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8/17/2019 ANTICUERPOS MONOCLONALES23
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ANTICUERPOS
MONOCLONALES.
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Anticuerpos Monoclonales:
Anticuerpos proteicos producidos a partir de clonas de 1 sola célula.
Son proteínas altamente especificas contra un antígeno en particular.
Su finalidad es localizar y destruir efectivamente células cancerosas sin
importar su localización en un organismo.
Utilidad: Terapias contra el cáncer, corazón y trasplante de órganos.
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Se inmuniza un animal con un antígeno provocando una respuesta inmune y
aumenta notablemente en el suero del animal la cantidad de Ig específicasdel antígeno empleado.
Producido a partir de la síntesis de numerososclones de linfocitos B .
Anticuerpos Policlonales
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Obteniéndose nuevos anticuerpos multivalentes y multiespecíficos
Generados a través de la inmortalización de los genes que codifican
a la molécula de Ig, en lugar de inmortalizar la célula productoradel Ac, como es el caso para los AcMo de primera generación.
Anticuerpos Recombinantes (AcR)
Moléculas producidas empleando técnicas
de biología molecular y ADN recombinante.
Producción de anticuerpos en
ausencia de inmunización del animal.
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Molécula artificial en la cual, las
porciones de las cadenas pesadas y
livianas provienen de una Ig humana
y las regiones variables VH y VL son
obtenidas de un AcMo múrido.
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Cuando se expresa la proteína hibrida
resultante que conserva la especificidad
por el antígeno del monoclonal murrino
original, pero con la estructura central de
una Ig humana.
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Antígeno (Proteína)
Anticuerpos específicos que reaccionan
en un antígeno denominado Epitopo.
‘‘ Anticuerpos Monoclonales’’
Anticuerpos
Epitopo
Anticuerpo específico que reacciona
en el Epitopo.
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Se obtendrá una suspensión del antígeno
que se va a preparar e inyectar en la
cavidad peritoneal del animal para
inmunizarlo.
Proceso de producción de
anticuerpos monoclonales en laboratorio :
Se obtiene clones de Linfocitos B
específicos para el antígeno de interés.
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Proceso de producción de
anticuerpos monoclonales en laboratorio :
Se extrae una muestra del bazo del animal, en la cual obtendremos
linfocitos B y los cultivaremos. Entre los linfocitos B estarán los clones específicos para los epitopos del antígeno
con el que inmunizamos al ratón.
Se añaden células tumorales inmortales de ratón ¨Células de Mieloma¨.
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Proceso de producción de
anticuerpos monoclonales en laboratorio :
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Proceso de producción de
anticuerpos monoclonales en laboratorio :
En presencia de esta sustancia, algunos Clones B
se fusionaran con Células de Mieloma.
Estas células hibridas, o ¨Hibridomas¨ conservaran:
- La inmortalidad del mieloma .
- La capacidad de sintetizar inmunoglobulinas del Linfocito B.
Hipoxantina.
Aminopterina.
Timidina.
Al añadir el condicionante HAT, las células
de mieloma mueren por no tener la
enzima adecuada para procesarlo
Y solo sobrevivirán los Hibridomas que tienen la enzima
para procesarla por su condición parcial de Linfocitos B.11
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Proceso de producción de
anticuerpos monoclonales en laboratorio :
Técnica de Disolución Limite.
(Se añade 1 célula o < por cultivo).
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Donde exista crecimiento clonal,Se liberara el medio de anticuerpo monoclonal.
Donde exista crecimiento clonal,
Se liberara el medio de anticuerpo monoclonal. Pasadas unos días en el incubador
estas células se replican y forman los
llamados clones que sintetizan
Inmunoglobulinas.
Finalmente se hacen inmunoensayos
enfrentándonos a nuestro antígeno de interés
para ver cual reacciona.
Nuevamente se dispensa la placa y ahora se pone
en contacto con el antígeno original y se observa
cual produce reacción .
Habrán cultivos en los que losanticuerpos reacciones frente a las
partículas y otros en los que no.
Se hace una resiembra en gran
cantidad de liquido y nuevamente se
introducen a la incubadora.
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1. Identificación de marcadores fenotípicos de tipo celulares particulares.
2. Inmunodiagnóstico.3. Identificación del tumor.
4. Tratamiento.
5. Análisis funcional de la superficie célula y de las moléculas secretadas.
Aplicaciones practicas de anticuerpos monoclonales :
Ejemplos:
• Anticuerpos contra la Citocina TNF Tratar Artritis
Reumatoide y otras enf. Inflamatorias.
• Anticuerpos contra el CD20 Tratamiento de Leucemiasde Linfocitos B y para eliminar Linfocitos B en ciertos
trastornos autoinmunes.
• Anticuerpos contra el Factor de crecimiento endotelialVascular: En pacientes con Cáncer de Colon y otros.
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• Reacción similar a una alergia.
• El sistema inmunitario reacciona a medicamentos que contienen proteínas,
empleados para tratar afecciones inmunitarias.
• Puede reaccionar al antisuero, la parte líquida de la sangre que
contiene anticuerpos administrados a una persona para ayudarla a
protegerse contra microorganismos o sustancias tóxicas.
Enfermedad del suero:
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¨Anticuerpos Monoclonales en uso clínico¨
Enfermedades Inflamatorias (Inmunitarias):
Diana: Efecto: Enfermedades:
Integrinas α4Bloqueo de salida de células
inmunitarias al intestino y al SNC.
Enfermedad de Crohn,
esclerosis múltiple.
BAFF(Familia de factor de activación del linfocito B).
Inhibición de supervivencia del
linfocito B.Lupus eritematoso sistémico.
CD3
Eliminación de linfocitos T. Trasplante.
CD11aBloqueo de migración de células
inflamatorias.Psoriasis.
CD20 Eliminación de linfocitos B.Linfomas de linfocito B, artritis
reumatoide, esclerosis múltiple,
otras enfermedades autoinmunes.
CD25 (IL-2Rα) Inhibición de función dellinfocito T.
Trasplante.
IgE Boqueo de función de IgE. Asma relacionada con alergia.
Receptor para IL-6 Bloqueo de la inflamación. Artritis reumatoide.
TNF Bloqueo de la inflamación. Artritis reumatoide, enfermedad
de Crohn y Psoriasis.
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Cáncer:
Diana: Efecto: Enfermedades:
CD30 Eliminación de linfocitos .Linfoma anaplásico de célula grande y
linfoma de Hodgkin.
CD33Eliminación de células mielociticas ;
activación de señales inhibidoras de
células mielocíticas.
Leucemia mielocítica aguda.
CD52 Eliminación de linfocitos . Leucemia linfocítica crónica.
CTLA-4(Antígeno de linfocito T citotóxico).
Activación de linfocito T. Melanoma.
EGFR(Receptor para el factor de crecimiento epidérmico).
Inhibición del crecimiento de
tumores epiteliales.
Cáncer colorrectal, pulmonar y de
cabeza y cuello.
HER2/Neu(Receptor para el factor de crecimiento epidérmico humano 2/Neu).
Inhibición de señales de EGF;
eliminación de células tumorales.Cáncer de mama.
PD-1 (Muerte programada).Activación de linfocitos T
efectores.
Melanoma, carcinoma renal, otros
tumores.PD-L1
(Ligando de Muerte programada).
Activación de linfocitos T
efectores.
Melanoma, carcinoma renal, otros
tumores.
VEGF(Factor de crecimiento endotelial vascular).
Bloqueo de angiogenia tumoral. Cáncer de mama, cáncer de colon,degeneración macular senil.
CD20 Eliminación de linfocitos B.
Linfomas de linfocito B, artritis
reumatoide, esclerosis múltiple, otrasenfermedades autoinmunes.
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Otras Enfermedades:
Diana: Efecto: Enfermedades:
C5 Bloqueo de lisis mediada por
el complemento.
Hemoglobinuria paroxística
nocturna, síndrome hemolítico
urémico atípico.
Glicoproteína IIb/IIIa Inhibición de agregación
plaquetaria.
Enfermedad cardiovascular.
Ligando de Rank Bloqueo de señales de
RANK.
Osteoporosis tras menopausia,
metástasis óseas de tumores
solidos.
Proteína del VSR
(virus sincitial respiratorio).
Bloqueo de entrada de
virus.
Infección por virus
sincitial respiratorio.