A laboratA laboratóóriumi vizsgriumi vizsgáálatok latok szerepe a szerepe a haematologiaihaematologiai

kkóórkrkéépek diagnosztikpek diagnosztikáájjáábanban

Dr. DDr. Dáávid Mariannavid MariannaPPéécs, 2009.cs, 2009.

HaematolHaematolóógiaigiai betegsbetegséégek gek diagnosztikdiagnosztikáájaja

1. Klinikai t1. Klinikai tüüneteknetek

2. 2. LaboratLaboratóóriumi vizsgriumi vizsgáálatoklatok

3. 3. PatholPatholóógiagia-- csontvelcsontvelıı aspiraspiráátumtum vagy vagy biopsziabiopszia-- nyirokcsomnyirokcsomóó FTAB vagy FTAB vagy rezekcirezekcióó

4. K4. Kéépalkotpalkotóó eljeljáárráásoksok

LaboratLaboratóóriumi vizsgriumi vizsgáálatok a latok a haematologiaihaematologiai diagnosztikdiagnosztikáábanban

-- VVéérkrkéép (1 db EDTA csp (1 db EDTA csıı), v), véérkenetrkenet-- VVöörröösvsvéérsejt srsejt süüllyedllyedééss-- SerumSerum protein protein elfoelfo, , IgIg meghatmeghatáározrozáásoksok-- ImmunfixImmunfixáácicióó-- Tumor Tumor markerekmarkerek: LDH, b: LDH, béétata--22-- MGMG-- VVééralvadralvadáási vizsgsi vizsgáálatoklatok-- ÁÁramlramláási si cytometriacytometria (FCM)(FCM)-- Genetika:Genetika:

kromoszkromoszóóma (ma (metafmetafááziszis))FISH (FISH (interfinterfááziszis))molekulmolekulááris biolris biolóógia (PCR)gia (PCR)

ThrombocytaThrombocyta szszáámm•• NormNormáál tartoml tartomáány:ny: 150150-- 450 G/l450 G/l•• Mikor:Mikor: spontspontáán vn véérzrzéések: sek: orrvorrvéérzrzéés, s, nykhnykh. v. véérzrzééss

ererııs menstrus menstruáácicióó, , metrorrhagiametrorrhagiathromboembolithromboemboliááss kkóórkrkéépekpek

•• Emelkedett:Emelkedett:primaerprimaer:: EssentEssent. . thrombocythaemiathrombocythaemia

EgyEgyééb CMPD: PRV, CML, OMFb CMPD: PRV, CML, OMFsecundaersecundaer:: vashivashiáányos nyos anaemiaanaemia

gyulladgyulladáás, RA, vs, RA, véérzrzééssmalignitmalignitááss, OC szed, OC szedéésstrauma, trauma, splenectomisplenectomiáátt

kköövetvetıı

ThrombocytaThrombocyta szszáám 2.m 2.

•• << 50 G/l:50 G/l: vvéérzrzéések msek mőőttéét, st, séérrüülléés kapcss kapcsáánn<< 20 G/l:20 G/l: spontspontáán vn véérzrzééseksek

•• CsCsöökkenkkenéés okai:s okai:csontvelcsontvelıı eleléégtelensgtelenséégginfiltratinfiltratíívv csontvelcsontvelıı betegsbetegséégekgek ((AL, CL, AL, CL,

MMMM, , fibrosisfibrosis stb.)stb.)perifperifééririáás sejtszs sejtszéétesteséés (s (ITPITP, gy, gyóógyszer,gyszer,

mmőőbillentybillentyőő, infekci, infekcióó))felhasznfelhasznáállóóddáás: s: DICDICvvéérzrzéés, s, hyperspleniahyperspleniahhíígulguláás (nagy mennyiss (nagy mennyisééggőő vvtvvt transzftranszfúúzizióó) )

ThrombocytaThrombocyta szszáám 3.m 3.

•• CsCsöökkenkkenéés okai (folyt.):s okai (folyt.):GyGyóógyszerekgyszerek

kemoterkemoteráápipiáás szereks szerekchloramphenicolchloramphenicol, , colchicincolchicinH2 blokkolH2 blokkolóók, k, indomethacinindomethacin, INH,, INH,chinidinchinidin, , streptomycinstreptomycin, , sulfonamidsulfonamidthiazidthiazid diuretikumokdiuretikumok, , HEPARINHEPARIN

ThrombotikusThrombotikus microangiopathimicroangiopathiáákk(TTP/HUS)(TTP/HUS)

AnaemiaAnaemia perniciosaperniciosaVelszVelszüületettletett kkóórkrkéépekpek

macrothrombocytmacrothrombocytáákkalkkal(pl. (pl. BernardBernard--SoulierSoulier syndromasyndroma))

ThrombocytaThrombocyta szszáámbeli mbeli anomanomááliliáákk

Thrombocythaemia Thrombocytopenia

PseudoPseudo--thrombocytopeniathrombocytopenia

EDTA indukálta TCT aggregáció Citráttal TCT aggregáció NINCS

TCT vesztés

Normális TCT szám

VVöörröösvsvéérsejt szrsejt száámm

•• NormNormáál tartoml tartomáány:ny:fféérfi: rfi: 4.74.7-- 6.1 x 106.1 x 101212/L/Lnnıı:: 4.24.2-- 5.4 x 105.4 x 101212/L/Lééletkor elletkor elııre re haladthaladtáávalval cscsöökken a szkken a száámm

•• Mikor:Mikor:vvéérkrkéép rp réészekszekéént minden esetbennt minden esetben

haematologiaihaematologiai betegsbetegséég g gyanujgyanujáávalvalvvéérszegrszegéénysnyséég gyang gyanúúja esetja esetéénnmagas magas vvtvvt szszáám gyanm gyanúúja esetja esetéénn

VVöörröösvsvéérsejt szrsejt száám 2.m 2.

•• CsCsöökkenkkenéés:s:vvéérzrzéés (pl. GI, trauma)s (pl. GI, trauma)haemolysishaemolysisdidiééta (ta (vashivashiáány, B12 vitamin hiny, B12 vitamin hiáányny))genetikai eltgenetikai eltéérrééseksek (pl. (pl. thalassaemithalassaemiáákk))csontvelcsontvelıı eleléégtelensgtelenséég, g, fibrosisfibrosishaematologiaihaematologiai malignommalignomáákktumor, tumor, sepsissepsisveseelveseeléégtelensgtelenséégg, terhess, terhesséégggygyóógyszerek (pl. kemotergyszerek (pl. kemoteráápia)pia)

VVöörröösvsvéérsejt szrsejt száám 3.m 3.

•• EmelkedEmelkedéés:s:Nagy magassNagy magassáágokbangokbanKrKróónikus Onikus O22 hihiáánybannyban

COPD, COPD, kongenitkongenitáálislis szszíívhibvhibáák,k,CorCor pulmonalepulmonale

FolyadFolyadéék hik hiáány (ny (dehydrdehydráácicióó))ThalassaemiaThalassaemiaPolycythaemiaPolycythaemia rubrarubra veravera

VVöörröösvsvéértest szrtest száármaztatott rmaztatott paramparamééterekterek

1. MCV (Mean Cell Volume) = Htc / RBC

A hematokrit és a vörösvérsejtszám hányadosa, az átlagos (vörösvér) sejttérfogatot adja.

Mértékegysége: fl.

2. MCH (Mean Cell Hemoglobin) = Hgb / RBC

Az egy sejtre esı hemoglobin mennyiségét jelenti, a hemoglobin koncentráció és a

vörösvérsejtszám hányadosa.

Mértékegysége: pg.

3. MCHC (Mean Cell Hemoglobin Concentration) = Hgb / Htc

Átlagos celluláris hemoglobin koncentrációt jelent, értékét a hemoglobin koncentráció és a

hematokrit hányadosa adja.

Mértékegysége: g/l.

4. RDW (Red Cell Distribution Width) érték a vörösvérsejt-csúcs magasságának 20 %-nál mért

eloszlás-szélessége, az esetleges poikilocytósis mérıszáma.

(femtoliter)

Vvt mérete,térfogata

Hgb mennyiség/ 1 Vvt

(picogramm)

(anisocytosis)

Hgb concentráció/ vér volumen

MCV: MCV: meanmean corpuscularcorpuscular volumevolume

•• MacrocytaerMacrocytaer anaemiaanaemiaKemoterKemoteráápiapiaAnaemiaAnaemia perniciosaperniciosa, , B12 vitamin B12 vitamin éés s

ffóólsavlsav hihiáánynyMDS, alkohol toxicitMDS, alkohol toxicitáássMyeloidMyeloid leukaemileukaemiáákkPajzsmirigy Pajzsmirigy éés ms mááj mj mőőkkööddéési zavarsi zavar

•• MicrocytaerMicrocytaer anaemiaanaemiaVashiVashiáányos nyos anaemiaanaemia, v, véérzrzééssKrKróónikus betegsnikus betegséégekhez tgekhez táársulrsulóó anaemiaanaemiaThalassaemiaThalassaemiaÓÓlom mlom méérgezrgezééssVeseelVeseeléégtelensgtelenséégg

MCH: MCH: meanmean corpuscularcorpuscular HGBHGB

•• HypochromHypochrom anaemianaemiáákk::ÓÓlom mlom méérgezrgezééssHaemoglobinopathiHaemoglobinopathiáákkVashiVashiáányny

•• NormochromNormochrom anaemianaemiáákk::AA, MDS, AA, MDS, myeloidmyeloid leukaemileukaemiáákkAlkohol toxicitAlkohol toxicitáás, pajzsmirigy betegss, pajzsmirigy betegsééggKemoterKemoteráápia, B12 vitamin pia, B12 vitamin éés s ffóólsavlsav hihiáánynyVese betegsVese betegséég, szerzett g, szerzett haemolysisekhaemolysisek

FehFehéérvrvéérsejt szrsejt száámm

•• EmelkedEmelkedéés (s (>> 10 G/l)10 G/l)::fertfertıızzéés, s, chronicuschronicus gyulladgyulladáássszszöövet vet necrosisnecrosisleukaemialeukaemiastressz, trauma, terhessstressz, trauma, terhesséégg

•• CsCsöökkenkkenéés (s (<< 4 G/l):4 G/l):csontvelcsontvelıı eleléégtelensgtelenséégekgekleukaemialeukaemia, infekci, infekcióó, di, diééta hibata hibaautoimmunautoimmun betegsbetegséégekgekkemokemo-- éés radioters radioteráápia (ANCpia (ANC<< 1 G/l)1 G/l)

PancytopeniaPancytopenia diagndiagnóózisazisa

•• CsCsöökkent csontvelkkent csontvelıı mmőőkkööddéés s AA (veleszAA (veleszüületett letett éés szerzett)s szerzett)AL, MM, OMF AL, MM, OMF LymphomLymphomáákk, , solidsolid tumoroktumorokTuberculosisTuberculosis, PNH, PNHMegaloblastosMegaloblastos anaemiaanaemia

•• NormNormáális csontvellis csontvelıı cellularitcellularitááss::MDSMDS

•• Fokozott perifFokozott perifééririáás destrukcis destrukcióóSplenomegaliaSplenomegalia

PerifPerifééririáás vs véérkenetrkenet

•• MayMay ––GrGrüünwaldnwald GiemsaGiemsa festfestééss•• Egyik leginformatEgyik leginformatíívabb vabb haematologiaihaematologiai tesztteszt•• MindhMindháárom sejtvonal rendellenessrom sejtvonal rendellenesséégeigei•• VvtVvt: m: mééret, alak, ret, alak, chromiachromia, , intracellularisintracellularis

strukturstrukturáákk•• FVS: szFVS: száámbeli eltmbeli eltéérréések, differencisek, differenciááltsltsáági gi

fokokfokok•• TCT szTCT száám, mm, mééret ret éés alaks alak

VVöörröösvsvéértest alaki eltrtest alaki eltéérrééseksek

fragmentocytfragmentocytáákkacanthocytacanthocytáákk fragmentocytfragmentocytáákk

hidegagglutininhidegagglutinin kköönnycsepp sejteknnycsepp sejtekechynocytechynocytáákkbuzogbuzogáányny vvtvvt

OMF

MájVeseLipid

TTPHUS

AIHA ÉgésDaga-nat

Vvt inklúziókVvt inklúziók

Supravitalis fest ıdésoxidált Hgb

DNS maradvány

Denaturált RNS

PerifPerifééririáás vs véérkenet 2.rkenet 2.

•• NeutrophilNeutrophil:: 5555-- 70%70%•• LymphocytaLymphocyta:: 2020-- 40%40%•• MonocytaMonocyta:: 22-- 8%8%•• EosinophilEosinophil:: 11-- 4%4%•• BasophilBasophil:: 0.50.5-- 1%1%

ÉÉretlenretlen grangranulocytulocytáákk

BalratoltBalratolt vvéérkrkéépp

4

Oka:zajló heveny bakteriális

fertızés

Neutrophilia egyéb okaistressz, trauma

gyulladások: reumás láz immunbetegségek: RAmetabolikus: köszvény,

ketoacidosis

eo

MononucleosisMononucleosis korai Bkorai B--sejtes sejtes ffááziszis

Kappa Lambda

Lymphocytosis okai:Vírus infekciók

Chr. bakteriális infekcióLymphocytás leukaemiaMyeloma, BesugárzásHepatitis fertızés

Polyclonalis B sejt proliferáció

PerifPerifééririáás vs véérkenet eltrkenet eltéérrééseisei

•• MonocytosisMonocytosis::ChronicusChronicus gyulladgyulladáásoksokVVíírusfertrusfertıızzéés, s, TuberculosisTuberculosisColitisColitis ulcerosaulcerosa, Parazit, Parazitáák (pl. k (pl. malariamalaria))

•• BasophiliaBasophilia::CMPD, CMPD, LeukaemiLeukaemiáákkUraemiaUraemia

AnaemiAnaemiáákk

Perifériás vérkép vizsgálata vashiányos anaemiában

Perifáriás vérkenet vashiányos anaemiában

Vashiányos vérszegénység

Laboratóriumi vizsgálatok:vérkép, perifériás vérkenet

serum ferritinserum vas

transferrin szinttransferrin telítettség

csontvelı vizsgálat nem indokolt

• MCV = 61.1 fL; M/H hányados = 0.63 • A vashiány diagnózisa bizonyított

VashiVashiáányos vnyos véérszegrszegéénysnyséégg

M/H < 0.9 : vashiány jelenlétére utal

Perifériás vérkép vizsgálata anaemia perniciosában

Perifériás vérkenet anaemia perniciosában

(Hypersegmentált neutrophil granulocyta)

Anaemiaperniciosa

Laboratóriumi vizsgálatok:vérkép, perifériás vérkenet

LDH, seBi, RTCB12 vitamin és fólsav szintekPC és IF ellenes antitestekcsontvelı: megaloblastos

vérképzés

ExtraExtra --éés s intravaszkulintravaszkul áárisrishaemolysishaemolysis

RES:lép

Hapto-globin

LaboratLaborat óóriumi eredmriumi eredm éények nyek extravaszkulextravaszkul áárisris haemolysisbenhaemolysisben

•• Fokozott Fokozott vvtvvt szszéétestesééssnemnem--conjugconjugááltlt seBiseBi szint emelkedikszint emelkedikvizelet vizelet ubgubg emelkedikemelkedikszszééklet klet stercobilinogenstercobilinogen emelkedikemelkedikhaptoglobinhaptoglobin jelentjelentıısen cssen csöökkenkken

•• Fokozott Fokozott vvtvvt termeltermelééssRTC emelkedikRTC emelkedikCSV M : E = 1 : 1 (N: 4 : 1)CSV M : E = 1 : 1 (N: 4 : 1)

•• KKáárosodott rosodott vvtvvt--kkRBC RBC éélettartam cslettartam csöökken, kken, morphologiamorphologia

LEUKAEMILEUKAEMIÁÁKK

FLOW CYTOMETRIA PCR

A leukaemiák diagnózisa

Acut myeloid leukaemiaPreanalitika

3 db EDTA-s csı vér(FCM + genetika)

+ csontvelı vizsgálat

Fúzionált lysosomák

Akut Akut myeloidmyeloid leukemileukemiáákkImmunfenotípus meghatározás

AML1

ETO

AML1/ETO

AML1/ETO

t(8;21)(q22;q22) (AML1/ETO)

t(15;17)(q22;q12)(PML/RARa)

RARαPML

PML/RARα

t(v;11)(v;q23)(v/MLL)

t(16;16)(p13;q22)(CBFββββ/MYH11)

M1 M3 M5 M4eo

Visszatér ı genetikai eltéréssel

CD34 HLA-DR MPO CD13 CD14 CD15 CD33 Gly CD41

M0 + +/- +/- +/- - - +/- - -M1 + +/- + +/- - +/- + - -M2 + +/- + +/- - +/- + - -M3 - - + + - + + - -M4 - + + + + +/- + - -M5 - + +/- +/- + +/- + - -M6 - - - - - - - + -M7 - - - - - - - - +

Vérkép ALL-ben

Perifériás vérkenet ALL-ben

AcutAcut lymphoblastoslymphoblastos leukaemialeukaemia

Rossz prognózis: magas FVS szám, érett B sejtes, Ph +, felnıtt kor, >4 hét remisszió elérése, KIR érintettség,

3-6 hónapnál MRD +

Pro-B + + + + - - -

Common-B + +/- + + + - -

Pre-B +/- - + + +/- + -

Érett-B - - + + +/- - +

Akut Akut lymphoblastoslymphoblastos leukemialeukemia

TdT CD34 HLA-DR CD19 CD10 cIgM sIgM

t(8;14) (c-myc/IgH)t(2;8) (kappa/c-myc)t(8;22) (c-myc/lambda)

c-myc

diagnózis meghatározása (immunfenotípus)

BURKITT(„érett-B” fentípus)

CML diagnCML diagnóózisazisa

•• PerifPerifééririáás vs véér:r:VVéérkrkéép, perifp, perifééririáás vs véérkenetrkenetRTRT-- PCR:PCR:BCRBCR--ABL fABL fúúzizióós s transcriptektranscriptekBCRBCR--ABL/ABL hABL/ABL háányados (nyados (<<0.1%)0.1%)CCyRCCyR ututáán 3 havontan 3 havonta

•• CsontvelCsontvelıı vizsgvizsgáálat:lat:MorphologiaMorphologiaCytogenetikaiCytogenetikai vizsgvizsgáálatlat ((PhPh +)+)FISH vizsgFISH vizsgáálatlatCCyRCCyR--igig fféélléévente, majd vente, majd ééventevente

CML diagnCML diagnóózisa 2.zisa 2.

Perifériás vérkép CLL-ben

Perifériás vérkenet CLL-ben

Gumprechtrög: sejtmag

Immunfenotípus meghatározás:CD5,19 és CD23 koexpresszió

Genetikai prognosztikai tényezık:CD38, del 11q, del 17p

Csontvelı vizsgálat nem szükséges !

Chronicuslymphocytáslaeukaemia

MonoklonMonoklonáálislisgammopgammopáátitiáákk

MGUSMGUSMGUS:MGUS: monoclonalmonoclonal gammopathygammopathy of of

undeterminedundetermined significancesignificanceM komponens:M komponens:

monoklonmonoklonáálislis fehfehéérjerje

SPEP: gamma globulin frakciSPEP: gamma globulin frakcióó

klonklonáálislis plazmasejtek termelik plazmasejtek termelik

1 neh1 nehéézlzláánc, egyfnc, egyfééle kle köönnynnyőőllááncnc

>> 25 25 éév :v : 1%1%

>> 70 70 éév :v : 3%3%

>> 90 90 éév :v : 14 %14 %

M komponens SPEP kM komponens SPEP kéépepe

CsontvelCsontvelııi plazmasejtek i plazmasejtek MyelomaMyeloma multiplexbenmultiplexben

A A MyelomaMyeloma multiplex multiplex diagnosztikdiagnosztikáájaja

1.1. VVéér:r:VVéérkrkéépp, CN, se , CN, se creatinincreatinin (50%), (50%), WeWe, HUS, , HUS, se se CaCa, LDH, , LDH, öösszfehsszfehéérjerje, se albumin, CRP , se albumin, CRP SPEP, immunglobulinok, SPEP, immunglobulinok, immunfiximmunfixáácicióóTeljes vTeljes véér r éés plazma viszkozits plazma viszkozitáás, s, PTR/INR, APTI, vPTR/INR, APTI, véérzrzéési idsi idıı, , ββ--22--mikroglobulin (MHC I. osztmikroglobulin (MHC I. osztáály ly AgAg

kköönnynnyőő lláánca)nca)

2. 2. Vizelet:Vizelet:proteinuriaproteinuria, Bence, Bence-- Jones protein, Jones protein, Vizelet Vizelet elfoelfo, , immunelfoimmunelfo

RouleauxRouleaux--kkéépzpzııddééss MMMM--benben

Magas plasma fehérje tartalom következményei, magas We-t okoznak

Komplett immunglobulin Komplett immunglobulin ééssszabad kszabad köönnynnyőőlláánc nc ((elfoelfo-- immunfiximmunfixáácicióó))

szL

IgA lambda monoclonalitás Szabad lambda könnyőlánc