7/21/2019 biorep 3

1/16

PENANGANAN DAN PENILAIAN GAMET BETINA

Oleh :

Nama : Seruni Tyas Khairunissa

NIM : B1J01107

Kel!m"!# : $

LAPO%AN P%AKTIK&M BIOLOGI %EP%OD&KSI

KEMENTE%IAN PENDIDIKAN DAN KEB&DA'AAN

&NI(E%SITAS JENDE%AL SOEDI%MAN

)AK&LTAS BIOLOGI

P&%*OKE%TO

7/21/2019 biorep 3

2/16

+01$I, PENDA-&L&AN

A, La.ar Bela#an/

Nilem (Osteochilus hasselti) merupakan ikan endemik (asli) Indonesia

yang hidup di sungai-sungai dan rawa-rawa. Namun, sejalan dengan

perkembangan, ikan tersebut kemudian dibudidayakan di kolam-kolam untuk

tujuan komersial. Secara nasional keberadaannya kurang begitu populer kecuali di

Jawa arat. !ampir "# $ produksi nasional ikan nilem berasal dari Jawa arat.

Ikan tawes (Barbonymus gonionotus) adalah ikan sungai yang biasa dimakanorang di daerah %sia &enggara daratan maupun kepulauan. Ikan air tawar

memiliki ukuran mencapai '# cm dan menyukai daerah dasar sungai mengalir

(benthopelagic, potamodromous) dengan kedalaman m. Suhu air yang ideal

untuk ikan ini **-*" +.

amet adalah sel kelamin yang berperan menentukan kualitas indiidu

masa datang. amet betina dibentuk dalam proses oogenesis dalam oarium dan

dalam proses tersebut ada /ase gamet dikeluarkan dari oarium (oulasi) sebelum

selesai penuh oogenesis selesai. 0i saluran reproduksi betina, gamet betina dicek

apakah dalam /ase siap untuk dibuahkan atau tidak. erbagai indikator dan

parameter digunakan untuk mengetahui tingkat kematangan gamet betina atau

oosit untuk persiapan /ertilisasi. Indikator yang digunakan dapat berupa indikator

mor/ologi, misalnya ada tidaknya struktur germinal vesikel breakdown (1)

atau struktur semacam kantung yang pecah. Selain itu, dapat juga menggunakan

parameter diameter telur.

amet betina sebagian besar dikeluarkan pada /ase oosit sekunder dan

siap dibuahi, meskipun ada juga yang dioulasikan pada saat oosit primer. 0ari

oosit primer ke oosit sekunder berlangsung proses yang disebut itelogenesis.

2roses ini dapat dideteksi secara mor/ologi karena ukurannya menjadi lebih besar,

sehingga bisa diukur dari paremeter diameter telur untuk tingkat pemasakan telur.

3kuran telur yang menjadi lebih besar biasa karena penambahan itelin atau juga

bisa disebabkan penambahan air atau proses hidrasi telur sebagai langkah persiapn

telur siap untuk di/ertilisasi spermato4oa konterpartnya.

http://id.wikipedia.org/wiki/Asia_Tenggarahttp://id.wikipedia.org/wiki/Asia_Tenggarahttp://id.wikipedia.org/wiki/Asia_Tenggarahttp://id.wikipedia.org/wiki/Asia_Tenggara

7/21/2019 biorep 3

3/16

B, Tuuan

&ujuan praktikum reproduksi penanganan gamet betina adalah

berpengalaman sehingga terampil menangani gamet betina yang dilatihkan, serta

dapat menganalisis tingkat kematangan gamet dalam hal persiapan untuk

/ertilisasi.

7/21/2019 biorep 3

4/16

II, MATE%I DAN METODE

A, Ma.eri

%lat-alat yang digunakan dalam praktikum ini antara lain kateter, spuit

tanpa jarum, object glass,pipet, cawan petri, mikroskop dan mikrometer.

ahan-bahan yang digunakan dalam praktikum kali ini antar lain

medium untuk gamet yang terdiri dari larutan ringer ikan atau /isiologis

danmedium untuk gamet (5#$ larutan sera methanol 6 7#$ /ormaldehid 6 #$

asam asetat), induk ikan betina yang sudah matang gonad.

B, Me.!e

A, Penan/anan Game. Be.ina

. 0ipastikan alat-alat sudah siap yaitu untuk pengambilan dan pengamatan

gamet betina yaitu kateter, mikroskop dan obyek glass

*. 0ipegang induk betina ikan dengan cara yang benar

7. 0iamati bagian entral dekat sirip ekor lubang-lubang pengeluaran pada ikan

betina, kenali dengan baik

'. 0engan hati-hati, dimasukkan satu ujung kateter ke dalam lubang pengeluaran

telur, kemudian dengan ujung satunya lagi di mulut, disedot telur sehingga

telur masuk kateter

. 0ikeluarkan kateter dengan hati-hati dari tubuh induk dan dipindahkan telur

dari dalam kateter dengan meniupkan ke dalam obyek glass atau ke dalam

wadah yang telah disediakan

5. 0iamati dan diukur diameter gamet dengan menggunakan mikroskop

8. 0icatat jumlah telur yang dapat dikoleksi dari kateter

". 0icatat dan dilaporkan ukuran gamet telur yang diperoleh dari pengukuran

menggunakan mikroskop dengan mikrometer

7/21/2019 biorep 3

5/16

9. 0ilaporkan hasil pengamatan dan dilengkapi dengan gambar gamet. 0apat

berupa sketsa gambar gamet menggambarkan ukuran gamet diukur dari bagian

mana sampai dengan titik:bagian mana dan berapa hasil pengukurannya.

7/21/2019 biorep 3

6/16

III, -ASIL DAN PEMBA-ASAN

1, -asil

ambar . ;osit yang diberi larutan sera

ambar *. ;osit yang tidak diberi larutan sera

ambar 7. ;osit yang diberi larutan sera secara mikroskopis

7/21/2019 biorep 3

7/16

B, Pem2ahasan

erdasarkan hasil yang didapatkan dari praktikum pematangan gamet

betina, oosit yang diberi larutan sera akan lebih menggumpal atau memusat jika

diletakkan pada object glass.erbeda dengan oosit tanpa larutan sera, yang mana

oosit akan menyebar pada object glass. !al tersebut sesusai dengan penyataan

edua adalah /ase itelogenesis,

ketika terjadi akumulasi material kuning telur yang disintesis oleh hati, kemudian

dibebaskan ke darah dan dibawa ke dalam oosit secara mikropinositosis.

2eningkatan ukuran indeks gonad somatik atau perkembangan oarium

disebabkan oleh perkembangan stadia oosit. 2ada saat perkembangan oosit terjadi

perubahan mor/ologis yang mencirikan stadianya (!artanti dan Nurjanah, *#7).

?enurut Nagahama (9") stadium oosit dapat dicirikan berdasarkan olume

sitoplasma, penampilan nukleus dan nukleolus, serta keberadaan butiran kuning

telur. erdasarkan kriteria ini, oosit dapat diklasi/ikasikan ke dalam beberapakelas. ;osit dibagi ke dalam " kelas, yaitu stadia kromatin-nukleolus,

perinukleolus (yang terdiri atas awal dan akhir nukleolus), stadium oil drop

stadiumyolkprimer, sekunder, tertier, dan stadium matang.

Siregar (99) menyatakan bahwa induk yang pantas dipijahkan adalah

induk yang telah melewati /ase pembentukan kuning telur (/ase itellogenesis)

dan masuk ke /ase dorman. @ase pembentukan kuning telur dimulai sejak

terjadinya penumpukan bahan-bahan kuning telur daAam sel telur dan berakhir

7/21/2019 biorep 3

8/16

setelah sel telur mencapai ukuran tertentu atau nukleolus tertarik ke tengah

nukleus. Setelah /ase pembentukan kuning telur berakhir, sel telur tidak

mengalami perubahan bentuk selama beberapa saat, tahap ini disebut /ase istirahat

(dorman), apabila rangsangan diberikan pada saat ini, maka akan menyebabkan

terjadinya migrasi inti ke peri/er, kemudian inti pecah atau melebur pada saat

pematangan oosit, oulasi (pecahnya /olikel), dan oiposisi, bilamana kondisi

lingkungan tidak cocok dan rangsangan tidak tersedia maka telur dorman tersebut

akan mengalami degenerasi (rusak) lalu diserap kembali oleh lapisan /olikel

melalui atresia. @aktor-/aktor eksternal lain yang menyebabkan terjadinya atresia

adalah ketersediaan pakan, sedangkan /aktor internal adalah umur telur. 3kuran

sel telur ada hubungannya dengan /ekunditas. ?akin banyak telur yang dipijahkan

ukuran telurnya makin kecil, misalnya ikan cod (diameternya -,8mm)

produksinya # juta telur (!artanti dan Nurjanah, *#7).

Sintesis itelogenin (prekursor kuning telur) di dalam hati disebut

itelogenesis. 1itelogenin diangkut dalam darah menuju oosit, lalu diserap secara

selekti/ dan disimpan sebagai kuning telur. 1itelogenin ini berupa

gliko/os/oprotein yang mengandung kira-kira *#$ lemak, terutama /os/olipid,

trigliserida, lipoprotein, dan kolesterol. erat molekul itelogenin untuk beberapa

jenis ikan diketahui antara '#- **# k0a. 2roses oogenesis pada teleost terdiri

atas dua /ase, yaitu pertumbuhan oosit (itelogenesis) dan pematangan oosit.

1itelogenesis merupakan aspek penting dalam pertumbuhan oosit yang meliputi

rangkaian proses () adanya sirkulasi estrogen (estradiol-8B) dalam darah

menggertak hati untuk mensintesis dan mensekresikan itelogenin yang

merupakan prekursor protein kuning telurC (*) itelogenin diedarkan menuju

lapisan permukaan oosit yang sedang tumbuhC (7) secara selekti/, itelogenin akanditangkap oleh reseptor dalam endositosis, dan (') terjadi translokasi sitoplasma

membentuk badan kuning telur bersamaan dengan pembelahan proteolitik dari

itelogenin menjadi subunit lipoprotein kuning telur, lipoitelin, dan /ositin.

%danya itelogenin menunjukkan terjadinya akumulasi lipoprotein kuning telur di

dalam oosit. 2ada beberapa jenis ikan selama pertumbuhan oosit terjadi

peningkatan Indeks Somatik onad (IS) sampai *#$ atau lebih (!artanti dan

Nurjanah, *#7).

7/21/2019 biorep 3

9/16

Salah satu proses reproduksi yang sangat plastik itellogenesis, proses

produksi kuning telur di dalam tubuh induk yang menyediakan sumber nutrisi

utama bagi embrio untuk berkembang. en-gen 1itellogenin terdapat pada

betinaa dewasa dalam jaringan khusus untuk produksi kuning, seperti lemak tubuh

serangga dan hati burung. 1itelogenesis telah dipelajari dengan baik pada burung

dan serangga dan diatur hormon dalam menanggapi kondisi lingkungan.

1itellogenesis diinduksi oleh koordinat aksi *#-hydroxyecdysone dan hormon

juenil (J!) pada serangga. Serangga mengatur produksi J! dan bergantian

denagan protein sperti sinyal insulin sinyal (IIS). &elur di 0rosophila mutan

reseptor insulin gagal menjadi itellogenik dan /enotip ini dapat diselamatkan

oleh metopren, sebuah analog J!. 2ada nyamuk %edes aegypti, ekspresi gen

itellogenin yang sinergis ditingkatkan dengan ecdysone dansignaling insuline,

melalui penginderaan protein nutrisi berupa &;D (0epina et al.,*#).

2embesaran oosit disebabkan terutama oleh penimbunan kuning telur.

Seperti pada kebanyakan ikan, kuning telur merupakan komponen penting oosit

ikan &eleostei. %da tiga tipe material kuning telur pada ikan &eleosteiE butiran

kecil minyak, gelembung kuning telur (yolk vesicle) dan butiran kuning telur (yolk

globule). Secara umum, butiran kecil minyak yang kita kenal dengan lipid yang

berantai panjang (asam lemak tidak jenuh) pertama kali muncul di daerah

perinuklear dan kemudian berpindah ke peri/eri (tepi sel) pada tahap selanjutnya.

3rutan kemunculan material kuning telur berariasi antarspesies. 2ada rainbow

trout, butiran kecil muncul segera setelah dimulainya pembentukan gelembung

kuning telur (Nagahama, 9").

@enomena penimbunan material kuning telur oleh oosit ikan dibagi

menjadi dua /ase, yakni sintesis kuning telur di dalam oosit atau vitelogenesisendogen dan penimbunan prekursor (bahan pembentuk) kuning telur yang

disintesis di luar oosit atau vitelogenesis eksogen . elembung kuning telur

positi/-2%S (mukopolisakarida atau glikoprotein) umumnya merupakan struktur

yang pertama muncul dalam sitoplasma oosit selama pertumbuhan sekunder oosit,

dan pertama kali muncul di 4ona terluar dan 4ona midkortikal pada oosit (!artanti

dan Nurjanah, *#7).

7/21/2019 biorep 3

10/16

>etika itelogenesis berlangsung, sebagian besar sitoplasma telur matang

ditempati oleh banyak gelembung kuning telur yang padat dengan asam lemak

dan dikelilingi oleh selapis membran pembatas. Selama tahap akhir itelogenesis,

globula kuning telur beberapa ikan &eleostei bergabung satu sama lain

membentuk masa tunggal kuning telur (!artanti dan Nurjanah, *#7).

2erkembangan gonad ikan betina terdiri atas beberapa tingkat yang dapat

didasarkan atas pengamatan secara mikroskopis dan makroskopis. Secara

mikroskopis perkembangan telur diamati untuk menilai perkembangan oarium

antara lain tebal dinding indung telur, keadaan pembuluh darah, inti butiran

minyak, dan kuning telur. Secara makroskopis perkembangan oarium ditentukan

dengan mengamati warna indung telur, ukuran butiran telur, dan olume rongga

perut ikan (!artanti dan Nurjanah, *#7).

2ada oarium ikan terdapat bakal sel telur yang dilindungi suatu jaringan

pengikat yang bagian luarnya dilapisi peritoneum dan bagian dalamnya dilapisi

epitelium. Sebagian dari sel-sel epitelium akan membesar dan berisi nukleus, yang

kemudian butiran ini kelak akan menjadi telur. Selama perkembangannya, ukuran

oositakan berariasi. 2ada tahap perkembangan awal, oogonia terlihat masih

sangat kecil, berbentuk bulat dengan inti sel yang sangat besar dibandingkan

dengan sitoplasmanya. ;ogonia terlihat berkelompok tapi kadang-kadang ada

juga yang berbentuk tunggal. Sementara itu oogonia terus membelah diri dengan

cara mitosis. 2ada ikan yang mempunyai siklus reproduksi tahunan atau tengah

tahunan akan terlihat adanya puncak-puncak pembelahan oogonia. 2ada ikan yang

memijah sepanjang tahun, perbanyakan oogonia akan terus menerus sepanjang

tahun (!artanti dan Nurjanah, *#7).

&rans/ormasi oogonia menjadi oosit primer banyak terjadi pada tahappertumbuhan yang ditandai dengan munculnya kromosom. Segera setelah itu,

/olikel berubah bentuk, dari semula yang berbentuk skuamosa menjadi berbentuk

kapsul oosit. Inti sel terletak pada bagian sentral dibungkus oleh lapisan

sitoplasma yang tipis. 2ada perkembangan selanjutnya, oosit membentuk lapisan

korion, membran, granulosa, membran, dan teka. Juga butir-butir lemak mulai

terlihat ditumpuk pada sitoplasma dan bersamaan dengan itu muncul cortical

alveoli. utir-butir lemak ini selanjutnya akan bertambah besar pada itelogenesis

7/21/2019 biorep 3

11/16

yang diawali dengan pembentukan akuola-akuola yang kemudian diikuti

dengan munculnya globula kuning telur, bersamaan dengan itu oosit membengkak

secara menyolok. >uning telur pada ikan terdiri atas /os/oprotein dan lipoprotein

yang dihasilkan oleh hati kemudian disalurkan ke dalam peredaran darah (!artanti

dan Nurjanah, *#7).

2erubahan mor/ologi ;osit meliputi germinal esicle (1), germinal

esiclebreakdown 10), meta/ase I, dan?eta/ase II. 2ada tahap 1 ooplasma

dipisahkan oleh membran inti yangjelas, perkembanan meta/ase I kromosom

berjajar dibidang eFuator siap untuk membelah dan kromosom memisah kearah

kutub G kutub yangberlawanan yang disebut ana/ase I, telo/ase I, setelah itu

kromosommengalami meta/ase II saat inikromosom berjajar pada bidang eFuator

dan terbentuklahfirst polar body. Sedangkan waktu pengeluaran telur (stripping)

adalah kondisi telur yang sudah mengalami oulasi yang biasanya ditandai oleh

kerusakan esikula germinal (germinal esicle breakdown, 10)(Hada et al.,

998). 2roses pematangan oosit(oum) secara in vitro ditandai dengan adanya

cumulus oophorus yang mengelilingioosit (oto et al., 99).

2erbedaan ukuran ikan pertama kali matang gonad ini dipengaruhi beberapa

/aktor, yaitu /aktor luar dan /aktor dalam. eberapa /aktor yang diduga dapat

menjadi penyebab perbedaan pencapaian ukuran pertama kali matang gonad,

seperti si/at genetik populasi, perbedaan letak wilayah (latitude), kualitas perairan,

dan besarnya tekanan penangkapan. Selain itu kematangan gonad berhubungan

dengan pertumbuhan dan /aktor lingkungan terutama ketersediaan makanan baik

secara kualitas maupun kuantitas (&otem et al., 997). ?urua (*##7) menyatakan

/aktor yang mempengaruhi pertama kali ikan matang gonad ada dua yaitu /aktor

luar seperti suhu dan arus serta /aktor dari dalam seperti umur, jenis kelamin,si/at-si/at /isologis ikan seperti kemampuan beradaptasi dengan lingkungan serta

ukuran.

1itelogenin adalah bakal kuning telur yang merupakan komponen utama

dari oosit yang sedang tumbuh (&yler, 99). 2ada saat proses itelogenesis

berlangsung, granula kuning telur bertambah dalam jumlah dan ukurannya

sehingga olume oosit membesar dan akhirnya akan menyebabkan meningkatnya

nilai indeks gonad somatik (Haron, 99).

7/21/2019 biorep 3

12/16

Taha" I : A3al "er.um2uhan 4Tia# Masa#5

Secara mor/ologi oarium berbentuk memanjang. 3kuran sel telur relatie

kecil dan belum terlihat jelas oleh mata telanjang. Secara histologis, oarium

didominasi oleh oogonium dan dijumpai telah adanya oosit primer hasil dari

perkembangan oogonium. elum dilapisi selaput /olikel. Inti sel (nukleus) terletak

di tengah dan bentuknya bulat serta dikelilingi oleh sitoplasma.

Taha" II : Ber#em2an/ 4Tia# Masa#5

Secara mor/ologi, oarium berwarna merah jambu, pembuluh darah masih

belum terlihat jelas. ;arium berwarna lebih kuning dari pada &> I. Sel telur

masih belum terlihat jelas oleh mata telanjang. Secara histologis, ;arium

didominasi oleh oosit primer, masih ditemukan oogonium, terlihat adanya lapisan

/olikel. &ahap awal terjadinya proses itellogenesis.

Taha" III : De3asa 4-am"ir Masa#5

Secara mor/ologi, oarium berwarna merah jambu sampai kekuningan, butir

telur sudah dapat dilihat oleh mata telanjang namun diameternya lebih kecil dan

pembuluh darah mulai terlihat. Secara histologis, oogonium dan oosit sekunder

masih ditemukan dan oosit sekunder berkembang menjadi oosit. utir kuning

telur (yolk egg) dan akuola minyak terlihat jelas yang menyebar dari sekitar

nukleus yang mengarah ke tepi.

Taha" I( : Ma.an/ 4Masa#5

Secara mor/ologi, oarium makin membesar berwarna kuning

kemerahmerahan, pembuluh darah jelas, telur terlihat jelas, keadaan telur masak

berukuran besar berwarna terang. Secara histologis, ;arium didominasi oleh

oum, inti sel terlihat jelas, butir minyak tersebar di sekitar inti sel. &> 7 dapat

terlihat bahwa masih terdapat &> dan *. Sama halnya dengan &> 7, pada&> ' masih terlihat &> * dan 7. 2erkembangan gonad betina secara histologis

bahwa ikan tetet (ohnius belangerii) memiliki tipe perkembangan oosit group

synchronous. !roup synchronous yaitu semua oosit yang ada di dalam oarium

mengalami tingkat kematangan yang berbeda (?urua, *##7). Selain itu

berdasarkan hasil pengamatan diketahui bahwa, ikan mengeluarkan telur sebagian

(partial spawner) sewaktu memijah dan akan dikeluakan lagi pada musim

pemijahan selanjutnya.

7/21/2019 biorep 3

13/16

&elur ikan yang siap di/ertilisasi yaitu warnanya yang coklat, oosit mencapai

10, dan oosit sekunder yang dikeluarkan saat stripping. erdasarkan

karakteristik oarium, maka tingkat kematangan gonad betina dibagi menjadi tiga

stadium, yaituE stadium I yang merupakan stadium awal pembentukan oarium,

jumlah oosit yang berada di dalam oarium masih sangat sedikit. ;arium

didominasi oleh oosit I dan oosit II. Selanjutnya stadium II ditandai dengan

oarium yang didominasi oleh oosit III dan oosit I1. Jumlah telur yang ditemukan

pada stadium ini sudah sangat banyak dan telur telah siap untuk dipijahkan. 2ada

stadium III, telur pada oarium telah dipijahkan. ;arium didominasi oleh ruang

kosong yang telah ditinggalkan oleh telur. >etika oosit mulai matang, membran

itelin atau lapisan kortikal terbentuk di bawah membran plasma. oositnya dapat

dikatakan sudah matang jika dikelilingi tiga sel epitelium /ollicular yang tebal

(!ope, 9"8).

>ematangan telur ditandai dengan terjadinya !erminal "esicle #igration

(?1) yaitu bermigrasinya germinal esikula kebagian tepi. !al ini terjadi

karena adanya rangsangan steroid yaitu #aturation $nduced %teroid (?IS)

Sedangkan telur yang belum mengalami kematangan menunjukkan telur dalam

/ase istirahat (dorman). 2ada /ase ini telur tidak mengalami perubahan beberapa

saat. %pabila rangsangan diberikan pada saat ini maka akan menyebabkan

terjadinya migrasi inti ke peri/er, inti pecah atau lebur yaitu pematangan oosit

pada peri/er (am, 9").

ontoh penerapan dalam bidang perikanan mengenai pematangan gamet

betina yaitu dalam mengetahui pengaruh kombinasi penyuntikan oaprim dan

2@* terhadap daya rangsang oulasi (waktu laten dan jumlah telur oulasi)

serta kualitas telur (pertambahan diameter telur dan kematangan telur). %garmemberikan in/ormasi tentang perlakuan kombinasi penyuntikan oaprim dan

2@* yang terbaik terhadap daya rangsang oulasi dan kualitas telur ikan

(!ardy et al., *#*).

7/21/2019 biorep 3

14/16

I(, KESIMP&LAN DAN SA%AN

A, Kesim"ulan

erdasarkan hasil dan pembahasan dari praktikum penanganan gamet

betina, dapat diambil disimpulkanE

. ;osit yang diberi larutan sera akan lebih menggumpal atau

memusat jika diletakkan pada object glasssedangkan oosit tanpa larutan sera

akan menyebar pada object glass.

*. Sel telur yang siap di/ertilisasi adalah oosit sekunder.

B, Saran

erdasarkan hasil praktikum, sebaiknya perlakuan saat pengambilan sel

telur lebih hati-hati.

7/21/2019 biorep 3

15/16

DA)TA% %E)E%ENSI

, Hasu4uki &, Katani @, and Shiniciro &, 99. $n vitroevelopment of

Bovine Oocytes 'ollected Ovaries of $ndividual 'ows fter *ertili+ation.

%nimal Deproduction Science 75E#-7.

!artanti, 3mi Ninik, Nurjanah. *#7. 2emacu 2ematangan onad Induk Ikan

Nilem 0engan &eknik Induksi !ormon.urnal OseatekNo..

!ardy, @ikri ?, Nuraini, Sukendi. *#*. &he apiek (&untius schwane Blleker) dengan

2usat 2enelitian 3niersitas Diau 2ekanbaru.

&otem, S.?., .! . 2awshe, and .2 . Singh. 997 . In itro maturation and

/ertili4ation o/ bu//alo oocytes (Bubalus bubalis) E

7/21/2019 biorep 3

16/16

Hada, . D., >atiya, 0. >., !aucan, ?. D., and ?adam ?I, 998, 'hromosome

'onfiguration uring $n "itro in !oat, %heep, and Buffalo Oocyte.

&heriogenology '8 E 9'8-9.

Haron, M. 99.