Accion de La Lipasa Pancreatica

accion de la lipasa pancreatica BIOQUIMICA

ACCION DE LA LIPASA PANCREATICA

I. Objetivos:

Demostrar experimentalmente la hidrolisis enzimática de los triglicéridos.

II. Materiales y reactivos:

a) Materiales: 1) Pipetas 2) Vasos 3) Erlenmeyer4) Mortero 5) Tubos de ensayo6) Gradilla 7) Probeta

b) Reactivos:

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1

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2

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III. Procedimientos:

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FENOLFTALEINA ACEITE

ACEITE NEUTRALIZADO PANCREATINA

AGUA DESTILADA NaOH


1) Neutralización del aceite, colocar 20 ml. De aceite en un matraz, añadir dos gotas de fenolftaleína y neutralizar hasta una coloración ligeramente rosada.

2) Preparar una solución de pancreatina (una pastilla) disuelta en 20 ml de buffer PH 8.

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FENOLFTALEINA ACEITE

ACEITE NEUTRALIZADO


3) Hidrolisis de triglicéridos. Seguir las indicaciones del siguiente cuadro.

Soluciones / Tubos Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

ml. de aceite neutro 2 2 2 2ml. buffer fosfato pH8 4 4 ----- 4ml. de agua destilada 5 ----- 4 -----ml. sol. pancreatina ---- 5 5 5*

5*: hervir la solución de pancreatina.

a. Antes de agregar a la sol. De pancreatina agitar la solución, si el color

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SOLUCIÓN FINAL


ligeramente no persiste añadir NaOH 0.01 N poco a poco hasta obtenerlo.

b. Llevar a hervir los 10 ml. De sol. De pancreatina

c. Luego de haber agregado la sol. De pancreatina. Llevar a baño maría de 37°C por media hora.

d. Luego titular el contenido de cada tubo con NaOH 0.1N hasta el color

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rosado usando solución alcohólica de fenolftaleína como indicador.

IV. Resultados :

1. Muestra del tubo uno no se rotulo

2. Muestra dos se rotulo con 7 ml.

3. Muestra tres se rotulo con 6 ml.

4. Muestra cuatro se rotulo con 4 ml.

V. Cuestionario

¿Qué otras lipasas conoces?

Lipasa pancreáticaEn los seres humanos, la lipasa pancreática es secretada por el páncreas, junto con las sales biliares en la vesícula, en respuesta a las hormonas que se liberan cuando el quimo (alimento parcialmente digerido) entra en el intestino. Las sales biliares funcionan para emulsionar las grasas en gotitas más pequeñas, lo que aumenta la superficie y la eficacia de la lipasa al catalizar su digestión.

Lipasa intracelularLa lipasa también cumple funciones intracelulares en los lisosomas, organelas que ayudan a eliminar los productos de desecho de las células.

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No existe un consenso claro sobre el papel específico de la lipasa dentro de los lisosomas que no sea el de desglosar las lipoproteínas dentro de la célula; sin embargo, los investigadores del Albert Einstein College of Medicine sugieren que esa lipasa puede funcionar también en la regulación del almacenamiento intracelular de lípidos.

Lipasa Gástrica es un componente del jugo gástrico segregado por las células principales del estómago, este da el punto final a la digestión que se lleva a cabo en el estómago, ayuda a formar el quimo y facilita su paso al intestino delgado para seguir con la digestión de tubo bajo.

Lipasa Lingual es un potente catalizador de Lípidos, que los transforma en triglicéridos y ácidos grasos libres. Se activa cuando llega al estómago por la presencia de pH acido. Esta enzima se encuentra en la leche materna que llega a las glándulas mamarias a través de la secreción de ella del páncreas y el transporte a través de la sangre.

LIPASAS E.C. 3.1.1.1

Lipasas no específicas.- hidrolizan todas las posiciones del triglicérido: Staphilococcus aureus,Candida rugosa

Lipasa 1,3-específicas .- conducen a 2- acil – monoglicéridos : Rhizopus arrhizus

Lipasa 2-específicas.- conducen a 1,3-diacilgliceridos : Geotrichum candidum.

explique cómo se realiza la digestión de los lípidos a nivel de los componentes del aparato digestivo.

DIGESTIÓN DE LÍPIDOS

La mayor reserva de lípidos en los alimentos tanto de origen vegetal como animal está constituida por los triacilgliceroles (TG). La ruta de digestión de los TG depende en cierta manera del largo de la cadena de los ácidos grasos que los constituyen. Los TG que contienen ácidos grasos de cadena corta y media (no más de 12 átomos de carbono) son hidrolizados en la boca y en el estómago a 2-monoacilglicerol (2-MAG) y ácidos grasos (AG) libres por acción de las enzimas denominadas lipasas sintetizadas en la lengua (lingual) y en el estómago (gástrica). Estas dos enzimas presentan mayor actividad en los niños que ingieren grandes cantidades de leche de vaca que contiene alto contenido en TG con ácidos grasos de cadena corta. La lipasa lingual es importante en el recién nacido porque en ellos no está bien establecida la secreción de lipasa pancreática. Los ácidos grasos de

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http://es.wikipedia.org/wiki/Intestino_delgado

http://es.wikipedia.org/wiki/Intestino_delgado

http://es.wikipedia.org/wiki/Quimo

http://es.wikipedia.org/wiki/Est%C3%B3mago

http://es.wikipedia.org/wiki/Digesti%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Jugo_g%C3%A1strico

http://es.wikipedia.org/wiki/Lipasa


cadena corta y media son absorbidos directamente por las células epiteliales intestinales. Luego entran a la sangre portal y son transportados al hígado unidos a la albúmina. El resto de la grasa dietaria ingresa al intestino donde es emulsionada en pequeñas partículas, que son estabilizadas por acción de compuestos anfipáticos llamados sales biliares.

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Las sales biliares son sintetizadas en el hígado y almacenadas en la vesícula biliar para luego se secretadas en el lumen del intestino. Estos compuestos actúan como detergentes, uniéndose a las gotas lipídicas que son disgregadas por la acción peristáltica del músculo intestinal. Esta grasa emulsionada es atacada por enzimas digestivas provenientes del páncreas entre las que se encuentran la lipasa y la colipasa. La lipasa pancreática es la responsable de separar los ácidos grasos de todos los largos de cadena de los TG produciendo ácidos grasos libres y 2-MAG. La colipasa es secretada como pro-colipasa y convertida en colipasa por acción de la tripsina. El complejo lipasa-colipasa es el que tiene actividad hidrolítica. Además se secreta bicarbonato (cuya secreción es estimulada por la hormona intestinal secretina) que neutraliza el ácido que entra al intestino desde el estómago junto con la comida parcialmente digerida,incrementando el pH a aproximadamente 6, condiciones óptimas para la acción de las enzimas digestivas del intestino. La secreción de sales biliares y de enzimas pancreáticas está estimulada por la hormona intestinal colecistoquinina. El páncreas también produce esterasas y fosfolipasa A2 que remueven el colesterol de los ésteres de colesterol y el ácido graso en posición 2 de los fosfolípidos (resultando en lisofosfolípidos) respectivamente. Los ácidos grasos y 2-MAGs producidos por digestión de los TG son nuevamente emulsionados por las sales biliares junto con otros lípidos dietarios (colesterol, vitaminas liposolubles y lisofosfolípidos) y empaquetados en micelas. Las micelas viajan a través de la capa de agua que se encuentra en la superficie de las microvellosidades de las células del epitelio intestinal donde los ácidos grasos, 2-MAG y demás lípidos dietarios

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son absorbidos. Las sales biliares no son absorbidas si no que cuando llegan al íleon el 95 % de las sales biliares son reabsorbidas y luego regresan al hígado vía circulación enterohepática. Sólo el 5 % de las sales biliares son excretadas en las heces bajo circunstancias normales Una vez dentro de las células del intestino los ácidos grasos son reesterificados en el retículo endoplásmico liso con el 2-MAG para formar TG. En este proceso los ácidos grasos son activados a acil-CoA de la misma forma en la cual se activan para sufrir β-oxidación. Los TG son insolubles en agua y no pueden entrar directamente en el torrente sanguíneo ya que coalescerían impidiendo el flujo sanguíneo por lo cual necesitan ser transportados en partículas que reciben el nombre de lipoproteínas. Las células intestinales empaquetan los TG junto con proteínas, colesterol, vitaminas liposolubles y fosfolípidos en lipoproteínas llamadas Quilomicrones. Más adelante se describirá en profundidad el metabolismo de esta lipoproteína.

5. cuál es el destino de los ácidos grasos liberados por acción de las lipasas digestivas.

los ácidos grasos de cadena corta liberados en el estómago y también en el intestino, son absorbidos rápidamente y conducidos vía vena porta al hígado. De esta forma constituyen una forma muy rápida de proveer de

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combustible metabólico a este órgano. Cabe recordar que el hígado es un órgano mayoritariamente gluconeogenético mas que glicolítico, por lo cual requiere del aporte de ácidos grasos como principal fuente energética. Los monoglicéridos junto con los ácidos grasos insaturados, son emulsionados por las sales biliares y los fosfolípidos de la secreción biliar, formándose así las micelas mixtas que favorecen su transferencia hacia las célula del epitelio intestinal para su absorción. Se ha propuesto, aunque no demostrado en forma inequívoca, la existencia de un transporte activo de ácidos grasos y de monoglicéridos en las células del epitelio intestinal.

6. Averigüe sobre la composición de los fármacos que se utilizan como reemplazo en la actividad de la lipasa pancreática.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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1.- Marangoni A, Rousseau D. Engineering triacylglycerols: The role of interesterification. Trends Food Sci & Technol 1995; 6: 329-335.

2.- Carey M, Small D M, Bliss C M. Lipid digestion and absorption. Ann Rev Physiol 1983;45: 651-677.

3.- Bracco U. Effect of triglyceride structure on fat absorption. Am. J Clin Nutr 1994; 60(suppl): 1002S-1009S.

4.- bioquímica de Harper.

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