Upload
vuhuong
View
213
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
A PERINATALlS IDÓSZAK víz- ÉS ELEKTROLYTFORGALMÁNAK,
VALAMINT AZ ÚJSZÜLÓTTEK UROGENITALIS TRACTUSÁNAK
Doktori iskola vezetoje:
Programvezeto:
Témavezeto:
Doktori Iskola:
ÁLLATKíSÉRLETES ÉSKLINIKAI VIZSGÁLATA
Dr Nyul Zoltán
Baranya Megyei Kórház"Kerpel-Fronius Ödön"
Gyermek-Egészségügyi Központ
PhD értekezés tézisei
Prof Dr Bódis József
Prof. Dr. Sulyok Endre
Prof. Dr. Sulyok Endre
. PTE ETK EgészségtudományiDoktori Iskola
P-3/C-4 program
Pécs, 2007
1 Bevezetés
Akoraszülések gyakoriságának csökkentésére irányuló eredményes szülészeti törekvések mellett a
csecsemohalálozás javításában fontos szerepe van azoknak az erofeszítéseknek, melyeket a
gyermekgyógyászok az újszülöttek élettani sajátosságainak megismerésére, az újszülöttkori
patológiás állapotok kórtanának tisztázására és a kóros állapotok megelozésére és kezelésére
végeznek. Ezen törekvések eredményeképpaz utóbbi évtizedekben a koraszülöttek és ezen belül is
az igen kis súlyú koraszülottek neonatologiai ellátásábanigen jeientös haladás történt.
A Pécsi Orvostudományi Egyetemen kiemelkedö hagyományai vannak az újszülöttkori sav-bázis
egyensúly szabályozása és ehhez kapcsolódóan az elektrolitforgalmi zavarok kutatásának. E
vizsgálatok eredményeképp sikerült feltárni az újszülöttkori elektrolitforgalomrenális és endokrin
szabályozásának legfontosabb elemeit, a sav-bázis egyensúly és az elektrolitháztartás sajátos
kapcsolatát és az érés során bekövetkezováltozásokat.
A vizsgálatok igazolták, hogy alacsony súlyú koraszülöttekben élettani körülmények között is
renális sóvesztés következik be, melynek eredményeképp negativ nátrium egyenleg és a plazma
nátrium koncentrációjának csökkenése, az úgynevezett "késöi hyponatraemia" alakul ki. Az
egészséges koraszü1Öttekbenazonos életkorban kialakuló késoi hyponatraemia és metabolikus
acidosis hátterében az elégtelen renális H+-Na+ csere pathogenetikai szerepét igazolták és elsoként
mutatták ki, hogy NaCl szupplementálással az elektrolitforgalom átmeneti, de a koraszülöttek
marginális szomatikus stabilitásátjelzo zavara megelozheto, illetve korrigálható.
2 Célkituzések
Az értekezésben összefoglalt vizsgálatainkkal az endogén ouabaili-szerü anyag neonatális,elektrolitforgalmi jelentoségét, a tüdo és az agyszövet fizikai víztereinek perinatális változásait
valamint a renális AQP-2 ürítés és az újszülött vese koncentráló képessége közötti kapcsolatot
kívántuk tisztázni. Különös figyelmet fordítottunk annak megismerésére is, hogy a húgyutak
normális muködésének fenntartásában milyen szerepet játszanak azok az autokrin/parakrin módon
ható vasoaktiv anyagok, melyek expressziója az egészséges ureterben kimutatható (endothelin-l,
adrenomedullin, nitrogén monoxid, neuropeptid-Y). Vizsgálatainkat modern laboratóriumi
módszerek felhasználásával (RIA, HPLC, HI-NMR spectroscopia, real-time PCR,
immunohistochemia)szélesköru hazai és nemzetközi együttmuködésbenvégeztük.
Eredményeink hozzájárulhatnak a perinatális idoszak élettani folyamatainak és kóros történéseinek
teljesebb megismeréséhez és alapjául szolgálhatnak a korábbiaknál eredményesebb terápiás
eljárások bevezetésének. Az ureterben kimutatható vasoaktiv hormonok quantitatívanalízisével a
húgyúti fejlodési rendellenességek kialakulásának mechanizmusához és a késobbi oki kezelés
megtervezéséheznyújthatunkhasznos információt.
3 Anyag és módszer
, .
Az endogén ouabain-szerií anvag renális kiválasztása NaCl szuvvlementált koraszülöttekben
A NaCl szupplementációban részesülö csoport /átlagos születési súly: 1578g (l280-1750g),
gestatios kor: 30,4 hét (29-33 hét)! és a kontroll csoport /átlagos születési súly: 1537g (1250-
1810g), gestatiós kor: 30,8 hét (28-34 hét)/ egyaránt 9-9 fi~ újszülöttet foglalt magában.A NaCl
szupplementáció protokollja szerint a vizsgált koraszillöttek a 8-21 nap között 3-5 mmol/kg/nap,
22-35 napos korban 1.5- 2.5 mmol/kg/nap NaCl-ot kaptak. A kontroll csoport NaCl
szupplementációbannem részesillt. Táplálásuk gyujtött anyatejjel történt, a második hét végére a
napi,folyadékbeviteI150-180m1/kg-igemelkedett.Valamennyikoraszülött zavartalan terhességböl,per vias naturales, jó állapotban született; perinatalis asphyxia, infectio vagy cardiopulmonalis
distress klinikai vagy laboratóriumi jelei nem voltak észlelhetöek és a vizsgálatsorozat egész
tartama alatt tünetmentes maradt. A vizsgálat etikai bizottsági hozzájárulás és minden újszülöttnél
tájékoztatástköveto szüloibeleegyezésbirtokábantörtént.
A vizsgált koraszülötteknél a 7. életnapon, majd 5 hetes életkorig hetente 24h-s vizeletgyujtés
történt és a gyújtött mintából meghatározásra került a renális Na, K (lángfotometria), kreatinin
(módosított Jaffé-reakció)valamint ouabain (RlA, HPLC) koncentráció. Folyamatosan ellenoriztük
a plasma elektrolitok szinteket is. A statisztikai analízis során az ugyanazon alanyok ouabain
excretiójának belül idobeni eltéréseinek elemzéséh'ezegymintás párosított, a szupplementált és a
kontroll csoport összehasonlításárakétmintást-próbát alkalmaztunk.
A tüdo és az agvszövet víztartalmának H1-NMR relaxációs vizsgálata foetalis és neonatalis .
nvulakban
A vizsgálatot 25 (n=17), 27 (n=14), 29 (n=l7) és 31 (n=12) napos gestatiós korú, electiv sectio
caesareával született Pannon fehér nyúlfoetusokon végeztük. A kísérlet másik csoportját 18,
terminusra (31 nap) született, 4 napos postnatalis korú nyúl képezte. Az állatokat letalis dózisú
subcutan pentobarbitállal elaltattuk, majd az összes víztartalom meghatározás,NMR relaxatios ido
és szöveti hyaluronan (HA)-mérés céljából agymintákat illetve tüdó szövetmintákat nyertünk. A
vízterekben lezajló postmortem változások elkerülése céljábol az NMR vizsgálatot közvetlenül az
állatok leölésétkövetoenvégeztük, a HA meghatározásiga mintákat -700C-rafagyasztvatartottuk.. .
A hyaluronsav meghatározás céljából a szövetmintákat súlymérés után lefagyasztottuk és
fagyasztva-száritottuk 72h-n át. Az ismételt súlymérés után a vfztartalmat nedves/száraz súly
hányadosaként határoztuk meg. A száraz szövetmintát 2.5 Ulml puffer oldatban (0.05 M Tris
aminomethan, 0.01 M CaC12, pH 7.2) pronase-val (protease p-5147, streptomycesgriseus, Sigma,
St Luis) kezeltük. Az enzimet 1 U/lOmg szövet koncentrációban alkalmaztuk.Az enzimkezelés
leállítása 10 perces, 100°C-osvízfilrdovel történt, majd a HA tartalmat radiometriásassay kit (HA
50, Pharmacia,Uppsala, Svédország)segítségével határoztuk meg.
NMR spectroscopia elokészítésére a 200 mg súlyú szövetrnintákat 5 mm átméroju NMR
üvegcsövekbe helyezve 400C-on 5 percig inkubáltuk. A mágneses rezonancia vizsgálat (MRS)
komputerizált Bmker Minispec PC 140 hordozható 0.96 T-s (40MHz) MR.spectroscoppaltörtént.
180° és 90° pulzusok között 8 különbözo mérést végezve került meghatározásraa TI relaxatios ido.
Az ismétlési idot a TI 5-szörösének tekintettük. A T2relaxatios idot a Carr-Purcell-Meiboom-Gill
sequencia használatával nyertük; 1000, 1 mSidejü echo alkalmazásával.Mindegyikpontot 5 mérés
átlaga képezte. Az adatok tárolása és analysise PC-n történt, a szöveti vfmakciók mobilitásuk
szerinti mennyiségi meghatározására a T2 relaxatios görbék multiexponenciális analysisét
alkalmaztuk, a nem lineáris legkisebb négyzetek módszerének felhasználásával. A szabad
inductioju proton relaxatio exponenciális mintát mutat. Amennyiben a vizsgált szövetminta
különbözo relaxatios hányadossal rendelkezö, egymástól független vfztereket tartalmaz, ezen
függvénymultiexponenciális egyenlettelleírható. A (T21és Tn relaxatios görbéveljellemzett)kötött
és szabad vízkompartmentekmeghatározásárabiexponentialis illesztést használtunk.
Pveloureteralis obstructióval született 2Vermekek stenoticus ureterszakaszainak vizsgálata
Congenitalispelviureteralis stenosis miatt, Anderson-Hynesszerint mútött 8 gyermek /átlagéletkor:
4,1 év (6 hét-12 év)/ stenoticus ureterszakaszai képezték a vizsgálati mintát. A diagnosis a
radiológai, scintigraphiai leletekre alapult. Kontrollszövetként tumor nephrectomián /n:7,
átlagéletkor: 73 ev (56-84 év)/ vagy hólyagtumor resectión átesett felnott páciensek uretermintái
szolgáltak. A szövetrnintákat közvetlenül a kimetszés után folyékony nitrogénban lefagyasztottuk
és a feldolgozásig-700C-ontároltuk.
A génexpresszíós vizsgálatok céljából RNA-zoI kit használatával (WAKChemie, Medical GmbH,
Bad Homburg, GFR) a szövetmintákból total RNS-t izoláltunk, majd spectrophotographiával
meghatároztuk a koncentrációjukat.Az így nyert RNS 2pg-ját 40 ul volumenü elegyben39C°-on
60 percig reverse transcriptiónak vetettük alá. A génexpresszió monitorizálásárareal-time PCR,analízist használtunk. Mértük a NPY, az endothelin-l, a közelmúltban felfedezett,
simaizomrelaxáns hatással rendelke2O adrenomedullin (AM), valamint a különbözo nitrogén-
monoxid synthase izoformok, a neuronalis (nNOS), endothelialis (eNOS) és indukálható (iNOS)
génjének mRNS expresszióját. Kontrollként glyceraldehid-3-phosphat dehydrogenase (GAPDH),
CD31, simaizom-actin (Smactin) és a neuronalis marker protein gén termék 9.5 (pGP)
housekeeping gének szolgáltak. Külso referenciaként a target-gén PCR termékének sorozathigítása
szolgált. A vizsgált cé1szekvenciákhoz (target) a Primer Express (perkin Elmer) program
segítségével választottunk oligonucleotidokat, azonos PCR kondíciókat eredményezö paraméterek
beállításával.
Vizelet aauaporin-2 kiválasztás koraszülött és érett úiszülöttekben
A vizsgálati csoportokat per vias naturales született 5 egészséges koraszülött (átlagos gestatios kor
30.6hét 130-32/;átlagosszületésisúly: 1570g11480-16701)és terminusraszületett9 egészséges
újszülött (átlagos gestatiós kor 39.2 hét 137-40/;átlagos születési súly: 3218g12760-42701)képezte.
Mindkét csoport úszülöttjeinek testsúlya a gestatiós korra számított 10-es és 90-es percentil közé
ese!!. A gestatiós idötartam meghatározása az UH-vizsgálattal megerosített anyai menstruációs
anamnesisen illetve a megszületést követoen vizsgált érettségi jeleken (Dubowitz-score) alapult.
Minden esetben az 1 perces Apgar érték 7-nél magasabb volt, a cardiorespiratoricus adaptatio
zavartalan volt es a perinatalis idöszak eseménytelenül zajlott. Az édesanyák normál étrendet
kaptak, nem részesültek. diureticus terápiában, kórelözményükben nem szerepelt renalis vagy
cardiovascularismegbetegedés. Az érett újszülöttek vizsgálatára az 1., 3. és 5 életnapon került sor,
62ml/kg, 86ml/kg és 116ml/kgmegfelelo napi folyadékbevitel biztosítása céljából 5%-os glucose
oldattal kiegészített anyatejes táplálás mellett. A koraszülött újszülöttek a vizsgálatsorozatbana 7.
életnapon majd hetente 6 hetes korig vettek reszt. A napi folyadékbevitel (158-195ml/kg)
eléréséhez az anyatejes táplálás kiegészítésere szinten 5%-os glucose oldatot kaptak. A vizsgálat
során mindkét csoport alanyaitói osmolalitas, kreatinin és AQP-2 meghatározás céljából az utolsó
táplálást követoen 3-4 h-val reggeli vizeletrnintavételrekerült sor.
A vizelet osmolalitás Knauer osmometerrel, a kreatinin mérése módosított Jaffé módszer szerint
történt. A vizelet aquaporin-2 (AQP-2) szint meghatározását magas .szenzitivitású
radioimmunoassay-valvégeztük. A statisztikai értékeléshezMann-Whitney tesztet használtunk.
4 Eredmények
Az endogén ouabain-szerü anvag renális kiválasztása NaCl szupDlementált koraszülöttekben
Alacsony sóbevitel esetében negatív Na egyensúly alakult ki a 4. hét végére, f!1elyeta plasma Na-
szint szignifikáns esése és folyamatosan csökkeno excretio jelzett. Ezzel szemben, a NaCl
szupplementációban részesülo koraszülött újszülöttek plasma Na szintje a normál tartományban
maradt,ugyanakkor a Na excretio fokozódott.
A szupplementációt megelozoen mindkét vizsgálati csoportban hasonló ouabain excretiót
észleltünk. A kontrollcsoportban a vizelet ouabain az 1. héten mért 180:1:9.7pglkglh-ról
szignifikánsan emelkedett a 3. héten regisztrált 260.1%11 pg/kglh-ig (p<O.OI),ezt követoen
azonban ezen a szinten maradt. A sóbevitel növelése a vizelet ouabain ürítés jelzett, de nem
szignifikáns csökkenésévei járt az elso két héten (146:1:16.8pglkglh az 1. héten és 92.1%16.6
pglkglh a 2. héten); a vizsgálat késobbi szakaszaiban további változásokat nem észleltünk.
SzignifIkánsaneltéro ouabain ürítés (p<0.001)mutatkozott a 2- 5. közötta két vizsgált csoportban.
A fenti megfigyelésekhez hasonlónak bizonyultak a kreatininre korrigált ouabain excretio
postnatalis változásai is és a 2-5 hét közötti intervallumban hasonlóképpen szignifikánsan
magasabb értékeket (p<0.001) találtunk a NaCl szupplementációbannem részesüIt koraszülöttek
esetében. Míg alacsony sóbevitel mellett a ouabain és a Na-excretio között összefüggés nem volt
észlelheto, a NaCl szupplementációban részesülo koraszülöttek esetében a két paraméter szoros
korrelációtmutatott (r=0.66, p<O.OOI).
Az agv 6s a tüdoszövet víztartalmán.akW-NMR relaxációs vizsgálata foetalis és neonatalis
nvulakban
A gestatio elörehaladtával a nedves/száraz súly hányadossal jellemzett agyszöveti víztartalomban
fokozatos,lassú csökkenést regisztráltunk a kezdeti, 25. napon mért 9.6:1:0.3-tól a 9.3%0.2 (27. nap,
p<0.01), 9.2%0.2 (29. nap, p<O.OOl),9.1%0.3 (31. nap, p<O.OOl) értékekig, melyet a 4. postnatalis
napon mért 8.7:1:0.3-as (p<0.001) kifejezett esés követett. A TI, T2 relaxatiós idok hasonló trendet
mutattak; a TI 1524:1:101 ms és 1494%50 ms között változott a foetalis periódusban, majd
1382%84ms-ra csökkent postnatalisan (p<0.001). A T2 relaxatiós ido postnatalis esését
(200.é:i:7.lms, p<O.OOl) azonban már a 25-29. gestatios naphoz képest (229:1:10.4ms - 233%7.1 ms)
a 31. napon (220:1:21.9ms) megfigyelhetö szignifikáns csökkené:5 vezette be (p<0.05).
A T2 relaxatiós görbe biexponenciális elemzése lehetövé teszi a kötött és szabad vízftakciókat
jellemzo gyors (T2l) illetve lassú (T22) komponensekre való bontást. A T21 a gestatiós idovel
párhuzamosan emelkedett 102.4:1:40.6ms-ról (25. nap) 135.5:1:64.3 ms-ig (31. nap), amit 92.6:1:28.8
ms-ra (4. nap) történo postnatalis csökkenés követett. A T22 a 25. napon mért 234.2:1:9.7 ms-os
értékrol a 29. napig 293.4:1:130.9 ms-ig emelkedett, majd folyamatos csökkenést mutatott a
224.2:1:19.2 ms-os (31. nap, p<O.OOl) és 206.0:1:8.4 ms-os (pos1nataIis 4. nap, p<O.OOl) értékekig.
Ennek eredményeképp, a T21relaxatios komponenssel reprezentált kötött vízftakció a 25. napon a
teljes agyszöveti víztartaIom 4.4:1:1.8%-át tette ki, majd a 29. napon elérve a 19.3:1:26.2%-os
maximális értéket (p<O.OI) fokozatosan süllyedt 6.8:1:8.0%-ig (31. nap) illetve 4.6:1:5.3%-ig
(pos1nataIis 4. nap, p<0.05). Miközben az agyszövet teljes vfztartaIma a gestatiós idoszakban a 29-
31. nap között mindössze 0.8%-kal mérséklodött, az ennek megfelelo T2 relaxatiós ido csökkenése
4.6%-os volt. A T21-bol származtatott kötött víZfrakció négyszeresére emelkedett a gestatio 29.
napjára, amit a 4. pOS1natalis napra a kezdeti értékre történo gyors esés követett. Ezen
eredményekbol az agyszöveti víztartaIomnak a gestatio elorehaIadtávaI fellépo átrendezodésére
következtethetünk.
A koraszülött nyúl agy HA-koncentrációjaa 25. napon észlelt 2095:1:273.4uglg értékroljelentosen
csökkent a 27. (1541:1:168.8uglg, p<O.OOI)és a 29. napra (1527:1:316.0uglg, p<O.OOI);ezt
követoen átmeneti emelkedést regisztráltunk (1826:1:292.0uglg, p<0.05) a 31. napon. Az érett
újszülött nyulak agyszövetének HA-koncentrációja összehasonlítva a koraszü1öttekével
pos1natalisanextrémalacsony értéket (1144:1:126.3uglg, p<O.OOI)ért el.
A tüdoszövet nedves/száraz súly hányadossaI számított víztarta1maa 25. gestatios nap (8.8:1:0.5)és
a 29. nap (8.8:1:0.4)között lényegében változatlan, a 31. naptól azonban mérsékelt (7.7:1:0.7,
p<O.OOI),majd a 4. életnapon kifejezett csökkenés (5.910.3, p<O.OOI)volt mérhetö. Hasonló
tendenciák észlelhetok a Th T2 relaxációs idok vonatkozásában, amennyiben átmeneti emelkedést
(1300:1:100ms TI és 191.5:1:25.8ms T2 a 25. praenatalis napon; 1430:1:80ms TI /p<O.OOllés
248.5:1:19.2ms T2/p<0.OOlla 27. napon) követoenmindkét érték csökkent.
A T2 relaxatiós görbe biexponenciáIis analízisévei elkülönített kötött (T21) és szabad (T22)
víztérftakciók a 27. napig növekedtek, majd a vizsgálati periódus végéig progresszív csökkenést
mutattak. A 25-29. napig terjedo gestatios idoszakban a teljes tüdoszöveti víztartaIom 31-34%-at
tette ki a kötött fractip, amely a 31 napon 21.6:1:8.0%-ra(p<0.001), a postnatalis 4. napon
16.6:1:9.4%-oshányadra csökkent (p<0.001).
A gestatio elorehaIadtávaIa száraz szövetre vonatkoztatott HA-concentratio fokozatos csökkenését
regisztráltuk (870.8:1:205.2uglg a 25.napon, 162.6:1:32.4pg/ga 31 napon /p<O.OOII),megszü1etést
követoen azonban - a tüdöszöveti víztartalom,kü1önösena kötött fractio párhuzamosan
bekövetkezö esése ellenére - a HA kétszeresére (347.3:1:708uglg /p<O.OOII)emelkedett. A
tüdoszöveti víztartaIom pozitiv korrelációt mutatott aT, (r=O.87, p<O.OOI)és a T2 (r=0.93,
p<0.001) relaxatios idökkel valamint a T2 analízisévei számított kötött (T21)vízfractióval (r=O.67,
p<0.001). A HA-koncentráció csak a teljes szöveti víztartalommaI korrelált (FO.39, p<O.OOI), a TI
(FO.15, n.s.), T2 (FO.22, n.s.) rela,"{atiosidöktöl és a T21komponenstöl (FO.24, n.s.) függetlennek
bizonyult.
Pveloureteralis obstructióval született evennekek stenoticus ureterszakaszainak vizsgálata
CD31-hez (endothel-specifikus housekeeping marker) viszonyítva szignifikánsan emelkedett
endothelin-1 (ET-1) és GAPDH-re (általános housekeeping gén) vonatkoztatva csökkent
adrenomedullin (AM) expressziót észleltünk a stenoticus ureterszakaszokban. Az nNOS, eNOS,
iNOS és NPY mRNS tartaIom tekintetében nem különbözott a stenoticus és a kontroll szövetminta.
Az egyéb peptiderg és nitrerg rendszerekkel összehasonlftva az NPY-expresszió lényegesen
alacsonyabbnakadódott.
Vizelet aauavorin-2 kiválasztás koraszülött és érett úiszüIöttekben
Az érett újszülöttek vizelet AQP-2 koncentrációja az 1. postnatalis napon volt a legmagasabb
(74~20 nmoVu1), a 3. és az 5. napon 3~12 nmoVul illetve 44~13 nmoVuI szintre esett. AIapvetöen
hasonló változásokat mutatott a vizelet creatinin excretio is, azonban kifejezettebb csökkenést.
mértunk (470~83 mgll az 1. napon vs. 132::1:8mgll az 5. napon; p<O.OOl). Ennek eredményeképpen
a kreatinire korrigáltAQP-2 kiválasztás aL, 3. és 5. napon 194:1:45finoVmgCr, 121~36 finoVmgCr
és 322::1:90finoIlmgCr értékeknek adódott. Ezzel ellentétes trend volt megfigyeIhetö a vizelet
osmolaIitás tekintetében; a postnatalis kor elörehaladtával fokozatos csökkenést észleltünk (1. nap
260~39 mOsm/l, 3. nap 188:1:55mOsm/l/p<Ö.05/, 5. nap 69 mOsm/l/p<O.Ol/).
5 Összefoglalás
Az értekezés elsö részében különbözö sóbevitel mellett a koraszü1öttek ouabain (EDLF)
excretiójának vizsgálatait ismertettük. Kimutattuk, hogy a NaCI-szupplementált koraszü1öttek
ouabain ürítése szignifikánsan alacsonyabb a kontrollcsoportéhoz képest. Eredményeink azon
irodalmi adatokat erösítik, melyek szerint nincs közvetlen okozati összefilggés a volumenexpansio
és az adrenalis ouabain produkció között. Számos korábbi kisérleti megfigyelésre támaszkodva
elsöként feltételeztilk, hogy koraszüIöttekben az EDLF tenneIése illetve secretiója a renin-
angiotensin-II rendszer szabályozása alatt áll. A NaCI- szupplementációban részesülö csoportban a
ouabain és a NaCl excretio között kimutatott pozitiv korreláció az EDLF-nek az excessív sóbevitel
eliminációjábanjátszott szerepéreutal.
A perinatalis idoszak vízforgalmának megértéséhez elengedhetetlen a víz molekuláris szintu
viselkedésének ismerete. Munkacsoportunk az agy és a tüdo víztartalmán~, W-NMR
spectroscopiával elkülönítheto, különbözo motilitási tulajdonsággal rendelkezo vízfractióinak,
valamint az igen jelentos vízköto tulajdonsággal rendelkezo hyaluronsavnak a gestatio és a
közvetlen postnatalis élet so~ bekövetkezo érési változásait és összefüggéseit kutatta.Eredményeink alapján az agyszövetet a foetalis idoszakban emelkedett HA-koncentráció és
víztartalom, ezen belül is a szabad motilitású fractio túlsúlya jellemzi. Ezen paramétereknek a
postnatalis életben bekövetkezo, de már a gestatio végén megkezdödo csökkenése függetlennek
bizonyul a kötött vízfractio változásaitói, ami arra enged következtetni, hogya foetalis agy
víztartalmánakátrendezodésébena hyaluronsav nemjátszik lényeges szerepet.
A tüdöszövet vizsgálata megerösíti azon korábbi megfigyelést, hogya tüdöbol történö
folyadékeltávolítás az effektív postnatalis. gázcsere biztosítása érdekében már a születést
megelozöen megindul. Eredményeink továbbá adatokkal szolgálnak a tüdo víztartalmának fizikai
sajátosságait illetöen, kimutatva a kötött vízfractio csökkenését és a szabad motililtású
komponensnek a perinatalis idöszakban bekövetkezö párhuzamos emelkedését. Az agyszövet
vizsgálatakor kapott eredményhez hasonlóan a tüdo vonatkozásában sem találtunk összefüggést a
kötött motilitásúvízfractio és a HA-tartalom között.
A koraszülött és érett újszülöttek AQP-2 üritésének vizsgálata megerosíti az elozetes megfigyelést,
hogy az AQP-2 az újszülöttek vizeletében alacsony koncentrációban ürül, továbbá excretiója az
érés során változik. Koraszülöttekben és érett újszülöttekben.az élet elso hetében megfigyelhetö
AQP-2 excretio nem mutat szignifikáns különbséget,mely az AVPáltal regulált AQP-2 szintézis és
intracelluláris transzport érésének postnatalis faktoraira lúvja fel a figyelmet. Vizsgálataink a
renális AQP-2 és a renális koncentráló kapacitás disszociációját mutatják, felvetve az AVP-AQP-2
tengely és AVP-tólfüggetlen tényezök egymástólaszinkronérését, változását.
Rán1utattunkarra, hogy az éretlen vese magas HA tartalma a renális koncentrálóképesség fontos
limitáló tényezöje és szerepet játszhat az újszülött excesszív vízkészleteinek kiüritésében és a
sikerespostnatalis adaptáció feltételeinekbiztosításában.
Számos paracrin/autocrin módon ható vazoaktiv hormon, peptid illetve ezek szintézisét végzo
enzim mutatható ki az urogenitalis tractusban, melyek szerepe még tisztázatlan. A congenitalis
ureter obstructióval operált betegek stenoticus szövetmintáin végzett molekuláris genetikai
vizsgálatainkrálátást engedhetnekegyes korélettani vonatkozásaikra.Vizsgálataink az endothelin-l
fokozott és az adrenomedullincsökkent génexpresszióját igazolták, mely eltérések, tekintetbevéve
physiologiai hatásukat, jól korrelálnak a stenoticus segmensekben megfigyelheto microanatomiai
elváltozásokkal.
Mellállapításaink összefolllalása:
1. Natrium-klorid szupplementációban részesülö koraszülöttek ouabain excretioja csökken, a
natrium és ouabain-ürités korrelációja a ouabainnak a só,eliminációjában lehetséges
szerepére utal.
2. Az agyban és a tüdoben már a gestatio végén megindul a vízterek átrendezodéseés ebben a
hyaluronsav nem játszik szerepet.
3. A renális AQP-2 kora- és érett újszülöttekben fiiggetlen a vese koncentráló kapacitásának
változásátóI.
4. Veleszületett pyeloureteralis obstructióban az endothelin fokozott és az adrenomedullin
csökkent génexpresszója figyelheto meg.
6 Köszönetnvilvánítás
Kiemelt köszönettel tartozom Dr. Sulyok Endre Professzor Úmak, aki az értekezés alapjául
szolgáló vizsgálatoknak mindvégig irányítója, munkánmak kezdetektol fogva bátoritó, segíto
támogatója, tanárom volt.
Köszönetet szeretnékmondani prof. Dr WolfgangRascher professzor Úmak, az ErlangeniEgyetem
Gyermekklinika igazgatójának, hogy lehetoséget biztosított számomra, hogy molekuláris biológiai
laboratóriumábandolgozhassakés így részese lehettem kiváló munkacsoportjának.
Köszönetem fejezem ki prof. Dr Gmmar Sedin professzornak az Uppsalai Egyetem
Gyermekklinika igazgatójának a labordiagnosztikai lehetoségek biztosításáért és hasznos
tanácsaiért.
Köszönet illeti mindazon munkat~saimat, akikkel együtt dolgozhattam a vizsgálatok során ésakiktol sokat tanulhattam.
Közlemények
Közlemények az értekezés tárgykörében
1. Sulyok E, Nyul Z. Hyaluronan-related limited concentration by the immature kidney. MedHypotheses. 2005;65(6):1O~8-61. Epub'2005 Sep 6. IF: 0.607
2. Nyul 2, Vajda Z, Vida G, Sulyok E, Frokiaer J, Nielsen S. Urinary aquaporin-2 excretion inpreterm and full-term neonates. Biol Neonate. 2002;82(1):17-21. IF: 0.81
3. Knerr 1,Nyul Z, Miller J, Rosch W, Dotsch J, Repp R, Weidner W, Rascher W. Increasedendothelin-l and decreased adrenomedullin gene expression in the stenotic tissue ofcongenital pelvi-ureteric junction obstruction in children. BJU Int. 200 I May;87(7):667 -71.IF: 0.84 '
4. Sulyok E, Nyul Z, Bogner P, Berenyi E, Repa 1, Vajda Z, Doczi T, Sedin G. Brain water andproton magnetic resonance relaxation in preterm and term rabbit pups: their relation totissue hyaluronan. Biol Neonate. 2001 Jan;79(1):67-72. IF: 1.072
5. Sedin G, Bogner P, Berenyi E, Repa 1, Nyul Z, Sulyok E. Lung water and proton magneticresonance relaxation in preterm and term rabbit pups: their relation to tissue hyaluronan.Pediatr Res. 2000 Oct;48(4):554-9. IF: 2.794
,6. Worgall S, Rascher W, Gyodi G, Nyul Z, Baranyai Z, Sulyok E. Urinary excretion ofendogenous ouabain-like substance is reduced in NaCl supplemented premature infants.Biol Neonate. 1997;72(6):337-44. IF: 0.932
Kumulatív impact factor: 9,673
Egyéb közlemények
1. Nyul 2, Harangi F, Varszegi D, 20mbai E. Vesicobullous lesions in a child. Bullouspemphigoid (BP). Arch DermatoL 1997 Jun;133(6):776-7, 779-80. IF: 2.358
2. DotschJ, HogenN, Nyul 2, Hanze J, Knerr 1,Kirschbaum M, Rascher W. Increase of '
endothelial nitric oxide synthase and endothelin-l mRNA expression in human placentaduring gestation. Eur JObstet Gynecol Reprod BioL 2001 Aug;97(2):163-7. IF: 0.884
3. Nyul 2, Hadzsiev K, Andrásofszky Zs, Harangi F, Maródi L. DiGeorge-szindróma in vitro
. fertilizációval született gyermekben. Gyermekgyógyászat. 2005;56(2): 153-157.
Nemzetközi elöadások, poszterek
1. Nyul 2, Dittrich K, Miller J, Dotsch J, Repp R, Weidner W, Rascher W. Increasedendothelin-I and decreased adrenomedullin gene expression in the stenotictissue ofcongenital pelvi-ureteric junction obstruction in children. IPNA Congress, London, 1999
2. Knerr 1, Repp J, Haenze J, Nyul 2, Kapellen T, Dotsch J, Rascher W. Ist das humaneendogene Retrovirus IDDMKI,222 ein mögliches Kandiudaten-Autoimmun-Gen beiDiabetres mellitus Typ-I? Paediatrische Forschung mitteleuropaeischer Laender in Wien,1998 (poszter)
3. Nyul 2, Bogner P, Berenyi E, Repa 1,Vajda Z, Doczi T, Sedin G, Sulyok E. Brain water infetal and newborn rabbits as assessed by HI-Ntv1R relaxometry: its relation to tissuehyaluronan. ESPN Congress XXX, Prága, 1999. (poszter)