Androgeni, insulino-resistenza e Androgeni, insulino-resistenza e patologia vascolare negli uominipatologia vascolare negli uomini

sottotitolosottotitolo“ ipogonadismo maschile acquisito dell’età adulta e sindrome metabolica : “ ipogonadismo maschile acquisito dell’età adulta e sindrome metabolica :

necessità di una rivisitazione critica ”necessità di una rivisitazione critica ”

Dr. S. La VigneraDr. S. La VigneraDipartimento di Scienze BiomedicheDipartimento di Scienze BiomedicheSez. di Endocrinologia, Andrologia e Medicina InternaSez. di Endocrinologia, Andrologia e Medicina InternaOspedale Garibaldi – Università di CataniaOspedale Garibaldi – Università di Catania

L’ANDROLOGO S.I.A. INCONTRA IL MEDICO DI MEDICINA GENERALEL’ANDROLOGO S.I.A. INCONTRA IL MEDICO DI MEDICINA GENERALE

Misterbianco (CT)

Sala Palazzo Comunale

Sabato 07 giugno 2008

Premesse essenzialiPremesse essenziali

Le concentrazioni plasmatiche di Testosterone di un soggetto adulto sano di sesso maschile variano fisiologicamente tra 300 – 1000 ng/dl; c.s. < 231 ng/dl identificano una condizione laboratoristica di accertato ipogonadismo

•Circonferenza addominale >94 cm

nell’uomo, >80 cm nella donna

•Trigliceridi 150 mg/dl (o Tx per

ipertrigliceridemia)

•HDL-C <40 mg/dl nell’uomo, <50 mg/dl

nella donna (o Tx per HDL-C)

•Pressione arteriosa 130/85 mmHg (o Tx

per ipertensione )

•Glicemia 110 mg/dl (o Tx per

iperglicemia)

3/5 = diagnosi di Sindrome

Metabolica

Makhsida N, Shah J, Grace Y, Yan G, Fisch H, Shabsigh R. Makhsida N, Shah J, Grace Y, Yan G, Fisch H, Shabsigh R. Hypogonadism and metabolic syndrome : implications for Hypogonadism and metabolic syndrome : implications for testosterone therapy. J Urol 2005; 174: 827-34testosterone therapy. J Urol 2005; 174: 827-34

Una recente metanalisi Una recente metanalisi condotta su oltre 60 condotta su oltre 60 studi clinici pubblicati ha studi clinici pubblicati ha avanzato la proposta di avanzato la proposta di includere il LOH (Late includere il LOH (Late Onset Hypogonadism) Onset Hypogonadism) tra le condizioni tra le condizioni comprese nella comprese nella definizione di Sindrome definizione di Sindrome MetabolicaMetabolica

Makhsida N, Shah J, Grace Y, Yan G, Fisch H, Shabsigh R. Makhsida N, Shah J, Grace Y, Yan G, Fisch H, Shabsigh R. Hypogonadism and metabolic syndrome : implications for Hypogonadism and metabolic syndrome : implications for testosterone therapy. J Urol 2005; 174: 827-34testosterone therapy. J Urol 2005; 174: 827-34

Tale proposta trae il Tale proposta trae il suo razionale dalle suo razionale dalle intime correlazioni intime correlazioni individuate fra livelli individuate fra livelli androgenici e androgenici e diverse variabili diverse variabili metaboliche e metaboliche e cliniche proprie della cliniche proprie della SMSM

Rolf C, von Eckardstein S, Koken U, Nieschlag E. Testosterone Rolf C, von Eckardstein S, Koken U, Nieschlag E. Testosterone substitution of hypogonadal men prevents the age-dependent substitution of hypogonadal men prevents the age-dependent increases in body mass index, body fat and leptin seen in healty increases in body mass index, body fat and leptin seen in healty ageing men : results of a cross-sectional study. Eur J Endocrinol ageing men : results of a cross-sectional study. Eur J Endocrinol 2002; 146: 505-11.2002; 146: 505-11.

L’obesità viscerale, che L’obesità viscerale, che costituisce un costituisce un importante fattore di importante fattore di rischio cardiovascolare, rischio cardiovascolare, risulta significativamente risulta significativamente incrementata nei incrementata nei pazienti con LOH, in pazienti con LOH, in virtù di una precisa virtù di una precisa attività biologica del T attività biologica del T sull’adipocitasull’adipocita

Rolf C, von Eckardstein S, Koken U, Nieschlag E. Testosterone Rolf C, von Eckardstein S, Koken U, Nieschlag E. Testosterone substitution of hypogonadal men prevents the age-dependent substitution of hypogonadal men prevents the age-dependent increases in body mass index, body fat and leptin seen in healty increases in body mass index, body fat and leptin seen in healty ageing men : results of a cross-sectional study. Eur J Endocrinol ageing men : results of a cross-sectional study. Eur J Endocrinol 2002; 146: 505-11.2002; 146: 505-11.

Un aumentato uptake di Un aumentato uptake di trigliceridi, associato a una trigliceridi, associato a una riduzione dei fenomeni di riduzione dei fenomeni di lipolisi, caratterizza l’attività lipolisi, caratterizza l’attività adipocitaria in presenza di adipocitaria in presenza di bassi livelli androgenici, e bassi livelli androgenici, e giustifica il dato clinico di un giustifica il dato clinico di un incremento della massa incremento della massa grassa del 20-35% nei grassa del 20-35% nei soggetti ipogonadicisoggetti ipogonadici

Cohen PG. The hypogonadal-obesity cicle. Medical Cohen PG. The hypogonadal-obesity cicle. Medical Hypotheses 1999; 52: 49-51Hypotheses 1999; 52: 49-51

L’obesità è d’altra parte L’obesità è d’altra parte responsabile di una responsabile di una incrementata attività incrementata attività aromatasica, che aromatasica, che riducendo ulteriormente riducendo ulteriormente i livelli circolanti di T, i livelli circolanti di T, realizza quello che realizza quello che PG PG CohenCohen definisce “ definisce “the the hypogonadal-obesity hypogonadal-obesity ciclecicle””

Isidori AM, Caprio M, Strollo F, Moretti C, Frajese G, Isidori A. Isidori AM, Caprio M, Strollo F, Moretti C, Frajese G, Isidori A. Leptin and androgens in male obesity: evidence for leptin Leptin and androgens in male obesity: evidence for leptin contribution to reduced androgenm levels. J Clin Endocrinol contribution to reduced androgenm levels. J Clin Endocrinol Metab 1999; 84: 3673-80.Metab 1999; 84: 3673-80.

Anche la Leptina, i Anche la Leptina, i cui livelli circolanti cui livelli circolanti aumentano con il aumentano con il crescere della massa crescere della massa grassa, è in grado di grassa, è in grado di inibire l’increzione di inibire l’increzione di T indirettamente T indirettamente alterando la alterando la pulsatilità del rilascio pulsatilità del rilascio di LHdi LH

Isidori AM, Caprio M, Strollo F, Moretti C, Frajese G, Isidori A. Isidori AM, Caprio M, Strollo F, Moretti C, Frajese G, Isidori A. Leptin and androgens in male obesity: evidence for leptin Leptin and androgens in male obesity: evidence for leptin contribution to reduced androgenm levels. J Clin Endocrinol contribution to reduced androgenm levels. J Clin Endocrinol Metab 1999; 84: 3673-80.Metab 1999; 84: 3673-80.

E’ d’altra parte E’ d’altra parte dimostrato come la dimostrato come la terapia sostitutiva terapia sostitutiva androgenica androgenica nell’ipogonadico riduca nell’ipogonadico riduca l’obesità viscerale, e l’obesità viscerale, e come il calo ponderale come il calo ponderale possa condurre a un possa condurre a un proporzionale aumento proporzionale aumento dei livelli di Tdei livelli di T

Kapoor D, Malkin CJ, Channer KS, Jones TH. Androgens, Kapoor D, Malkin CJ, Channer KS, Jones TH. Androgens, Insulin resistance and vascular disease in men. Clin Insulin resistance and vascular disease in men. Clin Endocrinol 2005; 63 : 239-50.Endocrinol 2005; 63 : 239-50.

Anche il profilo biologico di Anche il profilo biologico di sensibilità all’azione sensibilità all’azione insulinica sembra insulinica sembra rispondere positivamente, rispondere positivamente, nei soggetti ipogonadici, alla nei soggetti ipogonadici, alla supplementazione supplementazione androgenica, a conferma androgenica, a conferma dell’evidenza sperimentale dell’evidenza sperimentale di una condizione di di una condizione di insulinoresistenza indotta da insulinoresistenza indotta da orchiectomia nell’animale da orchiectomia nell’animale da esperimentoesperimento

Aversa e coll. Role of testosterone in the regulation of Aversa e coll. Role of testosterone in the regulation of erectile and cardiovascular function. Italian Journal of Sexual erectile and cardiovascular function. Italian Journal of Sexual and Reproductive Medicine 2005; 12: 102-13.and Reproductive Medicine 2005; 12: 102-13.

Un’attività biologica diretta del T Un’attività biologica diretta del T sul sistema circolatorio trova sul sistema circolatorio trova numerose conferme cliniche e numerose conferme cliniche e sperimentali.sperimentali.

Il T è in grado di produrre una Il T è in grado di produrre una vasodilatazione nelle arterie vasodilatazione nelle arterie coronarie, aorta e brachiale con coronarie, aorta e brachiale con meccanismo endotelio-dipendente meccanismo endotelio-dipendente (NO-cGMP), endotelio (NO-cGMP), endotelio indipendente (azione diretta sulla indipendente (azione diretta sulla concentrazione intracellulare di concentrazione intracellulare di CaCa++ ++ della cellula muscolare liscia) della cellula muscolare liscia) ed estrogeno-mediato.ed estrogeno-mediato.

Rosano GM. Androgens and coronary artery disease. A sex Rosano GM. Androgens and coronary artery disease. A sex specific effect of sex hormones ? Eur Heart J 2000; 21 : 868-specific effect of sex hormones ? Eur Heart J 2000; 21 : 868-7171

Tale attività biologica supporta Tale attività biologica supporta una serie di rilievi clinici relativi una serie di rilievi clinici relativi alle manifestazioni alle manifestazioni cardiocircolatorie del LOH.cardiocircolatorie del LOH.

Decisivo nel dimostrare una Decisivo nel dimostrare una correlazione tra LOH e rischio correlazione tra LOH e rischio cardiovascolare è il riscontro di cardiovascolare è il riscontro di livelli circolanti di T livelli circolanti di T costantemente più bassi nei costantemente più bassi nei soggetti con malattia soggetti con malattia cardiovascolare rispetto a cardiovascolare rispetto a controlli sani.controlli sani.

Rosano GM. Androgens and coronary artery disease. A sex Rosano GM. Androgens and coronary artery disease. A sex specific effect of sex hormones ? Eur Heart J 2000; 21 : 868-specific effect of sex hormones ? Eur Heart J 2000; 21 : 868-7171

La terapia androgenica La terapia androgenica sostitutiva nei soggetti con sostitutiva nei soggetti con LOH si associa a riduzione LOH si associa a riduzione del rischio di eventi del rischio di eventi cardiovascolari e a cardiovascolari e a inibizione del processo di inibizione del processo di aterosclerosi, mentre in aterosclerosi, mentre in soggetti ipogonadici con soggetti ipogonadici con angina cronica instabile angina cronica instabile riduce significativemente la riduce significativemente la severità ed il tempo di severità ed il tempo di ischemia.ischemia.

Quali sono i Quali sono i meccanismi alla meccanismi alla

base della base della variazione della variazione della

sensibilità sensibilità tissutale tissutale all’azione all’azione

androgenica ?androgenica ?

Meccanismi ipotizzatiMeccanismi ipotizzati

Entità di espressione di Entità di espressione di AR nei vari tessuti AR nei vari tessuti

(Luts LB, Mol Endocrinol 2003)(Luts LB, Mol Endocrinol 2003)

Polimorfismo funzionale Polimorfismo funzionale di ARdi AR

Effetti non genomiciEffetti non genomici Distribuzione tissutale Distribuzione tissutale

co-regolatori di ARco-regolatori di AR

Polimorfismo funzionale di ARPolimorfismo funzionale di AR

Un polimorfismo funzionale di AR potrebbe Un polimorfismo funzionale di AR potrebbe influenzare l’intensità del segnale genomico influenzare l’intensità del segnale genomico trasdotto.trasdotto.

Un esempio di tale meccanismo è Un esempio di tale meccanismo è rappresentato dalla tripletta CAG nell’esone rappresentato dalla tripletta CAG nell’esone 1 (poliglutamina) dove la lunghezza della 1 (poliglutamina) dove la lunghezza della ripetizione è inversamente correlata alla ripetizione è inversamente correlata alla sensibilità androgenica.sensibilità androgenica.

Ripetizioni più corte associate a rischio più Ripetizioni più corte associate a rischio più elevato di sviluppare neoplasie prostatiche elevato di sviluppare neoplasie prostatiche (Krithivas, J Clin Endocrinol Metabn 1999)(Krithivas, J Clin Endocrinol Metabn 1999)

Estensioni patologiche (>40) di tale Estensioni patologiche (>40) di tale ripetizione causano una malattia del ripetizione causano una malattia del motoneurone (Sindrome di Kennedy : atrofia motoneurone (Sindrome di Kennedy : atrofia muscolo-bulbo-spinale) muscolo-bulbo-spinale) (Patrizio P, J Androl 2001)(Patrizio P, J Androl 2001)

EFFETTI NON GENOMICIEFFETTI NON GENOMICI

Negli ultimi anni sono emerse Negli ultimi anni sono emerse considerevoli evidenze sugli effetti considerevoli evidenze sugli effetti non genomici degli steroidi, non genomici degli steroidi, androgeni inclusi (Cho JJ, Med Sci androgeni inclusi (Cho JJ, Med Sci Monit 2003).Monit 2003).

Tali effetti si distinguono dai Tali effetti si distinguono dai classici effetti genoma-mediati per classici effetti genoma-mediati per

1.1. Rapidità di inizio (da secondi a Rapidità di inizio (da secondi a minuti)minuti)

2.2. Indipendenza dalla inibizione della Indipendenza dalla inibizione della sintesi di RNA e proteinesintesi di RNA e proteine

3.3. Indipendenza dell’interazione con il Indipendenza dell’interazione con il nucleo cellularenucleo cellulare

Gli effetti androgenici non genomici sono legati Gli effetti androgenici non genomici sono legati alla rapida induzione di un secondo messagero alla rapida induzione di un secondo messagero ed alla relativa cascata di traduzione del segnale ed alla relativa cascata di traduzione del segnale che porta all’incremento dei livelli di Calcio che porta all’incremento dei livelli di Calcio citoplasmatico, all’attivazione di PKA, PKC, citoplasmatico, all’attivazione di PKA, PKC, MAPK; con vari effetti sulla funzione cellulare tra MAPK; con vari effetti sulla funzione cellulare tra cui : rilasciamento del tessuto muscolare liscio, cui : rilasciamento del tessuto muscolare liscio, trasmissione dei segnali neuromuscolari e trasmissione dei segnali neuromuscolari e giunzionali e plasticità neuronale (Heinlein CA, giunzionali e plasticità neuronale (Heinlein CA, Mol Endocrinol 2002).Mol Endocrinol 2002).

Tali effetti sono legati ad un recettore di Tali effetti sono legati ad un recettore di membrana e probabili siti di legame sono stati membrana e probabili siti di legame sono stati descritti per tutte le classi di steroidi, androgeni descritti per tutte le classi di steroidi, androgeni inclusi (Herve JC, Mini Rev Med Chem 2002) .inclusi (Herve JC, Mini Rev Med Chem 2002) .

Attualmente un AR di membrana non Attualmente un AR di membrana non è stato ancora identificato, ma studi è stato ancora identificato, ma studi preliminari sembrano dimostrare preliminari sembrano dimostrare l’esistenza di un sito di legame a l’esistenza di un sito di legame a bassa affinità per gli androgeni bassa affinità per gli androgeni alchilati sulla membrana microsomiale alchilati sulla membrana microsomiale (Chirino R, J Steroid Biochem 1989).(Chirino R, J Steroid Biochem 1989).

Sito di legame per Sito di legame per deidroepiandrosterone sulla deidroepiandrosterone sulla membrana di cellule endoteliali membrana di cellule endoteliali (Williams MR, J Clin Endocrinol Metab (Williams MR, J Clin Endocrinol Metab 2002)2002)

Recettore per SHBG sulla membrana Recettore per SHBG sulla membrana cellulare con trasduzione intracellulare cellulare con trasduzione intracellulare del segnale via AMP-ciclico (Rosner del segnale via AMP-ciclico (Rosner W, J Steroid Biochem Mol Biol 1999)W, J Steroid Biochem Mol Biol 1999)

L’azione genomica di AR è L’azione genomica di AR è modulata da un’ampia varietà di modulata da un’ampia varietà di fattori di regolazione, fattori di regolazione, rappresentati da proteine che rappresentati da proteine che agiscono in senso positivo (co-agiscono in senso positivo (co-attivatori) e negativo (co-attivatori) e negativo (co-repressori) e che sono poi repressori) e che sono poi responsabili della fine responsabili della fine modulazione di questo processo modulazione di questo processo di espressione genica (Heinlein di espressione genica (Heinlein CA, Endocr Rev 2002)CA, Endocr Rev 2002)

Testosterone e regolazione del tono vascolareTestosterone e regolazione del tono vascolare

AR è stato localizzato AR è stato localizzato ubiquitariamente nell’endotelio ubiquitariamente nell’endotelio vascolare e nelle cellule muscolari vascolare e nelle cellule muscolari liscie.liscie.

Il sistema vascolare può essere Il sistema vascolare può essere direttamente influenzato direttamente influenzato dall’azione del T che dall’azione del T che probabilmente agisce sui vasi con probabilmente agisce sui vasi con due meccanismi distinti ed due meccanismi distinti ed indipendentiindipendenti

Orshal JM, Am J Physiol Regul 2004; Orshal JM, Am J Physiol Regul 2004; Thompson J, Clin Exp Pharmacol 2003; Thompson J, Clin Exp Pharmacol 2003; Wynne FL, J Endocrinol Invest 2003Wynne FL, J Endocrinol Invest 2003

L’AR vascolare può mediare gli effetti del T sulla parete L’AR vascolare può mediare gli effetti del T sulla parete arteriosa ed è stato dimostrato che il T è in grado di arteriosa ed è stato dimostrato che il T è in grado di produrre una vasodilatazione dell’arteria coronaria, aortica produrre una vasodilatazione dell’arteria coronaria, aortica e brachiale attraverso l’attivazione sia di meccanismi e brachiale attraverso l’attivazione sia di meccanismi endotelio-dipendenti che endotelio-indipendenti (Chou TM, endotelio-dipendenti che endotelio-indipendenti (Chou TM, Circulation 1999);Circulation 1999);

Gli effetti endotelio-dipendenti del T vengono spiegati, Gli effetti endotelio-dipendenti del T vengono spiegati, sebbene in parte, attraverso la produzione di NO, mentre i sebbene in parte, attraverso la produzione di NO, mentre i meccanismi degli effetti endotelio-indipendenti sembrano meccanismi degli effetti endotelio-indipendenti sembrano coinvolgere diversi tipi di canali ionici della cellula coinvolgere diversi tipi di canali ionici della cellula muscolare liscia (Littleton-Kearney M, Biol Res Nurs 2004);muscolare liscia (Littleton-Kearney M, Biol Res Nurs 2004);

Azione antagonista sui VOCC “Voltage-operated calcium Azione antagonista sui VOCC “Voltage-operated calcium channels” (Crews JK, Arterioscler Tromb Vasc Biol 1999)channels” (Crews JK, Arterioscler Tromb Vasc Biol 1999)

Azione antagonista sui SOCC “Store -operated calcium Azione antagonista sui SOCC “Store -operated calcium channels” (Jones RD, J Endocrinol 2003)channels” (Jones RD, J Endocrinol 2003)

L’interazione del T con i suoi specifici recettori nucleari L’interazione del T con i suoi specifici recettori nucleari può innescare non soltanto un effetto genomico a lungo può innescare non soltanto un effetto genomico a lungo termine, ma anche una risposta vasodilatatoria acuta non termine, ma anche una risposta vasodilatatoria acuta non genomica (genomica (Wynne FL, J Endocrinol Invest 2003)Wynne FL, J Endocrinol Invest 2003)

CORRELAZIONE LOH-SMCORRELAZIONE LOH-SM

Correlazione conCorrelazione con FisiopatologiaFisiopatologia Evidenze a supportoEvidenze a supporto

Obesità visceraleObesità viscerale Aumento uptake Aumento uptake trigliceriditrigliceridi

Riduzione lipolisiRiduzione lipolisi

Aumentata Aumentata aromatizzazione con aromatizzazione con ulteriore riduzione di Tulteriore riduzione di T

Inibizione Leptina-mediata Inibizione Leptina-mediata sulla increzione di Tsulla increzione di T

Rolf C e coll, Cohen PG e Rolf C e coll, Cohen PG e coll, Isidori AM e collcoll, Isidori AM e coll

InsulinoresistenzaInsulinoresistenza Evidenza sperimentale su Evidenza sperimentale su animale da esperimento animale da esperimento dopo orchiectomiadopo orchiectomia

Kapoor D. e collKapoor D. e coll

Assetto lipidicoAssetto lipidico In pz con malattia In pz con malattia coronarica i livelli coronarica i livelli circolanti di T plasmatici, e circolanti di T plasmatici, e colesterolo HDL sono più colesterolo HDL sono più bassi rispetto i controllibassi rispetto i controlli

Livelli Lp(a) aumentatiLivelli Lp(a) aumentati

Weidemann W e collWeidemann W e coll

Omeostasi pressoriaOmeostasi pressoria Vasodilatazione mediata Vasodilatazione mediata da meccanismo endotelio da meccanismo endotelio dipendente (NO-cGMP) ed dipendente (NO-cGMP) ed endotelio indipendente endotelio indipendente (azione diretta sulla (azione diretta sulla concentrazione degli ioni concentrazione degli ioni calcio della cellula calcio della cellula muscolare liscia) muscolare liscia)

Orshall JM e coll, Orshall JM e coll, Thompson J e coll, Wynne Thompson J e coll, Wynne FL, Aversa A e collFL, Aversa A e coll

Giornale Italiano di medicina sessuale e riproduttivaAnno 2006

Internal and Emergency Medicine Anno 2006

High blood pressure & Cardiovascular Prevention

Anno 2006

Giornale Italiano di medicina sessuale e riproduttiva Anno 2007

Minerva MedicaAnno 2007

Journal of Endocrinological Investigation Anno 2007

La Vignera S, Sidoti G, Vicari E. L’ipogonadismo acquisito dell’età adulta condiziona negativamente la risposta farmacologica nei pazienti con sindrome metabolica e il recupero di normali parametri vascolari all’eco-color-doppler penieno dinamico dopo terapia con Sildenafil.

La Vignera S, Vicari E. La terapia con Testosterone transdermico (50 mg/die) migliora il profilo insulinemico di soggetti ipogonadici.

Noto R, Vicari E,La Vignera S. The age-correlated decreasing of testosteronemia (non-pharmacologically corrected) interferes negatively with the clinical response to the conventional therapy of metabolic syndrome.

La Vignera S, Vicari E. La terapia sostitutiva con Testosterone transdermico migliora la risposta clinica alla terapia medica convenzionale nei pazienti con quadro di sindrome metabolica combinata a ipotestosteronemia.

La Vignera S, Calogero A.E., Giammusso B, Vicari E. Partial androgen deficiency of the aging male and clinical response to conventional medical therapy in patients with metabolic syndrome

La Vignera S, Calogero A.E, Vicari E. Effects of insulin-sensitizing therapy in patients with metabolic syndrome : relationship with testosterone serum levels.

L’esperienza del nostro gruppo negli ultimi 2 anni ……………………………

Cosa ci riserva il futuro immediato ?

Clin Endocrinol (Oxf). 2008 Feb;68(2):284-9. Epub 2007 Sep 4.Clin Endocrinol (Oxf). 2008 Feb;68(2):284-9. Epub 2007 Sep 4. Androgens stimulate endothelial progenitor cells through an androgen receptor-mediated pathwayAndrogens stimulate endothelial progenitor cells through an androgen receptor-mediated pathway

BACKGROUND AND OBJECTIVE = BACKGROUND AND OBJECTIVE = Testosterone (T) treatment has recently been shown to Testosterone (T) treatment has recently been shown to induce an increase in the number of endothelial progenitor cells (EPCs) through a possible effect on induce an increase in the number of endothelial progenitor cells (EPCs) through a possible effect on bone marrow. Hypogonadotrophic hypogonadal (HH) men have low circulating EPCs that increase bone marrow. Hypogonadotrophic hypogonadal (HH) men have low circulating EPCs that increase significantly after T treatment. Moreover, expression of the androgen receptor (AR) has been significantly after T treatment. Moreover, expression of the androgen receptor (AR) has been demonstrated by immunohistochemistry in these cells, suggesting that T might also have a direct demonstrated by immunohistochemistry in these cells, suggesting that T might also have a direct effect on EPC function. In the present study we investigated the expression and function of the AR effect on EPC function. In the present study we investigated the expression and function of the AR in human EPCs and the in vitro effect of androgens on EPC function. in human EPCs and the in vitro effect of androgens on EPC function.

DESIGN = DESIGN = EPCs obtained from healthy male anonymous blood donors were analysed after EPCs obtained from healthy male anonymous blood donors were analysed after androgen stimulation with and without AR antagonist administration (flutamide). androgen stimulation with and without AR antagonist administration (flutamide).

RESULTS =RESULTS = Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), Western blotting and Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR), Western blotting and immunofluorescence analyses demonstrated the expression of AR mRNA and protein in human immunofluorescence analyses demonstrated the expression of AR mRNA and protein in human EPCs. Stimulation of these cells with the synthetic androgen methyltrienolone (R1881) caused AR EPCs. Stimulation of these cells with the synthetic androgen methyltrienolone (R1881) caused AR translocation in the nucleus, suggesting its activation. Colony forming unit (CFU), proliferation and translocation in the nucleus, suggesting its activation. Colony forming unit (CFU), proliferation and migration assays under different doses of R1881 demonstrated a dose-dependent increase in EPC migration assays under different doses of R1881 demonstrated a dose-dependent increase in EPC proliferation, migration and colony formation. All these effects are abolished by flutamide proliferation, migration and colony formation. All these effects are abolished by flutamide pretreatment. pretreatment.

CONCLUSIONS =CONCLUSIONS = This study showed that the increase in the proliferation, migration and colony This study showed that the increase in the proliferation, migration and colony formation activity of EPCs induced by androgens is an AR-mediated pathway. Androgen exerts formation activity of EPCs induced by androgens is an AR-mediated pathway. Androgen exerts these effects at concentrations that are physiologically present in men and therefore further studies these effects at concentrations that are physiologically present in men and therefore further studies are needed to clarify the clinical significance of these effects in normal and pathological conditions.are needed to clarify the clinical significance of these effects in normal and pathological conditions.