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BIBLIOTECA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA INFORME DE TESIS I CARACTERISTICAS FISICOQUÍMICAS DEL ACEITE ESENCIAL DEL PERICARPIO DE Citrus reticulata L. Y DETERMINACIÓN DEL PORCENTAJE RELATIVO DE SUS COMPONENTES HIDROCARBONADOS Y OXIGENADOS AUTORES: CHAVEZ LEON, ARMANDO NICOLAS GOMEZ ALVA, ARNOLD MANUEL ASESOR: Dr. Q.F. Venegas Casanova, Edmundo Arturo TRUJILLO PERU 2016 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

BIOQUIMICA Y FARMACIA DE AUTORES: BIBLIOTECA

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INFORME DE TESIS I

CARACTERISTICAS FISICOQUÍMICAS DEL ACEITE ESENCIAL DEL

PERICARPIO DE Citrus reticulata L. Y DETERMINACIÓN DEL

PORCENTAJE RELATIVO DE SUS COMPONENTES HIDROCARBONADOS

Y OXIGENADOS

AUTORES:

CHAVEZ LEON, ARMANDO NICOLAS

GOMEZ ALVA, ARNOLD MANUEL

ASESOR:

Dr. Q.F. Venegas Casanova, Edmundo Arturo

TRUJILLO – PERU

2016

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ÍNDICE

Pág.

ÍNDICE……………………………………………………………….……..……i

PRESENTACIÓN………………………………………………………….…....ii

JURADO CALIFICADOR…………………………………………………..….iii

DEDICATORIA…………………………………………………………….…....iv

AGRADECIMIENTO …………………………………………..……….…..…v

RESUMEN………………………………………………………….…….….….vi

ABSTRACT………………………………………………………….................vii

I. INTRODUCCIÓN…………………………………………………...........1

II. MATERIAL Y EQUIPO…………………………………………….….. 11

III. METODOLOGÍA DEL TRABAJO ……………………….………….....12

IV. RESULTADOS……………………………………………………….….20

V. DISCUSIÓN…………………………………………….…………….….22

VI. CONCLUSIONES……………………………………….……..............26

VII. RECOMENDACIONES…………………………………………………27

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS…………………………………..28

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PRESENTACIÓN

SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:

En cumplimiento de las normas dispuestas en el reglamento interno de la

Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo,

sometemos a su consideración el Informe de Tesis I titulado:

“Características fisicoquímicas del aceite esencial del pericarpio de Citrus

reticulata L. y determinación del porcentaje relativo de sus componentes

hidrocarbonados y oxigenados”

Dejamos a vuestra consideración señores miembros del jurado la calificación

del siguiente trabajo de investigación.

Trujillo, Setiembre del 2016.

Chavez León, Armando Nicolás Gomez Alva, Arnold Manuel

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JURADO CALIFICADOR

………………………………………………. Dr. Q.F. Jara Aguilar, Demetrio Rafael

PRESIDENTE

………………………………………………..… …..……………………………………

Dr. Q.F. Edmundo A. Venegas Casanova Dr. Q.F. Aro Díaz, Rubén Jesús ASESOR MIEMBRO

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DEDICATORIA

A Dios

Por darnos la sabiduría y la sapiencia

necesarias, para poder lograr

satisfactoriamente el desarrollo de este

trabajo de investigación y por

mostrarnos que existe un camino y

por más difícil que este sea, con

empeño todo es posible.

A Nuestros Padres

Por darnos la fortaleza y el impulso

necesarios para no desfallecer en el camino

a este un logro más en nuestra vida como

personas y como parte de la comunidad

científica

A Nuestros Asesor

Por tendernos no solo una mano amiga,

sino también brindarnos su amistad

incondicional, ello le ha permitido con el

pasar del tiempo aconsejarnos y darnos un

punto de vista más conciso siempre que ha

sido necesario no solo para poder presentar

este trabajo que nos ha demandado esfuerzo

sino para poder seguir adelante en este

arduo camino que nos espera

A nuestros Amigos

Por incentivarnos con cada una de sus

acciones a seguir adelante y no

desfallecer y por sobre todo mantener

siempre el carisma y las ganas de

trabajar

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AGRADECIMIENTO

El presente proyecto es el resultado del trabajo en

conjunto de todos los que formamos parte del

grupo de investigación, por eso es que por medio

estas breves líneas damos nuestro eterno

agradecimiento al Dr. Edmundo Arturo Venegas

Casanova, quien con sus enseñanzas ha hecho

de nosotros personas más críticas y más

objetivas, además ha fomentado en nosotros un

espíritu luchador que no flaquea bajo ninguna

situación

A nuestros queridos familiares y

amigos, un agradecimiento sin precedentes por

mostrarnos que los momentos más esplendidos no solo

se viven dentro de las paredes de un salón de clase, sino

que se pueden vivir a cada segundo y que de esos

momentos siempre se aprenden nuevas cosas que dia a

dia se han de mejorar para poder interiorizarlas y poder

mejorar como personas

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RESUMEN

El objetivo del presente trabajo de investigación fue determinar las

características fisicoquímicas del aceite esencial extraido del pericarpio de

Citrus reticulata L., obtenida del mercado de abastos “La Hermelinda”. El

aceite fue obtenido a través del método de hidrodestilación, obteniendo un

rendimiento del 0,6%. El aceite es de apariencia cristalina, de sabor amargo,

fresco; de consistencia oleosa y untuosa y de olor suigeneris. Además la

densidad obtenida de este aceite fue de 0.88086, el pH fue de 5.00 y el índice

de refracción fue de 1.4700. Este aceite demostró solubilidad en etanol de 96°

GL, en éter de petróleo y en metanol. Además se determinó el porcentaje de

sus componentes hidrocarbonados y oxigenados, los cuales fueron 36,7893% y

5,3641% respectivamente.

Palabras Clave: Citrus reticulata L., Aceite esencial, hicrocarbonado, oxigenado, hidrodestilación, organolétpico.

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ABSTRAC

The objective of this research was to determine the physicochemical

characteristics of oil essential extracted from the pericarp of Citrus reticulata

L., obtained from food market "La Hermelinda".The oil was obtained by the

method of hydrodistillation, obtaining a yield of 0.6%. The oil is crystalline in

appearance, bitter taste, fresh; oily and greasy consistency and fragrance

suigeneris. In addition the density obtained from this oil was 0.88086; the pH

was 5.00 and the refractive index was 1.4700. This oil showed solubility in

ethanol of 96 ° GL, petroleum ether and methanol. Also the percentage of

hydrocarbon and oxygenates compounds were determined, which were

36.7893% and 5.3641% respectively.

Keywords: Citrus reticulate L., oil essential, hydrocarbon, oxygenates,

hydrodistillation, organoleptic characteristics.

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I. INTRODUCCION

Los aceites son las fracciones líquidas volátiles, generalmente

destilables por arrastre con vapor de agua, que contienen las

sustancias responsables del aroma de las plantas y cubren un amplio

espectro de actividades tales como efectos farmacológicos,

antiinflamatorios, antioxidantes y anticancerígenos; otros tienen

características biocidas contra una amplia gama de organismos como

bacterias, hongos, virus, protozoos, insectos y plantas. Por ello, son

importantes en la industria de alimentos (condimentos y saborizantes),

cosmética (perfumes y aromatizantes) y farmacéutica. 1

Los aceites esenciales están formados por una mezcla de sustancias

cuya naturaleza y relación cuantitativa están determinadas por la

especie botánica y factores agrícolas, clima, suelos, época de cosecha,

etc. De forma general, en su composición están presentes compuestos

terpénicos hidrocarburos y compuestos oxigenados del tipo mono y

sesquiterpenos, compuestos alifáticos de bajo peso molecular, alcano,

alcoholes, aldehídos, cetonas, esteres, ácidos, etc.1

Tradicionalmente los aceites esenciales de frutas cítricas han sido

empleados como materias primas para la industria de saborizantes, por

su composición química que aporta el olor y sabor básicos de los

cítricos, aunque carecen de los compuestos químicos presentes en los

jugos y que son responsables de la nota frutal. Los Aceites Esenciales

de los cítricos (mandarina, limón, naranja y lima) tienen una demanda

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alta, principalmente en la industria de alimentos, farmacéutica y

de cosméticos , y son utilizados en la preparación de aromatizantes,

saborizantes, desinfectantes ambientales y en

procesos de síntesis química . Los Aceites Esenciales

de cítricos pueden ser extraídos mediante prensado en frío ,

hidrodestilación , fluidos supercríticos e hidrodifusión con microondas

y gravedad entre otros. Tradicionalmente en algunos países, entre

ellos Colombia, los Aceites Esenciales son extraídos industrialmente

mediante técnicas económicas viables como el prensado en frío o

la destilación por arrastre de vapor. Los aceites presentes en

los sacos o glándulas, localizadas en el epicarpio del fruto, pueden

ser removidos mecánicamente por prensado, obteniéndose una

emulsión la cual es centrifugada hasta separar el aceite

de la fase acuosa. Alternativamente, el Aceite Esencial puede ser

obtenido mediante arrastre con vapor; durante este proceso

las cortezas de los cítricos son expuestas a una corriente de vapor

de agua con una temperatura cercana a los 100 °C que libera y

evapora el aceite esencial. Luego, la mezcla de vapor de agua y el

Aceite Esencial es condensada y separada en un recipiente conocido

como “vaso florentino”. 2,3

En los aceites esenciales de cítricos, los componentes mayoritarios son

los hidrocarburos terpénicos que llegan a constituir con en los casos de

la naranja, toronja, tangerina del 90 al 98 % y los compuestos

oxigenados de 2 a 10 % y en otros cítricos como limón y lima, los

hidrocarburos terpénicos llegan a representar el 75 y 80 por ciento.

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Los compuestos oxigenados son altamente odoríferos y son los

responsables fundamentales del aroma y sabor de los aceites

esenciales, aunque los hidrocarburos terpénicos y sesquiterpenos

también contribuyen en menos proporción al valor aromático. Los

estudios realizados han demostrado que la mezcla de los compuestos

oxigenados y algunos hidrocarburos de bajo punto de ebullición

conforman el aroma único y complejo de los aceites esenciales de cada

especie cítrica, En algunos casos el carácter puede ser reformado por

la incorporación de sustancias aromáticas. La mandarina, familia de las

rutáceas (familia de los cítricos) posee como principales componentes:

el limoneno, ácido metil antranílico y éste de metilo. El aceite esencial

obtenido de la cáscara de esta fruta es de color amarillo dorado de olor

dulce y delicado. Entre sus propiedades generales se encuentra su

capacidad antiviral, calmante, diurético estimulante y revitalizador.

Entre las propiedades terapéuticas que se le atribuyen se pueden

mencionar: Circulatorias: Hipertensión, palpitaciones. De la Cabeza:

Gingivitis. De la Piel: Cicatrices, astringente, estrías, piel grasosa,

regenera la piel. Digestivas: Cólico, congestión del hígado, diarrea,

estreñimiento, flatulencia, náusea, tónico estomacal, tónico hepático.

Musculares: Calambres. Respiratorias: Hipo. Mentales: produce

balance emocional, sensación de felicidad y frescura.2,3

Los cítricos cultivados pertenecen botánicamente al reino Plantae,

subreino Thachebionta, superdivisión Spermatophyta, división

Magnoliophyta, clase Magnoliopsida, a la superorden Rosanae, al

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orden de las Sapindales, familia de las Rutáceas, y al género Citrus4;

existen otros dos géneros que son parte de la familia de las rutáceas,

los géneros Poncirus y Fortunella, a las que también se les denomina

con el término genérico de “Citrus”; el género Citrus, el más importante

de los tres, está compuesto por plantas de mediano a gran desarrollo,

con hojas perennes, aunque en algunas especies son pubescentes,

con bordes serrados, pecíolos más o menos alados o sin alas y

glándulas provistas de aceites aromáticos, flores solitarias o en cimas

terminales o axilares, cuatro o cinco sépalos cortos de color verde y

unidos entre sí, cinco pétalos de coloración blanca o matizados de

púrpura, estambres libres o más o menos soldados entre sí y en

número múltiple al de los pétalos, con anteras alargadas; el ovario es

súpero y gamocarpelar. El fruto es una hespéride con número variable

de semillas. Las características de los géneros Fortunella y Poncirus

son: hojas caducas y trifoliadas (poncirus), hojas aparentemente

simples y persistentes, ovario con 3, 5 ó 6 carpelos (fortunella) 4,5,6.

La mandarina es el fruto del mandarino, árbol de la familia de las

rutáceas muy similar al naranjo, aunque algo más pequeño y delicado.

Los frutos, llamados hespérides, tienen la particularidad de que su

pulpa está formada por numerosas vesículas llenas de jugo. Su

pequeño tamaño, su sabor más aromático y la facilidad de quitar su

piel, hacen de esta fruta una de las más apreciadas.7

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Reino: Plantae

División: Magnoliophyta

Clase: Magnoliopsida

Subclase: Rosidae

Orden: Sapindales

Familia: Rutaceae

Género: Citrus

Especie: reticulata7

El mandarino es un árbol pequeño de 2-6 m de altura con tronco con

frecuencia torcido generalmente sin espinas. Ramillas angulosas Hojas

oblongo-ovales, elípticas o lanceoladas, de 3.5-8cm de longitud y 1.5-4

cm de anchura, con la base y el ápice obtusos. Margen aserrado por

encima de la base. Son de color verde oscuro brillante en el haz y

verde amarillento en el envés, fragantes cuando se las tritura. Peciolos

con ala muy corta. Inflorescencias axilares o terminales con 1-4 flores

pentámeras, de color blanco, olorosas, de 1.5-2.5 cm de diámetro. 18-

23 estambres, casi libres. Frutos de 4-7 cm de longitud y 5-8 cm de

diámetro, globoso-deprimidos. Su color varia de amarillo verdoso al

naranja y rojo anaranjado. La superficie es brillante y está llena de

glándulas oleosas hundidas. La cáscara es delgada, muy fragante,

separándose fácilmente de la pulpa. Pulpa jugosa y dulce, refrescante.

Semillas oblongo-ovoides.8

Los aceites esenciales, según la definición de la Organización de

Internacional de Estandarización (ISO), “es un producto obtenido a

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partir de material vegetal crudo, ya sea por destilación con agua o

vapor o desde el epicarpio de los frutos cítricos por procedimiento

mecánico, o por destilación seca” (ISO/DIS 9235.2) . El término aceite

esencial, proviene de la contracción de la idea Aristotélica “quinta

esencia” de que la materia se compone de cuatro elementos (fuego,

aire, tierra, agua), y el quinta esencia se considera el espíritu o fuerza

vital, el aceite esencial por tanto se considera el espíritu de la planta;

químicamente son producto del metabolismo secundario de las plantas,

las primeras investigaciones sobre los constituyentes de estas se

atribuye al Químico Francés M. J. Dumas (1883), quién analizó algunos

compuestos hidrocarbonados y oxigenados; otro notable investigador

en este campo fue Wallach, asistente de Kekulé, realizó estudios en los

que caracterizó a algunos terpenos como pineno, canfeno, limoneno,

dipenteno, felandreno, terpinoleno, fencheno; años más tarde en 1887

Wallach, sugirió que los terpenos debían estar constituidos por

unidades de isopreno; en 1910 le fue otorgado el Premio Nobel de

química en reconocimiento a su labor en el campo de la química

orgánica y especialmente en el campo de los compuestos alicíclicos.

Investigaciones posteriores hechas por J. Read, W. Hückel, H.

Schmidt, W. Treibs, and V. Prelog, fueron principalmente orientadas a

dilucidar las estructuras estereoquímicas de mentol, carvomentol,

borneol, pinocamfeol, y compuestos cetónicos relacionados, pero, no

fue hasta la introducción de la cromatografía y la Resonancia

Magnética Nuclear (RMN), que muchas estructuras de terpenos fueron

dilucidadas, es así que el crecimiento del conocimiento sobre el campo

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de los aceites esenciales ha sido exponencial desde la última mitad del

siglo XX9,10. Químicamente los aceites esenciales son mezclas

complejas de compuestos terpénicos en mayor porcentaje, aunque

también existen compuestos fenilpropanos en menor porcentaje, por

tanto las principales rutas de biosíntesis son la de ácido mevalónico y

ácido Shikimico. Los Terpenos son compuestos formados por

unidades de isopreno cuya fórmula es (C5H8)n, la síntesis los terpenos

se produce a través de la formación de precursores formados

mediante reacciones catalizadas por enzimas y cofactores como

Adenosintrifosfato (ATP), Nicotinamida adenina di-nucleótido

fosfato(NADP / NADPH), minerales como el magnesio, entre otros; son

los ésteres pirofosfóricos de alcoholes, formados por la adición

secuencial de una unidad en cinco carbonos (C5), el pirofosfato de

isopentenilo (IPP) sobre una molécula inicial, un pirofosfato de prenol

alílico, siendo el primer término de la serie el pirofosfato de dimetilalilo

(DMAPP): geranilpirofosfato (GPP), precursor de los monoterpenos ;

farnesilpirofosfato (FPP), precursor de los sesquiterpenos en C 15;

geranilgeranilpirofosfato (GGPP), precursor de los diterpenos en C2011.

Los Monoterpenos están formados por 2 subunidades de isopreno, los

que pueden ser acíclicos (mirceno, ocimeno), monocíclicos (α y γ-

terpineno, p-cimeno) o bicíclicos (pinenos, α-careno, canfeno,

sabineno). A veces constituyen más del 90% del aceite esencial en el

género Citrus10,11.

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Los sesquiterpenos poseen 3 unidades de isopreno, las variaciones

estructurales en esta serie pueden ser hidrocarburos, alcoholes y

cetonas, el alargamiento de la cadena (FPP) aumenta el número de

ciclaciones posibles, de ahí proviene la gran variedad de estructuras de

este tipo de compuestos, se han descrito más de una centena de

esqueletos diferentes. Los sesquiterpenos se pueden ser hidrocarburos

mono o policíclidos (P-bisaboleno, p-cariofileno, longifoleno), alcoholes

(farnesol, carotol, (3-santalol, patchulol), cetonas (nootkatona,

longipinano-2,7-diona, P-vetivona), aldehidos (sinensales), ésteres

(acetato de cedrilo) 11.

Los diterpenos son otra gran familia de terpenoides que, según las

circunstancias, pueden aparecer en los aceites esenciales junto con los

monoterpenos (C-10) y sesquiterpenos (C-15), son compuestos con 20

átomos de carbono (cuatro unidades de isopreno, C- 20), por lo que su

peso molecular es superior al de monoterpenos y sesquiterpenos, y su

volatilidad menor. Sus características moleculares y estructurales

dificultan la extracción de los mismos en corriente de vapor, método

más usual para la extracción de aceites esenciales, por este motivo no

suelen considerarse componentes del aceite volátil, ya que no todos los

diterpenos se extraen, y los extraídos no lo son al 100%, los diterpenos

que suelen aparecer en las esencias son derivados del labdano y del

esclareol 12.

Los derivados oxigenados de los terpenos se originan debido

reactividad de los cationes intermediarios, esto justifica la existencia de

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numerosas moléculas funcionalizadas como alcoholes: acíclicos

(geraniol, linalol, citronelol), monocíclicos (mentol, α-terpineol, l-

terpinen-4-ol), bicíclicos (borneol, fenchol); aldehidos: generalmente

acíclicos (geranial, neral, citronelal); cetonas: acíclicas (tagetona),

monocíclicas (mentona, isomentona, carvona, pulegona), bicíclicas

(alcanfor, fenchona, tuyonas); ésteres: acíclicos (acetato o propionato

de linalilo, acetato de citronelilo), monocíclicos (acetato de mentilo,

acetato de α-terpinilo), bicíclicos (acetato de isobornilo); éteres: 1 ,8

cineol (llamado también eucaliptol), igualmente éteres cíclicos,

tetrahidrofuránicos o di- y tetrahidropiránicos, que para algunos juegan

un papel principal en el aroma de los frutos (óxidos de linalol);

peróxidos como el ascaridol; fenoles: timol, carvacrol11,13.

Los derivados de fenilpropano son mucho menos frecuentes,

generalmente son alil- y propenilfenoles, a veces de aldehídos,

característicos de determinados aceites esenciales de Apiaceae (anís,

hinojo, perejil) como el anetol, anisaldehído, apiol, metil - chavicol, etc.),

pero también de los de clavo, nuez moscada, estragón, albahaca,

ácoro (cálamo aromático), canelas (eugenol, safrol, asaronas,

cinamaldehído, etc.). Igualmente se pueden encontrar en los aceites

esenciales compuestos en como la vainillina (bastante frecuente) o

como el antranilato de metilo. Las lactonas derivadas de los ácidos

cinámicos al ser las más sencillas son facilmente arrastables por

corriente de vapor de agua10.

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1. HIPÓTESIS:

Implícita

2. OBJETIVOS

2.1. Objetivo General

Se determinó las características fisicoquímicas de los

aceites esenciales del pericarpio de Citrus reticulata L.

2.2. Objetivos Específicos

Se realizó la separación los componentes

hidrocarbonados y oxigenados de los aceites esenciales de

Citrus reticulata L.

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II. MATERIALES Y EQUIPOS

2.2.1. Material Botánico.

La muestra se adquirió en un mercado mayorista La

Hermelinda de la provincia de Trujillo Región La

Libertad.

2.2.2. Equipos:

Balanza analítica “Sartorius”

Equipo de Hidrodestilación de aceites esenciales.

Equipo Clevenger – extracción de aceites volátiles.

2.2.3. Material de vidrio y porcelana:

Pipetas 1 y 5 mL.

Vasos de precipitación de 50 y 100 mL.

Fiolas de 500 y 1000 mL

Peras de decantación de 500 y 1000 mL

2.2.4. Reactivos:

Cloruro de calcio, Merck

Bicarbonato de sodio, Merck

Cloruro de sodio, Merck

Sulfato de sodio, Merck

Agua destilada

2.2.5. Otros

Jeringas de 1 cc,

Viales de 5 cc, color ámbar.

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Algodón hidrofílico.

Termómetro,

Papel filtro

Cocina eléctrica.

Frascos color ámbar.

III. METODOLOGIA DEL TRABAJO14

1) Adquisición:14

10 kg de Mandarina “Citrus reticulata L.” que será

obtenida en el mercado mayorista La Hermelinda de la

provincia de Trujillo Región La Libertad.

2) Preparación de la muestra:

2.1) Selección

La planta recolectada se transportó al laboratorio de

Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de

la Universidad Nacional de Trujillo, donde se eliminarán las

sustancias extrañas presentes en la muestra.14

2.2) Limpieza

Luego de la separación de las sustancias extrañas, se

procedió a extraer el pericarpio del fruto y se lavó con agua

destilada, seguido de una desinfección utilizando hipoclorito

de sodio, a una concentración de 200 ppm.14

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3) Obtención del aceite esencial del pericarpio de Mandarina

“Citrus reticulata L.”

El aceite esencial se extrajo a partir del pericarpio del fruto fresco

por el método de destilación por arrastre de vapor de agua, se

cortó en pequeños trozos y se pesó 100 g luego se colocó en un

balón y se agregó 400 mL de agua destilada y finalmente se

calentó hasta punto de ebullición durante 3 h.

Como producto del proceso de condensación se obtuvo dos fases

una de aceite esencial y otra del agua (hidrolato); posteriormente

se separó el aceite esencial y se deshidrató las impurezas de

agua en el aceite esencial con Na2SO4 anhidro, se filtró y se

guardó en un frasco de vidrio color ámbar (para evitar la

descomposición por la luz), bajo refrigeración a una temperatura

de 4 oC.14

4) Determinación del rendimiento de aceite esencial de

pericarpio de Mandarina “Citrus reticulata”14

A partir de 100 g de pericarpio de Citrus reticulata se obtuvo un

determinado volumen que fue medido mediante el método

gravimetría-volumétrico se determinó el porcentaje de rendimiento

del aceite esencial (%RAE), aplicando la siguiente fórmula:

%RAE =Vol. AE (mL)

Pmuestra (g) 𝑥100

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Dónde:

% RAE: Porcentaje del rendimiento del aceite esencial

Vol. AE: Volumen del aceite esencial obtenido en mililitros.

Pmuestra: Peso de la muestra a destilar en gramos.

5) Parámetros fisicoquímicos del aceite esencial:14

5.1) Determinación de las características organolépticas:

Los caracteres organolépticos incluyen olor, color, sabor y

textura.14

Determinación de olor:

Se tomó una tira de papel secante de aproximadamente 1

cm de ancho por 10cm de largo y se introdujo en un extremo

en la muestra de ensayo. Luego se percibió el olor y se

determinó si corresponde con la característica del

producto.14

Determinación del color:

Se tomó en un tubo de ensayos bien limpio, seco y se llenó

este hasta las tres cuartas partes con la muestra de ensayo

y se observará el color, la transparencia, la presencia de

partículas y la separación en capas.14

Determinación del sabor:

Se tomó una pequeña alícuota y se probó el sabor.14

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Determinación de textura:

Se tomó una alícuota y se experimentó mediante el tacto la

textura y consistencia.14

5.2) Determinación de la densidad relativa:14

Se pesó el picnómetro vacío y seco 25° C y se llenó con la

porción de ensayo, manteniendo la temperatura de 25 °C

(±1°C) durante 15 min y luego se ajustó el líquido al nivel

requerido. Se pesó cuidadosamente el picnómetro con la

porción de ensayo y se repitió la operación con el agua

destilada a 25 °C.14

Expresión del resultado:

La densidad relativa a 25 ° C se calcula mediante la

siguiente fórmula:

D25 =M1 − M

M2 − M

Dónde:

M1: peso del picnómetro con la muestra (g)

M2: peso del picnómetro con el agua (g)

M: peso el picnómetro vacío (g).

5.3) Determinación del índice de refracción: 14

Se colocó sobre el prisma de medición una gota de agua

destilada, utilizando para ello una varilla de vidrio que no

tenga cantos agudos, se ajustó el equipo seleccionando la

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zona del espectro visible que aparece en la línea límite del

campo visual, moviendo el compensador cromático y

colocando la intersección del retículo sobre la línea límite de

los campos claro y oscuro. Después de haber realizado el

ajuste del refractómetro, se colocó una gota de la muestra

de aceite esencial de Citrus reticulata L. sobre el prisma de

medición, se cerró el termo prisma y la luz por medio del

espejo incidió sobre la apertura de entrada del prisma de

medición.14

5.4) Determinación del pH:

Se determinó el pH de la muestra mediante tira reactiva de

pH. Se Introdujo el papel pH en una muestra de aceite

colocada previamente en un tubo de ensayo.14

5.5) Solubilidad:

Se colocó en 7 tubos 0,5 mL de aceite esencial y luego se

agregó a cada tubo por separado 5 mL de agua, 5mL de

etanol 50%, 5 mL de etanol 70%, 5 mL de etanol 80%, 5 mL

de etanol 96%, 5 mL éter de petróleo y 5mL de metanol

respectivamente. Luego se agitó cada tubo y se observó en

cada uno de ellos si se produjo enturbiamiento.14

6) Separación y determinación del porcentaje relativo de

componentes Hidrocarbonados y Oxigenados del aceite

esencial:14

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6.1) Medición de los índices de refracción de los solventes

utilizados para el desarrollo de la cromatografía en

columna.

Medir alícuotas de los solventes que fueron empleados

(éter de petróleo y metanol); y medir su índice de refracción

el siguiente según procedimiento. Se colocó sobre el

prisma de medición una gota de solvente, utilizando para

ello una varilla de vidrio que no tenga cantos agudos, se

ajustó el equipo seleccionando la zona del espectro visible

que aparece en la línea límite del campo visual, moviendo

el compensador cromático y colocando la intersección del

retículo sobre la línea límite de los campos claro y oscuro.

Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se

colocó una gota de la muestra de ensayo sobre el prisma

de medición, se cerró el termo prisma y se enfocó la luz por

medio del espejo, de modo tal que la misma incida sobre la

apertura de entrada del prisma de medición y se procedió

de la misma forma que con el agua.14

6.2) Preparación de la muestra

Se pesó exactamente 1g de aceite esencial en un vaso de

precipitado de capacidad adecuada y se diluyó este en 5mL

de éter de petróleo de baja densidad (35-60°C).

6.3) Montado de cromatografía en columna cromatográfica

Se adaptó en un soporte metálico una columna

cromatografía de vidrio de dimensiones (2 cm de ancho por

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20 cm de largo), posteriormente con ayuda de un embudo

se empaca con sílica gel granulada de 60 mesch hasta las

¾ partes, cuidando no respirar las partículas de SiO2, que

se desprenden en el proceso. Una vez culminado el

empacado se vierte con la ayuda del mismo embudo la

muestra de aceite esencial la muestra de aceite esencial,

repitiendo el proceso con 2 fracciones sucesivas de 5 mL

de éter de petróleo que garanticen el lavado total del vaso

que contiene la muestra.14

6.4) Desarrollo Cromatográfico

Sobre los primeros 10mL de éter de petróleo utilizados para

adsorber la muestra sobre la sílica gel granulada, se

vertieron gradualmente 50mL más del solvente, esperando

su elución total de la columna y colectando la fracción en

un matraz de capacidad adecuada. Enseguida se adicionó

gradualmente 50mL de metanol y se esperó la elución de la

misma.14

6.5) Determinación de los índices de refracción finales

A una alícuota de las fracciones de éter de petróleo y

metanol se midió el índice de refracción.14

7) Determinación de porcentaje de compuestos

hidrocarbonados y oxigenados presentes en el aceite

esencial

Las fracciones de éter de petróleo y metanol eluidas se

vertieron en sendas cápsulas de porcelana de capacidad

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adecuada y posteriormente se vaporizaron los solventes en

baño de agua a 68ºC cuidando la permanencia de las

fracciones de aceite esencial.14

7.1) Plan de recolección de datos:

La información referente a las características fisicoquímicas

del aceite esencial se almacenó en una hoja de datos

diseñada para este fin.14

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IV. RESULTADOS

Tabla 1. Determinación del rendimiento del aceite esencial de

pericarpio de “Citrus reticulata L.”

Porcentaje de Rendimiento del aceite esencial

(%RAE)

Peso de muestra 162 g

Volumen de aceite esencial. 1 mL

% RAE 0.6%

Tabla 2. Características organolépticas del aceite esencial de

pericarpio de “Citrus reticulata”

Características organolépticas

Apariencia: Líquido cristalino

Color: Transparente

Olor: Suigéneris

Sabor: Pujante, no astringente,

amargo, fresco, ligero

Textura: Oleosa y untuosa

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Tabla 3. Características Físico químicas del aceite esencial de

pericarpio de “Citrus reticulata”

Densidad 0.88086

Densidad relativa 0.8684

Ph 5.00

Índice de Refracción 1.4700

Tabla 4: Solubilidad de aceite esencial

Solución Aspecto Miscible

Solubilidad agua Dos fases No

Solubilidad alcohol 50% Turbio No

Solubilidad alcohol 70% Turbio No

Solubilidad alcohol 80% Turbio No

Solubilidad alcohol 96% Límpido Si

Éter de petróleo Límpido Si

Metanol Límpido Si

Tabla 5. Porcentaje de componentes Hidrocarbonados y

Oxigenados

Características Porcentaje (%)

Componentes Hidrocarbonados 36.7893

Componentes Oxigenados 5.3641

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V. DISCUSION

Uno de los cítricos más consumidos por la comunidad trujillana es la

Mandarina “Citrus reticulata L.” , no ha tenido estudios realizados

dentro de nuestra Alma mater, la Universidad Nacional de Trujillo

respecto a las características fisicoquímicos de su aceite esencial

obtenido de su pericarpio.

Los aceites esenciales son compuestos formados por varias

substancias orgánicas volátiles, que pueden ser alcoholes, acetonas,

cetonas, éteres, aldehídos, y que se producen y almacenan en los

canales secretores de las plantas. Normalmente son líquidos a

temperatura ambiente, y por su volatilidad, son extraíbles por

destilación en corriente de vapor de agua, aunque existen otros

métodos. En general son los responsables del olor de las plantas. Los

aceites esenciales están contenidos en semillas, glándulas, pelos

glandulares, sacos, o venas de diversas piezas de la planta. 15, 16

La destilación por arrastre de vapor es un método sencillo y de bajo

costo, pero su inconveniente es que requiere largos periodos de tiempo

y tiene rendimientos bajos en comparación a otros métodos. Recién

destilados son incoloros o ligeramente amarillos. La destilación por

arrastre de vapor de agua en el equipo de Clevenger, nos proporcionó

un rendimiento de 0.6% realizada en invierno, la cual difiere del trabajo

de Adeleke y Oladipupo, quienes manifestaron que la hidrodestilación

les proporcionó un rendimiento promedio entre 0.1% - 0.4% la cual fue

realizada en época de verano en USA. 12, 17,18

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Los aceites esenciales se utilizan para dar sabor y aroma al café, el té,

los vinos y las bebidas alcohólicas. Son los ingredientes básicos en la

industria de los perfumes y se utilizan en jabones, desinfectantes y

productos similares. También tienen importancia en el campo de la

medicina, tanto por su sabor como por su efecto calmante del dolor y

su valor fisiológico. Con respecto a sus características organolépticas,

fueron coincidentes con la Ley mexicana NMX-K-445-1978. La

apariencia del aceite fue de un líquido cristalino y con respecto al olor

de este, fue suigéneris. Con respecto al sabor fue pujante, no

astringente, amargo, fresco y ligero. Con respecto al color, la ley

mexicana manifiesta que el color es amarillento mientras que nuestro

aceite presentó un color cristalino; lo que podría definirse una posible

oxidación o que la condición climática no fue la misma para estos

aceites. Según García, las características organolépticas del aceite

fueron de consistencia aceitosa, color amarillo – dorado, traslúcido,

insoluble en agua, aroma característico de la fruta en su estado

natural.19, 20

Con respecto a la densidad de los aceites esenciales, es inferior a la

del agua (la esencia de sasafrás o de clavo constituyen excepciones).

La densidad relativa obtenida del aceite de Citrus reticulata fue de

0,88086. Con respecto a los resultados de Mujica, su densidad relativa

es 0,90043.21

Nuestro aceite esencial nos proporcionó un pH de 5, el cual en

comparación al pH de Aceite esencial de Citrus sinensis el cual fue

4,3 ±0,01. A pesar de que no tiene relación con el aceite de nuestro

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estudio, se le consideró como referencia por pertenecer a la familia de

nuestra muestra.22

El índice de refracción de nuestro aceite esencial fue de 1.4700, la cual

coincide con el rango proporcionado por las normal COVENIN (1,457-

1,470) pero diferente al otorgado por la ley mexicana NMX-K-445-1978,

la cual manifiesta que el rango es de 1.4730 - 1.4760. Según Mujica, el

índice de refracción del aceite obtenido del pericarpio de Citrus

reticulata L. es 1,4680. Según García, el índice de refracción del aceite

fue de 1,4665. Éstas diferencias son proporcionadas por las

condiciones climáticas en las cuales fueron recolectadas y extraídas el

aceite, sumándose a eso el tipo de suelo y la latitud del sembrío.20, 21.

En la prueba de solubilidad se utilizaron 7 muestras que interactuaron

con 0.5 mL el aceite de Citrus reticulata cada una, disponiendo de 1

muestra de agua, muestras de etanol, muestra de éter de petróleo y

metanol. Tanto aceite y agua son inmiscibles ya que por sus distintas

naturalezas, apolar y polar respectivamente, son inmiscibles. Son

solubles en alcoholes y en disolventes orgánicos habituales, como éter

o cloroformo, y alcohol de alta gradación. Con respecto a las muestras

de etanol, se trabajaron con etanol al 50%, 70%, 80% y 96%, para lo

cual que no se disolvió en ninguno de los tres predecesores al etanol

de 96%, demostrando que al aumentar el grado alcohólico, la

solubilidad del aceite de Citrus reticulata aumenta14.

Los componentes mayoritarios de los aceites esenciales de cítricos son

los hidrocarburos terpénicos que constituyen del 90 al 95 % y los

compuestos oxigenados (2 a 6 % como máximo), así lo expresa Bauer

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en su trabajo. Nuestros resultados manifiestan que los componentes

hidrocarbonados de nuestro aceite esencial alcanza 36.7893%, lo cual

a comparación de las estadísticas mostradas no coindice; por otra

parte los compuestos oxigenados alcanza 5.3641% lo cual si coincide

con las estadísticas encontradas en el trabajo antes mencionados.23

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VI. CONCLUSIONES

Se realizó la extracción del aceite esencial del pericarpio de

Citrus reticulata L.

Se encontraron las siguientes características fisicoquímicas de

los aceites esenciales del pericarpio de Citrus reticulata L.,

densidad 0.88086, densidad relativa 0.8684, pH 5.00, índice de

refracción, 1.4700, también se realizó la separación de los

componentes hidrocarbonados y oxigenados de los aceites

esenciales de Citrus reticulata L. siendo el porcentaje relativo de

sus componentes hidrocarbonados fue 36.7896% y oxigenados

5.3641 %.

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VII. RECOMENDACIONES

Se recomienda estudios posteriores para la

caracterización de los componentes del aceite esencial de

Citrus reticulata, usando Cromatografía de Gases y

espectroscopia de masas; así como también puede realizarse

un estudio microbiológico.

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