Upload
others
View
4
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
ABSTRAK
PEMBERIAN DAGING AYAM BROILER
MENGHAMBAT PERKEMBANGAN PENIS DAN TESTIS
TIKUS GALUR WISTAR MELALUI PENURUNAN HORMON
TESTOSTERON DAN EKSPRESI RESEPTOR ANDROGEN
Berdasarkan konsep Anti-Aging Medicine salah satu penyebab penting
proses penuaan ialah berkurangnya kadar hormon. Hormon yang paling awal
berkurang pada masa dewasa yaitu testosteron dan estrogen. Kalau kekurangan
hormon testosteron dialami oleh anak laki-laki, maka terjadilah mikropenis dan
dapat juga terjadi mikrotestis. Tujuan penelitian ini untuk membuktikan hambatan
perkembangan penis dan testis melalui penurunan kadar testosteron, penurunan
reseptor androgen korpus kavernosum, dan penurunan reseptor androgen sel
Leydig. Juga untuk membuktikan penurunan ekspresi reseptor androgen (RA)
pada penis lebih sedikit dibandingkan pada testis setelah mendapatkan daging
ayam broiler.
Rancangan penelitian yang digunakan adalah Ramdomized Post-test Only
Control Group Design. Penelitian dilakukan selama 60 hari. Penelitian ini
menggunakan 34 ekor tikus jantan galur Wistar usia 28 hari, dibagi menjadi dua
kelompok. Kelompok kontrol diberi akuades 2 ml, kelompok perlakuan diberi
daging ayam broiler direbus 1,007 gr/60 gram bb. Data yang diamati meliputi
kadar testosteron, panjang penis, berat testis, RA korpus kavernosum, ekspresi
RA sel Leydig, penurunan RA kelompok kontrol dibandingkan penurunan
kelompok perlakuan pada penis dan testis.
Hasil penelitian menunjukkan rerata kadar testosteron serum kelompok
kontrol 19,26 ±2,09 ng/ml, kelompok perlakuan 17,57±2,47 ng/ml (p<0,05).;
rerata panjang penis kelompok kontrol 17,35±1,11mm, kelompok perlakuan
5,76±1,03 mm (p<0,05); rerata berat testis kelompok kontrol 1,95± 0,02gr,
kelompok perlakuan 0,65±0,06gr (p<0,05); rerata RA korpus kavernosum
kelompok kontrol 29,88±3,55 5HPF/5, kelompok perlakuan 2,00±1,12 5HPF/5
(p<0,05); rerata RA sel Leydig kelompok kontrol 44,91±11,47 5 HPF/5,
kelompok perlakuan 4,50±1,20 5HPF/5 (p<0,05). Terjadi penurunan ekspresi RA
korpus kavernosum sebanyak 6,69% dan 10,02% pada RA sel Leydig setelah
perlakuan. Penurunan RA di korpus kavernosum lebih sedikit dibandingkan
penurunan RA di sel Leydig.
Simpulan penelitian ini: pemberian daging ayam broiler menghambat
perkembangan penis dan testis tikus galur Wistar melalui penurunan kadar
hormon testosteron dan ekspresi RA di penis dan testis. Penurunan RA di penis
lebih sedikit dibandingkan di sel Leydig.
Kata kunci: daging ayam broiler, kadar testosteron, panjang penis dan berat testis,
ekspresi AR korpus kavernosum dan sel Leydig.
ii
ABSTRACT
ADMINISTRATION OF BROILER CHICKEN MEAT INHIBITED THE
DEVELOPMENT OF PENIS AND TESTIS OF RAT WISTAR STRAIN
THROUGH THE DECREASE OF TESTOSTERONE LEVEL AND
EXPRESSION OF ANDROGEN RECEPTORS
Based on the concept of Anti-Aging Medicine, one of the dominant causes
of aging process is the decrease of hormone level. Hormones that decrease in
early period of adult are testosterone and estrogen. If lack of testosterone occurs
in male children it results in micropenis and also microtestis. The aim of this
study was to prove that chicken meat caused the inhibition of penile and testicle
development through decrease of testosterone level, decrease of Androgen
Receptors (AR) expression in the corpora cavernosa of the penis and Leydig cell
of the testis. It also proved the decrease of AR in the penis was less compared to
AR decrease in the testis.
The design of this study was Experimental Post-test Only Control Group
Design. This study was performed at the Integrative Biomedical Laboratory Unit
Medical Faculty Udayana University and and Department of Pathology Gajah
Mada University in 60 days. This study used 34 male rats of Wistar strain, divided
into 2 groups. Control Group was given 2 ml akuadest, while Treatment Group
was treated with boiled chicken meat 1,007 gr/60 gram bw. Data observed include
testosterone level, length of penis, weight of testis, expression of AR of penis and
testis, and the percentage of decrease of AR in the penis compared to testis.
The results of the study showed that mean level of testosterone in control
group was 19,26 ±2,09ng/ml, while in treatment group was 17,57±2,47ng/ml
(p<0,05), mean penile length was 17,35±1,11mm in control group, while in
treatment group was 5,76±1,03mm (p<0,05), mean of testes weight in control
group was 1,95± 0,02 gr, while in treatment group was 0,65± 0,05gr (p<0,05).
Mean of AR expression in the the corpus cavernosum was 29,88± 3,55 in the
control group, in treatment group was 2,00± 1,12 (p<0,05). Mean of RA
expression in Leydig cells of control group was 44,91±1,47 5HPF/5, while in
treatment group was 4,50±1,205HPF/5 (p<0,05). There was decrease of 6,69% in
AR expression of the corpus cavernosum, and 10,02% in AR expression of the
Leydig cells in the treatment group. This result showed that decrease of AR
expression in the corpus cavernosum was less compared to the AR expression of
Leydig cells after treatment.
The conclusion of the study was broiler chicken meat inhibited the
development of penis and testes through the decrease of testosterone level and
decrease of AR expression in the corpus cavernosum and Leydig cells. The
decrease of AR expression in the corpus cavernosum was less compared to AR
expression in Leydig cells.
iii
Keywords: broiler chicken meat-testosterone level-penile length-testis weight -
AR expression in corpus cavernosum and Leydig cells
iv
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI …………………………………………………………… ix
DAFTAR GAMBAR………………………………………………………… xiii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xv
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG………………………………… xvi
BAB I PENDAHULUAN ………………………………………………… 1
1.1 Latar belakang ………………………………………………….. 1
1.2 Rumusan masalah ………………………………………………. 8
1.3 Tujuan penelitian…………………………………………………… 9
1.3.1 Tujuan umum ............................................................................ 9
1.3.2 Tujuan khusus.. ......................................................................... 9
1.4 Manfaat penelitian ………………………………………………… 10
1.4.1 Manfaat akademik …………………………………………… 10
1.4.2 Manfaat praktis………………………………………………. 10
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 11
2.1 Hormon dan proses penuaan. ............................................................ 11
2.2 Hormon testosteron .......................................................................... 13
2.2.1 Sintesis, sekresi, dan regulasi .................................................... 13
2.2.2 Testosteron pada sirkulasi ......................................................... 15
2.2.3 Metabolisme testosteron ............................................................ 16
2.2.4 Estrogen-like endocrine disrupting chemicals (EEDC)………. 18
2.3 Mikropenis dan mikrotestis ............................................................... 19
2.3.1 Embriologi ................................................................................. 22
2.3.2 Patofisiologi ............................................................................... 22
2.4 Reseptor Hormon .............................................................................. 23
2.4.1 Reseptor hormon dan transduksi sinyal ..................................... 25
2.4.2 Reseptor membran sel………………………………………… 25
v
2.4.3 Reseptor Intraseluler .................................................................. 27
2.4.4 Reseptor Estrogen ...................................................................... 29
2.4.5 Reseptor Progesteron ................................................................ 32
2.4.6 Reseptor Androgen ................................................................... 33
2.4.7 Hubungan antara reseptor .......................................................... 37
2.5 Tikus percobaan ............................................................................... 37
2.5.1 Tinjauan Umum ......................................................................... 37
2.5.1.1 Karakteristik tikus Wistar ................................................. 38
2.5.1.2 Organ seksual dan reproduksi tikus ................................. 40
2.5.1.3 Anatomi dan histologi penis dan testis tikus .................... 41
2.6 Kadar hormon testosteron pada tikus jantan. .................................... 44
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP, DAN HIPOTESIS ................ 45
3.1 Kerangka berfikir ............................................................................... 45
3.2 Konsep Penelitian ............................................................................. 47
3.3 Hipotesis ........................................................................................... 48
BAB IV METODE PENELITIAN ……………………………………….. 49
4.1 Rancangan Penelitian. ....................................................................... 49
4.2 Lokasi dan waktu penelitian.............................................................. 50
4.2.1 Lokasi penelitian ...................................................................... 50
4.2.2 Waktu penelitian ........................................................................ 50
4.3 Sampel penelitian ............................................................................... 51
4.3.1 Kriteria sampel .......................................................................... 51
4.3.1.1 Kriteria inklusi .............................................................. 51
4.3.1.2 Kriteria drop out ............................................................. 51
4.3.2 Jumlah sampel...........…………………………………………. 51
4.3.3 Teknik penentuan sampel .......................................................... 52
4.4 Variabel penelitian ............................................................................ 52
4.4.1 Identifikasi dan klasifikasi variable……. .................................. 52
4.4.1.1 Variabel bebas…………………………………………… 52
4.4.1.2 Variabel tergantung …………………………………….. 52
4.4.1.3 Variabel kendali ................................................................ 53
vi
4.4.2 Hubungan antar variabel ............................................................ 53
4.4.3 Definisi operasional variabel .................................................... 53
4.5.Instrumen Penelitian ..................................................................... 56
4.5.1 Pemeliharaan hewan coba................................................ ......... 56
4.5.2 Alat dan bahan untuk menghaluskan daging ayam broiler.... .... 56
4.5.3 Alat untuk pengambilan penis dan testis tikus........................... 56
4.5.4 Alat dan bahan untuk pemeriksaan Imunohistokimia ............... . 57
4.6 Prosedur Penelitian............................................................................ 58
4.6.1 Adaptasi hewan coba ................................................................ 58
4.6.2 Menghaluskan daging ayam broiler ………………………… . 58
4.6.3 Pembagian kelompok hewan coba…………………………….. 59
4.6.4 Pemberian perlakuan pada tikus...................................... ......... 59
4.6.5 Pengambilan sampel darah…………………………………… 60
4.6.6 Pengukuran kadar hormon testosteron……………………… .. 60
4.6.7 Eutanasia hewan coba............................................................. ... 61
4.6.8 Pengambilan Penis dan Testis Tikus........................................ . 62
4.6.9 Pemusnahan Sisa Spesimen Tikus ............................................ 62
4.6.10 Pembuatan blok paraffin .......................................................... 62
4.6.11 Pulasan imunohistokimia RA……………………………… .. 63
4.7 Alur Penelitian.................................................................. ................ 66
4.8 Analisis Data....................................................................... .............. 67
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... .. 68
5.1.Hasil Penelitian …………………………………………………… 68
5.1.1 Pemberian daging ayam broiler menurunkan kadar testosterone
tikus Wistar jantan....................................................................... 68
5.1.2 Pemberian daging ayam broiler menurunkan panjang penis
tikus Wistar................................................................................. 70
5.1.3 Pemberian daging ayam broiler menurunkan berat testis
tikus Wistar …………………………………………………… 71
5.1.4 Pemberian daging ayam broiler menurunkan RA korpus
kavernosum tikus Wistar ……………………………………… 73
vii
5.1.5 Pemberian daging ayam broiler menurunkan RA sel Leydig
tikus Wistar ……………………………………………………. 75
5.1.6 Pemberian daging ayam broiler menurunkan RA penis lebih
sedikit dari dan RA tikus Wistar…………………………….… 77
5.2 Pembahasan…….…………………………………………………… 78
5.2.1 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap penurunan
kadar testosteron………………………………………….…….. 78
5.2.2 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap penurunan
panjang testis…………………………………………..………. 79
5.2.3 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap penurunan
berat testis ……………………………………………………… 81
5.2.4 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap penurunan
RA korpus kavernosum …………………………………….… 81
5.2.5 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap penurunan
sel Leydig …………………………………………………… 82
5.2.6 Pengaruh pemberian daging ayam broiler terhadap Penurunan
RA penis lebih sedkit dari RA pada testis ………….………… 84
5.3 Keterbatasan penelitian …………………………………………… 85
5,4 Kebaharuan penelitian……………………………………………… 85
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN…………………………………………. 87
6.1 Simpulan …………………………………………………………… 87
6.2 Saran………………………………………………………………… 87
DAFTAR PUSTAKA ………..……………………………………………. 89
LAMPIRAN ………………………………………………………………… 96
viii
DAFTAR GAMBAR
2.1 Poros hipotalamus-hipofise-testis …………………………………….. 15
2.2 Gambar kasus mikropenis. …………………………………………….. 20
2.3 G protein–coupled receptors …………………………………………… 26
2.4 Reseptor intraseluler ………………………………………………….. 28
2.5 Pengaruh testosteron melalui reseptor pada jaringan target ………….. 34
2.6 Gambar tikus putih …………………………………………………… 38
2.7 Anatomi dan penis tikus dan mencit …………………………………. 42
2.8 Gambaran histologis penis tikus ……………………………………… 43
2.9 Ekspresi RA pada inti sel tubulus seminferus dan sel Leydig ………. 43
2.10 Kadar hormon testosteron tikus Wistar jantan ………………………. 44
3.1 Konsep penelitian …………………………………………………….. 47
4.1 Rancangan penelitian …………………………………………………. 49
4.2 Hubungan antar variabel ………………………………………………. 53
4.3 Alur penelitian ………………………………………………………… 66
5.1 Rerata panjang penis antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan… 71
5.2 Rerata panjang penis antara kelompok kontrol dan kelompok perlakua .. 72
5.3 Ekspresi Reseptor Androgen pada korpus kavernosum tikus Wistar …… 74
5.4 Ekspresi Reseptor Androgen pada sel Leydig tikus Wistar …………… 76
ix
DAFTAR TABEL
2.1 Ukuran panjang penis saat diregangkan ……………………………. 21
2.2 Ekspresi mRNA REα dan RE β ……………………………………… 30
2.3 Data Biologis Tikus ……………………………………………………. 39
2.4 Parameter yang dievaluasi pada post natal yang berbeda …………… 39
5.1 Perbedaan rerata kadar testosteron pada kelompok kontrol dan kelompok
perlakuan …………………………………………………….……….. 69
5.2 Perbedaan rerata panjang penis pada kelompok kontrol dan kelompok
perlakuan ………..…………………………………….……………… 71
5.3 Perbedaan rerata berat testis pada kelompok kontrol dan kelompok
perlakuan ……………………………………………………………. 73
5.4 Perbedaan rerata RA korpus kavernosum pada kelompok kontrol dan
kelompok perlakuan …………………………………………………. 75
5.5 Perbedaan rerata RA sel Leydig pada kelompok kontrol dan kelompok
perlakuan ……………………………………………………………….. 77
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Konversi perhitungan untuk berbagais pesies hewan uji dan
Manusia……………………………………………………….. 96
Lampiran 2a Hasil analisis daging ayam broiler ….………………………… 97
Lampiran 2b Analisis daging ayam direbus bagian paha, dada, sayap ….….. 98
Lampiran 2c Hasil analisis daging ayam broiler…………………………….. 99
Lampiran 3 Keterangan Kelaikan Etik ..………………………………… 100
Lampiran 4 Surat Keterangan melakukan pemeriksaan IHK ……………. 101
Lampiran 5 Analisis Statistik . Uji Normalitas, mogenitas dan Independent –
test …………………………………………………………… 102
Lampiran 6 Rerata kadar testosteron, Panjang penis, Berat testis, RA Korpus
kavernosum, RA sel Leydig ………………………………. 109
Lampiran 7 Pemberian perlakuan, pembedahan, pengambilan darah,
pengukuran panjang penis dan berat testis pada kelompok
perlakuan dan kontrol….……………………………………… 116
xi
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG
AAM : Anti-Aging Medicine
ACTH : Adrenocorticotropic hormone
ADP : Adenosine diphosphate
AR : Androgen receptor
AS : Amerika Serikat
BRCA1 : Breast cancer1
cAMP : Cyclic 3′,5′-adenosine monophosphate
CYP11A1 : Cytochrome P450, family 11, subfamily A, polypeptide1
DAG : Diacylglycerol
DES : Diethylstilbestrol
DHEA : Dehydroepiandrostenedion
DHT : Dehydrotestosterone
DNA : Deoxyribonucleic aci
ER : Estrogen Receptor
ERα : Estrogen receptor α
Erβ : Estrogen receptorβ
FSH : Follicle-stimulating hormone
GnRH : Gonadotropin-releasing hormone
GDP : Guanosine diphosphate
GTP : Guanosine triphosphate
gr : gram
xii
GH : Growth Hormone
HE : Hematoxylin-Eosisn
HPF : High Power Field
HREs : Hormone respons elements
hCG : human Chorionic Gonadotropin
IGF-1 : Insulin-like growth factor 1
PIP 2 : Phosphatidylinositol bisphosphate
IP 3 : Inositol trisphosphate
LH : Luteinizing hormone
mRNA : Messenger Ribonucleic Acid
mg : milligram
ml : milliliter
Muc-1 : Musin-1
ng : nanogram
NR3C1 : Nuclear receptor subfamily 3, group C, member1
NR3C2 : Nuclear receptor subfamily 3, groupC, member 2
NR3C3 : Nuclear receptor subfamily 3, group C, member 3
NR3C4 : Nuclear receptor subfamily 3, groupC, member 4
3-OHD : 13-hydroxysteroid dehydrogenase
17-OHD : 17- hydroxysteroid dehydrogenase
PBS : Phospate buffer saline
PI 3 Kγ : Phosphatidyl-3-kinase γ
PKC : Protein kinase C
xiii
PLC- β : Phospholipase C- β
RP : Reseptor progesteron
RT : Room Temprature
RhoGEFs : Rho guanine-nucleotide exchange factors
SHBG : Sex Hormone Binding Globulin
SS : Somatostatin
TSH : Thyroid-stimulating hormone
USFDA : United States Food and Drug Administration
VEGF : Vascular endothelial growth factor
WHO : World Health Organization
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang
Berdasarkan konsep Anti-Aging Medicine salah satu penyebab penting
proses penuaan ialah berkurangnya kadar hormon. Selain hormon melatonin dan
Growth Hormone (GH=hormon pertumbuhan) yang kadarnya telah berkurang
pada masa remaja awal, hormon yang paling awal berkurang pada masa dewasa
ialah hormon steroid seks, yaitu testosteron dan estrogen.
Proses penuaan berlangsung melalui 3 fase, yaitu (1) fase subklinis, (2)
fase transisi, dan (3) fase klinis. Fase subklinis berlangsung pada usia 25-35
tahun, fase transisi terjadi pada usia 35-45 tahun, sedangkan fase klinis
berlangsung pada usia 45 tahun ke atas (Pangkahila, 2011a).
Pada fase subklinis, ketika hormon steroid seks mulai berkurang, proses
penuaan sebenarnya telah dimulai. Salah satu akibat berkurangnya hormon steroid
seks ialah terjadinya disfungsi seksual. Karena itu sebagian perempuan pengguna
kontrasepsi hormonal, baik per oral maupun injeksi, telah mengalami disfungsi
seksual, khususnya Gangguan Dorongan Seksual (Sexual Desire Disorder)
(Pangkahila, 2011b). Karena itu pula disfungsi seksual merupakan indikator awal
terjadinya proses penuaan, baik pada pria maupun perempuan (Pangkahila,
2014a).
Kalau kekurangan hormon steroid seks terjadi sejak masa kecil, apalagi
janin, maka terjadilah gangguan perkembangan organ seksual. Kalau kekurangan
2
hormon testosteron dialami oleh anak laki-laki, maka terjadilah mikropenis dan
dapat juga terjadi mikrotestis. Namun mengingat hormon testosteron tidak hanya
berpengaruh pada aspek seksual, gangguan juga terjadi pada beberapa organ lain
seperti otot, eritropoesis, tulang, fungsi kognitif, dan kenyamanan hidup
(Pangkahila, 2011a).
Diagnosis mikropenis ditegakkan berdasarkan ukuran panjang penis dalam
keadaan direntangkan, yaitu memiliki panjang lebih kecil dari 2,5 standard deviasi
di bawah rata-rata ukuran normal sesuai umur (Tsang, 2010; Wiygul and Palmer,
2011; Hatipoğlu and Kurtoğlu, 2013). Kasus mikropenis dan atau mikrotestis
banyak dijumpai. Di Amerika Serikat (AS) mikropenis terjadi sebagai suatu
gangguan yang berdiri sendiri atau sebagai bagian dari suatu sindroma. Insiden
mikropenis di AS dilaporkan 1,5 dari 10.000 anak yang dilahirkan di antara tahun
1997-2000 (Nelson et al., 2005).
Pemeriksaan dengan ultrasound menunjukkan bahwa volume rata-rata
testis neonatus 0,35 ml. Mulai umur 10 tahun, volume testis bertambah dari 1,36
ml menjadi 12,83 ml pada usia 17 tahun. Pemeriksaan dengan kaliper
menunjukkan perbedaan, yaitu ukuran panjang 5,7 mm, lebar 1,4 mm, dan tebal
2,9 mm (Osemlak, 2011).
Data dan penelitian mengenai mikropenis di Indonesia hingga saat ini
masih kurang. Di Indonesia belum ada catatan yang pasti mengenai mikropenis.
Tetapi catatan Klinik Grasia Denpasar menunjukkan dalam periode 2007-2017
terdapat 312 kasus mikropenis dengan atau tanpa mikrotestis pada anak, remaja
3
awal dan dewasa, yang hampir semuanya mengalami obesitas (Pangkahila,
2017b).
Banyaknya kasus mikropenis dengan atau tanpa mikrotestis pada anak dan
remaja perlu mendapat perhatian karena berkaitan dengan proses penuaan akibat
ganggun hormon steroid seks, yang selanjutnya juga mengganggu kualitas hidup.
Kasus mikropenis dan juga mikrostestis tentu tidak dapat dilepaskan dari faktor
penyebabnya. Penyebab utama mikropenis adalah defisiensi hormon testosteron.
Hal ini disebabkan karena hipogonadotropik-hipogonadism akibat anomali
hormon pada poros hipotalamus-hipofise-gonad, dan sindrom insensitivitas
androgen dengan pertumbuhan penis yang terhambat meskipun sekresi androgen
normal atau berlebihan (Strauss and Barbieri, 2014).
Pada pria, perkembangan organ seksual ditentukan oleh hormon androgen.
Androgen berperan penting dalam perkembangan dan fungsi seksual pria selama
masa embriogenesis, pubertas, dan juga dewasa. Androgen utama ialah testosteron
dan metabolitnya yang lebih poten yaitu dihydrotestosterone (DHT) berperan
penting dalam diferensiasi seksual pria (Busillo et al., 2014).
Daya kerja androgen dimediasi oleh reseptor androgen (RA). Reseptor ini
termasuk dalam nuclear receptor 3 group C, terdiri dari glucocorticoid receptor
(NR3C1), mineralocorticoid receptor (NR3C2), progesterone receptor (NR3C3)
dan RA (NR3C4), yang bekerja sebagai ligand-dependent transcription factor
(Werner et al., 2014)
Jika testosteron tidak atau kurang berfungsi maka organ seksual pria,
terutama penis dan testis mengalami hambatan perkembangan dan juga fungsinya.
4
Salah satu penyebab tidak atau kurang berfungsinya testosteron ialah kadarnya
yang kurang akibat paparan bahan yang mengandung hormon estrogen atau mirip
estrogen.
Jumlah reseptor di dalam sel juga menentukan reaksinya terhadap hormon.
Bila hormon dan reseptornya cukup di dalam sel, ligan mengikat dan
mengaktifkan reseptor monomerik (Busillo et al., 2014)
Salah satu bahan yang ternyata mengandung hormon estrogen ialah daging
ayam broiler yang dijual di pasaran dan banyak dikonsumsi oleh masyarakat,
khususnya anak-anak. Para pasien mikropenis dengan atau tanpa mikrotestis
sesuai laporan Klinik Grasia di atas, semua mengonsumsi daging ayam broiler
sejak pertama kali mendapat makanan.
Hasil analisis yang dilakukan oleh Unit Pelayanan Terpadu Laboratorium
Analitik Universitas Udayana atas permintaan, menunjukkan bahwa bagian paha
daging ayam broiler goreng mengandung estrogen 0,472 pg/g, bagian dada
mengandung 0,536 pg/g, dan bagian sayap mengandung estrogen 0,751 pg/g
(Lampiran 2a). Daging ayam yang dianalisis tersebut dibeli di pasar tradisional.
Analisis daging ayam yang direbus menunjukkan bahwa bagian paha ayam
mengandung estrogen 0,683 pg/g, bagian dada mengandung estrogen 0,725 pg/g,
dan bagian sayap mengandung estrogen 0,807 pg/g (Lampiran 2b). Analisis
daging ayam bagian sayap yang digoreng yaitu sebanyak 0,987 pg/g dan direbus
mengandung estrogen sebanyak 1,024 pg/g, yang dibeli dari daerah lain lebih
tinggi (Lampiran 2c).
5
Estrogen di dalam daging ayam broiler, dapat dikelompokkan sebagai
Estrogen-like endocrine disrupting chemicals (EEDC) tanpa diketahui oleh
banyak orang, termasuk konsumennya. Senyawa EEDC merupakan bahan kimia
buatan yang kalau masuk ke dalam tubuh dapat menimbulkan gangguan fungsi
hormon dengan segala akibatnya (Roy et al., 2009).
Dibandingkan dengan otot ayam Brasilia yang mengandung hanya 0,2
pg/g E2 dan 0,4 pg/g E1, kandungan estrogen pada ayam broiler di Indonesia
sesuai hasil analisis di atas, ternyata lebih tinggi. Pada bagian lemaknya,
kandungan estrogen ayam Brasilia juga rendah. Tetapi sebaliknya, bagian lemak
ayam Jepang dan Amerika Serikat (AS) mengandung estrogen sangat tinggi.
Bagian lemak ayam Jepang mengandung E2 sebanyak 21,1 pg/g dan E1 65,7
pg/g, sedang ayam AS mengandung 20,7 pg/g E2 dan 54,6 pg/g E1.
Lemak sapi AS juga mengandung estrogen tinggi, yaitu E2 14,0 pg/g dan
E1 7,7 pg/g. Sebaliknya, daging sapi Jepang mengandung sangat rendah bahkan
boleh dianggap tidak mengandung estrogen, yaitu hanya 0,1 pg/g E1. Hasil
penelitian ini mengejutkan karena United States Food and Drug Administration
(US FDA) tidak memperbolehkan penggunaan hormon untuk hewan atau unggas.
Adanya kandungan estrogen mungkin didapat melalui makanan ayam yang
mengandung protein soya atau lainnya. Berdasarkan data ini, pasien kanker
payudara dan siapa pun yang berisiko tinggi sebaiknya membatasi mengonsumsi
daging unggas yang makanannya mengandung soya (Handa et al., 2010).
Untuk mengatasi kasus mikropenis dan atau mikrotestis, tentu diperlukan
pengobatan yang bertujuan meningkatkan kadar hormon testosteron agar dapat
6
berfungsi normal sehingga terjadi perkembangan normal penis dan testis. Dalam
praktek, hormon yang digunakan ialah gonadotropin atau testosteron. Pemilihan
ini didasarkan pada usia dengan memperhatikan kemungkinan efek samping,
khususnya penggunaan testosteron pada anak-anak.
Data klinis lain juga menunjukkan bahwa semua kasus mikropenis dapat
diatasi dengan pengobatan hormon gonadotropin dan atau testosteron tergantung
usia dan hasil pemeriksaan laboratorium, tetapi tidak semua kasus mikrotestis
dapat diatasi dengan pengobatan hormon tersebut (Pangkahila, 2014c).
Perbedaan data klinis ini mungkin disebabkan oleh perbedaan Reseptor
Androgen (RA) pada penis dan testis akibat paparan oleh hormon estrogen atau
progesteron. Reseptor Androgen (RA) juga dikenal sebagai NR3C4 (nuclear
receptor subfamily 3, group C, member 4), adalah suatu jenis reseptor inti yang
diaktifkan oleh testosteron atau dihydrotestosteron di dalam sitoplasma dan
ditranslokasi ke dalam inti (Lu et al., 2006; Strauss and Barbieri, 2014).
Penelitian pada sel Leydig mencit menunjukkan dalam keadaan tiadanya
RA, fungsi sel Leydig fetus normal, tetapi terjadi kegagalan dalam perkembangan
maturasi sel Leydig dewasa. Bila perkembangan maturasi sel Leydig dewasa
gagal, sel Leydig tidak berfungsi sebagaimana mestinya (Griswolda and
Behringer, 2009).
Sel Leydig memiliki reseptor estrogen yang mengikat estradiol dengan
cara klasik. Estradiol menginduksi beberapa perubahan yang sangat bergantung
pada tahap perkembangan sel Leydig. Pada testis janin dan neonatus, estradiol
7
menghalangi perkembangan ontogenik sel Leydig dari sel prekursor (Napier et al.,
2014).
Fungsi hormon yang abnormal dapat disebabkan karena produksi hormon
yang abnormal, baik berlebihan maupun kekurangan, tetapi dapat juga karena
fungsi atau jumlah reseptornya yang berkurang. Androgen baru berfungsi kalau
ada reseptor pada sel targetnya. Reseptor Androgen (RA) dikenal sebagai NR3C4
(nuclear receptor subfamily 3, group C, member 4), diantaranya didapatkan pada
nukleus sel Sertoli, sel Leydig testis, dan juga gonosit (Strauss and Barbieri,
2014).
Hormon estrogen berpengaruh dalam pertumbuhan dan fungsi gonad janin
laki-laki. Estrogen endogen menghambat perkembangan dan fungsi testis selama
masa janin dan neonatus. Reseptor estrogen β (REβ) berada dalam korda
seminiferus mengendalikan gametogenesis, sedangkan reseptor estrogen α (REα)
terdapat di dalam sel Leydig janin yang mengatur steroidogenesis (Delbes et al.,
2006).
Estrogen mengatur ekspresi gen steroidogenic acute regulatory (StAR)
protein dan Cytochrome P450, family 11, sub family A, polypeptide 1 (CYP11A1)
yang dibutuhkan untuk sintesis hormon seks steroid. Hambatan ekspresi StAR
protein menyebabkan pengaturan trasportasi kolesterol ke mitokondria terganggu.
Cytochrome P450, family 11, sub family A, polypeptide 1 (CYP11A1) adalah gen
yang mengkode enzim cytochrome P450 side-chain cleavage (P450scc). Enzim
ini mengkatalis pemecahan rantai samping kolesterol (Craig et al., 2011).
8
Penelitian invitro menunjukkan bahwa androgen signaling melawan efek
proliferatif estrogen pada sel kanker payudara yang RA positif. Di pihak lain,
overekspresi RA sangat menurunkan aktivitas transkripsi REα pada sel kanker
payudara RE positif (Park et al., 2012).
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui sejauh mana daging ayam
broiler yang mengandung estrogen seperti yang dijelaskan di atas mengakibatkan
penurunan hormon testosteron, hambatan perkembangan penis dan testis, serta
penurunan ekspresi RA korpus kavernosum dan RA sel Leydig.
Belum pernah ada penelitian seperti ini yang dilakukan sebelumnya.
Penelitian ini tidak dapat dilakukan pada manusia, melainkan hanya dapat
dilakukan pada tikus karena alasan etika.
Penelitian ini menggunakan daging ayam broiler yang direbus pada bagian
sayap karena hasil analisis menunjukkan kandungan estrogen yang lebih tinggi
pada sayap daging ayam direbus dibandingkan dengan yang digoreng serta dari
bagian dada dan paha.
1.2 Rumusan masalah
Berdasarkan uraian latar belakang tersebut, rumusan masalah pada
penelitian ini sebagai berikut:
1.2.1 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan kadar testosteron
tikus Wistar?
1.2.2 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan panjang penis tikus
Wistar?
9
1.2.3 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan berat testis tikus
Wistar?
1.2.4 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan ekspresi RA pada
korpus kavernosum tikus Wistar?
1.2.5 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan ekspresi RA pada
sel Leydig tikus Wistar?
1.2.6 Apakah pemberian daging ayam broiler menurunkan ekspresi RA pada
korpus kavernosum lebih sedikit dibandingkan ekspresi RA pada sel
Leydig tikus Wistar?
1.3 Tujuan penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Untuk mempelajari akibat pemberian daging ayam broiler terhadap
perkembangan penis dan testis melalui penurunan ekspresi RA pada
korpus kavernosum dan sel Leydig tikus Wistar.
1.3.2 Tujuan Khusus
1.3.2.1 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler menurunkan
kadar hormon testosteron tikus Wistar.
1.3.2.2 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler menurunkan
panjang penis tikus Wistar.
1.3.2.3 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler menurunkan
berat testis tikus Wistar.
10
1.3.2.4 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler menurunkan
ekspresi RA korpus kavernosum tikus Wistar.
1.3.2.5 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler menurunkan
ekspresi RA sel Leydig tikus Wistar.
1.3.2.6 Untuk membuktikan pemberian daging ayam broiler
menurunkan ekspresi RA korpus kavernosum lebih sedikit
dibandingkan ekspresi RA sel Leydig tikus Wistar.
1.4 Manfaat penelitian
1.4.1 Manfaat akademik:
1.4.1.1 Mengetahui sejauh mana daging ayam broiler mengakibatkan
berkurangnya ekspresi RA pada korpus kavernosum dan RA sel
Leydig tikus Wistar sehingga mengakibatkan hambatan
perkembangan penis dan testis.
1.4.1.2 Sebagai tambahan ilmu pengetahuan mengapa pengobatan terhadap
mikropenis lebih berhasil dibandingkan dengan mikrotestis dalam
kaitan dengan RA pada korpus kavernosum dan sel Leydig.
1.4.2 Manfaat praktis:
Walaupun penelitian ini dilakukan pada tikus, karena tidak mungkin
dilakukan pada manusia, manfaat praktis yang didapat ialah sebagai
berikut:
11
1.4.2.1 Menghindari makanan atau minuman yang terbukti mengandung
hormon estrogen atau mirip estrogen dari saat bayi, anak-anak
dan remaja awal agar tidak terjadi kasus mikropenis dan
mikrotestis.
1.4.2.2 Dalam memberikan pengobatan, pertimbangkan faktor usia agar
tidak terjadi kegagalan perkembangan khususnya untuk testis.
12