2998 PDA 検出器コネクタ B

インジェクタ

2-14 検出器の設定

注入トリガ信号の接続

検出器は、以下の注入トリガ信号をマニュアルインジェクタから受信します。

• 接点リレーによる注入ごとの注入開始信号

• 注入時に検出器のオートゼロを行うオートゼロ信号

インジェクタからのシグナルを受け取るたびに、検出器は対応するオートゼロまたは注入を開始します。

インジェクタから検出器にオートゼロまたはチャートマーク信号を送信するには、以下の表および図に示すように接続します。

ヒント：ファームウェアのデフォルトは注入時のオートゼロです。

インジェクタへの注入開始接続

インジェクタへの注入開始接続（パルス幅は 0 ~ 10 秒）

2998 PDA 検出器（コネクタ A） インジェクタコネクタ

ピン1 inject start +（赤） 一対のU字端子（または類似）のコネクタ

ピン2 inject start –（黒）

12345678910

+−

+−+−

+−

Inject StartInject StartGroundLamp OffLamp OffChart MarkChart MarkGroundAuto ZeroAuto Zero

インジェクタ2998 PDA 検出器コネクタ A

信号接続 2-15

検出器の配管

関連項目：C-6ページの「チューブの曲げ半径の推奨値」。

準備するもの

• 5/16インチスパナ

• 内径0.009インチ(0.23 mm)のステンレス鋼製チューブ（スタートアップキットに同

梱）

• ステンレス鋼製チューブカッターまたはやすり

• プラスチック製または布で覆ったペンチ

• 締付け用ねじアセンブリ(×3)

検出器への配管を行う方法

1. カラムアウトレットを検出器のインレットに接続するために必要なチューブの長さを測定します。

ヒント：試料のバンドの広がりを防ぐため（ブロードなピークを防ぐため）、このチューブの長さはできるだけ短くします。

2. 検出器のアウトレットを廃液ボトルに接続するために必要なチューブの長さを測定します。

ヒント：フローセル内で気泡が発生しないよう、このチューブの長さは少なくとも30 ~ 60 cm（1 ~ 2フィート）にします。

警告：

• 薬品による事故を防止するため、システムの操作時は、常に優良試験所基準(GLP)を遵守してください。溶媒の使用に関しては化学物質安全性データシー

ト（Material Safety Data Sheet：MSDS）を参照してください。

• 不適切な溶媒を使用すると、装置に重大な障害が発生し、オペレータが負傷する場合があります。

注意：汚染を防ぐため、検出器の配管を行う場合には、パウダーフリーで非ラテックスの手袋を着用してください。

注意：フローセルの損傷を防ぐため、1/32 インチのステンレス鋼製フローセルチューブは絶対に切断しないでください。

2-16 検出器の設定

3. 2本のチューブを以下のように切断します。

a. Waters 1/16インチステンレス鋼製カッターまたは切り刃のついたやすりを使

用して、目的の切断点でチューブの周囲に切り目を入れます。

b. 切り目を入れた両端を、布またはプラスチックで覆われた（表面を傷つけないようにするため）ペンチでつかみ、切断されるまでチューブを前後にゆっくりと動かします。

c. デッドボリュームとバンドの広がりを最小化するため、チューブの先端にやすりをかけて滑らかにします。

4. カラムアウトレットラインの両側および検出器アウトレットラインの一方の側で、再利用可能な手締めフィッティングを取り付けます。

再利用可能な手締めフィッティング

5. カラムアウトレットチューブの一端をカラムアウトレットの取り付け具にはめ込み、再利用可能な手締めフィッティングをしっかり締めた後、さらに 3/4回転させま

す。

6. チューブの別の一端を検出器インレットの取り付け具にはめ込み、ステップ 5 と同

様に、再利用可能な手締めフィッティングを締めます。

7. 検出器のアウトレットチューブの一端を、再利用可能な手締めフィッティングで検出器アウトレットの取り付け具に固定し、しっかり締めた後、さらに 3/4回転させま

す。チューブの端を廃液容器に取り付けます。

8. スタートアップキット付属の3/8インチOD Tygon®チューブを、ドリップトレイに

付いている蛇腹のドレインフィッティングの上にはめ込み、適切な廃液容器につなぎます。

注意：フローセルの損傷を防ぐため、最大許容圧力の6895 kPa（69 bar、1000 psi）(70 kg/cm2)にならないようにしてください。

TP02872

デッドボリュームを防ぐため、先端が真っ直ぐで滑らかであること

配管

フェラル

再利用可能な締付け用フィッティング

この長さはユニオンまたはカラムフィッティングによって異なる

検出器の配管 2-17

ガス供給接続検出器を窒素源に接続すると、短波長での操作が向上します。

必要条件：乾燥し油分を含まない、フィルタ済みの窒素のみを、28 ~ 41 kPa（0.28 ~ 0.41 bar、4 ~ 6 psi）の一定流量で供給してください。

ガス供給に接続する方法

1. プラスチック製チューブの一端を窒素源に接続します。

ヒント：窒素源とプラスチック製チューブの間にアダプタが必要な場合があります。

2. 窒素源フィッティングの別の一端を検出器の背面パネルに接続します。

検出器の起動とシャットダウン

起動手順には 1 分もかかりません。起動後、分析を実行するまでに、少なくとも 1 時間

ウォームアップする必要があります。信頼性の高い検出器性能が得られるようにこのセクションで紹介する手順に従ってください。

検出器の起動

検出器を起動する方法

1. 装置メソッドで、送液システムまたはポンプから、10 mL/ 分の HPLC グレードの水

が送液されるよう設定します。詳細については、EmpowerまたはMassLynxのオン

ラインヘルプを参照してください。

警告：可燃溶媒で発火の可能性があるガスは使用しないでください。常に不活性のガスを使用するようにしてください。

警告：

• この装置を使用する場合および溶媒とテスト溶液を用いて作業する場合には、優良試験所基準(GLP)に必ず従ってください。使用する溶媒とテスト溶液の

化学的および物理的性質を理解しておく必要があります。使用する溶媒とテスト溶液の物質安全性データシート (Material Safety Data Sheet：MSDS) を参

照してください。

• 不適切な溶媒を使用すると、装置に重大な障害が発生し、オペレータが負傷する場合があります。

2-18 検出器の設定

ガイドライン：

• 十分に脱気された HPLC グレードの溶媒のみを使用してください。移動相の

ガスがフローセル内で気泡を作り、検出器のレファレンスエネルギー診断テストに失敗する可能性があります。

• プライムで使用する溶媒の組成、グレード、システム内の溶媒との混和性があるか等の必要事項を確認してください。すべての溶媒ボトルにはフィルタを施し、プライムに必要な量の溶媒を用意してください。

2. 検出器の前面パネルにあるオフ / オン ( ) スイッチを押して On ( ) の位置にし

ます。

3. 検出器の前面パネルにあるランプおよび電源LEDを確認します。

電源LEDとランプLEDは次のように変わります。

• 電源 LED は緑色です。

• 初期化中、電源 LED は緑色に点滅します。

• 検出器の電源が正常に投入されると、電源およびランプ LED が緑色に点灯し

ます。

4. データの取り込み前に検出器を安定させるために 1 時間待機します。検出器が安定

しない場合は、第 4 章を参照してください。

検出器のインジケータライト

ランプインジケータ

オフ/オンスイッチ

パワーインジケータ

検出器の起動とシャットダウン 2-19

検出器 LED のモニター

検出器前面のLEDは、装置の状態を示します。

電源 LED電源 LED は、検出器の前面パネルに配置されており、装置の電源がオンかオフかを示しま

す。装置が正常に動作している場合は緑色に点灯します。

ランプ LEDランプLEDは電源LEDの左隣にあり、ランプの状態を示します。

次の表は、それぞれのLEDのモードと対応する検出器のランプの状態を示しています。

警告：感電を防ぐため、ランプ LED が赤色に点滅している場合は、ランプコネクタに触れないでください。ランプコネクタに触れる前に、検出器の電源を切り、電源コードをコンセントから抜いてください。

ランプ LED 表示

LED のモードと色 説明

消灯 検出器ランプが消灯していることを示しています。

緑の点灯 検出器ランプが点灯していることを示しています。

緑の点滅 検出器が初期化中またはキャリブレーション中であることを示しています。

赤の点滅 エラーによって検出器が停止したことを示しています。コンソールでエラー情報を確認してください。

赤の点灯 検出器の不具合によって、後続動作が妨げられていることを示しています。検出器の電源を一旦オフにして、再度オンにします。LEDがまだ赤色に点灯し続ける場合

は、Watersのサービスにお問い合わせください。

2-20 検出器の設定

検出器のシャットダウン

検出器をシャットダウンする方法

1. 移動相にバッファが含まれている場合は、10 mL/ 分で HPLC グレードの水を送液

し、洗浄します。そうでない場合は、10 mL の脱気したメタノールを送液し、洗浄しま

す。

2. 検出器の前面パネルにあるオフ /オン ( )スイッチを押してOff ( )の位置にし

ます。

キュベットの使用方法

検出器のキュベットオプションを使用すると、以下の操作を簡単に実行できます。

• サンプルの取り扱い

• 装置の確認と較正

検出器では、標準 10 mm の光路長の分光光度計のセル（石英キュベット）を使用します。つ

や消し面を上下に向けてキュベットホルダーにキュベットを差し込み、検出器のフローセルアセンブリに設置します。

キュベットを取り付けた状態の 2998 PDA 検出器のキュベットホルダー

制限：測定はキュベットとフローセルの組み合わせによって実行されるため、キュベット測定は、同じフローセル条件で実行する必要があります。スペクトルを保存して、差スペクトル用に新しいスペクトルを取り込む場合、フローセルの条件に差がある際には注意する必要があります。

キュベットのつや消し面を上下に向ける

キュベットの使用方法 2-21

理想的には、同じフローセル条件で、HPLC 装置がアイドル状態または静止状態のとき、お

よび動作中のときにキュベットを使用してゼロ測定とサンプル測定の両方を行うことを推奨します。

開始する前に

推奨事項：正確な結果を得るため、10 mmの光路長の石英キュベットおよびゼロ測定とサンプ

ル測定には、同じ石英キュベット（同じ製造ロット）を使用してください。

キュベットを使用して測定を開始する前に

1. キュベット測定に使用する移動相と同じ移動相を10 mL/ 分の流量でフラッシュ洗浄

し、フローセルを満たします。

2. 透明できれいなキュベットにするには、キュベットの透明な部分を研磨剤の含まれていない布で拭いてください。

キュベット測定手順

キュベット測定を開始するには

1. 検出器の左前面パネルカバーを取り外します。

2. キュベットホルダーを手前に引き出し、取り外します。

注意：キュベットはつや消し面だけを持ち、丁寧に取り扱ってください。透明な石英に指紋が付くと、光路の妨げになり、キュベット測定の整合性が損なわれます。

キュベットホルダー

2-22 検出器の設定

3. スプリングガイドを手前に向けた状態で、キャップを上に向け（ホルダーの方向）、キュベットのつや消し面を上下に向けて、ガイドに沿ってキュベット（溶離液入り）をゆっくり差し込みます。2-21ページの図を参照してください。

推奨事項：

• ホルダーが差し込まれたときに、キュベットホルダーのアパーチャを通して液体が見えるように（つまり、アパーチャが液体に完全に覆われるように）、キュベットには充分な溶液 (3 mL) を入れてください。

• キュベットホルダーは傾くので、親指や人差し指を使用して、キュベットをスロット内にしっかりと固定して、それ以上差し込めないようにしてください。

• キュベットホルダーの交換時に外れないようにしてください。

4. フローセルアセンブリにキュベットホルダーをゆっくり戻し、所定の位置にしっかり取り付けます。

5. 検出器の左前面パネルカバーを再度取り付けます。

• 正しいクロマトグラフ結果を得るため、キュベット測定の実行後は、検出器からキュベットを取り外し、空のホルダーを取り付けてください。

• 最適なシステム性能を維持するため、検出器の通常運転を再開する前に、左前面パネルカバーを再度取り付けてください。

6. 標準的な移動相を入れたレファレンスキュベットを差し込み、ゼロ測定を実行します。

7. レファレンスキュベットを移動相に溶けた分析対象物を含むキュベットと交換し、サンプル測定を実行します。

8. 保存、読み込み、減算、リプレイなどの機能を使用し、入手したデータを分析します。

キュベットの使用方法 2-23

2-24 検出器の設定

3 検出器のメンテナンス

この章では、検出器で実行する定期的な保守手順について説明します。

内容：

トピック ページ

Waters テクニカルサービスへの連絡 3-2

メンテナンス時の注意事項 3-2

日常のメンテナンス 3-3

フローセルのメンテナンス 3-3

ランプの交換 3-7

ヒューズの交換 3-10

3-1

Waters テクニカルサービスへの連絡

日本のお客様は、製品の不備やその他の問題については日本ウォーターズ株式会社(0120-800-299)までご連絡ください。それ以外のお客様は、Waters Corporation本社（米国

マサチューセッツ州、Milford）または最寄りのウォーターズ支社に連絡してください。

Waters CorporationのWebサイトには、世界のウォーターズ事務所の電話番号と電子メー

ルアドレスが記載されています。「www.waters.com」に進み、[About Waters] > [WorldwideOffices]をクリックします。

Watersテクニカルサービスに連絡する際には、次の情報をお手元にご用意ください。

• 症状の特徴

• 装置のシリアル番号

• 溶媒

• メソッドパラメータ（感度および波長）

• カラムの種類とシリアル番号

• サンプルの種類

• EmpowerまたはMassLynxソフトウェアのバージョンおよびシリアル番号

輸送中の破損およびクレームお申し出についての詳細は、『Waters 使用許諾・保証・サポー

トサービス』を参照してください。

メンテナンス時の注意事項

安全と警告への対応検出器をメンテナンスする場合は、ここで解説する警告および注意事項に目を通してから実施するようにしてください。

警告：事故防止の観点から、溶媒の処理、チューブの交換、およびシステムの操作を行う場合は、優良試験所基準 (GLP)に必ず従ってください。使用する溶媒の物理的および化学的な性質を確認してください。使用する溶媒については、製品安全データシート(MSDS)を参照してください。

警告：感電を防止するため、以下の注意事項を厳守してください。

• 検出器カバーを開けないでください。検出器内部にはユーザーがメンテナンス可能な部品はありません。

• 検出器の電源を切り、プラグを抜いてから、装置の保守を行ってください。

注意： 電子部品の破損を防止するために、装置の電源がオンになっている間は、アセンブリを取り外さないでください。検出器への電力供給を遮断するには、電源スイッチを［オフ］にし、AC電源からプラグを抜きます。アセンブリを取り外す場合は、電源切断後10秒以上待機してください。

3-2 検出器のメンテナンス

スペアパーツ

Waters では、本書で指示されたパーツのみを交換することをお勧めします。スペアパーツ

の詳細については、WatersのWebサイトの[Services/Support]ページの[Waters QualityParts Locator] を参照するか、2998 PDA Detector spare parts list（パーツ番号

71500121906）を参照してください。

日常のメンテナンス

2998 PDA検出器は、最小限の定期メンテナンスが必要です。

最適なパフォーマンスを維持するため、下記の手順を実行してください。

1. 溶媒ボトルフィルターを定期的に交換します。

2. カラム寿命の延長、圧力変動の抑制、ノイズの低減のため、溶媒を濾過し、脱気します。

3. 検出器をシャットダウンするたびに、バッファー系移動相を HPLC グレードの水で

除去し、さらに5 ~ 10%のメタノール水溶液によってフラッシュ洗浄します。このプ

ロセスで以下のことが回避されます。

• 溶媒ラインおよびフローセルの詰まり

• 部品の破損

• 細菌の繁殖

フローセルのメンテナンス

フローセルは、次の場合にメンテナンスが必要です。

• レファレンススペクトルが変化した場合。

• セル内の液体がドレインチューブからリークしている場合。

• ランプが正常に動作しているのに検出器が初期化できない場合。

• 検出器によって高い背圧が発生する場合。

ヒント：フローセルの汚れ以外にも、ランプ強度を減少させる原因があります。詳細については、第 4 章を参照してください。

フローセルのメンテナンスでは以下を実施します。

• フローセルのフラッシュ洗浄

• フローセルの取り外し

• フローセルの分解およびクリーニング

• フローセルアセンブリの取り付け

日常のメンテナンス 3-3

フローセルのフラッシュ洗浄

準備するもの

• 水（HPLCグレードのもの）

• HPLCグレードのメタノール

フローセルのクリーニングが必要な場合は、最初に溶媒でフラッシュ洗浄を試します。

フローセルのフラッシュ洗浄方法

1. 使用していたサンプルおよび移動相と相溶性のある溶媒を選択します。バッファを使用していた場合は、HPLCグレードの精製水を用いて10 mL/ 分の流量でフラッシュ洗

浄した後、表面張力の低いメタノールなどの溶媒を用いて 10 mL/ 分の流量でフ

ラッシュ洗浄します。

ヒント：使用溶媒が直前に使用した移動相と混和することを確認してください。

2. エネルギー読み込み診断を実施し、ランプエネルギーをテストします（4-3 ページを

参照）。

ランプ診断に失敗し、ランプ購入時から延べ 2000 時間運転または 1 年経過した場合

（どちらか成立）、Waters テクニカルサービスに連絡してください（3-2 ページを参

照）。

フローセルの交換方法

必要な器材

• 1/4インチのマイナスドライバー

• フローセル

フローセルを交換するには

1. 検出器の電源を切ります。

2. 送液を止めます。

3. 検出器の前面カバーを持ち上げて、手前に引いて前面カバーを取り外します。

4. 検出器のインレットチューブをカラムアウトレット接続から外します。

3-4 検出器のメンテナンス

2998 PDA 検出器の分析フローセル

ヒント：オプションの自動精製用フローセルには、3つのフィッティング−インレット

分析、インレット分取、およびアウトレットが備わっています。

5. 次の方法で、フローセルを取り外します。

• 1/4 インチのマイナスドライバーを使用して、フローセルアセンブリの前面プ

レートにある 3 本のつまみ付きネジを緩めます。

• ハンドルを握ってゆっくり手前に引き、取り外します。

6. 新しいフローセルを開梱して、不備がないか確認します。

7. フローセルアセンブリを開口部に合わせて、光学ベンチに挿入します。光学ベンチの調整ピンを使用してフローセルを正しい向きに挿入します。

8. 調整ピンが正しい位置に来るようにゆっくりとアセンブリを挿入します。

TP02754

フローセル

ランプ フローセルハンドル

つまみ付きねじ

フローセルのメンテナンス 3-5

分析フローセルアセンブリの取り付け

9. フローセルを挿入し続け、3本のつまみ付きネジを隔壁の穴にはめ込みます。

10. つまみ付きネジを手で締めてから、1/4 インチのマイナスドライバーでしっかりと締

めます。

11. インレットチューブをカラムのアウトレット接続とフローセルインレットに取り付けます。

12. 前面パネルカバーを元に戻します。

13. 検出器の電源を入れる前に、システムをプライムしてフローセルに溶媒を送液し、気泡を取り除きます。

注意： ネジの締め付けとフローセルを押し込む動作を交互に行い、フローセルを締め付け過ぎることなく、隔壁に正しく取り付けてください。

TP02755

調整ピン

フローセルハンドル

3-6 検出器のメンテナンス

ランプの交換

ランプの点灯に繰り返し失敗する場合や、キャリブレーションに失敗する場合には、ランプの交換が必要です。

2998検出器の光源のランプは、購入日から延べ 2000 時間の運転または1年間（どちらか成

立するまで）は、正しく点灯し、キャリブレーションにも合格することが保証されています。

ランプを取り外すには

1. ランプの電源を切ります。

2. 検出器の電源を切り、背面パネルから電源ケーブルを外します。

3. 30分間ランプを冷却します。

4. 前面パネルカバーを持ち上げて、本体から前面パネルカバーを取り外します。

5. ランプの電源コネクタを検出器から外します。

警告：火傷事故防止のため、ランプを取り外す際には、30 分以上の冷却時間を設けてください。稼働中のランプハウジングは、非常に高温になります。

警告：紫外線が目に入らないよう、下記の注意事項を遵守して下さい。

• ランプを交換する際には、検出器の電源を切る。

• 紫外線フィルタの付いた防護メガネを着用する。

• 装置の稼働中は、ランプをハウジングから出さない。

警告：ランプおよびランプハウジングが熱くなっているかもしれません。検出器の電源を切った後、冷えるまで30分待ってから、これらのコンポーネントに触れるようにしてください。

ランプの交換 3-7

ランプの取り外し方

6. ランプベースにある 2 本の取り付けねじを緩めます。ランプハウジングからランプ

をゆっくりと引き出します。

ランプを取り付ける方法

1. ガラス面を手で触れないよう注意し、新しいランプをパッケージから取り出します。

2. 新しいランプおよびランプハウジングを確認します。

警告：ランプの内部は、大気圧よりわずかに低圧のガスで充填されています。ランプを廃棄する際には、ガラスを割らないよう注意してください。古いランプは新しいランプの梱包材に入れて廃棄してください。

注意：新しいランプのガラス面は、手で直接触れないでください。指紋などの汚れが付くと、検出器の動作に悪影響が及びます。ランプ表面をクリーニングする場合は、レンズティッシュとエタノールで優しく拭き取ってください。研磨ティッシュは使わないでください。また、強い力をかけないようにしてください。

TP02754

調整ピン

ランプ電源コネクタ

取り付けねじ

ランプベース

取り付けねじ

3-8 検出器のメンテナンス

3. ランプベースプレートの切れ込みが1時の方向に来るようランプの位置を合わせて、

ランプハウジングの調整ピンと一致させてから、慎重にランプを奥まで押し込みます。光学ベンチに対して正しい位置にあることを確認します。

4. 2本の取り付けねじを締めてから、ランプの電源コネクタを接続します。

5. 前面パネルカバーを元に戻します。

6. 検出器の電源を入れ、ランプが温まるまで1時間待ってから操作を再開します。

ヒント：検出器の電源をオフにしてからオンにすると、検証手順が始まります。

7. コンソールで、［保守］>［ランプ交換］と選択します。

［ランプ交換］ダイアログボックス

8. ［新規ランプ］をクリックします。

注意： ネジの締め付けとランプを押し込む動作を交互に行い、締め付け過ぎることなく、ランプハウジングを正しく取り付けてください。

ランプの交換 3-9

［新規ランプ］ダイアログボックス

9. 新しいランプのシリアル番号を入力して（ランプコネクタのワイヤにラベルがあります）、[OK]をクリックします。

ヒューズの交換

検出器には、100 ~ 240 VAC、50 ~ 60 Hz、F 3.15 A, 250 V（高速ブロー）、5 × 20 mm (IEC)ヒューズが2本必要です。

下記のような症状が現れた場合、ヒューズの切断または不良が疑われます。

• 検出器の電源がオンにならない。

• ファンが回転しない。

ヒューズを交換する方法

必要条件：片方のヒューズのみの切断または不良が疑われる場合でも、ヒューズは両方交換してください。

1. 検出器の電源をオフにして、電源コードを外します。

2. 検出器の背面パネルの電源モジュールの上にあるスプリング式のヒューズホルダの側面を指でつまみます。

3. 最小限の力を加えて、スプリング仕掛けのヒューズホルダを取り外してください。

警告：感電防止のため、ヒューズを交換する前に、2998 PDA 検出器の電源をオフにしてプラグを抜きます。火災防止の観点から、交換するヒューズの種類とグレードは、交換前と同じものを使用してください。

3-10 検出器のメンテナンス

ヒューズホルダの取り外し方

4. 古いヒューズを取り外して捨てます。

5. 交換用ヒューズのグレードが適したものであることを確認してから、ヒューズをホルダに取り付け、次にホルダを電源モジュールに取り付けます。ホルダは、所定の位置でロックされるまでゆっくりと挿入します。

6. 電源モジュールに、電源コードを接続します。

TP02523

ヒューズ

ヒューズホルダ

電源モジュール

ヒューズの交換 3-11

3-12 検出器のメンテナンス

4 診断テストおよびトラブルシュー

ティング

本章では、2998 PDA 検出器のトラブルシューティングについて取り上げます。ただ

し、検出器はシステム全体での判定しか行わないことに留意してください。したがって、検出器に問題があると思われても、実際にはクロマトグラフィや他のシステム装置が原因である場合があります。

内容：

トピック ページ

診断テスト 4-2

全般的なトラブルシューティング 4-5

4-1

診断テスト

2998 PDA検出器は、起動時に一連の内部診断テストを自動的に実施します。起動時

の内部診断テストの結果は、検出器前面のインジケータLED、およびEmpowerワー

クステーション上のメッセージとして表示されます。

検出器の動作中に問題の原因を判断する必要がある場合は、Empower ワークステー

ションから同じ診断テストを実行できます。検出器のパフォーマンスの詳細な情報は、Empower ソフトウェアの［サンプルの分析］からアクセスし、PDA 検出器の

［PDA診断］画面でも確認できます。

検出器キャリブレーションの検証

フローセルの交換後は、PDA 検出器のキャリブレーションを検証してください。検

出器の電源を入れる前に、システムをプライムしてフローセルに溶媒を送液し、気泡を取り除きます。

推奨事項：フローセルが汚れていると、波長検証の結果に影響が及びます。キャリブレーションを行う前に、フローセルが清潔なことを確認してください。

検出器のキャリブレーションを確認するには

1. 使用していたサンプルおよび移動相と相溶性のある溶媒を選択します。バッファを使用していた場合は、HPLC グレードの精製水を用いて 10 mL/ 分の流量でフラッシュ

洗浄した後、表面張力の低いメタノールなどの溶媒を用いて10 mL/ 分の流量でフラッ

シュ洗浄します。

ヒント：使用溶媒が直前に使用した移動相と混和することを確認してください。

2. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

3. PDA 検出器の情報画面で、［保守］>［キャリブレーションの確認］>［開始］の順にし

ます。テスト時間は、［実行時間］バーグラフに表示されます。

4. テストが終了すると、［結果］が表示されます。検出器がテストに合格したことを確認します。

規則：合格するには、最大偏差が標準キャリブレーションの ±1 nm 以内になければ

なりません。

ヒント：テストに不合格になった場合は、フローセルをフラッシュ洗浄し、検出器のキャリブレーション手順を再び実行します。

5. ［閉じる］をクリックします。

注意：検出器を正しく調整し、キャリブレーションするためには、検出器の電源を入れる前にフローセルを溶媒で満たしておく必要があります。フローセルが空だと、キャリブレーションエラーが発生します。

4-2 診断テストおよびトラブルシューティング

ランプエネルギーの読み取り推奨事項：フローセルが汚れていると、ランプエネルギーの読み取りに影響が及びます。ランプエネルギーを読み込む前に、フローセルが清潔であることを確認してください。

ランプエネルギーを読み込むには

1. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

2. PDA 検出器の情報画面で、［保守］>［エネルギー読み込み］>［読み込み］の順にしま

す。［エネルギー読み込み］ダイアログボックスが表示されます。

3. ［閉じる］をクリックします。

エルビウムキャリブレーションを実行する推奨事項：フローセルが汚れていると、波長キャリブレーションの結果に影響が及びます。キャリブレーションを行う前に、フローセルが清潔なことを確認してください。

この手順を開始する前に、第 2章の記述に従い、検出器を設定する必要があります。

起動時の検証シーケンス中に、PDA検出器はエルビウムキャリブレーションを実行し

ます。この手順は手動で開始することもできます。

エルビウムキャリブレーションの検証を手動で開始するには

1. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

2. PDA 検出器の情報画面で、［トラブルシューティング］>［エルビウムキャリブレー

ション］をクリックします。［エルビウムキャリブレーション］ダイアログボックスが表示されます。

3. ［露光を最適化］をクリックします。

4. ［開始］をクリックします。

結果：検出器のフィルタがエルビウム位置に移動し、256.5、378.9、521.4 nm のエ

ルビウム発光ピークと、656.1 および 486.1 nm の重水素輝線が示されます。

規則：合格するには、最大偏差が +/−1 nm 以内であることが必要です。

診断テスト 4-3

5. ［停止］をクリックします。エルビウムフィルタが元の位置に戻ります。

6. ［保存］> [OK] >［閉じる］の順にクリックします。

キャリブレーション定数の読み込み

キャリブレーション定数を読み込む方法

1. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

2. ［トラブルシューティング］>［キャリブレーション定数］とクリックします。［キャリ

ブレーション定数］ダイアログボックスが表示されます。

3. ［読み込み］をクリックします。

4. ［閉じる］をクリックします。

PDA 検出器背面パネルのインターフェース接続の表示2998 PDA 検出器の背面パネルの入出力信号接続または接点リレーは、コンソール

画面から確認できます。ここには、装置の信号接続に関する状況がリアルタイムで表示されます。緑色LEDが点灯している場合は、シグナル用ケーブルが接続されている

ことを示します。赤色LEDが点灯している場合は、シグナル用ケーブルが接続されて

いないことを示します。

2998 PDA 検出器の背面パネルのインターフェース接続を表示する方法

1. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

2. PDA 検出器の情報画面で、［トラブルシューティング］>［背面パネル］とクリックし

ます。［PDA検出器背面パネル］ダイアログボックスが表示されます。

下表は、PDA検出器のI/O接続をまとめたものです。

注意：

• この手順を実行すると、スペクトルのライブラリ照合およびピーク純度キャリブレーションに影響が及ぶ場合があります。

• キャリブレーション手順を実行するたびに、スペクトルのライブラリ照合をやり直す必要がある場合があります。詳細については、第 5 章を参

照してください。

PDA 検出器のアナログ出力 / イベント入力接続

信号接続 説明

アナログ 1（出力） プログラム可能なアナログ出力。

アナログ 2（出力） プログラム可能なアナログ出力。

4-4 診断テストおよびトラブルシューティング

背面パネルのインターフェース接続の変更

背面パネルの表示画面では、特定の出力接続を開くか閉じるかを設定できます。出力接続を開くか閉じるかの設定機能は、注入の開始または停止を指定する場合や、システムの接続に関するトラブルシューティングをする際に有用です。

PDA 検出器背面パネルのインターフェース接続の変更方法

1. コンソール画面で、システムツリーから［2998 PDA検出器］を選択します。

2. PDA 検出器の情報画面で、［トラブルシューティング］>［背面パネル］とクリックし

ます。

3. ［PDA検出器背面パネル］ダイアログボックスで、出力 (OUT)と記された信号接続を

探し、赤または緑色の LED をクリックします。選択された信号接続は、出力信号が開

く か閉じる かいずれかの状態になります。

全般的なトラブルシューティング

このセクションでは、エラーの原因と対処方法について説明します。一見、検出器のトラブルと思われるような場合でも、クロマトグラフィ自身やシステム内の他の装置が原因になっている場合があります。

ほとんどの検出器のトラブルは比較的対処が簡単です。問題に対応する診断機能を実行し、検出器のトラブルシューティングを行った後でも問題が改善されない場合は、ウォーターズのテクニカルサービスに連絡してください。

スイッチ 1（出力） タイムイベントやスレッシュホールドイベントをコントロールします。ユーザープログラムが可能な補助出力です。

スイッチ 2（出力） タイムイベントやスレッシュホールドイベントをコントロールします。ユーザープログラムが可能な補助出力です。

注入開始（入力） 実行時間のクロックの開始をトリガし、タイムイベントを作動させます。

ランプオフ（入力） 入力が開始されると、ランプは消灯します。

チャートマーカー（入力） アナログ出力チャンネルにチャートマークを入れることができます（フルスケールの 10%）。アナログ出力の SignalOut 1とSignal Out 2の片方もしくは両方に設定可能です。

オートゼロ（入力） サンプル信号に加えてベースライン信号をゼロにするオフセット値を計算します。

PDA 検出器のアナログ出力 / イベント入力接続

信号接続 説明

全般的なトラブルシューティング 4-5

電源サージ

電源サージ、ラインスパイク、および過渡的なエネルギー源などは検出器の運転に悪影響を与えます。検出器に供給されている電源が正しく接地され、これらの問題が生じないことを確認してください。

電源 LED電源 LED は、検出器の前面パネルに配置されており、装置の電源がオンかオフかを

示します。装置が正常に動作している場合は緑色に点灯しています。

ランプ LEDランプLEDは電源LEDの左隣にあり、ランプの状態を示します。

フローセルから気泡を取り除く

フローセル内の気泡を取り除く方法

脱気したアセトニトリルまたはメタノールを、分析時の流量で検出器フローセルに送液します。

ランプ LED 表示

LED のモードと色 説明

消灯 検出器ランプが消灯していることを示しています。

緑の点灯 検出器のランプが点灯しており、検出器が起動時の波長検証に合格したことを示しています。

緑の点滅 検出器が初期化中または波長検証中であることを示しています。

赤の点滅 エラーによって検出器が停止したことを示しています。不具合の原因となっているエラーは、コンソールで確認できます。

関連項目：2998 PDA 検出器オンラインヘルプ

赤の点灯 検出器の不具合によって、後続動作が妨げられていることを示しています。検出器の電源を一旦オフにして、再度オンにします。LED がまだ赤色に点灯し続ける場合

は、Waters のサービスにお問い合わせください。

4-6 診断テストおよびトラブルシューティング

検出器のトラブルシューティング

以下の表は、検出器のハードウェアに関する一般的なトラブルシューティングの一覧です。

PDA 検出器のトラブルシューティング

症状 考えられる原因 対処法

LED が両方とも消灯 電源が入らない 1. 電源コードの接続を確認する。

2. 電力供給用のコンセントを確認する。

ヒューズの切断（寿命）または不良

ヒューズを交換する（3-10ページを参照）。

レファレンススペクトルが変動

移動相に気泡または不純物がある

新しい移動相を用意し、十分にデガス（脱気）する。

フローセル内に気泡がある フローセルの再接続と調整を行う。

フローセルをフラッシュ洗浄（3-4 ページを参照）す

るか、検出器の廃液アウトレットに 207 ~ 345 kPa

（2 ~ 3 bar、30 ~ 50 psi）の弱い背圧をかける。たとえば、長さ 30 ~ 60 cm、内

径が 0.009 インチ (0.23 mm)のチューブを検出器の廃液アウトレットに接続する。

検出器から継続的に音がする

検出器の故障 PDA 検出器の電源をいっ

たん切って、再度入れ直す。

コンソール画面に検出器が反応しない

ケーブルの接続不良または断線

ケーブルの接続を確認し、コネクタを確実に締めるか、ケーブルを交換する。

設定上の問題 Ethernet の設定を確認す

る。詳細についてはEmpower オンラインヘル

プを参照してください。

ランプが緑色に点滅し、電源ランプが緑色に点灯している

検出器が初期化中 対処は不要。初期化が完了する（両ランプが緑色に点灯する）まで待つ。

全般的なトラブルシューティング 4-7

ランプが赤色に点滅し、電源ランプが緑色に点灯している

起動時の診断テストに失敗 フローセルが正しく接続されているか確認する

（3-4 ページを参照）。

フローセルをフラッシュ洗浄する（3-4 ページを参照）。

フローセルが汚れているためシャッター診断テストが不合格になる

フローセルをフラッシュ洗浄する（3-4 ページを参照）。

気泡により、フォトダイオードアレイへ到達するエネルギーが不十分

フローセルをフラッシュ洗浄（3-4 ページを参照）す

るか、検出器の廃液アウトレットに 207 ~ 345 kPa

（2 ~ 3 bar、30 ~ 50 psi）の弱い背圧をかける。たとえば、長さ 30 ~ 60 cm、内

径が 0.009 インチ (0.23 mm)のチューブを検出器の廃液アウトレットに接続する。

ランプの光量不足 ランプを交換する（3-7 ページを参照）。

シャッターの障害を告げるメッセージ

シャッターの障害 1. フローセルから気泡を取り除く（4-6 ページを

参照）。

2. PDA 検出器の電源を

いったん切って、再度入れ直す。

ドレインラインに溶媒が流れ出る

フローセルガスケットからの漏れ

フローセルを交換する（3-4 ページを参照）。

フローセルのインレットおよびアウトレットからのリーク

フィッティングの締め付けが締めすぎまたは緩んでないかを確認し、必要に応じて交換する。

PDA 検出器のトラブルシューティング（続き）

症状 考えられる原因 対処法

4-8 診断テストおよびトラブルシューティング

5 スペクトルコントラスト理論

スペクトルコントラストアルゴリズムは、検出器が取り込むサンプルの UV/Vis 吸

光度スペクトルを比較するための手法です。本章では、アルゴリズムのベースとなっている理論と、吸光度スペクトルの形状の違いを利用する方法について説明します。また、スペクトルコントラストがこれらのスペクトルをベクトルとして表す方法も説明し、これらのベクトル間の違いが同じピーク内の複数の化合物（共溶出）の存在により発生したものか、ノイズ、光度測定エラー、溶媒の影響などの適切でない条件から発生したものかを判断します。

内容：

トピック ページ

吸光度スペクトルの比較 5-2

ベクトルによるスペクトルの表示 5-3

スペクトルコントラストアングル 5-4

望ましくない影響 5-8

5-1

吸光度スペクトルの比較

特定の溶媒および pH 条件で測定した場合、化合物の吸光度スペクトルの形状は化

合物に固有のものとなります。測定する波長領域での UV/Vis 吸光度の変化によっ

て、固有のスペクトル形状が生成されます。

次の図は、2つの化合物AおよびBの吸光度スペクトルを示しています。245 nmでの吸

光度と257 nmでの吸光度の比は、化合物Aで約2.2、化合物Bで0.7です。この単一波

長ペアの吸光度比の比較によって、化合物に関する情報はほとんど得られないことに注意してください。詳細については、複数の波長の比を比較する必要があります。

2 種類の化合物のスペクトルの比較

TP02838

Ab245Ab257--------------- 2.2=

Ab245Ab257--------------- 0.7=

化合物 A：

化合物 B：

nm

AU

220.00 240.00 260.00 280.00 300.00 320.00 340.00

0.40

0.20

0.00

化合物 A 化合物 B

245 nm257 nm

5-2 スペクトルコントラスト理論

ベクトルによるスペクトルの表示

スペクトルコントラストアルゴリズムでは、ベクトルを使用してスペクトルの形状の違いを定量化します。ベースライン補正されたスペクトルをベクトルに変換してからベクトル同士を比較します。スペクトルのベクトルには次の 2 つの要素があり

ます。

• 長さ – 分析対象物の濃度に比例します。

• 方向 – すべての波長での分析対象物の相対吸光度（吸光度スペクトル）によって決

定されます。測定した波長範囲で吸光度 (AU) が 1.0 未満のピークの場合、方向は

濃度には依存しません。

方向は吸光度化合物のスペクトルの関数であるため、ベクトル方向は化合物の識別に寄与します。スペクトルのベクトルが化合物を区別する能力は、スペクトルの解像度によって決まります。波長範囲が広がり、スペクトル解像度が高くなると、スペクトルに対するベクトルの精度が向上します。検出器で生成されたベクトルには、190 ~ 800 nm の範囲の吸光度が含まれます。スペクトルの精度を改善するには、解

像度を1.2 nmに設定します。

ヒント：分析対象物の吸光度が得られない波長を組み込まないようにします。

2 つの波長から生成されたベクトル

スペクトルコントラストアルゴリズムでは、ベクトルを使用してスペクトルを評価します。ベクトルの原理を理解するために、次の図の2つのベクトルについて考えま

す。これらは前の図で示したスペクトルに基づいています。

2 つのスペクトルのベクトルのプロット

TP02836

0 0.1 0.2 0.3 0.4

0.1

0.2

0.3

0.4

245 nm での AU

257

nmでの

AU

θ

化合物 B

化合物 A

ベクトルによるスペクトルの表示 5-3

この図では、各軸は前の図の吸光度比の計算に使用される 2 つの波長の吸光度単位

を表します。化合物 Aのベクトルの先端は、各軸で表される2つの波長での（化合物Aの）吸光度値の交点にあります。もう一方のベクトルは、同様に化合物 B のスペクト

ルから生成されます。

化合物 B のベクトルは、化合物 A とは異なる方向を指します。スペクトルコントラ

ストアングル(θ)で表されるこの差異は、波長245 nmおよび257 nmでの2つの化合

物の吸光度比の差異を反映します。スペクトルコントラストアングルがゼロより大きい場合は、スペクトル間に形状の差があることを示します（5-4 ページの「スペク

トルコントラストアングル」を参照）。

最終的には、ベクトルの長さは濃度に比例します。

複数の波長から生成されたベクトル

吸光度比が2つの波長に限定される場合は、多くの波長の吸光度比を比較する場合よ

りも、2 つの異なるスペクトルが同じ吸光度比を持つ可能性が高くなります。した

がって、スペクトルコントラストアルゴリズムは、複数の波長からの吸光度を使用して n次元ベクトル空間にベクトルを形成します。ここで、n はスペクトルからの波長

の数です。

2つのスペクトルを比較するために、スペクトルコントラストアルゴリズムはn次元

空間に各スペクトルのベクトルを形成します。2つのスペクトルのベクトルは、スペ

クトルコントラストアングルを計算するために数学的に比較されます。

2つの波長の比較と同様に、n次元空間のスペクトルコントラストアングルがゼロの

場合は、対応する波長における全ての吸光度比が一致していることを意味します。反対に、比の値が一致しない場合は、対応するベクトルが異なる方向を指していることになります。

スペクトルコントラストアングル

形状が同一のスペクトルは、同じ方向を指すベクトルを持ちます。形状が異なるスペクトルは、異なる方向を指すベクトルを持ちます。2 つのスペクトルの 2 つのベク

トル間の角度（スペクトルコントラストアングル）は、スペクトル間のスペクトルベクトルの方向の違いを示しています。

スペクトルコントラストアングルは、0° ~ 90°で変化します。0°に近いスペクトルコ

ントラストアングルは、比較されたスペクトル間の形状の違いがほとんどないことを示します。同一スペクトルを比較すると完全にスペクトルコントラストアングルは0°となります。最大スペクトルコントラストアングル90°は、2つのスペクトルが

どの波長でも重ならないことを示します。

スペクトルコントラストアングルとスペクトル形状の差異の関係を示すために、次の3つの図に示すスペクトルのペアについて考えます。

5-4 スペクトルコントラスト理論

異なる形状のスペクトル

次の図では、化合物AおよびBの吸光度スペクトルは明らかに異なります。したがっ

て、スペクトルコントラストアングル(62.3°)は大きな値となります。

スペクトルコントラストアングルが大きいスペクトル

化合物 A

化合物 B

スペクトルコントラストアングル：62.3°

波長 (nm)

ノーマライズした吸光度

スペクトルコントラストアングル 5-5

類似する形状のスペクトル

次の図では、2つの化合物AおよびBの吸光度スペクトルが似ています。したがって、

小さなスペクトルコントラストアングル(3.0°)は小さな値となります。

スペクトルコントラストアングルが小さいスペクトル

スペクトルコントラストアングル：3.0°

化合物 A化合物 B

波長 (nm)

ノーマライズした吸光度

5-6 スペクトルコントラスト理論

同一化合物でのスペクトルの違い

異なる化合物の吸光度以外が原因で、吸光度スペクトルがわずかであっても重要な差異が生じる場合があります。たとえば、同じ化合物の複数のスペクトルが、検出器のノイズ、光度測定エラー、高濃度のサンプル、または溶媒条件の変動によりわずかな差異を示すことがあります。たとえば、次の図のスペクトルは、2 種類の異なる濃

度（高、低）で、装置ノイズが1つの化合物の吸光度スペクトル形状にどのように影響

するかを示しています。同じ化合物のこれらの吸光度スペクトル間のスペクトルコントラストアングルは3.4°です。

2 種類の濃度における同一化合物のノーマライズした吸光度スペクトル

異なる濃度における同一化合物のノーマライズしたスペクトル

スペクトルコントラストアングル：3.4°

波長 (nm)

分析対象物の吸収がほとんどないか、まったくない範囲

ノーマライズした吸光度

スペクトルコントラストアングル 5-7

望ましくない影響

吸光度スペクトル間の形状の違いは、以下の望ましくない影響の 1 つ以上が原因と

なっている場合があります。

• 検出器のノイズ

• 高濃度サンプルによる光度測定エラー

• 溶媒組成の変動

これらのスペクトルを変動させる因子により、純粋な化合物においてもスペクトルに差が出る場合があります。スペクトルコントラストアングルを許容差アングルと比較することで、スペクトルの形状の違いを評価できます（5-9ページを参照）。

検出器のノイズ

静電気および温度の変動は、検出器の吸光度測定に電子的なノイズを加えます。これらのベースラインの変動として発生するノイズは、ノイズと呼ばれます。静電気および温度の変動を原因とする吸光度の変動の大きさは、クロマトグラムのベースライン領域の装置ノイズから予測できます。

光度測定エラー

高い吸光度（一般に 1 AU 超）では、様々の影響があるため、光度測定エラーが起こり

ベールの法則からのわずかな逸脱（約 1%）が起こることがあります。このレベルで

の光度測定エラーは、定量化にごくわずかな影響しか与えませんが、スペクトルの差が起こる顕著な原因となることがあります。すべてのスペクトルコントラスト操作に対する光度測定エラーの影響を最小化するには、化合物の最大スペクトル吸光度を1 AU未満にする必要があります。移動相の吸光度は、ダイナミックレンジの直

線性を各波長での移動相吸光度の量だけ低減することに注意してください。移動相吸光度の例については、付録 Cを参照してください。

関連項目：光度測定エラー曲線の影響の詳細については、Principles ofInstrumental Analysis（第 3版、Douglas A. Skoog、Saunders College Publishing、1985、pp. 168–172）を参照してください。

溶媒の変化

溶媒濃度と組成が変化しない限り（アイソクラティック処理）、溶媒ごとのバックグラウンド吸光度（存在する場合）は一定です。一方、グラジェント操作で発生するような溶媒の pH または組成の変化は、化合物の固有なスペクトル形状に影響するこ

とがあります（5-9 ページの図「p- アミノ安息香酸の吸光度スペクトルに対する pHの影響」を参照）。

5-8 スペクトルコントラスト理論

許容差アングル

スペクトルコントラストアングルの計算に加えて、スペクトルコントラストアルゴリズムでは許容差アングルが計算されます。許容差アングルは、理論では想定できない現実的な影響を加味したスペクトルコントラストアングルです。

スペクトルコントラストアングルとその許容差アングルを比較すると、スペクトル間の形状の違いが顕著かどうかを判断するのに役立ちます。通常、許容差アングルよりもスペクトルコントラストアングルが小さい場合は、形状の違いが理想的でない現象のみによるものであり、スペクトル間の差異はないことを示しています。許容差アングルよりもスペクトルコントラストアングルが大きい場合は、スペクトル間の重大な差異が原因となって形状の違いが生じていることを示しています。スペクトルコントラストの比較を自動化する場合は、スペクトルの最大吸光度が 1 AU以下である必要があります。

p- アミノ安息香酸の吸光度スペクトルに対する pH の影響

pH の影響

pH 6.9

波長 (nm)

吸光度

pH 5.1

pH 3.1

望ましくない影響 5-9

5-10 スペクトルコントラスト理論

A 安全上の注意

Waters の装置には、装置の操作と保守にかかわる隠れた危険性を警告する危険記号

が表示されています。各装置のユーザーガイドにも、危険記号の説明とその回避方法が示されています。本付録では、Waters の製品ライン全体に適用されるすべての

安全記号と説明について説明します。

内容

トピック ページ

警告記号 A-2

注意記号 A-5

すべての Waters 装置に適用される警告 A-5

電気および取り扱い関連の記号 A-6

A-1

警告記号

警告記号は、装置の使用または誤使用に伴う死亡、傷害、または非常に有害な生理的反応の危険性を警告します。Waters 装置を設置、修理、および操作する場合は、すべての警告に注

意を払ってください。Watersでは、装置を設置、修理、または操作する人が安全注意事項に従

わない場合、一切責任を負わないものとします。

作業中の危険警告

以下の警告記号は、装置または装置コンポーネントの操作・メンテナンスで生じる可能性がある危険を知らせます。このような危険性には、火傷、感電、紫外線被曝などが含まれます。

以下の記号が、マニュアルの説明または手順で現われた場合、それに付随する記述が、その固有の危険性を特定し、防止方法について説明します。

警告：（一般的な危険性。この記号が装置に示されているときは、該当する使用説明書で安全に関する重要な情報について調べてから装置を使用してください。）

警告：（高温表面への接触による火傷の危険性があります。）

警告：（感電の危険性があります。）

警告：（出火の危険性があります。）

警告：（尖端が鋭利なため刺し傷の危険性があります。）

警告：（手が挟まれ負傷する危険性があります。）

警告：（紫外線被曝の危険性があります。）

警告：（腐食性物質への接触の危険性があります。）

警告：（有毒物質への暴露の危険性があります。）

警告：（レーザー光線被曝の危険性があります。）

警告：（健康を損なう恐れがある生物因子にさらされる危険性があります。）

警告：（倒れる危険性があります。）

A-2 安全上の注意

具体的な警告特定の装置のユーザーマニュアル、および装置またはその構成部品に添付されたラベルには、以下の警告が表示されていることがあります。

破裂に関する警告

この警告は、非金属チューブが装備されたWaters装置に適用されます。

質量分析計の可燃性溶媒に関する警告

この警告は、可燃性溶媒を使用して操作する装置に適用されます。

警告：（爆発の危険性があります。）

警告：（眼を負傷する危険性があります。）

警告：圧力のかかった非金属（つまりポリマー）チューブは、破裂することがあります。このようなチューブで作業する場合は、以下の注意事項に留意してください。

• 保護メガネを着用してください。

• 近くにある火を消してください。

• 変形したり折れ曲がったりしている、あるいはそのような状態にあったチューブは使用しないでください。

• 非金属チューブは、テトラヒドロフラン (THF)、硝酸、硫酸などの、使用に適さな

い溶媒にさらさないでください。

• 塩化メチレンやジメチルスルホキシドなどの一部の成分は、非金属チューブの膨張を引き起こす場合があり、その場合、チューブは極めて低い圧力で破裂します。

警告：大量の可燃性溶媒を使用する場合は、閉鎖空間での発火の危険性を防ぐため、イオンソースに絶えず窒素を流し込む必要があります。

加熱性溶媒を使用する分析では、窒素供給圧が 690 kPa（6.9 bar、100 psi）を絶対

に下回らないようにしてください。また、窒素の供給に失敗した場合に LC 溶媒送

液が停止するように、LC システムへのガス障害接続が行われていることも確認し

てください。

警告記号 A-3

質量分析計による感電の危険性

この警告は、すべてのWaters 質量分析計に適用されます。

この警告は、特定の装置が動作モードの場合に適用されます。

生物学的有害物質に関する警告

この警告は、以下のような生物学的有害物質が含まれる物質を処理する際に使用する Waters装置に適用されます。人体に悪影響を及ぼす可能性のある生物因子を含む物質。

化学的有害物質に関する警告

この警告は、腐食性、有毒、可燃性、またはその他の有害物質を処理できる Waters 装置に適

用されます。

警告：感電防止の観点から、質量分析計の保護パネルは外さないでください。保護パネルで覆われているコンポーネントをユーザーがメンテナンスすることはできません。

警告：装置が動作モードのときは、質量分析計の特定の外表面が高電圧になることがあります。非致命的な感電防止のために、この高電圧警告記号の付いた領域に触れる場合は、その前に装置が待機モードであることをまず確認してください。

警告：Waters 装置およびソフトウェアを使用して、感染のおそれのある人体からの生成物、不活性微生物、およびその他の生物的物質を分析または処理できます。これらの因子からの感染を防止するために、すべての生体液に感染性があることを想定し、優良試験所基準 (GLP) に定められている正しい手順に従い、組織の生物学的有害物質の安全担当者に適切な使用法と取り扱いを相談してください。（米）国立衛生研究所(NIH)発行、Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories (BMBL)の最新版に具体的な予防措置が掲載されています。

警告：Waters 装置を使用して、危険性のある物質を分析または処理できます。これらの物質による事故を防止するために、物質とその危険性をよく理解し、優良試験所規範(GLP)に従い、組織の安全担当者に適切な使用法と取り扱いを相談してください。米国学術研究会議発行、Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Disposal of Chemicalsの最新版にガイドラインが掲載されています。

A-4 安全上の注意

注意記号

注意記号は、装置の使用または誤使用により装置を損傷したりサンプルの完全性が損なわれたりすることを示します。以下に、装置またはサンプルに損傷が及ぶ危険性を警告する代表的な記号と説明を示します。

すべての Waters 装置に適用される警告

本装置を操作する際は、標準の品質管理手順とこのセクションの装置に関するガイドラインに従ってください。

注意：損傷を防ぐために、装置のケースのクリーニングに研磨剤や溶媒を使用しないでください。

注意：規制機関から明確な承認を受けずに本装置の変更や改造を行うと、本装置のユーザーとしての承認が無効になる可能性があります。

警告：圧力のかかったポリマーチューブを扱うときは、注意してください。

• 加圧されたポリマーチューブの付近では、必ず保護メガネを着用してください。

• 近くにある火を消してください。

• 著しく変形した、または折れ曲がったチューブは使用しないでください。

• 非金属チューブには、テトラヒドロフラン (THF) や高濃度の硝酸または硫酸などを流

さないでください。

• 塩化メチレンやジメチルスルホキシドは、非金属チューブの膨張を引き起こす場合があり、その場合、チューブは極めて低い圧力で破裂します。

警告：ユーザーは、製造元により指定されていない方法で機器を使用すると、機器が提供している保護が損なわれる場合があるということを承知しているものとします。

警告：火災予防のために、ヒューズ交換では機器ヒューズカバー脇のパネルに記載されているタイプおよび定格のヒューズをご使用ください。

注意記号 A-5

電気および取り扱い関連の記号

電気的記号

これらの記号は、装置のユーザーマニュアルおよび装置の前面または背面パネルに表示されていることがあります。

電源オン

電源オフ

スタンバイ

直流

交流

接地

フレーム/シャシー、アース

ヒューズ

リサイクル記号：自治体の一般廃棄物として処分しないでください。

A-6 安全上の注意

取扱記号

これらの取り扱い関連の記号および関連テキストは、Waters 装置およびコンポーネント

の出荷時の外装に添付されたラベルに表示されることがあります。

天地無用

湿気厳禁

ワレモノ注意

吊り下げ禁止

電気および取り扱い関連の記号 A-7

A-8 安全上の注意

B 仕様

この付録には、2998 PDA 検出器の製品仕様が含まれています。

物理的仕様

項目 仕様

高さ 19.4 cm（7.64 インチ）

奥行き 61 cm（24.0 インチ）

幅 34.3 cm（13.5 インチ）

重量 12.6 kg（27.75 インチ）

使用環境仕様

項目 仕様

動作温度 4 ~ 40 °C (39.2 ~ 104 °F)

動作湿度 <95%、結露しないこと

輸送時および保管時の温度 −30 ~ 60 °C (−22 ~ 140 °F)

輸送時および保管時の湿度 20 ~ 85%、結露しないこと

音響ノイズ（装置生成） <50 dBA

電気的仕様

項目 仕様

保護クラスa クラス I

過電圧カテゴリb II

汚染レベルc 2

湿気防止d 標準 (IPXO)

B-1

線間電圧、公称 接地された AC

電圧範囲 100 ~ 240 VAC 標準

周波数 50 ~ 60 Hz

ヒューズ ヒューズ 2 本（100 ~ 240 VAC、

50 ~ 60 Hz、F 3.15 A、

250 V（高速ブロー）、5 × 20 mm (IEC)）

電力消費 185 VA、公称

a. 保護クラス I – 感電を防止するために装置は絶縁されています。クラス I は、電気が流れている部品（導線）と露出している伝導性部品（金属製パネル）間の単独の絶縁レベルを定義します。露出している伝導性部品は接地システムに接続されます。さらに、この接地システムは、電源コードのプラグの 3 番目のピン（接地ピン）に接続されます。

b. 過電圧カテゴリ II – 壁のコンセントなどのローカルレベルから電力を供給される装置を対象にしています。

c. 汚染レベル 2 – 電気回路の汚れの基準で、絶縁耐力または表面抵抗率を減少させる場合があります。レベル 2 は、通常の非伝導性の汚れを指しています。場合によっては、結露によって発生する一時的な伝導性も予想されます。

d. 湿気防止 – 標準 (IPXO) – IPXO は、漏れや吹き出した水の進入防止対策がないことを意味しています。該当する場合、X はほこりから保護されていることを示すプレースホルダです。

パフォーマンス仕様

項目 仕様

波長範囲 190 ~ 800 nm

光学解像度 1.2 nm

フォトダイオード数 512

デジタル解像度 1.2 nm/ピクセル

波長正確度 ±1.0 nm

波長再現性 ±0.1 nm

デジタルフィルタ サンプリングレートにより可変

2 次フィルタ 371 ~ 800 nm で固定

電気的仕様（続き）

項目 仕様

B-2 仕様

ノイズ – UV（ドライセル） 10 μAU ピーク間

フィルタ = 1 秒、30 秒セグメント

波長 = 254 nm

解像度 = 3.6 nm（3 ピクセルを平均）

フローセル = 分析用、10 mm

サンプリングレート = 2 Hz

ノイズ – UV（ウェットセルa） 10 μAU ピーク間

フィルタ = 1 秒、30 秒セグメント

波長 = 254 nm

解像度 = 3.6 nm（3 ピクセルを平均）

フローセル = 分析用、10 mm

サンプリングレート = 2 Hz

流量 = 0.5 mL/ 分

溶媒 = 水/アセトニトリル(90/10)

ドリフト – UV（ドライセル） 1000 μAU/hr

フィルタ = 1 秒、30 秒セグメント

波長 = 254 nm

解像度 = 3.6 nm（3 ピクセルを平均）

ウォームアップ時間 = 60 分

環境の安定性 = ±2 °C/ 時間

フローセル = 分析用、10 mm

サンプリングレート = 2 Hz

直線性 < 2.0 AU で 5%、プロピルパラベン類、257 nm、

分析フローセル

サンプリングレート 1、2、5、10、20、40、および 80

a. 酸素の影響を 230 nm で最小限に抑えるため、ウェット試験には水 / アセトニトリル (90/10) を使用してください。適切な溶媒コンディショニングを施した場合は、水 / メタノール (90/10) で代用することもできます。

パフォーマンス仕様（続き）

項目 仕様

B-3

Waters 2998 PDA フローセル仕様

説明 容量 (μL) 光路長 (mm)チューブ内径（インチ） 耐圧

（bar/psi）インレット アウトレット

分析 9.3 10 0.010 0.010 69/1000

自動精製

• 分析

• 分取

12.4 0.5 0.0100.040

0.040 138/2000

マイクロボア 4.1 8.0 0.005 0.005 69/1000

分取用 18.3 3.0 0.020 0.020 69/1000

キュベット 該当なし 10.0 該当なし 該当なし 該当なし

B-4 仕様

C 溶媒の取り扱い時の注意

この付録には、2998 PDA 検出器の操作やメンテナンス時に考慮する必要がある溶

媒取り扱い時の注意が含まれています。

内容：

トピック ページ

はじめに C-2

溶媒の混和性 C-3

バッファ溶液 C-5

溶媒ボトルの位置 C-6

チューブの曲げ半径の推奨値 C-6

溶媒の粘性 C-6

移動相の溶媒脱気 C-7

溶媒の脱気方法 C-8

波長の選択 C-9

C-1

はじめに

清潔な溶媒

純度の高い溶媒を使うことで、再現性のある分析結果が得られ、装置のメンテナンスの必要性が最小限に抑えられます。

汚染された溶媒は、ベースラインのノイズとドリフトの原因となります。また、粒子によって溶媒フィルターが目詰まりする可能性があります。

溶媒の品質

最良の結果を得るには、HPLCグレードの溶媒を使用してください。溶媒は使用前に、

0.45 μm フィルタを用いてろ過して下さい。通常、蒸留を行うと、ロット間で純度の差がな

くなり、これを使用すると、良好な結果が得られます。

溶媒調製のチェックリスト

安定したベースラインと良好な分離を得るために、以下のガイドラインに従って溶媒調製を行ってください。

• 0.45 μmのフィルターで溶媒のろ過を行う。

• 溶媒の脱気/スパージを行う。

• 溶媒を攪拌する。

• ドラフトの近くや衝撃のある場所におかないようにする。

水

高純度水精製装置によって精製された水を必ず使用してください。ろ過機能がない場合は、使用前に0.45 μmフィルターによるろ過を行ってください。

バッファ（緩衝剤）の使用

バッファを使用する場合、最初に塩を溶解して、pH を調整し、フィルターをかけて不溶性

物質を除去します。

注意：薬品による事故を防止するため、システムの操作時は、常に優良試験所規範(GLP) を遵守してください。

C-2 溶媒の取り扱い時の注意

テトラヒドロフラン

安定剤を含まないテトラヒドロフランを用いる場合は、新しい溶媒であることを確認してから使用してください。開封済みのテトラヒドロフランには汚染物質として過酸化物が含まれるため、ベースラインドリフトの原因となります。

溶媒の混和性

溶媒を交換する際には、事前に下記のテーブルを参照して、使用する溶媒の混和性について確認しておいてください。溶媒の変更時には、以下の点に注意してください。

• 変更する2つの溶媒間に混和性がある場合は、そのまま変更できます。混和性のない

2 つの溶媒間で変更する場合（たとえばクロロホルムから水への変更）は、中間溶媒

（イソプロパノールなど）が必要です。

• 溶媒の混和性には、温度も関係します。分析を高温で実施する場合は、温度が溶媒の溶解性に与える影響を考慮して下さい。

• 水に溶解しているバッファは、有機溶媒と混合した際に析出することがあります。

バッファ溶液を有機溶媒に置換する場合は、蒸留水を用いてフラッシュ洗浄してから、有機溶媒に置換してください。

警告：テトラヒドロフランの汚染物質（過酸化物）は、濃縮または乾固すると爆発する危険性があります。

溶媒の混和性

極性インデックス

溶媒粘度 (cP)、20 °C

沸点 (°C)1 atm

混和性数値 (M)

カットオフλ(nm)

–0.3 N-デカン 0.92 174.1 29 —

–0.4 イソオクタン 0.50 99.2 29 210

0.0 N-ヘキサン 0.313 68.7 29 —

0.0 シクロヘキサン 0.98 80.7 28 210

1.7 ブチルエーテル 0.70 142.2 26 —

1.8 トリエチルアミン 0.38 89.5 26 —

2.2 イソプロピルエーテル 0.33 68.3 — 220

2.3 トルエン 0.59 100.6 23 285

2.4 P-キシレン 0.70 138.0 24 290

3.0 ベンゼン 0.65 80.1 21 280

3.3 ベンジルエーテル 5.33 288.3 — —

溶媒の混和性 C-3

3.4 塩化メチレン 0.44 39.8 20 245

3.7 塩化エチレン 0.79 83.5 20 —

3.9 ブチルアルコール 3.00 117.7 — —

3.9 ブタノール 3.01 177.7 15 —

4.2 テトラヒドロフラン 0.55 66.0 17 220

4.3 酢酸エチル 0.47 77.1 19 260

4.3 1-プロパノール 2.30 97.2 15 210

4.3 2-プロパノール 2.35 117.7 15 —

4.4 酢酸メチル 0.45 56.3 15, 17 260

4.5 メチルエチルケトン 0.43 80.0 17 330

4.5 シクロヘキサノン 2.24 155.7 28 210

4.5 ニトロベンゼン 2.03 210.8 14, 20 —

4.6 ベンゾニトリル 1.22 191.1 15, 19 —

4.8 ジオキサン 1.54 101.3 17 220

5.2 エタノール 1.20 78.3 14 210

5.3 ピリジン 0.94 115.3 16 305

5.3 ニトロエタン 0.68 114.0 — —

5.4 アセトン 0.32 56.3 15, 17 330

5.5 ベンジルアルコール 5.80 205.5 13 —

5.7 メトキシエタノール 1.72 124.6 13 —

6.2 アセトニトリル 0.37 81.6 11, 17 190

6.2 酢酸 1.26 117.9 14 —

6.4 ジメチルホルムアミド 0.90 153.0 12 —

6.5 ジメチルスルホキシド 2.24 189.0 9 —

6.6 メタノール 0.60 64.7 12 210

7.3 ホルムアミド 3.76 210.5 3 —

9.0 水 1.00 100.0 — —

溶媒の混和性（続き）

極性インデックス

溶媒粘度 (cP)、20 °C

沸点 (°C)1 atm

混和性数値 (M)

カットオフλ(nm)

C-4 溶媒の取り扱い時の注意

混和性番号の使用法

混和性番号（M 番号）は、液体の標準溶媒に対する混和性を予測する際に使用します（C-3ページを参照）。

2つの液体の混和性を推測するには、大きい方のM番号の値から小さい方のM番号の値を

引き算します。

• M番号の差が15以下である2つの液体は、15 °Cの条件下において、任意の比率で混

和できます。

• 差が16の場合は、25 °C ~ 75 °Cが臨界溶解温度、50 °Cが最適温度となります。

• 差が 17以上の場合、2つの液体は混和性がないか、臨界溶解温度が 75 °Cを超えてい

ます。

溶媒の中には、親油性の度合いが両極端にある溶媒に対して、不混和性を示すものもあります。こうした溶媒には、2通りのM番号が与えられています。

• 1 番目の番号は常に 16 より小さい値であり、これは高親油性溶媒との混和性を示し

ます。

• 2番目の番号は、親油性とは反対のスケールの大きな値です。この両者の値の差が大

きい液体は、非常に限られた混和性しか持ちません。

たとえば、フルオロカーボン（フッ化炭素）類の中には、すべての標準溶媒と混和せず、これらのM数は0および32です。また2つのM番号をもつ液体同士は、通常相互に親和し合いま

す。

M 番号の体系では、一連の標準溶媒に対する混和性をテストすることで個々の液体を分類

しています。その後、混和性のカットオフポイントに対して、15 単位を補正項として加算ま

たは減算しています。

バッファ溶液

バッファを用いる場合は、高品質の試薬を用いて、0.45 μm フィルタでろ過を行うように

して下さい。

使用後はバッファーを検出システムに入れたままにしないでください。液体が通過する部分すべてをHPLCグレードの水でフラッシュ洗浄してから、システムを停止してください。

システム内に残っている蒸留水はそのままにしておきます（1日以上シャットダウンする場合

は、90% HPLC グレードの水と 10% メタノールの混合溶液でフラッシュ洗浄してくださ

い）。スパージシステムの場合には最低15 mL、インラインデガッサ等脱気装置では最低45mL使用します。

バッファ溶液 C-5

溶媒ボトルの位置

溶媒ボトルはHPLCより高い位置、またはポンプや検出器の上に置いてください（適切な漏

れ防止対策も行います）。

チューブの曲げ半径の推奨値

チューブを曲げる場合は、下表を参考にしてください。チューブの曲げ半径は、表で示されている値より大きくなければなりません。スケールは1:1であるため、図をテンプレートと

して使用できます。

溶媒の粘性

一般に粘性は、単一溶媒または低圧力条件で分析をする限り、重要な要素ではありません。ただしグラジェントを行う場合は、溶媒混合の過程で生じる粘性の変化により、圧力変動が起こる場合があります。たとえば水とメタノールを 1:1 で混合すると、水やメタノールを単

独で使用する場合に対して、生じる圧力は2倍になります。

圧力変化の影響の程度が不明な場合、分析中の圧力を監視してください。

ステンレス鋼製チューブの最小曲げ半径

チューブサイズ (OD) 最小半径

1/16 インチ以下のチューブ 1/4 インチ

1/8 インチチューブ 1/2 インチ

R

R

C-6 溶媒の取り扱い時の注意

移動相の溶媒脱気

移動相の問題がクロマトグラフィ問題のうちの70%以上を占めます。とりわけ220 nm未満

の波長では、脱気された溶媒を使用することが重要です。

脱気により以下のような効果が得られます。

• ベースラインが安定し感度が上がる

• 溶出ピークの保持時間の再現性が得られる

• 定量が可能な注入量の再現性が得られる

• ポンプ動作の安定性が高まる

気体の溶解性

一定容量の液体に溶解する気体の量は一定です。この量は以下によって異なります。

• 気体と液体の化学的な親和性。

• 液体の温度。

• 液体にかかる圧力。

組成、温度、または移動相にかかる圧の変化によって脱気される場合があります。

分子間力の影響

無極性ガス（N2、O2、CO2、He）は極性溶媒よりも無極性溶媒によく溶解します。またガスは

一般にガス分子同士に見られるのと同じような分子間力を持つ溶媒にはよく溶解します（「似たもの同士でよく溶ける」）。

温度の影響

温度は気体の溶解度に影響を与えます。溶解に発熱を伴う場合、溶媒の温度を上げれば気体の溶解度は下がります。溶解に吸熱を伴う場合、溶媒の温度が上昇すると気体の溶解度は上がります。たとえば、H2Oに対するHeの溶解度は、温度が上昇すると下がりますが、ベ

ンゼンに対するHeの溶解度は温度が上昇すると上がります。

分圧の影響

一定容量の溶媒に溶解する気体の量は、気－液平衡にある溶媒の気相におけるその気体の分圧に比例します。気体の分圧が下がると、溶解する気体の量も減少します。

移動相の溶媒脱気 C-7

溶媒の脱気方法

ここでは、安定したベースラインを得るための脱気の方法について説明します。溶媒を脱気すると、再現性とポンプの性能が向上します。

溶媒を脱気するには、次のいずれかの方法を用いることができます。

• ヘリウムスパージ

• 真空脱気

スパージ

スパージは溶媒中の溶存ガスを不溶性のガス（通常はヘリウム）で置換することによって脱気します。スパージを十分に行った溶媒を使用するとポンプの性能が向上します。ヘリウムスパージによって溶媒は平衡状態になり、この平衡状態は緩やかにスパージし、溶媒の上をヘリウムで覆った状態にすることで維持されます。ヘリウムで覆うことによって大気中の気体が溶解するのを防ぎます。

スパージによって移動相の組成が変化することがあります。

真空脱気

インラインバキュームデガッサはヘンリーの法則に従って、溶媒から溶存ガスを除去します。ヘンリーの法則によると液体に溶解するガスのモル分率は液体上部の気相におけるそのガスの分圧に比例することになります。液体表面のガスの分圧がたとえば排気などによって減少すれば、それに比例した量のガスが溶媒から放出されます。

真空脱気によって移動相の組成が変化することがあります。

溶媒脱気に関する注意事項

アプリケーションにふさわしい脱気方法を選択してください。溶存ガスを迅速に除去するため、以下の点に注意してください。

スパージ

ヘリウムスパージによって超音波脱気よりも安定したベースラインと高い感度が得られ、大気中の気体の溶解が防止されます。この方法は、テトラヒドロフランやその他過酸化物を形成しやすい溶媒では、酸化を防ぎます。

C-8 溶媒の取り扱い時の注意

真空脱気

長く吸引するほど、多くの溶存ガスが除去されます。次の2つの要因が溶媒脱気の総時間に

影響を与えます：

• 流量 – 低流量では、バキュームチャンバーを通過する際にほとんどの溶存ガスが除

去されます。流量が大きくなるほど、溶媒の単位容量当たりの気体の除去量は少なくなります。

• 脱気メンブランの表面積 – バキュームチャンバーの脱気メンブレンの長さは一定で

す。メンブレンを長くするには、2個以上のチャンバーを直列に接続します。

Waters® 2695 セパレーションモジュール（XE モデル）の場合は、インラインデガッサをオ

プションとして後から取り付けることも、工場出荷時に取り付けた状態で納品することも可能です。

波長の選択

このセクションでは以下のUVカットオフ波長を示します。

• 一般的な溶媒

• 一般的な混合移動相

• 発色団

一般的な溶媒に対する UV カットオフ

下表は、一部の一般的なクロマトグラム用溶媒の UV カットオフ値（溶媒の吸光度が 1 AUと等しくなる波長）をまとめたものです。カットオフの近傍またはカットオフより短い波長で計測を行うと、溶媒の吸光度に起因してノイズが増加します。

一般的なクロマトグラム用溶媒における UV カットオフの波長

溶媒UVカットオフ λ(nm) 溶媒

UVカットオフ λ(nm)

1-ニトロプロパン 380 エチレングリコール 210

2-ブトキシエタノール 220 イソオクタン 215

アセトン 330 イソプロパノール 205

アセトニトリル 190 塩化イソプロピル 225

アミルアルコール 210 イソプロピルエーテル 220

塩化アミル 225 メタノール 205

ベンゼン 280 酢酸メチル 260

波長の選択 C-9

移動相混合液

下表は、その他の溶媒、バッファ、界面活性剤でのカットオフ波長の近似値を示したものです。溶媒の濃度については、最も頻用される値を掲載しています。他の濃度の吸光度を使用する場合は、吸光度は濃度に比例するため、ベールの法則を用いて近似値を算定してください。

二硫化炭素 380 メチルエチルケトン 330

四塩化炭素 265 メチルイソブチルケトン 334

クロロフォルム 245 塩化メチレン 233

シクロヘキサン 200 n-ペンタン 190

シクロペンタン 200 n-プロパノール 210

ジエチルアミン 275 n-塩化プロピル 225

ジオキサン 215 ニトロメタン 380

エタノール 210 石油エーテル 210

酢酸エチル 256 ピリジン 330

エチルエーテル 220 テトラヒドロフラン 230

硫化エチル 290 トルエン 285

二塩化エチレン 230 キシレン 290

異なる移動相のカットオフ波長

移動相

UVカットオフ(nm)

移動相

UVカットオフ(nm)

酢酸、1% 230 塩化ナトリウム、1 M 207

酢酸アンモニウム、10 mM 205 クエン酸ナトリウム、10 mM 225

重炭酸アンモニウム、10 mM 190 ドデシル硫酸ナトリウム 190

BRIJ 35、0.1% 190 ギ酸ナトリウム、10 mM 200

CHAPS、0.1% 215 トリエチルアミン、1% 235

リン酸二アンモニウム、50 mM

205 トリフルオロ酢酸、0.1% 190

一般的なクロマトグラム用溶媒における UV カットオフの波長（続き）

溶媒UVカットオフ λ(nm) 溶媒

UVカットオフ λ(nm)

C-10 溶媒の取り扱い時の注意

発色団検出のための波長選択

多くの化合物にある特定の官能基は、光を選択的に吸収します。これらは発色団と呼ばれ、サンプル分子の検出を分類するために用いることができます。

下表は、一般的な発色団と、該当する検出波長(λmax)、各グループのモル吸光率(εmax)をまと

めたものです。この情報は、特定の分析について最適な波長を選択するのに役立ちます。特定の用途での最適な波長を求めるために、波長範囲のスキャンが必要な場合があります。

エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、1 mM

190 TRIS HCl、20 mM、

pH 7.0、pH 8.0202、212

HEPES、10 mM、pH 7.6 225 Triton-X™ 100、0.1% 240

塩酸、0.1% 190 Waters PIC®試薬 A、

1 バイアル / リットル

200

MES、10 mM、pH 6.0 215 Waters PIC 試薬 B-6、1 バイアル / リットル

225

リン酸水素ニカリウム一塩基、10 mM二塩基、10 mM

190190

Waters PIC 試薬 B-6、低 UV、1 バイアル / リットル

190

酢酸ナトリウム、10 mM 205 Waters PIC 試薬 D-4、1 バイアル / リットル

190

発色団の検出のための波長範囲 *

発色団 化学構成 λmax (nm)

∈max (L/m/cm)

λmax

(nm)∈max (L/m/cm)

エーテル —O— 185 1000

チオエーテル —S— 194 4600 215 1600

アミン —NH2 195 2800

チオール —SH 195 1400

二硫化物 —S—S— 194 5500 255 400

臭化物 —Br 208 300

ヨウ化物 —I 260 400

ニトリル —C≡N 160 —

異なる移動相のカットオフ波長（続き）

移動相

UVカットオフ(nm)

移動相

UVカットオフ(nm)

波長の選択 C-11

*Willard, H. H. et al. Instrumental Methods of Analysis, 6th ed. Litton Educational Publishing, Inc., 1981. Reprinted by permission of Wadsworth Publishing Co., Belmont, California, 94002.

アセチリド —C≡C— 175-180 6000

スルホン —SO2 — 180 —

オキシム —NOH 190 5000

アジド >C=N— 190 5000

エチレン —C=C— 190 8000

ケトン >C=O 195 1000 270-285 18-30

チオケトン >C=S 205 強

エステル —COOR 205 50

アルデヒド —CHO 210 強 280-300 11-18

カルボキシル —COOH 200-210 50-70

スルホキシド >S—O 210 1500

ニトロ —NO2 210 強

ニトリル —ONO 220-230 1000-2000 300-400 10

アゾ —N=N— 285-400 3-25

ニトロソ —N=O 302 100

硝酸塩 —ONO2 270（ショルダー）

12

アレン —(C=C)2—

（非環式 )

210-230 21,000

アレン —(C=C)3— 260 35,000

アレン —(C=C)4— 300 52,000

アレン —(C=C)5— 330 118,000

アレン —(C=C)2—

（脂環式）

230-260 3000-8000

エチレン /アセチレン C=C—C≡C 219 6,500

エチレン / アミド C=C—C=N 220 23,000

エチレン /カルボニル C=C—C=O 210-250 10,000-20,000

エチレン / ニトロ C=C—NO2 229 9,500

発色団の検出のための波長範囲（続き）*

発色団 化学構成 λmax (nm)

∈max (L/m/cm)

λmax

(nm)∈max (L/m/cm)

C-12 溶媒の取り扱い時の注意

1

移動相の吸光度

ここでは、よく使用される移動相について、各種の波長に対する吸光度を一覧で示します。ノイズを抑制するには、十分考慮した上で移動相を選択する必要があります。

最適な移動相とは、測定に用いる波長で吸収のないものです。そのような移動相を使用すると、すべての吸光度はサンプルの物性のみに起因したものとなります。また移動相の吸光度の影響としては、「オートゼロ」機能で排除される吸光度の分だけ、検出器のダイナミックレンジの直線性が損なわれる点が挙げられます。吸光度には、移動相の波長、pH、濃

度が関与します。下記の表は、各種の移動相の値を例示したものです。

ヒント：下表の吸光度は、10 mmの光路長による吸光度です。

空気および水に対して測定した移動相の吸光度

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

溶媒

アセトニトリル 0.05 0.03 0.02 0.01 0.01 <0.01 — — — —

メタノール（未脱気） 2.06 1.00 0.53 0.37 0.24 0.11 0.05 0.02 <0.01 —

メタノール（脱気済み）

1.91 0.76 0.35 0.21 0.15 0.06 0.02 <0.01 — —

イソプロパノール 1.80 0.68 0.34 0.24 0.19 0.08 0.04 0.03 0.02 0.02

安定剤を含まないテトラヒドロフラン(THF) 新品

2.44 2.57 2.31 1.80 1.54 0.94 0.42 0.21 0.09 0.05

安定剤を含まないテトラヒドロフラン(THF) 開封済

>2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 >2.5 2.5 1.45

酸および塩基

酢酸、1% 2.61 2.63 2.61 2.43 2.17 0.87 0.14 0.01 <0.01 —

塩酸、0.1% 0.11 0.02 <0.01 — — — — — — —

リン酸、0.1% <0.01 — — — — — — — — —

トリフルオロ酢酸 1.20 0.78 0.54 0.34 0.22 0.06 <0.02 <0.01 — —

リン酸二アンモニウム、50 mM

1.85 0.67 0.15 0.02 <0.01 — — — — —

トリエチルアミン、1%

2.33 2.42 2.50 2.45 2.37 1.96 0.50 0.12 0.04 <0.0

波長の選択 C-13

1

バッファおよび塩

酢酸アンモニウム、10 mM

1.88 0.94 0.53 0.29 0.15 0.02 <0.01 — — —

重炭酸アンモニウム、10 mM

0.41 0.10 0.01 <0.01 — — — — — —

エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム、1 mM

0.11 0.07 0.06 0.04 0.03 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02

HEPES、10 mM、pH 7.6

2.45 2.50 2.37 2.08 1.50 0.29 0.03 <0.01 — —

MES、10 mM、pH 6.0

2.42 2.38 1.89 0.90 0.45 0.06 <0.01 — — —

リン酸二水素カリウム、一塩基、(KH2PO4)、10 mM

0.03 <0.01 — — — — — — — —

リン酸水素二カリウム、二塩基、(K2HPO4)、10 mM

0.53 0.16 0.05 0.01 <0.01 — — — — —

酢酸ナトリウム、10 mM

1.85 0.96 0.52 0.30 0.15 0.03 <0.01 — — —

塩化ナトリウム、1 M

2.00 1.67 0.40 0.10 <0.01 — — — — —

クエン酸ナトリウム、10 mM

2.48 2.84 2.31 2.02 1.49 0.54 0.12 0.03 0.02 0.01

ギ酸ナトリウム、10 mM

1.00 0.73 0.53 0.33 0.20 0.03 <0.01 — — —

リン酸ナトリウム、100 mM、pH 6.8

1.99 0.75 0.19 0.06 0.02 0.01 0.01 0.01 0.01 <0.0

Tris HCl、20 mM、pH 7.0

1.40 0.77 0.28 0.10 0.04 <0.01 — — — —

Tris HCl、20 mM、pH 8.0

1.80 1.90 1.11 0.43 0.13 <0.01 — — — —

空気および水に対して測定した移動相の吸光度（続き）

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

C-14 溶媒の取り扱い時の注意

1

Waters® PIC® 試薬

PIC A、

1 バイアル /L0.67 0.29 0.13 0.05 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 <0.0

PIC B6、1 バイアル /L

2.46 2.50 2.42 2.25 1.83 0.63 0.07 <0.01 — —

PIC B6、低 UV、

1 バイアル /L0.01 <0.01 — — — — — — — —

PIC D4、1 バイアル /L

0.03 0.03 0.03 0.03 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.01

界面活性剤

BRI J 35、1% 0.06 0.03 0.02 0.02 0.02 0.01 <0.01 — — —

CHAPS、0.1% 2.40 2.32 1.48 0.80 0.40 0.08 0.04 0.02 0.02 0.01

SDS、0.1% 0.02 0.01 <0.01 — — — — — — —

Triton® X-100、0.1%

2.48 2.50 2.43 2.42 2.37 2.37 0.50 0.25 0.67 1.42

Tween™ 20、0.1% 0.21 0.14 0.11 0.10 0.09 0.06 0.05 0.04 0.04 0.03

空気および水に対して測定した移動相の吸光度（続き）

特定の波長 (nm) における吸光度

200 205 210 215 220 230 240 250 260 280

波長の選択 C-15

C-16 溶媒の取り扱い時の注意

索引

EEmpower データシステム、接続 2-14eSAT/IN モジュール 2-14Ethernet ケーブル、接続 2-6

LLED

電源 2-20, 4-6モニター 2-20ランプ 2-20, 4-6

MMassLynx データシステム、接続 2-14

WWaters TaperSlit フローセル 1-5

あアナログ信号 2-9, 2-13安全上の注意 A-1安全に関する注意事項、メンテナンス 3-2暗電流 1-9

い移動相、波長 C-13インストール

検出器 2-2インターフェース接続、検出器 4-4

う運転仕様 B-2

えエラーメッセージ 4-1エルビウムキャリブレーション、実行 4-3

か解像度

スペクトル 1-9比較 1-11

界面活性剤 C-15

化学的有害物質に関する警告 A-4過渡エネルギー 4-6可燃性溶媒 A-3外部アナログデータ収集デバイス、接続

2-13ガス

必要条件 2-18溶解性 C-7

き記号

警告 A-2注意 A-5電気的 A-6取扱 A-7

起動手順 2-18気泡を取り除く、フローセルから 4-6キャリブレーション

検証 4-2定数、読み込み 4-4

キャリブレーションの検証 4-2吸光度

計算 1-3光度測定エラー 5-8最大 5-8スペクトル、比較 5-2

吸光度データポイント、計算 1-9キュベット

使用 2-21取り外し 2-23ホルダー、図示 2-21ホルダーの交換 2-23

許容差アングル 5-9

くクロマトグラフサンプリングレート、平均

化 1-11

け警告記号 A-2, A-5

索引 -1

検出器暗電流 1-9開梱 2-2起動 2-18光学系、概要 1-2シリアル番号 2-2寸法 2-3取り付け 2-2ノイズ 5-8配管 2-16背面パネルのインターフェース接続

表示 4-4変更 4-5

場所の選択 2-3

こ交換

キュベットホルダー 2-23ヒューズ 3-10フローセル 3-4ランプ 3-7

光学アセンブリ、光路 1-2光度測定エラー 5-8

さ最大吸光度 5-8作成

送液停止 2-12注入開始 2-11

酸 C-13サンプリングレート

選択 1-8比較 1-8

しシグナル対ノイズ比、最適化 1-7質量分析計による感電の危険性 A-4シャットダウン 2-21試薬 C-15仕様

運転 B-2使用環境 B-1電気的 B-1

フローセル B-4物理的 B-1

使用環境仕様 B-1シリアル番号、特定 2-2真空脱気 脱気を参照信号

ケーブル、接続 2-6接続

注入開始 2-8注入トリガ 2-15入出力 2-10マニュアルインジェクタ 2-9

純度アングル、光度測定エラーの影響 5-8

すスパージ C-8スペアパーツ 3-3スペクトル

解像度、平均化 1-10吸光度、比較 5-2異なる形状 5-5コントラスト

アングル 5-4スペクトル形状の違い 5-8生成されたベクトル 5-4ベクトル 5-3

スペクトル形状の違い 5-8生成されたベクトル 5-4違い 5-7データ、分解 1-6ベクトル 5-3ベクトルとして表現 5-3類似する形状 5-6

スペクトルマッチ、スペクトル形状の違い 5-8

寸法 2-3

せ生成されたベクトル 5-3, 5-4生物学的有害物質に関する警告 A-4接続

Empower データシステム 2-14Ethernet ケーブル 2-6

索引 -2

MassLynx データシステム 2-14外部アナログデータ収集デバイス 2-13信号ケーブル 2-6チャートレコーダー 2-13注入開始 2-8注入トリガ信号 2-15電源 2-5入出力 2-10マニュアルインジェクタ 2-9

そ送液停止、作成 2-12

た脱気

注意事項 C-8–C-9利点 C-8

脱気の効果 C-8

ちチャートレコーダー、接続 2-13注意記号 A-5注入開始

作成 2-11信号 2-8接続 2-8

注入トリガ信号、接続 2-15チューブ

切断 2-17曲げ半径、最小 C-6

てデータ

フィルタリング 1-12レート 1-12

電気的仕様 B-1

電気的記号 A-6電源 LED 2-20, 4-6電源、接続 2-5電源サージ 4-6

I

とトラブルシューティング

Waters への問い合わせ 4-5検出器 4-7診断機能 4-1

取扱記号 A-7取り付け

ネットワークガイドライン 2-7ランプ 3-8

取り外しキュベット 2-23フローセル 3-5ランプ 3-7

に入出力コネクタ 2-10

ねネットワーク、インストールのガイドライ

ン 2-7

のノイズの影響 5-8望ましくない影響、形状の違い 5-8

はハードウェア、準備 3-1配管、実施 2-16背面パネルのインターフェース接続

表示 4-4変更 4-5

波長移動相の吸光度 C-13参照 1-12生成されたベクトル 5-4選択 C-9–C-11

破裂に関する警告 A-3バッファ溶媒 C-5

ひ光路、光学アセンブリ 1-2ヒューズ、交換 3-10

索引 -3

ふフォトダイオードアレイ、光の測定 1-7フラッシュ洗浄、フローセル 3-4フローセル

TaperSlit 1-5開梱 2-2気泡を取り除く 4-6交換 3-4仕様 B-4条件 2-22取り付け 3-6取り外し 3-5比較 1-5フラッシュ洗浄 3-4メンテナンス 3-3

物理的仕様 B-1

へ平均化

クロマトグラフサンプリングレート 1-11

スペクトル解像度 1-10ベールの法則 1-4, 5-8ベクトル

2 つの波長からの生成 5-3スペクトル、表現 5-3スペクトルコントラスト 5-3複数の波長からの生成 5-4

ほ本装置に関するガイドライン A-5

まマッチアングル、光度測定エラーの影響 5-8

めメンテナンス

注意事項 3-2定期 3-3

メンテナンス、フローセル 3-3

もモニター、検出器 LED 2-20

よ溶媒

UV カットオフ C-9–C-11ガイドライン C-2混和性 C-3–C-5粘性に関して考慮すべき事項 C-6バッファ溶媒 C-5ボトル C-6溶媒取り扱い時の一般的注意 C-2–C-3

溶媒アングル、光度測定エラーの影響 5-8溶媒の混和性 C-3–C-5溶媒の変化 5-8溶媒ボトル、位置 C-6読み込み

キャリブレーション定数 4-4ランプエネルギー 4-3

らラインスパイク 4-6ランプ

LED 2-20, 4-6交換 3-7取り付け 3-8取り外し 3-7冷却時間 3-7

ランプエネルギー、読み取り 4-3

れ冷却時間、ランプ 3-7レファレンス

スペクトル 1-9波長 1-12

索引 -4