Upload
others
View
0
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
A hisztokompatibilitási rendszer sejtbiológiája és genetikája
Klinikai Immunológia Budapest, 2020.02.27Rajczy [email protected]
• Szinte minden sejt felszínén jelen van.
• Az MHC-gének kb. 400 millió évvel ezelőtt a porcos halakbanjelentek meg.
• Felfedezése: egérben (1937), emberben (1953)
• Nagymértékű polimorfizmus jellemzi
• Emberben Humán Leukocita Antigén (HLA) az elnevezése
• Fontos immunfolyamatokban van szerepe
A fő szöveti összeférhetőségi génkomplex(Major Histocompatibility Complex) MHC
Miért olyan fontos a HLA rendszer?
• Az emberi faj túlélésének egyik legfontosabbmeghatározó tényezője (a saját és a nem-saját felismerése)
• Központi szerepet játszik az immunválaszelindításában
• Első helyen áll az immunológiai és nemimmunológiai betegségekkel szembenifogékonysággal való asszociációban
Jean Dausset (1916–2009)
‘A HLA rendszer atyja’
A HLA rendszer megismerése
A HLA gének a 6. kromoszómán
A humán MHC régió
hla.alleles.org
Az MHC proteinek két típusa:
II. osztály
HLA-DR, -DQ, -DP
Immunsejtek felszínén
Indukálható más sejteken is (endotél sejtek)
I. osztály
HLA-A, HLA-B, HLA-C
Minden sejt felszínén*
*Not on red blood cells
A HLA I. és II. osztályú molekulák szerkezete
Polimorf pozíciók
A peptidkötő zseb felülnézete
Polimorf pozíciók
A peptidkötő zseb felülnézete
Az antigénkötő zseb aminósav-szekvenciája
HLA Class I GenesHLA Class I
Gene A B C
Alleles 5,907 7,126 5,709
Proteins 3,720 4,606 3,470
0 alleles 308 244 243
hla.alleles.org 2019.09.20
HLA Class II
Gene DRA DRB DQA1 DQB1 DPA1 DPB1
Alleles 29 3,331 229 1,795 168 1,537
Proteins 2 2,357 98 1,194 65 1,006
0 alleles 0 141 6 77 3 80
Az ismert HLA allélek száma folyamatosan növekszik
Miért van szükség ennyi allélre?- megváltozik az antigénkötő zseb szerkezete
A polimorf oldalláncok megváltoztatják a peptidkötő zseb jellegzetességeit
-> többféle peptid felismerése lehetséges populációs szintenThe HLA FactsBook Author(s):Steven G.E. Marsh, Peter Parham and Linda D. Barber
Az emberi sokféleség evolúciója; a migráció és a szelekció hatása
• A genetikai változások hozták létre a modern HLA alléleket az evolúció ideje alatt
• Az emberek migrációja Afrikából
• Egyedi variációk kiválogatódása a patogének hatására
• Egyedi variációk véletlenszerű vesztése
Genus „Homo” appears~2.5 million years ago
Példa két allél előfordulása alapján
egy allél, amelyet Afrikából hoztak az Észak-Európát benépesítő emberek
egy allél, amely mutációval jöhetett létre az Ázsiát benépesítő embereknél
Az allélek és haplotípusok megoszlása követhető a világban
HLA-A*02:05 B*52:01 DRB1*15:02
A HLA-A allélek öröklődése
a családban
➢ 4 lehetséges genotípus a gyermekeknél➢ lehet heterozigóta vagy homozigóta ➢ 1:4 eséllyel örökli két testvér ugyanazt a két allélt
HLA haplotípusok
Apai 6. kromoszómaAnyai 6. kromoszóma
Haplotípus: az allélek kombinációja egy kromoszómán
A haplotípusokelkülönülése a
családban
Identikus két testvér, ha mindkét haplotípusban egyeznekHaploidentikus két személy, ha egy közös haplotípusuk van
Rekombinánshaplotípusok a
családban
Rekombináció: a számfelező osztódás fázisában a génszakaszok kicserélődése homológ kromoszómák között.:
Esély az egyező testvérre1 – (0.75)n n = testvérek száma
testvérek száma esély (%)
1 252 443 584 685 766 827 878 909 92
10 94
A HLA antigének/allélek nevezéktana
HLA - A * 24 : 02 : 01 : 01
Locus Asterisk Allele family(serological where possible)
Aminoacid difference
Non-coding(silent)polymorphism
Intron,3’ or 5’
polymorphism
N = nullL = lowS = Sec.A = Abr.
HLA - A * 24 : 02 : 01 : 02 : L
A klasszikus HLA gének funkciója
A klasszikus HLA gének: HLA-A, C, B, DRB1, DQB1, és DPB1 termékei alapvető szerepet
játszanak az immunválaszban
Az I. és II. osztályú molekulák a peptideketa sejt különböző részeiben kötik
Antigén (idegen peptid)prezentáció és T sejt felismerés
Az NK sejtek összekapcsolják a veleszületett és adaptív választ
HLA molecules also function as ligands for the Natural Killer (NK) cell surface molecules involved in NK cell responses
Human KIRs Binding Site on the Surface of MHC Class I Molecule
Examples of the role of MHC genes in immune functions
A HLA szerepe: előnyök és hátrányok
Az MHC által kötött peptidek forrása
Saját
• Normál sejtfehérjék
Antigén (nem saját)
• Kórokozók
• Tumor-asszociált fehérjék
• Egyéb idegen fehérjék (oltóanyagok, gyógyszerek)
• Idegen HLA (transzplantáció)
Fertőző betegségek & HLA Effect Of Heterozygosity at HLA
On Progression to AIDS
A kórokozóra adott válasz egyénenként eltérő
HLA-B53 protects against malaria and its frequency is increased in malaria risk areas.
2%
25-40%
1%
HLA és autoimmun betegségek
• 47 évvel ezelőtt számoltak be először róla
• B27 és az Ankylosing Spondilitis (Bewertonet. Al, 1973, Schlosstein et al, 1973)
• több száz betegséget írtak le, amelyekbizonyos HLA genotípusokkal társulnak
• Kérdés, mi a magyarázata azasszociációnak?
Melyek a valószínű mechanizmusok?
1. A HLA molekulák a T sejtek részére történő peptidbemutatásban való szerepe
- a HLA prezentálja a betegséget kiváltó saját peptidet, nem saját peptidet vagy megváltozott saját peptidet
2. T-sejt repertoár befolyásolása (szelekciós folyamat)
3. A HLA biológia további szempontjai
4. Nem a HLA nem játszik közvetlen szerepet, hanem más kapcsolt gének ebben a régióban, pl. a HFE -örökletes haemochromatosis
A HLA tipizálás klinikai felhasználása
o Populációs vizsgálatok
o Betegség-asszociáció
o Farmakogenomics
o Trombocita transzfúzió
o Transzplantáció: donorkiválasztás
- szerv
- vérképzőrendszeri őssejt
A transzplantációs immunológia feladata a transzplantációs folyamatban
HLA típus meghatározása
HLA-ellenes immunizálódás kimutatása:
– Ellenanyagok jelenléte
– Ellenanyagok specifitása
– Tiltott és megengedhető antigének definiálása
– Donorspecifikus ellenanyagok azonosítása
Keresztpróba a donor és recipiens között a kilökődési reakció előrejelzésére
A HLA-ellenes antitestek kimutatása és jelentősége
HLA immunizációt kiváltó tényezők • Terhesség
- Primer válasz: anyai keringésbe szüléskor bekerülő, a magzat apai eredetű HLA antigénjei ellen
- Szekunder immunválasz: a következő terhességek alatt a placentán átkerülő kis mennyiségű magzati antigén ellen
• Transzfúzió
- A vérkészítményben levő fehérvérsejtjek/trombocitákhatására citotoxikus HLA antitestek jöhetnek létre
• Transzplantáció
- Alloimmunizációt befolyásoló tényezők
donor és recipiens közötti hisztokompatibilitási különbség
recipiens immunválaszadó képessége
immunszuppresszió mértéke és minősége
Az ellenanyagkimutatás módszerei
Clin J AM Soc Nephrol 1:404-414, 2006 Mechanism of Alloantibodies
Hiperimmunizált beteg ellenanyagprofilja
A humorális alloimmunitás stádiumai
Clin J Am Soc Nephrol 1: 404, 2006
Az őssejtátültetés folyamata
gyógyszer
donor
Beteg Gyógyultallogén
autológfagyasztás
sugár megtapadás
www.ovsz.hu/ossejtdonacio
Őssejt átültetés indikációi
Jean Dausset, FR
1916 - 2009
1958: A HLA felfedezése
1980
Rose Payne, US
1909 - 1999
Jon van Rood, NL
1926 - 2017
1968 Az első transzplantáció: egypetéjű ikerpárnál
1968 Az első testvérdonoros átültetés
1973 Az első nem rokon donorral történt átültetés
Csontvelőátültetés - Bone Marrow Transplantation
Blut 1975 Dec;31(6):347-54
Bone marrow transplantation for aplastic anaemia
from a HL-A and MLC-identical unrelated donor.
Lohrmann HP, Dietrich M, Goldmann SF, Kristensen T,
Fliedner TM, Abt C, Pflieger H, Flad HD, Kubanek B,
Heimpel H.
Bone-marrow transplantation (BMT) from an unrelated,
HL-A-phenotype-identical, MLC-negative donor was
performed in a 31 year old woman with severe long
lasting aplastic anemia. ...
1990
Az őssejtátültetés fejlődésének idővonala1957-2006
EBMT 2013
1,000,000 átültetés
1971 Anthony Nolan Wiskott-Aldrich szindrómával született
1974 Shirley elindította az Anthony Nolan Csontvelődonor Regisztert
1979 Anthonynak nem lett egyező donora és 7 éves korában meghalt
Az önkéntes donor regiszterek kezdete
Nagyon sok család követte Shirley Nolan példáját
2018 szeptember 11-én a választható donorok száma:
32,360,678 önkéntes donor
961,497 köldökvér-egység
A WMDA partnere 134 szervezet 52 országban, amelyek rendelkezésre bocsájtják a donorok adatait a nemzetközi keresés céljára.
1994 World Marrow Donor Association
E.D. Thomas, US
1920 – 2012
John Goldman, GB1938 – 2013
Jon J. van Rood, NL
1926 - 2017
59
Új termékek/ Őssejt-források
• A csontvelőtől (BM) a perifériás vérsejtekig
• A köldökvér-felhasználás bevezetése és csökkenése (UCB)
• A „haplo” átültetés és a sejtterápiák előretörése
Változó trendek
60
• A HLA tipizálás új módszere: NGS
• Az ismert allélek számának rohamos emelkedése
Változó trendek
https://www.genome.gov/images/content/costpermb_2017.jpg
class-I SSO/SSPclass-II SSO/SSPearly Sanger NGS
courtesy of Prof. Steve Marsh (hla.alleles.org)
Honnan jön az önkéntes, nem rokon donor?
Segítség a donorkereséshez:Segítség a donorkereséshez:
A donor kiválasztása őssejtátültetéshez
Első választás: HLA azonos testvér
HLA egyező nem rokon donor
Ha nincs
1-2 HLA tulajdonságban eltérő
nem rokon donor
Köldökzsinórvér(1 vagy több
egység)
Haploidentikus(50%-ban egyező)
családi donor
www.ovsz.hu/csvwww.ovsz.hu/ossejtdonacio
Ha nincs
Az átültetés sikerét befolyásoló tényezők a beteg (recipiens) és a donor oldaláról
HLA egyezés(A, B, Cw, DR, DQ, DP)
NemD/R
Az immunrendszeregyéb génjei
D/R
ÉletkorD/R
R= RecipiensD= Donor
Virológiastátusz
(CMV) D/R
Eredeti betegség (stádium és
súlyossági fok) R
Kondicionálástípusa R
Időtartamdiagnózis -> átültetés
D/R
Őssejt forrása D
Legyen minél
fiatalabb!
Legyen férfi!
Legyen a CMV státusa
egyező a betegével!
Megbízható regiszter, minél
közelebb!
Supporting Global Development
WMDA supports its members to develop and grow, so that moretransplant patients find the most suitable match:
• Improving the donor pool: numbers, typing, age, availability
2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017
0
2,000,000
4,000,000
6,000,000
8,000,000
10,000,000
12,000,000
14,000,000
All donors
year
North America
South America
Africa/Australia/Pacific
East Asia
West Asia
Europe
A nemzeti és a külföldi betegek részére biztosított őssejtkészítmények száma
Őssejtátültetés a klinikai gyakorlatban Nem rokon donorral történt átültetések Magyarországon 1990-2018 (n: 881)
2 0
61
62
6 5 4 59 8
12
21 2327
4246
4953 54
68
59
81
73 7471
75
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
www.ovsz.hu/ossejtdonacio67
Őssejtátültetések nem rokon donorral őssejtforrás és betegcsoport szerint 2018-ban
perifériás vér 9
csontvelő17
köldökvér1
perifériás vér 47
csontvelő1
Gyermek betegek Felnőtt betegek
www.ovsz.hu/ossejtdonacio
4513
9
3111
Az őssejtet adományozó nem rokon donorok megoszlása származási ország szerint 2018-ban
német
lengyel
amerikai
izraeli
svéd
olasz
holland
www.ovsz.hu/ossejtdonacio
Őssejtetadományozott
19 donorunk
Nemzetközi regiszter
34 millió donorMagyar regiszter:
7114 donor
Betegeink őssejtetkaptak:
897 donortól
www.ovsz.hu/ossejtdonacio
71
General information for patients and carersconsidering haematopoietic stem cell
transplantation (HSCT) for severe autoimmunediseases (ADs):
A position statement from the EBMT AutoimmuneDiseases Working Party (ADWP), the EBMT Nurses
Group, the EBMT Patient, Family and Donor Committee and the Joint Accreditation Committee
of ISCT and EBMT (JACIE)
Helen Jessop1●Dominique Farge2,3,4,5●Riccardo Saccardi6●TobiasAlexander7●Montserrat Rovira8●Basil Sharrack9●Raffaella Greco10●NicoWulffraat11●John Moore12●Majid Kazmi13●Manuela Badoglio14●Gillian
Adams15●Bregje Verhoeven15●John Murray16●John A. Snowden
Bone Marrow Transplantation 2019 https://doi.org/10.1038/s41409-019-0430-
Mechanism of immune re-setting with autologous HSCT in autoimmune diseases
Summary of major categories and types of autoimmune diseases treated with HSCT in the EBMTregistry, as per August 2018
EBMT activity—autologous HSCT for MS, other immune-mediated neurological diseases and other autoimmune diseases by year, 1994–2018
(N = 2766)