bustanussalam (11,13).pdf

7/23/2019 bustanussalam (11,13).pdf

1/61


2/61


3/61

Fitofarmaka, Vol. 2, No.1, Juni 2012 ISSN : 2087-9164

i

J u r n a l I l m i a h F a r m a s i

Susunan Redaksi

Pelindung : Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam UNPAK

Pimpinan Redaksi : Ketua Program Studi Farmasi FMIPA UNPAK

Redaksi Pelaksana : Dra. Bina Lohita Sari, MPd. Apt.

:Mira Miranti, STP, M.Si.

:Dr. S.Y. SrieRahayu, M.Si.

Dewan Redaksi : Dr. Tri Panji

: drh. Min Rachminiwati, PhD.

:Dr. drh.Hera Maheshwari, M.Sc.

:Siti Sadiah, MSi. Apt.

Alamat Redaksi : Program Studi Farmasi FMIPA, Universitas Pakuan

:Jln. Pakuan PO Box 452 Bogor

: Telp : (0251) 8349324: Fax : (0251) 8375547

:Email : [email protected]


4/61


5/61


ii

UCAPAN TERIMA KASIH

Fitofarmaka Mengucapkan terima kasih kepada

Mitra Bestariyang telah memberikan kontribusi atas terbitnyaJurnal Fitofarmaka Vol. 2 No 1 Juni 2012

Berikut ini adalah nama Mitra Bestari Vol. 2 No 1 Juni 2012:

Prof. Dr. Ibnu Gholib Ganjar, DEA, Apt. (Universitas Gadjah Mada)

Prof. Maksum Radji, M.Biomed (Universitas Indonesia)

Dr. A.A. Harmita, Apt. (Universitas Indonesia)

Dr. Ajeng Diantini, M.Si., Apt. (Universitas Padjadjaran)

Dr. Nisa Rachmania Mubarik, M.Si (Istitut Pertanian Bogor)


6/61


7/61


iii

PENGANTAR REDAKSI

Fitofarmaka adalah jurnal ilmiah yang diterbitkan untuk mengakomodasi

tulisan hasil penelitian bagi sivitasakademika farmasi Universitas Pakuan

khususnya dan instansilain di luar Universitas Pakuan pada umumnya. Jurnal ini

memuat artikel primer yang bersumber langsung dari hasil penelitian Ilmu

Farmasi.

Fitofarmaka diterbitkan dua kali dalam setahunya itu pada bulan Juni dan

Desember oleh Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam,Universitas Pakuan.

Semoga Jurnal ini bermanfaat bagi perkembangan hasanah ilmu

pengetahuan.

Bogor, Juni 2012

Redaksi


8/61


9/61


iv

J u r n a l I l m i a h F a r m a s i

DAFTAR ISI

SusunanRedaksi .....................................

Ucapan Terima Kasih.....................................

Pengantar Redaksi .........

Daftar Isi ............

i

ii

iii

iv1 IDENTIFIKASI SENYAWA DAN UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETIL

ASETAT KULIT KAYU MASSOI (Cryptocarpa massoy)

Bustanussalam, Haryanto Susilo,Endang Nurhidayati

67 - 76

2 HISTOPATOLOGI HATI MENCIT PASCA PEMBERIAN SUSPENSI

KEPEL (Stelechocarpus burahol) SECARA INTRA-GASTRIK

SELAMA 14 HARI .

Eva Harlina, Siti Sadiah,Huda S Darusman, Gita Alvernita

77 - 82

3 POTENSI ANTIBAKTERI EKSTRAK HEKSANA BANDOTAN

(Ageratum conyzoidesL.)TERHADAPEscherichia coli DANStaphylococcus aureusDAN IDENTIFIKASI SENYAWA ORGANIK

DENGAN METODE KROMATOGRAFI GAS SPEKTROMETRI

MASSA (GC-MS) ........................................................................................

Tri Aminingsih, Husain Nashrianto, AjiSyaifulRohman

83 - 90

4 KIJING TAIWAN (Anodontawoodiana) SEBAGAI SUMBER

KALSIUM TINGGI DALAM UPAYA MENCEGAH OSTEOPOROSIS

Sata Yoshida Srie Rahayu91 -98

5. UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL BUAH PARE (Momordica

charantiaL) SEBAGAI ANTIBAKTERI Salmonella typhi.......................OomKomala, BinaLohitaSari, Nina Sakinah

99-104

6. ELUSIDASI STRUKTUR SENYAWA BETA GLUKAN DARI SERAT

JAMUR SHIITAKE (Lentinus edodes Berk.) YANG LARUT DALAM

AIR MENGGUNAKAN METODE SPEKTROMETRI .

Bambang Mursitodan Rayung Sari

105-113


10/61


11/61

Fitofarmaka, Vol. 2 No.1 , Juni 2012 : 67-76

67

IDENTIFIKASI SENYAWA DAN UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETIL ASETAT

KULIT KAYU MASSOI (Cryptocarpa massoy)

Bustanussalam1), Haryanto Susilo

2, Endang Nurhidayati

2

1

Laboratorium Kimia Bahan Alam, Pusat Penelitian BioteknologiLembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) - Cibinong

2Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,

Universitas Pakuan

ABSTRAK

Massoi (Cryptocarpa massoy) merupakan jenis tumbuhan yang selama ini sudah

digunakan oleh masyarakat lokal Papua sebagai obat tradisional. Bagian yang dimanfaatkan

dari tumbuhan ini adalah kulit kayu yang diekstraksi untuk menghasilkan minyak.

Pemanfaatan kulit kayu Massoi oleh masyarakat lokal selama ini masih dirasakan kurang

optimal, oleh karena belum banyaknya penelitian terkait kandungan senyawa kimia dankhasiat pengunaan kulit kayu Massoi secara farmakologis. Penelitian ini dilakukan untuk

mengidentifikasi senyawa bioaktif ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi serta menguji

aktivitasnya sebagai antibakteri, antioksidan dan mengetahui tingkat toksisitasnya.Kulit

kayu Massoi diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut metanol dan

dipartisi dengan pelarut air - etil asetat (1:1). Ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi diuji

fitokimia, aktivitas antibakteri, toksisitas dan antioksidan. Selanjutnya untuk

mengidentifikasi adanya senyawa tertentu dilakukan pemisahan, pemurnian dan identifikasi

secara kromatografi. Pengujian fitokimia ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi diketahui

mengandung senyawa tertentu golongan minyak atsiri, flavonoid, tanin, steroid, triterpenoid

dan kumarin. Hasil uji aktivitas diketahui bahwa ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi

memiliki aktivitas positif sebagai senyawa sitotoksik dengan LC50 sebesar 12,12 ppm (sangat

toksik) dan sebagai antioksidan dengan IC50 sebesar 44,02 ppm (aktif). Hasil pemisahansenyawanya yang dilakukan dengan kromatografi kolom didapat 7 fraksi yang

dikelompokkan berdasarkan profil kromatogram KLT hasil kromatografi kolom yang

meliputi bentuk noda, warna, dan waktu retensinya. Hasil analisis KCKT didapatkan fraksi

dengan area terbesar terdapat pada fraksi 4 sebesar 95042975 pada waktu retensi 10,050

menit. Fraksi 4 dianalisis dengan menggunakan GC-MS untuk mengetahui komponen

senyawa yang terdapat di dalamnya, hasil analisisnya didapatkan 13 senyawa terbesar yang

mempunyai persen kemiripan antara 95-99 % dari dataLibrary program GC-MS.

Kata kunci: Cryptocarpa Massoy, toksisitas, antibakteri, antioksidan dan analisis kromatografi.

PENDAHULUAN

Kecenderungan kembali ke alamatau lebih dikenal dengan istilah back to

nature, memberikan arahan baru di

Indonesia untuk mengembangkan potensi

keanekaragaman hayati yang dimilikinya.

Tidak kurang dari 1260 jenis tumbuhan

yang terdapat di hutan hujan tropika

merupakan kekayaan Sumber Daya Alam

yang dapat digunakan sebagai bahan obat,

baik untuk obat tradisional maupun sebagai

bahan baku obat modern (Zuhud, et al.

1994 dalam Zuhud dan Yuniarsih 1995).

Menurut Jafarsidik (1987) dalam

Komaryati, et al. (1995), di Indonesia

terdapat kurang lebih 85 jenis pohon hutanyang berguna sebagai bahan baku obat.

Salah satu tumbuhan hutan di Indonesia

yang berkhasiat obat adalah tumbuhan

Massoi yang berasal dari famili Lauraceae.

Massoi (Cryptocarpa massoy)

merupakan jenis tumbuhan yang selama ini

sudah digunakan oleh masyarakat lokal

Papua sebagai obat tradisional. Bagian


12/61


68

yang dimanfaatkan dari tumbuhan ini

adalah kulit kayu yang diekstraksi untuk

menghasilkan minyak. Beberapa penelitian

Etnobotani pada masyarak

at lokal Papua memberikan informasibahwa minyak kulit massoi digunakan

sebagai bahan jamu, obat cacing dan obat

untuk kejang perut (Komaryati, et al.

1995). Batang pohon Cryptocarpa massoy

mengandung minyak yang mudah

menguap sebanding dengan kayu manis. Di

pulau Jawa, tumbuhan ini digunakan

sebagai bahan rempah utama bagi berbagai

obat tradisional dengan serangkaian

manfaat, selain itu Massoi juga digunakan

sebagai bahan campuran pewarna untukpembuatan batik Jawa.

Pemanfaatan kulit kayu Massoi

oleh masyarakat lokal selama ini masih

dirasakan kurang optimal, oleh karena

belum banyaknya penelitian terkait

kandungan senyawa kimia dan khasiat

pengunaan kulit kayu Massoi secara

farmakologis, sehingga penggunaanya

sampai saat ini hanya berdasarkan pada

data-data empiris dan belum dapat

digunakan secara meluas oleh masyarakat

pada umumnya. Untuk itu penelitian lebih

lanjut mengenai tumbuhan ini diharapkan

dapat memberikan tambahan informasi

yang dapat dipergunakan untuk

memaksimalkan penggunaannya dalam

bidang kesehatan sebagai obat tradisional.

Didasarkan pada permasalahan tersebut,

maka penelitian ini dilakukan untuk

mengidentifikasi senyawa bioaktif ekstrak

etil asetat kulit kayu Massoi serta mengujiaktivitasnya sebagai antibakteri,

antioksidan dan mengetahui tingkat

toksisitasnya.

BAHAN DAN METODE

Bahan yang digunakan adalah

serbuk simplisia kulit kayu massoi

(Cryptocarpa massoy), metanol, etil asetat,

aquades, kloroform, DPPH, serium sulfat,

kloramfenikol, bakteri (Escherichia

coliATCC 25922 dan StaphylococcusaureusATCC 25923), pereaksi (Meyer,

Dragendorf, Buchardad, Lieberman, dan

FeCl3), telur Artemia salina L, dan garam

laut. Alat-alat yang digunakan antara lain:

mesin penyerbuk simplisia (Fort Waine,

Indiana), rotavapor, neraca analitik, corongpisah, seperangkat alat Kromatografi Lapis

Tipis (KLT), lampu UV 254 nm dan 365

nm, cawan petri, sonicator, hot plate,

kolom kromatografi, autoklaf, Laminar Air

Flow, pipet mikro, shaker, oven, TLC plate

Alumunium silika gel GF254,

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

(Shimadzu Series), Spektrofotometer

(Beckman DU-650), Gas Chromatograhy-

Mass Spectro (Agilent 5975) serta alat-alat

gelas dan alat-alat umum lainnya yanglazim digunakan di dalam laboratorium

kimia.

Penelitian dilakukan dalam dua tahap.

Tahap pertama dilakukan analisis

pendahuluan terhadap sampel untuk

mengetahui identitas dan gambaran umum

sampel uji, yaitu berupa: determinasi

tumbuhan (sampel), preparasi sampel

(pembuatan serbuk simplisia dan ekstrak)

dan uji fitokimia. Tahap kedua dilakukan

analisis kimia lanjutan, yaitu uji aktivitas

antibakteri dengan metode difusi cakram,

uji aktivitas antioksidan dengan metode

Penangkapan Radikal Bebas, serta uji

toksisitas dengan metode Brine Shrimp

Lethality Test (BSLT). Kemudian

dilakukan pemisahan, pemurnian dan

identifikasi senyawa dengan menggunakan

analisis KLT, kromatografi kolom, KCKT

dan GC-MS.

Preparasi SampelSimplisia yang digunakan dalam

penelitian ini merupakan koleksi Pusat

Penelitian Bioteknologi LIPI Cibinong,

yang diperoleh dari Lembah Baliem,

Wamena, Irian Jaya.Pembuatan ekstrak

dilakukan dengan cara maserasi dengan

menggunakan pelarut metanol.Maserat

metanol yang didapat kemudian

dievaporasi dengan menggunakan

rotavapor, hingga didapat ekstrak kental.

Ekstrak kental dipartisi menggunakanpelarut etil asetat : air (1:1) sebanyak 600


13/61


69

ml yang dilakukan sebanyak tiga kali. Fase

etil asetat yang sudah terpisah dari fase air

diambil, kemudian dievaporasi

mengggunakan rotavapor sampai didapat

ekstrak hampir kental, kemudian diangin-anginkan hingga pekat/kental.

Uji Fitokimia

Uji fitokimia dilakukan terhadap

senyawa alkaloid, flavonoid, tanin,

polifenol, uji steroid/terpenoid, saponin,

kuinon, kumarin dan minyak atsiri.

Uji Antibakteri

Ekstrak etil asetat sebelum difraksinasi

dengan kromatografi kolom, dilakukan ujiaktivitas antibakteri dengan metode difusi

cakram. Bakteri uji yang digunakan adalah

Escherichia coliATCC 25922 dan

Staphilococcus aureus ATCC

25923.Sebagai kontrol positif digunakan

kloramfenikol dan etil asetat sebagai

kontrol negatif.

Larutan uji dibuat dalam tiga

konsentrasi yang berbeda yaitu 500, 1000,

1500 ppm. Kontrol positifdibuat dalam

konsentrasi 500 ppm. Kertas cakram yangtelah disterilkan dicelupkan ke dalam

larutan kontrol positif dan ke dalam

masing-masing larutan uji yang terdiri dari

tiga konsentrasi (500, 100, 1500 ppm),

diletakkan di atas media inokulum.

Dilakukan pengamatan selama tiga hari

dengan menghitung luas Diameter Daerah

Hambat (mm).

Uji Antioksidan

Uji aktivitas antioksidan denganmetode Panangkapan Radikal Bebas

dengan pereaksi DPPH, dilakukan dengan

menggunakan Vitamin C sebagai kontrol

positif. Larutan blanko dibuat dari larutan

DPPH 1 mMol dipipet 1 ml kedalam

tabung reaksi yang telah ditera 5 ml, lalu

ditambahkan metanol hingga 5 ml dan

dihomogenkan.Laruatan uji dibuat dalam

konsentrasi sampel masing-masing 5, 10,

25, 50, 100 ppm.

Kontrol positif dibuat dalam konsentrasimasing-masing 3, 6, 9, 12 dan 15

ppm.Larutan blanko, larutan uji dan larutan

kontrol positif segera diinkubasi selama 30

menit pada suhu 37oC, kemudian serapan

dibaca pada panjang gelombang 515 nm.

Uji Toksisitas

Larutan ekstrak dibuat dalam

konsentrasi masing-masing 1000, 100, dan

10 ppm. Sebagai pembanding disiapkan

larutan blanko yang sama namun tidak

disertai penambahan ekstrak.Uji toksisitas

BSLT dilakukan dengan cara memasukkan

10 ekor larva udangArtemia salinaLeach.

untuk tiap-tiap perlakuan ke dalam botol

vial yang telah berisi air laut salinitas 12%

dan larutan blanko. Setelah 24 jam,dilakukan pengamatan dengan menghitung

jumlah larva udang yang mati. Dari data

yang diperoleh, dihitung nilai LC50 dengan

menggunakan analisis probit dengan selang

kepercayaan 95%.

Analisis Kromatografi Lapis Tipis

(KLT)

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

dilakukan bertujuan untuk mengetahui pola

kromatogram yang dihasilkan daripemisahan senyawa yang terdapat pada

sampel. Eluen yang digunakan merupakan

kombinasi dari beberapa pelarut (heksan,

etil asetat, kloroform, aseton, metanol dan

air) dengan perbandingan tertentu, dan

telah dijenuhkan terlebih dahulu.

Kemudian lempeng diamati di bawah sinar

UV 254 nm dan 366 nm, di semprot

menggunakan penampak bercak serium

sulfat, dan dikeringkan diatas pemanas.

Hasil yang didapat tersebut diamati, daneluen yang menghasilkan pemisahan

terbaik selanjutnya digunakan sebagai

eluen pada kromatografi kolom dan HPLC.

Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom

Fraksinasi dilakukan dengan

menggunakan cairan eluasi pada KLT

yang sesuai sebagai fasa gerak dan silika

gel sebagai fasa diam. Sebanyak 4 g

ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi

dimasukkan ke dalam kolom kaca yangtelah berisi silika gel. Ditambahkan cairan

eluasi secara gradient menggunakan n-


14/61


70

heksan : etilasetat (10:1 ~ 1:1) dilanjutkan

kloroform : metanol (5:1 ~ 1:1) dan

dibiarkan mengalir melalui kolom. Adanya

senyawa dalam fraksi-fraksi tersebut

dideteksi dengan KLT, fraksi yangmempunyai pola yang sama selanjutnya

digabungkan menjadi satu sehingga

diperoleh fraksi yang mempunyai sifat

hampir sama. Setelah itu dilakukan analisis

KLT kembali dengan eluen yang sesuai,

kemudian noda pada KLT divisualisasi

dengan lampu UV 254 nm dan 366 nm,

dan disemprot dengan penampak bercak

serium sulfat. Fraksi-fraksi yang dihasilkan

ini kemudian akan diuji aktivitas kembali

(hasil yang positif) dan digunakan untukanalisis KCKT dan GC-MS.

Analisis Kromatografi Cair Kinerja

Tinggi (KCKT)

Alat KCKT yang digunakan adalah

Shimadzu Liquid Chromatograph LC-6AD.

Fase gerak yang digunakan adalah

campuran palarut heksan-etil asetat (2:1)

dan fase diam menggunakan Shperisorb

S5W (untuk senyawa non polar). Kondisi

alat diatur dengan flow rate 1 ml/menit,tekanan 121-141 kg/cm2dan pada panjang

gelombang 230 nm. Fraksi-fraksi yang

didapat dari hasil pemisahan kromatografi

kolom dilarutkan dengan metanol sampai

larut, kemudian disaring dengan kertas

saring Millipore 0,45 m, masing-masing

fraksi diinjeksikan 20 l menggunakan

syringe.

Analisis Kromatografi Gas-

Spektrometri Massa (GC-MS)Sampel fraksi 4 ekstrak etil asetat

kulit kayu Massoi di analisis dengan

instrumen GC-MS Agilent 5975 untuk

mengetahui senyawa organik yang terdapat

di dalamnya. Sebelumya fraksi 4 yang

telah difraksinasi pada kromatografi

kolom, dimurnikan dengan menggunakan

KLT Preparatif. KLT preparatif yang

dilakukan menggunakan fase gerak

heksan-etil asetat (2:1) dan fase diam silika

yang dilapisi pada lempeng kaca. HasilKLT dikerok dan dilarutkan dengan

kloroform. KLT preparatif dilakukan

sebanyak dua kali pengulangan hingga

didapatkan pola bercak tunggal, untuk

kemudian siap dianalisis dengan GC-MS.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Preparasi Sampel

Serbuk kulit kayu Massoi diekstraksi

dengan cara maserasi menggunakan pelarut

metanol, maserasi bertujuan untuk

menghindari terjadinya kerusakan terhadap

komponen organik penyusunnya. Maserat

yang diperoleh dari proses maserasi,

dipartisi dengan ekstraksi cair-cair

menggunakan pelarut etil asetat - air (1:1).

Ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi dari

hasil pemisahan yang didapat kemudian

digunakan sebagai sampel dalam penelitian

ini.

Tabel 1.Hasil Rendemen PartisiKeterangan : Rendemen didasarkan pada

perbandingan bobot awal serbuk simplisia denganbobot akhir ekstrak etil astat.

Uji Fitokimia

Hasil uji fitokimia ekstrak etil asetat

kulit kayu Massoi menunjukkan hasil

positif pada senyawa golongan minyak

atsiri, flavonoid, tanin, steroid, terpenoid,

dan kumarin.

Sampel

Bobot

awal(gr)

Fase Berat (gr)Rendemen (%)

kulitkayu

Massoi200

Etilas

etat 6,2931 3,1465

Air 8,2206 4,1103


15/61


71

Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak etil

asetat kulit kayu massoi

Uji Fitokimia Hasil Keterangan

Minyak Atsiri +++ (+) berbau aromatik(-) tidak berbau aromatik

Flavonoid ++ (+) terbentuk warna kuning/merah/jingga

(-) tidak terbentuk warna kuningmerah/jingga

Tanin + (+) terbentuk warna biru tua/

hijau kehitaman(-) tidak terbentuk warna biru

tua/hijau kehitaman

Steroid/

Terpenoid

+ (+) terbentuk warna merah

(-) tidak terbentuk warna merah

Kumarin + (+) berfluoresensi hijau/biru

(-) tidak berfluoresensi hijau/biru

Alkaloid - (+) terbentuk endapat merah bata/putih

(-) tidak terbentuk endapat merahbata/putih

Saponin - (+) terbentuk busa

(-) tidak terbentuk busa

Kuinon - (+) terbentuk warne merah(-) tidak tyerbentuk warna merah

Uji AntibakteriHasil pengukuran Diameter Daerah

Hambat ekstrak etil asetat kulit kayu

Massoi dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Hasil Pengamatan Diameter

Daerah Hambat (DDH)

Pengujian antibakteri ekstrak etil

asetat kulit kayu Massoi menunjukkan

hasil negatif, dimana dari ketiga

konsentrasi larutan yang dibuat 500 ppm,

1000 ppm, dan 1500 ppm menghasilkan

DDH 0 mm, yang berarti larutan ekstrak

kulit kayu Massoi tidak menunjukkan

aktivitas sebagai antibakteri. Kontrol

positif menggunakan larutan kloramfenikol500 ppm yang menghasilkan DDH 1600

mm, dan kontrol negatif dengan

menggunakan larutan etil asetat

menunjukkan DDH 0 cm.

Uji Toksisitas Larva Udang (BrineShrimp Lethality Test)

Hasil uji toksisitas ekstrak etil

asetat terhadap larva udang dapat diketahui

dengan menghitung jumlah larva udang

yang mati.

Tabel 4.Hasil Uji Toksisitas ekstrak etil

asetat kulit kayu Massoi terhadap

larva udang

Tabel di atas merupakan rekapitulasi nilai

persen kematian larva udang dari masing-

masing konsentrasi tiap sampel pada uji

toksisitas, dari hasil ini kemudian dapat

dihitung nilai LC50 menggunakan analisis

probit. LC50 merupakan konsentrasi yang

mematikan 50% dari populasi hewan uji.

Dari percobaan ini, nilai LC50 ekstrak etil

asetat kulit kayu Massoi adalah 12,12 ppm.

Nilai LC5012,12 ppm menunjukkan tingkat

toksisitas yang sangat toksik, senyawa

dikatakan sangat toksik apabila nilai LC50

lebih kecil atau sama dengan 30 ppm.Menurut Meyer (1982), hasil toksisitas

yang tinggi ditunjukkkan dengan nilai

konsentrasi yang menyebabkan kematian

50% larva udang, semakin kecil nilai yang

dimiliki ekstrak tanaman maka akan

semakin toksik. Meyer (1982) juga

memaparkan, senyawa kimia berpotensi

bioaktif jika memiliki nilai LC50 kurang

dari 1000 ppm. Oleh karena itu ekstrak etil

asetat kulit kayu Massoi dapat dikatakan

mempunyai potensi bioaktivitas.

Konsentrasi

Populasi

larva

udang

(ekor)

Letal

(kematian)Rata-

rataUlangan

1 2 3

Blanko 10 - - - 0

10 ppm 10 2 4 2 2.67

100 ppm 10 10 10 10 10

1000 ppm 10 10 10 10 10

Keterangan

Konsentrasi

Larutan

(ppm)

Diameter Daerah

Hambat (mm)

E. coli S. aureus

Larutan Uji500 0 0

1000 0 0

1500 0 0

Kontrol Positif 500 1600 1400

Kontrol

Negatif

500 0 0

1000 0 0

1500 0 0


16/61


72

Antioksidan

Ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi diuji

aktivitas antioksidan dengan pereaksi

DPPH dan vitamin C sebagai kontrol

positif.

Tabel 5. Hasil uji antioksidan ekstrak etil

asetat kulit kayu Massoi

Ekstrak Etil asetat kulit kayu

Massoi dibuat dalam deret konsentrasi

yang berbeda dimaksudkan untuk

menentukan IC50. Dari tabel diatas dapat

diketahui nilai IC50ekstrak etil asetat kulit

kayu Massoi adalah sebesar 44,02 ppm.

Ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi dapat

dikatakan aktif sebagai antioksidan karena

nilai IC50 < 100 ppm. Menurut Dewi, et al.

(2001), suatu senyawa sebagai antioksidan

dikatakan aktif apabila IC50 < 100 ppm,

lemah jika IC50 < 100-200 ppm dan tidak

aktif bila IC50 > 200 ppm. Nilai

penghambatannya dapat dilihat dengan

menghubungkan persen hambatan dengan

konsentrasi larutan, seperti yang teterapada Gambar 7 dan 8.

Gambar 7.Kurva konsentrasi inhibisi 50

(IC50) ekstrak etil asetat kulitkayu Massoi

Gambar 8.Kurva konsentrasi inhibisi 50

(IC50) Vitamin C

Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Ekstrak etil asetat kulit kayu

Massoi dianalisis KLT denganmenggunakan beberapa pelarut, tujuannya

untuk memperoleh profil kromatogram

senyawa dengan beberapa perbandingan

komposisi. Hasil kromatogram KLT

ekstrak etil asetat kulit kayu Massoi dapat

dilihat pada Gambar 9.

Gambar 9.Kromatogram KLT ekstrak etil


Keterangan:

Fase gerak

(a): Heksan-Etil asetat (2:1)

(b): Heksan-kloroform-etil asetat (2:1:1)

(c): Heksan-kloroform-metanol (1:1:2)Fase diam: Silika Gel GF254

Penampak bercak: serium sulfat

Pengamatan:* noda tampak dibawah sinar UV254 nm** noda tampak dibawah sinar UV 365 nm*** noda tampak dengan penampak bercak

Gambar di atas merupakan profil

komposisi eluen terbaik dalam analisis

KLT yang dilakukan pada penelitian ini.

Hasil analisis KLT ekstrak kulit kayuMassoi dapat dilihat pada Tabel 6.

y = 0.8028x + 14.657

r = 0.9943

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

0 20 40 60 80 100 120

Konsentrasi Larutan

PersenHambatan

LarutanKonsentrasi

(ppm)Absorbansi

Hambatan

(%)

IC50

(ppm)

Blanko 0 2,3377 0

44, 02Larutan Uji

5 1,9973 14,56

10 1,8137 22,41

25 1,4472 38,09

50 0,9803 58,06

100 0,1706 92,70

Kontrol

Positif

3 1,9215 17,80

5,956 0,9770 58,21

9 0,4506 80,72

12 0,0746 96,80

a b c

*

*****

y = 8.6503x - 1.495

r = 0.9778

0

20

40

60

80

100

120

0 2 4 6 8 10 12 14

Konsentrasi Larutan

Persenn

Ham

batan


17/61


73

Tabel 6. Hasil analisis KLT ekstrak etil


Perbedaan nilai Rf dalam hal ini

dapat dipengaruhi oleh komposisi senyawa

dalam sampel. Dari hasil analisis ini

diperoleh hasil eluen terbaik untuk elusi

KLT ekstrak etilasetat kulit kayu Massoi

adalah campuran pelarut heksan - etil

asetat dengan perbandingan 2:1. Pemilihaneluen tersebut berdasarkan nilai Rf, bentuk

dan jumlah spot yang dihasilkan serta pola

pemisahan senyawanya.

Kromatografi Kolom

Pemilihan pelarut sebelumnya telah

dilakukan pada saat KLT dengan pelarut

heksan-etil asetat (2:1), sehingga dengan

metode gradien komposisi pelarut yang

digunakan dimulai dari perbandingan 10:1

sampai dengan 1:1 (untuk pelarut yangsifatnya nonpolar) dan untuk pelarut yang

lebih polar digunakan pelarut kloroform-

metanol perbandingan 5:1 sampai dengan

1:1. Fraksi-fraksi hasil tampungan eluen

yang dikumpulkan didapat sebanyak 203

vial dengan volume rata-rata 14 ml. Fraksi-

fraksi ini kemudian dikelompokkan

berdasarkan profil kromatogram KLT.

Tabel 7. Fraksi-fraksi hasil Kromatografi

kolom ekstrak etil asetat kulit

kayu Massoi

Fraks

i Keterangan

Bobot

(mg)

1 gabungan vial 1-4 47,9






7gabungan vial 131-

203 844,8

Pola kromatogram ketujuh fraksi hasil

kromatografi kolom ekstrak etil asetat kulit

kayu Massoi dapat dilihat pada Gambar 10.

Masing-masing fraksi yang didapat

selanjutnya akan dianalisis menggunakan

kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT).

Gambar 10. Kromatogram Fraksi Kroma-

tografi Kolom ekstrak etil


Keterangan:

Fase gerak : heksan-kloroform-metanol

(5:2:1)

Fase diam: Silika Gel GF254

Penampak bercak: serium sulfatPengamatan:* noda tampak dibawah sinar UV254 nm** noda tampak dibawah sinar UV 365 nm*** noda tampak dengan penampak bercak

Uji Aktivitas Positif

Aktivitas positif ini dimaksudkan untuk

menguji kembali senyawa yang terdapat

pada fraksi etil asetat kulit kayu Massoi

yang sebelumnya telah difraksinasi dengan

kromatografi kolom. Fraksi-fraksi yang didapat diuji aktivitas antioksidan dengan

PelarutKeterangan Hasil

Jumlah Noda Warna Rf

Heksan-Etilasetat

(2:1)

6

coklat 0,3

coklat 0,46

coklat muda 0,66

coklat muda 0,7

coklat 0,78

coklat 0,88

Heksan-

kloroform-etilasetat (2:1:1)

6

putih kecoklatan 0,14

kuning

kecoklatan0,38

coklat muda 0,56

putih kecoklatan 0,62

putih kecolatan 0.67

coklat muda 0,76

Heksan-Kloroform-

metanol (1:1:2)

3

coklat muda 0,69

coklat 0,82

coklat muda 0,93


18/61


74

menggunakan metode penangkapan radikal

bebas dengan pereaksi DPPH yang sama

dengan pengujian awal. Hasil uji aktivitas

antioksidan metode penangkapan radikal

bebas dengan peraksi DPPH padakonsentrasi sampel 100 ppm dengan cara

spekrofotometri dapat dilihat pada Tabel 8.

Tabel 8. Hasil Uji Aktivitas Positif

Antioksidan Fraksi etil asetat

kulit kayu Massoi

Jika hasil uji ini dibandingkan dengan

uji antioksidan di awal, hasil uji aktivitas

antioksidan pertama lebih besarhambatannya dibandingkan dengan hasil

uji aktivitas positif kedua. Ini berarti

senyawa yang berpotensi sebagai

antioksidan dalam ekstrak etil asetat kulit

kayu Massoi akan lebih aktif jika dalam

bentuk sebelum dipisahkan (fraksinasi).

Analisis KCKT

Dengan membandingkan waktu retensi

dan area sampel pada hasil analisis KCKT

terdapat tiga senyawa yang kemungkinan

berada pada beberapa fraksi, senyawa-senyawa tersebut dapat dilihat pada Tabel.

9 di bawah ini.

Tabel 9. Kemungkinan senyawa yang

terdapat dalam fraksi hasil

analisis KCKT

Analisis GC-MS

Analisis GC-MS fraksi 4 (F4)


merupakan tahap lanjutan untuk

mengidentifikasi senyawa yang terdapat di

dalam sampel.

Senyawa-senyawa yang terdapat di

dalam Tabel 10. adalah senyawa-senyawa

yang mempunyai persen kemiripanberkisar antara 95-99 %. Hasil uji aktivitas

positif terhadap ekstrak dan fraksi etil

asetat kulit kayu Massoi adalah

aktivitasnya sebagai antioksidan. Menurut

Hary Winarsi (2007), senyawa antioksidan

non-enzimatis dapat berupa tokoferol,

karotenoid, flavonoid, quinon, bilirubin,

asam askorbat, asam urat, dan protein

lainnya. Berdasarkan hasil uji fitokiamia

yang telah dilakukan sebelumnya

kemungkinan senyawa yang tedapat dalamsampel adalah senyawa golongan

flavonoid. Namun demikian dari ketiga

belas senyawa diatas, tidak terdapat adanya

senyawa golongan flavonoid hal ini diduga

karena keberadaan senyawa tersebut dalam

sampel ada dalam konsentrasi kecil

sehingga perlu dilakukan pemurnian

senyawa (isolasi) lanjutan dan analisis

pada fraksi yang lainnya selain fraksi 4

(F4).

FraksiKonsentrasi

(ppm)Absorbansi % Inhibisi

Blanko 0 2,3377 0

1 100 1,7776 24,25

2 100 1,7659 24,46

3 100 2,1063 9,90

4 100 1,8369 21,42

5 100 1,6643 28,81

6 100 1,4094 39,82

7 100 0,7375 68,45

Senyawa Fraksi

Waktu

Retensi(menit)

Luas Area

1

F1 3.733 38468387

F2 3.925 9393627

F6 3.467 2359848

F7 3.708 11982655

2F2 6.025 3852263

F3 6.233 49981059

3

F4 10.05 95042975

F5 10.1 52415311

F6 10.083 8882340

F7 10.125 11338392


19/61


75

Tabel 10. Tiga belas senyawa terbesar

hasil analisis GC-MS

KESIMPULAN DAN SARAN

Ekstrak etilasetat kulit kayu Massoi

(Cryptocarpa Massoy) mengandung

minyak atsiri, flavonoid, tanin, steroid,triterpenoid dan kumarin. Nilai

LC50diperoleh sebesar 12,12 ppm yang

menunjukkan tingkat toksisitas yang sangat

tinggi dannilai IC50 sebesar 44,02 ppm

yaituaktif sebagai antioksida

Hasil analisis KCKT ketujuh fraksi

hasil kromatografi kolom, didapatkan

fraksi dengan waktu retensi dan area

terbesar pada fraksi 4, yaitu pada Rt=

10.050 menit dan area 95042975. Aktivitas

antioksidan senyawa yang terdapat pada

ekstrak etil asetat lebih besar dibandingkan

dengan fraksi hasil pemisahan dengan

kromatografi kolom, dimana % hambatan


dengan konsentrasi 100 ppm lebih aktif

dibandingkan hasil fraksinasi. Analisis GC-

MS senyawa pada fraksi 4, terdapat 13

senyawa terbesar yang mempunyai persen

kemiripan antara 95-99 % dari 72 senyawa

yang teridentifikasi.

Saran

1. Perlu dilakukan pengeringan ekstrak

kental etil asetat kulit kayu Massoi

dengan freezedryer agar diperoleh

ekstrak kering.2. Perlu dilakukan isolasi senyawa aktif

dengan menggunakan pelarut yang

sesuai dengan tingkat kepolaran yang

lebih.

3. Perlu dilakukan penelusuran senyawa

aktif dan uji aktivitas secara kuantitatif

untuk mengidentifikasi senyawa kimia

yang terdapat pada ekstrak etil asetat

kulit kayu Massoi yang mempunyai

aktivitas positif sebagai antioksidan dan

senyawa sitotoksik.

UCAPAN TERIMA KASIH

Ucapan terimakasih kami sampaikan

kepada:

1. Laboratorium Biofarmaka IV,

Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia

(LIPI) - Cibinong.

2. Program Studi Farmasi, Universitas

Pakuan, Bogor.

DAFTAR PUSTAKA

Alam, G. 2002. Brine Shrimp Lethality

(BSLT) Sebagai Bioassay dalam

Isolasi senyawa Bioaktif dari

Bahan Alam. Majalah Farmasi dan

Farmakologi. hal-6.

Departemen Kesehatan RI. 1979.

Farmakope Indonesia, Edisi III.

Direktorat Pengawasan Obat dan

Makanan. Jakarta.

Direktorat Pengawasan Obat dan Makanan.

1985. Cara Pembuatan Simplisia..

Jakarta.

Direktorat Pengawasan Obat dan

Makanan. 1995. Farmakope

Indonesia, Edisi IV.. Jakarta.

Direktorat Pengawasan Obat dan Makanan.

2000. Parameter standar Umum

Ekstrak Tumbuhan Obat.. Jakarta.

No Library/ ID (senyawa) RT % Kemiripan

1 (1-methylene-prophenyl)benzene

4,73 95

21,3-cyclohexadien, 1-

phenyl6,18 96

33-phenyl-1,4-

cyclohexadien6,60 96

4 1,1-biphenyl 6,81 95

5

3-hydroxy-4-

methoxybenzaldehyde

(isovanillin)

6,97 96

61,3-cyclohexadien, 1-

phenyl7,26 95

76-pentyltetrahydro-2H-

pyran-2-one7,76 96

8 dodecanoic acid 8,18 999 benzoic acid 9,86 97

10 n-hexadecanoid acid 11,11 99

11 9,12-octadecanoid acid 12,20 99

12

1,2-benzenedicarboxylic

acid, butyl phenylmethyl

ester31,54 97

13 icosane 15,24 96


20/61


76

Gariswara, G.S. 1995. Farmakologi dan

Terapi, Edisi IV. Fakultas

Kedokteran, UI Press. Jakarta.

Gritter, R.J. Bobbit JM. Schwarting AE.

1991. Pengantar Kromatografi,

Edisi kedua (Penerjemah:

Padmawinata K. Soediro I). ITB.

Bandung, hal. 23-32.

Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia:

Penentuan Cara Modern

Menganalisis Tumbuhan

(Padmawinata K, penerjemah).

ITB. Bandung. hal.84-94.

Jawets, E., J.L. Melnick dan E.A.

Adelberg. 1986. Mikrobiologi

Kedokteran Edisi 20

(penerjemah:Nugroho E, Maulany

RF). Penerbit Buku Kedokteran.

Jakarta. hal. 143-177.

Lemmens. 1995. Plant Resources of

South-East Asia No.5(2). Timber

Trees:Minor Commercial Timbers.

Blackhuys Publisher. Leiden. 152-

161.

Mulyati, A.H. 2007. Dasar-dasar

Kromatografi. Jurusan Kimia,

FMIPA, Universitas Pakuan.

Bogor. hal.3-42.

Nugroho, R.G., Triantoro dan C.M.E.

Susanti. 2007. Kandungan Bahan

Aktif Kayu Kulilawang

(Cinnamomum culilawane Bl.) dan

Masoi (Cryptocaria massoia).Balai Penelitian dan

Pengembangan Kehutanan Papua

Maluku. Manokwari.

Pujianti, S. Ningsih dan Triwidodo. 2002.

Uji Toksisitas terhadap Larva

Artemia Salina dari Fraksi n-

Heksana, Kloroform, Etil asetat

dan Air Eksstrak Etanol Rimpang

Temu Mangga (Curcuma magga

Val). Fakultas Farmasi, UniversitasSurabaya. hal.109.

Rali, T., S.W. Wossa dan D.N. Leach.

2007. Comparative Chamical

Analysis of the Essential Oil

Constituens in Bark, Heartwood

and Fruits of Cryptocarya massoy

(Oken) Kostrem. (Lauraceae) from

Papua New Guinea. Molecules

12(1); 149-154.

Soerbito, S. 1991. Analisis Senyawa Obat.Pusat Antar Universitas Ilmu

Hayati. ITB. Bandung. hal 131-

152.


21/61

Fitofarmaka, Vol. 2No.1 ,Juni2012 : 77-82

77

HISTOPATOLOGI HATI MENCIT PASCA PEMBERIAN SUSPENSI KEPEL

(Stelechocarpus burahol) SECARA INTRAGASTRIK SELAMA 14 HARI

The Histopathology of Mice Liver Treated by Kepel (Stelechocarpus burahol)

Suspension Intragastrically for 14 days

Eva Harlina1), Siti Sadiah

2), Huda S Darusman

2)dan Gita Alvernita

3)

1)Bagian Patologi, Departemen Klinik Reproduksi dan Patologi, FKH IPB,

2)Bagian Farmakologi dan Toksikologi, Departemen Anatomi,

Farmakologi dan Fisiologi, FKH IPB,3)

Program Sarjana, FKH IPB

ABSTRACTThis aim of this study was to examine the effect of Kepel (Stelechocarpusburahol) to the

mice hepatocytes. Thirty male mice of 4 week aged were divided into three groups; control group

was treated by aquadest, Dose1x group was treated by 2.6 mg/g BW/day kepel powder (0.5 mlkepel suspension/day), and Dose 5x group was treated by 13 mg/g BW/day kepel powder (1.0 ml

kepel suspension/day). The treatment was intragastrically for 14 days. The mice were euthanized

and necropsy followed by the liver collection for histopathology assay. The histopathological

examination of liver showed hydropic degeneration, cell death and extramedullary

hematopoietic observed on mice hepatocytes. The ANOVA analysis showed that kepel caused

increase significantly (p


22/61


78

dapat memberikan efek wangi pada produk

ekskresi manusia seperti keringat, urin dan

feses. Hasil penelitian sebelumnya dengan

pemberian intragastrik pada hewan tikus

dan mesncit terbukti secara signifikanmampu menurunkan kadar amonia, fenol

dan trimetilamin pada feses hewan. Untuk

keamanan penggunaan kepel dalam jangka

waktu panjang perlu dilakukan pengamatan

salah satunya pada organ hati. Penelitian

ini bertujuan untuk mempelajari gambaran

histopatologi organ hati mencit terhadap

pemberian suspensi daging buah kepel

karena hati merupakan organ interna

pertama yang terkena efek toksik dari suatu

substansi yang masuk ke dalam tubuh.

BAHAN DAN METODE

Sebanyak 30 ekor mencit dibagi

menjadi tiga kelompok yaitu kelompok

kontrol dan kelompok perlakuan Dosis 1x

dan Dosis 5x. Kelompok kontrol hanya

dicekok akuades 0.5 ml/hari, sedangkan

kelompok perlakuan Dosis 1x dan Dosis 5x

masing-masing dicekok serbuk daging

buah kepel yang dilarutkan dalam akuades

(selanjutnya disebut suspensi kepel)

sebanyak 2.6 mg/kg BB/hari dan 13 mg/kg

BB/hari selama 14 hari. Penentuan dosis

pada mencit berdasarkan hasil konversi

dosis empiris pada manusia (2 buah kepel

sehari) terhadap mencit, dengan faktor

konversi 0.0026 (bacharah, ). Pada akhir

perlakuan mencit dieuthanasi kemudian

diambil hatinya untuk dibuat sediaan

histopatologi dan diwarnai dengan

Haematoxillin-Eosin.Evaluasi histopatologi hati

dilakukan dengan menghitung jumlah

hepatosit yang mengalami degenerasi

hidropis dan kematian sel pada 20 lapang

pandang foto. Foto histopatologi hati

menggunakan lensa kamera Webcamdan

lensa objektif mikroskop 40x, sedangkan

penghitungan hepatosit menggunakan

software ImageJ. Selain itu dilakukan pulapenghitungan jumlah fokus extramedullary

hematopoiesis (EMH) pada seluruh lapang

pandang hati. Hasil penghitungan hepatosit

dianalisis menggunakan analisis sidik

ragam acak lengkap (ANOVA) dengan uji

lanjutan Duncan (= 0.05).


Pengaruh Pemberian Suspensi Kepel

(Stelechocarpus burahol) TerhadapGambaran Histopatologi HatiPada pengamatan seluruh sediaan

histopatologi hati mencit perlakuan

umumnya ditemukan kelainan hepatosit

berupa degenerasi hidropis (Gambar 1a)

dan kematian sel (Gambar 1b). Selain itu

ditemukan pula fokus-fokus sel radang

myeloblast dan eristroblast di sinusoid, di

daerah segitiga Kiernan maupun di tepi-

tepi vena sentralis yang disebut

extramedullary hematopoiesis (Gambar 1a)(Marchiori et al. 2007). Degenerasi

hidropis ditandai dengan pembengkakan

dan adanya ruang-ruang kosong di

sitoplasma sehingga sitoplasma tampak

seolah robek-robek, sedangkan inti tampak

normal. Kematian sel dicirikan oleh

sitoplasma hepatosit yang berwarna lebih

merah sedangkan inti mengecil dan

memadat sehingga berwana lebih gelap.

Hasil analisis statistik persentase hepatosit

mencit yang mengalami degenerasihidropis dan kematian sel disajikan pada

Tabel 1.


23/61


79

20m20m

Tabel 1. Persentase perubahan hepatosit mencit pasca pemberian suspensi kepel

(Stelechocarpus burahol)

Persentase (%) Hepatosit

Kelompok Hepatosit Normal Degenerasi Hidropis Hepatosit mati

Kontrol 38.79 15.00a 36.05 12.50a 25.16 13.57a

Dosis 1x 36.89 12.67a 41.45 13.07b 21.66 7.757b

Dosis 5x 30.17 11.73b 57.70 12.57c 12.13 6.47cKeterangan: Huruf berbeda pada kolom yang sama berbeda nyata pada taraf 0.05

(a) (b)

Gambar 1. Seluruh hepatosit mengalami degenerasi hidropis disertai adanya fokus

extramedullary hematopoiesis (panah)pada hati kelompok Dosis 5x (a);

Kematian hepatosit yang dicirikan oleh sitoplasma berwarna lebih merah daninti yang mengecil (panah) (b). Pewarnaan HE, bar:20 m.

Hasil analisis statistik persentase

hepatosit yang mengalami degenerasi

hidropis pada kelompok perlakuan (Dosis

5x dan 1x) lebih tinggi dan berbeda nyata

(p< 0,05) dibandingkan dengan kelompok

kontrol, dan kelompok Dosis 5x lebih

tinggi dan berbeda nyata (p< 0,05)

dibandingkan dengan kelompok Dosis 1x.

Peningkatan persentase degenerasi hidropis

sejalan dengan meningkatnya dosis

pemberian suspensi kepel, sehingga

degenerasi hidropis hepatosit disebabkan

oleh pemberian suspensi kepel.

Degenerasi hidropis merupakan

kerusakan sel yang disebabkan oleh

iskemia yang menyebabkan kerusakan

membran sel. Iskemia juga menyebabkan

penurunan fosforilasi oksidatif yang

berakibat menurunkan ATP sehinggamenurunkan kerja pompa Na. Adanya

kerusakan membran sel menyebabkan ion

K+ keluar dari sel sedangkan air, ion Na+

dan ion Ca2+ masuk ke dalam sel secara

berlebihan sehingga mengakibatkan

pembengkakan sel. Penurunan ATP juga

mengakibatkan peningkatan glikolisis

sehingga pH sel akan mengalami

penurunan. Penurunan pH mengakibatkan

benang khromatin pada inti sel menjadi

menebal dan pada akhirnya menjadi rusak.

Hal ini dapat menyebabkan hilangnya

benang khromatin dan protein sel sehingga

apabila berlanjut akan berujung pada

nekrosis sel (Hanna 2011). Degenerasi

hidropis merupakan repson awal sel

terhadap bahan-bahan yang bersifat toksik

yang masuk ke hati melalui aliran darah.

Oleh karena itu degenerasi hidropis

biasanya dimulai dari hepatosit yangberada di tepi lobuler yang kemudian


24/61


80

menyebar ke sentra lobuler (Talukder

2001). Selain itu, degenerasi hidropis juga

dapat terjadi pada hewan yang mengalami

hipoksia. Pemberian oksigen yang cukup

serta penghentian paparan bahan toksikdapat memulihkan sel yang mengalami

degenerasi hidropis.

Kepel termasuk kedalam famili

Annonaceae yang memiliki satu metabolit

yang khas yaitu acetogennin atau sering

disebut Annonaceous acetogennin (ACGs)

(Alali et al. 1999). Menurut Liang et al.

(2009) derivat ACGs yang paling

berbahaya adalah bullatacin. Kandungan

ACGs dalam daging buah kepel diduga

penyebab degenerasi hidropis hepatosit.Hasil analisis statistik persentase

hepatosit yang mengalami kematian sel

berbanding terbalik dengan degenerasi

hidropis. Persentase kematian sel pada

kelompok perlakuan (Dosis 5x dan 1x)

lebih rendah dan berbeda nyata (p< 0,05)

dibandingkan kelompok kontrol, dan

kelompok Dosis5x lebih rendah dan

berbeda nyata (p


25/61


81

al. 2006). Persentase sel mati yang lebih

rendah pada kelompok perlakuan (Dosis 5x

dan 1x) dibandingkan kelompok kontrol

diduga disebabkan oleh aktivitas senyawa

antioksidan yang terkandung pada buahkepel. Secara umum antioksidan akan

bekerja pada membran sel yang rusak

akibat peroksidasi lemak membran oleh

radikal bebas (Cheville, 2006).

Di tepi-tepi vena sentralis, vena

porta dan di sinusoid ditemukan fokus-

fokus sel-sel mononuklear yang disebut

extramedullary hematopoiesis(EMH)

(Gambar 1a). EMH terbentuk terutama bila

hewan mengalami anemia, sehingga untuk

mengatasinya sel basofilik maupunmyelosit yang belum matang dilepaskan

dari sumsum tulang ke dalam darah. EMH

biasanya ditemukan di organ hati, limpa

dan limfonodus. Fokus EMH terdiri atas

sel basofilik dan sel-sel mielosit yang

belum matang maupun yang matang

(NIEHS 2010).

Anemia pada mencit percobaan

dapat dikaitkan dengan kandungan tanin

pada kepel. Menurut Darusman (2010),

daging buah kepel mengandung senyawa

tanin, walaupun jenis dan kadarnya belum

diketahui. Menurut Makkar (2003) dan

Herlina (2007) tanin tidak bersifat toksik

namun bersifat antinutrisi.Adanya senyawa

tersebut dapat mengikat protein pakan

sehingga mencit mengalami

hipoproteinemia yang pada akhirnya

berujung pada anemia. Fokus-fokus EMH

ditemukan di seluruh kelompok perlakuan,

dan terbanyak pada kelompok Dosis 5x.Hal ini dikarenakan semakin tinggi dosis

suspensi kepel yang diberikan maka

semakin tinggi kadar tanin yang

dikonsumsi sehingga mencit semakin

menderita anemia.

KESIMPULAN

Pemberian suspensi kepel

(Stelechocarpus burahol) menginduksi

terjadinya degenerasi hidropis, kematian

sel dan extramedullary hematopoiesispada

hati mencit.

SARAN

Perlu dilakukan uji toksisitasbertingkat hingga uji LD50dengan variabel

pengujian yang lebih banyak untuk

mengetahui dosis aman hingga dosis lethal

dari suspensi Kepel (Stelechocarpus

burahol).

DAFTAR PUSTAKA

Alali FQ, Liu XX, McLaughlin JL. 1999.

Annonaceous acetogennins: recent

progress. J. Nat. Prod.62:504-540.Dash P. 2011. Kematian sel.Basic Medical

Sciences, St. Georges University of

London. [terhubung berkala].

www.sgul.ac.uk/dept/immunology/

~dash. [2 Oktober 2011].

Cheville, NF.2006. introduction to

Veterinary Pathology. 3th edition.

2006. Wiley-Blackwell.

Darusman HS. 2010. Aktivitas

Farmakologis Tanaman Kepel(Stelechocarpus burahol (Blume)

Hook & Thomson) Sebagai

Deodoran Topikal dan Oral.

[Thesis]. Bogor: Fakultas

Kedokteran Hewan Institut

Pertanian Bogor.

Fleury C, Mignotte B, Vayssiere JL. 2002.

Mitochondrial reactive oxygen

species in signaling cell death.

Biochim 84: 2-3. [abstrak].http://www.sciencedirect.com/scien

ce/article/pii/S030090840201369X

. [2Oktober 2011].

Hanna P. 2011. Cellular pathology.

[terhubung berkala]. http://people.

upei.ca/hanna/. [2 Oktober 2011]

Harlina, E. 2007. Toksikopatologi dan

Biotransformasi Senyawa Toksik

lamtoro merah (Acacia villosa)

pada Tikus. (Disertasi). Bogor.


26/61


82

Institiu Pertanian Bogor, Fakultas

kedokteran Hewan.

Kresno SB. 2001. Ilmu Onkologi Dasar.

Bagian Patologi Klinik FK UI:

Indonesia. hlm 13-15.

Kusuma FR, Zaky MB. 2005. Tumbuhan

Liar Berkhasiat Obat. Jakarta :

Agromedia Pustaka.

Liang YJ, Zhang X, Dai CL, Zhang JY,

Yan YY, Zeng MS, Chen LM, Fu

LW. 2009. Bullatacin ABCB1-

overexpressing cell kematian sel via

the mitochondrial dependent

pathways. J Biomed Biotechnol

[terhubung berkala].

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/a

rticles/PMC2715821/. [12

September 2011].

Makkar HPS.2003. Effect and Fate of

Tannins in Ruminant Animals,

Adaptation to tannins, and

strategies to overcome detrimental

effect of feeding tannin-rich feeds.

Small Ruminant Res 49:241-256

Marcheix JJ, Fleuriel A, Billiot J. 1990.

Fruit Phenolics. Boca Raton: CRC

Press.

Marchiori E, Escuisato DL, Irion KL,

Zanetti G, Rodrigues RS, Meirelles

GS, Hochhegger B. 2007.

Extramedullary hematopoiesis:

findings on computed tomography

scans of the chest in 6 patients.Jor.

Bras. Pneum. [terhubung berkala].

http://www.scielo.br/scielo. [12September 2011].

[NIEHS]. National Institute of

Environmental Health Sciences.

2011. The Digitized Atlas of Mouse

Liver Lesions: Extramedullary

Hematopoiesis.[terhubung berkala].

http://www.niehs.nih.gov/research/

atniehs/ labs/lep/path-support/core-

support/lverpath/miscellaneous.cfm

[6Oktober 2011].

Norbury CJ, Hickson ID. 2001. ( dalam

Elmore 2007) Cellular responses to

DNA damage. Annu Rev

Pharmacol Toxicol 41:367401.

Renehan AG, Booth C, Potten CS. 2001.

What is kematian sel, and why is it

important?.BMJ322:15368.

Sunardi CSA, Padmawinata K, Kardono

LBS, Gana A. 2007. Isolasi dan

Identifikasi Kulit Batang Burahol

(Stelechocarpus burahol) Terhadap

sel Leukimia [disertasi]. Bandung :

Institut Teknologi Bandung,

Sunarni T, Pramono S, Asmah R. 2007.

Flavonoid antioksidan penangkap

radikal dari daun kepel

(Stelechocarpus burahol). Majalah

Farmasi Indonesia ; 18(3).

Talukder SI. 2001. Lecture notes on

pathology of hepatobiliary system.

[terhubung berkala].

http://www.talukderbd.com/lectures/hepatobiliary_system_note.pdf [6

September 2011].

Tisnadjaja D, Saliman E, Silvia,

Simanjuntak P. 2006. Pengkajian

Burahol (Stelechocarpus burahol

(Blume) Hook & Thomson) sebagai

buah yang memiliki kandungan

senyawa antioksidan. Biodiv 7 (2):

199-202.

Warningsih. 1995. Uji fitokimia dan efekantiimplantasi ekstrak etanol bunga

hibiscus rosa-sinensis, buah Piper

nigrum, dan buah Stelechocarpus

burahol[abstrak]

Wiart C. 2007. Goniothalamus species: A

source of drugs for the treatment of

cancers and bacterial infections.

eCAM 4 (23) 299-311.


27/61


83

POTENSI ANTIBAKTERI EKSTRAK HEKSANA BANDOTAN

(Ageratum conyzoidesL.) TERHADAPEscherichia coli DAN Staphylococcus

aureusDAN IDENTIFIKASI SENYAWA ORGANIK DENGAN METODE

KROMATOGRAFI GAS SPEKTROMETRI MASSA (GC-MS)

Tri Aminingsih1), Husain Nashrianto

2), Aji Syaiful Rohman

3)

1,2,3)Program Studi Kimia FMIPA Universitas Pakuan

ABSTRAK

Bandotan (Ageratum conyzoides Linn) merupakan tanaman gulma yang sering

dimusnahkan, namun sekelompok masyarakat ada yang memanfaatkan tanaman ini sebagai

obat tradisional yang dapat menyembuhkan beberapa macam penyakit diantaranya luka

koreng di kulit, malaria, influenza, radang paru-paru, tumor, obat rematik . Penelitian ini

bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa yang ada dalam ekstrak heksana bandotan serta

menguji aktivitas antibakterinya terhadap Staphylococcus aureusdanEscherichia coli. Herba

bandotan diekstraksi dengan heksana menggunakan metode maserasi. Maserasi dilakukan

dalam bejana tertutup selama 24 jam dan sesekali diaduk. Proses maserasi dilakukan

sebanyak tiga kalivolume 500 mL.Ekstrak heksana dipekatkan dengan rotary evaporatordan

dilakukan pengujian fitokimia meliputi golongansenyawa alkaloid, saponin, tanin,

triterpenoid steroid dan flavonoid. Ekstrak heksan herba bandotan diuji aktivitas

antibakterinya terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan metode kertas

cakram dan dianalisis senyawa kimianya dengan Kromatografi Gas-Spektrofotometri Massa

(GC-MS). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar rendemen ekstrak sebesar 10,01%,

kadar air 8,41%,dan ekstrak heksana herba bandotan mengandung senyawa

golonganalkaloid, triterpenoid-steroid dan flavonoid. Ekstrak heksana herba bandotan

memiliki aktivitas antibakteri dengan diameter daya hambat (DDH) terhadap S. aureus 29,6

mm dan diameter daya hambat (DDH) terhadapE. coli 12,4m sehingga lebih peka terhadapS. aureus (gram positif)dibandingkan denganE.coli (gram negatif).Komponen senyawa yang

terdapat dalam ekstrak heksana herba bandotan yang dianalisis dengan Kromatografi Gas

Spektrometri Massa (GC-MS) antara lain kariofilen, isokariofilen, ageratokromen,

demetoksiageratokromen, 6-vinil-7-metoksi-2,2-dimetilkromen, kumarin, asam

dikloroasetat, 1-heptadekanol, 7-etil-6-metil-5-metiltiopirazolo[1,5-a]pirimidin.Senyawa-

senyawa tersebut diduga merupakan senyawa yang berperan sebagai zat antibakteri.

Kata kunci : Bandotan, heksana, antibakteri,Escherichia coli dan Staphylococcus aureus,GC-MS.

PENDAHULUAN

Masyarakat Indonesia sudah biasa

menggunakan obat-obatan tradisional yangumumnya berasal dari tumbuhan untuk

mencegah dari serangan penyakit atau

mengobati penyakit. Aplikasi dari obat-

obatan ini bisa dengan cara meminum

ekstrak air dari tanaman tersebut atau

meletakkan simplisia yang sudah ditumbuk

halus pada daerah di tubuh yang sakit atau

yang terkena infeksi. Penyakit infeksi

merupakan salah satu permasalahan dalam

bidang kesehatan yang dari waktu ke

waktu terus berkembang. Infeksimerupakan penyakit yang dapat ditularkan

dari satu orang ke orang lain atau dari

hewan ke manusia. Infeksi dapat

disebabkan oleh berbagai mikroorganismeseperti virus, bakteri, jamur, riketsia, dan

protozoa. Organisme-organisme tersebut

dapat menyerang seluruh tubuh manusia

atau sebagian daripadanya.

lnfeksi juga bisa disebabkan oleh

munculnya strain bakteri yang resisten

terhadap antibiotik. Bagi negara-negara

berkembang, timbulnya strain bakteri yang

resisten terhadap antibiotik pada penyakit

infeksi merupakan masalah penting.

Kekebalan bakteri terhadap antibiotikmenyebabkan angka kematian semakin


28/61


84

meningkat, sedangkan penurunan infeksi

oleh bakteri-bakteri patogen yang dapat

menyebabkan kematian sulit dicapai.

Selain itu, cara pengobatan yang

menggunakan kombinasi berbagaiantibiotik juga dapat menimbulkan

masalah resistensi.Berkembangnya

resistensi bakteri terhadap obatobatan

hanyalah salah satu contoh proses alamiah

yang dilakukan oleh organisme-organisme

untuk mengembangkan toleransi terhadap

keadaan lingkungan yang baru. Resistensi

bakteri terhadap obat pada suatu

mikroorganisme dapat disebabkan oleh

suatu faktor yang memang sudah ada pada

mikroorganisme sebelumnya atau mungkinjuga faktor itu diperoleh kemudian.

Resistensi antibiotik merupakan masalah

besar bagi orang-orang yang bekerja di

klinik dan kini telah dilakukan banyak

usaha untuk mencegah terjadinya resistensi

antibiotik (Pelczar dan Chan,

1988).Pemakaian antibiotika yang tidak

tepat untuk pengobatan infeksi bakteri

memunculkan berbagai masalah setelah

puluhan tahun pemakaiannya yaitu

menimbulkan bakteri yang resisten

terhadap antibiotika Keamanan bahan

makanan sehubungan dengan residu

antibiotika merupakan masalah kesehatan

masyarakat yang penting di berbagai

negara. Selain itu, kurangnya informasi

ilmiah mengenai komponen-kompenen

kimia yang terdapat dalam tanaman untuk

obat tradisional ini mengakibatkan nilai

ekonomi dari tanaman-tanaman ini sangat

rendah. Penggunaannya yang biasanyamenggunakan dosis sembarang bisa

mengakibatkan efek yang tidak diinginkan.

Salah satu tanaman yang telah digunakan

sebagai obat tradisional adalah Ageratum

conyzoides Linn., yang memiliki nama

daerah bandotan, babandotan (Sunda),

badotan dan wedusan (Jawa). Di

Indonesia, tanaman ini digolongkan

sebagai gulma sehingga sering

dimusnahkan,namun beberapa kelompok

masyarakat menggunakan tanaman inisebagai obat tradisional untuk

menyembuhkan berbagai macam penyakit:

luka koreng di kulit, malaria, influenza,

radang paruparu dan tumor. Di negara lain

di Asia, Afrika dan Amerika Latin ,

tanaman ini juga digunakan sebagai obattradisional dengan beragam aplikasi,

seperti obat demam, rematik, sakit kepala,

dan sakit perut, obat pneumonia, obat

diarhea, diabetes, HIV/AIDS.

Penyelidikan farmakologi telah dilakukan

oleh beberapa peneliti. Misalnya, ekstrak

eter dan kloroform memiliki efek inhibitor

terhadap perkembangan in

vitroStaphylococcus aureus, ekstrak

metanol dari seluruh bagian tanaman

menunjukkan aksi inhibitor tehadapperkembangan Staphylococus aureus,

Bacillus subtilis, Eschericichia coli, and

Pseudomonas aeruginosa. Selain itu,

ekstrak air dari tanaman ini memiliki aksi

analgesik yang efektif pada tikus dan

antispasmotik (Ming, 1999).Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui potensi antibakteri dari ekstrak

heksana herba bandotan terhadap bakteri

Escherichia coli dan Staphylococcus

aureus serta mengetahui komponen

senyawa yang terdapat dalam ekstrak

heksana herba bandotan menggunakan

metode Kromatografi Gas Spektrometri

Massa (GC-MS).

BAHAN DAN METODE

Bahan yang digunakan dalam

penelitian ini antara lain herbabandotan

(Ageratum conyzoides Linn.),aquadest,

alkohol 70%, larutanpengekstrakheksana,media NA(Nutrient

Agar), eritromisin,

kloramfenikol,aluminium foil, kertas

cakram, suspensi bakteri Staphylococcus

aureus, suspensibakteri Escherichia coli,

dan dan pereaksi-pereaksi uji fitokimia:

HCl 10%, HCl 2%,HCl 2N, pereaksi

Mayer, etanol 95%,serbuk Zn, HCl(p),

FeCl3, dietil eter, pereaksi Lieberman-

Buchard. Peralatan yang digunakan

Laminar Air Flow (LAF), autoklaf, gelaspiala, gelas ukur, rotavapor, neraca


29/61


85

analitik, corong, pipa kapiler, tabung

reaksi, pipet tetes, pipet serologi steril,

cawan petri steril, jangka sorong, kapas,

batang pengaduk, spatula, hot plate,

spirtus, ose, dan peralatan GC-MS.

METODE PENELITIAN

Pembuatan Simplisia dan Ekstraksi

Herba bandotan dicuci, ditiriskan,

dikeringkan, dihaluskan, diayak dan

dianalisis kadar airnya. Ekstraksi herba

bandotan dengan maserasi menggunakan

pelarut heksana di dalam bejana tertutup

selama 24 jam dan sesekali diaduk. Ekstrak

heksana dipekatkan dengan rotavapor,

kemudian ditentukan kadar rendemennya.Ekstrak heksana lalu diuji fitokimia, diuji

potensi antibakterinya, dan dianalisis

senyawa kimianya menggunakan GC-MS.

Pengujian Fitokimia

Pengujian fitokimia ekstrak herba

bandotan dilakukan berdasarkan metode

analisis tanaman obat meliputi uji alkaloid,

flavonoid, saponin, tanin dan triterpenoid

steroid.

Uji Potensi Antibakteri

Bakteri uji yang digunakan adalah

Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli. Kertas cakram steril dengan diameter

6 mm ditetesi 15 l ekstrak heksana herba

bandotan, kemudian diletakkan pada media

agar yang telah diberi bakteri uji dan

diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam.

Sebagai pembanding/kontrol digunakan

antibiotika Eritromisin 15 g danKloramfenikol 30 g sebagai kontrol

positif danpelarut heksana sebagai kontrol

negatif masing-masing sebanyak 15 l.

Analisis Kandungan Senyawa Kimia

Hasil ekstrak heksana herba

bandotan diidentifikasi komponen

senyawanya menggunakan metode

Kromatografi Gas Spektrometri Massa

dengan alat GC-MS.


Rendemen dan Kadar Air Ekstrak

Herba Bandotan

Dari ekstraksi herba bandotan

menggunakan heksana, diperoleh ekstrakkental heksana herba bandotan yang

berwarna hijau. Hasil penimbangan ekstrak

kental bandotan yaitu 50,07 gram. Dari

hasil tersebut diperoleh rendemen ekstrak

sebesar 10,00%.

Kadar air pada simplisia

menunjukkan ketahanan dalam

penyimpanan, biasanya kadar air yang

dipersyaratkan untuk bahan ekstrak adalah

tidak lebih dari 10%. Hal ini untuk

menghindari tumbuhnya jamur ataumikroba pada hasil ekstraksi. Jumlah air

yang terkandung dipengaruhi dari

perlakuan yang telah dialami bahan, seperti

kelembaban udara, tempat penyimpanan,

dan lain-lain. Kadar air yang didapatkan

pada penelitian ini adalah sebesar 8,41%

dan diperoleh rendemen hasil ekstrak

sebesar 10,00%.

Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Heksana

Herba Bandotan

Hasil penapisan senyawa fitokimia

menunjukkan bahwa ekstrak heksana herba

bandotan mengandung senyawa alkaloid,

flavonoid, dan triterpenoid-steroid.

Senyawa alkaloid mempunyai aktivitas

sebagai antibakteri, senyawa flavonoid

sebagai antioksidan, senyawa tanin dapat

berfungsi untuk melapisi lapisan mukosa

pada organ agar terlindungi dari infeksi

bakteri. Senyawa saponin dapatmeningkatkan permeabilitas dinding usus,

memperbaiki penyerapan nutrien, dan

menghambat aktivitas enzim urease (Erika,

2000).

Hasil Uji Potensi Antibakteri Ekstrak

Heksana Herba Bandotan

Potensi antibakteri ekstrak heksana

herbabandotan terhadap bakteri S. aureusdan E. coli dapat ditentukan dengan

mengukur Diameter Daya Hambat (DDH)petumbuhan bakteri di sekitar kertas


30/61


86

cakram yang terlihat jernih. Dari hasil uji

terhadap ekstrak kental herba bandotan

(Tabel 1) didapatkan bahwa terdapat zona

hambat yang masih lebih kecil

dibandingkan dengan kontrol positif(Kloramfenikol 30g dan Eritromisin

15g). Hasil pengukuran DDH ekstrak

heksana herba bandotan terhadap bakteri S.

aureus adalah sebesar 29,6 mm, sedangkan

terhadap bakteriE. coli adalah sebesar 12,4

mm.Dari hasil di atas terlihat bahwa

pengukuran DDH terhadap bakteriS.

aureus lebih luas dibandingkan dengan

DDH terhadap bakteri E. coli.Uji daya

hambat terhadap ekstrak metanol herba

bandotan yang telah dilakukan pada

penelitian sebelumnya didapatkan hasil

pengukuran diameter daya hambat

terhadap bakteri S. aureus adalah sebesar

12 mm, sedangkan terhadap bakteri E. coli

adalah sebesar 10 mm (Gunawan, 2008).Jika dibandingkan dengan hasil diameter

daya hambat yang diperoleh terhadap

ekstrak heksana herba bandotan, potensi

daya hambat ekstrak heksana herba

bandotan masih lebih besar dari ekstrak

metanol herba bandotan. Hal ini

menunjukkan bahwa ekstrak heksana herba

bandotan memiliki efektifitas daya hambat

yang lebih baik.

Tabel 1. Hasil Uji PotensiAntibakteri (DDH) Ekstrak Heksana Herba Bandotan

Ekstrak Ulangan

DDH pada

Staphylococcus

aureus (mm)

DDH pada

Escherichia

coli(mm)

Bandotan

1 30,2 12,4

2 29,6 12,4

3 29,1 12,5

rata-rata 29,6 12,4

Kontrol - (Heksana)

1 Negatif Negatif

2 Negatif Negatif

3 Negatif Negatif

rata-rata - -

Kontrol +

(Kloramfenikol 30g)

1 31,4 21,5

2 31,9 21,5

3 31,6 23,4

rata-rata 31,6 22,1

Kontrol +

(Eritromisin 15g)

1 30 22,6

2 30,9 21,6

3 31 22,3

rata-rata 30,6 22,2


31/61


87

(a) (b)

Gambar 1. Hasil uji aktivitas antibakteri Kloramfenikol terhadap bakteri

Staphylococcus aureus(a) danEscherichia coli(b)

(a) (b)

Gambar 2. Hasil uji aktivitas antibakteri Eritromisin terhadap bakteri

Staphylococcus aureus(a) danEscherichia coli(b)

.

(a) (b)

Gambar 3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak heksana bandotan terhadap

bakteri Staphylococcus aureus(a) danEscherichia coli(b)

Secara in vitro, ekstrak heksana

herba bandotan memiliki daya antibakteri

terhadap bakteri uji S. aureus dan E. coliyang ditandai dengan terbentuknya zona

hambat berupa zona bening di sekitar

kertas cakram. Potensi antibakteri ekstrak

herbabandotan terhadap bakteri S. aureus

lebih besar dibandingkan terhadap bakteriE. coli. Pada ekstrak heksana herba

bandotan didapatkan DDH 29,6 mm untuk

bakteri uji S. aureus dan 12,4 mm untuk

bakteri uji E. Coli. Perbedaan tersebut

terjadi karena kedua bakteri uji tersebut

memiliki komposisi dinding sel yang

berbeda. S. aureusyang merupakan bakteri

gram positif mempunyai sruktur dinding

sel yang sederhana (kandungan lipidrendah) dibandingkan dengan E. coli yang


32/61


88

merupakan bakteri gram negatif yang

memiliki struktur dinding sel yang lebih

rumit (kandungan lipid tinggi yang

kompleks), sehingga dinding bakteri gram

negatif lebih sulit ditembus oleh zatantibakteri.

Kontrol positif kloramfenikol 30 g

dan eritromisin 15 g memiliki diameter

daya hambat yang hampir sama terhadap

bakteri uji S. aureus dan E. Coli. Fungsi

dari kontrol positif kloramfenikol dan

eritromisin ini sebagai

pembandingterhadap potensi antibakteri

ekstrak heksana herba bandotan. Hasil

menunjukkan ekstrak heksana herba

bandotan memiliki diameter daya hambat

yang hampir sama dengan kontrol positif

kloramfenikol dan eritromisin. Dari hasil

ini dapat diketahui bahwa herba bandotan

memiliki daya hambat yang baik terhadap

bakteri S. aureusdanE. Coli.

Hasil Uji Identifikasi Senyawa Ekstrak

Heksana Herba Bandotan dengan

Metode Kromatografi Gas Spektrometri

Massa.

Senyawa yang diduga terkandung

didalamekstrak heksana herba

bandotantertera pada Tabel 2 dan

kromatogram senyawaanekstrak heksana

bandotan pada Gambar 4.

Gambar 2.Kromatogram senyawaan ekstrak heksana herba bandotan hasil analisis dengan

GC-MS.


33/61


89

Tabel 4.DugaanSenyawa yang Terkandung dalam Ekstrak Heksana Herba Bandotan

NoRT

(menit)

Nama Senyawa

(Prosentase

dugaan)

Struktur

SenyawaGolongan Senyawa

1 22,891 Kariofilen (99) Seskuiterpenoid

2 22,650 Isokariofilen (90)

3 23,433 Demetoksiageratok

romen (91)

Fenilpropanoid

4 26,709 6-vinil-7-metoksi-

2,2-dimetilkromen

(91)

5 26,362 Ageratokromen

(86)

6 23,627 Kumarin (60)

7 40,879 7-etil-6-metil-5-

metiltiopirazolo[1,5

-a]pirimidin (56)

Alkaloid

8 25,138 Asam dikloroasetat

(81)

Asam karboksilat

9 28,285 1-heptadekanol

(81)

C17H35OH Alkohol

Senyawa-senyawa tersebut di atas

merupakandugaan senyawa yang

terkandung dalam ekstrak heksana herba

bandotan. Menurut literatur, bandotan

mengandung senyawa kimia antara lain

kumarin dan ageratokromen, dari hasil uji

identifikasi senyawa menggunakanKromatografi Gas Spektrometri Massa

terhadap ekstrak heksana herba bandotan,

diperoleh hasil bahwa benar herba

bandotan mengandung kumarin dan

ageratokromen (Tabel 6.). Senyawa-

senyawa kumarin, ageratokromen,dan

turunan kromen dalam bandotan

merupakan zat yang dapat menghambat

bakteri.

Dengan diketahuinya efektivitas

ekstrak herba bandotan sebagai antibakteri

terhadap bakteri S. aureus dan bakteri E.

Coli, dan hasil identifikasi senyawa

menggunakanKromatografi Gas

Spektrometri Massa telah memberikan

hasil bahwa herba bandotan mengandung

senyawa kimia yang dapat digunakan

sebagai bahan obat,diharapkan herba

bandotan ini dapat menjadi salah satualternatif obat tradisional untuk pengobatan

dan pencegahan penyakit pada manusia

terutama sebagai obat luka, antiinflamasi,

dan antikanker.

KESIMPULAN DAN SARAN

Berdasarkan hasil penelitian

terhadap ekstrak heksana herba bandotan,

maka dapat disimpulkan bahwa:

1. Jenis senyawa fitokimia yangterkandung dalam ekstrak heksana


34/61


90

herba bandotan antara lain

alkaloid,flavonoid,dan triterpenoid-

steroid.

2. Ekstrak heksana herba bandotan

memiliki aktivitas antibakteri dengandiameter daya hambat (DDH) terhadap

S. aureus 29,6 mm dan diameter daya

hambat (DDH) terhadap E. coli12,4mm

3. Secara keseluruhan zat antibakteriherba bandotan lebih peka terhadap S.

aureus(gram positif)dibandingkan

denganE.coli (gram negatif).4. Dari hasil uji potensi antibakteri dapat

diketahui bahwa ekstrak heksana herba

bandotan memiliki potensi antibakteriterhadap jenis bakteri gram positif dan

gram negatif.5. Komponen senyawa yang terdapat

dalam ekstrak heksana herba bandotan

yang dianalisis dengan Kromatografi

Gas Spektrometri Massa (GC-MS)

antara lain kariofilen, isokariofilen,

ageratokromen,

demetoksiageratokromen, 6-vinil-7-

metoksi-2,2-dimetilkromen, kumarin,

asam dikloroasetat, 1-heptadekanol, 7-

etil-6-metil-5-metiltiopirazolo[1,5-

a]pirimidin. Senyawa-senyawa

tersebut merupakan senyawa yang

berperan sebagai zat antibakteri.

DAFTAR PUSTAKA

Fardiaz, S. 1983. Mikrobiologi Keamanan

Pangan. Bogor: PAU Pangan dan

Gizi, Institut Pertanian Bogor.Dalimarta, S. 1999. Atlas Tumbuhan

Indonesia. Jilid ke-1. Jakarta:

Trubus Agriwidya.

DepKes RI. 2000. Parameter Standar

Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.

Jakarta: DirJen POM.

Erika, B.l. 2000. Aromex 510, Pemacu

Pertumbuhan dan Efeknya

Terhadap Kinerja Ayam Broiler.

Laporan Penelitian Fakultas

Peternakan Institut Pertanian

Bogor.

Ganiswara, S.G., et.al. 1995. Farmakologi

dan Terapi. Edisi 4. Jakarta:

Bagian Farmakologi FakultasKedokteran Universitas Indonesia.

Gunawan, W.G. 2008. Identifikasi

Senyawa Aktif Antibakteri pada

Herba Bandotan (Ageratum

Conyzoides. Linn).Jurusan Kimia

FMIPA Universitas Udayana,

Bukit Jimbaran.

Gunawan, P.W. Yulinah, E. Sukrasno

Adayana, I.K. (2006). Telaah

Antimikroba Daun Babadotan

(Ageratum Conyzoides. Linn).African Journal of Pharmaceutica

Indonesia.31, (2).

Harbone, J.B. 1975. The Flavonoid. Edisi

ke-1. London: Chapman and Hall.

Harbone, J.B. 1987. Metode Fitokimia.

Diterjemahkan oleh Padmawinata

K., Soediro I. Bandung: Institut

Teknologi Bandung.

Hutapea J.R. dan Syamsuhidayat S.S.

1991. Inventaris Tanaman Obat

Indonesia. Jakarta: Badan

Penelitian dan Pengembangan

Kesehatan.

Lenny, Sovia .2006. Senyawa Flavonoid,

Fenil Propanoida dan Alkaloida.

USU Repository.

Ming, L.C., 1999. Ageratum conyzoides :

A Tropical Source of Medicinal

and Agricultural Products. In

Janic J. (Ed.). Perspective on New

Crops and New Uses. ASHSPress. Virginia, USA.

Pelczar, M.J.Jr. dan Chan, E.C.S. 1986.

Dasar-dasar Mikrobiologi.

Diterjemahkan oleh Hadioetomo

RS, dkk. Jakarta: UI Press.

Suradikusumah, E. 1989. Kimia

Tumbuhan. Bogor: Pusat Antar

Universitas Ilmu Hayati, Institut

Pertanian Bogor.


35/61


91

KIJING TAIWAN(Anodonta woodiana) SEBAGAI SUMBER KALSIUM TINGGI

DALAM UPAYA MENCEGAH OSTEOPOROSIS

Sata Yoshida Srie Rahayu

Program Studi Biologi FMIPA Universitas Pakuan

ABSTRAK

Kalsium merupakan mineral yang sangat dibutuhkan dalam tubuh manusia. Apabila

kekurangan kalsium dapat menyebabkan riketsia pada anak, osteomalasia (tulang lunak)

dan osteoporosis (tulang keropos) pada orang dewasa. Untuk mencegah hal tersebut maka

dibutuhkan asupan kalsium yang cukup. Kurang sadarnya masyarakat akan pentingnya

kalsium bagi tubuh mengakibatkan dua dari lima orang Indonesia terkena osteoporosis.

Masyarakat Indonesia umumnya mengetahui sumber kalsium bagi tubuh manusia adalah

susu serta produk olahannya. Kandungan kalsium pada susu sapi sebesar 143 mg

padahalterdapat sumber kalsium lain yang berpotensi yaitu memiliki kandungan kalsiumlebih besar daripada susu yaitu kerang. Tujuan penelitian adalah untuk mengkaji komposisi

kimia pada Kijing Taiwan dan merumuskan metode sosialisasi Kijing Taiwan sebagai

sumber kalsium dalam upaya pencegahan osteoporosis. Manfaat penelitian adalah untuk

memperkenalkan Kijing Taiwan sebagai menu makanan keluarga. Penentuan komposisi

kimia proksimat, yang meliputi analisis kadar air, analisis kadar abu, analisis kadar protein,

analisis kadar lemak dan analisis kadar karbohidrat dan kadar mineral Ca, Cu, Fe dan Zn.

Dalam penelitian ini kita dapat mengetahui kandungan kalsium pada Kijing Taiwan, yaitu

366 mg kalsium serta mengetahui berapa gram Kijing Taiwan yang harus dikonsumsi untuk

memenuhi asupan kalsium per hari per orangnya, yaitu sebanyak 273 gr. Diharapkan dari

lingkup yang kecil ini dapat mengurangi kasus osteoporosis di Indonesia.

Kata kunci : Kijing, Anodonta woodiana, sumber kalsium, osteoporosis

PENDAHULUAN

Kalsium merupakan mineral yang

sangat dibutuhkan dalam tubuh manusia.

Kalsium berperan penting dalam proses

metabolisme tubuh, penghantar isyarat

saraf, mengatur denyut jantung,

pertumbuhan otot dan lain-lain. Kebutuhan

kalsium pada manusia berbeda-beda

tergantung tingkat usianya. Untuk

memenuhi kebutuhan kalsium tersebutmanusia harus mengkonsumsi makanan

yang mengandung kalsium. Kekurangan

kalsium pada tubuh manusia dalam jangka

panjang akan mengakibatkan pengeroposan

dan pengapuran pada tulang, kerusakan

pada gigi, dan lain-lain(Deearyana 2006).

Masyarakat umumnya mengetahui

bahwa sumber kalsium utama berasal dari

susu. Kandungan kalsium pada susu sapi

per 100% Berat Dapat Dimakan (BDD)

sebesar 143 mg. Padahal ada sumberkalsium lain yang berpotensi yaitu

memiliki kandungan kalsium lebih besar

daripada susu yaitu kerang(Nasoetion et al.

2009).

Indonesia sebagai negara kepulauan

mempunyai perikanan laut yang cukup

besar. Potensi sumber daya ikan di laut

Indonesia diperkirakan mencapai 6,7 juta

ton per tahun. Salah satu potensi perikanan

laut tersebut adalah kerang. Data Dirjen

Perikanan menunjukkan adanya kenaikanproduksi kerangsebesar 11,73% selama

tahun 1990-1993 (Direktorat Jenderal

Perikanan, 1995). Melihat potensi sumber

daya kerangyang melimpah di perairan

Indonesia dan kandungan kalsiumnya yang

tinggi maka kerangsangat bermanfaat

untuk dijadikan sebagai sumber kalsium

lain selain susu.

Saat ini banyak orang yang terkena

osteoporosis. Puslitbang Gizi Depkes

bekerja sama dengan Fonterra BrandsIndonesia mempublikasikan bahwa 2 dari 5


36/61


92

orang Indonesia memiliki risiko

mengalami osteoporosis. Hal ini

disebabkan kurangnya kesadaran

masyarakat dalam memenuhi kebutuhan

kalsiumnya secara optimal. Misalnyadalam mengkonsumsi susu, masyarakat

tidak mengkonsumsinya sesuai dengan

kebutuhan kalsiumnya yaitu sebanyak 3

gelas per hari. Oleh karena itu diperlukan

sosialisasi mengenai pentingnya memenuhi

kebutuhan kalsium dengan memberikan

alternatif menu makanan olahan berbahan

dasar kerang(Departemen Kesehatan RI,

2009).

Tubuh manusia memerlukan

mineral kalsium yang cukup bagi tubuh.Masyarakat umumnya memenuhi

kebutuhan kalsiumnya hanya dengan

mengkonsumsi susu. Banyak masyarakat

yang belum memahami bahwa ada bahan

makanan yang mengandung mineral

kalsium paling tinggi yaitu kerang. Dalam

penelitian ini akan dilakukan penentuan

komposisi kimia proksimat kerangsebagai

sumber kalsium.

Dokter dan ahli gizi pada umumnya

menyarankan pasiennya yang menderita

osteoporosis untuk mengkonsumsi lebih

banyak susu sapi karena mengandung

kalsium tinggi. Kedengarannya cukup

masuk diakal, tetapi tidak akan berhasil.

Orang Amerika dan Eropa Utara

mengonsumsi 800 mg - 1200 mg kalsium

sehari, tapi tetap saja mereka lebih

menderita osteoporosis daripada orang

Asia dan Afrika yang mengonsumsi 300

mg - 500 mg kalsium per hari.Penyebab utama osteoporosis

adalah terlalu banyak mengonsumsi acidic

yang berasal dari daging, gula dan bahan-

bahan yang mengandung kimia. Untuk

menetralisir aciditas tersebut, tubuh

mengambil kalsium (alkalin) dari tulang.

Sehingga masalah osteoporosis bukanlah

bahwa seseorang itu tidak cukup memakan

kalsium. Kebutuhan hidup yang semakin

meningkat menyebabkan pengurangan

alokasi dana terhadap makanan tambahanseperti susu. Kasus osteoporosis yang telah

ramai dipergunjingkan merupakan efek

dari kurangnya asupan kalsium sementara

sumber kalsium yang saat ini dikenal

masyarakat adalah susu. Berdasarkan data

dari Puslitbang Gizi Depkes, dua dari limaorang Indonesia berpeluang untuk terkena

osteoporosis. Hal ini mengindikasikan

kurangnya asupan kalsium pada masing-

masing individu(Departemen Kesehatan RI

2009).

Pemenuhan kebutuhan kalsium

setiap harinya menjadi pilihan sulit bagi

setiap ibu rumah tangga selaku pemegang

kendali dalam keuangan rumah tangga dan

pengatur menu makanan untuk

keluarganya. Kesulitan pemenuhankebutuhan kalsium dikarenakan harga susu

yang beredar di pasaran terus meningkat

tidak sebanding dengan kenaikan

pengahasilan yang didapatkan. Oleh karena

itu dibutuhkan suatu alternatif sumber

kalsium baru yang dapat mensubtitusi susu

dengan kandungan kalsium yang tinggi

dengan harga yang terjangkau. Sumber

kalsium yang dapat dikembangkan adalah

kerang.

Tujuan dari penelitian ini adalah

untuk mengkaji komposisi kimia

proksimat, yang meliputi analisis kadar air,

analisis kadar abu, analisis kadar protein,

analisis kadar lemak dan analisis kadar

karbohidrat dan mineral Cu, Fe dan Zn

pada daging kerang air tawar yaitu Kijing

Taiwanserta merumuskan metode

sosialisasinya sebagai sumber kalsium

dalam upaya pencegahan ospteoporosis.

Penelitian ini bermanfaat sebagaipeluang untuk memperkenalkan Kijing

Taiwan kepada masyarakat khususnya ibu

rumah tangga dalam pengolahan menu

makanan olahan yang berbahan dasar

kerang.

Kalsium dan Osteoporosis

Asupan kalsium yang memadai

adalah penting untuk mencapai massa

tulang yang optimal (optimal peak bone

mass/PBM) dan mengatur laju kehilangankalsium dari tulang dengan bertambahnya


37/61


93

usia. Secara umum, fungsi kalsium adalah

membangun tulang dan gigi, mengatur

proses-proses tubuh dalam darah dan

jaringan, dan membantu proses

penggumpalan darah. (Nasoetion et al.2009)

Tabel 1.Angka Kecukupan Gizi Kalsium

Rata-rata yang Dianjurkan (per

orang per hari) 2004.

Anak

Umur Kalsium (mg)

0-6 bln 200

7-12 bln 400

1-3 thn 5004-6 thn 500

7-9 thn 600

Pria dan Wanita

Umur Kalsium (mg)

10-12 thn 1000

13-15 thn 1000

16-18 thn 1000

19-29 thn 800

30-49 thn 800

50-64 thn 80065 thn + 800

Sumber :Nasoetion et al. 2009.

Dari tabel di atas dapat diketahui

bahwa kebutuhan kalsium setiap orang

berbeda tergantung dari usia. Pada masa

kanak-kanak asupan kalsium yang

dibutuhkan per harinya masih sedikit

sedangkan pada umur 10-18 tahun asupan

kalsium sangat dibutuhkan untuk

pertumbuhan. Ketika memasuki usia

produktif (19-49 tahun) hingga non

produktif, asupan kalsium yang dibutuhkan

sedikit berkurang namun harus tetap

dipenuhi untuk menunjang aktifitas mereka

dan menjaga kekuatan tulang mereka.

Kekurangan kalsium dapat

menyebabkan riketsia pada anak,

osteomalasia atau tulang lunak dan

osteoporosis atau tulang keropos pada

orang dewasa. Osteoporosis adalahgangguan yang menyebabkan penurunan

secara bertahap jumlah dan kekuatan

jaringan tulang. Penurunan tersebut

disebabkan oleh terjadinya demineralisasi

tulang, yaitu tubuh yang kekurangan

kalsium akan mengambilnya dari tulang

dan gigi. (Departemen Kesehatan RI 2007).International Osteoporosis Foundation

(IOF) memperkirakan, 150 juta orang di

seluruh dunia terdeteksi menderita

osteoporosis dan berisiko mengalami patah

tulang yang dapat melumpuhkan dan

menurunkan kualitas hidup.

Kebutuhan tubuh akan kalsium bisa

dipenuhi dengan mengkonsumsi makanan

sumber kalsium. Bahan makanan yang

mengandung sumber kalsium paling tinggi

terdapat pada kerang(Koral AUP/STPPapua2008).

Kijing Taiwan (Anodonta woodiana)

Di Indonesia, Anodonta woodiana

merupakan alien spesies dari Taiwan sejak

tahun 1971 dan sudah lama dikenal

penduduk serta memiliki potensi ekonomi

dan ekologi yang besar. A. woodiana

merupakan salah satu sumber protein

hewani, dengan kandungan nutrisi yang

baik. Bagian tubuh kijing ini juga

digunakan sebagai bahan pakan ternak dan

obat penyakit kuning. Cangkangnya

sebagai bahan industri kancing dan

penghasil mutiara air tawar (Rahayu,

2011).

Pemanfaatan A. woodiana yang

dilakukan selama ini hanya sebagai pakan

ternak, industri kancing, dan biofilter,

sementara kemampuan biologisnya untuk

memproduksi mutiara belum banyakdiketahui. Jika melihat lebih detil anatomi

dan proses biokimia jaringan tubuhnya,

ternyata Anodonta sp. mampu mendeposit

crystaline calcium carbonat (CaCO3)

dalam bentuk kristal aragonit yang dikenal

sebagai nacre, dan komponen pembentuk

lapisan prismatik yaitu kristal hexagonal

calsite conchiolin (C32

H48N

2O

11) pada

lapisan cangkang bagian dalam.

Di bawah ini diperlihatkan daftar

komposisi bahan makanan kerang(Tabel

2).Tabel Berdasarkan data di atas dapat


38/61


94

dilihat kandungan protein, lemak,

karbohidrat pada kerangdalam bentuk

kerangsegar dan kerangrebus.

Tabel di bawah ini menyajikan

daftar komposisi bahan makanan yang

terkandung pada susu serta produk

olahannya. Berdasarkan data di atas dapat

dilihat kandungan protein, lemak,

karbohidrat pada komposisi bahan

makanan susu serta produk olahannya.

Tabel 2. Daftar Komposisi Bahan Makanan Kerang

No Gol Nama Pangan BDD Protein Lemak Karbohidrat

% % % %

1 5Kijing Taiwan

segar100 23,23 7,01 3,55

2 5Kijing Taiwan

rebus100 19,48 2,50 3,75

Tabel 3.Daftar Komposisi Bahan Makanan Susu dan Olahannya

No Gol Nama Pangan BDD Energi Protein Lemak KH

% Kal G g g

1 8 Es krim 100 207 4 12.5 20.6

2 8 Keju 100 326 22.8 20.3 13.1

3 8 Kelapa susu 100 204 2.6 20 4

4 8 Mentega 100 725 0.5 81.6 1.4

5 8 Susu Ibu (ASI) 100 65 1.1 3.5 7.7

6 8 Susu Kambing 100 64 4.3 2.3 6.6

7 8 Susu Kental Manis 100 336 8.2 10 55

8 8 Susu Kental Tak Manis 100 138 7 7.9 9.9

9 8 Susu Kerbau 100 160 6.3 12 7.1

10 8 Susu Sapi 100 61 3.2 3.5 4.3

11 8 Susu Skim(tak berlemak) 100 36 3.5 0.1 5.1

12 8 Tepung Susu 100 509 24.6 30 36.2

13 8Tepung Susu Asam, untukbayi

100 418 19 9 65.5

14 8 Tepung Susu Skim 100 362 35.6 1 52

15 8 Yoghurt 100 52 3.3 2.5 4

Sumber : Daftar Komposisi Bahan Makanan (Dept. Gizi Masy. FEMA IPB 2009)

BAHAN DAN METODE

Penelitian ini dilaksanakan di

laboratorium nutrisi BBPBAT Sukabumi

dari bulan April hingga Agustus 2010.

Bahan dan Alat

Alat-alat yang digunakan pada

tahap persiapan sampel adalah pisau,

talenan, timbangan digital dan kertas label.

Alat untuk analisis proksimat dan AASyang dilengkapi dengan AC lampu Ca, Cu,

Fe, Zn dan gas O2 dan NO2 yang

digunakan untuk analisis mineral.

Bahan yang digunakan sebagai

Documents

bustanussalam (11,13).pdf