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B DIRECCION DE INVESTIGACION Y ESTUDIOS DE POST GRADO
"CONSUMO DE FRUCTOSA POR
EL PREPARADO CARDIOPULMQNAR
TESIS QUE EN OPCION AL GRADO DE
MAESTRO EN CIENCIAS
PRESENTA
DRA. ELV1A ENGRACIA PATRICIA HERRERA G
I'M Z6658 FM 1984 H4
1020071161
UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON
FACULTAD DE MEDICINA
SUB DIRECCION DE INVESTIGACION Y ESTUDIOS DE POST GRADO
"CONSUMO DE FRUCTOSA POR EL PREPARADO CARDIOPULMONAR"
tesis que en opción al grado de:
MAESTRO EN CIENCIAS ' . •
presenta
DRA. ELVIA ENGRACIA PATRICIA HERRERA'GUTIERREZ
Monterrey, N.L., Mayo de 1984.
133657
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA
FACULTAD DE MEDICINA
UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON
Asesor:
DR. JOSE PISANTY 0.
A MI MADRE:
Quien con su Amor y rectitud me supo impulsar.
A MI ESPOSO:
Por su paciencia, carino y apoyo incondicional.
A MIS HIJOS:
Quien con sus tiernas sonrisas me dierón valor a
continuar.
A MIS HERMANOS:
Martha, Enrique e Hilario. Por hacerme fáciles
los momentos díficiles.
A MI MAESTRO:
Dr. José Pisanty 0. Que con su ejemplo de tena
cidad y sabiduría sabe despertar la inquietud
del estudiante.
A MI AMIGA: Aida Aracely Peña G. Por su compañía y amplia •
colaboración en la realización de esta Tesis.
MI AGRADECIMIENTO:
Mas Sincero a todas las personas que en alguna forma me apoyarán para realizar esta Maestría. En especialL al Lic. José Hugo Martínez Ortíz, Rector -de la U.J.E.D.
Al Dr. Alejandro Peschard Fernández, Director de la Es-
cuela de Medicina de la U.J.E.D.
A mi Maestro: Dr. Reynaldo Humberto Milla V.
A mis Maestros, Amigos y Compañeros por su valiosa co-
laboración:
MSc. Rosa Blanca Montemayor, LCB. Ma. Luisa Garza de
Gza., Dra. Lupita Zapiain de Cerecedo, Ing. Humberto Mo
ra, Dr. Ricardo H. Chávez Chávez, LCB. Sonia L. de Cas-
tillo M. , Dr. Jesús R. Tavitas, Martha E. Galindo L. e
Idalia Gpe. González de Sauceda.
I N D I C E
CAPITULO PAGINA
I INTRODUCCION 1
II MATERIAL Y METODOS 4
III RESULTADOS g
IV DISCUSION Y CONCLUSIONES 21
V RESUMEN 23
VI REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 25
APENDICE
CAPITULO I
I N T R O D U C C I O N
MaTkov en 1980 (10) demostró que la fructosa difosfato
cuando se administra a los perros con isquemia regional
del miocardio experimentalmente inducida, causa regre-
sión de los cambios electrocardiográficos isquémicos y
aumenta significativamente el ATP (Adenosintrifosfato)
y CP (Creatinfosfato)tanto en miocardio isquémico como
en el normalmente perfundido; extrapolando estos resul-
tados parecería que la fructosa difosfato puede cierta-
mente restaurar la actividad deprimida del ciclo de Emb
den-Meyerhof en el miocardio isquémico.
Estas conclusiones sugieren una base racional para e m -
plear fructosa difosfato en situaciones clínicas como -
un agente para limitar o disminuir la magnitud del in-
farto agudo del miocardio.
La fructosa en otras ocasiones ha sido utilizada (17) -
en forma intravenosa en casos de cetoacidosis diabética
y lesión hepática debido a cuatro ventajas teóricas so-
bre la glucosa.
1.- Es metabolizada más rápidamente
2.- Su utilización no depende de la insulina
3.- Es anticetogénica
4.- Causa menos lesión venosa
Los experimentos de Nikkila (13) demostraron que el pa-
ciente diabético (adulto) tratado con y sin insulina
pueden consumir 75 gramos de fructosa diariamente sin -
ningún efecto adverso.
Estas conclusiones están apoyadas por Turner y colabora
dores (15), quienes aseguran igualmente que las condi-
ciones basales no se modifican y que inclusive las die-
tas pueden ser sometidas a variaciones en cuanto al con
tenido de grasas y proteínas.
Crapo y colaboradores (2) también mencionan que la fruc
tosa se puede utilizar por vía oral.
Sin embargo algunos investigadores (17) aseguran que la
fructosa es metabolizada únicamente en el hígado donde
produce aumento en la formación de lactato, agotamiento
de los fosfatos de alta energía, aumento en la forma-
ción de ácido úrico e inhibición de la síntesis protei-
ca. Hessov (4) menciona que la fructosa se ha empleado
como tratamiento en casos de intoxicación alcohólica in
debidamente, ya que existen varias contraindicaciones.
Observando las controversias que existen entre los i n -
vestigadores con respecto a la utilización de la fructo
sa, consideramos importante efectuar un estudio con el
objeto de especificar el consumo de la fructosa en un -
tejido que sea lo suficientemente estable con mínima in
terferencia de otros, por lo que elegimos el Preparado
Cardiopulmonar. Planteando en el presente trabajo co-
mo hipótesis:
Que el Preparado Cardiopulmonar consume fructosa y que
existe la necesidad de cuantificar dicho consumo.
CAPITULO II
MATERIAL Y METODOS
En este trabajo se necesitaron 2 perros por experimento
no importando raza ni sexo y como único requisito que -
fluctuaran entre 15 y 20 kgs. de peso.
Se practico Preparado Cardiopulmonar a uno de ellos y -
el otro se sometio a venodisección para obtener sangre
para el reservorio correspondiente, en un total de 30 -
experimentos.
El Preparado Cardiopulmonar se practicó de acuerdo a la
técnica de Starling.
Se anestesia el perro con pentobarbital sódico,33 mg. -
por cada kg. de peso, intravenoso ó intraperitoneal, se
canula tráquea y se conecta el respirador automático; -
se disecan y se cortan los nervios vagos. Se abre el tó
rax por la línea media con la ayuda de un esternotomo y
se procede a disecar los 6 vasos que se utilizaron que
son: aorta, tronco braquiocefálico, vena ázigos, arte-
ria subclavia, vena cava superior y vena cava inferior.
La vena ázigos y la subclavia se ligan inmediatamente
después de disecadas, la vena cava superior y el tron-
co braquiocefálico se canulan. Este último se conecta
a una resistencia periférica midiendo el flujo a tra-
vés de un sistema Strohmur y de aquí, por medio de un
conector de látex llegará a un serpentín que se encuen
tra en un baño de temperatura constante a 38 ó 39°C. -
pasando a un reseryorio que conduce la sangre a la ve-
na cava superior; cuando lo anterior se ha efectuado -
se liga la aorta y enseguida la vena cava inferior y -
en este momento queda aislada la circulación cardiopul_
monar.
Se realizaron un total de 30 experimentos, divididos -
en 2 grupos: 1?- Con carga normal, colocando el reser-
vorio a 6 cms. de altura sobre la aurícula derecha y -
2°.- con sobrecarga colocando el reservorio a 21 cms. -
de altura sobre la aurícula derecha.
En ambos casos se tomaron mués tras (testigos ó inicia-
les) y enseguida se agregó 1 gramo de fructosa por li-
tro de sangre y se procedió a tomar muestras cada 15 -
minutos por espacio de 4 horas aproximadamente - deter
minando glucosa y fructosa.
La determinación de glucosa se efectuó con tirillas de
glucosa-oxidasa inmovilizada y leídas en reflectómetro
tipo Dextrometer. La fructosa se determinó de acuerdo
a la técnica de Kulka ( 6 ) y de acuerdo a la técnica
utilizada por Peña y Pisanty (14) se efectuó hidroliza
do con papaina.
A continuación se describe la técnica:
Sangre fresca a la que se le agrega fluoruro de
sodio (inhibidor enzimàtico).
Reactivo de cetosas - consta de dos soluciones:
A) Resorcinol 0.05% (peso/volumen) en etanol absolu
to.
B) HC1 (densidad 1.18) con PeNH4 (SO4) .12 HzO -
0.216 Gramos/litro.
Acido tricloroacético al 401, agua destilada, baño
de temperatura constante.
Procedimiento General:
Primeramente se toma 1 mililitro de sangre, y se le
agregan 9 mililitros de agua destilada para hemolizarla,
posteriormente se precipitan las proteínas agregando 1
mililitro de ácido tricloroacético, se centrifuga y se
separa el sobrenadante, y el precipitado de proteínas -
se redisuelve con 3 mililitros de agua destilada agre-
gándole 350 miligramos de papaina y se incuba por 4 ho-
ras a 37°C y se procede inmediatamente a centrifugar.
Tanto del sobrenadante como del resultante de la hidró-
lisis, se toman 2 mililitros de cada uno y se ponen en
sendos tubos de 12 milimetros X 125 milimetros a estos
se agregan 3 mililitros de solución A y 3 mililitros de
solución B. El contenido de cada tubo se mezcla bien y
se cubre con su correpondiente tapón, se sumergen en un
baño de agua a 80°C por 40 minutos y un blanco de reac-
tivos es incluido en cada grupo; pasado este tiempo se
sacan los tubos y se introducen en un baño con hielo.
Se determina la fructosa del tubo que contiene el
sobrenadante y del tubo que contiene el hidxolizado
de papaina sumando ambos resultados, siendo aproxima
damente el 30% del resultado lo que corresponde al -
sobrenadante y el 701 restante al hidrolizado de pa-
paina.
Las soluciones son comparadas con un standard, las -
extinciones fueron medidas a una longitud de onda es_
pecífica (480 nanómetros) la cual se determinó des-
pués de hacer un barrido del espectro y posteriormen
te una curva de calibración en un espectrofotómetro
Beckman de cuarzo.
El color rojo producido después de calentar a 80°C -
por 40 minutos y medido a 480 nanómetros fué reprodu
cible y recuperamos mas del 701 del azúcar añadido,
dicho color es estable por más de una hora.
CAPITULO III
R E S U L T A D O S
En un total de 30 experimentos divididos en dos grupos,
observamos que el Preparado Cardiopulmonar consume fruc
tosa en ambos grupos; con carga normal (manteniendo el
reservorio 6 cms. por arriba de la aurícula derecha) el
consumo es menor y con sobrecarga (manteniendo el reser
vorio 21 cms. por arriba de la aurícula derecha) el con
sumo es mayor, (en las tablas I y II podemos observar
los resultados de las concentraciones de fructosa de ca
da uno de los experimentos) las dos muestras iniciales
de cada experimento se determinaron antes de agregar la
fructosa mostrándonos un promedio de 24 miligramos por
decilitro. Posteriormente al agregar un gramo de fruc-
tosa al reservorio correpondiente (el cual contiene un
litro de sangre) se efectuaron determinaciones de fruc-
tosa cada 15 minutos alcanzando una concentración en
los primeros 15 minutos de 95 miligramos por decilitro
de fructosa. Pasando un lapso de 4 horas aproximadamen
te la concentración promedio fué de 51 miligramos por -
decilitro de fructosa en condiciones de carga normal, y
tan solo en 2 horas la concentración promedio fué de 49
miligramos por decilitro de fructosa en condiciones de
sobrecarga (Tabla V y VI y Gráficas I y II en las cua-
les podemos observar intervalos de confianza para un 95%
de confiabilidad de acuerdo a nuestros resultados esta-
dísticos). Efectuamos comparación de los valores de -
fructosa en porcentaje con carga normal y sobrecarga -
de acuerdo al tiempo de medición (Tabla VI y Gráfica -
III).
Podemos observar las concentraciones de fructosa libre
(sobrenadante) y de fructosa conjugada (hidrolizado) -
antes y después de agregar fructosa (Tablas III y IV).
Comparamos consumo de glucosa y fructosa con carga ñor
mal y sobrecarga teniendo concentraciones iniciales
promedio de acuerdo a datos estadísticos de 150 mili-
gramos por decilitro de glucosa, determinando a los
165 minutos glucosa de 0 miligramos por decilitro en -
condiciones normales y en tan solo 90 minutos determi-
naciones de glucosa de 0 miligramos por decilitro en -
condiciones de sobrecarga (Gráficas IV y V).
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CONCENTRACION DE FRUCTOSA CADA 15 MIN. EN EL PREPARADO CARDIOPULMONAR.
GPO. I (Carga Normal) GPO.II (Sobrecarga)
MUESTRA TIEMPO MUESTRA TIEMPO
1.- 95.9 mgA 15' 1.- 86,8 mg.l 15'
2, - 95.9 " " 30' 2, - 79,66 " " 30 '
3.- 97.8 M " 45' 3.- 72,80 » » 45'
4t- 91,13 " " 60' 4,- 68,13 " " 60'
5.- 87.20 " " 75' 5.r 63, " » 75'
6.- 86,53 " " 90' 6.- 59,5 " » 90'
7. - 82,86 " " 105' 7.- 55.28 " " 105'
8.- 78 " " 120' 8,- 49 " " 120'
9.- 78.06 " " 135'
10.- 74.71 " " 150'
11.- 65. " " 165'
12.- 64.69 " " 180'
13.- 62.69 " " 195'
14.- 60.41 " " 210'
15.- 51.55 " M 225'
TABLA V
Datos promedio obtenidos de los 30 experimentos divididos en 2 grupos. 15 experimentos con carga normal CTabla I) deter minando 15 muestras promedio y 15 experimentos con sobrecar-ga (Tabla II) determinando 8 muestras promedio, Las determi naciones se efectuarón después de añadir 1 gr. de fructosa -por litro de sangre,
Tiempo Carga Normal Sobrecarga Diferencia Porcentaje 1 5 ' 9 5 mg. 8 6 mg. 9 mg. 1 0 1
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9 0 ' 8 6 " 5 9 !' 2 7 " 3 1 ' *
1 0 5 ' 8 2 " 5 5 " 2 7 " 3 3 "
1 2 0 1 7 8 M 4 9 " 2 9 " 3 7 "
1 3 5 ' 7 8 " - - -
1 5 0 ' 7 4 " - T* -
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TABLA VI
Comparación de la concentración de fructosa en el Preparado CardiopulmonaT - con carga normal y sobrecarga de acuerdo -al tiempo de medición.
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CAPITULO IV
DISCUSION Y CONCLUSIONES
La utilización y los efectos nocivos de la fructosa han
sido muy controvertidos (2,4,5,9,10,11,13,15 y 17).
Clásicamente se han aceptado los reportes de que existe
en concentraciones muy bajas en nuestro organismo (1,3,
7,8,12 y 16) y se ha supuesto que solamente puede ser -
utilizada primero en forma de glucógeno almacenado en -
hígado y luego de glucosa. En el momento de hacer estu
dios de dosificaciones mas acuciosas de fructosa paTece
evidente que se dispone de hecho de una cantidad de - -
fructosa previamente no detectada, conjugada o combina-
da en alguna forma. Es pues importante saber si podre-
mos o no utilizar esa fructosa, ya que su disponibili--
dad es un apoyo importante sobre todo en el caso de los
diabéticos a los cuales puede administrarse con menos -
limitaciones que la glucosa; si a eso agregamos la p o -
sible utilización de fosfato de fructosa (que indudable
mente se encuentra en el interior de la célula) en el -
infarto de miocardio eso hace mas interesante el estu-
dio de la posible utilización de esa substancia.
Nuestro estudio revela que el Preparado Cardiopulmonar
sí consume fructosa en condiciones normales, haciendo -
notar que las observaciones entre los 15 y los 45', pr£
sentan diferencias que no son significativas y por lo -
tanto es de suponerse que se deba a irregularidades - -
atribuibles a procesos de redilución entre la sangre
circulante y el reservorio. Y que en condiciones de
sobrecarga el consumo es mayor, de igual manera a lo
que sucede con el consumo de glucosa, a diferencia -
de que la glucosa se consume en menor tiempo.
Esto nos permite sugerir la utilidad de la fructosa
como reserva energética y justificar con mayor razón
la utilización de la misma en forma pura. Antigua-
mente la glucosa y la fructosa estaban prohibidas en
las dietas de los diabéticos; actualmente sabemos —
que la fructosa se encuentra en una gran variedad de
alimentos disponibles, los cuales pueden ser ingeri-
dos por el paciente diabético.
CAPITULO V
R E S U M E N
En esta serie de experimentos se midió consumo de fruc-
tosa por el Preparado Cardiopulmonar, el cual se llevó
a cabo de acuerdo a la técnica de Starling, y la fructo_
sa se determinó de acuerdo a la técnica de Kulka (6) y
según técnica Peña - Pisanty (14) se hidrolizó con pa--
paina. Se trabajaron un total de 30 experimentos divi-
didos en 2 grupos, los primeros 15 se trabajaron en con
diciones normales manteniendo el reservorio a 6 cms.
por arriba de la aurícula derecha y los 15 restantes en
condiciones de sobrecarga manteniendo el reservorio a -
21 cms. por arriba de la aurícula derecha.
Los resultados muestran que el Preparado Cardiopulmonar
consume fructosa en condiciones normales, pero que su -
consumo es mayor en condiciones de sobrecarga. En nues_
tras muestras iniciales el promedio de la fructosa es -
de 24 miligramos por decilitro, al agregar la fructosa
alcanza la concentración de 95 miligramos por decilitro
en 15 minutos y pasado un lapso aproximadamente de 4 ho
ras obtenemos 51 miligramos por decilitro con carga ñor
mal, mientras que en condiciones de sobrecarga en tan -
solo 2 horas determinados 49 miligramos por decilitro.
Comparamos el consumo de fructosa y glucosa, determi- -
nando en promedio 150 miligramos por decilitro de glu-
cosa observando que en condiciones normales en 2 horas
45 minutos obtenemos glucosa de 0, mientras que en con
diciones de sobrecarga en tan solo 1 hora 30 minutos -
obtenemos el mismo nivel.
Se comprobó que el Preparado Cardiopulmonar consume
fructosa y que es importante su estudio ya que no se -
requiere influencia de algunas secreciones, principal-
mente insulina,lo que nos permite sugerir la utilidad
de la fructosa como reserva energética y justificar
con mayor razón la utilización de la misma en forma pu
ra.
CAPITULO VI
B I B L I O G R A F I A
Bartlett, G.R.: Human rea cell glycolytic interme-
diates. J. Biol. Chem 234: 449, 1959.
Crapo, Phyllis, A., et.al.:The effects of oral
fructose, sucrose and glucose in subjects with
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