Buenas Prácticas de laboratorios demicrobiología

Buenas Prácticas de laboratorios demicrobiología

según Disposición ANMAT N°3602/2018

Disertante: Inés Rizzo email: irizzo@anmat.gov.ar

DISPOSICIÓN ANMAT N° 3602/18(Texto ordenado por Disposición 3827/18 )

Fiscalización de los establecimientos elaboradores, importadoresy distribuidores de especialidades medicinales:

En aspectos relativos a condiciones de funcionamiento ysistemas de control de calidad utilizados por losestablecimientos alcanzados por la normativa

FabricaciónFabricación• Todas las operaciones de adquisición de materiales y

productos, producción, acondicionamiento, control decalidad, liberación, almacenamiento, distribución demedicamentos y los controles correspondientes a dichasoperaciones

DISPOSICIÓN ANMAT N° 3602/18(Texto ordenado por Disposición 3827/18 )

Fiscalización de los establecimientos elaboradores, importadoresy distribuidores de especialidades medicinales:

En aspectos relativos a condiciones de funcionamiento ysistemas de control de calidad utilizados por losestablecimientos alcanzados por la normativa

FabricaciónFabricación• Todas las operaciones de adquisición de materiales y

productos, producción, acondicionamiento, control decalidad, liberación, almacenamiento, distribución demedicamentos y los controles correspondientes a dichasoperaciones

CONTROL DE CALIDAD- Capítulo 6 –Parte A Sistema de Calidad Farmacéutico: las operaciones de producción

y control se describen claramente y adoptan las BPM y BuenaBuenaprácticasprácticas dede controlcontrol dede calidadcalidad (BPL)(BPL); (ítem 1.4 .iv).

Los laboratorios destinados a control de calidad deberán cumplir loslineamientoslineamientos dede ISOISO 1702517025::20172017 ((General requirements for thecompetence of testing and calibration laboratories)

66..11..-- CadaCada titulartitular de una autorización de funcionamientorelacionada con medicamentos debedebe tenertener un departamento decontrol de calidad. (ítems 1.9)

oContará con los recursos adecuados para garantizar que todas lasactividades de control de calidad se realizan de formaforma efectivaefectiva yyconfiableconfiable

CONTROL DE CALIDAD- Capítulo 6 –Parte A Sistema de Calidad Farmacéutico: las operaciones de producción

y control se describen claramente y adoptan las BPM y BuenaBuenaprácticasprácticas dede controlcontrol dede calidadcalidad (BPL)(BPL); (ítem 1.4 .iv).

Los laboratorios destinados a control de calidad deberán cumplir loslineamientoslineamientos dede ISOISO 1702517025::20172017 ((General requirements for thecompetence of testing and calibration laboratories)

66..11..-- CadaCada titulartitular de una autorización de funcionamientorelacionada con medicamentos debedebe tenertener un departamento decontrol de calidad. (ítems 1.9)

oContará con los recursos adecuados para garantizar que todas lasactividades de control de calidad se realizan de formaforma efectivaefectiva yyconfiableconfiable

LABORATORIOS DE CONTROL DE CALIDAD

• 3.26 Los laboratorios de Control de Calidad deben estar separadosseparados de laszonas de producción. Esto es particularmente importante en el caso delaboratorios de control de productos biológicos, microbiológicos yradioisótopos, que también deben estar separados entre sí.

• 3.27 Los laboratorios de control deben estar diseñadosdiseñados de forma adecuadaa las operaciones que deban llevarse a cabo en los mismos. Debe habersuficiente espacio para evitar confusiones y contaminación cruzada.

• 3.29 Son necesarios requisitos especiales en los laboratorios que manipulensustancias especiales, como muestras biológicas, microbiológicasmicrobiológicas oradiactivas. Deben estar provistos de unidadesunidades manejadorasmanejadoras dede aireaireseparadas.

• 3.26 Los laboratorios de Control de Calidad deben estar separadosseparados de laszonas de producción. Esto es particularmente importante en el caso delaboratorios de control de productos biológicos, microbiológicos yradioisótopos, que también deben estar separados entre sí.

• 3.27 Los laboratorios de control deben estar diseñadosdiseñados de forma adecuadaa las operaciones que deban llevarse a cabo en los mismos. Debe habersuficiente espacio para evitar confusiones y contaminación cruzada.

• 3.29 Son necesarios requisitos especiales en los laboratorios que manipulensustancias especiales, como muestras biológicas, microbiológicasmicrobiológicas oradiactivas. Deben estar provistos de unidadesunidades manejadorasmanejadoras dede aireaireseparadas.

CONTROL DE CALIDAD- Capítulo 6 66..55..-- Los equiposequipos dede laboratoriolaboratorio no deben moverse entre zonas de alto riesgo

para evitar la contaminación cruzada accidental. En particular, el laboratorio demicrobiología debe organizarse de modo que se minimicenminimicen loslos riesgosriesgos dedecontaminacióncontaminación cruzadacruzada

66..2121..-- Los reactivosreactivos de laboratorio, las solucionessoluciones, los patronespatrones dede referenciareferenciay los mediosmedios dede cultivocultivo se rotularán con la fecha de preparación, de apertura,fecha de caducidad y la firma de la persona que los haya preparado.

6.12.- El planplan dede muestreomuestreo usado debe justificarse apropiadamente yfundamentarse en una aproximación basada en la gestión de riesgos

6.13.- Las muestrasmuestras deben manejarse de manera que se minimicen los riesgosde confusión y para protegerlas de condiciones de almacenamiento adversas

4.26. - Debe disponerse de POEsPOEs sobre los ensayosensayos de los materiales yproductos en las diferentes fases de la fabricación, describiendo los métodos yequipos que deben utilizarse

CONTROL DE CALIDAD- Capítulo 6 66..55..-- Los equiposequipos dede laboratoriolaboratorio no deben moverse entre zonas de alto riesgo

para evitar la contaminación cruzada accidental. En particular, el laboratorio demicrobiología debe organizarse de modo que se minimicenminimicen loslos riesgosriesgos dedecontaminacióncontaminación cruzadacruzada

66..2121..-- Los reactivosreactivos de laboratorio, las solucionessoluciones, los patronespatrones dede referenciareferenciay los mediosmedios dede cultivocultivo se rotularán con la fecha de preparación, de apertura,fecha de caducidad y la firma de la persona que los haya preparado.

6.12.- El planplan dede muestreomuestreo usado debe justificarse apropiadamente yfundamentarse en una aproximación basada en la gestión de riesgos

6.13.- Las muestrasmuestras deben manejarse de manera que se minimicen los riesgosde confusión y para protegerlas de condiciones de almacenamiento adversas

4.26. - Debe disponerse de POEsPOEs sobre los ensayosensayos de los materiales yproductos en las diferentes fases de la fabricación, describiendo los métodos yequipos que deben utilizarse

LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA

EsEs importanteimportante mantenermantener enen perspectivaperspectiva lala naturalezanaturaleza dede loslosmicroorganismosmicroorganismos,, lala potencialpotencial fuentefuente dede contaminacióncontaminación cruzadacruzada,, lalanaturalezanaturaleza dede loslos materialesmateriales aa analizaranalizar,, asiasi comocomo loslos requerimientosrequerimientosregualatoriosregualatorios enen lala industriaindustria farmacéuticafarmacéutica..

LaLa generacióngeneración,, registroregistro yy trazabilidadtrazabilidad dede datosdatos eses lala llavellave parapara garantizargarantizar lalaseguridadseguridad dede loslos resultadosresultados..

Test de esterilidad

Detección, aislamiento, enumeración e identificación demicroorganismos (bacteria, hongos y levaduras)

Control de endotoxinas bacterianas en diferentesmateriales (por ejemplo materia prima, agua, productos)

Control de productos, superficies, vestimenta y medioambiente

Ensayos con microorganismos como parte del sistemade control de medios y de métodos

LABORATORIOS DE MICROBIOLOGIA

EsEs importanteimportante mantenermantener enen perspectivaperspectiva lala naturalezanaturaleza dede loslosmicroorganismosmicroorganismos,, lala potencialpotencial fuentefuente dede contaminacióncontaminación cruzadacruzada,, lalanaturalezanaturaleza dede loslos materialesmateriales aa analizaranalizar,, asiasi comocomo loslos requerimientosrequerimientosregualatoriosregualatorios enen lala industriaindustria farmacéuticafarmacéutica..

LaLa generacióngeneración,, registroregistro yy trazabilidadtrazabilidad dede datosdatos eses lala llavellave parapara garantizargarantizar lalaseguridadseguridad dede loslos resultadosresultados..

Test de esterilidad

Detección, aislamiento, enumeración e identificación demicroorganismos (bacteria, hongos y levaduras)

Control de endotoxinas bacterianas en diferentesmateriales (por ejemplo materia prima, agua, productos)

Control de productos, superficies, vestimenta y medioambiente

Ensayos con microorganismos como parte del sistemade control de medios y de métodos

Personal

• Los test microbiológicos deber ser realizados y supervisados porpersonalpersonal concon experienciaexperiencia,, ccualificadosualificados en microbiología o Cs.equivalentes.

• El personal debe tener entrenamientoentrenamiento básicobásico y experienciaexperiencia prácticaprácticarelevante antes de autorizarlos a realizar los test correspondientes.

• El laboratorio debe mantener registros de todo el personal técnico,describiendo su cualificación, entrenamiento y experiencia.

•• LaLa eficaciaeficacia de cada técnico debe estar demostrada con evaluacionesperiódicas.

Personal

• Los test microbiológicos deber ser realizados y supervisados porpersonalpersonal concon experienciaexperiencia,, ccualificadosualificados en microbiología o Cs.equivalentes.

• El personal debe tener entrenamientoentrenamiento básicobásico y experienciaexperiencia prácticaprácticarelevante antes de autorizarlos a realizar los test correspondientes.

• El laboratorio debe mantener registros de todo el personal técnico,describiendo su cualificación, entrenamiento y experiencia.

•• LaLa eficaciaeficacia de cada técnico debe estar demostrada con evaluacionesperiódicas.

WHO Technical Report Series, No. 961, 2011 y BPF Disposición ANMAT N° 3602/18

DISPOSICIÓN ANMAT N° 3602/18- Parte A

• 2.11 Además de la formación básica en la teoría y práctica enel sistema de gestión de calidad y en las normas de correctafabricación, el personal de reciente contratación debe recibiruna formación adecuada a las tareas que le sean asignadas.También debe proporcionarse formación continua y debeevaluarse su eficacia práctica. Los programas de formacióndeben estar disponibles, aprobados por el responsable de cadasector, según proceda. Deben conservarse registros deformación.

• 5.21.B.10 supervisión de la conducta de trabajo para asegurarla eficacia de la formación y el cumplimiento con los controlesprocedimentales pertinentes.

DISPOSICIÓN ANMAT N° 3602/18- Parte A

• 2.11 Además de la formación básica en la teoría y práctica enel sistema de gestión de calidad y en las normas de correctafabricación, el personal de reciente contratación debe recibiruna formación adecuada a las tareas que le sean asignadas.También debe proporcionarse formación continua y debeevaluarse su eficacia práctica. Los programas de formacióndeben estar disponibles, aprobados por el responsable de cadasector, según proceda. Deben conservarse registros deformación.

• 5.21.B.10 supervisión de la conducta de trabajo para asegurarla eficacia de la formación y el cumplimiento con los controlesprocedimentales pertinentes.

Eficacia del analista

•• MatrizMatriz dede análisisanálisis dede loslos resultadosresultados obtenidosobtenidos porpor cadacada analistaanalista,,concon determinadodeterminado índiceíndice dede aceptaciónaceptación

• De acuerdo a la responsabilidad de su puesto establecer criterioscriterios dedeevaluaciónevaluación por ej.: Deben considerar incluir técnicas básicas como:

preparaciónpreparación dede placasplacas,, técnicastécnicas asépticasasépticas,, preparaciónpreparación dede mediosmedios,, dilucionesdiluciones serialesseriales ee identificaciónidentificación

• El personal solo puede realizar análisis sobre muestras si se evaluósu competencia o si se realizan los controles con adecuadasupervisión.

•• MatrizMatriz dede análisisanálisis dede loslos resultadosresultados obtenidosobtenidos porpor cadacada analistaanalista,,concon determinadodeterminado índiceíndice dede aceptaciónaceptación

• De acuerdo a la responsabilidad de su puesto establecer criterioscriterios dedeevaluaciónevaluación por ej.: Deben considerar incluir técnicas básicas como:

preparaciónpreparación dede placasplacas,, técnicastécnicas asépticasasépticas,, preparaciónpreparación dede mediosmedios,, dilucionesdiluciones serialesseriales ee identificaciónidentificación

• El personal solo puede realizar análisis sobre muestras si se evaluósu competencia o si se realizan los controles con adecuadasupervisión.

criterios de evaluación puntuados de 1al 10

• Las áreas destinadas a Microbiología deben estar dedicadas yposeer un sistema de tratamiento de aire independiente yseparado de las otras áreas, especialmente de las deproducción.

• Los diferentes sectores deben estar Calificados.

• La clasificación de los sectores debe ser acorde a lasactividades que se realizan.

ÁreasÁreasÁreasÁreas

• Las áreas destinadas a Microbiología deben estar dedicadas yposeer un sistema de tratamiento de aire independiente yseparado de las otras áreas, especialmente de las deproducción.

• Los diferentes sectores deben estar Calificados.

• La clasificación de los sectores debe ser acorde a lasactividades que se realizan.

ÁreasÁreasÁreasÁreas• Deben estar diseñadas con suficiente espacio para cada una de las

actividades a fin de evitar mezcla, contaminación y contaminación cruzada.Los materiales de construcción deben ser de fácil limpieza y desinfección.

• Debido a la naturaleza de algunos materiales (p.e.medios estériles vs.organismos de referencia o incubación de cultivos) deben diseñarseespacios de trabajo separados para:

– lavado yy desinfeccióndesinfección dede manos. - manejo de muestras

– Manejo de cepas de referencia

– Preparación y dispensación de medios (con área de enfriamiento)

– tipo de análisis (control higiénico, esterilidad)

– registros.

• Deben estar diseñadas con suficiente espacio para cada una de lasactividades a fin de evitar mezcla, contaminación y contaminación cruzada.Los materiales de construcción deben ser de fácil limpieza y desinfección.

• Debido a la naturaleza de algunos materiales (p.e.medios estériles vs.organismos de referencia o incubación de cultivos) deben diseñarseespacios de trabajo separados para:

– lavado yy desinfeccióndesinfección dede manos. - manejo de muestras

– Manejo de cepas de referencia

– Preparación y dispensación de medios (con área de enfriamiento)

– tipo de análisis (control higiénico, esterilidad)

– registros.

Los accesos deben ser restrictos sólo a personal autorizado.El personal debe conocer y estar informado de:

Los procedimientos de entrada y salida incluyendo lavestimenta a utilizar

Uso particular de cada área/sector

Las restricciones impuestas de trabajo en cada área

Las razones para la imposición de cada restricción

los niveles de contención apropiados

ACCESO AL LABORATORIOACCESO AL LABORATORIOLos accesos deben ser restrictos sólo a personal autorizado.El personal debe conocer y estar informado de:

Los procedimientos de entrada y salida incluyendo lavestimenta a utilizar

Uso particular de cada área/sector

Las restricciones impuestas de trabajo en cada área

Las razones para la imposición de cada restricción

los niveles de contención apropiados

Area

sAr

eas/

sect

ores

/sec

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s • Las actividades a realizar en el laboratorio demicrobiología deben estar segregadassegregadas enen espaciosespaciosdedicadosdedicados o al menos separadas por tiempo.

Si no poseen áreas dedicadas se debe aplicar unanálisisanálisis dede riesgoriesgo.

• Los test de esterilidad deben realizarse en áreasáreasdedicadasdedicadas..Ar

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s/se

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microbiología deben estar segregadassegregadas enen espaciosespaciosdedicadosdedicados o al menos separadas por tiempo.

Si no poseen áreas dedicadas se debe aplicar unanálisisanálisis dede riesgoriesgo.

• Los test de esterilidad deben realizarse en áreasáreasdedicadasdedicadas..

CL

ASI

FIC

AC

ION

DE

AR

EA

S

La clasificación debe basarse en la criticidad de los productosy las operaciones que deben llevarse a cabo en las áreas:

• El TEST DE ESTERILIDAD debe realizarse en áreascon la misma clasificación utilizada para la manufacturade estériles/asépticos.

La inyección de aire para áreas grado A y B deberealizarse a traves de filtros HEPAs

• Deben tener un sistema de alarma para el sistema detratamiento de aire.

CL

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La clasificación debe basarse en la criticidad de los productosy las operaciones que deben llevarse a cabo en las áreas:

• El TEST DE ESTERILIDAD debe realizarse en áreascon la misma clasificación utilizada para la manufacturade estériles/asépticos.

La inyección de aire para áreas grado A y B deberealizarse a traves de filtros HEPAs

• Deben tener un sistema de alarma para el sistema detratamiento de aire.

CL

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S

• Las actividades como preparación de medios, de muestras,recuento de microorganismos deben estar segregadas porespacio o al menos por tiempo.

• Por ejemplo:

El manejo del cepario y el control higiénico de losproductos podrían ser realizados en la misma áreaclasificada aplicando los principios de Análisis de riesgo,programas de limpieza y decontaminación y verificaciónde la limpieza.

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• Las actividades como preparación de medios, de muestras,recuento de microorganismos deben estar segregadas porespacio o al menos por tiempo.

• Por ejemplo:

El manejo del cepario y el control higiénico de losproductos podrían ser realizados en la misma áreaclasificada aplicando los principios de Análisis de riesgo,programas de limpieza y decontaminación y verificaciónde la limpieza.

Zonas Grado Propuesto

Recepción de muestras- Preparaciónde medios- Descarga de autoclaveEstufas- Decontaminación

Noclasificadas

Controladas

Descarga autoclave dentro del áreade Control de esterilidad

Grado B ISO 5 (turbulento) y<10 ufc/m3

Control de esterilidad – Flujolaminar

Grado A ISO 5 (laminar) y<1 ufc/m3

Control de esterilidad— background Grado B ISO 5 (turbulento) y<10 ufc/m3

CLAS

IFIC

ACIÓ

N D

E AR

EAS

CLAS

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ISO 5 (turbulento) y<10 ufc/m3

Control Microbiológico –FlujoLaminar

Grado A ISO 5 (laminar) y<1 ufc/m3

Control Microbiológico- background Grado C ISO 7≤100ufc/m3

Manejo de cepario- Test depromoción de crecimiento –Recuento - Distribución de mediosestériles en placas o tubos-FlujoLaminar

Grado A ISO 5 (laminar) y<1 ufc/m3

CLAS

IFIC

ACIÓ

N D

E AR

EAS

CLAS

IFIC

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N D

E AR

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ÁreasÁreas• La entrada al área limpia se debe realizar por un sistema de airlock y de

esclusasesclusas dede personalpersonal. La etapa final de ingreso debe cumplir “at rest”lamisma condición de limpieza que el área a la que se ingresa.

• Las esclusas para el cambio de vestimenta deben tener un tamañoadecuado para facilitar la operación.

• Deben registrarse las lecturas de los manómetros de diferencial depresión entre áreas, salvo que posean instalado un sistema demonitoreo continuo validado. Como mínimo las lecturas se debenrealizar antes de que el operador ingrese a los vestuarios y al finalizar laactividad. También se debe registrar la presión de filtros del Fj laminar.Los manómetros deben rotularse indicando el sentido de flujo y laespecificación de aceptación.

• La entrada al área limpia se debe realizar por un sistema de airlock y deesclusasesclusas dede personalpersonal. La etapa final de ingreso debe cumplir “at rest”lamisma condición de limpieza que el área a la que se ingresa.

• Las esclusas para el cambio de vestimenta deben tener un tamañoadecuado para facilitar la operación.

• Deben registrarse las lecturas de los manómetros de diferencial depresión entre áreas, salvo que posean instalado un sistema demonitoreo continuo validado. Como mínimo las lecturas se debenrealizar antes de que el operador ingrese a los vestuarios y al finalizar laactividad. También se debe registrar la presión de filtros del Fj laminar.Los manómetros deben rotularse indicando el sentido de flujo y laespecificación de aceptación.

El monitoreo microbiológico de las áreas destinadas arealizar el Test de Esterilidad debe ser realizado durantecada sesión en condición dinámica - de operación.

Deben establecerse especificaciones incluyendo limitesde alerta y acción para la contaminación microbiológica.

Los limites están incluidos en la Tabla del Anexo 1 –Disposición ANMAT 3602/18

ÁreasÁreasEl monitoreo microbiológico de las áreas destinadas arealizar el Test de Esterilidad debe ser realizado durantecada sesión en condición dinámica - de operación.

Deben establecerse especificaciones incluyendo limitesde alerta y acción para la contaminación microbiológica.

Los limites están incluidos en la Tabla del Anexo 1 –Disposición ANMAT 3602/18

• Límites recomendados de la contaminación microbiana(a)

Grado Muestra deaire

ufc/m3

placas desedimentaciónufc/4 horas (b)

placas decontactoufc/placa

impresión deguantes5 dedos

ufc/guanteA(c) < 1 < 1 < 1 < 1

B 10 5 5 5B 10 5 5 5

C 100 50 25 -

D 200 100 50 -

Notas: (a) Se trata de valores medios.(b) Cuando las placas de sedimentación individuales se expongan durante

menos de 4 horas, deberán definir los límites de alerta y acción propios.(c) El valor esperado es “0” ufc, cualquier recuperación de 1 ufc o mayor

debe ser investigada.

EquiposEquipos

• Los equipos del laboratorio nono debendeben moversemoverse entre áreas dediferente grado de limpieza, para evitar accidentes de contaminacioncruzada.

• Los equipos usados en el laboratorio de microbiología no deben serusados fuera de las áreas del Laboratorio. De ser necesario deben estarespecificadas las precauciones a tomar.

• Como parte del sistemasistema dede calidadcalidad, deben implementarse programasde calificación, calibración, verificación de funcionamiento,mantenimiento y un sistema de monitoreo de uso de cada equipo.

• Los equipos del laboratorio nono debendeben moversemoverse entre áreas dediferente grado de limpieza, para evitar accidentes de contaminacioncruzada.

• Los equipos usados en el laboratorio de microbiología no deben serusados fuera de las áreas del Laboratorio. De ser necesario deben estarespecificadas las precauciones a tomar.

• Como parte del sistemasistema dede calidadcalidad, deben implementarse programasde calificación, calibración, verificación de funcionamiento,mantenimiento y un sistema de monitoreo de uso de cada equipo.

Incubadoras, baños de agua y hornos, cámaras de temperatura controlada

• La estabilidadestabilidad yy lala uniformidaduniformidad dede lala distribucióndistribución dede lala temperaturatemperatura, y eltiempo requerido para alcanzar las condiciones de equilibrio debenestablecerse inicialmente y documentarse, en particular con respecto a losusos típicos. (por ejemplo, posición de elementos en la cámara, altura yespacio entre las pilas de placas de Petri).

• La temperatura de funcionamiento de este tipo de equipo debe controlarse yconservar los registros.

• Deben implementarse el MonitoreoMonitoreo continuocontinuo de la temperatura.

EquiposEquipos

Incubadoras, baños de agua y hornos, cámaras de temperatura controlada

• La estabilidadestabilidad yy lala uniformidaduniformidad dede lala distribucióndistribución dede lala temperaturatemperatura, y eltiempo requerido para alcanzar las condiciones de equilibrio debenestablecerse inicialmente y documentarse, en particular con respecto a losusos típicos. (por ejemplo, posición de elementos en la cámara, altura yespacio entre las pilas de placas de Petri).

• La temperatura de funcionamiento de este tipo de equipo debe controlarse yconservar los registros.

• Deben implementarse el MonitoreoMonitoreo continuocontinuo de la temperatura.

• Deben estar equipados con autoclaves,autoclaves, concon registroregistro dede ciclociclo,, separadaspara las actividades de esterilización y de decontaminación.

Sin embargo, en casos excepcionales, un autoclave puede ser aceptable,siempre que se tomen precaucionesprecauciones para separar las cargas dedescontaminación y esterilización, y que exista un programaprograma dede limpiezalimpiezadocumentado para abordar el entorno interno y externo de la autoclave.

• Se debe calificar los equipos acorde al tipo y cantidad de carga anualmente.

• La eficacia de su funcionamiento durante cada ciclo puede verificarsemediante el uso de indicadores químicos o biológicos para fines deesterilización o descontaminación. LasLas tirastiras indicadorasindicadoras debendeben usarseusarse sólosóloparapara mostrarmostrar queque sese haha procesadoprocesado unauna carga,carga, nono parapara demostrardemostrar lalafinalizaciónfinalización dede unun ciclociclo aceptableaceptable..

EquiposEquipos• Deben estar equipados con autoclaves,autoclaves, concon registroregistro dede ciclociclo,, separadas

para las actividades de esterilización y de decontaminación.

Sin embargo, en casos excepcionales, un autoclave puede ser aceptable,siempre que se tomen precaucionesprecauciones para separar las cargas dedescontaminación y esterilización, y que exista un programaprograma dede limpiezalimpiezadocumentado para abordar el entorno interno y externo de la autoclave.

• Se debe calificar los equipos acorde al tipo y cantidad de carga anualmente.

• La eficacia de su funcionamiento durante cada ciclo puede verificarsemediante el uso de indicadores químicos o biológicos para fines deesterilización o descontaminación. LasLas tirastiras indicadorasindicadoras debendeben usarseusarse sólosóloparapara mostrarmostrar queque sese haha procesadoprocesado unauna carga,carga, nono parapara demostrardemostrar lalafinalizaciónfinalización dede unun ciclociclo aceptableaceptable..

EQUIPAMIENTO VOLUMÉTRICO

• Se debe realizar y registrar la verificación inicial de los equiposvolumétricos ( dispensador automático, pipetas mecánicas o dispensadoresde medio) y programar chequeos regulares para asegurar que el equipofunciona dentro de la especificación requerida. Para el material de vidriocertificado no se requiere la verificación inicial.

• Después de la calificación inicial, se recomienda realizar verificacionesaleatorias de precisión. Si el proveedor no tiene un sistema de calidadreconocido, los laboratorios deben verificar la idoneidad de cada loterecibido. Se debe verificar la precisión del volumen entregado por elequipo contra el volumen establecido (en el caso de instrumentos devolumen variable para varios ajustes diferentes).

• Los equipos volumétricos desechables de "un solo uso", deben seradquiridos de empresas con un sistema de calidad reconocido y relevante..

EQUIPAMIENTO VOLUMÉTRICO

• Se debe realizar y registrar la verificación inicial de los equiposvolumétricos ( dispensador automático, pipetas mecánicas o dispensadoresde medio) y programar chequeos regulares para asegurar que el equipofunciona dentro de la especificación requerida. Para el material de vidriocertificado no se requiere la verificación inicial.

• Después de la calificación inicial, se recomienda realizar verificacionesaleatorias de precisión. Si el proveedor no tiene un sistema de calidadreconocido, los laboratorios deben verificar la idoneidad de cada loterecibido. Se debe verificar la precisión del volumen entregado por elequipo contra el volumen establecido (en el caso de instrumentos devolumen variable para varios ajustes diferentes).

• Los equipos volumétricos desechables de "un solo uso", deben seradquiridos de empresas con un sistema de calidad reconocido y relevante..

Monitoreo ambiental en el laboratorioDeben poseer PROCEDIMIENTOS Y PROGRAMASPROCEDIMIENTOS Y PROGRAMAS que abarquen:

Monitoreo de aire por impacto, por placas de sedimentación y/o decontacto

Control de temperatura y diferenciales de presión, con sus límites dealerta y accion definidos

Analisis de tendencias de los resultados del monitoreo ambiental confrecuencia definida.

Limpieza, desinfección e higiene

Deben establecerse programas de limpieza y sanitización

Los resultados del monitoreo microbiológico deben ser evaluados

Debe haber un procedimiento para tratar los derrames.

Monitoreo ambiental en el laboratorioDeben poseer PROCEDIMIENTOS Y PROGRAMASPROCEDIMIENTOS Y PROGRAMAS que abarquen:

Monitoreo de aire por impacto, por placas de sedimentación y/o decontacto

Control de temperatura y diferenciales de presión, con sus límites dealerta y accion definidos

Analisis de tendencias de los resultados del monitoreo ambiental confrecuencia definida.

Limpieza, desinfección e higiene

Deben establecerse programas de limpieza y sanitización

Los resultados del monitoreo microbiológico deben ser evaluados

Debe haber un procedimiento para tratar los derrames.

• Los métodos incluidos en Farmacopea Argentina o internacionalesreconocidas se consideran validados.

• Se debe verificar la adecuación de métodos, para los productosespecíficos a evaluar, para recuperación de bacterias, hongos ylevaduras

• Los efectos potencialmente inhibitorios de las muestras deben se tenidosen cuenta

• El laboratorio debe realizar la verificación de idoneidad incluyendocontroles positivos y negativos antes de incluirlos como métodos derutina.

• Los métodos no incluidos en Farmacopeas deben ser validados antes desu uso: determinación de precisión, especificidad, límite de detección,límite de cuantificación, linealidad y robustez. Métodos estadísticos.

VALIDACIÓN DE MÉTODOSVALIDACIÓN DE MÉTODOS

• Los métodos incluidos en Farmacopea Argentina o internacionalesreconocidas se consideran validados.

• Se debe verificar la adecuación de métodos, para los productosespecíficos a evaluar, para recuperación de bacterias, hongos ylevaduras

• Los efectos potencialmente inhibitorios de las muestras deben se tenidosen cuenta

• El laboratorio debe realizar la verificación de idoneidad incluyendocontroles positivos y negativos antes de incluirlos como métodos derutina.

• Los métodos no incluidos en Farmacopeas deben ser validados antes desu uso: determinación de precisión, especificidad, límite de detección,límite de cuantificación, linealidad y robustez. Métodos estadísticos.

• Los medios pueden prepararse internamente o adquirirse parcial ototalmente preparados. Los microondas no deben usarse para la fusión demedios debido a la distribución inconsistente del proceso decalentamiento.

• Los fabricantes/proveedores deben estar aprobados y calificados. Elproveedor calificado puede certificar algunos de los parámetros decalidad. La promoción del crecimiento deben realizarse en todos losmedios en cada lote y en cada envío.

• En el ítem 6.23 se establece que la idoneidad de todos los medios decultivo debe verificarse antes de su uso.

Cuando el proveedor de medios proporciona certificación de promociónde crecimiento por lote de medios y las condiciones de transporte hansido calificadas, el usuario puede confiar en el certificado del Fabricantecon la verificación periódica de sus resultados.

Medios de CultivoMedios de Cultivo• Los medios pueden prepararse internamente o adquirirse parcial o

totalmente preparados. Los microondas no deben usarse para la fusión demedios debido a la distribución inconsistente del proceso decalentamiento.

• Los fabricantes/proveedores deben estar aprobados y calificados. Elproveedor calificado puede certificar algunos de los parámetros decalidad. La promoción del crecimiento deben realizarse en todos losmedios en cada lote y en cada envío.

• En el ítem 6.23 se establece que la idoneidad de todos los medios decultivo debe verificarse antes de su uso.

Cuando el proveedor de medios proporciona certificación de promociónde crecimiento por lote de medios y las condiciones de transporte hansido calificadas, el usuario puede confiar en el certificado del Fabricantecon la verificación periódica de sus resultados.

El uso adecuado de los medios de cultivo, diluyentes y otroslíquidos de suspensión debe verificarse, cuando corresponda, conrespecto a:

•Porcentaje de recuperación de organismos. Debe demostrarseuna recuperación del 50–200% (después de la inoculación deno más de 100 unidades formadoras de colonias (ufc);

•Inhibición de organismos no diana;

•Propiedades bioquímicas (diferenciales y de diagnóstico); y

•Otras propiedades apropiadas (por ejemplo, pH, volumen yesterilidad).

Medios de CultivoMedios de Cultivo

El uso adecuado de los medios de cultivo, diluyentes y otroslíquidos de suspensión debe verificarse, cuando corresponda, conrespecto a:

•Porcentaje de recuperación de organismos. Debe demostrarseuna recuperación del 50–200% (después de la inoculación deno más de 100 unidades formadoras de colonias (ufc);

•Inhibición de organismos no diana;

•Propiedades bioquímicas (diferenciales y de diagnóstico); y

•Otras propiedades apropiadas (por ejemplo, pH, volumen yesterilidad).

• La distribución de los medios después de la esterilizacióndebe realizarse bajobajo flujoflujo dede aireaire unidireccionalunidireccional paraminimizar el potencial de contaminación ambiental.

Esto debe considerarse un requisito mínimo para que losmedios se utilicen en los ensayos tanto de productos estérilescomo no estériles.Se incluye en el requerimiento el enfriamiento de los medios,ya que las tapas de los contenedores deberán retirarse paraevitar la acumulación de condensación.

Medios de CultivoMedios de Cultivo

• La distribución de los medios después de la esterilizacióndebe realizarse bajobajo flujoflujo dede aireaire unidireccionalunidireccional paraminimizar el potencial de contaminación ambiental.

Esto debe considerarse un requisito mínimo para que losmedios se utilicen en los ensayos tanto de productos estérilescomo no estériles.Se incluye en el requerimiento el enfriamiento de los medios,ya que las tapas de los contenedores deberán retirarse paraevitar la acumulación de condensación.

Monitoreo ambiental- Placas de exposición•OGY- Oxytetracycline Glucose Yeast Extract Agar

•SGA - Sabouraud Glucose Agar

Temperatura y Tiempo de incubación: 20-25°C – 5 días

•PCA -Plate Count Agar

•TSA- Tryptic Soya Agar

Temperatura y Tiempo de incubación: 30-35°C -48 horas

Hong

os y

Hong

os y

Leva

dura

sLe

vadu

ras

Bact

eria

sBa

cter

ias

•OGY- Oxytetracycline Glucose Yeast Extract Agar

•SGA - Sabouraud Glucose Agar

Temperatura y Tiempo de incubación: 20-25°C – 5 días

•PCA -Plate Count Agar

•TSA- Tryptic Soya Agar

Temperatura y Tiempo de incubación: 30-35°C -48 horasBact

eria

sBa

cter

ias

Cualquier modificación de la metodología implicarealizar ensayos preliminares de:Efectividad de los medios de cultivo y validez delmétodo con microorganismos de referencia ysalvajes (cepario propio)

Expresión de resultados• Si el resultado de la enumeración es negativo, debe informarse como "nono

detectadodetectado parapara unauna unidadunidad definidadefinida" o "menor que el límite de detecciónpara una unidad definida".

• Los resultados de las pruebas cualitativas deben informarse como"detectados / no detectados en una cantidad o volumen definido". Tambiénse pueden expresar como "menos de un número especificado deorganismos para una unidad definida" donde el número especificado deorganismos excede el límite de detección del método y esto ha sidoverificado.

• En los datos en bruto, elel resultadoresultado nono debedebe darsedarse comocomo cerocero para unaunidad definida a menos que sea un requisito reglamentario. Sólo se puedeusar un valor reportado de "0" para la entrada de datos y cálculos o análisisde tendencias en bases de datos electrónicas

• Si el resultado de la enumeración es negativo, debe informarse como "nonodetectadodetectado parapara unauna unidadunidad definidadefinida" o "menor que el límite de detecciónpara una unidad definida".

• Los resultados de las pruebas cualitativas deben informarse como"detectados / no detectados en una cantidad o volumen definido". Tambiénse pueden expresar como "menos de un número especificado deorganismos para una unidad definida" donde el número especificado deorganismos excede el límite de detección del método y esto ha sidoverificado.

• En los datos en bruto, elel resultadoresultado nono debedebe darsedarse comocomo cerocero para unaunidad definida a menos que sea un requisito reglamentario. Sólo se puedeusar un valor reportado de "0" para la entrada de datos y cálculos o análisisde tendencias en bases de datos electrónicas

Buenas Prácticas de laboratorios demicrobiología

según Disposición ANMAT N° 3602/2018

MUCHAS GRACIAS POR SUATENCIÓN!!!!!

Disertante: Inés Rizzo email: irizzo@anmat.gov.ar

MUCHAS GRACIAS POR SUATENCIÓN!!!!!