Upload
fanditri
View
218
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/18/2019 Conlap ALT 2
1/12
MIKROBIOLOGI
UJI KUALITAS MIKROBIOLOGI MAKANAN BERDASARKAN ANGKA LEMPENG
TOTAL KOLONI BAKTERI
LAPORAN PRAKTIKUMDisusun untuk memenuhi tugas matakuliah Mikr!ilgi Lan"ut #i!im!ing leh Pr$% Dr%
Dra% Utami Sri &astuti' M(#% Dan Dr% En#ang Suarsini' M%Ke#
Oleh)
Kelm(k * + O$$ering B
Al$iana K% P% ,-./.*-0-123/4
D5iriani P% ,-./.*-0-12.-4
Eni Su6antri ,-./.*-0-01784
Imam Bukhri M ,-./.*-0-01214
N9i A6u L% N% ,-./.*-0-07//4
The Learning University
PROGRAM PAS:A SARJANA
JURUSAN PENDIDIKAN BIOLOGI
UNI;ERSITAS NEGERI MALANG
Okt!er 8/-.
A% TOPIK ) Uji Kualitas Mikrobiologi Makanan Berdasarkan Angka Lempeng Total Koloni
Bakteri
B% &ARI+TANGGAL PRAKTIKUM )
1. Inokulasi sampel bakteri yang terdapat pada makanan padat dilakukan pada hari Rabu !
"ktober !#1$!. %engamatan dan perhitungan Angka Lempeng Total bakteri dilaksanakan pada hari
Kamis $ "ktober !#1$
8/18/2019 Conlap ALT 2
2/12
:% TUJUAN )
Untuk menentukan kualitas mikrobiologi sampel makanan padat berdasarkan Angka
Lempeng Total koloni bakteri.
D% DASAR TEORI )
Teknik enumerisasi merupakan suatu &ara untuk menghitung jumlah spesies atau
kelompok mikroorganisme per gram atau per mili bahan yang digunakan sebagai media biakan
'(aluyo !##)*.
Untuk menentukan jumlah bakteri dapat digunakan beberapa &ara+
1. ,umlah bakteri se&ara keseluruhan 'total cell count *. %ada &ara ini dihitung semua bakteri
baik yang hidup maupun yang mati. -isebut juga Angka Lempeng Total 'ALT*.
!. ,umlah bakteri yang hidup 'viable count *. ara ini menggambarkan jumlah sel yang hidup
sehingga lebih tepat bila dibandingkan teknik pada butir 1 '(aluyo !##)*.
Koloni yang tumbuh tidak selalu berasal dari 1 'satu* sel mikroorganisme karena
beberapa mikroorganisme tertentu &enderung untuk berkelompok atau berantai. Bila
ditumbuhkan pada media dan lingkungan yang sesuai kelompok bakteri ini hanya akan
menghasilkan 1 'satu* koloni. Berdasarkan hal tersebut seringkali digunakan istilah
colonyforming units '/U0ml* untuk perhitungan jumlah mikroorganisme hidup. ebaiknya
hanya lempengan agar yang mengandung $#2$## koloni saja yang digunakan dalam perhitungan.
Lempengan agar dengan jumlah koloni tinggi '3$## koloni* sulit untuk dihitung sehingga
kemungkinan kesalahan perhitungan sangat besar 'Lay 144)*.
Uji Angka Lempeng Total 'ALT* dan lebih tepatnya ALT aerob meso5il atau anaerob meso5il
menggunakan media padat dengan hasil akhir berupa koloni yang dapat diamati se&ara 6isual
berupa angka dalam koloni'&5u* per ml0g atau koloni01##ml. %rinsip pengujian Angka Lempeng
Total menurut Metode Analisis Mikrobiologi yaitu pertumbuhan koloni bakteri aerob meso5il
setelah &uplikan diinokulasikan pada media lempeng agar dengan &ara tuang dan diinkubasi padasuhu yang sesuai.
%engen&eran sampel membantu untuk memperoleh penghitungan jumlah yang benar
namun pengen&eran yang terlalu tinggi akan menghasilkan lempengan agar dengan jumlah
8/18/2019 Conlap ALT 2
3/12
koloni yang rendah '7$# koloni*. Lempengan demikian tidak absah se&ara statistik untuk
digunakan dalam penghitungan '(aluyo !##)*.
-alam penghitungan mikroorganisme seringkali digunakan pengen&eran. -i laboratorium
pengen&eran dilakukan dengan botol pengen&er namun dapat pula menggunakan tabung.
Lempengan yang dapat digunakan dalam penghitungan bakteri ialah lempengan yang
mengandung $#2$## koloni. ,umlah bakteri permiliter ialah jumlah koloni dikalikan 5aktor
pengen&er 'Lay 144)*.
Keuntungan dari metode pertumbuhan agar atau metode uji Angka Lempeng Total adalah
dapat mengetahui jumlah mikroba yang dominan. Keuntungan lainnya dapat diketahui adanya
mikroba jenis lain yang terdapat dalam &ontoh. Adapun kelemahan dari metode ini adalah +
1. Kemungkinan terjadinya koloni yang berasal lebih dari satu sel mikroba seperti pada
mikroba yang berpasangan rantai atau kelompok sel. Kemungkinan ini akan
memperke&il jumlah sel mikroba yang sebenarnya.
!. Kemungkinan adanya jenis mikroba yang tidak dapat tumbuh karena penggunaan jenis
media agar suhu p8 atau kandungan oksigen selama masa inkubasi.
$. Kemungkinan ada jenis mikroba tertentu yang tumbuh menyebar di seluruh permukaan
media agar sehingga menghalangi mikroba lain. 8al ini akan mengakibatkan mikroba
lain tersebut tidak terhitung.
). %enghitungan dilakukan pada media agar yang jumlah populasi mikrobanya antara $# 9
$## koloni. Bila jumlah populasi kurang dari $# koloni akan menghasilkan penghitungan
yang kurang teliti se&ara statistik namun bila lebih dari $## koloni akan menghasilkan
hal yang sama karena terjadi persaingan diantara koloni.
%enghitungan populasi mikroba dapat dilakukan setelah masa inkubasi yang umumnya
membutuhkan :aktu !) jam atau lebih 'Bu&kle 14;
8/18/2019 Conlap ALT 2
4/12
&. %ipet steril
d. =nt Kas0 Laminar Air /lo:
e. Labu =rlenmeyer 1## ml
5. Tabung reaksi
g. Mortar dan pistle
h. Blender
Bahan yang dibutuhkan adalah+
a. ampel bahan makanan Prol Tape padat 1# gram
b. Medium lempeng >apek Agar 'A* ? buah
&. Larutan air pepton #1 @ sebanyak 4# ml
d. tabung reaksi berisi larutan air pepton #1 @ 4 ml
e. Al&ohol
8/18/2019 Conlap ALT 2
5/12
8% :ara Ker"a
Menyiapkan 1 labu =rlenmeyer berisi 4# ml air pepton #1@ dan tabung
reaksi berisi air pepton #1@ 4 ml lalu diberikan kode A B - dan =.
Menyiapkan ? buah medium lempeng yang diberikan kode A B - = dan /.
Menimbang 1# gram bahan makan padat kemudian se&ara aseptis memasukkan ke
dalam 4# ml air pepton #1@ dalam labu =rlenmeyer tersebut kemudian mengambil
1 ml suspense dalam tabung reaksi A lalu ko&oklah dengan memutar diantara kedua
tangan atau dengan shaker.
Mengambil 1 ml suspense dalam tabung reaksi B. Melakukan pengen&eran
bertahap tersebut sampai dengan tabung reaksi = maka diperoleh suspense
dengan tingkat pengen&eran 1#21 1#2! 1#2$ 1#2) 1#2 1#2?.
Mengambil se&ara aseptis 1 ml masing2masing suspense tersebut lalu diper&ikan di
atas permukaan medium lempeng dengan kode yang sesuai. Menutup &a:an petri
berisi medium lempeng tersebut lalu memutar2mutar &a:an petri tersebut sehingga per&ikan inokulum tadi tersebar se&ara merata pada permukaan medium lempeng.
Menginkubasikan biakan pada medium lempeng tersebut pada suhu $
8/18/2019 Conlap ALT 2
6/12
8/18/2019 Conlap ALT 2
7/12
. 1# 2 $;
?. 1# 2? 1
G% ANALISIS DATA
N Tingkat Pengen=eran Jumlah Klni Bakteri
1. 1# 21 !)#
!. 1# 2! !$;
$. 1# 2$ 4;
). 1# 2) )!
. 1# 2 $;
?. 1# 2? 1 ' TU-*
%ada praktikum kali ini kelompok kami mengunakan makanan Prol tape yang diperoleh
dari kantin MI%A UM. -igunakan beberapa tingkat pengen&eran mulai dari 1# 21 1# 2! 1# 2$
1# 2) 1# 2 dan 1# 2?. Berdasarkan ketentuan perhitungan jumlah total koloni bakteri dalam tiap
mL atau gram sampel makanan apabila data yang dihasilkan terdapat dua atau lebih tingkat
pengen&eran yang menghasilkan antara $#2$## koloni maka yang digunakan adalah data
dengan tingkat pengen&eran tertinggi yakni tingkat pengen&eran 1#2) dan 1#2 pada praktikum
ini. Untuk men&ari nilai angka lempeng total maka dilkukan perbandingan antara hasil
tertinggi dan terendah dari kedua tingkat pengen&eran perhitungannya sebagai berikut +
8/18/2019 Conlap ALT 2
8/12
ALT Koloni pada T.%engen&eran 1#2) E D D 1#
E )! D 101#2) D 1#
E )! D 1#?
ALT Koloni pada T.%engen&eran 1#2 E D D 1#
E $; D 101#2 D 1#
E $; D 1#<
%erbandingan E $; D 1#?
)! D 1#?
E 4#
8asil perbadingan antara nilai tertinggi dan terendah adalah 4# '3 !* maka yang
dilaporkan hasil dari kedua pengen&eran ini adalah yang terke&il yakni )! D 1#? &5u0g.
Berdasarkan Badan %enga:asan "bat dan makanan Fo. $ bah:a kue berbasis sayur umbi2
umbian dan ka&ang2ka&angan 'gadung singkong talas kentang ubi jalar jamur dan
sebagainya* batas kontaminasi ALT adalah sebesar 1 D 1#) &5u0g maka &ake tape yang dijual
di kantin MI%A dengan nilai ALT sebesar )! D 1#?
&5u0g melebihi ambang batas dan tidak layak dikonsumsi.
&% PEMBA&ASAN
%raktikum yang bertujuan untuk menentukan kualitas mikrobiologi sampel makanan
padat berdasarkan Angka Lempeng Total 'ALT* koloni bakteri ini dia:ali dengan membiakan
bakteri yang terdapat pada makanan padat pada medium lempeng. Terlebih dahulu makanan
padat yaitu Prol Tape tersebut dilarutkan ke dalam larutan air pepton #1@. Makanan padat
ditimbang sebanyak 1# gram dilarutkan ke dalam 4# ml larutan pepton #1@. ampuran
tersebut kemudian diko&ok hingga terbentuk suspensi. elanjutnya dilakukan pengen&eran
pada suspensi tersebut hingga tingkat pengen&eran 1#2?. %engen&eran ini bertujuan untuk
mendapatkan jumlah biakan yang representati5 untuk dilakukan perhitungan.
8/18/2019 Conlap ALT 2
9/12
Gam!ar (engen=eran !ertingkat%
Masing2masing hasil tingkat pengen&eran yaitu 1#21 1#2! 1#2$ 1#2) 1#2 1#2? diambil
1 ml untuk diper&ikan diatas permukaan medium lempeng. etelah &a:an petri ditutup &a:an
petri diputar2putar sehingga per&ikan sampel merata pada permukaan medium lempeng.
etelah rata sampel biakan tersebut kemudian diinkubasikan pada suhu $
8/18/2019 Conlap ALT 2
10/12
%erhitungan jumlah koloni bakteri didapatkan+ !)# koloni pada tingkat pengen&eran
1#21 !$; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2! 4; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2$ )!
koloni pada tingkat pengen&eran 1#2) $; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2 dan 1 koloni
pada tingkat pengen&eran 1#2?. Berdasarkan hasil hitungan total koloni tersebut terdapat
pengen&eran yang menghasilkan jumlah koloni antara $# sampai $## sehingga untuk
menentukan nilai Angka Lepeng Total digunakan ketentuan nomor yaitu+ G Jika terdapat
dua atau lebih tingkat pengenceran yang menghasilkan jumlah antara 30 sampai 300 koloni
dan perbandingan antara hasil tertinggi dan terendah dari tingkat pengenceran terendah ! "
maka harus ditentukan rerata dari kedua nilai tersebut dengan memperhitungkan tingkat
pengencerannya. Jika perbandingan antara hasil tertinggi dan hasil terendah # " maka yang
dilaporkan hanya yang terkecil$.
Berdasarkan ketentuan tersebut maka yang dapat digunakan untuk perhitungan Angka
Lempeng Total adalah pada tingkat pengen&eran 1#2) ')! koloni* dan pada tingkat
pengen&eran 1#2 '$; koloni*. Angka Lempeng Total pada tingkat pengen&eran 1# 2) didapatkan
)! D 1#? &5u0g dan Angka Lempeng Total pada tingkat pengen&eran 1#2 didapatkan $; D 1#<
&5u0g. %erbandingan antara hasil tertinggi dan hasil terendah yang didapat adalah 4 atau lebih
dari ! sehingga nilai ALT yang digunakan adalah )! D 1#? &5u0g.
Untuk menentukan layak atau tidak layaknya suatu bahan makanan untuk dikonsumsi
maka harus di&o&okkan dengan ketentuan Badan %enga:as "bat dan Makanan atau Badan
%"M. %ada tabel ketentuan dari Badan %"M dapat dilihat batas minimal koloni yang
digunakan untuk menentukan kelayakan makanan dikonsumsi. Prol Tape yang digunakan
sebagai sampel penelitian termasuk dalam ketentuan bahan makanan nomor $ yaitu
G golongan kue berbasis sayur umbi%umbian dan kacang%kacangan &gadung singkong talas
kentang ubi jalar jamur'. Holongan ini memiliki batas maksimal jumlah koloni 1 D 1#) &5u0g.
Berdasarkan hasil hitungan ALT koloni di dapatkan angka )! D 1#
?
&5u0g
atau lebih dari batasmaksimal yang ditentukan oleh Badan %"M. -engan kata lain dapat dikatakan bah:a Prol
Tape yang dibeli dari kantin /MI%A UM tersebut tidak layak konsumsi.
Makanan yang tidak layak konsumsi merupakan makanan yang tidak memenuhi
standar mutu pangan yang telah ditentukan. -alam Undang2Undang %angan Tahun 144?
dijelaskan bah:a standar mutu pangan adalah spesi5ikasi atau persyaratan teknis yang
dilakukan tentang mutu pangan misalnya dari segi bentuk :arna atau komposisi yang
disusun berdasarkan kriteria tertentu yang sesuai dengan perkembangan ilmu pengetahuan
dan teknologi serta aspek lain yang terkait. tandar mutu pangan tersebut men&akup baik
pangan olahan maupun pangan yang tidak diolah. -alam pengertian yang lebih luas standar
8/18/2019 Conlap ALT 2
11/12
yang berlaku bagi pangan men&akup berbagai persyaratan keamanan pangan gi>i mutu dan
persyaratan lain dalam rangka men&iptakan perdagangan pangan yang jujur misalnya
persyaratan tentang bahan olahan dan pemasaran
e&ara 5isik Prol Tape yang dijadikan objek pengamatan memiliki &iri antara lain
:arna+ &oklat kekuningan bau+ tape yang masih segar rasa+ manis asam dan kenyal.
Berdasarkan karakteristik tersebut se&ara 5isik Prol Tape yang diamati masih dalam kondisi
baik dan menarik untuk dikonsumsi. Famun setelah di hitung ALT terbukti makanan tersebut
tidak layak untuk dikonsumsi. Ada beberapa kemungkinan yang mengakibatkan Prol Tape
tersebut tidak layak untuk dikonsumsi antara lain kemungkinan bahan2bahan atau peralatan
yang digunakan dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses
penjualannya yang terpapar se&ara langsung dengan udara dan hiruk pikuk manusia. Prol
Tape di kantin /MI%A UM dijual se&ara terbuka tanpa ada penutupnya yang terpapar dengan
udara bebas dan akti6itas penjual dan pembeli. ehingga kondisi lingkungan sekitar tempat
penjualan tidak higienis.
I% DISKUSI
-% Bera(akah angka lem(eng ttal klni !akteri (a#a !e!era(a ma=am makanan 6ang
#i(eriksa>Makanan yang diteliti Angka Lempeng Total koloni bakteri adalah Prol Tape. Angka
Lempeng Total yang didapat adalah )! D 1#? &5u0gr.
8% Bagaimana kualitas mikr!ilgi makanan 6ang telah #i(eriksa !er#asarkan angka
lem(eng ttal klni !akteri >
Berdasarkan peraturan Kepala Badan %enga:as "bat dan Makanan Republik Indonesia
tentang penetapan batas maksimum &emaran mikroba dan kimia dalam makanan pada Kue
!er!asis sa6ur' um!i?um!ian #an ka=ang?ka=angan ,ga#ung' singkng ,ta(e4' talas'
kentang' u!i "alar' "amur4 adalah -@-/
*
=$u+g 'BFI B%"M !##4*. %ada makanan yangditeliti merupakan prol tape yang berbahan dasar tape 'hasil 5ermentasi dari singkong*
didapatkan hasil *'8 @ -/1 =$u+gr berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bah:a
makanan tersebut ti#ak la6ak #iknsumsi karena melebihi batas maksimum dalam hal ini
batas maksimum menurut BFI B%"M '!##4* adalah konsentrasi maksimum &emaran
yang dii>inkan terdapat dalam makanan.
8/18/2019 Conlap ALT 2
12/12
.% Darimanakah asal !akteri kntaminan (a#a makanan terse!ut>
Bakteri kontaminan pada makanan Prol Tape kemungkinan berasal dari bahan2bahan
yang digunakan dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses penjualannya yang terpapar se&ara langsung dengan udara. Bakteri di udara akan menempel
tumbuh dan kembang biak di makanan tersebut dalam hal ini adalah Prol Tape. Makanan
merupakan sumber nutrisi 'substrat* yang baik bagi pertumbuhan bakteri.
J% KESIMPULAN
Berdasarkan hasil hitungan ALT koloni didapatkan angka )!D1#? &5u0g atau lebih dari
batas minimal yang ditentukan oleh badan %"M '1D1#) &5u0g*. berdasarkan perhitungan
tersebut dapat dikatakan bah:a Prol Tape yang dibeli dari kantin MI%A UM tersebut tidak
layak konsumsi. Ada beberapa kemungkinan yang mengakibatkan Prol Tape tersebut tidak
layak untuk dikonsumsi antara lain kemungkinan bahan2bahan atau peralatan yang digunakan
dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses penjualannya yang
terpapar se&ara langsung dengan udara dan hiruk pikuk manusia.
K% DA