Cosa c’è nei vaccini:

eccipienti, additivi e altro?

Franco Giovanetti

ASL CN2 Alba Bra - Regione Piemonte

Additivi: la prospettiva degli

antivaxxers

Sfatare i miti

Ora incollo sul paraurti un

adesivo controle vaccinazioni

Mettilo tra“La terra

è piatta” e “L’evoluzione è un falso”

Eccipiente/Additivo

• Una sostanza di per sé

farmacologicamente inerte

• Quando è usata in combinazione con

principi attivi, può produrre diversi benefici

Eccipienti/Additivi dei vaccini

• Adiuvanti

• Antimicrobici/Conservanti

• Stabilizzanti

• Tamponi (Buffers)

• Altre sostanze chimiche

Adiuvanti

Che cosa fanno gli adiuvanti?

• Incrementano e modulano la risposta immune senza avere di per sè uno specifico effetto antigenico

• Incrementano l’uptake da parte delle cellule presentanti l’antigene

• Attivano le cellule presentanti l’antigene

• Inducono la produzione di citochine e complemento

Alluminio

Fonti di Al

Al nel latte

• Latte materno: range 5 – 380 mcg Al/L con un

valore centrale intorno a 40 mcg/L

• Latte in polvere per neonati/lattanti: in media

225 mcg Al/L

• Latte di soia (formulazione per neonati/lattanti):

460 – 930 mcg/L

Sali di Al

• Alluminio idrossido: non è propriamente

Al(OH)3, in realtà è AlOOH (ossi-idrossido

di alluminio [composto cristallino])

• Alluminio fosfato: alcuni gruppi ossidrilici

dell’Al idrossido sono sostituiti da gruppi

fosfato

Come fanno gli adiuvanti a base di Al a

potenziare la risposta immune?

Tre ipotesi

• Meccanismo di deposito (spiegazione controversa): l’antigene è rilasciato lentamente al fine di stimolare la produzione di anticorpi

• Reclutamento di vari tipi di leucociti (neutrofili, eosinofili,macrofagi, monociti e cellule dendritiche) in corrispondenza del sito d’iniezione

• Facilitazione dell’immunità umorale attraverso le risposte immuni di tipo Th2

Farmacocinetica del fosfato di Al

Mitkus RJ et al. Updated aluminum pharmacokinetics following infant exposures through diet and vaccination. Vaccine 2011;29:9538– 9543

MRL= Minimal Risk Level

Farmacocinetica dell’idrossido di Al

Mitkus RJ et al. Updated aluminum pharmacokinetics following infant exposures through diet and vaccination. Vaccine 2011;29:9538– 9543

MRL= Minimal Risk Level

Profilo di sicurezza degli adiuvanti

a base di Al

“We found no evidence that aluminium salts in vaccines cause

any serious or long-lasting adverse events”.

• The FDA analysis indicates that the body burden

of aluminium following injections of aluminium-

containing vaccines never exceeds safe US

regulatory thresholds

• GACVS concludes that this comprehensive risk

assessment further supports the clinical trial and

epidemiological evidence of the safety of

aluminium in vaccines.

Miofascite macrofagica (MMF)

• Lesione istopatologica di origine ignota, reperita tramite biopsia del muscolo deltoide in soggetti adulti

• Le biopsie muscolari mostrano infiltrazione del tessuto muscolare ad opera di macrofagi PAS-positivi contenenti inclusioni cristalline

• Ipotesi: la MMF potrebbe rappresentare una inusuale reazione alla somministrazione i.m. di vaccini contenenti sali di Al?

• La MMF è stata osservata quasi esclusivamente in Francia

MMF e malattia sistemica

• MMF è stata rilevata in pazienti sottoposti a biopsia del muscolo deltoide in seguito a mialgie diffuse, artralgie o debolezza muscolare

• Alcuni autori (soprattutto francesi) hanno postulato una sindrome (FMMS), che include MMF e sintomi clinici sistemici (mialgia, affaticamento cronico, disfunzione cognitiva)

• Non ci sono dati che dimostrano una relazione causale

• Mancano dati convincenti su un possibile meccanismo patogenetico

ASIA syndrome (Autoimmune/Autoinflammatory

Syndrome Induced by Adjuvants)

Hawkes D et al. J Autoimmunity 2015;59:77-84.

ASIA: i criteri diagnostici sono deboli

Hawkes D et al. J Autoimmunity 2015;59:77-84.

• "Più ricerca è necessaria per determinare qual è il meccanismo biologico alla base dell’ASIA (se ne esiste uno )"

• “Qual è la finestra temporale da considerare? Forse 6 settimane? "

• "Gli attuali criteri diagnostici devono essere più specifici"

• "I criteri devono essere raffinati per individuare la dose di adiuvante necessaria per determinare la patologia... .senza tale modifica, tutti i casi di tossicità da metalli potrebbero ragionevolmente essere classificati come ASIA"

• "Anche se accogliamo con favore la discussione su condizioni come l'ASIA, non crediamo che questa sia una diagnosi valida"

Chi è lo scopritore di ASIA?

Yehuda Shoenfeld

Adiuvanti più recenti

• MF59 (un vaccino influenzale stagionale e

un vaccino pandemico 2009)

• AS04 [ MPL+ Al salt]: Monophosphoryl

lipide A, derivato non tossico del

lipopolisaccaride di Salmonella minnesota

R595 (Vaccino bivalente HPV; vaccino

HBV per pazienti IRC in dialisi)

MF59

• Componente principale: squalene

• Fonti naturali: olio di fegato di squalo; si trova naturalmente nei tessuti umani

• Incrementa il reclutamento e l’attivazione delle cellule presentanti l’antigene

• Promuove l’uptake dell’antigene e la migrazione delle cellule ai linfonodi

ASO4 - Monophosphoryl lipide A

Unger JK,

Peters H.

Kidney Int.

2008;73:799-

801

AS04 stimulates TLR-4 by increasing antigen presenting cells maturation and

Th1 responses.

Harrison's , Principles of Internal Medicine 2005, 16° ed.

Toll like receptors

Stabilizzanti

Condizioni avverse che compromettono

la stabilità dei vaccini

• Freeze-drying process (per quei vaccini che sono liofilizzati): una serie di stress si verifica durante il processo di liofilizzazione

• Aderenza alla parete della fiala: alcuni additivi prevengono l’adesione

• Calore: tutti i vaccini sono sensibili al calore, anche se in misura diversa, a seconda del tipo di antigene

Gelatina

• Alcuni vaccini contengono gelatina come

stabilizzante

• In vaccini vivi, la gelatina idrolizzata

(= gelatina a basso peso molecolare) protegge le

particelle del virus legandosi ad esse e

migliorandone quindi la stabilità

Gelatina ad alto

peso

molecolare

(>100,000 Da)

Gelatina a

basso peso

molecolare

(max 5,000 Da)

Idrolisi

Minori probabilità

di reazioni IgE-

mediate alla

gelatina

Incidenza più elevata di

reazioni di ipersensibilità di

tipo immediato alla gelatina

Albumina

• L’albumina sierica umana proviene da

donatori di sangue screenati; il processo di

fabbricazione elimina il rischio di

trasmissione di agenti patogeni

• Alcuni vaccini vivi contengono albumina

umana ricombinante (rHA) prodotta in

cellule di lievito da DNA ricombinante

Funzioni dell’albumina

• Inibisce l’adesione delle proteine del

principio attivo al contenitore

• Impedisce l'aggregazione proteica

• Stabilizza la struttura conformazionale

delle molecole proteiche

Altri stabilizzanti

• Buffers (per esempio, tampone fosfato): per

mantenere un determinato intervallo di pH

• Sali (ad esempio, NaCl): per ottenere tonicità

• Zuccheri (saccarosio, lattosio), aminoacidi

(glicina, acido glutammico)

• Polisorbato (Tween 80) è un emulsionante

(tensioattivo). Si trova in molti alimenti e

ingredienti di vari farmaci somministrati per via

orale o parenterale. Una quantità giornaliera di

10 mg / kg di peso può essere assunta senza

alcun rischio.

Conservanti

Conservanti

• Aggiunti ai vaccini dal 1930

• Nel 1916: 4 morti, 68 gravi infezioni sistemiche e

26 ascessi locali in seguito alla somministrazione

di un vaccino multidose contro il tifo contaminato

da Staphylococcus aureus

• Storicamente, sono tre i conservanti più utilizzati:

• thimerosal

• fenolo

• 2-fenossietanolo

Molti vaccini moderni sono senza conservanti

Thimerosal (thiomersal)

• Non più in uso, tranne che nelle preparazioni multidose (ad esempio, vaccino pandemico 2009 multidose)

• Thimerosal contiene metilmercurio, che viene escreto più velocemente del metilmercurio

• Diversi studi epidemiologici (compresi studi di coorte e studi caso-controllo) non hanno trovato un aumento del rischio di autismo e altre patologie del SNC nei bambini vaccinati con i prodotti contenenti thimerosal.

Altre sostanze chimiche

Formaldeide• Utilizzato per inattivare i virus e per detossificare

tossine batteriche (ad esempio, la tossina difterica)

• La formaldeide viene diluita durante il processo di fabbricazione del vaccino

• I quantitativi residui di formaldeide possono essere trovati in alcuni vaccini

• In un piccolo numero di vaccini è ancora presente come conservante, ad una concentrazione non superiore a 0,1 mg.

Alte concentrazioni di formaldeide possono

danneggiare il DNA, ma ...

• La formaldeide è un intermedio nel metabolismo umano

• Gli esseri umani hanno 2,5 mcg di formaldeide/ml nel sangue

• Supponendo che un bambino di 2 mesi abbia un peso medio di 5 kg e un volume di sangue medio di 85 ml / kg…

• ... la quantità totale di formaldeide che si trova naturalmente nel suo sangue è di 1,1 mg

• 1,1 mg è un valore dieci volte maggiore di quello contenuto in qualsiasi vaccino

Offit P. Pediatrics 2003;112:1394-1401

Antibiotici

• Molti vaccini contengono tracce di antibiotici

• Gli antibiotici sono usati durante il processo di fabbricazione per prevenire la contaminazione accidentale con batteri

• Gli antibiotici nei vaccini (neomicina, streptomicina o polimixina B) non sono quelli di solito dati ai bambini

• Gli antibiotici che hanno più probabilità di causare gravi reazioni allergiche (ad esempio, penicilline, cefalosporine etc.) non vengono utilizzati nella produzione di vaccini

• Pertanto, i pazienti con allergia agli antibiotici comuni possono essere vaccinati

C’è altro?

• Mai sentito parlare di nanoparticelle

metalliche nei vaccini?

A. Gatti

S. Montanari

Impurità metalliche nei vaccini?

• Nel loro libro, Montanari e Gatti affermano di

aver trovato nanoparticelle metalliche in alcuni

vaccini da loro esaminati con uno speciale tipo

di microscopio elettronico (ESEM)

Non solo nei vaccini

PubMed: Gatti AM [Author] AND vaccines

(accesso 7 aprile 2016)

PubMed: Montanari S [Author]

AND vaccines (accesso 7 aprile 2016)

Domande che attendono una risposta

• I risultati (peraltro ottenuti in un laboratorio privato: Nanodiagnostics Srl) sono riproducibili in altri lab. dotati della stessa strumentazione?

• Se fosse confermata la presenza di nanoparticelle metalliche nei vaccini, quale sarebbe la loro origine?

• Se fosse confermata la presenza di nanoparticelle metalliche nei vaccini, quali potrebbero essere gli effetti sulla salute?

Grazie per l’attenzione