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5/19/2018 bioaumentacion- bioestimulacion Azolla coriliniana.pdf

Remocin de Fenantreno porAzolla

Carolinianautilizando bioaumentacin co

microorganismos hidrocarbonoclastas


UNIVERSIDAD VERACRUZANA

INTEGRANTES:

Arias Acosta Juan OsvaldoBarrn Mijangos Hctor

Gonzlez Quintana JazzielQuiroz Ramrez Stephanie

ING. AMBIENTAL 601 FCQ

CATEDRTICO:

Dra. Patricia Pavn Orozco

E.E.:

Sistemas Ambientales II: Biorremediacin

ACTIVIDAD:

Caso de Bioaumentacin / Bioestimulacion


INTRODUCCION

La Bioaumentacin es otra tcnica que es parte de la biorremediacin de suelos

contaminados. Esta tcnica consiste en el uso de enzimas o cultivos de

microorganismos con alta capacidad de oxidacin con el propsito de eliminar

sustancias indeseables, donde se asegura que estn presentes los microorganismos

especficos capaces de degradar al compuesto contaminante no deseado hasta sus

molculas bsicas.

La inoculacin controlada de cultivos bacterianos de accin dirigida, especialmente

formulado y de ocurrencia natural, para asistir a los hallados naturalmente en el suelo,

adaptadas en un medio con un contaminante igual o similar al que contiene el suelo

donde se las quiere introducir, acompaadas de otros componentes biotecnolgicos.

Por lo general los contaminantes son la nica fuente de alimento de las bacterias

inoculadas.

La bioaumentacin posibilita controlar la naturaleza de la Biomasa. Garantiza que el

tipo de microorganismos ms idneo est presente en el suelo en cantidad suficiente

para degradar en forma efectiva y eficiente los residuos contaminantes y reducirlos a

sus componentes bsicos (CO2 y H2O).

Por otra parte, la bioestimulacin, la cual es otro tratamiento que va de la mano con la

Bioaumentacin; consiste en la adicin de nutrientes, sustratos o tenso activos que

estimulen el crecimiento y actividad metablica de los microorganismos degradadores

presentes en la zona impactada incorporando una fuente de Nitrgeno, una fuente de

Fsforo y minerales que mejoran apropiadamente el PH, para mantener activa la flora

bacteriana activa que va a biodegradar el contaminante.

Algunas bacterias y cianobacterias hongos y algas poseen diversas herramientas que

les permiten utilizar HAP de bajo y alto peso molecular como nica fuente de energa y

carbono. El fenantreno es un hidrocarburo con 3 anillos aromticos que se encuentra

en altos porcentajes en productos refinados del petrleo, tiene un peso molecular de

178 y solubilidad en agua1, 29mgml la presencia de FEN en los ecosistemas se debe a

la combustin incompleta de materiales orgnicos como carbn petrleo gasolina y

madera.

Azolla es un helecho acutico que forma simbiosis con la cianobacterias Anabaena

azollae, la cual vive dentro de su fronda y puede fijar de 100 a 1564kg de

N2ha-1ao-1. Ha sido empleada en la limpieza de acuferos por su habilidad de fijar

N2 y remover P de los ecosistemas. Tambin se menciona que Azolla puede ser usado

como purificador de agua y su aplicacin biotecnolgica requiere de seleccin de

biotipos y desarrollo y mejoramiento de hbridos adems de mayor entendimiento delos mecanismos que inducen su esporulacin y reproduccin.


Remocin de Fenantreno porAzolla Carolinianautilizando

bioaumentacin con microorganismos hidrocarbonoclastas

Luis Alfredo Castro-Carrillo, Julin Delgadillo-Martnez, Ronald Ferrera-Cerrato y Alejandro Alarcn

FUNDAMENTO

El petrleo es una mezcla de variados hidrocarburos y otros compuestos orgnicos,

incluyendo algunos organometlicos con V y Ni, principalmente. Es tambin uno de los

recursos naturales no renovables ms importantes para la humanidad y vara en

composicin y propiedades fsico-qumicas de acuerdo a su sitio de extraccin.

La contaminacin de los ecosistemas con petrleo es un problema que ha estado

presente a travs del tiempo y muchos estudios se han enfocado en la evaluacin de la

degradacin de hidrocarburos persistentes en el ambiente, en especial los aromticos

polinucleares (HAP).

El fenantreno (FEN) es un hidrocarburo con tres anillos aromticos que se encuentra

en altos porcentajes en productos refinados del petrleo; su presencia en los

ecosistemas se debe a la combustin incompleta de materiales orgnicos como

carbn, petrleo, gasolina y madera. Una mnima porcin es derivada de incendios

forestales y erupciones volcnicas. El FEN y otros contaminantes pueden ser asimilados

por las races de las plantas y acumulados, metabolizados o volatilizados (Raynolds y

Skipper, 2005).

Algunas bacterias y cianobacterias, hongos y algas poseen diversas herramientas que

les permiten utilizar HAP como fuente de energa y carbono; as como las bacterias

tambin hay planta acuticas usadas para la limpieza de aguas residuales urbanas e

industriales contaminadas con metales pesados y compuestos orgnicos, sin embargo,

son pocos los reportes que existen sobre ellas.

El Azolla es un helecho acutico que forma simbiosis con las cianobacterias Anabaena

azollae, la cual vive dentro de su fronda y puede fijar de 100 a 1564 kg de N2por ha por

ao (Quintero-Lizaola y Ferrera-Cerrato, 2000). Ha sido empleada en la limpieza de

acuferos por su habilidad de fijar N2y remover Fsforos de los ecosistemas. El Azolla

puede ser usado como purificador de agua y su aplicacin biotecnolgica requiere de

seleccin de biotipos y desarrollo y mejoramiento de hbridos, adems de mayor

entendimiento de los mecanismos que inducen su porulacion y reproduccin.


DESCRIPCION DEL PROYECTO

Materiales y Mtodos

Fase I.- Seleccin de colectas de Azolla tolerantes al fenantreno.

En esta fase se utilizaron cuatro colectas de Azolla de diferentes zonas de Mxico,

cuyas caractersticas se encuentran en la Tabla 1.

Fase I. Seleccin de colectas de Azolla tolerantes al fenantreno (aqu se utilizaroncuatro colectas de Azolla de diferentes zonas de Mxico), Tabla I.

1. Se estableci un experimento completamente al azar con cinco diferentes

concentraciones de fenantreno Sigma 96% de pureza; FEN), de 0, 25, 50, 75 y

100mgl-1 en la solucin nutritiva para cada uno de las cuatro colectas

evaluadas.

2. Las unidades experimentales con 5 repeticiones, fueron recipientes de plstico

de 0,5l de capacidad y 86,5cm2 de rea,

3. Aadir 300ml de solucin nutritiva Yoshida compuesta por (gl-1) 0,05

NaH2PO42H2O; 0,09 K2SO4; 0,11 CaCl2; 0,4 MgSO47H2O; 0,01 MnCl2H2O; y

cido ctrico monohidratado 0,015g, y por (mgl-1) 0,1 (NH4)6Mo7O24 4H2O;

1,1 H3BO3; 0,4 ZnSO47H2O; 0,04 CuSO45H2O; 9,6 FeCl36H2O.

4.

El FEN ser disuelto previamente en acetona para su distribucin en la solucinnutritiva y se coloc el helecho acutico hasta despus de 24h, para permitir la

volatilizacin del solvente.

5. En cada recipiente se colocar 1g de peso fresco de las diferentes colectas de

Azolla para cada recipiente.

6. El experimento se llevar a cabo en cmara de crecimiento con temperatura de

27C y humedad relativa de 60%.

7. Fotoperodo de 12h e intensidad lumnica de 280molcm-2s-1 (se mantuvo el

nivel de solucin nutritiva en cada unidad experimental). Esta fase

experimental concluy cuando el helecho llen la superficie del recipiente de laprimera unidad experimental, ~28 das despus de la inoculacin (DDI).

TABLA 1

CLASIFICACION DE LAS COLECTAS DE Azolla DE ORIGEN MXICANO, UTILIZADAS EN EL

EXPERIMENTO

Lugar de coleccin Altitud (m) Catlogo IRRI Clasificacin taxonmica*

Cerro gordo, Veracruz 1435 8028 A. mexicana

Guamchil, Sinaloa 50 - A mexicanaTlhuac, Distrito F. 2240 - A. filiculoides

Crdenas , Tabasco 10 4139 A. caroliniana


8. Se colectar la biomasa del helecho acutico y se secar a 70C durante 72h.

Terminado este proceso de secado se pes el material vegetal.

Fase II. REMOCIN DE FENANTRENO POR AZOLLA CAROLINIANA UTILIZANDO

BIOAUMENTACIN CON BACILLUS STEAROTHERMOPHILUS Y OSCILLATORIA SP.

1. De acuerdo a los resultados obtenidos en la Fase I, se seleccionar la colecta de

Azolla que mostr mayor tolerancia a FEN (en condiciones de invernadero).

2. Se requieren recipientes de plstico (600ml de capacidad y 157,5cm2 de rea)

conteniendo 300ml de solucin Yoshida.

3. Se inocula un consorcio con dos microorganismos degradadores de FEN,

Bacillus stearothermophillus y Oscillatoria sp. (BST+OSC). La bacteria B.

stearothermophillus fue asilada de un suelo contaminado con petrleo de

Minatitln, Veracruz, Mxico, y tiene la capacidad de producir un surfactante

til en la degradacin de hidrocarburos del petrleo.

4. Los biosurfactantes han sido considerados de importancia en la

biorremediacin de ambientes contaminados pues son biodegradables, de baja

toxicidad y mejoran la biodisponibilidad de los compuestos txicos (Amzcua-

Vega et al., 2004).

5. La cianobacteria Oscillatoria es aislada previamente de un acufero

contaminado con petrleo en Tabasco; es fijadora de N2 atmosfrico y tiene

capacidad fotosinttica.

6.

Para su inoculacin, ambas cepas fueron propagadas por separado en mediosde cultivo para bacterias (Merck) y cianobacterias (Allen, 1968) e incubadas

durante 48 a 120rpm y 27oC.

7. De cada cultivo microbiano se tomaron 5ml (109 clulas ml1), para inocular

las respectivas unidades experimentales.

8. El experimento factorial 32 tuvo un diseo experimental completamente al

azar con 11 repeticiones por tratamiento.

El factor inoculacin del helecho tuvo dos niveles:

1) A. caroliniana (Tabasco) no inoculada

2) A. caroliniana inoculada con BST+OSC.

Para el factor FEN se consideraron tres concentraciones: 20, 40 y 60mg FEN por litro de

solucin nutritiva. Adems, se incluy un tratamiento testigo sin FEN y sin inoculacin

del consorcio microbiano. Variables de crecimiento de A. caroliniana Se determin el

peso fresco de A. caroliniana a los 49 DDI en las cinco repeticiones restantes de cada

tratamiento y la fitomasa fue luego secada a 70oC por 48h para determinar el peso

seco. Se calcul el porcentaje de inhibicin o estimulacin del crecimiento del helecho


por efecto de las diferentes concentraciones de FEN tomando en cuenta como 100%

de crecimiento al promedio del tratamiento testigo.

Tambin, se determin la tasa de crecimiento relativo y el tiempo de duplicacin

basado en peso seco, de acuerdo a la metodologa utilizada por Quintero-Lizaola

(1998) y Vidal et al. (1992). Para la tasa relativa de crecimiento se utiliz la ecuacin

TCR= (LnW2-LnW1)/(t), donde TCR: tasa de crecimiento relativo (gg1da1), LnW2;

logaritmo natural del peso final, LnW1: logaritmo natural del peso inicial, y t: tiempo

de crecimiento (das). En el caso de la tasa de duplicacin, esta se calcul como

TD=Ln2/TCR, donde TD: tiempo de duplicacin expresado en das. Actividad de la

enzima nitrogenasa.

A los 7, 14 y 21 DDI, se realiz la prueba de reduccin de acetileno para determinar la

actividad de la enzima nitrogenasa. Se coloc 1g de helecho acutico en frascos de

vidrio de 25ml que fueron sellados hermticamente con un tapn de goma. Una hora

despus, se extrajo 10% del aire, emplazndolo por acetileno comercial. Se extrajo

una muestra de la fase gaseosa y se transfiri a tubos al vaco (Vacutainer) de 10ml.

Posteriormente, se determin la cantidad de acetileno y etileno en un cromatgrafo

de gases (Hewlett Packard 5890) con temperatura de columna de 60oC y de detector

de 70oC. La actividad nitrogenasa fue estimada de acuerdo con la metodologa

propuesta por Ferrera-Cerrato et al. (1993).

Poblacin microbiana en la rizsfera de A. caroliniana A los 49 DDI, se determin la

poblacin de algunos grupos Tabla I Clasificaci n de las colectas de Azolla de origen

me xicano, utilizadas en el experimento Lugar de coleccin Altitud (m) Catlogo IRRI

Clasificacin taxonmica*Cerro Gordo, Veracruz 1435 8028 A. mexicana Guamuchil,

Sinaloa 50 - A. mexicana Tlahuac, Distrito Federal 2240 - A. filiculoides Crdenas,

Tabasco 10 4139 A. caroliniana IRRI: International Rice Research Institute.

*Clasificacin de acuerdo a anlisis molecular segn Zimmerman et al. (1993).

594 AUG 2008, VOL. 33 N 8 microbianos en la rizsfera del helecho acutico, por el

mtodo de cuenta viable. Se prepararon diluciones decimales acuosas y siembra en

placa de agar con el medio mineral mnimo modificado (Hernndez-Acosta et al., 2003)

derivado del medio fuente combinada de carbono (Rennie, 1981) y que consta de dos

soluciones. Solucin 1:0,8g K2HPO4; 0,2g KH2PO4; 0,1g NaCl2; 28,0mg Na2FeEDTA;

25,0mg Na2MoO4; 0,25g extracto de levadura; y 900ml agua destilada. Solucin 2:

2,0g MgSO4; 0,06g CaCl2; 100mg de FEN diluidos en 10ml de acetona y 100ml de agua

destilada.

Las dos soluciones se esterilizaron por separado a 18lbsplg2 durante 18min y cuando

tibias se mezclaron. Para degradadores de FEN que no fijan N2 atmosfrico se utiliz

el medio de cultivo anterior ms 1,5g NH4NO3. Se us agar papa glucosa ms rosa de

bengala para hongos totales (Beever y Bollard, 1970).


g p g ( y , )

Contenido de fenantreno.

El anlisis del contenido de FEN de la solucin nutritiva se realiz semanalmente

durante 49 das. Durante los primeros seis muestreos se utiliz slo una repeticin por

tratamiento. En el muestreo final se utilizaron cinco repeticiones. Para ello, a cada

unidad experimental se le retir el helecho, para ello se utiliz el mtodo de extraccin

en fase lquida con embudo de separacin. La solucin nutritiva (~300ml) se deposit

en el embudo y se mezcl con 150ml de diclorometano. Se agit vigorosamente y se

permiti la separacin de las fases. El diclorometano se colect en matraz baln de

fondo plano y se concentr la muestra en un rotavapor. Este proceso se repiti dos

veces adicionando diclorometano, agitando y concentrando la muestra. La lectura del

FEN se realiz en espectrofotmetro UV-VIS (Hewlett Packard Modelo Chemstation) a

253nm. Se prepar una curva de calibracin con 1; 0,8; 0,6; 0,4 y 0,2 mg FENml1 de

diclorometano (Soroka y Soroka, 2002). La degradacin de FEN fue expresada comoporcentaje.

Observacin microscpica del icrosimbionte Anabaena azollae

Se observaron los posibles cambios en la morfologa microscpica de la cianobacteria

en las frondas de A. caroliniana por efecto del contaminante. A los 28 DDI, se tom una

muestra de A. caroliniana en fresco de cada tratamiento. Una porcin de frondas

(0,1g) fueron cuidadosamente maceradas en portaobjetos. Se trat de retirar la

mayora de los fragmentos de tejidos de A. caroliniana y solo dejar la savia con las

cianobacterias libres. Sin realizar tincin, se coloc un cubreobjetos y se observ en

microscopio ptico, en campo claro y con el objetivo 40 para la toma de micrografas.

Anlisis estadstico

Los datos de cada variable en cada fecha de muestreo, se sometieron a un anlisis de

varianza y prueba de comparacin de medias (Tukey, =0,05), mediante el programa

SAS para Windows versin 8.2, 1999-2001.


Ventajas y Desventajas del proyecto

Ventajas Desventajas

No requiere rea adicional parallevar a cabo el tratamiento, ni el

uso de maquinaria pesada.

La recoleccin de Azolla tolerantes

al fenantreno se colecta en

diferentes partes del pas.

Efectividad del procesoindependientemente de las

concentraciones.

El proceso ocupa muchas sustancias.

El proceso se estimula enpresencia de dosis bajas.

Se lleva a cabo en un periodo de

tiempo largo.

Degradacin de contaminantes

especficos.Requiere mucha experimentacin.

Estabilidad del sistema.

Dosis ms altas (70mgkg-1)

inhiben tanto el crecimiento de la

bacteria como su actividad

nitrogenasa.

Resultados y Discusin

Seleccin de colectas de Azolla tolerantes al FEN La presencia de FEN en la solucinnutritiva, independientemente de su concentracin, redujo significativamente el

crecimiento de las cuatro colectas de Azolla. Las colectas de A. mexicana de Guamuchil

(Sinaloa) y de Cerro Gordo (Veracruz) fueron las ms susceptibles al FEN, el cual

produjo la muerte de estas colectas aun en las concentraciones ms bajas. A.

caroliniana (Tabasco) mostr mayor tolerancia al FEN. El tiempo requerido para que

esta colecta llenara la superficie del recipiente en presencia de 25mg FEN fue de 25

DDI, mostrando el mayor peso seco (0,16g). El tratamiento con 50mg de FEN tuvo 3,2g

de peso fresco y 0,11g de peso seco, los cuales fueron mayores al testigo (2,7g de peso

fresco y 0,06 de peso seco). En presencia de 75mg FEN la produccin de biomasa delhelecho fue similar al testigo. En contraste, A. caroliniana no mostr crecimiento en

presencia de 100mg FEN, tratamiento en el cual las races de helecho estuvieron

separadas y consecuentemente, la parte area estaba muerta (datos no presentados).

Aun cuando no se tienen reportes respecto al comportamiento de Azolla ante los HAP,

la presencia de hidrocarburos del petrleo tiene efectos negativos en el crecimiento de

este helecho acutico. Cohen et al. (2002) mencionaron que A. pinnata no fue capaz de

tolerar la presencia de diesel a concentraciones de 2,4lm2. Hasta donde pudimos

conocer, el presente es de los primeros estudios que mencionan los efectos negativos

del FEN en el crecimiento de cuatro colectas de Azolla, de las cuales A. caroliniana tuvo

mayor tolerancia a concentraciones bajas.


Remocin de FEN por A. caroliniana utilizando bioaumentacin con BST+OSC

En la segunda fase del estudio se utiliz el complejo de A. caroliniana (Tabasco)

expuesta a concentraciones de FEN no mayores a 60mg por litro de solucin nutritiva.

A los 42 DDI, A. caroliniana llen la superficie del recipiente en el tratamiento con

40mg FEN inoculado con BST+OSC. La produccin de materia seca fue

significativamente mayor (P


TABLA II

VARIABLES DEL CRECIMIENTO DE A.coroliniana EXPUESTA A CONCENTRACIONES DE FENANTRENO EN LA

SOLUCION NUTRITIVA Y BIOAUMENTACIN CON UN CONSORCIO MICROBIANOAILADO DE UN HUMEDAL

CONTAMINADO CON PETRLEO, A LOS 49 DDI

Tratamiento Fenantreno(mg/l)

Peso fresco(g) Peso seco(g) Etimulacin*(%)

TCR** TD (dias)

Azolla

0 2.82 1.32 --- 0.22 3.2

20 3.18 1.58 19.7 0.39 1.7

40 3.09 1.49 12.88 0.34 2

60 2.96 1.32 0 0.22 3.2

Azollla conBST + OSC

20 3.14 1.38 4.54 0.26 2.6

40 3.24 1.58 19.7 0.4 1.7

60 2.78 1.1 -6.67 0.04 18.7

*Estimulacion o inhibicin del crecimiento de A. caroliniana con respecto al tratamiento sin inculacion y sin fenantreno.

** gr producido / gr inoculados por da

TCR: tasa de crecimiento relativo, TD: tiempo de duplicacin, BST: Bacillus stearothermophilus, OSC: Oscilatoria sp.

El FEN, a excepcin de la dosis de 40mg, inhibi la actividad de la enzima nitrogenasa

en A. caroliniana con respecto al testigo (Figura 1). Por su parte, la inoculacin del

consorcio BST+OSC contribuy a la disminucin de la actividad enzimtica, la cual fue

en general muy similar a la observada en el testigo no inoculado (Figura 1). La actividad

nitrogenasa en sistemas simbiticos como el caso de Azolla-Anabaena no ha sido

previamente evaluada en presencia de HAP. No obstante, Stahl y Williams (1986)

indicaron que la presencia de petrleo redujo significativamente la actividad

nitrogenasa en el sistema simbitico trbol-Rhizobium. Por otra parte, se tienen

antecedentes de que esta actividad enzimtica en races de trbol inoculadas con

Rhizobium leguminosarum var. trifolii, puede ser estimulada en presencia de dosis

bajas de Cr (10mgkg1); sin embargo, dosis ms altas (70mgkg1) inhiben tanto el

crecimiento de la bacteria como su actividad nitrogenasa (Casella et al., 1988). Por su

parte, la actividad nitrogenasa y la absorcin de N (NH4 + y NO3 ) en Nostoc

muscorum son sensiblemente afectadas por la aplicacin de Cr, Ni y Pb (Rai y Raizada,

1989). Adems, la nitrogenasa en bacterias de vida libre fijadoras de N2 atmosfrico

presenta variaciones en su inhibicin y/o estimulacin por efecto de plaguicidas, de

manera particular la presencia de paraquat resulta en la inhibicin de esta actividad

enzimtica (Jagnow et al., 1979). Dado que las unidades experimentales no estuvieron

en un sistema completamente cerrado, se consider la evaluacin de losmicroorganismos en la rizsfera del helecho.


Tcnicas de bioestimulacin y bioaumentacin

Estimulantes de la actividad microbiana: aceptores de electrones, nutrientes, o

dadores de electrones. Es lo que se denomina tcnicas de Bioestimulacin. Se ha

demostrado que en la mayora de casos el factor limitante de los procesos debiodegradacin es el agotamiento de aceptores de electrones ms que el agotamiento

de nutrientes como nitrgeno y fsforo.

Actualmente, existe un producto en el mercado capaz de abastecer de oxgeno al

emplazamiento contaminado denominado ORC (Oxygen Release Compound),

compuesto que libera oxgeno.

Hasta la fecha, han surgido diferentes productos capaces de suministrar hidrgeno al

medio para estimular la biodegradacin anaerobia de los contaminantes clorados, los

ms ampliamente utilizados son el HRC (Hydrogen Release Compound) y el CAP18,

ambos compuestos que liberan hidrgeno.

Microorganismos responsables de la biodegradacin de los contaminantes presentes

en el emplazamiento en estudio.

Es lo que se denomina tcnicas de Bioaumentacin.

Actualmente, existen dos productos en el mercado BIO-DECHLOR INOCULUM y KB-1

DECLORADOR que contienen microorganismos capaces de degradar los disolventesclorados va decloracin reductiva y que se aplican directamente en el subsuelo.

En el presente proyecto se han considerado ambas tcnicas de bioremediacin in-situ

(Bioestimulacin y bioaumentacin) ya que son medidas adicionales altamente

recomendadas y efectivas para reducir el tiempo requerido por la MNA para alcanzar

los objetivos de limpieza en aguas subterrneas contaminadas. Todos los compuestos

anteriores han sido diseados para ser de fcil aplicacin, de bajo coste, seguros

medioambientalmente, y altamente efectivos. por definicin, un remedio que incluya

la introduccin de cualquier tipo de estimulante/potenciador ya no se considera

atenuacin natural. [U.S EPA, 1999, p. 4]

Bioestimulacin de la degradacin aerobia mediante un compuesto liberador de

oxgeno

Descripcin del compuesto

El ORC (Oxygen Release Compound) [Regenesis, 2004a] es un producto diseado

especficamente para el tratamiento in-situ de la contaminacin de las aguas

subterrneas por hidrocarburos de petrleo (BTEX y MTBE) o por cualquier otro


contaminante degradable aerbicamente (compuestos alifticos menos clorados como

el CV o el DCE).

El ORC tambin est disponible en forma de filtros de varios dimetros los cuales se

instalan en pozos. Estos filtros se sacan y se reemplazan por otros al final de su vida til

(cuando se agota la liberacin de oxgeno).

Tipos de aplicacin del producto

El ORC puede ser aplicado:

1. En el fondo de una excavacin por deposicin del producto.

2. En la zona saturada (aguas subterrneas) contaminada mediante tres

mtodos: (1) instalacin de filtros, (2) equipos de inyeccin directa o

(3) relleno de pozos.

Bioestimulacin de la degradacin anaerobia mediante compuestos liberadores de

hidrgeno

Descripcin de los compuestos

El HRC (Hydrogen Release Compound) [Regenesis, 2004b] es un producto

especficamente diseado para el tratamiento in-situ de las aguas subterrneas

contaminadas por disolventes clorados (PCE, TCE, TCA, TCM (cloroformo) y sus

derivados) o por cualquier otro contaminante degradable anaerobicamente.

El tiempo de actuacin del producto (estimulando la decloracin reductiva) se estima

entre 12 y 18 meses, liberando indirecta y lentamente hidrgeno al medio.

CAP18TM [DBI, 2003a] es otro compuesto lquido muy levemente viscoso derivado de

aceites vegetales de soja y que se utiliza para la bioestimulacin de la degradacin

anaerobia mediante la liberacin de hidrgeno.

CAP18 TM est catalogado como un nutriente que estimula la degradacin anaerobia

de los contaminantes.

Tipos de aplicacin del compuesto

El HRC es un lquido altamente viscoso que puede ser aplicado:

(1) En el fondo de una excavacin por deposicin del producto

(2) En la zona saturada (aguas subterrneas) contaminada mediante equipos

de inyeccin directa o mediante relleno de pozos


Bioaumentacin de los degradadores de etenos clorados mediante cultivos

microbianos

El KB-1TM [SIREM, 2003a] es un cultivo microbiano natural y no patgeno que

contiene varias especies de Dehalococcoides, el nico grupo de microorganismos

documentados hasta el momento capaces de degradar etenos clorados, como el PCE,

TCE, DCE y VC, a productos finales, no txicos y aceptables medio ambientalmente,

como el eteno.

El KB-1TM es un enriquecimiento derivado de las bacterias que se han hallado

naturalmente en subsuelos y aguas subterrneas contaminadas por compuestos

clorados.

CONCLUSION

Se observaron diferencias en la tolerancia de colectas de Azolla hacia concentraciones

crecientes de FEN. A caroliniana fue la colecta con la mayor tolerancia a FEN

propiciando la remocin de este de la solucin nutritiva. La presencia de FEN produjo

disminucin significativa en el crecimiento, TD y actividad nitrogenasa en el

simbiosistema Azolla-Anabaena. La aplicacin de bioaumentacion con Bacillus

stearothermophilus y oscillatoria sp. Produjo mayor degradacin de FEN en

concentraciones de 20mgl

1 pero su efecto fue limitado en concentraciones >40mg

FEN. Ms aun la presencia de FEN produjo cambios morfolgicos en la cianobacteria

Anabaena azollae cuyas cadenas de clula fueron ms cortas y los heterocistos se

encontraron libres lo que denota toxicidad en la simbiosis y muerte del helecho en

concentraciones de FEN >60mgl1.


REFERENCIAS

Gua tcnica de Atenuacin Natural Monitorizada en emplazamientos

contaminados.

Tcnicas de bioestimulacin y bioaumentacin para la potenciacin de labiodegradacin de contaminantes.

http://www.ingenieroambiental.com/7/37786-1.pdf

Remocin de fenantreno por azolla caroliniana utilizando bioaumentacin

con microorganismoshidrocarbonoclastas Luis Alfredo Castro-Carrillo, Julin

Delgadillo-Martnez, Ronald Ferrera-Cerrato y

Alejandro Alarcn.

Documents

bioaumentacion- bioestimulacion Azolla coriliniana.pdf