Upload
vannhu
View
222
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
��
�����������
���������� � ������������������ ������������������������ ������������������������ ���������� ��������� ����� ������������������������������� � ��� �������������������� �������������� ��������� ������������������� ���������������������� ������������������������������������������������
������������������������������������������������������������� �� ������ !��������������� �����"����� � ���� � #�� $���� � ���� � %��� ������������&�'�� ������ #���������������(���� ������ )��*��� ������ %��+���� ������ ,������������(���-���������� #�������������������������������������� ���"����� ������ ���"����������� ������ ���������� ���� ��������������������� ������� �����������������
�������������������� �� ���������� �� ������� ���� �������������
�������� �������� ����� ���������� ��
�.&/�0�12/3�/4��5""&6/32���1�5���77��4&/5�233�&���77�58���/4"78�1/�6�1�2�/781���"6��3$65812��83��25503/�0&*�&6�5�1+/���
�� ��� � ��������� ������� �� ����������� ����������������������
�7������������&��������������(��������+�9����:�������.��������1�������4�������.�����������0��;��������3�������������(�����1���� <�=>�>%�)<���?���@�������������A ����'����
������������(������&��������������.�������4�������(����������+�9�����2��������.���������"����
�7����������������������������������8��������4������������4����������4�������(����������+�9����2��������.���������"����
�������
��������������� �������������� �������� ������� ������������������������� ���������������� ���������������������������������������� �������� ��������������������������������������� ��������� ����������������������� ���������������������� ����������������������� ��������������!"#���������� ������$�� ��� ������������������������ ���������������������������������������%�#&#'�������������� ��������������� �� ���������� �����������������������%()*'���������������������������������� ������� ������+�������� ������������������,���� ��������������������������������������������� ���� ������ ����������������&*"���������� ���� %�-����'��� ��./�0� �����1/��0 ����������� ������$�� ���� ��2.�3/ �����40��� �� � �5��� ���!"#������������� ���������� ������������%�6����'��� ��./��. ������� ������$�� �����.0��3 ������� ������������������������������� ��� ������ ���� �������������,���� ������������������������� ���� ���������!"#������������&*"���������� ������$�� ��
������ ��������������������������������������$�� ���������������
��������
��������� 5����� ���������������� ������� ���!"#����� ����� ���� ���������&*"��)��� ���� � �����������������������,����������� ���� ������������������������� ���� ��,��������5���������� �������� ���!"#����� ���,��������������$�� �������������������� ��������� ���� ����,������� �������#������������������� ���, ������� �� ���������� ��������� �����5����������������������������������������������������� ���� ���������������� ��� �� ���������������� ������������ ������ �� �������������&*"��������./�0� �����1/��0 ������� 5�����������%�-����'� ������$�� ���� ��� �� �,������2.�3/ �����40��� ������� 5�������� � ���5��� �����!"#�������,�����8����%��6����'� �� ����./��. � �� ��$��� ���� ���� ���� .0��3 � �� ��������������� ����� ���� ��������� ���������� �� ����������������������� 5���� ������������ ������!"#�����&*"������ ��� ������$��� ���� ����
9���,���:�&��������� ����������������������������$�� ���������������
����������������� ��� ������������������������������������� �
��
������������������������������������������������� ������������������������.���� ����� )��� ���� ����� ��� ����� ����� �9�����'������ ���� ���� ������ ����������������� ������������� ���� ����� ���������������� ������ %������������������������������������������������������������������������������������������B�����-�"������ #�7�� ������ %��
��������������������� � ��������2�5� ������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ���� ������������� 2�5� ������������ ����� ��������� ��������� ����������������������������������������1�������������� ���� ���� ��������� ��� ���������������� ����������������������������� ������������������+��������������5�������� %����������������9�������)%�����������������������������2�5���������������� ������������� ��>�����������=>�#,C��� �����������������������������������������������&����� �� ������������������ ���� ����������������������������� �������������������������� ����������������������2�5���������2�5�������������������������������������������������������������������
0����������9������������������������������������� ���� �������������������������������������������2�5��������������� ����� ������� ���������� ���� ���������������� ���� .���� ������� ������������������� �������� ���� ���������� ������������������� ������� ������ ���� �������������������������� �����������������������������������������������������������2�5������������������������������ ����������������������������2�5� ���������������������������� ����� �������� � ��� ������=>,#���.������������������������������������������������������'����������� �������?����������� ������������������������������������������������������������������� ������������ �����'������������� � ��������������2�5 ��������������������� ������������������������� �������� ����� (����� ������� ������������������������������� ��������������������������� 2�5������ ��?��� �������� ������������ ���������������������������������������
������������ ������������
������!�" ���� ��#�"�$�����%���&����� ���! ���������'�������������������
����� %?<�������� ���������� ������� ������������� ����� ��� #� 20��� �������� ��� ���������������� �.5�*D� 4������� 2����;���+��������������)<����������������������������#� 20��������������������������� ��*D��������2����;����+�������7��� ������ !��.������������������*����'����������������������9����������������'��������������������� ���������������������������������������������� ������� ����� =@=�� .���� ����� ����������� �� ��������� ����������� ������;������ �������� ������ ����������������������� �������� �����9������ .����� ������������������������������������������������*���������������������������� �� ������ �."�D� *��'��� �������� ����������������
���" ����'������� ���=#>� ������� ���������������
���������������������������������������� ��#C�������#��������������������������������������2������2�5��������������������������� ������������ ������������������������� ���������� ��&� 5������ ��������������������������������������������������������������������������� ��#C��� �����E � )C���18���������0�8��������= ����������� �������� �� ������������� ����� ���������������2�5��������?�������������5��������������� ��� ������������ ����������������� ��������� ������ ����� ��������������������������� �����������������0�8�������% ��������������� � �����������0�8�������! ����������������!,����'�'�������5�5�����= C�4"�������������� �������������� ���������������������2�5��������?�����������
#�"�����'��(����� 2�5���������������!��� ��
���� � ����� ��� �������5�5�?��������� ��������0�8��� �������������������������=C��� �� ���������������3�88D�*��'����� C����� ��;���� ������ �4"���*��'��� # � ����F�����'����� # � G�F�� �������� '���� �=��5���'������������������0�8������� � ���� � ������������������������������5������ ������ ,��
�;������;���������2�5���������������������� ��������� 2�5������ ���������� 2�5
��������� �������������
��
��9������ ������� ������� �� ���� !!�#<?��������� ����� �+��'��?.2��� ������ = ������� �������������������� ��������������9������������ ���� � ���� 2���� ��� ������9����� ����� ������������ ��� ������������ ������ ���������� ���� ���9������������������������ ����������"����� ����� � �������������������� ����� 2�5� ��������������� � ���� �������������������������������� ������ ������� ���� ������������������� ����� 2�5� ���� ��������������������������������� ��������������� ���������� ���������� ������� �������������
��������������������
(������ ������� ��������� ����� ���������������������������������������9������ ����� ��������� ������� �������'����������������������B������������������������ ������ �������������� ��9�� ���������������������� ���������������������� �������������������� ���������������+�� �����������������9����'����������������������;������������������;������������������� ���������� ����� �������������� ��������� ������ �� �������� ������� ��� ���� ������������� ���� ����� �������� ������������������������������������������������������������������������������ ��������������9������������������������������# C�;��������������������������������������# �E�< C;������������������������������������������������������� ���������� ����������> C;����� �������� �*������ =���������?������ �������������������������������������������������������������������'��������������������� ���� �������� �� �������������������������
���������������������������������������������� ��#C�������!�������#������������������������������������������������������������ ��������� �������@� ��� ������� 2�5��������� ����������������������������������� �*������ �8?����� ��� ������� 2�5���������������������������� ����������� ����*��������?�*���������;��������������������������������������������������;����������� 2�5�� ������ �� ��� � ���� ��������������������������������
(� %�"�� ���'��;������;���������2�5����������������
������ ��������� 2�5������ ���������� 2�5��9������ ������� ������� �� ��� ##$%&��������������� �������= �������� ������������������� ���������������9����������� ���� � ���� 2���� ��� ���� ���9����� ���������������� ��� ����� �������� �����*�������+������������� �������9������������������������ ���������
H��������� 2�5� ���������� ��������� ��������� ���� ��������� ������� ���������������� ��� �><�#%C�� ���������� ����������� ���������������>!�#>C��B������������������'���������������;���������2�5���������������������������������������� ���������� �����.I � #���1����=��
B������� ;��������� 2�5�������� ����������������������������������������������������������� �������� ������������ ����������������������������������������������� ����������������������������������������������������������������+������������������������������ ����;���� ����������������� ��������������;����� ���� �������� �������� ��������������������������������9�������������� ���� ������� ����������������� 2�5�� :���9������������������������������������������ ����?������������ ����������'���������������������� �������������������������������������2�5����������������������������?���2�5�������� ����� �������� 2�5� �������� ����������������������������������?������������������ ����� 9����� ���������� ���� �������������������������� ������������� ��2�5�������������������?�������������������� �������9��������������� ���������������������������������������������������������������?��� ��������� ���������������� ��������������������2�5�������������� �����������������������������������������������2�5����������������������������������������������������� ��������� ��� ��9����������������������������������������� ���� ���������������������������
2������2�5������������������������� ��������������������9����������������������� ���������������������������������� � ������������������������������������������9��������2�5������������������'������������������������������������������������������% ������� ���� ����� ���� � ��� ������! �������:��������������������������������������� ����� % ������� �������� �������
����������������� ��� ���������������������
��
��������� �������������
������� ������������������������������������������������������������������������������������������ ����!������������"�����������������������������������������������#!$���������������%����&���������'��(�)�
�����*� +�������������#!$�����������������,�������-��.�"/�������������� ����- �.��/����� �������������0,������������������������������������������������������������������!�"��#!$�������������������������&������1�������������������������������������2��������������#!$��������������������������0������&������3��#!$����������� ����������������2���0�������������������������������#!$���������������%����&���������'��(�)��
������� +�&���#!$����� 4!��������������������������#!$����������������������0*���������������������� 4!�������������������������0���������!��������� 4!������������0�������
�5
��� ����������?������������ �������������������������������� � ������?��� ��������������� ���������� ��� ���� � ��� ������������������������?�����������������������������������������'���������������������������� ���������������������������+������������������������������������������������������������������ �� �����! ������������������������� ! ������� ����� ���� � �� �������-(��9��� =>,#���8��� �� ���������� ��������������������������������������������������������� � ��� ������������������������(��9��� ������������ ���������� ������� � ��������������������������������������������������������������������������� ���������������������������
"���������� ����������������������������� ���������� ��� ����@� =�� 9�������������� ��������������������������������������� � �� ����������������������������������;���������2�5������������(��9���=>,#���������� ��������������������� ���������'����������������������0�������������������������������������������������������)��= ��=%�������)������������������ ������������������������ � ���������! ����������?���������������� ��������������������� ������'���� ���������� ���������� 2�5� ������������������ ����� �������� ������ ���
�������������������������������������+��������������������� ��9�� ��������� �������������� �������� ����������9������������������������)������.�������������9����� ���� ���� ���� ����� �)� ���� �������������������������� 2�5� ������������������������������������������������'�9���������� 2�5� ������ ����������� ��'���������������������������� ���������������������� ������������������� ���� � ���������������������'�����������!�����������������������������2�5��������?�������������������� ������� ������ ��� ��������� ����������������������������������� �������������������� � ������������������������������ ������ )�� 2�5� ������ ������������������������������#���������������������������������� 2�5������ ����� ������ ����9����� ������������������
B�������������������������������� ������������������������������������������� ������������������������������������ ��������������������� ����������������"�������?��������� ������������������� ������������������'�� ���������� ���������������������� �� ����������� ���� ��� ���� ����� ��������� �������������������������������������������������������������������������������������������������'�'�������������
Metode Isolasi Jumlah embrio Attachment rate (%) Tingkat Pembentukan Koloni Primer ESC (%)
Enzimatik 54 43 (79.63 %)b 10 (18.52 %)b
Immunosurgery 65 61 (93.85 %)a 28 (43.08 %)a
�������� ������������������ ������������������������������������������������ ����������������������� �����
������������������������������������������������6�������������������������-+7(�(�/��������������
Metode Isolasi Jumlah ICM Total sel ICM Profil sel ICM
Hidup Mati Viabilitas (%)
Enzimatik 20 468 438 30 93,59a
Immunosurgery 20 487 480 7 98,56a
�����������������������������������������������6�������������������������-+7(�(�/��������������
%������ 8���������#!$���������������������������������,������������������� ���
����������������� ��� ���������������������
�9
��������������� ����)$ ����%����$ ��#�"����������
B�������;���������2�5�������������������������������������������� ���������� ����� ���� �������� ������������ ������ �������*������ !�� � ����� 2�5� ������������ ����������������������� ����������������.J � #����������������������������"����� ����� �������������������������������������2�5� ������������������������������������ ����'�����������?�����������>!�<#C�����)!� <C����������� �.J � #������������� ���������� ����,>�%!C� ���� =<�#�C� �1���� ���� +�� ������������������� ��9�� ��������� ��������������������������2�5�������������������������������������������������������������� � ���� �������������� ���������������������� ���������������������������������������������������
������������ ����������� �������� ����� ������������������������������������������ ������� ���� ��������� ������������������������������������������������ ������ ������������������������������������2�5��������?�������������.�������������������� ������� ����������� �������� �������������������������������������������������������������������������������������������������'�����2�5������������������ ��2�5�������������������� �����������������������?���������������������������������������������������������;����������������������+����� ������� ����� ;��������� ������ �������9�����������������������'������������������������� ��'���������� ��������� ������������������������������2�5� ��������������������� �� ���� ��������� ������ �������� ������������� ���������� ������?��� 2�5������������������������ ��������������������������������������������� ����?���������������� ���������������� � ��������������������������������� ���
.�������������2�5�������������������������������������������������������������������������'�����������������������2�5�������?��� ��������� �*������ ����� .��������������� ����� ������� �������� �� ���� ������������������������������������?������������������������������������������������������ ��� ��������� ��'���� ���������.���������������������������������� ��������������� ������������ ��� ����� ������� ������ ���������������� ������������������������������?���2�5����������2�5��������������
������������������������ ������������������������ �������� ������ ���������������� 2�5�������?������������
��'���������������� ����� ������������������������������ ������� �����������������������������������������7�� ������� !������������������������������������������������������ ����������� �� ��� ����'����= C������������������������������������������%<C��+����������������������������������������������������������������������� ��������������
#���������
��������� ����������������������������9��������� ���������� ��� ���� �����������������������2�5��������?������������������������������� ��������������������������������������
�'����������#����K
.��������� ��������� ������"..���������2(12�KK����������������������������������������� ��� ������� ���������� ����� ��������� ��������� �������!� ��������� ��� 2�������.��������� "������ � 0����� ���� �����������'������ ������������ ������� ����������������� ��� ������ 7������������� 4(+� 2."��������������������������������������� �����������������������������
��*�������#�
"�����(&��:��� �����19�������+?1�6������H8������;�� ���� 85� B������ � ���������������������.�������������� ���'���������2����������� �' ���������' ��>=@=<>?� =�
"�����28��+�(����������������3��8����� #�3���������������������������������� ���'�����'������'���'� ���������������������' � ������� ���%<@�%�E,#�
�� ��:����B������8�&����'����.�" ��'�����5�����������85�B������� !��.�������������� ���'���������������'������;������������� ���!<)@=!>=?=) >�
*���L?5��6?��$����+?L��������?6�B������7���?7����� L?8� $����� �?5������� 7?$������+�:������:�7���6�����������L�6����� %�������������������������'�����'����������;�������������������� ���'������'��������������==!@���>?��!,�
+�������:(�(������:�"�������& ����+�7���
��������� �������������
�:
:+�7���� � ,����;�������� ��� ����'����'�����'� ���������������������� ������������ ���'� ����� '����( � ����� ������� ������!)�@��#?�<�
(��������.(5�(����(�������:�7����1&�"�����77��������� )��3����'� �M���� ��'�������'������ ���������������������� ���'�����'��������)���"�������0�8�= =@=��,,E=��<=�
(������*&����������� #��3��������'���'����������������������������������������� ���'�����'����������������������*�"�����) ������=%@�!#�,E!#!)�
7��5����$�����6�+����7�:�����L�$���������B?+�B����� � !�� 2�������� ���� '������ ������ ���'� ����� '��� ����� ���'��������' ���������' �����! ���%#@)�>?)!)�
7���+�� :N�7������B���������5?1�3�� ����&(��������+���������B7�6�������+������ !��5�������������������������� ���������'�������;�����������������22���' ������ �� �����=@=#�?=%=�
7��:��&+�����:�"������?+�6�����5��� ����� %����������'������'��������������������� ���'������'��������)���"������0�8�= !@#%<<?#%>!�
5�������1��� %��.����������������������������� ��� � �� ����� ���� ����������������������������������������������������� ���� ���'� ����� '�����'���7�������.���������������5�����4������.�����������0��;��������3������������
5�������1��8�"��������� ����(�0 �� � ,�.���������������������������� ��������� � ���� � ����� ��� � ������� ���������������� ��� �� ��� ������� ��� ����������������������������7�������.��������+����"��������� 4������� .����������0��;��������3������������
.����885���5���������88�.�������������5������������� )���40?*5�����'��������������� ���'������'���'����������������������9��������'����+������� ��*��<@=?#�
&�'�����.�����'����:8�&�����8����������"������� � #���'�������� '���������� ��������?�����'����'�������;����������������� ���'������'����,� -"���*������=>@=!)=?=!)!�
�������5��5�"���������� ����H�5����� %�� ����� '��� ���� �������������� ���� � >=@==#<?==%#�
���������""�(��9����=>,#��2����������� ��������������' ����.��'��)���"�������0�8,�@# >>?#= ��
B�����85���(&�"������� #������ ���'�����'��@�������'���������;�������������� ����'������� ����������' ��<#@%!#?%,<�
$����:?N��L?"�6���"?4�5���B�+��6���8?L$�����*�+������44�5����L?5�$�����$?�B������?3�7���"1�7����8.�L������� %�3����� ��O������������ ��� ���� ���'� ����'�������'���� �'���������������������������� ����� '��� ! � ���� ����) ����� � �=,@><=?><%�
����������������� ��� ���������������������