Biologia Celular Ciências Biomédicas

Ciências Farmacêuticas

Aula P5

Importância do isolamento, utilização, observação e caracterização de mutantes. Observação de mutantes de Drosophila melanogaster e Schizosaccharomyces pombe. Os objectivos principais desta aula prática são: 1) entender a importância da utilização de mutantes em ciências ligadas directa- ou indirectamente à biologia, nomeadamente a biologia celular; 2) reforçar a experiência e o poder de observação do discente; 3) reforçar a capacidade do discente de chegar a conclusões idênticas, semelhantes ou diferentes dos investigadores originais; 4) integrar os conhecimentos obtidos nas aulas teóricas e teórico-práticas com a prática laboratorial, em especial no que respeita ao estudo de mutantes do ciclo celular. 5.1 Estudo de mutantes de Drosophila Utilize as figuras seguintes para:

a) identificar o sexo das moscas Drosophila que observar à lupa; b) identificar quais as mutações que elas possuem; uma vez que cada indivíduo está marcado com

uma referência, associe essa referência com a designação correcta do mutante; e c) verifique se existe algum fenótipo que esteja associado a um determinado sexo; se sim, discuta se

essa associação é estatisticamente significativa ou não.

Figura 1. - A, D. melanogaster selvagem (wild type); B, D. melanogaster macho, onde se mostram os pentes sexuais (sex combs) típicos dos machos desta espécie (a azul); C, D. melanogaster mutante ebony; D, diagrama de comparação entre uma mosca selvagem (esquerda) e ebony (direita).

A B

C D

Figura 2. - A, D. melanogaster mutante white macho (esquerda) e fêmea (direita); B, D. melanogaster mutante serrate - veja se consegue identificar o sexo dos dois indivíduos; C, asa selvagem (esquerda) e serrate (centro e direita); D, mutante drop; E, mutante curly; F e G, moscas com cerdas normais; H, mosca mutante stubble.

A B

D

C

E

F G H

Figura 3. - A, D. melanogaster selvagem (wild type) e mutantes cinnabar, white e sepia; B, D. melanogaster selvagem (+) e mutantes sepia (se), cinnabar (cn) e white (w); C, comparação entre indivíduos macho (Male) e fêmea (Female). 5.2 Estudo de mutantes de Schizosaccharomyces pombe

Neste estudo, pretende-se que identifique as diferenças entre Schizosaccharomyces pombe cdc25 e wee1, tanto crescidas à temperatura permissiva (25ºC) como crescidas à temperatura restritiva (36ºC). Tem preparações definitivas marcadas com referências. Faça uma correspondência entre cada preparação e o respectivo mutante, justificando com o que aprendeu nas aulas teóricas e teórico-práticas. Figura 4 - Schizosaccharomyces pombe selvagem (painel superior), cdc25 (painel médio) e wee1 (painel inferior) crescidos a 36ºC.

A B

C