DIVERSIDAD CELULAR II. CELULAS EUCARIOTAS (ANIMALES Y PROTOZOOS) ESTRUCTURA Y DIVERSIDAD.

RESUMEN

Con la aparición del microscopio y la utilización de tinciones la observación de células se facilitó enormemente llegando al punto de clasificarlas en dos grandes grupos: los eucariontes y los procariontes quienes presentan marcadas diferencias en su estructura morfológica. Mediante la preparación de diferentes muestras de origen biológico se busca encontrar las disparidades estructurales de las células de cada tejido. Los resultados evidencian que cada célula presenta una morfología característica que contribuye a la óptima realización de sus funciones.El objetivo de esta práctica realizada en el laboratorio fue identificar por medio de la observación en el microscopio con objetivos de 10 X y 40X el núcleo y la estructura de las células eucariotas a través de montajes con diversos tipos de muestras tomadas del hígado, riñón, sangre, grasa animal, mucosa bucal y semen; realizando las prácticas de tinción simple con colorantes como el azul de metileno en las muestras de frotis bucal y esperma, el Sudan III para la visualización de células adiposas, la eosina para diferenciar las células de la sangre (leucocitos y eritrocitos), entre otros. Logrando por medio de estos procedimientos observar estos tipos de células eucariotas.

SUMMARYWith the advent of the microscope and the use of cell staining

observation it is greatly facilitated reaching the point of classifying them into two groups : eukaryotes and prokaryotes who show marked differences in their morphological structure . By preparing different samples of biological origin researchers seek structural disparities of cells from each tissue. The results show that each cell has a characteristic morphology which contributes to the optimal performance of their duties.The objective of this practice performed in the laboratory was identified by observation under a microscope with objectives of 10X and 40X the core and the structure of eukaryotic cells through assemblies with various types of samples taken from liver, kidney , blood , animal fat, oral mucosa and semen; making practices simple staining with dyes such as methylene blue samples buccal swabs and sperm , Sudan III for display of adipose cells , eosin for differentiating blood cells ( leukocytes and erythrocytes ) among others . Achieved through these procedures observe these types of eukaryotic cells.

PALABRAS CLAVECélulas sanguíneas, células hepáticas, células renales, células adiposas, células reproductoras, frotis, tejido, tinción, microscopio, organismos unicelulares.

INTRODUCCION

Los organismos vivientes están formados por unidades básicas llamadas célula, la cual es la unidad morfológica y funcional de todo ser

vivo. De acuerdo a esto los organismos vivos pueden clasificarse según el número de células que posean en unicelulares (poseen una sola célula) y los pluricelulares (si poseen más de una célula) Los resultados de muchas investigaciones fundamentaron la base de la teoría celular que se puede resumir en estas afirmaciones:1. Todos los organismos vivos están formados por una o más células.2. La célula es la unidad funcional de todo ser vivo.3. Las células nuevas provienen de células preexistentes.4. Todas las células contienen su información hereditaria.Se denomina célula eucariota a todas las células que tienen su material hereditario, fundamentalmente su información genética, encerrado dentro de una doble membrana. Presentan un citoplasma compartimentado, con orgánulos separados o interconectados, limitados por membranas biológicas que son de la misma naturaleza esencial que la membrana plasmática. El núcleo es el más notable y característico de los compartimientos en que se divide el protoplasma.

MATERIALES Y METODOS

* De laboratorio: microscopio, cubre y porta objetos, lanceta, gotero, palillos de diente, algodón estéril, papel o toallas absorbentes, guantes, tapaboca, frasco lavador, mechero.* Reactivos: azul de metileno, alcohol absoluto, sudan III, hematoxilina, eosina, agua.* Biológicos: células de la mucosa bucal, sangre, un pedazo de hígado animal, un pedazo de riñón, una

muestra de esperma, agua de charca, grasa animal.

PROCEDIMIENTO:Parte A. Observación de células de la mucosa bucalUtilizando un palillo de dientes se raspo cuidadosamente el interior de la mejilla; se colocó sobre el portaobjeto, sobre esta se dispersó el raspado en forma de zig-zag. Se dejó secar la muestra. Posteriormente se calentó el portaobjeto con la llama del mechero para fijar la muestra. Luego se colocó el portaobjeto sobre el soporte para tinción y se le agrego unas gotas de azul de metileno, dejándolo actuar durante 1 minuto; se vertió el colorante restante y se lavó la preparación hasta que ya no soltara más color. Se procedió a observar al microscopio.

Parte B. Observación de células sanguíneasCon una lanceta estéril se realizó una punción en el dedo índice, se colocó una gota de sangre en el portaobjetos y realizo un extendido, con otro portaobjeto se deslizo sobre toda la superficie, de tal manera que se obtuvo una fina película de sangre. Luego se dispuso la muestra de sangre para tinción y se cubrió con unas gotas de alcohol absoluto hasta que se evapore para asegurar la fijación. Luego se cubrió con unas gotas de hematoxilina y se dejó actuar por 15 minutos. se lavó la preparación y se le agrego unas gotas de eosina dejando actuar por 1 minuto. Se volvió a lavar hasta que no soltó más colorante, se dejó secar y se procedió a su observación en el microscopio.

Parte C. Observación de células reproductorasSe preparó un montaje con una gota de la muestra de esperma. Se observó mediante el microscopio a menor y mayor aumento.

Parte D. Observación de células adiposasCon una cuchilla se cortó una fina capa de grasa y se froto contra el portaobjeto, se agregó alcohol absoluto hasta que se evaporo y luego se le aplico Sudan III, se dejó actuar por 5 minutos se lavó con agua y finalmente se observó en el microscopio.

Parte E. Observación de células hepáticasSe tomó un pedazo de hígado se hizo un corte transversal, luego fue raspado y aplicado en el portaobjeto en forma de zig-zag, se dejó secar y se fijó, se le aplicó azul de metileno y se dejó actuar por un minuto, se lavó con agua , y se montó la muestra en el microscopio para la observación.

Parte F. Observación de células renalesSe tomó un pedazo de riñón, se hizo un corte transversal, luego fue raspado y aplicado en el porta objeto en forma de zig-zag, se dejó secar y se fijó, se le aplicó azul de metileno y se dejó actuar por un minuto, se lavó con agua, y se montó la muestra en el microscopio para la observación.

Parte G. observación de microorganismo de agua dulce (agua de charca).Se depositaron unas gotas de agua de charca sobre el porta objeto, se le coloco un cubre objeto y se procedió a examinar en el microscopio.

RESULTADOS

Montaje A: Células Epiteliales En la muestra se realizó el procedimiento de tinción simple, al observar detalladamente en 10X – 40X (fig. 1 y 2) se apreciaron las células epiteliales obtenidas del frotis bucal.

Al observar las células de la mucosa bucal, en presencia de azul de metileno, este tiñe las células haciendo evidente a tan solo 40x, sus estructuras básicas, (membrana celular, núcleo y citoplasma)

Fig. 1 (10X) fig. 2 (40X)

Montaje B: Células SanguíneasAl tomar la muestra de sangre se colocó en la porta objeto, luego se sometió al procedimiento de tinción y observamos en 10X – 40X (fig. 3 y 4), apreciamos las células sanguíneas (plaquetas, glóbulos rojos y blancos).Al microscopio se observó un predominio de los glóbulos rojos, los cuales se ven así por la tinción con la eosina, no tienen núcleo y son más delgados en el centro que por los bordes. Los glóbulos blancos se identifican por la presencia del núcleo pintado de morado por la hematoxilina y pudimos diferenciar varias clases: linfocitos, monocitos, neutrófilos, basófilos, neutrófilos y eosinofilos.

Fig. 3 (10X)

Fig. 4 (40X)

Montaje C: células reproductoras (semen).Se consiguió la muestra de semen fresca de uno de nuestros compañeros con la finalidad de observar y analizar. Se tomó un poco de semen para colocarse en un portaobjetos, posteriormente se cubrió con un cubreobjetos y poder ser visualizado en el microscopio. Al observarlos en el objetivo de 10X (fig. 5) solo se ven varios puntos con bastante movilidad, pero al observarlos en el objetivo de 40X (fig. 6) se pueden apreciar mejor detallados, se les pueden apreciar sus partes como la cabeza y la cola.

Fig. 5 (10X) fig. 6 (40X)

Montaje D: Células Adiposas En la muestra se realizó un procedimiento con alcohol y tinción con Sudan lll, al visualizar detalladamente en 10X – 40X (fig. 7 y 8) se apreciaron las células

adiposas (adipocitos) del frotis de grasa animal. La célula contiene un núcleo redondo, uniforme, con leves irregularidades de contorno y un citoplasma frecuentemente extenso.

Fig. 7 (10X) fig. 8 (40X)

Montaje E: Células Hepáticas En la muestra se realizó el procedimiento de tinción simple, al observar detalladamente en 10X – 40X (fig. 9 y 10), se apreciaron las células hepáticas (hepatocitos) obtenidas del frotis de hígado animal.

Fig. 9 (10X) fig. 10 (40X)

Montaje F: Células RenalesEn la muestra se realizó el procedimiento de tinción simple, al visualizar detalladamente en 10X – 40X (fig. 11 y 12), se apreciaron las células renales (nefronas) apreciadas como puntos azules.

Fig. 11 (10X) fig. 12 (40X)

Montaje G: Agua de CharcaAl realizar la observación del agua de charca en el objetivo de 40X (fig. 13), se logró apreciar un organismo unicelular zooplancton (micro alga), potriococo, con movimiento y alimentándose. Además se observaron algunas algas unicelulares, Diatomeas. (fig. 14).

Fig. 13 (40X) fig. 14

DISCUSION

Las estructuras de células eucariotas observadas en este laboratorio permiten describir la forma de las células dependiendo de la función que cumplan. La sangre tiene importancia fundamental para el mantenimiento de la homeostasis normal del organismo, es decir, el equilibrio fisiológico. Inmersa en esta encontramos los eritrocitos que transportan oxígeno y dióxido de carbono y presentan una forma bicóncava que permite una absorción rápida y son de color rojo. Por otro lado se encuentran los leucocitos que dependiendo del tamaño, de la función y del número de núcleos se clasifican en linfocitos, monocitos y polimorfonucleares.Al igual que los pulmones y el hígado, los riñones recuperan componentes esenciales y eliminan los desechos por medio de un filtrado para esto usan células especializadas como las nefronas. En cuanto a la muestra de las

células adiposas o adipocitos observamos que son células muy grandes redondeadas con un borde muy fino de citoplasma, que rodea una gran gota de lípidos almacenados, el núcleo esta achatado y generalmente se ubica a los extremos del citoplasma. En la muestra del hígado se identificaron las células hepáticas que tienen una forma poliédrica y su núcleo es central y único, con uno o más nucléolos y el citoplasma tiene un aspecto granular y contiene gran cantidad de glucógeno. En la observación de la muestra del semen se evidenciaron las células reproductoras masculinas que tienen una cabeza portadora de la dotación paterna de material genético y una cola larga y a modo de látigo que lo propulsa hacia el ovulo. En la muestra se observó que se movían con gran agilidad. En cuanto a la muestra de la mucosa bucal hay presencia de células eucariotas con núcleo y forma definida.

Este trabajo permite reconocer las formas y funciones de diversas células especializadas presentes en el cuerpo humano y además permite adquirir habilidades y destrezas para el uso y manejo del microscopio.

CONCLUSIÓN

En esta práctica se pudieron apreciar las diferentes células que componen el cuerpo tanto humano como animal, además de las partes correspondientes a las que pertenece. Así como que todas las células humanas no son iguales, apreciado en el ejemplo de la mucosa bucal en la cual las células se encuentran separadas entre sí, y

en el resto del cuerpo se encuentran unidas.Aprendimos a diferenciar las partes que componen al espermatozoide y además las células y bacterias que podemos encontrar en aguas impuras o infectadas. Además de la función del colorante sudan III y la hematoxilina.

BIBLIOGRAFIABlanco German, Martínez Neys “Manual para prácticas de laboratorio en el área de biología general y celular”Manual para prácticas de laboratorio en el área de biología general y celular.Nueva enciclopedia autodidactica tomo 6, Zamora editores LTDA. Edición 1998WEB GRAFIAhttp://www.slideshare.net/andresricote/tincin-simple-presentation http://es.m.wikipedia.org/wiki/tejido_adiposo

http://es.m.wikipedia.org/wiki/nefrona

http://iesabastos.org/archivos/daniel_tomas/laboratorio/sudanIII/sudan3.html

http://es.m.wikipedia.org/wiki/celula_eucariota

www.diversidadmicrobiana.com/index.php?option=com_content&view=article&id=712&Itemid=748

http://es.m.wikipedia.org/wiki/excavata

http://es.m.wikipedia.org/wiki/amoebozoa http://es.m.wikipedia.org/wiki/rhizaria

ANEXOS

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS:

1. realice un cuadro comparativo con cada uno de los diferentes tipos de células que observo, excepto las sanguíneas (solo observaciones).

Humanas Frotis bucal Espermatozoides

- Tinción con azul de metileno.

- Separadas entre sí.- Flujo de material entre ellas.

- No necesita tinción.- En una sola gota se

aprecian montones.- Mueren al poco tiempo

fuera de su entorno.

Animal Adipocitos Nefronas Hepatocitos

- Tinción con sudan III

- Pertenecientes al tejido graso.

- Tamaño mayor al resto de las observadas.

- Tomadas de la superficie del tejido.

- Tinción con azul de metileno.

- Pertenecientes al riñón.

- Tomadas de la superficie del tejido.

- Tinción con azul de metileno.

- Pertenecientes al hígado.

- Tomadas de la superficie del tejido.

2. Cuadro comparativo de la sangre humana.Las células de la sangre están formada de tres tipos principales: Glóbulos rojos (eritrocitos) o hematíes, glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos). Todas las líneas celulares que dan lugar a las células de la sangre se originan en la médula ósea.

Los eritrocitos Los leucocitos Las plaquetasSon las células más numerosas del organismo. Carecen de núcleo y son flexibles y elásticos, presentando una forma bicóncava que les permite atravesar mejor los capilares. El color rojo característico de la

Son células incoloras de fina membrana, con núcleo, de mayor tamaño que los glóbulos rojos pero de número inferior a éstos. La función fundamental de estas células es la defensa del organismo. Tienen un origen doble: los

Son estructuras que en realidad no son verdaderas células, sino fragmentos citoplasmáticos de las células madre de la médula ósea. Son las encargadas de proporcionar los elementos necesarios para que la sangre

sangre proviene de la hemoglobina contenida en los hematíes, una proteína rígida en hierro que se une al oxígeno y lo transporta a las diferentes células del cuerpo.

que poseen un citoplasma con granulaciones, los denominamos granulocitos, y los monocitos se originan, como los hematíes en la médula ósea; los linfocitos, se forman en los ganglios linfáticos, aunque posteriormente son llevados por la sangre a diferentes zonas del organismo, en las que ejercerán sus funciones.

pueda coagularse.

3. caracterice morfológica y fisiológicamente los diferentes tipos de células observadas.

* Células humanas de la mucosa: Estos tipos de células están unidas herméticamente una con otra de manera estrecha, lo cual evita el paso de material entre ellas excepto las células de la mucosa bucal las cuales se encuentran separadas. Tiene un esqueleto interno formado por actina y filamentos.* Adipocitos: células redondeadas, de 10 a 200 micras, con un contenido lipídico que representa el 95% del peso celular y que forma el elemento constitutivo del tejido graso. Almacena una gran cantidad de grasa. Existen dos tipos de adipocitos:1. Adipocitos blancos: contienen una gran cantidad de lípidos rodeados por un anillo de citoplasma. El núcleo es plano y se localiza en periferia. Contienen grasa en un estado semilíquido, y compuesta por triglicéridos y esteres de colesterol. Secreta resistina, adiponectina y leptina.2. Adipocitos marrones: tienen forma poligonal, tienen una gran cantidad de citoplasma con fracciones dispersas de lípidos. Su núcleo es redondo, su color marrón se debe a la gran cantidad de mitocondrias que poseen. Los seres vivos utilizan este tipo de tejido adiposo para mantener la temperatura.* Hepatocito: célula propia del hígado que constituye alrededor del 80% de la población celular del tejido hepático. Poseen una forma poliédrica y núcleo voluminoso que se dispone alrededor de un vaso venoso. su función es la metabolización de las sustancias nutritivas, transformación de la glucosa en glucógeno, fabricación de proteínas, degradación de las sustancias toxicas presentes en la sangre y segregación de la bilis.* Nefrona: unidad estructural y básica del riñón, responsable de la purificación de la sangre. Su principal función es filtrar la sangre para regular el agua y las sustancias solubles, reabsorbiendo lo que es

necesario y excretando el resto como orina. Está situada principalmente en la corteza renal.* Leucocito: células sanguíneas que son los efectores celulares de la respuesta inmunitaria, no contienen pigmentos. su tamaño oscila entre 8 y 20 micrómetros. Según la forma de su núcleo se clasifican en:1. Leucocito con núcleo sin lóbulo o mononucleares: linfocitos o monocitos2. Leucocitos con núcleo lobulado o polimorfonucleares: neutrófilos, basófilos, eosinofilos.* Trombocitos: fragmentos citoplasmáticos pequeños, irregulares y carentes de núcleos, de 2 o 3 micrómetros de diámetro. Son una fuente natural de factores de crecimiento. Están involucradas en la hemostasia, iniciando la formación de coágulos o trombos.

4. indique la taxonomía para los protistos y caracterice cada grupo.

R// La taxonomía actual de los protistas es la siguiente

* Supergrupo excavata: incluye los eucariotas más primitivos (glardia, jakobida, trichomonas, malawimonas, metamonada, percolozoa, euglena).la mayoría retienen un orgánulo mitocondrial en una forma grandemente modificada. Otros presentan mitocondrias con crestas tubulares, discoidales o, en algunos casos, planas. La mayoría poseen dos o más flagelos y muchos presentan un aparato digestivo ventral con una ultra estructura característica, soportado por micro túbulos.

* Supergrupo amoebozoa: amoeba, entamoeba, mohos mucosos acelulares (physarum), mohos mucosos celulares (dyctiostelium). Sus seudópodos son de tipo romo y en forma de dedo y se denominan lobopodios. La mayoría son unicelulares y son comunes en el suelo y en los hábitats acuáticos. Varían grandemente de tamaño

* Supergrupo rhizaria: radiolarios, foraminíferos, cercozoa. Sus miembros varían considerablemente en la forma, pero la mayor parte son ameboides con seudópodos filiformes, reticulados o soportados por micro túbulos. Casi todos tienen mitocondrias con crestas tubulares.Supergrupo chromalveolata: alveolata: apicomplexa (plasmodium, toxoplasma; dinoflagelados (noctiluca, symbiodinium); ciliados (vorticela, paramecium) – stramenopiles: diatomeas, algas pardas, algas doradas, antiguos oomicetos (peronosporomycetes) – haptophyta: coccolithales (fotosintéticos con escamas de calcita decorada) las únicas características comunes que comparten son: el origen común de cloroplastos, la presencia de celulosa en la mayoría de las membranas celulares

* Supergrupo primoplantae: viridiplantae, rhodophyta, glaucophyta. Carecen de centriolos y tienen mitocondrias con crestas planas. Tienen generalmente pared celular que contiene celulosa en su composición y el alimento se almacena en forma de almidón.

5. las células epiteliales están unidas estrechamente entre sí formando una estructura continua. Las células de la mucosa bucal (en el interior de la mejilla), sin embargo, están separadas ¿a qué atribuye usted esta condición?

R// Se debe a que el tejido de la piel está formado por el epitelio plano estratificado queratinizado el cual forma la epidermis de la piel, en el que las células más superficiales están muertas y cuyo núcleo y citoplasma ha sido remplazado por queratina, que forma una capa fuerte y resistente a la fricción, impermeable al agua y casi impenetrable por las bacterias, adaptándose a las funciones de protección. El tejido de la mucosa bucal está formado por epitelio plano estratificado no queratinizado el cual presenta varias capas de células planas, de las cuales, las más superficiales presentan núcleo son células vivas y en constante división celular no se encuentran queratinizadas, las más profunda están en contacto con la lámina basal. Las más profundas son cuboides, las del medio poliédricas y las de la superficie son planas. La queratinización de las células epidérmicas impide que existan espacios intercelulares entre las mismas a diferencia de las de la mucosa bucal donde existen espacios intercelulares.

6. para que se agrega hematoxilina?

R// se agrega hematoxilina a la muestra para diferenciar las estructuras presentes ya que este solo tiñe a las estructuras que contiene un componente acido. Un ejemplo de ello es la tinción realizada en la sangre aquí nos permite apreciar la estructura del glóbulo blanco y las plaquetas.

WEBGRAFIA:

http://taxonomiadanielcastrejon.blogspot.com.co/p/blog-page_25.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Sangre

https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_hematoxilina-eosina

https://es.wikipedia.org/wiki/Hematoxilina