463.вирусные болезни нарцисса (narcissus l

На правах рукописи

АРУШАНОВА Елена Сергеевна

ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА(NARCISSUS L.)

И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ

Специальность 06.01.11—защита растений

Авторефератдиссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

МОСКВА 1999

Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

СП''

Диссертация выполнена на кафедре защиты растенийР< свинского Университета дружбы народов

Наушые руководители доктор сельскохозяйственныхi'j\ л, профессор Ю. И. Помазков, кандидат биологическихHJVK, старший научный сотрудник Л1. А. Келдыш

Официальные оппоненты доктор биологических navKВ. В. Мазин; кандидат биологических наук О. О. Белошап-кииа.

Ведущее предприятие — Всероссийский институт защитырастепли, г Санкт Петербург, Пушкин

Защита диссертации состоится «-Л» umct 1999 г

з < II* > час на заседании диссертационного совета Д 120 35 09в Московской сельскохозяйственной академии им К А Тими-

Адрес 127550, Москва, \л Тимирязевская, 49 УченыйЧСХА

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХААвтореферат разослан « {<L-s> илоЛ . . 1999 г

Ученый секретарьдиссертационного совета—


. . ОК1ЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАКОТЫ

Актуальность исследований. В настоящее время OIMCIUWTC* тенденциивозрастания внимания к качеству цветоводческой продукции, а также мерамно обеспечению ее фигосанш арной безопасное! и. особенно при женоргерастительного материала. И мире доход от продажи декоративных растенийсоставляет около 50 миллиардов долларов, ич них 12 приходится на ЗападнуюЕвропу и 6 - па США и Японию. В 1'кроне лидерами являются Нидерланды(50 % мировой продукции цветоводства), а также Данин. Кельтия, Германия,Италия, Израиль (l.avvson, 1946). Луковичные культуры приобретают всебольшую популярность благодаря не юлько их замечакмьным декоративнымсвойствам и незаменимостью при создании ланлшафюв в ранневесеннийпериод, но и тем, что они относятся к категории важнейших ныгоночныхкультур, позволяющих получать высококачественную продукцию ишмм'ч;время (Вылов, Зайцева. 1990).

Среди декоративных луковичных растений нарциссы занимают одно и»ведущих мест, уступая лишь тюльпанам по разнообразию окраски цветка.Увлечение згой культурой началось в • XIXвеке, когда в Англии, были получены многочисленные гибриды между

трубчатыми п крупнокорончагымн нарциссами. Современные сорта сложныегибриды, многие из них полиплоиды. Коллекция ГНС РАН им. I I. I). Цицинанасчитывает 265 крушюкороичатых сортов; Кб - трубчатых; 47 -.мелкокорончатых; 34 - разрешокорончагых; 2ft - махровых и 26 - из всехпрочих групп. "•',-• •

Промышленная основа цветоводства имеет свою специфику, котораяподразумевает. широкую интродукцию посадочного материала, еговегетативное размножение и монокультуру, что способствует интенсивномуразвитию болезней и расширению их ареала (Бойко, 1990).

. Сдерживающим фактором промышленного цветоводства являютсяинфекционные болезни, среди которых вирусные занимаю! наибольшийудельный вес (Макутенайте. 1992). Они вызывают потерю декоративныхкачеств, ухудшение физиологического состояния растений и, в конечномсчете, причиняют значительный экономический" ущерб. Интенсификацияпроцессов производства усиливает вредоносность вирусных болезней иособенно смешанных вирусных инфекций. Особенностью вирусных болезнейрастений является гетерогенность вирусных Популяций, представленныхразличными вирусами и их штаммами с разнообразными биологическимисвойствами. Отрицательное влияние вирусов на репродуктивную способностьрастений приводит к фенотяпическому изменению признаков сорта.

, ЦЕНТРАЛЬНАЯНАУЧНАЯ ЕГ-SJtttOTEKA

Моск.им. К.

ИНВ. №


снижению vpo/ная (скор iiiiKiuin ниыочноп про I\KHIIM на 40-70 "a II

нырож luniio i«iui[iiiiiM4iiiiii\ к nupvt. i\i соршн (V1inpo<|) пиша \l)42)

1'с<срнаЦ|1Я lllip\v.llll 1ШС1ОЧН11Ч К\ 1Ы\р » K\Ll jpitllkOHMX II U) ЮНЫХ II

ICCHIIX ipciieciiMx paciciuiux ciioeoiicniVei HI iskiiHaiuiio и Шфк\ 1Я1ИШ

вшГл in к. ни lie lOLiaioiuocu cue iciiiiii о eoeianc и paeitpocr ранении

mipvcon e южноеII. n\ inailiifciiiKii oieMeliuie' мер оорьоы с ними e ie ia.ui

ак1\.Ы1.пмм шчченпе мои I p\шп i naioieiioii

Цен. и i цачи nee ie ижапин \ I I , L I I H iiiiepai\pin i\ iaiuii>i\ и

lipe IBapiile ii.iu.ie nee ie% юн шия проно шмие n I 1>С РЛ11 eiui leie n.eiBVior о

широком распространении Blip\eoii p и m'llli.ix |акеоиомичеекн\ rpvilll в

K O I ieKi[iioiiiiij\ I I . IC.I* leiiiDix leKopanmiiiIN ЦНСШЧНМЧ К\ n.np

И екнш е ним i i 1кже lie [oeiaiouiioii щччеппоеп.ю I.IFMKIKI вопроса

кошнкаег iieoiixo I I IMOCII (ю ice ici LIMIOIO щччепня ннр\сон ltd pat нгшыч

npc iLi.mnie wx N truwis I Ценно наших псе ie KiRaiuiii являюсь

oiKieiioii шпе мер oopi t>i.i с внр\енымп taoo и-нлипямп на ынной к\ ibivpc H

спя in с >шм емки 1пс1> е ie' (мощие* ia.ui'iii

1 !1<\чпп. ciciieiii. раепросiранения и харакир енмпюмов Hiipvciihix

iat">o leiiaiiiiii в ко i icMinoiniMx насаж юнпях Narcis>us I

2 Olipe ic llllk ми юной соеiаи нирчеов и Псрспосчпко» и BMte'iiiH.

lOMiiiiiipvioiuiic i шп • инфекции на нарциссах а киокс на рапнчных

npc lciaBiiic |ях поря ika I iliales про ician ICHIIUX u ко i ICKIIUHX

фон loiHiii оранжереи I laniioio (хианнческою caia

^ Paipaooraib ш м и н ы спсюмы oi юров юння Narcissus I для

v iv чтения качееша юкорашвпой цве-ючпои нрол>кшш и

сохранения ви юною и сортовою рапкюбрашя колпекиий

Научная почини paooibi Па нлрциесах днап юстированы

нсемононенпме моп к\ |ычре внр\сы Bean >ello\\ mosaic virus ( B Y M V )

Potato virus Y (PVY) Carnation latent virus (Cml V) Carnation mottle virus

(CrnMV) Iobacco necrosis vims (TobNV) Arabis mosaic virus ( A M V ) Tomato

ringspol virus (lomRSV) ЛИ alia mosaic virus (Л1 MV) Raspberrv nngsput virus(RRSV) Tulip breaking virus (TBV) I obacco rattle virus, (FobrfV) Всеговыявлено 16 вош\'днre icft прннатежатих к 10 таксономическим группам(Potv- Potex- Л1 MV-group Tobamo- Nepo- Cucumo- Carmo-, Carla-. Canno-Fobra- Tobacco nee-osis group)

И»>ченне характера распространения вирусов на различных сортахNarcissus L и представите 1я\ фонической и субтропической флоры порядкаLiliales выявило наличие смешанных инфекций доминирующимикомпонентами которых являются Tobacco mosaic virus (TMV) и Cucumismosaic virus (CMV) Число компонентов комплексной инфекции достигает 6


(сорт Pastelina). Пока WHO, что частога встречаемое™ AMV; RRSV; TobNV;lomRSV: BYMV; TobRV составляет 18: 7; I I : 5 - 6; 12 и 5.3 %соответственно для каждого вируса

В результате проведенных исследовании, показана возможностьпередачи на нарциссы CMV двумя нсспсцифичсскнми нидамп глей:.Macrosiphum rosae (I..) и My/us cerasi (I'.): BYMV - Aphis labae Scop., a I'VY -A. labae Scop, и My/us omatus l.aing.

Проведена оценка устойчивости-.растений Narcissus I.. (12 сортов) к 5видам глей, регулярно выявляемых и посадках нарцисса. Лпалтустойчивое! и различных сортов не выявил образной, обладающихабсолютной устойчивостью.

Определены размеры жепданта. обеспечивающие )ффсктнв»юс1ьоздоровления от комплекса вирусов при максимальном выходе растении:составы питательных сред для получения алкснтинных побегов и индукцииризогенеза. ' •

Впервые в растениях Narcissus 1.. и некоторых представителях порядкаl.ilialcs диагностирован вирус, серологически родственный Х-вирусу шалота(ХВ111: ShXV) п прннадлежттш. как мы предполагаем, к ipyinie XB1II-подобных вирусов (Вишничснко, Лрушанова. Келдыш и др., I9W).

Практическая значимость работы, В результате комплексныхвирусологических исследований на культуре Narcissus I,. получены данные повидовому составу вирусов, характеру их сочетаний в составе комплекснойинфекции, особенностям распространения. Они являются обоснованием дляра<работки и усовершенствования комплекса профилактических мероприятийв создании системы противовирусной защиты коллекционных насажденийNarcissus L. *

На основании экспериментальных. данных с учетом имеющихсясведений разработана методика оздоровления нарциссов от комплекса

• вирусов, Определен оптимальный размер , жеплапга для полученияосвобожденных от вирусов растений.

Идентифицирован новый ХВШ-подобный вирус на p. Narcissus L. инекоторых представителях порядка l.ilialcs. .

• Апробация работы. Материалы доложены на XYII Международномсимпозиуме (23 - 27 June, 1997. Beihesda. USA): на HI Международной

.конференции «Цветоводство -сегодня и завтра» (Москва, 1998).Публикации. Основные результаты исследований опубликованы в 8

печатных работах. •Объем и содержание работы. Диссертация изложена на 147 страницах

машинописного текста и состоит из введения, 15 глав, выводов и заключения.


1 со кр/Мп 2U I.IO inn , и i иоыриропаиа 9 <|)o101 рафиями и рисункамиСписок iinipaivpi.i нк IH)4JCI 2lW панмишнанпн in коюрмх 220 паиноыр nun i\ чшкач

( О ( Н ' Ж Ч Ш И 1Ч1.О1Ы

I «>Ь U )l> ,1И 11 1>Л I У1'Ы ПО I f Ml

I) uowpc нмсраирм прнкс KIII.I мчГыиклции not ie uw\ юг. лающиечарам (.рнсшкл ocnouiu.iM инрчсным taoo юнанпям поражающий ролNarussib I особспноыям urn» IOI им к\ 1Ы\ры lloipoono рассмотрены иобсуж кии распространение и »pi. юное нос 1Ь ннр\спы\ |або ювапин,поражающих шрцииы ИМИ p.icnpocip ШСПНЯ нирмон мсн>1Ы и\иссле тиамин и оиюшшс прием и HIIICI рмронашкш ирогнвокир\спон1.НЦН1Ы ОсоГнк. 11IMIM.1IIIH. \ 1С ICIIO I1LIIO IM0H.1IIIIH) кЛ 1ЬГ>рЫ allllkdLlbllblX

мериекм как uii<oio m нажнепших мего юв освобождения растении отЙИр\СМОН ИнфскЦПН

2 УСЛОВИЯ МЛН РИАЛЫ И Ml [ОДЫИСС'И ДОВЛНИИ

')кик.риме1па.1М1ан работа пронолп мсь на кафелре taiuinы растенийРоссийскою Унинсрсшоа ф^жбы народов и в оглею laiuiriы растенийГ явного 6oiaiin>K(.koio ca.ia им II 13 Циаина в течение 1995-1999 i г

Основными оГ)1л;мамп пес кмований яв1Я1Ись прелаавитепи порядкаLihalcs семспс|ва Amarxllidaceae рол Narcissus L, также проводилискринпиш на «араженность вирусами среди различных представителейтропической и с\ бтроинческон флоры

Л I» выявления и идентификации вирусов испотьзовали общепринятыесхемы со сгащаргным набором шиикаторных расгеиий ( Fulton.1960, 1967,Murant I')70a 11ома(кон. 1978 Починков Келдыш 1979, Келдыш, Помазков,1980 Index оГ , 1983)

Оценка устойчивости форм, сортов и видов к возбудителям,переносчикам и векторный перенос проводили по стандартным методикам(Помазков, Келды.и, 1979, Втасов и др , 1990)

Испытание чкепериментальных растений посредством переносчиковпроводили в боксах при оптимальной температуре 1 8 - 2 3 °С (Bnggs, 1959,Келдыш, 1967) Применяли naipyiKy от 1 до 100 особей Обособленныепопуляции глей-переносчиков в отношении которых проводится оценка на


устойчивость, поддерживали на основном кормовом растении подизолятором. Наблюдения за характером поведения переносчика проводилив течение 24 часов. Учитывали число особен, оставшихся после подсадки.Если череч сутки на исследуемых <1юрмах не остается пи одной особи, то ихотносят к иммунным. Растения, на которых остается исходное количество.тлей или более, считаются восприимчивыми и. могут рассматриваться вкачестве кормовых растений. Растения, на которых сохранилось меньшеисходного числа особсй,относят к заселяемым (Келдыш. Помачков, 1980).

Все /женеримешгальные работы по инфицированию и тестированиюрастений проводились и контролируемых условиях, исключающихвозможность вторичного и перекрестного заражения.

Биологическое тестирование выполнялось по типоным для изучаемыхгрупп вирусов методикам. В набор травянистых растсний-индикаюров ;щямеханической передачи входили виды: Nicotiaita tabacum; N.ruslica; N.glutinosa: Petunia hybrida; Datura stramonium: Cucumis sativus; Chenopodiumamaranticolor; Ch.quinoa: Phaseolus vulgaris. ; . ; ' .

Для приготовления инокулюма использовали 0,02 М фосфатный буферрН 7,5-8,0 с добавлением различных стабилизирующих соединений: кофеина,ДИЭКА, 2 М1-, никотннсудьфата, активированного угля, аскорбиновойкислоты и iip.(Cadman, 1956; Fulton, I960; 1967; Picrpoint, Harrison, 1963;Lister, 1964; Метьют.' 1973; Гиббс. Харрисон, 1978). В качестве абразиваиспользовали целит или карборунд: непосредственно после инокуляциилистья промывали водой, что способствовало увеличению числаобразующихся местных поражении, а затем растения помешали в затененныеусловия на несколько часов для повышения восприимчивости^ Holmes, 1929;Bawrden, Roberts, 1948). В качестве инфекционного матсрихта использовалилистья Narcissus l.., травянистых индикаторов с признаками заболеваний.Очистку ; и концентрирование препаратов выполняли с помощью

•дифференциального центрифугирования но схемам, которыерассматриваются » соответствующих разделах данной работы.

' Инфскционность препаратов контролировали методом биологического, тестирования на травянистых индикаторах, применяемых'для диагностики и

идентификации определенных вирусов .* - • Видовой состав тлей в биоценозе декоративных луковичных растений'.определяли методом желтых чашек Мерике (Moericke. 1951).

При диагностике и идентификации вирусов, поражающих Narcissus L.,использовались: визуальная . оценка зараженности, серологический тест(двойная иммунодиффузия в агаровом геле по Ouchterlony (1953)),


иммупофсрмшгнми JIMJIHI f I ISA (Clark Adams 1977 Ьобкова. Чирков,1ЧХ1 Гпутова. I48S AT.HK.KOB I4SS I angveld !«W6 Beck, Husted 19%) сIICIIOJK.«поищем геы-сисгсч прошводства Ml У ПИИКХ, НПО «Ьиочар»Л 1я постановки сероло! ическич реакции испо1ыова.ш 1акже сыворотки иантшены, но юченные ш \чреждепми Ьодгарнн I о ишнлпн I ермапин СШАКроме гою, примени шсь отечес шейные сыворогкн и лишены m Институтабшюр|-аничсскои химии им Шемякина, 1СХА НИИКХ

Регистрацию регультагов нммупоферментного анализа проводили наадсорбциометре фирмы «f)>nattch» модечь HR-700 «Microplate Rcadcn>Ссролш ическому aiiaiiiuy метошм иммуноблоттиша подвергалираспгге 1ьные жстракты после низкоскоростпого центрифугирования (10 000\ g 30 мин ) и очищенные прспарагы Экстракты по 1>чали in свежих ичизамороженных щетьев исследуемых сортов Листья гомо1сшг1нровали нахолоде в ступке в присутствии эксграгирчютего 0 2 М ка.нш-фосфагно1 обуфера. рИ 8 5

Иммупоблоттинг проводили в соответствии с протоколом,исполыуемым в качестве стандартною (Пшнннчсико и др 1996,Vishnichcnko et al, 1994) В работе исполыовались ангисыворотки противрекомбипактно! о капсилною бе 1ка ЧВШ (As 37) и рротиввысокоочншенною препарата интактных вирусных.частиц ХВШ (As I 4)

'Электронно-микроскопические исслечования проводили в ччектронноммикроскопе ЕМ-301 (Philips) Кшпрочь осуществлялся как в очищенныхпрепаратах, так и прямым методом (Brandcs |Ч57, Проиенко 1966)

Методы нммуносорбции и декорирования пеполмовалн вмодификациях Вишниченко В К, Стельмащук В Я , Завркева С К (1996)

Пассаж ХВШ-подобного вируса ш Narcissus L (сорт Super Star)проводили на 2-х недельные сеянцы шалота A ascalomcum (cr Creation)методом механической инокуляции при температуре 25°С и отнооггечьнойвлажности 70% Тест-растения содержались в контролируемых условиях втечений 3-4 недель Присутствие в них капсилного белка ХВШ-подобногорегистрировали на основании результатов нммуноблотинга с использованиемAs I 4

Оздоровление растений от вирусных болезней проводили методомкультуры апикальных меристем Поверхностная стерилизацияосуществлялась 0,1 % раствором сулемы или 0 I % раствором диацида, времязкепозиции 7 минут (Высоцкий, Шершень, 1993) Апексы выделяли припомощи препаровальной и п ы и малого глазного скальпеля Техникаприготовления питатепьных сред, стерилизация бокса, инструментов,табораторной посуды, растительного материала, методика вычленения и

- 6 -


посадки апексов, а также выращивание растений-регснсрантов общепринятые(Бугснко, 1964; Калинин. 1980; Трофимец, Остапенко, Бойко, 1985).Основная питательная среда содержала макро- и микроэлементы поМураснге-Скугу (Murashige, Scoog, 1962), сачарочу 30 г/л; агар-агар 7 г/л: рНсреды 5,6-5,8. Размер экспланта контролировали с помощьюокулярмпкрометра.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Симптоматический анализ чаболсваний, вычываемых вирусамина рачличных сортах NARCISSUS L.

, . Таблица I.Симптоматический анализ чаболсваний на некоторых

сортах Narcissus L.

Тип симптомов

Свстло-челеная крапчатостьЬ'слесая крапчатость •...,. >.'

Желто-челсная полосчатость . • •

Желто-белая полосчатость

Желто-челеная штриховатость

Светло-челеная илриховатость

Краевой хлороз •

Деформация (морщинистость),краевой хлорозГофрнрованность листовой пластинкиПестролепестность цветков ;

Измельчение растений, отсутствиецветения

Сорт

She; Gipantic Star; I.ady LuckYellow Star; Selebrito;Artist's Model; Sioux •KissprolT; Bridal Rose; Shane'sCas'le; Ullimus; Romi Barrow; .Lord Nelson; VivexFxplorer; Victory; Credo;SpectacularScarlett О' Нага; Lime Chiffon; .Biscaine; Gigantic StarAm bergate. Explorer,White PlumLord Nelson, Walt Disney,CarltonUndertone, Soldier Brave, Credo,Selebrito, Honic TiresAmbergate, Scarlett О' НагаDaydream, Spectacular, .Lemon Show, Artist's ModelCredo, Patriarch,Feeling ducky. Kindled


Исосшнания iipomi ШМЫС нами в IW^-1998 г г, свидетельствуют ошироком pticiipocip.iiK.Mnn и накоплении вирчеов pa зычныхыксоиомическич ipyini мл про leonine IH\ сем Amaryllidaccac в жосистемахГ ЬС Раысния с нрншаками нирченон инфекции выяв 1с'ны во всехколлемшоннмч насажденпяч

Н реч\ ibiaie обе ic um.iniiii КОЛЛСКЦИОННЫЧ насаждений Narcissus L Втечение |ЧЧ*-1ЧУ8 i i \ciaiiouiciio что внешние пришакн вирусныхзаболеваний варьирмог По пш\ симптомов их можно рдиыигь нанеско ibko ipymi (laui I)

Основной спектр симиюмов - MOIJIIMI иолосатос1ь шгрнчонаюсть,песгро iciicciiiocib цветков деформация лиыьсн краевой viopo-»,измельчение pacieunn oicMcmiie цвепенпя —отмечен _ нами наколлекшюнныч поса.1кач нарциссов

Установлено, "то нреоо иыаюишмн на ку|ылрс являются прильнемжечю-ic leiioH по юсагости и ^формация (моршиннсюсть)

11а некоторых copiax 01 мечено сочетание симптомов, например,деформация шегьев и ипрнчоваюыь (Scarlett О liar* Ambergate),деформация и iiiMc н.чение растении (Credo), красной хлороз и желго-«лен<1я-полосатость (1 ord Nelson)

Количественный учет больных растений в динамике свидетельствует отом. что уве шчнваегся и пропет поражения сортов (габл 2), причем даннаятенденция отмечена не только на культуре Narcissus L . но и на другихлуковичных культурах

Таблица 2Распространение вирусных болезней в культуре Narcissus L

по годам изучения

Периодизучения

(года)

19861995-961997-98

Культура

НарциссыНарциссыНарциссы

Количество сортов (шт )/ % от общего числасортов

Обсле-дованосортов

457/100239/100239/100

% пораженных растений в сортедо 10%

386/84,430/12.616/6.7

10-50%

36/7,979/33.120/8,4

>50 %

6/1,385/35.642У17.6

100 %

25/5,545/18.8161/67,4

-2-


Из данных таблицы следует, что вирусологическая ситуация вколлекционных насаждениях за период с 1986 г. Иретерпсла значительныеизменения. Сорта, в которых было поражено 1 0 0 % растений, в 1986 г.составляли лишь незначительную долю от всей коллекции ( 5,5 %) . К 1998году больше половины обследованных сортов нарциссов оказалисьпораженными на 100%.

В связи с данными по расширению спектра хозяев вирусов,поражающих Narcissus L., за период 1996 - 1997 гг. были проведеныисследования, в частности, визуальная диагностика, на представителяхпорядка Liliaies (открытый и закрытый ipyirr). • . .'

Визуальный анализ и обследования растений из различных семействпорядка l.iliales показали наличие растений с симптомами вирусныхзаболеваний.

Таким образом, отмечена тенденция распространения н увеличениястепени поражения, а также стабильное присутствие вирусной инфекции, вцелом типичное для большинства сортов.

Мониторинг распространения вирусов в коллекциях нарциссов.

Методом двойной диффузии в. геле было испытано 9 сывороток кразличным вирусам и проанализировано более 100 сортов Narcissus L. свыраженными вирусоподобными симптомами.

Согласно полученным данным, в коллекционных насажденияхоткрытого грунта из основных возбудителей, зарегистрированных нанарциссах, нами выявлены: Tobacco mosaic virus (TMV) - на 5 сортах;Cucumis mosaic virus (CMV) - на 9 сортах. Из несвойственных возбудителейвыявлены: Carnation mottle virus (CrnMV) - на 13 сортах; Soybean mosaic virus(SMV) - на 19 сортах; Chrysanthemum virus В (ChrVB) - на 18 сортах.

• По данным ДДА уровень распространения на изучаемых сортах такихвирусов, как CrnMV, SMV, ChrBV, TMV и CMV составляет соответственно54,2; 79,1; 75,0; 20,8 и 57,5 %.

Согласно данным . серологического анализа, проведенного : методомдвойной диффузии, в коллекционных насаждениях преобладают: SMV;CrnMV и ChrVB.

Растения различных сортов Narcissus были также проанализированы спомощью ИФА (ELISA), как одного из наиболее чувствительных и точныхметодов. В результате анализа, проведенного в культуре Narcissus L. быливыявлены: Narcissus mosaic virus (NMV) - на 5 сортах; TBV - на 3 сортах;TMV - на 14 сортах; ALMV - на 6 сортах; AMV - на 1 сорте; CMV-Hal6


юртах, Cml V - на 15 сортах CmMV - на 3 сортах TobRV - на 2 сортахPotato virus S (PVS) - на 1 сорте, PVY - на 7 сортах, lobNV - на 4 сортахTotnRSV - на 2 сортах Hean yellow mosaic virus (BYMV) - на 4 сортах RRSV- на 2 сортах

IJKIIM образом но данным ИФА, на ьол юкцнонных насажденияхNarcissus I к числу доминирующих можно отнести TMV, CMV и Cml V

Таблица 3Распространение вир) сов па Narcissus I и раыичных представите 1ях

порядка 1 lhales

Количество видов/сор гов

Lilialcs* S видов

Marcissus L ** 13 сортов36

14156

144

9

1116

4

15-312

[ pyuiui вирусов

Pol\-

Л1 MV-

1 obacco Nccrosis-

Potex-

ГоЬапю-

Nepo-

Cucumo-

Carla-

Carmo-

Tobra-

Ro {будиre in

PVY, FBV, BYMV

AIMVi

lobNV

NMV

TMV

RRSV, TomRSV,AMV

CMV IAV

CrnLV, PVS

CmMV

TobRV

* - H I пртсстнроваиных 16 видов** - in прпгесгированиых »4 сортов


На представителях тропической и субтропической флоры по нашимданным были зарегистрированы: TBV - на 3 видах (Polianthes tuberosa;Tupistm sp.; Amaryllis beladonna); NMV - на Semele androgina; CrnLV - на 4видах (Crinum asiaticum; Chlorophytum sp., I; Polianthes tuberosa; Amaryllisbeladonna); ALMV - на 3 видах; CMV - на 10 видах; TMV - на 6 видах;Tomato aspermy virus (TAV) на Asparagus setaceus; AMV - на видах; TobNV -на Tupistra sp.; TobRV - на Zcphyranthes Candida; TomRSV на Chlorophytumsp.2; BYMV - на 2 видах.

Таким образом, по данным H<t>Ai на растениях сем. Liliales такжепреобладают TMV и CMV. •

На культуре Narcissus L. и представителях порядка Liliales обнаруженыосновные: NMV, TMV, CMV и несвойственные вирусы: CmLV, CmMV,RRSV, TomRSV, PVY, PVS, TBV, BYMV, AMV, принадлежащие кразличным таксономическим группам (Табл. 3).

Изучение характера распространения вирусов на различных сортахNarcissus L., а также в пределах видов порядка Liliales, в коллекциях выявилопреобладание смешанных инфекций (табл. 4).

Таблица 4.Распространение смешанной инфекции на Narcissus L. и

видах порядка Liliales по результатам ИФА

Число 'сортов и видов

Narcissus L;34 сорта

порядок Liliales16 видов

Количество сортов и видов со смешаннойинфекцией/%

моноин-фекция6/17,6

5/31,3

2 возбудителя8/23,5

5/31,3

3 возбудителя11/32,4

3/18,8

более 3-хвозбудите-лей

9/26,5

1/6,3

Показано, что, как правило, в составе комплексной инфекцииприсутствуют от 2 (сорта Undertone, Credo) до 6 (PasteUna) компонентов уNarcissus L. и от 2 (Veltheimia viridifolia, Asparagus setaceus) до 4 (Polianthestuberosa) у видов из порядка Liliales.

Присутствие TMV, CMV, NMV, PVY, TobRV было подтвержденоданными биологического тестирования. Иэоляты NMV, CMV, TobRV иTomRSV, выделенные из нарциссов, в некоторой мере отличаются пофизическим показателям и эффективности передачи от типовых штаммов, а

. / ; ' •" ; ' •• • - и -


также июлягов н« бобовых к\льг>Р юмагов и тюльпанов ( Волощ\к, 1985,Зитикаите 1488 Тертяк 1490)

Но морфоло! ическим свойствам мрегнырнрована идентичностьтиповых штаммов (по pew штатам яектронпой микроскопии)

4. И1УЧ1ПИЕ РОЛИ ПИ И В РАСПРОСТРАНЕНИИ ВИРУСОВНА NARCISSUS I

Извиню, чго распространение фитовирусов тесно свжано сра1лнчными переносчиками которые являннея )ффективнымн факторами ихпередачи в прирохе (Развя шша, 1475 I иббе Харрисон 1978) Исхош lit»гого для разработки мероприятий по ищите раосний от вирусной инфекциинеобходимо шучение фпны переносчиков и их выимоотношепии свирусами Наиболее активную и чногочиеченную фуппу переносчиковвирусов растениП представляют I m (Aphididae)

Нами в экосистемах текоративных ЛУКОВИЧНЫХ кутыур выявлено 15видов i.iL-и Данные полученные на основании исполыования жсл1ых чашекМерике, свидетсльстн\ют о наличии в составе сборов ви юв г icftприуроченных к pat шчным кульivрам (Aulacorthum solani (Kail) M>/us cerasi(F), Hyalopieras pruni CJCOITT D\;.aphi!> ы>гЫ Kalt ) наряду с вшами,характерными для цветочных растений (D\saphis tulipac Ud Ь Macrosiphumrosae(l ), Macrobiphum Iih (L ) My/us ornatus I amg)

По речу чьтатам вщуальных набпюдений (в динамике) на нарциссахзарегистрированы - Myzus percicae Su!z A solani

Таким образом, отмеченные вилы глей правомерно рассматривать вкачестве потенциальных векторов вирусов на тучаемых кучьтурах

В современной чкологической обстановке наблюдается усилениевредоносности и распространения несвойственных ряду культур рапичныхвирусов Огому способствуют номейетвия стрессовых, а1ггропогснныхфакторов и приемов, используемых при интенсивных технолошяч (Келдыш,Помазков 1985. Кетдыш 1995) При этом формирование новыхпатологических комплексов происходит на фоне количественного икачественного изменения динамики распределения вирусов переносчиков исостояния их ПОПУЛЯЦИЙ Векторы (переносчики) яв1яюгся одним шсущественных факторов изменения видового сос-ава и расширешгя кругарастений-чозясв вирусов (Келдыш Помажов Червякова, Арушанова, 1998)

Результаты жепериментов по изучению роли тлей в распространениивирусов на нарциссы претставлены в таблице 5

-12-


l.]f> мша 5И<>чение векторной негк, ычн вирусов на Narcissus 1

1 переносчика | Bupve | ')ффск|ив|шс1ь , Koinpo iwioeпере ычн

К, pcrsicae Sul/ [ С MV __ ^ 4ХMac rosae (I )M cerasi (I ) CMV 4»

JVIJIUSIJUIC Sul/ _ J IJYMV I 1Л labacScop *

M регмеас Sul/ J PVY I _ 22 I »Л labaeScop J I'VY Jf 26 f - ~ - 1 -

M omatus 1 aign I PVY L П i ••

В poiv ii.idic нронсленпыч >KciicpiiMciiiOH HiiKaiano ч ю наряд сlUHCiTHMM переносчиком M pi,rsit.ie ы н ш ш и iitpe ыча u.i napiiiitchi CMVдвумя iiccnatiu|)ii4ttKii"<ii ни lavin i itn M rosat и M itrasi HYMV - Л fabaca IJVY - Л labat и M uniatut причем н|)фскшн|икгь перешчиin.ciiciuuLinnipiiHjnni 1ми ни lavui i ILK tociaii IH ы П - 40 "o

1аким обра (ом мнимая » tip\M\pc афи юфа\пы i\honii4iiu\лскорагивных кук.гур танин 1ьное ч ш о они \ioi\i шр.иь оире ш ICIIIIMOро 1Ь в иерешчс инфекции PVY BW1V и CMV Причем ия ни ы М terasiбыла показана tnotoonocib к пере ыче CMV HI OUIOKIIOIO Минина каккрылатыми так и бхкрылымн (.та.шями

Исполыопание еортов и BICIOB об ia.iaiomii\ чсюичиноегью к векторам,пре'лставпяст наиболее (ффекшвиый способ (апшгы pacieiniii от паюгеноввир)спой >гиоло1ии причем оеоб>ю ценность ия пракшкн пре ктавляютtopTa и В1ЫЫ об 1алающпс фчпповой чеюйчивоел i ю

Нами npoBoaii.iaci. paGoia по оценке \еюичнвосги 12 еоргов Narcissus кS видам пей регулярно выяв шемых в поеалкач нарцисса

Анализ устойчивости рашичпыч сортов нарциссов не выявил обра}цон.облаланшшх абсолютно!! УСТОЙЧИВОСТЬЮ (табт 6)

Реакция нарциссов на все т\чаемые вп ил г км в не н>м выровнена, навсех сортах тли способны питаться в |счснпе перио ы лослагочною JL\Xинфицирования Исключение сосчавляеч ниш. I) sorbi коюрая на всех сортахнарциссов присутствовала не более I часа

Таким образом все 1есшр\емые topia Narcissus L опюсягся к(асе (яемым а сорта Ноше Ьгсь и I ord Nelson являкпея кормовыми для Мccrasi и Л Fabac В pci\ n.iaic nccie ювашш нылс ICHM уешичипые к

- / 3 -


населению различными видимп rjieii-псреносчиков: M.persicae - 3 сорта: II.pruni - 4; М ccrasi - 3. -

Таблица 6.Оценка у с т й ч и н о е т пско'юр'мх сорюн Narcissus L. к тлям-нереноечикамТестируемым

сорт

Super Siar(Ionic 1 iresBridal RoseAmbcrjiaieUndertone

CredoLord Nelson

l.imcChilTonDaydreamPatriarchTedstoneSentinel

Число сохранпншихся in 5 подсаженных особейчерсч 1/3/24 часа

M.persicae

5/5/46/6/2

• 3/3/2

6/4/35/4/06/4/25/5/4

-5/5/14/3/05/4/15/1/0

Л.ГаЪае

2/1/02/2/72/1/У1/2/1

-3/4/24/2/62/0/04/3/14/1/03/2/04/1/1

D.sorbi

3/2/01/1/00/0/00/0/02/0/00/0/01/1/01/0/02/1/01/1/10/0/01/0/0

II.pruni

4/3/12/2/24/2/05/1/0

-6/4/02/3/22/2/22/1/16/4/25/3/02/2/1

М. ccrasi

2/1/02/2/72/1/91/2/1

-3/4/24/2/65/2/1 n

5/3/11/1/02/2/11/0/0

5. идштиФИКл! 1ия i шевойс mi:i и ibix ВИРУСОВ I IA КУЛЬТУРЕNARCISSUS L.

Наряду с традиционными вирусами нами выявлены и несвойственныевозбудители на видах, входящих в семейство Amaryllidaceae, порядок Liliales(Amaryllis L., Narcissus I..)-

Задачей нашего , исследования был поиск вирусов, серологическиродственных ХВШ на представ1ггелях таксонов эволюшюнно близких родуAllium. В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,принадлежащих к семействам Liliaceae и Amaryllidaceae, был обнаруженвирус, серологически родственный ХВШ - первый представитель ХВШ-подобных вирусов, инфицирующих растения, не принадлежащих к родуAllium . Антиген, серологически родственный капсндному белку ХВШ, былобнаружен в двух видах рода Chlorophytum, в нескольких сортах Lilium L., :


dsupit uiiium и нарциссовД | я alumina распространения X1H1I на KV н.прс Narcissus (

itcno (ыовали 2 aiiniCbiBopoiMi к HJIIUI UIOVIV бе IKV - As >7 it As I 4 - кlunakTHMM вирионам в очищенном upcnapaic

Чналш нрово ныи с 7 lopi.ivui Narcissus I \\j рис IЛ it Ibпро ician ILIII.I имм>нобло|Ы ж е ф а м о в (рис 1А1 и копненфированпыхпрепаратов(рис 1Ь)

В жефактах и конциприроианпых препарат* ирису ICIBMOI 2 к laccaвирусного капси шого белка с мо ICK\ |ярнымм массами 47 кДа и 28 кДаПричем ее ш в Ь сортач приемсшонл,! н> 1ько (к юк 28 кДа (рис 1 Л, Ьлорожкн 1-4 и 6-7) н copie Super Star ( шрожка ^) оЛнару-женм "ба классакалек ним о бе жа

Максимальная коннешраиия UIHHOIO анипсна наб по юлась н шеи.яхнарциссов в фаю цветения IIOMDMV IUIIIMII p i c i m e ч.нын Maicpiiuiиспо 1ыова.1ся .vi» нол\чсния омишеннпч нир\C1U.I4 ирснар.пон В такихпрепаратах прис\ icntoiia^ui 2 к lacca вирчепою кансн пни о б е ж а смо1скмярными массами 2К кДа и ^7 кДа (рис 2А) Aiiliici niopoiKa прошврекомбинацию!о капси llioi о бе |ка \BIIl \s 37 peai npon.ua с бетком 28 кДа(рис 2b) lot ia как антнемнорожа полученная прошн иысоюючшцепных

1

•37*4 а -

•Ziru.IL-

— I

6 7 Ь 9 С 5 а оЬ

в 9

Рис I Имммюбтоттнг жеграктов и концентрированныхпрепаратов ХШП-подобною иир\еа нарписсон Дорожки I - 7 -сортообраэиы Narcissus I (Davdreain Sentinel I ord NelsonCredo Super Star 12 5 12 2") юрожки 8 Q - контр» ib(проана.Ш1ированные ранее ж ы р а м м i\Ka-ina.iora)


препарат» XBIII As 1.4 реагировала с белками обоих классов (рис. 2В). Врезультате обработки -экстрактов листьев Narcissus L. неионным летергекгомТритон х 100 освобождался и селимеш провал в стандартных условиях11ситрнф> гиропашм (SW 2Х, 25 000 об/мин. 2.5 ч) реагирующий с As 37 белокс молекулярной .массой 55 кДа (рис. 21).

Рис. 2. Элекгрофоретнческни и серологический ana.ni»очищенных препаратов XIUII-модобного >*вируса нарциссов: А- -электрофорез вирусного препарата в 10 % ИААГ; В, В -иммуноблопинг препарата, полученного с использованиемсоответственно As37 и Asl.4 : Г- иммупоблоттинг препарата,полученного с использованием пененного дегергента тритон X-100, As37; Д - иммуноблоттинг очищенного препаратавыделенного стандартным методом.

По-видимому, данный белок представляет собой димер капищногобелка с молекулярной массой 28 кДа, однако механизм их образования иструктура в настоящее время неизвестны. Неясно также, какие различия впервичной структуре 28 кДа и 37 кДа капсидных белков ХВШ-подобноговируса нарциссов обуславливает столь существенную разницу их кажущихсямолекулярных масс. Существование двух классов капсклного белка ХВШ-подобного вируса нарциссов может быть связано с гетерогенностью молекулкапсидного белка этого вируса по степени гидрофильное™, однако, труднообъяснить, почему при серологическом анализе методом иммуноблотинга 37кДа калсидный белок реагирует с антисывороткой Asl.4 и не реагирует сантисывороткой As 37. • .

Исследование очищенных вирусных препаратов из листьев Narcissus L.методами иммуноэлектронной микроскопии выявило наличие в них массыгибких частиц длиной около 800 нм и диаметром 12 нм (рис 3).

Однако на основании факта декорирования незначительной частивирусных частиц можно сделать вывод о достаточно низкой степени

-/е-. • • • • - - . • ' " • • : , . • : • ; . . • , . • ;


Рис З Иммупо1лск1ронная фотография очищенных ирспаратонХВШ-полобиого вируса нарцисса

ссроло! нческого родства выявленного вируса XBL1JРезультаты (.вилетсльствуюг о том, что в растениях нарциссов,

амариллисов присутствует вирус, серологически родственный XDU1 ипринадлежащий, как мы полагаем, к ХВШ-подобным фитовирусам Нашиисследования показали, что данный вирус легко передается механически испособен репродуцироваться в сеянцах тало i а в условиях моновируснойинфекции и накапливаться в них в значительных концентрациях

6 РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ОЗДОРОВЛЕНИЯ NARCISSUS LМЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ

При разработке методов получения безвирусного растительногоматериала необходимо учитывать влияние генетических, физиологических,гормональных и физических факторов

По данным наших экспериментов наибольший выход безвирусныхрастений (до 75 % при культивировании экешгантов в 0,2 мм) наблюдали усорта Super Star Приживаемость эксплантов малого размера былазначительно ниже по сравнению с более крупными Оздоровительный эффект(по данным ИФА и ЭМ) был выше и достигал 57,1 - 75,0 % от числарегенерировавших Данные таблицы 7 свидетельствуют и о сортовой разницев приживаемости эксплантов и в выходе безвирусных растений по тремразмерам, хотя зависимость от размера экспланта сохраняется по сортам

Согласно модели «Скуга-Миллера» (Scoog, Miller, 1957), образованиепобегов стимулируется при наличии преобладающих концентраций


Влияние размера жеиланта па выход безвпрусныхpacicitiiii Narcissus L.

Сорт

Super Star

Patriarch

Lord Nelson

Pil'iMCp

жеплашов.*M M

0.20.3

- 0,50.20.30,5

. 0.20,30.5

•HIT.

X13157 -j1013X1213

Регенерированоicero '

Го26,643.350.023.333.343,326.640.043,3

Таблица 7.

Бечвирусныхшт.

631430

• 5

3

%75.023,16,6

57,130.0

062,525,015,3

•- 30 'жеплантов меристема!ической iканн.

цитокимииа но отношению к ауксину, гогла как обратное соотношениеспособствует образованию корней. Данная модель приемлема для большогочисла растений, н о . ее нелыя считать универсальной. Концентрациигормонов, необходимые для органогенеза, широко варьируют и для каждоговида определяются эмпирически (табл. 8).

При повышения концентрации а-нафтилуксусной кислоты до 5 мг/лсильно возрастает процент образования кадлусной ткани ( 31,0 % у сорта LordNelson), что является нежелательным из-за генетической нестабильности(Balzan, 1978, Williams, Coll in, 1976) и достаточно трудно добитьсяконтролируемого морфогенеза (Катаева. Австисов, 1981).

В результате проведенных "кепернментов показано, что оптимальныеконцентрации гормонов для сортов Narcissus L.: БАП - 10 мг/л, ПУК - I мг/л,при которых получено наибольшее количество растений-регенерантов (до40,3 % у сорта Super Star), при этом процент каллусообразовапия невысок (до6,2 %)(табл. 9).

Таким образом, проведенные- исследования показали, чтоприживаемость эксплаптов разного размера и выход безвирусных растений-регенерантов зависит от многих условий: сортовых особенностей, составасреды, физических факторов выращивания. Однако, увеличить выходбезвирусных растений возможно путем сочетания метода культуры • .


Liu H U M 8

Морфогсне-i ме'рнсгсм Narcissus I на pa «личных ере ia\

I l it) IV

Сорт ДЛИ IНО IlipoI

Состав ере И•( M I / 0

iпе-

| Чарамер I По IVMCHOnpiaiioicfic la ] pacicmiii

noiKiMili KOil ive peieiie- |

ванныхMtpiltlCM*

i INCH lairra

I

| Super Маг _ JI ф и ю ю р -

моиои

(K.I

фимнор-MOHOB

20 4174П

1 0 0\ 00I 00

I pjiiion

10 H

Super StarPatriarch

I ord NelsonSuper SlarPatriarch

1 ord Nelson

Super StarPatriarch

Lord Nelson

MC <ЬЛП 10 011УК 0 5

MC -ЬЛП 10 0ПУК 1 0

MC t-

ЬЛП 10 011УК s о

1 MC 1-

ЬЛП 10 0

' НУКО^MC +

1 ЬЛП 10 01 ПУК 10

MC ~' ЬЛП 10 01 НУКso

1

i

1

44 143 4M) 44S X

40 016 71 82 4

0 0

2 11 0 01 S 1

il*2 *Г1 23 Ii 21 9 1, 30 4 1

, 3 1 0 X

14 417 921 240 138 730 4

1 4

II 20 0

—1

-

* - 20 "жсшшшов меристема!ическои ткани

Pel операционная способноегь меристем Narcissus IТабчииа 9

Сорт

Super StarPatriarchLord Nelson

Погибло апексов •

от инфек-ций.

5 74 24 3

в процессекультиви-рования.

ХарактерopiaiioieHcia"

побеги inжепланга

"'о

43 2 | 4-> 849 456 9

40 036 7

ка.1 ivc

5 3

I10TV4CIIO

растенмн-pei енерантов.

40 16 2 | 38 72 3 | 30 4

* - i n 20 жеплатов* * - cpeja содержащая ЬЛП - 10 мг/ I П У К - 1,0 M I / I

-iS-


апикальных меристем с хемо- и термотерапией. Устойчивость сортов кинфекции также, несомненно, оказывает влияние на результативностьоздоровления рода Narcissus L. от вирусов.

ВЫВОДЫ

1. Вирусные заболевания выявлены на 239 сортах Narcissus L. различногопроисхождения в насаждениях коллекционного типа, а также на 33 видахпредставителей тропической и субтропической флоры.

Отмечена устойчивая тенденция их распространения по сравнению с1986 годом. Заражение комплексом вирусов отмечено практически на-100 %изучаемых сортов Narcissus L. Комплексная вирусная инфекция доминирует ина обследованных видах порядка Liliales, причем число компонентоввирусного комплекса варьирует от. 2 до 6, . .2. Доминирующими симптомами в насаждениях Narcissus • I-. являютсямозаика, полосатость, краевой хлороз, пестроленестность цветков,деформация листьев, измельчение растений. На изученных представителяхтропической и субтропической флоры порядка Liliales доминироваламозаичность. . . ,->• . "' " ~" *'-

3. Данные симптоматического, серологического, индикаторного иэлектронно-микроскопического анализов свидетельствуют о широкомраспространении TMV; CMV; CmMV; PVY; CrnLV; NMV; AMV; RRSV;TobNV; TomRSV; BYMV и TobRV на культуре Narcissus L.4. Установлено, что большинство возделываемых сортов пораженыкомплексом вирусов; 23,5 *Л сортов поражены 2-мя возбудителями, 32,4 %сортов - 3-мя возбудителями, а на 26,5 % сортов обнаружено более 3-хв о з б у д и т е л е й . '"••. '• ' . < . - ' " " " ' . . л - , * - * " / ,- ;' , ., ' -. • ••• .'.-'••

5. В насаждениях Narcissus L. установлен состав комплексных инфекций,видовой состав возбудителей, выявлено широкое ^ варьирование,- итрансформаиия признаков Проявления вирусных комплексов. Наибольшая'стабильность проявления симптомов характерна для сортов: Lord Nelson,Scarlett ОНага, Super Star, Patriarch.6. Среди обследованных сортов Narcissus L. не было выявленопредставителей, обладающих комплексной устойчивостью к возбудителям..Показана тенденция расширения ареала меспеиифическнх возбудителей(PVY; ShVX; C m t V ; CroMV), что обуславливает необходимостьоздоровленияхозяйсткенио-иенныхсортовNswcissusL..» " ;' • . ! : 77. Все тестируемые сорта нарциссов относятся к заселяемым, а сорт HonicTires и Lord Nelson являются кормовыми для М. cerasi и A.fabae. В результате

' . • ' * '•- " • ' ' - > - г о - . " -' ; ' ; . : ' ' , . ' . " . ; . ; - ; ' . " ' " . . ; : •" " - : : ; :


исследований выделены устойчивые к заселению различными видами тлей-персиосчикон, М persicae - 3 сорта Л fabae - 4 сорта, Н pruni - 4 сорта, Мcerasi 1 сорта Выживаемость тлей на различных сортах значительноколеблется8 В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,принадлежащих к семейстшам Liliaccae и Amaryllidaceae был обнаруженвирус, серологически родственный ShVX Антиген, серологическиродственный капсидному белку ХВШ обнаружен в fleyv видах Chlorophytum,4 сортах Amaryltis и 14 сортах Narcissus L9 В экстрактах и концентрированных препаратах присутствовали 2 классавирусного капенлиого белка с молекулярными массами 37 и 28 кДаИсспедованив очищенных вирусных препаратов ш листьев нарциссовметодами иммуноэлектроннои микроскопии показало наличие в них массыгибких нитевидных частиц длиной ~ 800 им и диаметром ~ 12 нм XBI1I-полобный вирус легко перелается механически и способен репродуцироватьсяв растениях шалота и нарцисса в условиях моноинфекции10 С целью получения оздоровленных растений был апробирован методкультуры апикальных меристем Оптимальная величина экспланта составляла0,2 мм для получения безвирусных растений, а концентрациягормонов БАП - 10 мг/л, НУК - 1 мг/л. при этом процент каллусообразованиясоставлял ~ 6 2 % Для индукции ризогенеза уменьшали вдвое содержаниеминеральных солей в среде МС, концентрация НУК составляла 0,5 мг/л

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

При разработке системы защиты цветочных культур, и, в частности,Narcissus L, от вирусов необходимо учитывать особенности ихэпидемиологии в условия коллекций и экспозиций Исходная позициязаключается в квалифицированной оценке экологической и фигосанитарнойобстановки (состав вирусов и их переносчиков, состояние их популяций,биолого-экологические свойства растений хозяев и уровень взаимодействиямежду ними) Вирусы являются неотъемлемыми сочленами любойэкосистемы, в этой связи, очевидно, нереально содержание во времени вколлекциях «безвирусных» линий, клонов и форм растений Оптимальнаяметодология противовирусной защиты на современном этане ориентируетсяна формирование агроценозов, в которых реализуется возможностьмеханизмов регуляции плотности вредных организмов и включаетследующие основные этапы• направленное формирование коллекций, экспозиций, ограничивающих

-«?•-


уровень распространения и непрерывность циркуляции традиционных и«новых» вирусов и переносчиков (введение устойчивых сортов и видов, втом числе с латентной реакцией); .

• внедрение системы оздоровления при производстве посадочного исеменного материала (тестирование, термо (химио-) терапия, культура

. меристемы);• оздоровление отдельных сортов, представляющих ценность лпя генофонда,• удаление из коллекций и экспозиций восприимчивых видов и сортов,

перевод ценного материала в генные банки; .• проведение профилактических мероприятий (фитосанитарное

тесгирование, биологический и химический контроль переносчиков,соблюдение карантинных требований). .

В результате таких подходов реализуется возможность созданияэкосистем, ограничивающих вредоносность вирусов и их переносчиков.

Синеок работ, опубликованных но теме диссертации:

1. Келдыш М.Л., Червякова О.П., Лрушанова Е.С. Вирусные заболеванияновых нетрадиционных культур// Тез. докл. Всерос. съезда по защитерастений,- Пушкин. - 1995. С. 570-571. •*

2. Keldish -M., Arushanova E., Pomazkov Y., Cervyakova О. Incidence of pomefruil viruses in ornamentals // XYU int. Symp. on virus diseases of Fruit trees. -1997. -p.« 174. о

3. Keldish M, Pomazkov Y., Cervyakova O., Arushanova E. Vectors as a factor inwidening host range for viruses of stone fruit trees // XYU int. Symp. on virusdiseases of Fruit trees. - 1997.-p. 171 •

4. Арушанова E.C., Тимохнна Е.Т., Байкалова О.С. Фнтосаннтарноесостояние коллекционных посадок Narcissus L. и перспективы егооптимизации // Тез. докл. Ill межд. конф.- 1998.- с. 26-27."

5. Арушанова Е.С, Келдыш , М.А., Червякова О.Н. Роль декоративныхрастений в распространении вирусов на садовых культурах // Тез. докл.Всерос. совещ.: Актуальные вопросы теории и практики зашиты растений вусловиях многоукладное™ с.-.х.- 1998. -с. 261-263. •

6. Келдыш М.А., Помазков Ю.И., Червякова О.Н., Арушанова Е.С. Векторыкак фактор изменения видового состава и расширения круга растений-хозяев вирусов плодовых культур // Тез. докл. Всерос. совещ.: Актуальные

-22-


вопросы теории и практики laniuihi растений в условиях чноюуклалносшi , . 4 . |99Х -с 261-261 ,

7 Kcldish М , Pomazkov Y , Arushanova L , Cervyakova О Vectors as a factor inwidening host rangt for viruses ot Iruit trees and ыпа11 fruit crops (some Ijctorsof virus tpidemiology)// Aua horticulture -472 -v I -p 23-26

8 Вишниченко В К , Арушаноиа С С Ке |дыш М А Калошин А А Заврие»С К Сероло1ичсски родственный X вирусу шалота (XB11I) гибкийпитспнлнми вирус, не приншшежашип к роду Allium // Докл PACXII -1994 -№2 - t 23-26

-23-


Объем i 5 п л Заъ,аз 342 Тираж 100

Типография Издательства V\CXA127550, М о с к в а И 5 5 0 , Т и м и р я з е в с к а я у ч , 4 4


Documents

463.вирусные болезни нарцисса (narcissus l