AntibiogramaAntibiograma

curso: curso: microbiologíamicrobiología

AlumnaAlumna: Roció Collazos .M: Roció Collazos .M

Conceptos Conceptos AntibiogramaAntibiograma: : son métodos in Vitro que determinan son métodos in Vitro que determinan

la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio específica y estandarizada.laboratorio específica y estandarizada.

Concentración Mínima InhibitoriaConcentración Mínima Inhibitoria (CIM): (CIM): Es la Es la

menor concentración de una gama de diluciones de menor concentración de una gama de diluciones de antibiótico que provoca una inhibición de cualquier antibiótico que provoca una inhibición de cualquier crecimiento bacteriano visible.crecimiento bacteriano visible.

Antibióticos:Antibióticos: Son sustancias químicas producidas por Son sustancias químicas producidas por organismos vivientes, o sintetizados en el laboratorio organismos vivientes, o sintetizados en el laboratorio capaces de inhibir en pequeñas cantidades los procesos capaces de inhibir en pequeñas cantidades los procesos vitales de microorganismos, destruyendo e impidiendo su vitales de microorganismos, destruyendo e impidiendo su desarrollo y reproducción.desarrollo y reproducción.

Clasificación de los AntibióticosClasificación de los Antibióticos

ß-lactámicos: ß-lactámicos: Penicilinas, Monobactam. Penicilinas, Monobactam.

Glicopéptidos: Glicopéptidos: Vancomicina.Vancomicina.

Aminoglicòsidos: Aminoglicòsidos: Gentamicina, Amikacina.Gentamicina, Amikacina.

Macrólidos: Macrólidos: Eritromicina, Azitromicina, Eritromicina, Azitromicina,

ClaritromicinaClaritromicina. . Quinolonas: Quinolonas: Ciprofloxacino, Levofloxacino.Ciprofloxacino, Levofloxacino.

TetraciclinasTetraciclinas Sulfonamidas y trimetoprim: Sulfonamidas y trimetoprim: bactrin , bactrin ,

exazol.exazol.

Método de Difusiòn en Disco Método de Difusiòn en Disco (Baeur-Kirby)(Baeur-Kirby)

Es el mas difundido.Es el mas difundido. Prueba la inhibición o resistencia de los Prueba la inhibición o resistencia de los

microorganismos, enfrentándolos con los microorganismos, enfrentándolos con los medicamentos que se encuentran impregnados medicamentos que se encuentran impregnados en pequeños discos.en pequeños discos.

Medio de cultivo utilizadoMedio de cultivo utilizado

Mueller HintonMueller Hinton Su reproducibilidad Su reproducibilidad

aceptable. aceptable. Baja concentración de Baja concentración de

inhibidores, condición inhibidores, condición crítica para evaluar crítica para evaluar sulfonamidas, trimetoprim sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. y tetraciclina.

El crecimiento satisfactorio El crecimiento satisfactorio de patógenos no de patógenos no exigentes. exigentes.

Existir ya gran experiencia Existir ya gran experiencia en estudios de en estudios de susceptibilidad. susceptibilidad.

Factores que influyen en el Factores que influyen en el AgarAgar

pH: pH: EEl rango de pH va de 7,2 a 7,4l rango de pH va de 7,2 a 7,4..

variación de cationes divalentes:variación de cationes divalentes:

Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para aminoglucósidos y tetraciclinas en aminoglucósidos y tetraciclinas en Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa..

Profundidad del AgarProfundidad del Agar: La profundidad : La profundidad recomendada de la capa de agar es de 3 a recomendada de la capa de agar es de 3 a 5 mm. 5 mm.

Preparación del InóculoPreparación del Inóculo

Se prepara el inóculo con ajuste a la Se prepara el inóculo con ajuste a la turbidez McFarland 0,5 que turbidez McFarland 0,5 que corresponde aun diámetro de1.5 x10 corresponde aun diámetro de1.5 x10 UFC/ML, directo en caldo de colonias UFC/ML, directo en caldo de colonias frescas en agar no selectivo.frescas en agar no selectivo.

Inoculación de la placaInoculación de la placa

Con un Con un hisopo estéril hisopo estéril en tres en tres direcciones direcciones inocule toda inocule toda la placa la placa (giros de (giros de 60°). 60°).

Aplicación de sensidiscosAplicación de sensidiscos

separación: los discos deben de estar separados24 mm (del centro de un sensidisco al otro más cercano).

Cantidad: 12 unidades en placas de 150mm y 5 unidades en placas se 100mm.

Lectura e interpretación de los Lectura e interpretación de los resultadosresultados

Categorías de interpretaron:

Sensible: El microorganismo presenta un gran área de inhibición causada por el fármaco. 95% éxito

Intermedio: Se presenta un halo de inhibición mas reducido.

Resistente: Presenta muy poco o casi nada de halo.

Medición de los halosMedición de los halos

Después de incuba las placas del antibiograma se procederá a la lectura de este.

Se usa una regla y se mide el radio del halo de inhibición partiendo de desde donde está el disco de antibiótico hasta donde se inhibió el crecimiento.

La longitud obtenida después se compararán con estándares que nos dirán si el medicamento será efectivo o no en el tratamiento.

Antibiótico Resistente Intermedia Susceptible

Ampicilina ≤ 13 14 - 16 ≥ 17

Amikacina ≤ 14 15 – 16 ≥ 17

Sulfisoxasol ≤ 12 13 - 16 ≥ 17

Gentamicina ≤ 12 13 – 14 ≥ 15

Cloranfenicol ≤ 12 13 - 17 ≥ 18

Ceftriaxona ≤ 12 14 – 20 ≥ 21

Ciprofloxacina

≤ 15 16 - 20 ≥ 21

Tetraciclina ≤ 14 15 - 18 ≥ 19

AcidoNalidixico

≤ 13 14 – 18 ≥ 19

Estrptomicina ≤ 11 12 – 14 ≥ 15

anamicina ≤ 13 14 - 17 ≥ 18

Trimetroprim/Sulfametoxas

ol≤ 10 11 – 15 ≥ 16

Otros métodosOtros métodos

Dilución en Caldo: Dilución en Caldo: En el método de dilución en En el método de dilución en caldo, base de casi todos los métodos utilizados en la caldo, base de casi todos los métodos utilizados en la actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el desarrollo tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el desarrollo del microorganismo del microorganismo

Método de E-test: Método de E-test:

Consiste en aplicar sobre un medio de cultivo, donde se encuentra el microorganismo a ensayar, tiras plásticas que llevan incluidas un gradiente de concentración de un determinado ATB. Luego se incuba adecuadamente y se observa la formación de una elipse de inhibición de crecimiento.

Método Automatizado:

Este método se basa en micro diluciones sobre micro tubos. El crecimiento bacteriano se va a observar por la turbidez o fluorescencia de los micro tubos.

Es útil para examinar una gran cantidad de muestras

GRACIASGRACIAS