B CNG THNGTRNG I HC CNG NGHIP THC PHM TP.HCMKHOA CNG NGH THC
PHM------
BO CO TH NGHIMVI SINH VT HC THC PHM
GVHD: o ThinSVTH: Phm Ngc Hnh 2005110141Trn Thin Ct Nhn
2005110348L Hong Linh 2022110064Hunh Th Minh Tm 2005110449
TP H Ch Minh, Thng 9/2013BI 1: HNG DN S DNG THIT B, DNG C PHNG
TH NGHIMQUAN ST TIU BN VI SINH VT DI KNH HIN VI QUANG HC
Mc tiu: Chun b trang thit b cn thit ca mt phng th nghim vi sinh
vt. Vn dng c cc quy tc an ton trong phng th nghim vi sinh vt
I C s l thuyt1. Cc quy tc an ton trong phng th nghim vi sinh vt
Hiu ng nguyn tc, phng php lm vic vi vi sinh vt. Thao tc an ton trn
i tng vi sinh vt mt cao. Khng n un, ht thuc trong phng th nghim vi
sinh vt Mc o blouse trong thi gian thc hnh. Khng dng ming ht bng ng
ht ( pipette) nh lng vi sinh vt hay ha cht, m phi dng qu bp cao su
khi thao tc ht bng ng ht. Hp Petri mi trng hoc sau nui cy vi sinh
vt, khng m np, dng tay s v dng mi ngi. Khi l tay lm vi sinh vt ra
ni lm vic, dng khn hay giy tm cn 70 lau v lau sch li bng khn hay
giy tm cn 70 khc. Khi s dng que cy gieo cy vi sinh vt cn phi c kh
trng bng cch t trn ngn la n cn trnh vn vi ra xung quanh. Trc v sau
khi thao tc trn vi sinh vt cn lau tay k bng cn 70 . Khi thc hin
thao tc ny cn phi trnh xa ngn la n cn khi tay cn t. Cn ghi ch tn
chng vi sinh vt v ngy thng th nghim ln cc dng c cha mi trng nui cy
vi sinh vt. Tt c cc cht thi v mi trng cha hoc nhim vi sinh vt cn c
hp kh trng trc khi em vo thng rc. Cc dng c nhim vi sinh vt cn c ngm
trong dung dch st khun trc khi ra. Khng thch vo bn ra v ng thot
nc.2. Dng c v thit b th nghim vi sinh vt
II Tin hnh th nghim1. Lm nt bng Sau khi nhn dng c ta phi lm sch
dng c bng nc. Sau dng bng thm nc lm kh. Ngn nga cc cht t mi trng
nui cy vo trong ming v trnh nhim tp t ming vo mi trng.Bc 1: Dng tay
x 1 ming lp bng hnh ch nht, gp cc ra ming bng vo trong cho gn khng
b x.Bc 2: cun cht li thnh nt sao cho va kht ng nghim (khng qu cht
cng khng qu lng) : Khng lm nt bng qu cht gy v ng nghim. Khng lm nt
bng qu lng v d b nhim tp.
2. Bao giy dng cMc ch: Trc khi hp kh trng dng c, vt liu, cn phi
tin hnh bao gi k cng v ng k thut thun tin cho cng vic kh trng, trnh
hin tng nt v hay b tp nhim sau khi hp.Trong phng th nghim vi sinh
vt, ngi ta thng cun giy trn nhiu dng c: ng nghim, a Petri, bnh tam
gic,Bao gi dng c: Sau khi lm nt, cc dng c phi c bao gi quy cch em
hp.Bc 1: i vi ng nghim ng mi trng c nt bng, cn dng giy bc cht pha u
nt bng li.Bc 2: Chai l cng c bc cht phn nt bng giy.Bc 3: Pipette c
gi bt u t pha u nh git, cun giy dn theo kiu xoy trn c cho ti ht pha
u c nt bng.Bc 4: Cc pipet c th c gi t 1 ti vi chicCc a Petri c gi
thnh chng, mi chng t 3-5 chic Cc dng c khc, tu theo yu cu m c s bao
gi cho thch hp. Nu hp ni hp p lc th khng c bao gi bng giy thm nc m
phi dng loi giy dai, khng thm nc.Cc dng c bao gi phi tht kh, sch,
trnh v trong khi hp. Dng c bao gi xong phi dn nhn, ngy em hp tin
vic theo di, s dng.
3. Hp tit trng dng c NI HP (AUTOCLAVE)Nguyn l: Phng php s dng ni
hp p lc da trn nguyn tc lm gia nhit cc vt bng hi nc bo ho di p sut
ln hn p sut kh quyn. Khi p sut tng, nhit cng tng theo. Tc dng phi
hp gia nhit cao v p sut m bo cho vic kh trng thc hin c tt. Khi hp,
p lc s tiu dit c t bo v sinh dng ln bo t ca vi sinh vt .
CCH VN HNH NI HP C:Bc 1: Kim tra mc nc trong khong an ton nc vo
ni hp vi lng thch hp (n vch chun trn ng thu tinh t di phu rt nc).
Nc phi , khng nn qu v khi si nc c th lt vo ng dn n p k v lm sai lc
ch s p. Nu t, hiu qu kh trng km, c th gy chy ni. Tt nht nn dng nc
ct cho vo ni hp v n s khng to ra canxi.Bc 2: Bt cng tc gia nhit trc
(10-15 pht).Bc 3: t cc dng c vo bung hp.Cc dng phi bao gi k ri mi
xp vo ni hp. nng trn. Khng nn xp dng c qu st nhau hi nc c th di
chuyn d dng .Bc 4: Kim tra v ng cc valve x v valve an ton.Bc 5: y
np v vn c i xng nhau tng i mt.Bc 6: Khi ng h p lc ch 0.4-0.5 kg/cm2
th x kh ln 1 cho ti khi ng h p lc ch 0.1 kg/cm2 hay khi thy bung kh
x xut hin dng kh trng lin tc th ng valve x.Bc 7: Ch cho ng h p lc
ch 1 atm hay nhit ch 1210 C tnh gi v canh 15 pht.Bc 8: Khi thi gian
kh trng, i p sut trong ni h dn ti vch s 0, m van thng hi x ht kh.
Vn c, m np, ly cc dng c kh trng ra.
III - Cu hi tho lun
1. Nu k thut chnh knh hin vi khi quan st trng thi sng v trng thi
cht
Khi vi sinh vt trng thi sng: Ly mt phin knh sch cho 1 git nc hay
1 git phm mu methylene blue (0.1%). Sau cho vi sinh vt ha tan trong
git nc hay git mu long . y l knh sao cho chn ca l knh chm vo git nc
hay git mu, nghing mt gc 16% v thm cc ph gia khc)Bc 4: Duy tr nhit
canh trng 40-45oC.Bc 5: Sau khi khuy u men vo sa, xc nh pH im u,rt
dch sa vo h nha.Bc 6: 40oC trong 5 6 gi.Bc 7: Sau 6h ln men, xc nh
pH im cui Bo qun sa chua trong t lnh 2-4oC.
III Cu hi n tp
1. Mc tiu ca vic o hm lng cht kh trong dch sa nguyn liu?Vt cht
kh ch yu bao gm m sa, protein, ng lactose, khong v cc vitamin. Sa c
lng vt cht kh cao s c gi tr dinh dng cao. Vt cht kh trong sa thp
ngha l sa c gi tr dinh dng thp. Nu vt cht kh rt thp, iu c ngha l sa
b pha thm nc.V th, ta phi xc nh hm lng cc cht trong sa nhm: p ng yu
cu theo tng i tng tiu dung m bo ng cht lng ra Thanh tra kim tra yu
cu kim nghimMt khc, i vi ring qu trnh ln men sa chua, th vic o hm
lng cht kh trong dch sa nguyn liu s lm trnh hin tng tch lp khi ln
men.
2. Ti sao phi dch ln men 40-43oC?Nhit ln men ti u vi sa chua
l42-43oC nhit ny, thch hp cho vi khun lactic d dang hot ng ,cc vi
khun lactic s phn chia v nhn ln rt nhanh, ln men to ra axit lactic
lm cho sa chua ln, protein trong sa (gi l cazein) kt ta lm sa chuyn
sang trang thi c, nh vy qu trnh ln men s xy ra nhanh chng va d
dng.
3. Nu thay i nhit ln men th cht lng sn phm c thay i khng v thng
s no s thay i theo?Nhit ln men khng n nh s lm thay i t l chng vi
sinh vt nh hng ti cht lng sn phm.Nhit ln men ph thuc vo t l
chng.Trong phm vi nhit thp, khi nhit tang ln s tng tc sinh trng ca
vi sinh vt v cc phn ng trong t bo u tng cho nn ton b hot ng trao i
cht s tng ln khi nhit cao hn, v vi sinh vt s tng trng nhanh hn. Lc
nhit tng n mt lc nht nh th nhit cng tng, tc sinh trng cng gim. Khi
nhit tng qu cao, th vi sinh vt s cht hoc gy ra s bin tnh ca
enzyme.
oo
